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RADIOPROTEÇÃO

Professor: Rodrigo Penna

Departamento de Engenharia Nuclear

CCTN - UFMG

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DOSIMETRIABIOLÓGICA:

MICRONÚCLEOS

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A IDÉIA

Ao fazer o estudo de um artigo na disciplina RADIOFÁRMACOS, surgiu a idéias de trabalhar com DOSIMETRIA BIOLÓGICA pelo método dos micronúcleos. Implementando a técnica em um trabalho preliminar, ela poderá ser utilizada, no CCTN, em vários outros trabalhos e estudos posteriores.

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MÉTODO DO MICRONÚCLEO

Origem - fragmentos acêntricos- cromossomos inteiros

Tamanho- 1/20 a 1/5 do Ø do núcleo principal Indicadores - agentes clastogênicos

- agentes aneugêncios

Schmidt (1975) – células da medula óssea de camundongos

Countryman e Heddle (1976) – relação quantitativa entre a dose e a frequência de MN em linfócitos humanos

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Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células

mononucleadasMETÁFASE

EFEITOGENOTÓXICO

ANÁFASE

CÉLULANORMAL

CÉLULAANORMAL

CÉLULAS -FILHAS NORMAISCÉLULAFILHA

NORMAL

CÉLULAMICRONUCLEADA

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Fenech & Morley (1985) – “cytokinesis block method”Citocalasina B – Helminthosporum dematoideum

inibe a citocinese, mas não a carciocinesecélula binucleada (1 divisão nuclear)

Cultivo: adição de cito B, 44 horas após tratamento isotônico – preservação do citoplasma

para cada dose – 500 células binucleadasDesvantagem - não oferece toda a informação

- 10 a 12 MN / 1000 binucleadasVantagens - relativamente simples e sensível

- análise mais rápida- bom indicador de dano genético- magnitude do dano ocorrido

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Ilustração esquemática do mecanismo de formação de micronúcleos em células binucleadas

METÁFASE

EFEITOGENOTÓXICO

ANÁFASECÉLULANORMAL

CÉLULAANORMAL

CÉLULAMICRONUCLEADA

CÉLULANORMAL

ADIÇÃO DECITOCALASINA B

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Parâmetros:

-frequência de células com MN (incidência de células afetadas)

-distribuição de MN (extensão do dano ocorrido)0, 1, 2, 3, 4, 5 MN por célula>5 MN - desprezado

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CLASSIFICAÇÃO DE CÉLULAS DE MAMÍFEROS QUANTO À RADIOSSENSIBILIDADE

GRUPO 1: linfócitos eritoblastos espermatogoniasGRUPO 2: células granulosas mielócitos células intestinais célualas germinativas da camada epidérmica da peleGRUPO 3: células glandulares gástricas células endoteliais de vasos sanguíneosGRUPO 4: osteoblastos osteoclastos condroblastos espermatócitos e espermátidesGRUPO 5: granulócitos osteócitos espermatozóidesGRUPO 6: fibroblastos células endoteliais de grandes vasos sanguíneos eritrócitosGRUPO 7: fibrócitos condrócitos fagócitosGRUPO 8: células musculares células nervosas

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RADIOSSENSIBILIDADE DE LINFÓCITOS

normalmente não se dividem

células especializadas e diferenciadas

células altamente radiossensíveis

relação volume nuclear / citoplasma grande

escassos em citoplasma

Características

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PROJETO DE PESQUISA

Utilizar os micronúcleos como parâmetro de dosimetria biológica.

Irradiar o sangue de coelhos (ou ratos ou cobaias) e verificar o dano biológico.

Experimentos in vitro.