real-time PCR
リアルタイムPCR システム試薬・消耗品カタログ2015年7月
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販売店
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本社:〒108-0023 東京都港区芝浦 4-2-8
Contentsリアルタイム PCRアプリケーション.........................................................................................................3
アプリケーション別リアルタイムPCR試薬セレクションガイド ...........................................................................3
アッセイの選択 ...........................................................................................................................................4
TaqManアッセイアプリケーション .................................................................................................................6
TaqMan アッセイフォーマット / リアルタイムPCRシステム / デジタルPCRシステム .........................................8
デジタルPCRのアプリケーション ..................................................................................................................9
遺伝子発現解析 ..........................................................................................................................................10
RNA抽出試薬 ...........................................................................................................................................10
Cells-to-CT Kitシリーズ .............................................................................................................................12
Cell-to-CT Kit ...........................................................................................................................................14
1ステップRT-PCRキット ............................................................................................................................15
逆転写試薬 ...............................................................................................................................................16
TaqMan Fast マスターミックス ..................................................................................................................18
TaqMan マスターミックス ..........................................................................................................................19
SYBR Green マスターミックス ..................................................................................................................23
TaqMan 遺伝子発現アッセイ .....................................................................................................................24
TaqMan アレイプレート(96ウェルタイプ) ...................................................................................................25
TaqMan アレイ(384ウェルタイプ) .............................................................................................................28
TaqMan 内在性コントロール ......................................................................................................................29
RNAi解析 ......................................................................................................................................................32
siRNA 合成オリゴ .....................................................................................................................................33
RNA(siRNA、miRNA) 導入用試薬 .............................................................................................................36
microRNA解析 ...........................................................................................................................................37
microRNA 抽出キット................................................................................................................................38
microRNA 用逆転写試薬 ..........................................................................................................................39
microRNA アッセイ ..................................................................................................................................40
Non-coding RNA アッセイ ........................................................................................................................42
microRNA 機能解析用試薬 .......................................................................................................................43
SNP解析 .......................................................................................................................................................44
SNP ジェノタイピングアッセイ ...................................................................................................................45
SNP ジェノタイピング用試薬 .....................................................................................................................46
変異解析 .......................................................................................................................................................48
コピー数多型解析 ......................................................................................................................................49
High Resolution Melt(HRM)解析 .......................................................................................................50
タンパク質発現解析 ...................................................................................................................................52
タンパク質熱安定性解析 ..........................................................................................................................55
プラスチック製品 .......................................................................................................................................56
プラスチック製品 ・ その他消耗品 ..........................................................................................................59
TaqManプローブカスタム合成サービス ..............................................................................................60
オンラインオーダーシステムのご案内 ..................................................................................................................61
INDEX(製品番号順) ........................................................................................................................................63
INDEX(製品名順) ............................................................................................................................................69
3
アプリケーション別リアルタイムPCR試薬セレクションガイド目的のアプリケーションに適したリアルタイムPCR用反応試薬を以下に記載しています。 各製品の詳細は参照ページをご覧ください。
アプリケーション TaqMan ケミストリ 掲 載ページ SYBR Green ケミストリ 掲 載
ページ
遺伝子発現解析
RNA抽出試薬
PureLink RNA Kit シリーズTRIzol Reagent
TRIzol Plus RNA Purification System
TaqMan Cells-to-CT Kit シリーズAmbion Single Cell-to-CT Kit
10
10
10
13
14
MagMax シリーズRNAqueous Kit
SYBR Green Cells-to-CT Kit シリーズ
11
11
13
逆転写反応試薬 Super Script VILO シリーズ 16 High Capacity RNA-to-cDNA Kit 17
1ステップ RT-PCRキット・マスターミックス
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix
15
21
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit 15
PCR マスターミックス
TaqMan Fast Advance Master Mix
TaqMan Fast Universal PCR Master Mix
TaqMan Universal Master Mix II
TaqMan Gene Expression Master Mix
TaqMan Multiplex Master Mix
18
18
19
20
22
Power SYBR Green PCR Master Mix
Fast SYBR Green Master Mix
SYBR Select Master Mix
23
23
23
TaqMan アッセイ
TaqMan Gene Expression Assays
TaqMan Array Plate
TaqMan Array Gene Signature 96-well Plate
TaqMan Gene Signature Arrays
TaqMan Custom Arrays
24
25
26
28
28
-
RNAi解析 siRNA
Silencer Select siRNA
TaqMan siRNA Assays
Ambion In Vivo siRNA
33
35
35
Lipofectamie RNAiMAX
Invivofectamine 3.0 Reagent
36
36
microRNA発現定量解析
microRNA抽出試薬mirVana miRNA Isolation Kit
mirVana PARIS Kit
