Laboratoire National de Contrôle des Produits PharmaceutiquesCentre collaborateur de l’OMS pour la conformité du
médicament
SERVICE DE BIOEQUIVALENCESERVICE DE BIOEQUIVALENCE
Résultats d’une étude pilote de métformine
Aspects réglementaires et méthodologique
Effi i é d édi é é iEfficacité�du�médicament�générique
Essais de bioéquivalence
Démontrer l’équivalence thérapeutique entre :
médicament générique
et
médicament de référencef
Service de bioéquivalence
Secrétariat technique
Assurance qualité
Unité
technique qualité
Conduite des essais et analyse
des données
UnitéLaboratoire
Affaires réglementaires
et gestion Coordination
cliniqueTraitement des
données Essais bioanalytiques
Essais physicoc-himiques g
pharmaceutiqueclinique bioanalytiques et cinétiques
de dissolution
«On entend par produits pharmaceutiquesbioéquivalents les équivalents pharmaceutiquesbioéquivalents,les équivalents pharmaceutiques(médicaments génériques) ou les produitspharmaceutiques de substitution dont la vitesseet le taux d’absorption ne révèlent pas deet le taux d absorption ne révèlent pas dedifférence importante lorsqu’ils sontadministrés à la même dose molaire de lafraction thérapeutique dans des conditionsfraction thérapeutique dans des conditionsexpérimentales analogues, que ce soit paradministration unique ou par administrations
lti lmultiples » .FDA
Essaii pilotee 0022 Essai pilote 002 :Etudes de bioéquivalence entre deux formulations q
de chlorhydrate de metformine cps à 850mg
TMet002 versus RMet002
Objectifs de l’étude
� Démontrer la bioéquivalence des deux formulations T Met002 et R Met002
� Optimiser les moyens disponibles en Algérie
� Développer l’axe des essais de bioéquivalence :Démarches administratives et réglementairesMéthodologie et réalisation pratique de l’étudeMéthodologie et réalisation pratique de l étudeApplicabilité des procédures opératoires mises en place
Approbation des autorités et CE
Réglementaire AssuranceTracé des courbes :C=f(tps)
Clinique Statistique
Paramètres pharmacocinétiques :AUCCmaxCmaxT max
A l iPh i éti
Elaboration du protocole
Recrutement et sélection des l i iAnalytiquePharmacocinétique volontaires sains
Administration des produits Test paramétriques et non paramétriques
Intervalle de confiance 90% (80-125%)
Prélèvements à différents temps
Intervalle de confiance 90% (80 125%)Dosage dans le milieu
biologique
Préparationn dee l’étudee Préparation de l étude
Etapes préliminaires
Administrative et réglementaire
Clinique
Bioanalytique
pharmacocinétique et statistique
Protocole de l’étudeProtocole de l’étude
Conception du protocole et réalisation de l’essai
Réglementation algérienne
Recommandations internationales
g g
� Déclaration d’Helsinki (Seoul 2008)
� Bonnes pratiques cliniques ICH (E6)
� Directives européennes(2001/20/CE)
Approbation par l’investigateur clinicienclinicien
Etapes administrative et réglementaireEtapes administrative et réglementaire
Approbation du comité d’éthiquepp q
Autorisation du Ministère Santé
Contraction d’une assurance
Sélection des volontaires Nombre des sujets
Informations et consentement de participationInformations et consentement de participation
Caractéristiques démographiques Age –sexe –IMC-phénotype génétique
Critères d’inclusion et de non inclusion
Examens médicaux de pré inclusionExamens médicaux de pré inclusionAntécédents médicaux Examen clinique Analyses médicales de laboratoire
17/01/2011
18/01/2011
Identification des volontaires
RandomisationRandomisation
Retrait Critères de retraitTypes de retraitRemplacement des participants retirés
AASS AgeAgeSexeSexe
2323-35 ans (27 08 ±2 87)9 F – 4 H (27.08 ±2.87)
IMCIMC
18.5 et 26.7 kg/m2
30.5)g
(22.75 ± 30.5)
PoidsPoids tailletaille
45 85 Kg45-85 Kg(62.58±10.13)
153153-185 Cm (165.83±10.27)
CaractéristiquesCaractéristiques démographiques
Critères d’inclusionCritères d’inclusion
•Age entre 18-45 ans
•IMC� + /- 15% du rapport idéal�
•Absence d’allergie au médicament étudié
•Disponibilité
•Consentement de participation éclairé signéConsentement de participation éclairé signé
•Examen clinique sans déviations significatives
é é•Analyses médicales sans déviations significatives
Examen clinique avec déviations significatives Prise de médicament à effet inducteur ou
inhibiteur enzymatique trois (3) mois avant
Analyses médicales de laboratoire avec déviations significatives
A té éd t d’ ll i ( ) édi t
l’étude.
