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Parasitos intestinales en las Iguanas del Parque Zoológico Santa Fe.
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1
INFORME DE PROYECTO
PARÁSITOS INTESTINALES EN LAS IGUANAS DEL PARQUE ZOOLÓGICO
SANTA FE
INVESTIGADORES
Sebastián Ramírez Suarez
María Claudia Puerta Vásquez
Asesor
Gustavo Valencia Quiroz. Licenciado en ciencias Naturales y Educación Ambiental
2
1. RESUMEN
Se está identificando las clases de parásitos intestinales que presentan las
iguanas del parque zoológico santa fe, a través de técnicas de separación e
identificación de parásitos a nivel de laboratorio. Se ésta utilizando el montaje
directo y la técnica de Flotación, la primera en solución salina al 0.9% y la segunda
en solución salida al 33%; se hace su posterior montaje en placas porta y cubre
objetos y luego son llevadas al microscopio para observación y registro digital con
un aumento de 10, 40 y 100X. La muestra representativa de iguanas para los
coprológico se obtiene de diferentes zonas del Zoológico denominadas zona 1:
flamencos, zona 2 Lago del Totumo, Zona 3 Bisontes y zona 4 Herbívoros y son
albergadas momentáneamente en los hábitats de cuarentena del Parque donde
permanecen con por un periodo de tres días siendo probable así obtener la
muestra de heces fecales naturalmente. Los resultados son analizados con la
ayuda de un experto en microbiología y por comparación con las imágenes guías y
los registros obtenidos en digital a través del microscopio.
3
2. TABLA DE CONTENIDO
ítem Título # Pág.
1 Resumen 2
2 Tabla de contenido 3
3 Agradecimientos 4
4 Introducción y justificación 5
5 Antecedentes y Planteamiento del problema 6
6 Pregunta de investigación 8
7 Objetivos 8
8 Hipótesis 8
9 Marco teórico 9
10 Metodología 17
11 Cronograma de actividades 19
12 Discusión, interpretación y aplicación de resultados 20
13 Conclusiones parciales 23
14 Bibliografía 24
15 Anexos 25
4
3. AGRADECIMIENTOS
Primero que todo queremos agradecer a la Feria Explora y Cuidamundos EPM y al
Zoológico Santa Fe, por el apoyo incondicional que ha brindado a nuestro
proyecto, igualmente a nuestra asesora de la UPB Lina María Martínez Sánchez
por los consejos metodológicos para de nuestra investigación.
Para nuestros padres y madres de familia que han sido claves con la investigación
y el acompañamiento en los aspectos logísticos, de laboratorio y campo, a
Gustavo Valencia, nuestro tutor de herpetología y Nenfy Oyola microbióloga del
Parque Zoológico Santa Fe, muchas gracias por su apoyo y sabiduría.
5
4. INTRODUCCIÓN Y JUSTIFICACIÓN
Las iguanas son reptiles muy hábiles capaces de desplazarse por todos los
medios posibles, por ejemplo, son veloces en tierra, excelentes nadadoras y muy
agiles trepando arboles, de ésta manera se comportan en el Zoológico cada
individuo, incluso delimitando su territorio.
Sabemos entonces que las iguanas son libres en el Parque y que tienen una
dinámica natural, que se desplazan por todos los rincones del Zoo y al igual que
otros animales pueden contraer alguna enfermedad relacionada con parásitos
como por ejemplo hongos, bacteriana, anélidos, etc.
El trabajo con iguanas en cautiverio ha demostrado que estos reptiles pueden ser
reservorio y a la vez transmisores de muchas enfermedades, queremos confirmar
el estado en que se encuentran a nivel de parásitos intestinales las iguanas
presentes en el zoo y esto como podría relacionarse con la salud de la misma
especie y de otro tipo de animal.
Este tipo de temas aun son desconocidos en muchos Zoológicos del mundo y por
tal motivo se ha vuelto de nuestro interés, sabemos que será una experiencia
inolvidable y que sobre todo aprenderemos mucho.
6
5. ANTECEDENTES O PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En nuestro medio se tiene escaso conocimiento sobre las especies parasitarias
que se encuentran habitualmente en la fauna silvestre. Pero existen algunos
estudios realizados en este tipo de anímales: por ejemplo en el “…Perú en el
Parque Las Leyendas se realizó un estudio en un grupo de animales salvajes en
cautiverio en el zoológico Parque Las Leyendas en Lima, Perú, con el fin de
determinar la presencia de parásitos gastrointestinales y establecer un plan de
tratamiento apropiado. Algunos de los parásitos que se encuentran en animales de
vida silvestre pueden permanecer en sus huéspedes cuando se encuentran en
cautiverio debido a la autoreinfección o la infección cuando las condiciones
sanitarias, el alimento o la presencia de huéspedes intermediarios o vectores lo
permiten; por ejemplo, los primates no humanos se infectan con oxyuroideos
porque estos parásitos tienen ciclo de vida directo, los pinnípedos lo hacen con las
larvas de ascáridos presentes en los peces marinos que ingieren como alimento
(Soulsby, 1987). Los carnívoros son reservorios de protozoos, nemátodes,
céstodes y trematodes, algunos de los cuales pueden infectar al hombre (por
ejemplo: Toxoplasma gondii, Lagochilascaris minor, Spirometra mansonoides,
Paragonimus spp.) (Soulsby, 1987). Sin embargo, poco se conoce sobre los
huéspedes intermediarios o definitivos de estos parásitos en el Perú tanto en la
fauna que proviene de su ambiente natural como en la que se encuentra en
cautiverio; por este motivo”…1 En el presente trabajo, se dan a conocer 4 especies
de nemátodes hasta ahora desconocidos para el Perú, mencionando sus
huéspedes y su distribución. ESTOS. Dipetalonema graciliformis; Saguinus
labiatus; Evaginuris branickii, Dinomys branickii, Alaeuris caudatus; Iguana iguana;
Serpinema amazonicus; Podocnemis expansa.