TaqMan miRNA ABC Purification Kit
38
38
38
-
逆転写反応試薬TaqMan MicroRNA RT Kit
Megaplex Primer Pools
39
39
PCR マスターミックス TaqMan Universal Master Mix II 19
TaqMan アッセイ
TaqMan MicroRNA Assays
TaqMan Array MicroRNA Card
TaqMan Pri-miRNA Assays
TaqMan Non-coding RNA Assays
40
41
42
42
microRNA機能解析 microRNA mimic & inhibitormirVana miRNA mimic & inhibitors 43 Lipofectamine RNAiMAX
Invivofectamine 3.0 Reagent
36
36
SNP ジェノタイピング解析
PCR マスターミックスTaqMan Genotyping Master Mix
TaqMan GTXpress Master Mix
46
46
-
TaqMan アッセイ TaqMan SNP Genotyping Assays 45
1ステップ SNP ジェノタイピング TaqMan Sample-to-SNP Kit 47
変異解析 TaqMan アッセイ TaqMan Mutation Detection Assays 48
コピー数多型解析 TaqMan アッセイ TaqMan Copy Number Assays 49
HRM解析 PCR マスターミックス MeltDoctor HRM マスターミックス 50
タンパク質発現解析
試薬TaqMan Protein Expression Core
Reagents Kit with Master Mix
53
TaqMan アッセイTaqMan Protein Assay Kit
TaqMan Protein Assay Open Kit
53
53
タンパク質熱安定性解析 試薬 Protein Thermal Shift Dye Kit 55 Protein Thermal Shift Starter Kit 55
4
リアルタイムPCRを利用した検出方法には、Applied Biosystems™ TaqMan™ アッセイとApplied Biosystems™
SYBR™ Greenアッセイがあります。当社のリアルタイムPCRシステムは、どちらのアッセイにも対応しています。
アッセイの選択
TaqMan アッセイ(5'-ヌクレアーゼ アッセイ)
確かな精度を提供するTaqMan アッセイTaqMan アッセイは、ターゲット遺伝子の配列をもつPCRプライマーとTaqMan プローブを用いてPCR反応を行い、5’-ヌクレアーゼ活性によってTaqMan プローブが分解される時に生じる蛍光シグナルをリアルタイムに検出します。
特徴
・高い精度と特異性にすぐれた定量解析が可能・ PCR条件が構築されており、共通の温度プログラムを使用
・ 様々な生物種に対応した130万種類を超えるプライマー・プローブセットをご用意(24ページ TaqMan Gene Expression Assays)
・ 2種類の蛍光を用いることで同時に2つの遺伝子定量が可能
・ 使用するマスターミックスに内在性のリファレンス色素を含有するため、すべての反応でシグナルの標準化が可能
1.Polymerization
2.Strand displacement
3.Cleavage
4.Polymerization completed
TaqMan プローブの両端には、レポーター蛍光色素(R)とクエンチャー(Q)がそれぞれ5'末端と3'末端に結合しています。
反応前のTaqMan プローブは、レポーターの蛍光がクエンチャーの働きにより抑制されています。
各伸長サイクル中に、DNAポリメラーゼの5'- 3'エキソヌクレアーゼ活性によりTaqMan プローブが分解され、レポーター蛍光色素が5'末端から遊離します。
レポーター蛍光色素は、クエンチャーとの距離が離れて(抑制から解き放たれて)本来の蛍光を発します。PCR中に生じるレポーター色素からの蛍光の増加を リアルタイムに測定し、解析ソフトウェアにより定量結果を算出します。
蛍光5'-ヌクレアーゼアッセイは、レポーター色素およびクエンチャー分子で両端をラベルした配列特異的オリゴヌクレオチドプローブ(TaqMan プローブ)を使用します。このTaqMan プローブは、PCR反応中フォワードプライマーとリバースプライマー間のターゲット配列にアニールします。そして、それに続く伸長反応でDNAポリメラーゼが 5'- 3'エキソヌクレアーゼ活性によりTaqMan プローブを分解していきます。その結果クエンチャー分子によりクエンチングされていたレポーター色素の蛍光強度が増加します。
検出原理
図1. TaqMan アッセイ検出原理
5
SYBR Green アッセイ
コストパフォーマンスのSYBR Green アッセイSYBR Greenアッセイは、2本鎖 DNAに結合して蛍光を発するSYBR
Green I 存在下でPCRを行い、2本鎖 DNA量の増加に伴って生じる蛍光シグナルをリアルタイムに検出します。
特徴
・ PCRプライマーとSYBR Green I試薬のみ使用するので低コスト・ 融解曲線からPCR産物のTm値を測定・ 使用するマスターミックスに内在性のリファレンス色素を含有するため、すべての反応でシグナルの標準化が可能
SYBR Green I Dyeは、2本鎖DNAに結合することで蛍光を発します。
DNAが1本鎖に変性する時、SYBR Green I DyeはDNAから遊離して、 蛍光は急激に減少します。
伸長反応中、プライマーがアニーリングしてPCRプロダクトが産生されます。
伸長反応に伴い、 SYBR Green I Dyeは2本鎖DNAに結合し再び蛍光を 発します。増加した蛍光をリアルタイムPCRシステムが検出します。
1.Reaction setup
2.Denaturation
3.Polymerization
4.Polymerization completed
PCR反応によって増幅された2本鎖DNAへのSYBR Green I Dyeの結合によりDNAの定量を行います。SYBR Greenアッセイでは検出ターゲットに特異的な蛍光プローブは必要としませんが、非特異的な増幅産物を検出する可能性があります。その欠点を最小限にとどめるためにAmpliTaq Gold DNA Polymeraseによるホットスタート法を使用します。
検出原理
TaqMan アッセイ SYBR Green アッセイ蛍光検出 TaqManプローブ分解による蛍光シグナル検出 2本鎖DNAに結合するSYBR Green I の蛍光シグナル検出
使用オリゴ3種
ノンラベルPCRプライマー ×2TaqMan プローブ
2種ノンラベルPCRプライマー ×2
特異性 ○※1 △※2
感度 ○ ○PCR条件検討 不要 必要
プライマー・プローブセット
設計済み TaqMan Gene Expression Assaysヒト、マウス、ラット、シロイヌナズナ、ショウジョウバエ
アカゲザル、イヌ、線虫、ゼブラフィッシュ、ウシ、ウサギ、ニワトリ、ブタなどを対象に合計130万種以上
カスタムデザイン
マルチプレックス反応
可能異なる蛍光で標識したプローブを使用 不可能
※1 ターゲットに対して3種のオリゴで検出するので特異性が高く、 プライマーダイマーや非特異的産物を検出しません。
※2 プライマーダイマー等の目的としないPCR産物も検出可能なため、 実験系の事前確認を推奨しています。
表1. TaqMan アッセイとSYBR Green アッセイ比較
図2. SYBR Green アッセイ検出原理
6
TaqMan アッセイアプリケーション実績のあるTaqMan アッセイが良質な研究成果の取得をサポートします。
TaqMan アッセイは、遺伝子発現解析、microRNA(miRNA)を含むSmall RNA解析、コピー数多型解析、SNPジェノタイピング解析およびタンパク質発現解析などのアプリケーションに利用可能な製品で、既製の遺伝子特異的プローブおよびプライマーセットからお選びいただくか、ご希望の配列でカスタムプローブおよびプライマーをオーダーすることができます。すべてのアッセイ製品はTaqMan プローブ法を利用しています。
TaqMan プローブ法は、定量的遺伝子発現解析およびSNPジェノタイピング解析におけるゴールドスタンダードで、高い感度と高い特異性、高い再現性、広いダイナミックレンジを有しています。TaqMan プローブ法を用いた定量 PCR用の試薬・消耗品をご用意しており、目的に応じて良質な研究成果が取得できるようにデザインされています。
タンパク質発現
TaqMan Protein Assayは、少量の培養細胞などのサンプルから得られたタンパク質マーカーを迅速かつ簡単に同定し、相対的に定量することができる革新的な製品です。プレデザインされたアッセイからお選びいただくか、お客様の抗体を使用して独自のアッセイを作成することもできます。
SNPジェノタイピング
TaqMan プローブ法の高い精度により、SNPジェノタイピングを簡単に行えます。設計済みの450万種類のヒトおよびマウス TaqMan
SNP Genotyping Assay、およびCustom TaqMan SNP Genotyping
Assayを、様々なサイズでご用意しています。
コピー数多型
TaqMan Copy Number Assayは、ヒトゲノム全体をカバーする160万種類以上の設計済みのアッセイと、マウス遺伝子のエクソンをターゲットとする18万種類以上のアッセイ、Custom Plus TaqMan Copy
Number AssaysおよびCustom TaqMan Copy Number Assaysを、様々なサイズでご用意しています。
遺伝子発現解析
TaqMan Gene Expression Assayは、定量的遺伝子発現解析を行なえる製品で、23の生物種用の合計130万種類以上のプライマー /プローブセット(FAM またはVIC 標識を選択可能)を4つのサイズでご用意しています。カスタムアッセイにより、任意の生物種の遺伝子やスプライスバリアントの発現解析を実施することもできます。
薬物代謝ジェノタイピング
約2,700種 類 の 特 異 的 なTaqMan Drug Metabolism
Genotyping Assayをご用意しており、PharmaADMEコアマーカーをはじめ、既知のあらゆるDME薬理遺伝学的マーカーの遺伝子多型を検出できます。
miRNAおよびnon-coding RNA解析
下記の目的に使用可能な、miRNAおよびnon-codingRNA
(ncRNA)研究用のツールを様々なサイズで提供しています。
・ miRNAのプロファイリング ・ pri-miRNAの定量・ small RNAの定量 ・ ターゲットmiRNAの定量・ 長鎖 ncRNAの定量
c
c
c
c
cc
遺伝子発現解析製品名 特長 ページTaqMan Gene Expression Assays
1本のチューブにTaqMan MGBプローブとプライマーセットが最適な濃度で混合された状態でお届けします。ランダムプライマーによって逆転写反応したcDNAテンプレートをサンプルとし、マスターミックス試薬を加えるだけで、簡単に高精度のデータを得ることができます。
24
Custom TaqMan Gene Expression Assays
あらゆる生物種ゲノムやターゲットに対応可能なカスタムメイドのTaqMan Gene Expression Assaysです。 24
TaqMan Array Plates ご指定いただいたTaqMan Gene Expression Assaysを、96ウェルプレートフォーマットに分注し乾燥してお届けするカスタマイズ製品です。プレートフォーマットは遺伝子数で5種類、およびプレートタイプ(Fastとスタンダード)を選択できます。プレートにサンプルとマスターミックス試薬を加えるだけで、正確な定量が行えます。
25
TaqMan Array Gene Signature 96-Well Plate
96ウェルフォーマットのプレートに、特異的生体プロセスやパスウェイ、また疾患関連遺伝子に対するTaqMan Gene Expression Assaysがあらかじめ選定されています。各プレートには、選定された遺伝子および内在性コントロールとなる遺伝子も乾燥した状態で設定されていますので、一度の実験で関連する遺伝子を網羅的に解析できます。
26-27
TaqMan Gene Signature Arrays
384ウェルのカード型アレイに疾病関連遺伝子や特定の遺伝子パスウェイなどの遺伝子群を、弊社独自にあらかじめ選択して、スポットした既製のTaqMan アレイです。
28
TaqMan Custom Arrays 384ウェルフォーマットのアレイ型アッセイシステム。相対定量により遺伝子発現定量を効果的、容易に行なえます。1サンプルに対して12遺伝子から384遺伝子に対して1-8サンプルの発現定量が行えます。定量性のあるカスタムアレイです。
28
TaqMan Array Human Endogenous Control Plate
TaqMan 内在性アッセイ、実験に最適な内在性コントロール遺伝子を簡単に選択できるツールです。搭載されているのは、各種文献や、多くのヒト組織サンプルを用いたテストによって選別された、32の内在性コントロールの候補遺伝子です。
29
Custom Plus TaqMan RNA Assays
お望みの入力された配列に対してTaqMan Gene Expression Assaysと同様のバイオインフォマティック解析や他の生物種の転写産物を検出しないようにデザインを行うカスタムアッセイです。
24
表2. アプリケーション別 TaqMan アッセイ製品一覧
7
miRNAおよびnon-coding RNA解析製品名 特長 ページMegaplex RT Primer Pools for TaqMan MicroRNA Assays
miRNA用の逆転写プライマーをプールしたもので、cDNAの作製プロセスを簡素化し効率化した製品です。個々のMultiplex RTプールは1プールあたり数百類のプライマーを含んでいます。マイクロアレイを用いた方法に比べ、より高い感度と特異性より迅速なmiRNAプロファイリング結果が得られます。
39
TaqMan MicroRNA Assays TaqMan ケミストリーを使用してmiRNAを定量する設計済みプライマープローブセットです。前駆体ではなく成熟miRNAのみを標的とするため、生物学的に重要な結果を確実に得ることができます。アッセイは、逆転写反応用プライマーおよびリアルタイムPCR用のプライマープローブのセットとして供給されます。
40
TaqMan Array MicroRNA Card TaqMan MicroRNA Assaysの利点を十分に生かした、『定量性のあるアレイ』です。384ウェルのカードにTaqMan
プローブとプライマーがスポットされており、8つのポートからサンプルを加えて遠心するだけで、ランを開始できます。41
TaqMan Non-coding RNA Assays TaqMan Non-coding RNA Assays は、長鎖のnon-coding 転写産物の発現を検出できる信頼性の高いアッセイです。 42
TaqMan Pri-miRNA Assays miRNAの生物学的生成過程で最も初期に生じるprimary miRNA (pri-miRNA)を定量するアッセイです。 42
SNP ジェノタイピング・コピー数多型製品名 特長 ページTaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays
約450万のアッセイ総数を誇ります。中~小規模のSNPタイピング実験に理想的です。簡便な操作で再現性の高いSNPタイピングが可能です。プライマーと、それぞれのアリルに対応した2種類のTaqMan プローブを利用して、リアルタイム PCRシステムで解析します。
45
TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays
221の薬剤代謝関連酵素、トランスポータータンパクをターゲットに、約2,700種類のマーカーのGenotypingを可能にしたTaqMan アッセイです。
45
TaqMan Copy Number Assays CNVバリデーションに適したヒト用にデザインされた、160万種以上およびマウス用18万種以上のTaqMan プローブとプライマーセットです。ターゲットCNVs用のTaqMan Copy Number Assaysと、内部コントロール TaqMan Copy Number Reference Assaysを用いて、リアルタイム PCRシステムにてコピー数を3 ~ 4時間で決定することができます。