Prise de vitamines �2 j avant l’étude �Antécédents d’allergie au(x) médicament
(s)et/ou aliment(s) soumis à l’étude .
Antécédents de maladies cliniques pouvant
Consommation excessive de thé –café et/ou de
boissons à base de caféine �+3tasses/jour�
Critères de non inclusion
Antécédents de maladies cliniques pouvant influencer le devenir du médicament
Antécédents d’abus de drogues ou d’alcool.
� /j �
Participation à une étude de bioéquivalence ou
à une étude clinique 2 mois avant la période 1.g
Grands fumeurs� +10 cigarettes/jour �
à une étude clinique 2 mois avant la période 1.
Une hospitalisation prévue au cours des 3 mois
suivant l’administration du médicamentConsommation de jus ou d’aliments contenant
du pamplemousse sept (7) j précédant l’étude
suivant l administration du médicament
Femmes enceintes et allaitantes.
Régime alimentaire spécial (végétarien)Refus de signer le consentement de participation
S j t t êt t té d’Prise de médicament quelconque avec ou sans prescription deux (2) semaines .
Sujets ne pouvant être contacté en cas d’urgence
consentement de participation
« Acceptation libre et formellement expriméed’une personne afin de participer à un essai donné
c’est un consentement libre éclairé et exprès »( Chapitre 3- Arrêté N°387 - loi N°85-05 )
c’est un consentement libre, éclairé et exprès »
Investigateurs et sites d’investigationet sites d’investigation
Promoteur /Investigateur principal
LNCPP P M i MBLNCPP
I ti t li i iSit d’i ti ti
Pr Mansouri.MB
Investigateur clinicienSite d’investigation
Service�de�Bioéquivalence�(LNCPP)
Pr. Guermaz.R
Unité pharmacocinétique
Dr Mansouri.k
Sélection médicale des volontairesUnité�pharmacocinétique��Unité�investigation�cliniqueUnité�bio�analyseUnité Analyse des données
Sélection médicale des volontaires Clinique�Arezki��Lakhel Médecine�interne.EPH�El�Biar .�Alger��Laboratoire�de�biologie�clinique.�Unité�Analyse�des�données
Unité�équivalence�pharmaceutiqueUnité��assurance�qualité�
g qHôpital�Birtraria
Conduite de l’étude
Protocole de l’étude
Étude randomisée croisée sans bénéfice individuelle directeÉtude randomisée croisée sans bénéfice individuelle directe2 traitements ,2 séquences et 2 périodes
Pé i d IIPé i d I Wash out
7 jours
Période IIPériode I
Produit test : 8 sujets Produit de référence : 8 sujets (TR)
Seq (1)
(RT)
Seq(2)Produit de référence : 8 sujets Produit test : 8 sujets
Seq(2)
Produit de référence produit test
Site d’investigation clinique
� Salle de séjours
� Poste des urgences médicales
� bureau pour les cliniciens et despostes de prélèvements.
� Poste pour la récupération desprélèvements.