1 Huéspedes definitivos de Spirometra mansonoides (Cestoda, Diphyllobothriidae) en el Perú
7
Otro tipo de Estudios realizados en Iguanas importadas han encontrado lo
siguiente:
Lombrices intestinales: Los parásitos intestinales, y en particular los oxiuroideos,
los acaris y los estrongiloideos, son muy comunes en las iguanas recién
importadas y afortunadamente no demasiado peligrosos. Mediante el examen de
las heces, que siempre debe efectuarse en los ejemplares recién adquiridos, el
veterinario podrá descubrir si la iguana alberga lombrices intestinales y podrá
prescribir o administrar directamente el medicamento adecuado2.
Estreñimiento y meteorismo: Se trata de patologías muy graves que pueden
llevar a la iguana a la muerte en pocas horas y deben ser tratadas del mejor modo
por personal experto. En la iguana el estreñimiento se presenta con un
característico aumento de volumen del abdomen, respiración dificultosa e intentos
de emisión de comida. Se debe a un estancamiento, en el colon saculado, de
material seco que dificulta para avanzar hacia el último tramo del aparato digestivo
y para ser eliminado en forma de heces. En el colon saculado el alimento seco es
privado de agua de nuevo y se vuelve aún más consistente, lo que agrava el
problema. Las causas de esta patología son diversas: dieta rica en alimentos
secos (como piensos secos para iguana, heno y verduras deshidratadas por
permanecer en lugar caluroso); escasa ingestión de agua (porque falta del todo,
no es renovada a diario o bien está la cubeta sucia); depósitos adiposos (en una
iguana obesa): huevos irregulares (demasiado largos o anchos, en forma de V) o
muy numerosos (70 o más); deformaciones óseas de la pelvis (con frecuencia
resultado de una EMO), que comprimen el intestino; ingestión de cuerpos extraños
(grava, piedras, arcilla, cortezas, etc.).
Estudios como estos representan la importancia de continuar abordando estas
problemáticas en pro comprender como es la dinámica del parasito y su
hospedero y sobre todo de su potencial zoonótico frente a otras especies.
2 Fuente de informacion: La iguana. Massimo millefanti Editorial de vecchi
8
7. PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN
¿Qué tipos de parásitos intestinales presentan las iguanas del Parque Zoológico
Santa Fe y que potencial zoonótico representan para las demás especies que
habitan estas instalaciones, incluyendo al ser humano?
8. OBJETIVOS
Objetivo general:
Determinar los parásitos intestinales que están presentes en las iguanas
del Parque Zoológico Santa Fe y su potencial zoonótico frente a las demás
especies que habitan estas instalaciones, incluyendo al ser humano?
Objetivos específicos:
Identificar los tipos de parásitos intestinales en las iguanas a través de la
observación mediante el microscopio.
Relacionar el tipo de parasito con el estado de salud de los ejemplares y
con su probable potencial zoonótico.
9. HIPOTESIS
Es probable que las iguanas del Zoológico posean parásitos intestinales que
pueden transmitirse a otro tipo de animales que integran la colección del parque
Zoológico a través de la dispersión natural de las heces fecales por varias zonas
del Zoo.
9
10. MARCO TEÓRICO
En nuestro marco teórico abordaremos los aspectos generales de la especie de
iguana perteneciente a este estudio Iguana iguana luego, los aspectos generales
de la parasitología y el significado de parasito. También Especificando un poco
más reseñaremos varios tipos de parásitos algunos de interés para nuestra
investigación que serán el referente de comparación con lo que encontremos en
las iguanas.
Aspectos Biológicos de la especie Iguana Iguana3
Iguana es un género de lagarto de la familia Iguanidae nativo de zonas tropicales
de centro y Sudamérica y el Caribe, que fue descrito por primera vez por el
naturista austríaco Josephus Nicolaus Laurenti en su libro Specimen Medicum,
Exhibens Synopsin Reptilium Emendatam cum Experimentis circa Venena en
1768. El género iguana incluye a dos especies, Iguana iguana e Iguana
delicatissima.
La palabra "iguana" deriva del nombre taíno para este animal, "iwana".1 Iguana
iguana es la especie de este género más usada para la cría en cautiverio.
Características físicas
Hay dos tipos de lagarto del género Iguana poseen una papada, con espinas que
corren por la espalda hasta la cola y un tercer ojo en su cabeza. Este último es
conocido como ojo parietal, el cual parece una escama pálida en la cabeza. Detrás
del cuello hay unas escamas que asemejan picos, nombrados escamas
tuberculares.
Las iguanas pueden medir de 7,5 centímetros hasta 2 metros, de los cuales 1,3
metros pertenecen a la cola.2 Son animales herbívoros y se reproducen a través
de huevos que son colocados bajo tierra durante el mes de febrero. Alcanza la
3 Aspectos biológicos y generales de Especie Iguana iguana son referenciados de
http://es.wikipedia.org/wiki/Iguana_iguana
10
madurez sexual a los 16 meses de edad, pero son consideradas adultas a los 36
meses, cuando miden 70 centímetros de largo. 3
Visión: Las iguanas tienen una excelente visión y pueden ver cuerpos, sombras y
movimiento a grandes distancias. Las iguanas usan sus ojos para navegar a
través de selvas densas, así como también para encontrar comida. Tienen
también ciertas señales visuales para comunicarse con otras iguanas.
Audición: La oreja de la iguana es conocida como tímpano, que es una estructura
externa localizada cerca de los ojos, que en realidad no procesa el sonido,
simplemente lo transmite a una oreja interna que está protegida del agua y objetos
foráneos. Es una parte delgada y delicada de la iguana, y es crucial para su
audición.