49
Custom TaqMan Copy Number Assays & Custom Plus TaqMan Copy Number Assays
デザイン済みTaqMan Copy Number Assays以外のゲノム領域や、ヒトおよびマウス以外の生物種のCNVsアッセイを行うためのプローブとプライマーのカスタム合成サービスです。
49
TaqMan Copy Number Reference Assays
TaqMan Copy Number Reference Assaysは、TaqMan Copy Number Assaysま た はCustom TaqMan Copy Number Assaysのヒトまたはマウス用コントロールで、反応時に反応溶液中に混合して使用します。
49
TaqMan Mutation Detection Assays
TaqMan アッセイによる遺伝子変異解析用製品です。Competitive Allele-Speci�c TaqMan PCR (castPCR)テクノロジーをベースにデザインされています。アレル特異性の高いMGBブロッカーオリゴにより、ターゲット外の非特異的な反応を抑制することに成功し、わずかな変異も検出が可能です。
48
タンパク質発現 製品名 特長 ページTaqMan Protein Assay Open Kit / TaqMan Protein Assays Core Reagents Kit with Master Mix
すべてのタンパク質をターゲットとするために、お客様の抗体を使用してTaqMan Protein Assayプローブを作成するキットです。ビオチン化された抗体をご用意いただき、その抗体にストレプトアビジンラベルのオリゴヌクレオチドを添加することで、2種類の抗体-オリゴヌクレオチドのアッセイプローブを作成します。この複合体に対して、 TaqMan 5’ヌクレアーゼ技術を応用して、タンパク質の発現量を定量することが可能です。
52-53
カスタムプレーティングサービス製品名 特長 ページTaqMan Custom Plating Service お望みのTaqMan Gene Expression AssaysまたはTaqMan MicroRNA Assaysなどを、96ウェルプレートもしくは
384ウェルプレートにお望みの形で分注してお届けするサービスです。ご注文の項目は以下のとおりです。・アッセイ数 / プレートレイアウト / プレート数・プレートタイプ (96ウェル Standard、96ウェル Fast、384ウェル)・アッセイタイプ TaqMan Gene Expression Assays (Inventoried, Made-to-Order, and Custom) 24
TaqMan MicroRNA Assays (Inventoried, Made-to-Order, and Custom) 40
TaqMan Non-coding RNA Assays (Inventoried, Made-to-Order) 42
TaqMan SNP Genotyping Assays(Predesigned Custom and DME) 45
TaqMan Copy Number Assays (Predesigned Custom Plus or Custom) 49
8
TaqMan アッセイフォーマット解析するサンプルやターゲット数等、お客様の研究ニーズに合わせてTaqMan アッセイフォーマットをお選びいただけます。
リアルタイムPCRシステム /デジタルPCRシステム革新的なリアルタイムPCRシステムが 多様なニーズを満たします。
シングルチューブ 96もしくは384ウェルプレート 384ウェル TaqMan Arrayカード OpenArray プレート
• 中小規模のプロジェクトに最適
• 反応セットアップの簡便さと柔軟性の適度なバランス
• 96および384ウェルタイプのすべての装置に対応
• 凍結乾燥した混合済みアッセイおよびマスターミックスのフォーマットが利用可能
• 1アッセイより購入可能
• フレキシブル
• どんなタイプのリアルタイムPCR装置にも対応
• 1反応当たりのコストが低い
• 中規模から大規模なプロジェクトに最適
• Quant Studio 12K Flex、Quant Studio 7もしくは7900HTリアルタイムPCRシステムのTaqMan Arrayシステムに対応
• 1反応当たりのコストを最小に抑え大規模プロジェクトに最適
• 究極のスループット
• Applied Biosystems™ Quant Studio™ 12K Flex、OpenArray システムに対応
StepOne システム• コンパクトかつコストパフォーマンスに優れたリアルタイムPCR
• 46ウェル、3色、Fastおよびスタンダードサイクリングに対応
• StepOnePlusシステムへアップグレードが可能
QuantStudio 3 システム• 直観的なタッチスクリーン画面で簡単な操作を提供するエントリーモデル
• 96ウェル、4色、Fastモードで30分以内にランニングが完了
• 3分割で温度制御を行うVeriFlex Blockを搭載
QuantStudio 7 システム• 優れた性能と拡張性を重視した生産性の高いリアルタイムPCR
• 独立した6枚の励起フィルターと蛍光フィルターを組み合わせ、最大21種類の波長を検出
• 4種類の交換可能なブロックで幅広いニーズに対応 (96ウェル、96ウェルFast、384ウェル、および TaqManR Arrayフォーマット )
QuantStudio 12K Flex システム• 究極のスループット、柔軟性および容易なスケールアップに対応
• サンプルブロックは、96ウェル、96ウェルFast、384ウェル、 TaqMan Arrayカード、およびOpenArray フォーマットの5種類
• 1回のランあたり1から12,000個以上の データポイントをプロジェクトに合った形式で解析
• OptiFlex システムを白色 LEDと21個の フィルターの組み合わせを強化することで、マルチプレックスとケミストリの選択に最大限に対応
• 遺伝子発現とmicroRNA、ジェノタイピング、およびデジタルPCRまで幅広く解析
QuantStudio 3D デジタル PCRシステム• 拡張性のあるチップ技術を採用• 20,000データポイントを実現• シンプルなワークフロー• 貴重なサンプルを無駄なく定量
New
9
デジタルPCRのアプリケーションデジタルPCR は、標準曲線を必要としない、高感度・高精度で、絶対定量が可能な解析方法です。
デジタル PCR
デジタル PCR は核酸の絶対定量を必要とするアプリケーションにおいて、リアルタイム PCR の限界を超える能力を提供する画期的な技術です。標準曲線を必要とせず、高感度・高精度な絶対定量を可能にする技術は、複数の遺伝子間における発現量の比較やレアバリアントの検出、微量な濃度差を比較するようなアプリケーションにおいて、威力を発揮する新しい解析手法として期待されています。
低濃度領域を高感度に検出するデジタル PCRは、1%未満のレアな変異の検出を可能にします。Custom TaqMan SNP Genotyping
Assays は、がん研究でよく利用される遺伝子、EGFR, KRAS, BRAF,
PIK3CA, JAK2 などについて、実績のあるTaqMan アッセイのデザインパイプラインで設計し、QuantStudio 3D デジタル PCR システムに最適化したバリデーション済みのアッセイを提供しています。
デジタル PCRの応用例としては、以下のものが挙げられます。• がん研究 野生型DNAのバックグラウンドに対する体細
胞変異の高感度かつ特異的な検出
• ウイルスや病原体の 標準曲線に頼らないウイルスの高感度な絶対的検出 な定量
• アグリ分野における 野生型DNA のバックグラウンドに対する導入 品質管理 遺伝子遺伝子組み換え体含有量の高感度かつ特
異的な検出
• コピー数多型 遺伝子コピー数のわずかな違いを検出
• 定量PCR の検証 高い精度と感度を利用した従来法データの確認図3. Custom TaqMan SNP Genotyping Assays でKRAS G12V の変異をQuantStudio 3D デジタル PCR システムで解析野生型ゲノム DNA に10%(A)、1%(B)、0.1%(C)の変異体をそれぞれ混合した。(D)は 野生型コントロールサンプル。デジタル PCRで、それぞれ10.384%(A)、 1.393%(B)、 0.142%(C)の解析結果を得た。
製品名 サイズ 製品番号 価格QuantStudio 3D デジタル PCR システム ProFlex PCRシステム付き
QuantStudio デジタルPCR システム、デュアルフラットブロックProFlex PCR システム、QuantStudio 3D ChipLoader、インスタレーションキット、設置・基本取扱説明付
1式 QS3D-PF(2年保証)
¥6,400,000
QuantStudio 3D デジタル PCR Chips v2 12 チップ A26316 ¥11,880
QuantStudio 3D デジタル PCR Master Mix v2, 1.5 mL 1.5 mL A26358 ¥17,000
QuantStudio 3D デジタル PCR Master Mix v2, 5.0 mL 5.0 mL A26359 ¥48,000
製品名 サイズ 製品番号 価格Custom TaqMan SNP Genotyping Assays for Rare Mutation Analysis (20x, Small scale)
12 反応 4383547 ¥11,500
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays for Rare Mutation Analysis (40x, Medium scale)
450 反応 4332077 ¥65,900
QuantStudio 3D デジタル PCR システムによるレアな変異の検出
デジタルPCRの原理デジタルPCR では、1 ウェルあたりに1 分子のDNA が入るか入らないかになるように、多数のウェルにサンプルを分配して個別にPCR を行います。ターゲット配列を含むウェルではPCR 増幅が進んで蛍光シグナルが検出されますが、ターゲット配列を含まないウェルではPCR 増幅が進まず、蛍光シグナルは検出されません。PCR 終了後シグナルを検出し、各ウェルの「ある(+)・なし(-)」を判別し、シグナルの「ある(+)」ウェル数をターゲットのコピー数として算出します。
① 対象サンプル ③ PCR増幅エンドポイントで増幅の有無をカウント
② サンプルを分配1コピー/ウェル以下に分配 ④ 直接的な定量
●増幅ある(+)○増幅なし(-)
XX コピー / µL
QuantStudio 3D デジタル PCR システム、消耗品、デジタル PCR用マスターミックス
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays
注意:デジタルPCRの反応では、TaqMan Gene Expression Assaysなども使用することができます。詳細は営業担当者にお問い合わせください。
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有機溶媒と組み合わせたより高品質なトータル RNA 抽出キット
TRIzol Plus RNA Purification SystemInvitrogen™ TRIzol™ Plus RNA Puri�cation Systemは、スピンカラムタイプのPurelink RNA Mini Kitと有機溶媒試薬タイプで論文使用実績No.1のTRIzol を組み合わせ、約45分で高品質なRNAを抽出するシステムです。また、スピンカラム法だけでは抽出の難しい繊維や脂質の多い組織サンプルからもTRIzol を組み合わせたこのシステムによりトータルRNAの抽出が可能です。
製品名 サイズ 製品番号 価格TRIzol Plus RNA Purification System・TRIzol Reagent 100 mL (製品番号:15596026)・ PureLink RNA Mini Kit 50 回 (製品番号:12183018A)
50 反応 12183555 ¥56,400
抽出困難なサンプルからもRNA 抽出
TRIzol ReagentInvitrogen™ TRIzol™ Reagentはフェノールとグアニジン・イソチオシアネートの調製済み単相溶液で、DNA・タンパク質フリーなトータル RNA
抽出の製品として、数千以上の論文で引用されている試薬です。TRIzol
LS Reagentは血液、ウイルス含有物などの液体サンプルからのトータル RNA抽出用試薬です。
製品名 サイズ 製品番号 価格TRIzol Reagent 100 mL 15596026 ¥27,600
200 mL 15596018 ¥48,900
4 × 200 mL 15596018SP ¥178,000
TRIzol LS Reagent 100 mL 10296010 ¥27,400
200 mL 10296028 ¥48,300
RNA抽出試薬
ミニカラムタイプで最大収量のRNAを抽出
PureLink RNA Kit シリーズInv i t rogen™PureLink™
RNA Mini Kitは、簡単で使いやすいスピンカラム法を利用することにより、フェノールなどの危険な試薬を使わずに、様々な種類のサンプルタイプから、迅速に高品質のトータル RNAを抽出できます。このキットは動物・植物の細胞や組織、血液、バクテリア、酵母、液体サンプルから高純度、高収量のRNAを得ることができます。サンプルの量によって、ミニキットは最大1,000µg、マイクロキットは100µgの収量を得ることができます。また、アクセサリーも充実しており、ホモジナイザーはサンプルの粘性を抑制し、DNase Setはカラム上でゲノム DNAの分解を行なうことができます。
製品名 サイズ 製品番号 価格PureLink RNA Mini Kit 10 回 12183020 ¥10,400
50 回 12183018A ¥32,100
250 回 12183025 ¥134,600
PureLink RNA Micro Kit 50 回 12183016 ¥44,900
PureLink Homogenizer 50 回 12183026 ¥11,600
PureLink DNase Set 50 回 12185010 ¥13,000
製品名 TRIzol Reagent PureLink Kits TRIzol Plus RNA Purification System MagMAX™ Kits
方法 有機溶媒 シリカメンブレン TRIzol+シリカメンブレン マグネットビーズ抽出時間 60 分 20 分 45 分 45 分サンプルタイプ ほとんどの細胞、組織 細胞、組織 ほとんどの細胞、組織 細胞、血液、植物
サンプルインプット量100 mgまでの組織、1×108までの細胞(1 mL試薬あたり)
200 mgまでの組織、5×106 ~ 1×108までの細胞
200 mgまでの組織、5×108までの細胞
100 mgまでの組織、5×106 までの細胞
抽出困難なサンプル ☆☆☆ ☆☆ ☆☆☆ ☆☆ハイスループット対応 ☆ ☆☆ ☆☆ ☆☆☆
Tissue(mg)
1,000PureLink RNA Mini Kit
Competitor s midi kit
Competitor s mini kit
900
800
700
600
500
400
300
200
100
25 100 2000
RN
A(
µg)
図4. トータル RNA収量比較PureLink RNA Mini Kitと競合製品で、ラット肝臓組織からトータル RNAを精製しました。PureLink RNA Mini Kitはミニカラムながらミディ並みの高収量の結果が得られます。
表3. RNA抽出用試薬セレクションガイド
11
スピンカラムを利用した簡便なRNA抽出キット
RNAqueous KitApplied Biosystems™ RNAqueous™ Kitは、RNA吸 着グラスファイバーフィルターをスピンカラムに採用した抽出キットです。有機溶媒を使用せずに、わずか20分の工程で簡単にRNA精製ができます。リアルタイム発現解析には、ゲノム DNAのコンタミのないRNAを精製できるRNAqueous-4PCR Kitが適しています。