Admission des volontaires
Un responsable decoordination clinique
Un médecin
Un infirmier
Répartition des volontaires
GROUPE A GROUPE B GROUPE C GROUPE DGROUPE A GROUPE B GROUPE C GROUPE D
VBDI 08 VSIM 09 VBLS 16
VMIH 05 VSAK 14 VBKN 15
VBDA 02 VTTY 03 VDIS 04
VAIN 01 VAIA 11 VAIK 12
VBBH 07
Admission des volontaires
Distribution des badgesExamen clinique Renseignements du CRF
Identification des volontaires
Code d’identification
Badge d’identification
0101Essai Pilote de bioéquivalence
T Met 002 VS R Met002 Essai Pilote de bioéquivalence
comprimé 850mg
Code de l’étude: 002
Code du sujet:
T Met 002 VS R Met002
comprimé 850mg
Nom :
Initiales du sujet:
Date de Naissance :
Date(s) de l’étude:
Prénom :
Qualité :
- 1er période : 03/03/2011
-2eme période : 10/03/2011
Fonction :
Badge des volontaires Badge des participants
Cahier d’observation
« Document destiné à recueillir au fur et à mesure de l’essai,pour chaque sujet, les informations définies par
l l L i f i ê illile protocole .Les informations peuvent être recueillies par toutmoyen garantissant l’édition et la conservation,
et permettant le contrôle de qualité ».(Arrête N°387)
�Numérotation des pages�Identification de l’étude �Code d’Identification du sujet �Identification du centre
Première partie pré inclusion
�Données démographiques
�Antécédents médicaux
� Contrôle de pré administration
� Administration du produit
Deuxième partie
�Fiche de fin d’essai (après la première administration )
�Fiche de fin d’essai((après la deuxième administration) �Examen clinique
�Bilan biologiq e de sélection
Administration du produit
�Recueil des prélèvements
�C t ôl d i itpériode 1
T i iè ti
�Commentaires éventuels�Bilan biologique de sélection
�Traitement antérieur et en cours
�Contrôle des signes vitaux
�Evaluation de l’état général pendant l’étude
Troisième partie période 2
�Compte rendu de l’évaluation médicale
�Critères d’inclusion et de non inclusiondé
�Détails de consommation
�Traitement concomitant
Quatrième partie fin de l’essai
dé�Consentement de participation signé
�Formulaire d’admission
�Compte rendu des effets indésirables
Pose du cathéter
Période I Période IIHeure du Heure 7h30 7h30h
recueil du 1er
prélèvementP0
prévue
Heureréelle
7h33-7h49 7h30-7h44
Pose du cathéter Recueil du 1er prélèvement dans un tube hépariné
F t d thét R li d thétFermeture du cathéter Remplissage du cathéter avec une solution héparinée
Administration des produits
Choix du comparateur
Produits d’investigation
p
Étiquetage et conditionnementLNCPP
Conservation
Dispensation
Étude n° :
Sujet n° :
Période n° :Dispensation
Inventaire en post-étudeTMet002 (RMet002)
comprimé 850mg
n° :
A�utiliser�seulement�pour�étude�
de bioéquivalencede�bioéquivalence
Administration des produits
Chaque volontaire a reçu un étui contenant un comprimé du produittest ou de référence selon la table de randomisation
8h00 � 8h06
Sé (RT) Sé (TR)Séquence (RT) Séquence (TR)
VSAK 14 VSIM 09VSAK 14
VMIH 05
VBKN 15
VSIM 09
VDIS 04
VAIK 12VBKN 15
VTTY 03
VAIA 11
VAIK 12
VBDA 02
VBBH 07VAIA 11 VBBH 07
VAIN 01
VBDI 08VBDI 08
Administration des produits
Conditions d’activité et de posture physique
Conditions alimentaires
Administration des médicaments
Médicaments associés
Prélèvements
Nature des prélèvements
Profil des prélèvements Modalités des prélèvements
• Volume :5 ml ,< 400 ml
D é 12 h
• Volume :5 ml ,< 400 ml
D é 12 h
Étiquetage des prélèvements
É• Durée : 12 h
• Nombre: 18 pvts
• Durée : 12 h
• Nombre: 18 pvtsÉtude N°: ------
Code d’ID: ------
Pé i d (1 2)• Temps(h): 0.33; 0.66; 1.00; 1.33;1.66 ; 2 ; 2.33 ; 2.66; 3; 3.33;3.66; 4.00; 5.00; 6.00;
• Temps(h): 0.33; 0.66; 1.00; 1.33;1.66 ; 2 ; 2.33 ; 2.66; 3; 3.33;3.66; 4.00; 5.00; 6.00;
Période: (1 ou 2)
Prélèvement N°: ----
8.00;10.00;12.008.00;10.00;12.00
Traitement des Prélèvements
Vérifications des tubes
Centrifugation, séparationCentrifugation, séparation et aliquotage
Congélation à (-70°C)
Suivi de l’essai
Consommation d’aliments et de l’eau
déj t d d- déjeuner: un repas standarda été servi 4h aprèsl’administration (12hoo)
- Gouter: un gouter standard aété i 8h èété servi 8h aprèsl’administration(16h00).