Distribución: Las iguanas son propias zonas húmedas selváticas de Sudamérica,
Centroamérica y el Caribe viven normalmente en árboles alrededor de 1,2 m sobre
el suelo, a pesar de su tamaño pueden moverse velozmente entre las plantas y
son excelentes trepadoras.
La parasitología: es una rama de la biología que se dedica a estudiar
organismos vivos, parásitos, eucariotas; como son los protozoos, helmintos
(trematodos, cestodos, nematodos) y artrópodos. En su campo definen
como parasito como una relación simbiótica aniso específica (entre distintas
especies) en la que el parásito es dependiente metabólicamente de su
hospedador y no es beneficiosa para éste”. A pesar de lo descrito anteriormente,
el parasitismo también en algunos casos suele implicar una relación trófica, el
parásito también puede lograr obtener otros beneficios de quien lo posea, ya que
esto es lo que le sirve como protección frente a los depredadores o competidores
a quienes se debe enfrentar. Por otra parte es importante destacar que los
parásitos suelen tener la facilidad de causar algún perjuicio sobre quién lo posee
en mayor o menor grado.
11
Los parásitos pueden vivir en diferentes partes del cuerpo, incluyendo los ojos y el
cerebro, pero aquí vamos a discutir algunos de los parásitos más comunes de
reptiles que habitan en el tracto digestivo que pueden ser identificados en examen
fecal.
Hay muchos tipos diferentes de pruebas fecales que se utilizan hoy en día,
algunas pruebas son más apropiadas para identificar ciertos parásitos. Las dos
pruebas más comúnmente realizadas son la "materia fecal flotante" y "Fecal
Calumnia". La mayoría de los veterinarios lleva a cabo una o ambas de estas
pruebas aunque algunos parásitos, especialmente protozoos más pequeños, que
una sola célula, no se visualizan bien con la flotación fecal o técnicas de tinción,
pero se pueden identificar con otros métodos como el "ácido rápido".
Cuando nos referimos a parásitos debemos tener en cuenta que pueden estar
alojados dentro o fuera del organismo por ejemplo tenemos a nivel interno
endoparásitos y a nivel externo ectoparásitos.
Existe la parasitación interna por Protozoos como Amebas, Coccidios y Criptosporidios y por Vermes como Nematodos, Trematodos y Cestodos.
Veamos algunos tipos de parásitos:
Protozoos: La especie de protozoo parásito más patógena en saurios es
Entamoeba invadens. Son parásitos de ciclo directo que colonizan el tracto
gastrointestinal, originando anorexia, diarrea, deshidratación y emaciación. Las
lesiones más frecuentemente observadas son gastritis, enteritis, colitis, ulceración
y necrosis de la mucosa gastrointestinal. Cuando existe invasión hematógena se
pueden ver afectados el hígado y los riñones, con lesiones de tipo necrótico. La
infestación tiene su origen en la ingestión de quistes infestantes procedentes de
las heces de otros reptiles. El diagnóstico in vivo se realiza mediante la
observación de quistes o trofozoitos en las heces. Como tratamiento de elección
se utiliza metronidazol y dimetridazol (Lane & Mader, 1996).
Los coccidios son parásitos de ciclo directo de las células epiteliales intestinales,
aunque también se han descrito en las vías biliares. Los géneros más frecuentes
12
en reptiles son Eimeria, Isospora y Caryospora. Aunque son parásitos de ciclo
directo el ooquiste eliminado por heces requiere tres días antes de ser infestante.
Ello tiene una importante implicación desde el punto de vista de la prevención; en
un terrario en el que exista algún saurio infestado, si éste u otro ejemplar ingiere
material contaminado con ooquistes de dos días no se producirá infestación. Sin
embargo, si el alimento contaminado permanece más tiempo será infestante. Por
lo tanto es fundamental la limpieza y retirada de materia orgánica del terrario, tanto
heces como restos de alimentos. Histológicamente se pueden observar los
protozoos parásitos junto con lesiones de tipos ulcerativos e inflamatorios de
diverso grado. El diagnóstico in vivo se realiza mediante examen de heces e
identificación de ooquistes esporulados. La criptosporidiosis es una enfermedad
parasitaria grave debida a coccidios del género Cryptosporidium. Aunque la
enfermedad tiene una mayor incidencia en serpientes, también se ha descrito en
aproximadamente 15 especies de saurios (O’Donoghue, 1995). La mayoría de los
casos de criptosporidiosis en saurios han estado asociados con infestaciones
gástricas subclínicas (Upton, 1990), aunque también se han descrito cuadros
clínicos con anorexia, letargia y emaciación en camaleones (Dillehay et al., 1986)
y lagartos ocelados (Frost et al., 1994). Mientras las lesiones asociadas a
criptosporidiosis en serpientes son fundamentalmente hiperplásicas, con gastritis
proliferativa caracterizada por hiperplasia de las células mucosas de las glándulas
gástricas, algunos autores sugieren que los saurios responden a la infestación con
una gastritis atrófica (Frost et al., 1994), si bien también se han descrito lesiones
similares a las observadas en serpientes en un Chlamydosaurus kingi (Orós et al.,
1998). La posibilidad que más de una especie de Cryptosporidium parasite a
reptiles podría explicar las diferentes lesiones (Upton et al., 1989). No existe un
tratamiento efectivo frente a esta enfermedad en reptiles.
Trematodos: Los trematodos descritos en saurios pertenecen al orden Digenea.
Son parásitos muy pequeños (1-2 mm) de ciclo indirecto, presentes en boca,
faringe, esófago, tráquea y pulmones. Las lesiones que originan son de tipo
ulcerativo y salvo que el número de parásitos sea elevado, no se consideran de
13
excesiva importancia, salvo por la contaminación bacteriana secundaria de las
lesiones.