製品名 サイズ 製品番号 価格RNAqueous Kit 50 回 AM1912 ¥40,900
RNAqueous Midi Kit 15 回 AM1911 ¥29,700
RNAqueous-4PCR Kit 30 回 AM1914 ¥40,000
RNAqueous-96 Kit 192 回 AM1920 ¥94,400
RNAqueous-96 Automated Kit 4 × 96 回 AM1812 ¥150,600
RNAqueous-Micro Kit 50 回 AM1931 ¥47,600
組織中のRNAを安定化する保存溶液
RNAlater SolutionApplied Biosystems™ RNAlater ™ Solutionは、組織保存用の水性で無毒の試薬で、凍結されていない組織サンプル中の細胞性 RNAをインタクトな状態で安定化、保護します。RNAlater Solutionがあれば、組織サンプルをすぐに処理したり、後日処理するために液体窒素でサンプルを凍結する必要はありません。
DNA除去のための試薬
TURBO DNA-free KitApplied Biosystems™ TURBO DNA-free™ Kitには、DNA除去のスタンダードとなった非常に効果の高いTURBO DNase(特許出願中)を採用しています。TURBO DNase はリコンビナントで、野生型のDNase Iに比べて不要なDNAをより効果的に分解できるよう改良されています。また、従来のDNase Iに比べて基質への結合能力が6倍高く、RT-PCRでのfalse positiveシグナルの原因となる残存DNAの除去に適しています。
製品名 サイズ 製品番号 価格RNAlater Solution 100 mL AM7020 ¥18,100
250 mL AM7024 ¥33,800
500 mL AM7021 ¥58,600
50 × 1.5 mL AM7022 ¥43,400
20 × 5 mL AM7023 ¥43,400
製品名 サイズ 製品番号 価格TURBO DNA-free Kit 50 反応 AM1907 ¥21,300
凍結済み組織中のRNAを安定化する保存溶液
RNAlater -ICEApplied Biosystems™ RNAlater™ -ICEは、凍結保存した組織をRNAを分解させずに安全に融解できる試薬です。凍結した組織をRNAlater -ICE
に入れ、-20℃で一晩融解処理するのみです。一旦解凍した組織はほとんどのRNA分離法で簡単に処理できます。
製品名 サイズ 製品番号 価格RNAlater -ICE 25 mL AM7030 ¥18,800
進化した磁気ビーズを利用したRNA抽出キット
MagMax シリーズ磁気ビーズによる抽出はフィルター方式よりもRNAを効果的に結合できるので、サンプルサイズや実験間の差違に影響されることなく安定して高いRNA収量が得られます。Applied Biosystems™ MagMax™ 磁気ビーズテクノロジーは多サンプル、低濃度サンプルからのRNA抽出に極めて有効です。
キットを使用する際にはマグネティックスタンドが必要です。
製品名 サイズ 製品番号 価格MagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit
100 回 AM1840 ¥115,800
MagMAX-96 Blood RNA Isolation Kit 96 回 AM1837 ¥73,800
MagMAX-96 Total RNA Isolation Kit 96 回 AM1830 ¥66,700
MagMAX Viral RNA Isolation Kit 50 回 AM1939 ¥42,700
MagMAX-96 Viral RNA Isolation Kit 96 回 AM1836 ¥64,800
磁気ビーズを用いるRNA抽出キット用のマグネティックスタンドです。
製品名 サイズ 製品番号 価格Single Place Magnetic Stand 1 個 AM10026 ¥13,900
Magnetic Stand-96 1 個 AM10027 ¥67,100
96 well Magnetic-Ring Stand 1 個 AM10050 ¥139,000
RNA保存用溶液製品名 サイズ 製品番号 価格THE RNA Storage Solution 10 × 1 mL AM7000 ¥8,400
50 mL AM7001 ¥8,400
TE Buffer pH7.0 10 × 1 mL AM9860 ¥8,400
50 mL AM9861 ¥8,400
0.1 mM EDTA 50 mL AM9912 ¥8,400
12
RNA精製無しでリアルタイム解析へ
Cells-to-CT Kit シリーズApplied Biosystems™ Cells-to-CT
™ Kitシリーズは、培養細胞からのRNA精製無しでリアルタイム PCR解析を行なうことができます。データの精度はRNA精製を行なった場合と同等です。Cells-to-CT Kitシリーズには、遺伝子発現解析やsiRNAによる遺伝子制御、そしてmicroRNA
(miRNA)解析などに最適な製品が用意されています。
・ 最適化されたワークフロー gDNAの除去を含む細胞溶解試薬、逆転写酵素ミックス、そしてリアルタイム PCRマスターミックスの融合によるワークフロー
・ 高速 室温でDNase処理を含むサンプル調製が
「わずか7分」で完了
・ 簡便 培養細胞はチューブからでも培養プレートからでも細胞溶解が可能
・ 強力かつ正確 サンプルあたり10 ~ 100,000個の細胞数で遺伝子発現解析が可能。またこの結果は精製されたRNAと比較しても、その定量精度は同等
Cells-to-CT Kitシリーズ
遺伝子発現解析に
TaqMan Gene Expression Cells-to-CT Kit
TaqMan Fast Cells-to-CT Kit
Cells-to-CT 1-Step TaqMan Kit
Power SYBR Green Cells-to-CT Kit
Cells-to-CT 1-Step Power SYBR Green Kit
Fast SYBR Green Cells-to-CT Kit
微量サンプルからの遺伝子発現解析に
TaqMan PreAmp Cells-to-CT Kit
miRNA発現解析に
TaqMan MicroRNA Cells-to-CT Kit
Cel
ls-t
o-C
T C
Ts
Puri�ed RNA CTs
細胞溶解(7分) 逆転写反応 リアルタイム解析
2 Step
1 Step図5. シンプルなワークフロー
図6. Cells-to-CT Kitで調製したライセートを使ったリアルタイムPCRの再現性HeLa細胞から精製したトータル RNAと、Cells-to-CT Kitで調製したライセートをそれぞれ用いて、128種類のTaqMan Gene Expression AssaysをApplied Biosystems™ 7900HT リアルタイム PCRシステムで解析しました。Cells-to-CT Kitで調製したライセートから得られたCt値を精製済みトータル RNAを用いた同じアッセイでのCt値に対してプロットしました。
RNA精製を行なった場合と同等の性能が得られます
13
TaqMan アッセイ用
TaqMan Gene Expression Cells-to-CT KitApplied Biosystems™ TaqMan™ Gene Expression Cells-to-CT
™ Kitを用いると、時間が短縮でき、工程も極めて単純であるため、ハイスループットのアプリケーションも簡単に自動化できます。キットには、培養細胞を溶解し、RNAを保護しながらゲノム DNAを除去する試薬、cDNA合成のための逆転写用試薬、リアルタイム PCR解析用のTaqMan Gene Expression Master Mixがセットになっています。
製品名 サイズ * 製品番号 価格 TaqMan Gene Expression
Cells-to-CT Kit40 反応 4399002 ¥82,400
100 反応 AM1728 ¥162,500
400 反応 AM1729 ¥623,100
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
TaqMan Cells-to-CT Control Kit/Stop SolutionApplied Biosystems™ TaqMan™ Cells-to-CT
™ Control Kitは、TaqMan Gene Expression Cells-to-CT Kitと組み合わせることにより、以下のような目的に使用できます。・リアルタイムPCR反応の阻害物質の存在を確認・サンプルあたりの最適な細胞数を確認・反応標準化用の内在性コントロールとして使用可能
製品名 サイズ 製品番号 価格 TaqMan Cells-to-CT Control Kit 100 反応 4386995 ¥73,500
Cells-to-CT Stop Solution 1 mL 4402960 ¥35,700
TaqMan Fast Cells-to-CT KitApplied Biosystems™ TaqMan™ Fast Cells-to-CT
™ Kitは、RNA精製の必要が無く、さらにFast PCR 対応のリアルタイム PCRシステムと組み合わせることで、培養細胞からの迅速な遺伝子発現解析を可能にします。キットには細胞溶解試薬のほか、逆転写試薬とTaqMan Fast Universal PCR Master Mixが含まれています。
製品名 サイズ * 製品番号 価格 TaqMan Fast Cells-to-CT Kit 100 反応 4399003 ¥162,500
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
Cells-to-CT 1-Step TaqMan Kit TaqMan 1-Step RT-PCR マスターミックスが新しく製品ファミリーに加わりました。サンプルからRT-PCR 結果を得るまでのワークフローがかつてないほどに簡略化されます。Applied Biosystems™ Cells-to-CT
™ 1-Step TaqMan™ Kit は、シンプルなCells-to-CT 溶解技術を Fastモード対応の1ステップ RT-PCR マスターミックスと組み合わせることで、限られたサンプル操作回数で結果を得るまでの時間を短縮できます。
製品名 サイズ 製品番号 価格 Cells-to-CT 1-Step TaqMan Kit 20 回 A25605 ¥43,200
100 回 A25603 ¥170,600
400 回 A25602 ¥654,200
微量サンプル用
TaqMan PreAmp Cells-to-CT KitApplied Biosystems™ TaqMan™ PreAmp Cells-to-CT
™ Kitには、TaqMan Gene Expression Cells-to-CT Kit と同様、細胞溶解試薬、逆転写試薬、TaqMan Gene Expression Master Mixに加え、cDNAをプレ増幅することにより微量なサンプルを増やすことができるTaqMan PreAmp Master Mixが含まれています。
製品名 サイズ * 製品番号 価格 TaqMan PreAmp Cells-to-CT Kit 40 反応 4387299 ¥307,100
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
SYBR Green アッセイ用
Power SYBR Green / Fast SYBR Green Cells-to-CT KitApplied Biosystems™ SYBR™ Green Cells-to-CT
™ Kitsは、細胞ライセートから直接 SYBR Greenのリアルタイム発現解析ができるキットです。このキットには、細胞溶解、ゲノム DNAの除去、逆転写反応に必要な試薬が含まれています。また、リアルタイム PCR反応用試薬としてPower SYBR Green Master Mix または Fast SYBR Green Master Mix が含まれています。
Power SYBR Green Cells-to-CT Kit製品名 サイズ * 製品番号 価格
Power SYBR Green Cells-to-CT Kit 40 反応 4402953 ¥76,900
100 反応 4402954 ¥135,800
400 反応 4402955 ¥517,500
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
Fast SYBR Green Cells-to-CT Kit製品名 サイズ * 製品番号 価格
Fast SYBR Green Cells-to-CT Kit 100 反応 4402956 ¥135,800
400 反応 4402957 ¥523,000
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
SYBR Green Cells-to-CT Control Kit製品名 サイズ 製品番号 価格
SYBR Green Cells-to-CT Control Kit 100 反応 4402959 ¥41,500
Cells-to-CT 1-Step Power SYBR Green KitApplied Biosystems™ Cells-to-CT
™ 1-Step Power SYBR™ Green Kit は、RT-PCRステップに1ステップフォーマットを採用することにより、サンプルから結果を得るまでのワークフローを、感度および特異性を損なうことなく、大幅に簡略化することができるようになりました。このキットにはPower SYBR Green 1-Step RT-PCR マスターミックスが含まれています。
製品名 サイズ 製品番号 価格 Cells-to-CT 1-Step
Power SYBR Green Kit20 回 A25601 ¥40,300
100 回 A25600 ¥142,600
400 回 A25599 ¥543,300
miRNA 発現解析用
TaqMan MicroRNA Cells-to-CT KitApplied Biosystems™ TaqMan™ MicroRNA Cells-to-CT
™ Kitは、培養細胞から直接 miRNAの発現プロファイリングを可能にします。このキットはシンプルで完成されたワークフローにより、少数のサンプルからでもmiRNA発現解析が行なえ、また簡単に自動化・ハイスループットアプリケーションに組み込むこともできます。
製品名 サイズ * 製品番号 価格 TaqMan MicroRNA Cells-to-CT Kit 100 反応 4391848 ¥211,400
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
14
単一細胞からの発現解析に
Ambion Single Cell-to-CT Kit多くの細胞からの遺伝子発現結果では、単一細胞内に生じる微妙で重要な変化までの探求には限界があります。生物システムの複雑さをより理解するためには、単一細胞解析を行なう方法があります。Invitrogen™ Ambion™ Single Cell-to-CT™ Kitは、1 ~ 10細胞からRNA
精製をせずにそのまま遺伝子発現解析を行うことができます。各キットは、5 ステップだけで完了できる単純なワークフローに最適化されたサンプル調製、逆転写、Pre-Ampli�cation およびリアルタイム PCR用試薬が入っています。
単一細胞からのRNA調製に
Ambion Single Cell Lysis Kit単一細胞解析により、ライフサイエンス研究はさらに発展する可能性があります。しかし、単一細胞に含まれる微量なRNAの検出と定量を行うことは重要な課題です。Invitrogen™ Ambion™ Single Cell Lysis Kit は、単一細胞からの信頼できるRNA 調製を行うことができます。
Cell-to-CT Kit
・ 単一細胞からのリアルタイムPCR用に最適化されたワークフロー・ Single Cell-to-CT Kitの優れた感度と再現性
• 単一細胞からのRNA 調製が可能• サンプル ロスなしにより高い感度が得られる• さまざまな酵素反応に適合