- Consommation d’Eau: unvolume standard de 200ml aumoment de l’administrationmoment de l administration
- Consommation de 100 mlConsommation de 100 mld’eau glucosée 10% à 10h00et 11h00.
Tolérance
Surveillance clinique des volontaires
Tolérance
Effet indésirable (EI)/Effet indésirable grave(EIG)Effet indésirable (EI)/Effet indésirable grave(EIG)
Recueil des effets indésirables
Conduite à tenir devant un événement indésirable
QualificationQuantification
Intensité- gravité- duréegLien de causalité
Règles générales de suiviRègles générales de suivi
Documentation et enregistrements des effets indésirables
Surveillance clinique des volontaires
Code du Période Type d’EI
volontaire
VAIN01 1 Tachycardie
VTTY 03 1 Malaise vagal
VSIM 09 1 Céphalée
VAIK12 1 Malaise vagal jugulé
VBKN1 2 Malaise
Retrait
Sélection 16 volontaires
Empêchements personnels
Début de l‛essai13 volontaires
VMBL 10VZHH 0613 volontaires VZHH 06VLLH 13
Sortie volontaire
F d l‛Fin de l‛essai13 volontaires
Méthode Bio analytiqueMéthode Bio analytique
Dosage de la metformine:Dosage de la metformine:Au niveau plasmatiquePar: LC-MS/MSPar: LC MS/MSEtalonnage interneComplexité matrice : extraction (dé ï i i )(déproteïnisation)
11 Mai 2011 37
L’apport de la LCL’apport de la LC--MS/MSMS/MS
Méthode bio analytiqueMéthode bio analytique
Développement et validation
Critères:
Développement et validation
linéaritésensibilitéSpécificité Eff t t iEffet matriceFidélité /exactitudeRendement d’extractionRendement d’extraction StabilitéIntégrité de la dilutionIntégrité de la dilution
Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique
III- Déroulement du dosage des prélèvements :
Dates:Dates:Début : 16 Mars 2011Fin : 28 Mars 2011
Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique
Durée d’analyse : 6minutesNombre total d’echantillons : 114Nombre total d echantillons : 114 Durée totale essai /jour: 13 heures
Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique
RésultatsXIC o f +MR M (5 pa ir s): 2 60 .20 0 /11 6 .3 0 0 D a ID: P ro p ra no lo l1 fro m S am ple 1 0 (S TD0 7 30 0 0n g /m l) o f 02 0 22 0 11 _ S electiv ite.w iff (Tu rb o S... M ax. 3 .0e 5 c ps.