Cestodos: Dentro de este grupo de parásitos los tres órdenes de importancia
clínica en reptiles son Proteocephalidea, Pseudophyllidea, y Mesocestoididea.
Dentro del primer orden los géneros Proteocephalus y Acanthotaenia parasitan el
intestino anterior de varánidos (Frank, 1981). Dentro del segundo orden tan sólo
los géneros Duthiersia y Scyphocephalus parasitan a saurios, concretamente
varánidos. Dentro del tercer orden se han descrito en lagartos parásitos adultos de
las familias Nematotaenudae y Anoplocephalidae (Fig. 6), así como cisticercos de
la familia Dilepididae y tetratiridios de la familia Mesocestoididae,
desconociéndose en la mayoría de los casos el ciclo biológico del parásito.
Nematodos: Dentro de este grupo de parásitos destacan en saurios dada la
frecuencia de presentación los nematodos oxyúridos. Son parásitos de ciclo
directo muy comunes especialmente en iguánidos. Sus fases larvarias se
desarrollan en el intestino anterior y después migran y se establecen en el
intestino grueso particularmente en colon en el caso de infestaciones severas
pueden causar impactación y anorexia, pero algunos autores piensan que en bajo
número pueden servir al hospedador incluso para prevenir la constipación
intestinal, ya que rompen y desmenuzan el material fecal. El diagnóstico se basa
en la detección de huevos embrionados o no embrionados en las heces. El
tratamiento de elección es fenbendazol vía oral, a dosis de 50 mg/kg. 0tro grupo
de nematodos frecuentes en saurios son los filáridos. Las filariosis suelen ser
subclínicas pero en infestaciones severas puede haber necrosis de territorios
orgánicos como consecuencia de trombosis parasitarias y consiguiente isquemia.
Requieren mosquitos o garrapatas como hospedadores intermediarios. Las formas
adultas suelen encontrarse en vena cava posterior y vena porta-renal, así como en
el tejido subcutáneo en el caso de algunas especies. Existen numerosos géneros
algunos de los cuales son específicos, como el género foleyella en camaleones.
El diagnóstico se basa en la detección de microfilarias en la sangre.
14
Dado que el tratamiento con ivermectina no ha sido probado en la mayoría de las
especies de saurios, se recomienda como medida preventiva el control de los
insectos hematófagos que pueden actuar como hospedadores intermediarios.
Recientemente se han detectado inmunohistológicamente microfilarias de
Foleyella sp. En un camaleón de Oustaleti (Furciferoustaleti) (Orós et al., 2001).
A continuación anexaremos la lista de imágenes de parásitos que se construyendo
en nuestro marco teórico. Imágenes Tomadas del libro del capítulo de
Parasitología de ELLIS C. GREINER and DOUGLAS R. MADER.
Giardia lamblia Orchidasma amphiorchis
Pachypsolus irroratus Hymenolepis diminuta
Aspicularis tetráptera Hymenolepis nana
15
Syphacia muris Cryptosporidium muris
Ameva. Entomoeva invadens tropozoite Ciliate trophozoite
Isospora amphiboluri Eimeria tacayea
Hexamita Nycloterus
16
Giardia lambia Balantidium y Nycloterus
Huevo de cestodo Géneros de Oxyrida
Las recopilaciones de imágenes seguirán en construcción pues son el material didáctico para la
comparación con nuestras fotos que tomamos en el microscopio del Zoo.
Respecto a los procesos parasitarios hay que indicar que en la naturaleza la
mayoría de los reptiles están parasitados pero normalmente no sufren severas
infestaciones y por lo tanto no se compromete su supervivencia. Ello se debe a
que los animales en libertad no están confinados en un espacio reducido y por
tanto la concentración ambiental de parásitos no es alta. Sin embargo, en
condiciones de cautividad, especialmente si las condiciones higiénico-sanitarias no
son adecuadas, la concentración de parásitos puede ser mucho más alta y por
tanto supone un mayor riesgo. Además en cautividad hay que considerar también
el estrés como factor adicional que disminuye las defensas del animal
favoreciendo la colonización parasitaria. Existen numerosísimas especies
parásitas afectando a reptiles. Lo más importante desde el punto de vista práctico
17
es conocer el ciclo del parásito y la forma de prevenir la infestación: si el ciclo es
indirecto, y por tanto requiere un hospedador intermediario para completar su
ciclo, la medida más efectiva es evitar la existencia de ese hospedador
intermediario. Si el ciclo es directo se recomienda actuar sobre el animal
parasitado.
10. METODOLOGÍA
El estudio se realiza a 1450 msnm en la Cuidad de Medellín en cuatro zonas del
Parque Zoológico Santa Fe correspondientes al hábitat de: 1 flamencos, 2 lago del
totumo, 3 hábitat de Bisontes y 4 Zona de herbívoros. Zonas en las cuales son
colectados los ejemplares de la especie Iguana iguana para ser llevados a la Zona
de cuarentena donde son registradas y evaluadas cada una de sus características
como el tamaño, peso, condición corporal y particularidades. Allí se realiza el
procedimiento de marcado el cual se hace ubicando un número consecutivo en la
escama salida con un marcador de tinta negra permitiendo esto no afectar en
ningún momento la integridad del animal. El número mínimo de iguanas a colectar
está estimado en 20.
Además de registrar un historial del animal se procede a albergarlo en los hábitats
de cuarentena por un periodo de tres días con el ánimo de conseguir la mayor
cantidad de muestras posibles (heces fecales) para llevar al laboratorio. Durante
este periodo de tiempo las iguanas cuentan con los requerimientos necesarios
para su bienestar como son el agua, alimentación, Calor (lámpara térmica) y
troncos para que puedan trepar.
A continuación se describen los materiales utilizados y el procedimiento para
realizar la toma e identificación de las muestras como son el seriado, hisopado
Cloacal, coprológico y montaje al microscopio.