また、従来の精製法やボイル法と比較し、単一細胞解析の感度と再現性に優れています。
28
1 CellEquivalent
Single Cells 100 Cells
CT
26
24
22
20
20.4 21.6
13.6
18
16
14
12
・Preamplifiedした産物を 1:20で希釈しリアルタイム PCRをおこないます。5
・11µlの PreAmp Mixを加えます。
・95℃で 10分の後、95℃で 15秒、60℃で 4分でPCRをおこないます。
4・4-5µlの RT Mixを加えます。
・25℃で 10分、42℃で 60分、85℃で 5分インキュベートします。
3・1µLの Stop Solutionにを加えます。
・室温で 2分インキュベートします。2
・10µLの Single Cell Solutionに1‐10細胞を加えます。
・室温で 5分インキュベートします。1
T
製品名 サイズ * 製品番号 価格 Ambion Single Cell-to-CT Kit 50 反応 4458237 ¥189,200
400 反応 4458236 ¥1,090,400
Ambion Single Cell Lysis Kit 100 反応 4458235 ¥82,400
* スタートサンプル数(細胞溶解反応数)として表示
図7. Single Cell-to-CT Kitの感度と再現性100細胞サンプルコントロールと比較すると、単一細胞相当のサンプルでは、理想的な期待される直線性と感度が得られました(6.8のCT差)。また個々の単一細胞は固有の細胞多様性と生物学的変化により大きな変動性を示します。
図8. 従来の精製法やボイル法との比較10細胞をサンプルとし、以下の方法で細胞を調製しました。1. Single Cell Lysis Bufferで溶解(25℃で5分)。2. PBS中で凍結 /溶解を5回処理。3. PBSまたはRTバッファー中でボイル(95℃で10分)。各ライセートを逆転写でcDNAを調製し、さらに14サイクルのPre-Ampli�cation処理を行い、B2M、GAPDH、HPRT1、TGFB1のアッセイを行いました。生物学的レプリケートを5個設定し、平均のCt値を示しています。
DNAメチル化解析用
Cells-to-CpG Bisulfite Conversion KitApplied Biosystems™ Cells-to-CpG™ Bisul�te Conversion Kitは、DNA
メチル化解析のためのバイサルファイト処理のワークフローを最適化し、迅速な処理を可能にします。細胞、組織、血液、FFPEなど様々なサンプルに対応し、ゲノム DNA精製不要で、サンプル内のシトシンを直接変換します。変換率のモニタリングを容易にするコントロールにより定量性を向上し、弊社各種プラットフォームでの解析を検証済みです。エピジェネティックな遺伝子制御に関わるメチル化シトシンの遺伝子座特異的、またはゲノムワイドな検出にお役立ていただけます。
製品名 サイズ 製品番号 価格 Cells-to-CpG Bisulfite Conversion
Kit 50 反応 4445555 ¥36,000
2 × 96 反応 4445554 ¥62,000
Cells-to-CpG Bisulfite Conversion & Quantitation Control Kit
20 反応 4445553 ¥28,500
Cells-to-CpG Methylated and Unmethylated gDNA Control Kit
50 µL 4445552 ¥42,000
・Preamplifiedした産物を 1:20で希釈しリアルタイム PCRをおこないます。5
・11µlの PreAmp Mixを加えます。
・95℃で 10分の後、95℃で 15秒、60℃で 4分でPCRをおこないます。
4・4-5µlの RT Mixを加えます。
・25℃で 10分、42℃で 60分、85℃で 5分インキュベートします。
3・1µLの Stop Solutionにを加えます。
・室温で 2分インキュベートします。2
・10µLの Single Cell Solutionに1‐10細胞を加えます。
・室温で 5分インキュベートします。1
T
図9. 2回のピペッティングステップでサンプル調製
15
TaqMan RNA-to-CT 1-Step KitApplied Biosystems™ TaqMan™ RNA-to-CT™ 1-Step Kitは、高い検出精度と1ステッププロトコールの操作性を融合させたハイパフォーマンスキットです。逆転写反応からTaqMan リアルタイム反応までのすべての工程を1本のチューブで行うことができます。1ステッププロトコールは操作の簡便性だけでなく、クロスコンタミネーションのリスクや人為的エラーを低減します。新しい試薬カクテルの採用により、TaqMan アッセイの検出精度をそのままに、幅広いダイナミックレンジでの検出と様々なアッセイで安定したRNAの定量結果を提供します。TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix(21ページ)もあわせてご参照ください。
• 1ステッププロトコールによる操作性• 広いダイナミックレンジ• 信頼のパフォーマンス• ATおよびGCリッチに対応する安定性• TaqMan Gene Expression Assays(24ページ)に対応
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit, 1 mL
40 反応 4392653 ¥28,200
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit, 5 mL
200 反応 4392938 ¥85,400
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit, 5 mL × 10
2,000 反応 4392656 ¥773,000
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kitプロトコール
1 冊 4393463 無償
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kitクイックリファレンスカード
1 冊 4393464 無償
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step KitApplied Biosystems™ Power SYBR™ Green RNA-to-CT™ 1-Step Kit
は、新酵素カクテルの採用で優れた検出感度と操作性を両立しました。逆転写反応からPCR増幅までを1本のチューブで行なうことができ、分注誤差とコンタミネーションリスクを低減します。また、SYBR Greenアッセイでの検出で共通の懸念材料であったプライマーダイマーによる偽陽性の問題を極力回避することができ、高いデータ精度と低発現遺伝子や微量サンプルからの検出に効果を発揮します。
• 新試薬カクテルによる検出能の向上• 操作性の高さと人為的エラーの低減• 広いダイナミックレンジでのパフォーマンス
製品名 サイズ 製品番号 価格Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit, 1mL
40 反応 4391178 ¥28,200
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit, 5mL
200 反応 4389986 ¥75,400
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit プロトコール
1 冊 4391003 無償
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit クイックリファレンスカード
1 冊 4391112 無償
∆R
n
Cycle2
10
1
0.1
0.014 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40
Der
ivat
ive
Rep
orte
r (-
Rn)
3.5
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
Temperature (ºC)65.0 70.0 75.0 80.0 85.0 90.0 95.0
図10. Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kitを使用したGAPDHの増幅曲線と解離曲線RNAは培養細胞 BOSC23より抽出を行い、Applied Biosystems™ StepOnePlus™ リアルタイム PCR システムを使用して3重測定を行いました。
1ステップRT-PCRキット
16
cDNA合成cDNA合成
RNA
VILO
RNA
高次構造により逆転写が停止
ヘルパータンパク質等により高次構造がほぐれて、cDNA合成
従来
30000
25000
20000
15000
10000
cpm
9,310
25,687
2,9655000
0S製品
他の製品と比較して最大のダイナミックレンジ
Cycle Quantity
2.5μg
△RN
C1
VILO A製品 リニアリティ
1pg 1μg 2μg
VILO
A製品
D製品
B製品
C製品
1pg~ 2.5μgの広範囲で高い直線性
逆転写試薬
リアルタイム PCR用の逆転写酵素としてベストチョイス
SuperScript VILO シリーズInvitrogen™ SuperScript™ VILO™ シリーズは、Variable Input Linear
Output(広範囲なサンプル量に対し、リニアな結果が得られること)を目的として最適化された試薬で、実績の多いSuperScript Ⅲ逆転写酵素(RT)システムのバッファー系を改良しました。より安定した定量 PCR
の結果を得るには、細胞内の正確なmRNAを反映したcDNA合成を行なうことが重要です。この製品を使用することで、遺伝子産物の低発現もしくは高発現が起因となる増幅バイアスを低減し、広範囲のサンプル濃度でも優れたリニアリティのあるデータが得られます。さらに高次構造 RNAの逆転写を可能にし、一貫性のある結果をもたらします。SuperScript VILO Master Mixは、1チューブフォーマットで手間やコンタミのリスクを最小限にしたマスターミックスフォーマットです。
• 逆転写困難な高次構造のRNAテンプレートもcDNA合成可能• RNA濃度が高い(からみあって逆転写困難な)場合も逆転写可能• 変性ステップ不要で、実験の手間を省略
SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit製品名 サイズ 製品番号 価格SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit 50 反応 11754050 ¥37,600
250 反応 11754250 ¥159,400
SuperScript VILO Master Mix製品名 サイズ 製品番号 価格SuperScript VILO Master Mix 50 反応 11755050 ¥43,400
250 反応 11755250 ¥182,100
500 反応 11755500 ¥330,100
cDNA合成cDNA合成
RNA
VILO
RNA
高次構造により逆転写が停止
ヘルパータンパク質等により高次構造がほぐれて、cDNA合成
従来
30000
25000
20000
15000
10000
cpm
9,310
25,687
2,9655000
0S製品
他の製品と比較して最大のダイナミックレンジ
Cycle Quantity
2.5μg
△RN
C1
VILO A製品 リニアリティ
1pg 1μg 2μg
VILO
A製品
D製品
B製品
C製品
1pg~ 2.5μgの広範囲で高い直線性
製品名 High Capacity cDNA Reverse Transcriptase Kit
High Capacity RNA-to-cDNA Kit
SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit
SuperScript VILO Master Mix
逆転写酵素 MultiScribe MultiScribe Superscript III Superscript III最適反応温度 37°C 37°C 42°C 42°Cサンプルインプット量(Total RNA)
20 ng-2 µg 20 ng-2 µg 1 pg-2.5 µg 1 pg-2.5 µg
RNase H活性除去 - - ☆☆☆ ☆☆☆逆転写困難なサンプルへの対応 ☆ ☆ ☆☆☆ ☆☆☆
キットのフォーマット 5 チューブ 2 チューブ 2 チューブ 1 チューブマスターミックス
図13. 広い濃度範囲で高い直線性合成したcDNA量を変えて定量 PCRを行い、ダイナミックレンジを測定しました。ダイナミックレンジ測定条件: TaqMan法ターゲット遺伝子:TfR Target
図11. 高いcDNA合成効率32P-dCTP取り込みによるcDNA合成効率をS製品とA製品、SuperScript VILO(VILO)で比較しました。A製品と比較して約9倍の取り込み効率を示しました。
図12. RNAの高次構造をほぐしてcDNAを合成 VILOのヘルパータンパク質とバッファーがRNA高次構造をほぐしてくれるため、非常に効率よくcDNAを合成することができます。
VILO の卓越したリニアリティ
SuperScript VILO と他の製品を比較すると、定量 PCR反応への影響が最小で、合成したcDNAはその後の定量 PCR反応への阻害が起こりません。そのため、従来製品よりも大量のテンプレートを加えることができます。
表4. 逆転写酵素セレクションガイド
他の製品と比較して最大のダイナミックレンジ
1pg ~ 2.5µgの広範囲で高い直線性
17
High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit
製品名 サイズ * 製品番号 価格High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit
200 反応 4368814 ¥33,300
1,000 反応 4368813 ¥140,600
High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit, with RNase Inhibitor
200 反応 4374966 ¥41,700
1,000 反応 4374967 ¥188,800
High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit プロトコール
1 冊 4375575 無償
RNase Inhibitor, 20 units/µL 100 反応 N8080119 ¥14,400
*20 µLの反応系で計算
TaqMan Reverse Transcriation Reagents
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Reverse Transcription Reagents
200 反応 N8080234 ¥64,600
10-Pack, TaqMan Reverse Transcription Reagents
2,000 反応 4304134 ¥561,900
その他の酵素 /プライマー /試薬製品名 サイズ 製品番号 価格MultiScribe Reverse Transcriptase 5,000 units 4311235 ¥13,700
RNase Inhibitor, 20 units/µL 2,000 units N8080119 ¥14,400
Random Hexamers, 5 nmoles 0.1 mL N8080127 ¥12,500
Oligo d(T)16 Primers, 5 nmoles 0.1 mL N8080128 ¥12,500
GeneAmp dNTP Blend, 10 mM 1 mL N8080260 ¥11,200
GeneAmp dNTP Blend, 12.5 mM with dUTP
100 反応 N8080270 ¥17,100
AmpErase Uracil N-glycosylase(UNG)
100 units N8080096 ¥27,900