2.8 e5
3.0 e54 .64
2.2 e5
2.4 e5
2.6 e5
Propranolo l (SI)
1 4 e5
1.6 e5
1.8 e5
2.0 e5
8.0 e4
1.0 e5
1.2 e5
1.4 e5
M etfo rm ine
2.0 e4
4.0 e4
6.0 e4 3 .60M etfo rm ine
0 .5 1 .0 1 .5 2.0 2.5 3.0 3 .5 4 .0 4 .5 5 .0 5 .5Tim e, min
0.0
Méthode bioanalytiqueMéthode bioanalytique
Résultats
Gamme d’étalonnage
Résultats:
1 Critères d’acceptation de l’essai:1-Critères d acceptation de l essai: *Gamme d’étalonnage :EQUATION : Y=ax+b
r � 98%
Résultats:
2 Critères d’acceptation:2-Critères d’acceptation:Déviations :
�+/-20% :std 1(LIQ)�+/-20% :std 1(LIQ)�+/-15%: autres stds
75% dans les normes
Résultats:
*Contrôle de qualité :déviations:
+/ 15% t CQ� +/-15%: autres CQ
4/6 des CQ dans les normes4/6 des CQ dans les normes
Analyse des donnéesAnalyse des données
Cp=f(tCp f(t)
AnalyseAnalysepharmacocinétiqupharmacocinétiqu AnalyseAnalyse
statistiquestatistiqueee statistiquestatistique
Logicielcertifié
RMet002
TMet002
Courbes des moyennes arithmétiques des concentrations Courbes des moyennes arithmétiques des concentrations plasmatiques en fonction du temps après prise de plasmatiques en fonction du temps après prise de TMet002 (testTMet002 (test), ), comprimé à 850 mg et comprimé à 850 mg et RMet002 RMet002 (référence), comprimé à 850 mg (référence), comprimé à 850 mg
éé(sur échelle (sur échelle normale et semi logarithmique)normale et semi logarithmique)
2400
Analyse pharmacocinétique
1800
L)
treatment = Rtreatment = T
600
1200
C(n
g/m
L
10000
treatment = R
0 3 6 9 12
0
600
1000ng/m
L)
treatment = Rtreatment = T
T(h)1000
C(n
0 3 6 9 12T(h)
100
SSC0�� = SSC0�t + Ke /CLAST
Ke : pente de droite de régression log linéaire de la phase d’élimination
Analyse pharmacocinétique
10000DtName: VSAK14 (II) R
Ke : pente de droite de régression log-linéaire de la phase d élimination
DtName: VSAK14 (II) Rfitting
1000
C(n
g/m
L) �inf
R>90%
0 3 6 9 12
100
�supR>90%
0 3 6 9 12T(h)
T1/2=ln2/Ke %SSC résiduelle < 20%
RMet002TMet00
2
Analyse statistique
ANOVA : Evaluation des effets1 Formulation1. Formulation2. Sujet
Pé i d3. Période4. Séquence
Détermination de l’IC à 90% T/R de Cmax , SSC
Intervalle de confianceIntervalle de confianceBioéquivalence (�=5%)
90% CI
Bioéquivalence (�=5%)
�� �
90% CI
1-� CI Bioinéquivalence (�)
1-� CIBioinéquivalence (�)
Intervalle d’équivalenceIntervalle d équivalence
Ratios et intervalles de confiance
Intervalle de confiance %
Ré lt t
Paramètre Ratio(moy.géo)
Ratio %Intervalle de confiance %
Conclusion Puissance du test (%)Limite inf. Limite sup.
Résultats Ln C max 1,0078 100,78 94,58 119,58 Bioéquivalent 86,131
Ln SSC 0�t 1,0032 100,32 91,62 115,66 Bioéquivalent 93,064
86,131
93,064Ln SSC 0�� 1,0034 100,34 92,07 115,53 Bioéquivalent 92,783
CRatio
92,783
> 80%
SSC 0�t
SSC 0��
C max
�� ��
0�t
�� ��Intervalle d’équivalence
C l iC l iConclusionConclusion
� Bioéquivalence (T/R)
� Validation de la méthodologie
� Etude programmé en présence des d l’OMS (Q lifi i dexperts de l’OMS (Qualification du
service
MERCIMERCI