Materiales:
Guantes de látex, Guantes de carnaza para atrapar las iguanas,
microscopio, gasa, Cajas de petri, computador con su respectivo software,
18
cámaras digitales, tarros de coprológico, tabletas de madera e hisopos
estériles, tapabocas, bata de laboratorio, solución salina al 2.8% o tambien
solución azúcarada4 al 20% Asesor experto en parasitología y asesor
científico del proyecto.
Seriados: Consiste en muestreo repetitivo, que se hace por un periodo de 3
días para aumentar la probabilidad de encontrar los parásitos existentes en
las iguanas o en cualquier otro animal.
Técnicas utilizadas para examinar las muestras:
Flotación: es una técnica que permite diluir las heces fecales encontradas
en los hábitats de cuarentena, en un tubo de ensayo y ser filtrada por una
gasa para que a través de esta pasen solamente ciertos huevos de
parásitos intestinales y se adhieren a un cubre objeto que se coloca encima
del tubo de ensayo. Veamos lo pasos para esta técnica:
Instrucciones:
1. Coloca agua destilada al frasco con la materia fecal.
2. tamiza (filtra) la materia fecal.
3. coloca líquido en un tubo de ensayo hasta las ¾ partes.
4. centrifuga a 1500rpm durante 3 min.
5. Tira el sobrenadante
6. Agrega agua hasta las ¾ partes y coloca un tapón y agita.
7. Centrifuga a 1500rpm por 3 min.
8. Tira el sobrenadante.
9. Repite los paso 6, 7,8.
10. Agrega ZnSO4 al 33% hasta ¾ partes.
11. Agita hasta homogenizar
12. Centrifuga a 1500rpm por 3 min
13. Destapa el tubo y colócalo en la gradilla y con el asa bacteriológica toma
muestra de la superficie
14. Colócala en el porta objetos con una gota de iodo lugol y tápalo con el
cubre objetos.
15. Enfoca con 10x revisa toda la muestra
4 Solucion azucarada: 900 gramos de azúcar en 700 mililitros de agua.
19
16. Enfoca con 40x
17. Realiza datos de paciente examen físico y microscópico dibujos
observaciones y conclusiones
Frotis directo: Con ayuda de un hisopo estéril o un estilete se introduce
por la cloaca de la iguana y se toma la muestra de materia fecal, luego se
frota sobre el porta objeto, se diluye con un poco de solución salina5 y en
otras ocasiones con lugol6 y se hace observación directa en el microscopio.
Identificación: Con ayuda de un experto, imágenes y un libro guía
aprenderemos a identificar las clases de familias y géneros de parásitos a
través del microscopio.
Variable de la investigación
Químicas: PH de heces fecales.
Físicas: humedad, temperatura, Densidad parasitaria.
Biológicas: Se podrían expresar con ayuda de la categorización taxonómica de
las familias y géneros de parásitos que logremos encontrar.
11. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
ACTIVIDADES JULIO AGO SEPT OCT NOV DIC ENE FEB
RECOLECCION X X X X
ANALISIS X X X
SEGUIMIENTO X X
CONCLUSIONES
X X X
5 Solución Salina: se diluye al 2.8% utilizando 331 gramos de sal en 1 litro de agua.
6 Lugol: Es un colorante utilizado para tinción de microorganismos, por ejemplo parásitos y bacterias.
20
12. DISCUSIÓN, INTERPRETACIÓN Y APLICACIÓN DE RESULTADOS
De las 20 Iguanas proyectadas como la muestra representativa de ejemplares
para el proyecto, se han capturado hasta la fecha en dos actividades de campo al
interior del Zoo 11 individuos, representados en 1 juvenil X hembras adultas y
machos adultos. Cada ejemplar ha sido evaluado y registrado (ver tablas de
registro) además se han marcado con un numero en la escama salida con la
ayuda de un marcador no borrable. Para reconocerlas por un corto periodo de
tiempo. También se registraron fotográficamente las particularidades de cada
ejemplar para ser tenidas en cuenta en caso realizarse recaptura. La técnica de la
fotografía resulta ser no invasiva y a la vez muy practica.
Al primer grupo que constaba de 6 ejemplares se les realizaron en total 18
Hisopados Cloacales, los cuales no develo ningún tipo de información caso
contrario a las muestras a las muestras colectadas de las heces fecales que
dejaban las Iguanas en el hábitat de cuarentena.
Figura # 1 Hisopado cloacal Figura # 2 Coprológico obtenido naturalmente
Por los datos arrojados y lo complicado de manipular estos ejemplares se decide
continuar la investigación solo con la colecta de heces fecales que ellos depositen
en el hábitat de cuarentena. Estas muestras son llevas al laboratorio en un tarro
para coprológico totalmente estéril y marcado con los datos del ejemplar y la zona
a donde pertenece.
21
A continuación presentamos las tablas que relacionan el número de muestras
obtenidas, el número de pruebas realizadas y los resultados parciales (código de
foto).
N. Científico N.
común # serie
Técnica de
separación
Identificación al
micro Observaciones
Iguana iguana Iguana 001 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 002 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 003 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 004 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 005 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 006 Hisopado cloacal 0
Iguana iguana Iguana 007 Hisopado cloacal
Iguana iguana Iguana 008 Hisopado cloacal
Iguana iguana Iguana 009 Hisopado cloacal
Iguana iguana Iguana 010 Hisopado cloacal
Iguana iguana Iguana 011 Hisopado cloacal
En la primera tabla se evidencia como después de los hisopados cloacales la
identificación en el microscopio no devela ningún tipo de resultado para los 6
primeros ejemplares. En total por todo el seriado sumaron 18 muestras no
revelaron muestras significativas.