20 % Glycerol Solution, Molecular Biology Grade
100 mL 402929 ¥13,500
TaqMan Control Total RNA(Human)50 ng/µL
100 µL 4307281 ¥15,800
TaqMan Control Genomic DNA(Human)10 ng/µL, 2本
100 µL 4312660 ¥13,500
製品名 サイズ * 製品番号 価格High Capacity RNA-to-cDNA Kit 50 反応 4387406 ¥22,300
High Capacity RNA-to-cDNA Kitプロトコール
1 冊 4387951 無償
High Capacity RNA-to-cDNA Kitクイックリファレンスカード
1 冊 4392339 無償
*20 µLの反応系で計算
High Capacity RNA-to-cDNA KitApplied Biosystems™ High Capacity RNA-to-cDNA™ Kitは、リアルタイム PCRによる遺伝子解析に最適なcDNAプールを生成するために最適化されています。逆転写反応の段階でRNA存在比によるバイアスがかかってしまっては、リアルタイム PCRによる定量自身の信頼性が失われます。High Capacity RNA-to-cDNA Kitは、インプットしたRNAを全て逆転写し、忠実なcDNAプールを合成します。
• 試薬を2本に集約し、操作を簡略化• 逆転写反応の時間が30 ~ 60分に短縮• 最大2µgのRNAを一度に逆転写• 2ステップの定量RT-PCRに最適
18
TaqMan Fast マスターミックス
驚異のスピードとパフォーマンスの両立
TaqMan Fast Advanced Master Mix現在の標準的なマスターミックス以上のパフォーマンスを保持し、かつ反応時間は40分以内になるようデザインされた試薬です。
• Fastモード搭載のリアルタイムPCRシステムだけでなく、スタンダードモード搭載システムでも、専用のFast サイクルを使用して高速化が可能
• AmpliTaq Fast DNA Polymeraseを採用。サンプル調製後、室温で最大72時間安定
• 外因性、内因性コントロールとのデュプレックスPCRに最適化することで、さらに高い信頼性を実現
• TaqMan AssaysおよびTaqMan Arrayで検証済
スタンダードモード搭載の装置でもFast が可能
Fastおよびスタンダードモード搭載のシステムで使用できるように最適化されています。スタンダードモード搭載のシステムでもFastで高いパフォーマンス結果が得られます。
卓越したパフォーマンス
標準的なマスターミックスと同等以上のパフォーマンスを提供します。既成のマスターミックスを指標にして、検出感度、正確性、ダイナミックレンジ、特異性において卓越したパフォーマンスを提供します。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Fast Advanced Master Mix, 1 mL
100 反応 4444556 ¥15,800
TaqMan Fast Advanced Master Mix, 5 mL
500 反応 4444557 ¥70,900
TaqMan Fast Advanced Master Mix, 2 × 5 mL
1,000 反応 4444963 ¥137,100
TaqMan Fast Advanced Master Mix, 5 × 5 mL
2,500 反応 4444964 ¥331,500
TaqMan Fast Advanced Master Mix, 10 × 5 mL
5,000 反応 4444965 ¥640,400
TaqMan Fast Advanced Master Mix, 50 mL
5,000 反応 4444558 ¥627,000
*20 µLの反応系として計算
TaqMan Fast Universal PCR Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ Fast Universal PCR Master Mixは、TaqMan Fast PCR専用にデザインされたマスターミックス試薬です。Fast PCR対応モデルで使用することができます。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Fast Universal PCR Master Mix(2X), No AmpErase UNG
250 反応 4352042 ¥36,000
2-Pack, TaqMan Fast Universal PCR Master Mix(2X), No AmpErase UNG
500 反応 4366072 ¥69,700
5-Pack, TaqMan Fast Universal PCR Master Mix(2X), No AmpErase UNG
1,250 反応 4366073 ¥173,100
10-Pack, TaqMan Fast Universal PCR Master Mix(2X), No AmpErase UNG
2,500 反応 4364103 ¥330,400
TaqMan Fast Universal PCR Master Mix 50 mL
5,000 反応 4367846 ¥595,500
TaqMan Fast Universal PCR Master Mix プロトコール
1 冊 4351891 無償
*20 µLの反応系として計算
Fastモード対応マスターミックスをご利用いただくと、リアルタイム定量解析を迅速に行うことができます。通常のリアルタイム PCRでは、標準的な40サイクルのランに約1時間45分を要しますが、Fastモード対応マスターミックスをご利用いただくと、Fast対応モデルでは約40分、そしてApplied Biosystems™ TaqMan™ Fast Advanced Master Mixをご利用いただくと、スタンダードモード対応モデルでも約55分で40サイクルのランを行うことができます。Fastモード対応モデルは専用ブロックが搭載されており、Fast PCRプログラムおよびFast専用プレートを用いた反応を行うことによって最も迅速にFast PCRを行うことができます。
Cycle Number
ΔR
n
10
1
0.1
0.0112 14 16 18 20 22 24 26 28 30
19
全てのアプリケーションを、この1本で
TaqMan Universal Master Mix IIApplied Biosystems™ TaqMan™ Universal Master Mix IIは、広いダイナミックレンジにわたって高い感度と精度を持ち、低コピー数のターゲットの検出にも対応し、また様々なサンプル間のわずかな差も正確に定量することができます。またこの試薬は、遺伝子発現定量、microRNA(miRNA)定量、SNPやCNVのジェノタイピングなど、様々なアプリケーションに対応しています。
・ リアルタイムPCR溶液を調製してから、室温で24時間安定・ 遺伝子発現定量、 SNPジェノタイピングそしてmiRNAの TaqMan
Assays に対応・ TaqMan AssaysのPCR条件を変更する必要なし
・ UNGの有無で2タイプのマスターミックスを用意
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 1 mL
40 反応 4440042 ¥15,800
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 5 mL
200 反応 4440038 ¥70,900
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 2 × 5 mL
400 反応 4440044 ¥137,100
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 5 × 5 mL
1,000 反応 4440045 ¥331,500
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 10 × 5 mL
2,000 反応 4440046 ¥640,400
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG 50 mL
2,000 反応 4440039 ¥627,000
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 1 mL
40 反応 4440043 ¥15,800
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 5 mL
200 反応 4440040 ¥65,200
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 2 × 5 mL
400 反応 4440047 ¥125,900
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 5 × 5 mL
1,000 反応 4440048 ¥303,400
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 10 × 5 mL
2,000 反応 4440049 ¥573,000
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG 50 mL
2,000 反応 4440041 ¥561,800
*50 µLの反応系として計算
遺伝子発現解析での検出感度と広いダイナミックレンジ
Applied Biosystems™ TaqMan™ Universal Master Mix IIは、遺伝子発現レベルでの広いダイナミックレンジでターゲットを定量解析できるように設計されています。そのため1回の実験で発現量の多いものと少ないものを同時に定量解析することが可能です。下図に示すように、シングルコピーであるRNase P遺伝子をターゲットとして、ヒトゲノミックDNAを段階的に希釈し、TaqMan Universal Master
Mix IIで定量解析を行ったところ、広範囲で優れたPCR増幅効率の直線性が観察されました。
図14. 広範囲にわたるリアルタイム PCRでの検出ダイナミックレンジ
ハイスループットに対応する室温での安定性
PCR溶液を調製した後に室温で24時間放置しても、微細な量的差異を見分けることができるように、高品質な試薬を使用して調製しております。これはハイスループット分注システムなどを使用して、リアルタイム PCR
の反応をするまでに時間がかかる場合は特に有用です。TaqMan Universal Master Mix IIで調製したリアルタイム PCR溶液の安定性の実験として、リアルタイム PCR溶液調製直後と30℃で24時間保持したものを比較しました。
図15. サンプル調製後の溶液を室温で24時間放置したときの溶液安定性と
そのパフォーマンスの比較
TaqMan マスターミックス
20
TaqMan マスターミックス
遺伝子発現定量に最適
TaqMan Gene Expression Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ Gene Expression Master Mixは、リアルタイム PCR遺伝子発現定量用に最適化されたマスターミックスです。GCやAT含量の高いテンプレート、デュプレックス PCRにおいても高いパフォーマンスが得られます。またTaqMan Universal PCR Master Mixのプロトコールをそのまま使用することができます。
・ 従来のマスターミックスよりも広いダイナミックレンジと優れた定量性を確立
・ マルチプレックス反応における高い安定性
・ 低コピーサンプルからの安定した定量性・試薬分注後72時間室温で安定
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Gene Expression Master Mix, 1 mL
40 反応 4370048 ¥15,800
TaqMan Gene Expression Master Mix, 5 mL
200 反応 4369016 ¥70,900
TaqMan Gene Expression Master Mix, 2 × 5 mL
400 反応 4369514 ¥137,100
TaqMan Gene Expression Master Mix, 5 × 5 mL
1,000 反応 4369510 ¥331,500
TaqMan Gene Expression Master Mix, 10 × 5 mL
2,000 反応 4369542 ¥640,400
TaqMan Gene Expression Master Mix, 50 mL
2,000 反応 4370074 ¥627,000
TaqMan Gene Expression Master Mix プロトコール
1 冊 4371135 無償
TaqMan Gene Expression Master Mix クイックリファレンスカード
1 冊 4371134 無償
*50 µLの反応系として計算
RNA実験やPCR実験のためのWater
Nuclease free Water製品名 サイズ 製品番号 価格Nuclease-free Water 500 mL AM9930 ¥14,000
1,000 mL AM9932 ¥23,300
10 × 50 mL AM9937 ¥17,600
100 mL AM9938 ¥6,000
5 × 100 mL AM9939 ¥20,900
TaqMan Universal PCR Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ Universal
PCR Master Mixは、TaqMan プローブを使用した5'ヌクレアーゼアッセイのPCRアプリケーションに必要なすべての試薬が含まれています。この試薬を使用することで、サンプル調製を簡略化することが可能です。Applied Biosystems™ AmpliTaq Gold™ DNA Polymeraseを用いており、定量的解析に優れたパフォーマンスを提供します。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Universal PCR Master Mix 200 反応 4304437 ¥76,400
2-Pack, TaqMan Universal PCR Master Mix・4304437 × 2
400 反応 4364338 ¥140,500
5-Pack, TaqMan Universal PCR Master Mix・4304437× 5
1,000 反応 4364340 ¥342,800
10-Pack, TaqMan Universal PCR Master Mix・4304437 × 10
2,000 反応 4305719 ¥674,100
TaqMan Universal PCR Master Mix, 10-Pack・5 mL × 10
2,000 反応 4318157 ¥674,100
TaqMan Universal PCR Master Mix, 50 mL
2,000 反応 4326708 ¥662,900
TaqMan Universal PCR Master Mix プロトコール
1 冊 4304449 無償
*50 µLの反応系として計算
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNGApplied Biosystems™ TaqMan™ Universal
PCR Master Mix, No AmpErase UNG
は、 AmpErase UNG を用いないTaqMan
プローブによる5'ヌクレアーゼアッセイのPCRアプリケーションに必要なすべての試薬が含まれています。この試薬を使用することで、サンプル調製を簡略化することが可能です。AmpliTaq Gold DNA Polymeraseを用いており、定量的解析に最適なパフォーマンスを提供します。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG
200 反応 4324018 ¥70,900
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG, 2-Pack
400 反応 4364341 ¥130,400
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG, 5-Pack
1,000 反応 4364343 ¥312,400
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG, 10-Pack
2,000 反応 4324020 ¥606,700
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG, 50 mL
2,000 反応 4326614 ¥595,500
TaqMan Universal PCR Master Mix プロトコール
1 冊 4304449 無償
*50 µLの反応系として計算
21
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix, 1 mL
200 反応 4444432 ¥55,800
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix, 5 × 1 mL
1,000 反応 4444434 ¥170,800
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix, 10 mL
2,000 反応 4444436 ¥331,500
*20 µLの反応系として計算
PCR阻害物質存在下でも信頼の定量結果を
TaqMan Fast Virus 1-Step Master MixPCR阻害物質を含有するようなサンプルからでも、RNAおよびDNAウイルスの信頼ある定量結果を提供します。
• 1ステップの4倍濃度のマスターミックスで、RNA / DNAを高感度に検出
• 血液などに含まれるPCR阻害物質にも対処できる新しい試薬組成• Fast リアルタイムRT-PCRに対応• すべての弊社リアルタイムPCR装置において、同じプロトコールを採用
• 単一ターゲットのみならず、コントロールを含むマルチプレックスにも対応
PCR阻害物質存在下でも安定した定量的検出
ウイルス検出用サンプルには血液や土壌、組織などが含まれるケースが多々あります。Applied Biosystems™ TaqMan™ Fast Virus 1-Step
Master Mixに含まれるバッファーおよび添加剤は、これら狭雑物の存在するサンプルにおいても、確かな結果を提供できるように最適化されています。
Fastリアルタイム PCRに対応
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mixは、結果を得るまでの時間を最短化することが可能であるだけでなく、リアルタイム PCRシステムを効率的に利用することも可能です。4倍濃縮の組成により、反応液量の少容量化が可能になり、Fastプロトコールにも対応することができます。そして検出感度を維持したまま高速化し、処理能力を上げることができます。
微量サンプルを用いた発現解析に
TaqMan PreAmp Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ PreAmp Master Mixは、サンプルに増幅バイアスを及ぼすことなく少量のcDNAをPrePCRで増幅することにより、微量なサンプルから解析できるターゲット数に増やすことができます。
PrePCRはターゲットとするTaqMan Gene Expression Assays(最大100種類の遺伝子)を用いて行ない、1ng程度の微量なcDNAサンプルから最大200反応のリアルタイムPCR用のサンプルを増幅します。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan PreAmp Master Mix 40 反応 4391128 ¥139,400
TaqMan PreAmp Master Mix Kit 1 式 4384267 ¥177,600
・PreAmp Master Mix (4391128) ・TaqMan Gene Expression Master Mix, 5 mL (4369016)
TaqMan Reagents Starter Kit
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Reagents Starter Kit 1 Kit 4352405 ¥39,400
・TaqMan Universal Master Mix, No UNG(1.25 mL)・TaqMan Gene Expression Assay, Eukaryotic 18S rRNA, 20X(0.3 mL)・Human Raji cDNA, 25 ng/µL(0.05 mL)
0 20 40 60 80 100 120 140
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix
TaqMan EZ RT-PCR Core Reagents
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit
一般的な2ステップ反応
リアルタイムPCRの所要時間(分)
図16. 当社の4種のキットにおける所要時間の比較FastサイクルプロトコールができるTaqMan Fast Virus 1-Step Master Mixを使用すれば、スタンダードサイクルの試薬と比較して、同一時間内に倍のサンプルを処理できます。さらに他の1ステップキットと比較した場合でも、1本のチューブで提供されるTaqMan Fast Virus 1-Step Master Mixは、分注誤差と作業時間を最小化できます。
22
TaqMan Multiplex Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ Multiplex Master Mixは、Fast PCR
プロトコールに対応し、最大4ターゲットを増幅出来るように最適化されています。シングルプレックス反応およびマルチプレックス反応において再現性の高い結果が得られます。TaqMan Multiplex Master Mixには、AmpliTaq Fast DNA Polymerase、Uracil-N Glycosylase(UNG)、dUTPを含むdNTP、MUSTANG PURPLE(パッシブリファレンス)、および最適化されたバッファーコンポーネントが含まれます。2X濃度で提供しています。
• マルチプレックス反応に最適化-4種類の遺伝子発現アッセイ、 または2か所のSNPのジェノタイピングアッセイ
• トップレベルの性能-優れた感度、精度、ダイナミックレンジ、 および特異性を実現
• どの装置でも反応時間の短縮-FastタイプのPCR装置だけでなく、StandardタイプのPCR装置でもFast PCRが可能
• UNGによるキャリーオーバーコンタミネーションの防止 -熱感受性の高いUDGを使用
マルチプレックスマスターミックス製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Multiplex Master Mix 1 mL 4461881 ¥22,100
5 mL 4461882 ¥92,100
2 x 5 mL 4461884 ¥171,400
5 x 5 mL 4484262 ¥397,800
10 x 5 mL 4484263 ¥704,500
50 mL 4486295 ¥689,700
コントロールキット製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan GAPDH Assay, JUN dye/QSY probe
250 reactions 4485712 ¥45,000
TaqMan GAPDH Assay, JUN dye/QSY probe, primer-limited
250 reactions 4485713 ¥45,000
TaqMan RNase P Assay, ABY dye/QSY probe
250 reactions 4485714 ¥45,000
TaqMan RNase P Assay, ABY dye/QSY probe, primer-limited
250 reactions 4485715 ¥45,000
TaqMan QSYプローブ製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan QSYプローブ 6,000 pmol 4482777 ¥58,500
20,000 pmol 4482778 ¥110,200
50,000 pmol 4482779 ¥153,300
QSY プローブのご注文はこちらから: www.lifetechnologies.com/taqman-ord
図17. 遺伝子発現定量におけるシングルプレックスとマルチプレックスの比較(A)EGFRアッセイ、FAMラベル、(B) BRCA1 アッセイ、VICラベル、(C) ESR1アッセイ、JUNラベル、(D) RNaseP アッセイ、ABYラベル。QuantStudio 7 リアルタイムPCRシステムで、TaqMan Multiplex Master Mix を使用して増幅しました。コントロールcDNA を10 µL あたり 20,000 pg ~ 2 pg の10倍希釈系列を調製し、4つのシングルプレックス(青)と4-plex(赤)で実施した結果、いずれも希釈倍率に応じた増幅曲線を得ることができました。希釈系列のCt値の平均(線グラフ)と標準偏差(棒グラフ)をそれぞれひとつのグラフに表示し、シングルプレックスと4-plexの結果がほぼ一致していることを確認しました。PCR 効率は、EGFRでシングルプレックスが96.09%に対し4-plexが96.39%、BRCA1でシングルプレックスが93.56%に対し4-plexが94.93%、ESR1でシングルプレックスが97.13%に対し4-plexが95.81%、RNasePでシングルプレックスが96.91%に対し4-plexが98.1%でした。
AAmplification plot
△Rn
Cycle
1
2 10 20 306 14 24 3418 28 38 404 12 22 3216 26 368
2
3
4
5
6
B
Cycle2 10 20 306 14 24 3418 28 38 404 12 22 3216 26 368
3.5
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
△Rn
Amplification plot
C
Cycle2 10 20 306 14 24 3418 28 38 404 12 22 3216 26 368
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
△Rn
Amplification plot
D
Cycle2 10 20 306 14 24 3418 28 38 404 12 22 3216 26 368
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
△Rn
Amplification plot
TaqMan QSYプローブとは?新しいApplied Biosystems TaqMan QSYプローブは最大4色までのマルチプレックスアッセイに最適な新しいクエンチャーを使用したプローブです。同一サンプルから複数ターゲットを同時に検出する際、ターゲット数が 3種以上になる場合はMGBプローブよりもQSYプローブをお勧めします。
TaqMan マスターミックス
23
SYBR Green マスターミックス
Power SYBR Green PCR Master MixApplied Biosystems™ Power SYBR™ Green PCR Master Mix は、低コピー(2コピー)のターゲット遺伝子を検出でき、DNA、cDNA(RNA)を広いダイナミックレンジで高感度に定量できます。新たに最適化された組成により、検出感度が大きく向上しました。反応のばらつきを最小限に抑え、安定した、一貫性のある結果を得ることができます。サンプルとPCRプライマーを除く、SYBR Greenリアルタイム PCR反応に必要なすべての試薬を含む、使いやすい2×プレミックス溶液です。
製品名 サイズ * 製品番号 価格Power SYBR Green PCR Master Mix, 1 mL
40 反応 4368577 ¥9,500
Power SYBR Green PCR Master Mix, 5 mL
200 反応 4367659 ¥36,800
2-Pack, Power SYBR Green PCR Master Mix, 2 × 5 mL
400 反応 4368706 ¥71,400
5-Pack, Power SYBR Green PCR Master Mix, 5 × 5 mL
1,000 反応 4368702 ¥173,300
10-Pack, Power SYBR Green PCR Master Mix, 10 × 5 mL
2,000 反応 4368708 ¥336,000
Power SYBR Green PCR Master Mix, 50 mL
2,000 反応 4367660 ¥315,000
Power SYBR Green PCR Master Mixプロトコール
1 冊 4367218 無償
*50 µLの反応系として計算
SYBR Green PCR Master MixApplied Biosystems™ SYBR™ Green PCR Master Mixは、SYBR
Green PCRに必要な試薬が2×濃度のプレミックスになっています。
製品名 サイズ * 製品番号 価格SYBR Green PCR Master Mix, 1 mL 40 反応 4344463 ¥10,500
SYBR Green PCR Master Mix, 5 mL 200 反応 4309155 ¥51,500
SYBR Green PCR Master Mix, 50 mL 2,000 反応 4334973 ¥446,300
10-Pack, SYBR Green PCR Master Mix, 10 × 5 mL
2,000 反応 4312704 ¥462,000
SYBR Green PCR Master Mix プロトコール
1 冊 4310251 無償
*50 µLの反応系として計算
図18. Human gDNAから増幅を行ったβ-actin遺伝子の増幅曲線と検量線
5 10 15 20 25 30 35 40
Cycle Number
1.0e+002
1.0e+001
1.0e+000
1.0e-001
1.0e-002
Delta Rn vs Cycle
Del
ta R
n
50 ng 5 ng 500 pg 50 pg 5 pg
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0
Log Concentration
34
32
30
28
26
24
22
20
18
16
Standard Curve
CT
Slope = -3.28
R2 = 0.997
5 pg
50 ng
50 pg
5 ng
500 pg
Fast SYBR Green Master MixApplied Biosystems™ Fast SYBR™ Green Master Mixは、Fast PCR
用マスターミックスです。Fast PCR対応モデルでお使いいただけます。マスターミックスには新しい酵素が採用されており、高い特異性を示すと同時にプライマーダイマーや非特異的なPCR増幅を最小限度に低減するようにデザインされています。
製品名 サイズ * 製品番号 価格Fast SYBR Green Master Mix, 1 mL 100 反応 4385610 ¥9,500
Fast SYBR Green Master Mix, 5 mL 500 反応 4385612 ¥36,800
2-Pack, Fast SYBR Green Master Mix, 2 × 5 mL
1,000 反応 4385616 ¥71,400
5-Pack, Fast SYBR Green Master Mix, 5 × 5 mL
2,500 反応 4385617 ¥173,300
10-Pack, Fast SYBR Green Master Mix, 10 × 5 mL
5,000 反応 4385618 ¥336,000