Por el contario el montaje al microscopio de las heces fecales recogidas en
cuarentena empezaron a revelar la presencia de algunos parásitos como sucedió
en los ejemplares 1, 3, y 9.
N. Científico N.
común # serie
Técnica de
separación
Identificación
al micro
Habitat Observaciones
Iguana iguana Iguana 001 Flotación si Foto 001
Iguana iguana Iguana 002 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 003 Flotación si Foto 003
Iguana iguana Iguana 004 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 005 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 006 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 007 Flotación 0
22
Iguana iguana Iguana 008 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 009 Flotación Si (bacterias
desconocidas)
Foto 002
Iguana iguana Iguana 010 Flotación 0
Iguana iguana Iguana 011 Flotación 0
Zona 1: flamencos
Zona 2: totumo
Zona 3: bisontes y sabanas
Zona 4: herbívoros
fecha ·#
ejemplar # de
muestra Zona resultado
Hisopado Cloacal/Frotis
Directo Flotación Observaciones
21/09/2010 1 2 NOPI X
21/09/2010 2 1 NOPI X
21/09/2010 3 1 1 NOPI X X se observaron Trofozoitos de Balantidium sp
21/09/2010 4 2 3 NOPI X X pool
21/09/2010 5 2 3 NOPI X X pool
21/09/2010 6 2 4 NOPI X X pool
04/10/2010 7 4 NOPI X
05/10/2010 8 4 NOPI X
05/10/2010 9 3 NOPI X
05/10/2010 10 3 NOPI X
fecha ·#
ejemplar # de
muestra Zona resultado
Hisopado Cloacal/Frotis
Directo Flotación Observaciones
22/09/2010 1 2 2 NOPI X X se encontraron Trofozoitos de Balantidium y huevos de tipo
oxiuroideo ver foto #
22/09/2010 2 1 NOPI X
22/09/2010 3 1 NOPI X
22/09/2010 4 2 3 NOPI X X se encontraron Trofozoitos de
23
Balantidium sp
22/09/2010 5 2 3 NOPI X X
22/09/2010 6 2 4 NOPI X X
22/09/2010 7 4 NOPI X
22/09/2010 8 4 NOPI X
22/09/2010 9 3 NOPI X Bacterias desconocidas
22/09/2010 10 3 NOPI X
fecha ·#
ejemplar # de
muestra Zona resultado
Hisopado Cloacal/Frotis
Directo Frotación Observaciones
05/10/2010 7 1 4 NOPI X X
07/10/2010 7 2 4 X X huevo desconocido
05/10/2010 8 1 1 X X trofozoitos de trichomonos y
huevo desconocido
Parásitos encontrados hasta el momento en las heces de las iguanas del
Parque Zoológico Santa Fe.
Bautizar las fotos
Imagen . Foto Valencia, G Imagen 007 . Foto Hoyola, N
24
Imagen Ramírez, S
La presencia de estos parásitos pueden significara lo siguiente: la presencia
de Balantydium sp
Gráfica # 1. Sistematización de datos: En la siguiente tabla se presenta la
relación del numero de Iguanas vs el área en que se colectaron
Discusión:
Gráfica # 2.
0
1
2
3
4
5
6
7
8
Flamencos (Zona 1)
Totúmo (zona 2)
bizontes (zona 3)
Herviboros (zona 4)
# Ig
uan
as
Título del eje
Número de iguanas Colectadas vs Zona Geográfica
#REF!
# Iguanas Colectadas
25
Gráfica Número Tres:
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
# Iguanas Colectadas # Muestras Con Isopados
# Parasitos
nú
me
ro d
e e
ven
tos
Título del eje
Correlación del # de iguanas colectadas con el numero de isopados realizados y el numero número de Párasitos encontrados
Flamencos (Zona 1)
Totúmo (zona 2)
bizontes (zona 3)
Herviboros (zona 4)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
# Iguanas Colectadas # Muestras Recolección de
Heces
# Parasitos
# e
ven
tos
po
siti
vos
Título del eje
Correlación entre el número de iguanas colectadas, el número de heces fecales realizados y el numero número
de Párasitos encontrados
Flamencos (Zona 1)
Totúmo (zona 2)
bizontes (zona 3)
Herviboros (zona 4)
26
Gráfica Numero Cuatro:
13. CONCLUSIONES PARCIALES
Hasta el momento podemos interpretar que la mejor manera de detectar los
parásitos intestinales de las iguanas del parque Zoológico Santa Fe se debe
realizar a través de la colecta de muestras que surjan naturalmente pero con
iguanas control, de ahí la importancia de marcar las iguanas y de aislarlas
individualmente durante tres días para recoger la mayor cantidad de pruebas
posibles.
La técnica de identificación de parásitos por comparación es una buena estrategia
pero de igual manera se necesita un entrenamiento arduo para aprender a
diferenciar y a encontrar los parásitos con la ayuda del microscopio.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
Flamencos (Zona 1. Balantidium sp)
Totúmo (zona 2. Balantidium sp, y
Huevo desconocidos)
bizontes (zona 3. Balantidium
sp, Trozofoitos de trichomonas y
Huevo desconocidos)
Herviboros (zona 4. Ninguno)
# Parasitos
# Parasitos
27
Según los registros de tamaño y peso de los ejemplares de iguana iguana del
Zoo se encuentran en perfectas condiciones, no presentan desnutrición y por el
contrario poseen bastante vitalidad y fuerza. Aunque algunos individuos presentes
cicatrices y les falte alguna parte del cuerpo se comprende que los ejemplares que
llegaron al zoológico fueron asignados por las autoridades ambientales para que el
zoo sea una oportunidad más para vivir.
El tiempo es una variable compleja para este tipo de investigaciones pues se
requiere demasiado logística como permisos, personal, materiales y sobre todo las
condiciones del clima por que en muchas de las salidas de campo en el zoo
hemos perdido los días por la lluvia. Cuando llueve las iguanas se refugian en los
arboles y se quedan allí para cuando sale el sol y es poco probable que bajen.
ESPERAMOS OBTENER MAS MUESTRAS PARA PRESENTAR UN BUEN
AVANCE DE RESULTADOS EN LA FERIA EXPLORA Y CUIDAMUNDOS EMP.
28
14. BIBLIOGRAFÍA
Coles, William (2002), «Green Iguana», U.S.V.I. Animal Fact Sheet #08 (Department of Planning and Natural Resources US Virgin Islands Division of Fish and Wildlife),
http://www.vifishandwildlife.com/Education/FactSheet/PDF_Docs/08GreenIguana.pdf
Joan Queralt Gil. «Iguanas» (en español). Consultado el 3 de junio de 2008.
«Resptiles y Peces: Iguana». Consultado el 3 de junio de 2008.
Tantaleán, M. Michaud, Carmen (2011). Definitive hosts of Spirometra mansonoides
(Cestoda, Diphyllobothriidae) in Peru.
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-
99332005000100015. Huéspedes definitivos de Spirometra mansonoides
(Cestoda, Diphyllobothriidae) en el Perú
Iguanas.cl 1 42 pm sábado 17 abril
www.dialway .com. 1 46 pm Sábado 17 de abril
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/biologia/v05_n2/nematodes.htm hora .
156 fecha. 17 de Abril de 2010
http://www.galapagospark.org/noph.php?page=institucion_laboratorio&set_lang=e
s hora 200 pm 17 abril
ELLIS C. GREINER and DOUGLAS R. MADER. Capitulo de Parasitología
Continúa en construcción
15. ANEXOS
29
Tabla de ingreso y examen Físico de fauna silvestre
Allí registramos todos los datos del ejemplar y las particularidades en físico se
tienen todas las tablas.
30
31
Actividades de campo Captura de iguanas y adecuación de cuarentena
32
Tablas de sistematizacion de datos de los ejemplares y sus particularidades
Ejemplos
fecha de historia
marca o microchip
historia clínica
Procedencia
entregado por:
cautiverio
21/09/2010 ejemplar: 001 001 Medellín, Antioquia
autoridad ambiental
si
clase orden familia genero especie nombre común
reptilita Squamata Iguanidae iguana Iguana iguana iguana
sexo: edad aproximada peso longitud anexos anexos
macho adulto 8 kg 1.32 m Condición corporal: normal
escamas normales
Lugar de colecta
celda de cautiverio
observaciones problemas
internos PROBLEMAS PROBLEMAS
lago del totumo celda B SOLO agresivo ninguno le falta parte de
la gula falta 4to dedo
inferior derecha
Observaciones
fecha de historia
marca o microchip
historia clínica
Procedencia
entregado por: cautiverio
21/09/2010 ejemplar:002 h:002 Medellín, Antioquia
autoridad ambiental
si
clase orden familia genero especie nombre común
reptilita Squamata Iguanidae iguana iguana iguana iguana
sexo: edad
aproximada peso longitud anexos anexos
33
macho adulto 7.5 kg 1.42 m condición
corporal: normal escamas normales
Lugar de colecta
celda de cautiverio
observaciones
problemas internos
PROBLEMAS PROBLEMAS
flamencos celda D SOLO agresivo ninguno LASERACIONES faltas escamas
laterales
Bitacora parcial de nuestro proceso de investigación
Bitacora:
Fecha: 20 de Febrero de 2010
Actividad: Lluvia de ideas.
Descripcion: Los integrantes del club científico del zoológico nos reunimos con
nuestros profesores para analizar diferentes temas de investigación que
pudiéramos llevar a cabo dentro del zoo.
Conclusion: Escogimos el tema de parasitos presentes en iguanas del parque
zoológico santa fe.
Fecha: 15 de marzo de 2010
Actividad: Construcción del anteproyecto:
Descripcion: En este dia el profesor nos explico como se elabora un anteproyecto
y las partes que lo conforman. Se formulo la pregunta de investigación, se
establecieron los objetivos y comenzamos el marco teorico.
Conclusion: No solo en el Club aprendemos sobre fauna sino también adquirimos
conocimientos académicos y sembramos los primeros pinos para una formación
como investigadores.
34
Fecha:
Actividad: Aprobacion del anteproyecto
Descripcion: Fue presentado al profesor el anteproyecto para revisión y
aprobación.
Fecha:
Actividad: Parque Explora
Descripcion: Reunion informativa sobre la feria explora 2010
Actividad: Inscripcion Feria Explora 2010
Explora para inscribir su proyecto a la FERIA EXPLORA 2010.
Actividad: Aprobacion del proyecto
Descripcion: El proyecto fue aprobado para pasar a semifinales, se exponen todas
la condiciones para seguir en el proceso de selección y la metodología exigida por
el PARQUE EXPLORA.
Actividad: Reunion con la asesora designada por el parque explora.
Descripcion: Se le presenta a la asesora el proyecto para que lo revise, se le hace
un resumen sobre lo que hemos adelantado y le informamos la metodología a
seguir con respecto al trabajo de campo.
Fecha: 29 de Junio de 2010
Actividad: Reunion con la microbióloga del PZSF.
Descripcion: El PZSF nos puso a disposicion para la el estudio de las heces
fecales a la doctora Nenfy, ella nos va a colaborar con el análisis de la materia
fecal recolectada en las diferentes zonas del Parque.
Fecha: 2 de Julio de 2010
Actividad: Recoleccion de materia fecal.
35
Descripcion: Teniendo en cuenta las normas de bioseguridad, nos dispusimos a
recolectar las muestras de materia fecal en diferentes sitios del PZSF, las
depositamos en frascos coprologicos, las marcamos con la fecha, el lugar de reco
lección y el numero de la muestra. Luego las llevamos al laboratorio y con la
colaboración de la doctora nenfy procedimos a realizar el respectivo análisis
Conclusion: aprendimos los diferentes métodos que se utilizan para examinar una
muestra de materia fecal, las condiciones en que hay que almacenarlas, y las
normas de bioseguridad que hay que tener en cuenta para no contagiarlas con
agentes externos.
Fecha: 11 de Septiembre de 2010
Actividad: Correccion del proyecto.
Objetivo: Restaurar aspectos metodológicos y conceptuales del proyecto.
Descripcion: Luego de una entrevista con nuestro asesor del parque explora y del
Zoologico se hizo necesario reestructurar algunos aspectos metodológicos de la
investigación. En el método que se utilizara para recolectar las muestras de heces,
se sugiere un cambio drástico, ya que antes nuestra metodología planteaba que
recolectaríamos las heces al azar en diferentes zonas del zoológico, pero
concluimos que los resultados no eran los mas exactos ya que no sabíamos al
momento de encontrar algún parasito a que animal pertenecía. En el método
recomendado colectar los animales, colocarlos en zona de cuarentena y tomar
muestras de las heces como también isopados cloacales, por medio de este
método los resultados van a ser mas precisos y se sabra a que animal pertenece.
Fecha: 21 de septiembre de 2010
Actividad: Colecta de ejemplares
Descripcion: Al principio, cuando se planteo la forma de como se haría la
respectiva colecta, dijimos que haríamos las tomas de muestra en diferentes
zonas del zoo buscando la materia fecal del suelo al azar, inclusive se hizo un
36
ejercicio de tomar 3 muestras, las llevamos al laboratorio y la con la ayuda de la
microbióloga, las analizamos y tomamos nota de lo encontrado en las diferentes
muestras, pero cuando hablamos con nuestra asesora del parque explora nos
recomendó otra forma de colecta que es la que utilizamos en el trabajo de campo
y es la siguiente:
1. Gracias al apoyo de la Doctora Martha Ocampo pudimos acceder a cuatro
cuartos para llevar a nuestros ejemplares y colocarlos en cuarentena, estos
sitios los limpiamos y desinfectamos adecuadamente para protegerlos de
cualquier bacteria que pudieran tener, también cubrimos la parte inferior de
la reja con triplex para que ellos no se hagan daño con la malla.
2. Luego con la ayuda del equipo médico y algunos empleados, hicimos la
colecta de 6 ejemplares de diferentes sitios del zoo, entre ellos dos
machos, en el sitio de colecta se tomaron directamente de la cloaca de
cada animal las muestras de heces y las etiquetamos y fotografiamos.
3. Procedimos a llevarlos al sitio de cuarentena, allí fueron medidos y
pesados, se les observo las anomalías que algunos tenían y por último los
colocamos en los cuartos, agrupados de acuerdo al sitio donde fueron
capturados, los machos fueron puestos en sitios diferentes por seguridad
de ellos ya que son muy territoriales y pueden atacarse.
4. Las muestras fueron llevadas al laboratorio para su posterior estudio que
detallaremos mas adelante.
5. Estos 6 ejemplares se analizaran por tres días consecutivos conforme a lo
planteado en el proyecto.
La conclusión que sacamos de este método de muestreo es que es mas
especifico con respecto a cada animal, ya que se sabe, al menos la primera toma,
de que animal es. Mejor que lo que habíamos planteado inicialmente. Puede que
para el animal sea mas traumático, por ser capturado y puesto en cautiverio,
puede ser también que desarrollen alguna anomalía que no tenían debido al
estrés que esto les pueda causar, pero nos esforzamos para que su cautiverio y
37
posterior estudio sea lo menos dañino para ellos, lo último que nosotros
desearíamos seria causarles algún mal.
Fecha: 22 de Septiembre de 2010
Actividad: Recolecta de materia fecal en cada hábitat y se les hizo isopado cloacal.
Descripcion: Se procede a observar si hay heces en cada hábitat para su
recolección. Se encontró materia fecal en el hábitat 1, que pertenece al ejemplar
numero 3, también el hábitat 4 ejemplar 2, luego se les hizo isopado al resto de los
ejemplares.
Conclusion: Ya que, según nos informa la microbióloga, los hallazgos encontrados
solo se han obtenidos de muestras de heces, ninguno por isopado cloacal, debido
a esto tomamos la decisión de no continuar haciendo este procedimiento, por lo
pobre de los resultados y por el alto estrés que se le causa a los animales.
Fecha: 23 de Septiembre de 2010
Actividad: Liberacion de los ejemplares.
Descripcion: Nuevamente buscamos muestras de heces en cada hábitat sin
resultados, como ya ajustamos el tercer dia, procedemos a la liberación de los
ejemplares, se tomaron fotos de los ejemplares para registrar las anomalidades
físicas de cada uno.
Se liberan en el mismo sitio de donde fueron capturados.
Conclusion: La toma de muestras por medio de heces es mas lento que con el
isopado cloacal pero nos arroja mejores resultados, ya que asi es como hemos
obtenido los tipos de parasitos encontrados en los animales.
Fecha: Entre el 24 de Septiembre y el · de Octubre no pudimos capturar animales
debido al invierno, ya que estos animales se suben a los copos de los arboles para
aprovechar el sol.
Fecha: 4 de Octubre de 2010
38
Actividad: Preparacion de Habitats y Captura de la segunda parte de los
ejemplares.
Descripcion: Como hicimos para la colecta anterior se procede a desinfectar los
hábitat con hipoclorito al 5%, luego vamos a las diferentes zonas del zoo para
buscar los ejemplares.
Se colectaron 2 ejemplares un macho adulto y un juvenil que en el momento no
sabemos si es macho o hembra, se llevaron al área de cuarentena.