Fast SYBR Green Master Mix, 50 mL 5,000 反応 4385614 ¥315,000
Fast SYBR Green Master Mixクイックリファレンスカード
1 冊 4385371 無償
Fast SYBR Green Master Mixプロトコール
1 冊 4385372 無償
*20 µLの反応系として
ランタイム
図19. 各システムでFast SYBR Master Mixを用いたときのランタイム比較
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TaqMan Gene Expression AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ Gene Expression Assaysは、リアルタイム PCR遺伝子発現定量を簡単な操作で行なっていただけるデザイン済みプライマー &プローブセットです。数多くのアッセイ構築で培われたノウハウと経験を活用した独自のアルゴリズムにより設計されており、ヒト、マウス、ラット、イヌ、シロイヌナズナ、ショウジョウバエ、線虫、アカゲザル、ゼブラフィッシュ、ニワトリ、ウサギ、ウシ、ブタ等に対応する合計130万種類以上のアッセイが用意されています。幅広いラインナップを持ち、Exon単位での検出が可能なので、スプライスバリアント解析やRNAi研究にも威力を発揮します。
FAM ラベル製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Gene Expression Assays, Inventoried
250 反応 4331182 ¥33,500
TaqMan Gene Expression Assays, Small, Made-to-Order
360 反応 4351372 ¥50,700
TaqMan Gene Expression Assays, Medium, Made-to-Order
750 反応 4351370 ¥84,000
TaqMan Gene Expression Assays, Large, Made-to-Order
2,900 反応 4351368 ¥166,900
VIC ラベル製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Gene Expression Assays, Small_VIC, Made-to-Order
360 反応 4448489 ¥50,700
TaqMan Gene Expression Assays, Medium_VIC, Made-to-Order
750 反応 4448490 ¥84,000
TaqMan Gene Expression Assays, Large_VIC, Made-to-Order
2,900 反応 4448491 ¥166,900
マルチプレックス用の低濃度(Primer Limited)TaqMan Assays(VIC ラベル)製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Gene Expression Assays, Small_VIC, PL Made-to-Order
360 反応 4448484 ¥50,700
TaqMan Gene Expression Assays, Medium_VIC, PL Made-to-Order
750 反応 4448485 ¥84,000
TaqMan Gene Expression Assays, Large_VIC, PL Made-to-Order
2,900 反応 4448486 ¥166,900
*20 µLの反応系で計算
製品名 サイズ 製品番号 価格Custom Plus TaqMan RNA Assay, Small 20 × 濃度
360 反応 4441114 ¥50,700
Custom Plus TaqMan RNA Assay, Medium 20 × 濃度
750 反応 4441117 ¥102,100
Custom Plus TaqMan RNA Assay, Large 60 × 濃度
2,900 反応 4441118 ¥181,600
Custom Plus TaqMan RNA AssaysApplied Biosystems™ Custom Plus TaqMan™ RNA Assaysは、入力した配列に対してTaqMan™ Gene Experssion Assaysと同様のバイオインフォマティック解析や他の生物種の転写産物を検出しないようにデザインを行います。Custom Plus TaqMan RNA Assaysを選択した場合、プライマーおよびプローブの配列は非公開になります。
ご注文にはオンラインオーダーシステムへの事前登録が必要です。詳細は60ページをご覧ください。アッセイの検索については、弊社ウェブサイトをご覧ください。www.lifetechnologies.com/taqmanjp
Species Number of Assays
H. sapiens (Human) 212,207
M. musculus (Mouse) 185,566
R. norvegicus (Rat) 151,955
O. sativa (Rice) 99,822
A. thaliana (Arabidopsis) 97,879
C. elegans (Nematode) 92,687
B. taurus (Cow) 67,104
M. mulatta (Rhesus Monkey) 66,480
D. rerio (Zebrafish) 63,712
X. tropicalis (Frog) 56,764
C. familiaris (Dog) 55,202
G. gallus (Chicken) 48,432
Species Number of Assays
D. melanogaster (Fruit Fly) 41,607
Z. mays (Sweet Corn) 38,446
S. scrofa (Pig) 9,868
S. pombe (Fission Yeast) 6,538
O. cuniculus (Rabbit) 5,924
S. cerevisiae (Baker's Yeast) 5,525
G. max (Soybean) 3,456
E. caballus (Horse) 2,970
C. porcellus (Guinea Pig) 2,037
V. vinifera (Grape) 965
T. aestivum (Wheat) 760
Total Number of Assays 1,315,906
表5. TaqMan Gene Expression Assaysラインナップ 2011年10月現在
アッセイが既に合成された状態の製品“Inventoried”と、設計まで完了しており注文を受けて合成を行なう製品“Made-to-Order”があります。それぞれ製品番号、価格、反応数および納期が異なります。
製品名 サイズ 製品番号 価格Custom TaqMan Gene Expression Assays, S-scale
50 µL 反応:140 反応20 µL 反応:360 反応
4331348 ¥50,700
Custom TaqMan Gene Expression Assays, M-scale
50 µL 反応:300 反応20 µL 反応:750 反応
4332078 ¥102,100
Custom TaqMan Gene Expression Assays, L-scale
50 µL 反応:1,160 反応20 µL 反応:2,900 反応
4332079 ¥181,600
Custom TaqMan Gene Expression Assays
Applied Biosystems™ Custom TaqMan™ Gene Expression Assays
は、あらゆる生物種ゲノムやターゲットにも対応可能なカスタムメイドの遺伝子発現定量アッセイ試薬です。デザイン済みのTaqMan Gene
Expression Assaysに含まれない生物種のアッセイをご希望の場合は、こちらをご利用ください。ターゲットを含む配列情報から遺伝子発現定量アッセイに最適なプローブとプライマーセットを検索・合成し、TaqMan
Gene Expression Assaysと同様、プレミックスの状態でお届けします。
デザイン済み製品・カスタムメイド製品を含むすべてのアッセイは共通の温度プログラム条件で利用でき、TaqMan アッセイの特長である優れた感度と直線性、ダイナミックレンジでの解析を行なうことができます。
TaqMan 遺伝子発現アッセイ
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TaqMan Array Plate (96ウェルタイプ -スタンダードまたはFast対応)Applied Biosystems™ TaqMan™ Array Plate は、ご指定いただいたTaqMan Gene Expression Assays(24ページ)を96ウェルプレートフォーマットに分注してお届けするカスタマイズ製品です。プレートフォーマットは遺伝子数で5種類あり、プレートはスタンダードとFastで合計10種類の中からお選びいただけます。届いたプレートにサンプルとマスターミックス試薬を加えるだけで、正確な定量が行えます。個別に購入したTaqMan Gene Expression Assaysが未使用のまま残るという無駄が少なくなります。
・ お手頃 プレート6枚から注文可能。様々なプロジェクトに最適
・ カスタマイズ可能 プレートの構成、アッセイ、配置、レプリケート数、 コントロールをオンラインツールで設定
・ 便利 96ウェルプレートにPCRプライマーとTaqManプローブが 乾燥状態で分注されているのでマスターミックスとサンプルを添加するだけで準備完了
ご注文にはオンラインオーダーシステムへの事前登録が必要です。詳細は60 ページをご覧ください。アッセイの検索およびプレートフォーマットの詳細については、弊社ウェブサイト、“TaqMan Array Plate”をご覧ください。www.lifetechnologies.com/taqmanjp
製品名 ** サイズ 製品番号 価格 *
TaqMan Array Plates, Format 8 (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413266 ¥34,100¥29,600¥25,000
TaqMan Array Plates, Format 8 (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413263 ¥34,100¥29,600¥25,000
TaqMan Array Plates, Format 16 (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413264 ¥38,700¥34,100¥29,600
TaqMan Array Plates, Format 16 (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413261 ¥38,700¥34,100¥29,600
TaqMan Array Plates, Format 16 + Endogenous Controls (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413265 ¥38,700¥34,100¥29,600
TaqMan Array Plates, Format 16 + Endogenous Controls (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413262 ¥38,700¥34,100¥29,600
TaqMan Array Plates, Format 32 (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391528 ¥51,200¥44,300¥38,700
TaqMan Array Plates, Format 32 (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413259 ¥51,200¥44,300¥38,700
TaqMan Array Plates, Format 32 + Endogenous Controls (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391529 ¥51,200¥44,300¥38,700
TaqMan Array Plates, Format 32 + Endogenous Controls (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413260 ¥51,200¥44,300¥38,700
TaqMan Array Plates, Format 48 (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391526 ¥56,800¥51,200¥44,300
TaqMan Array Plates, Format 48 (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413257 ¥56,800¥51,200¥44,300
TaqMan Array Plates, Format 48 + Endogenous Controls (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391527 ¥56,800¥51,200¥44,300
TaqMan Array Plates, Format 48 + Endogenous Controls (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413258 ¥56,800¥51,200¥44,300
TaqMan Array Plates, Format 96 (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391524 ¥67,000¥56,800¥51,200
TaqMan Array Plates, Format 96 (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413255 ¥67,000¥56,800¥51,200
TaqMan Array Plates, Format 96 + Endogenous Controls (Standard)
6 枚12 枚
18 枚以上
4391525 ¥67,000¥56,800¥51,200
TaqMan Array Plates, Format 96 + Endogenous Controls (Fast)
6 枚12 枚
18 枚以上
4413256 ¥67,000¥56,800¥51,200
* 1 枚あたりの価格となります。 最小ご注文単位は6 枚です。以降6 枚単位で増やすことができます。 (例: 12 枚、18 枚、24 枚…)
** Candidate Endogenous Control遺伝子は、GAPDH、HPRT1、GUSBの3種類です。
対応モデルStandard : 7900HT / ViiA 7 / 7500 / 7300 /
QuantStudio(スタンダード96ウェルブロック)システムFast : 7900HT / ViiA 7 /7500Fast / StepOnePlus /Quant-
Studio(Fast96ウェルブロック)システム
TaqMan アレイプレート(96ウェルタイプ)
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TaqMan Array Gene Signature 96-Well PlateApplied Biosystems™ TaqMan™ Array Gene Signature 96-Well Plate
は、特異的生体プロセスやパスウェイ、また疾患関連遺伝子に対するTaqMan Gene Expression Assaysを選定し、96ウェルフォーマットのプレートに分注した製品です。各プレートには、選定された遺伝子の他、内在性コントロールとなる遺伝子も乾燥した状態で供給されていますので、一度の実験で関連する遺伝子を網羅的に解析できます。
• 1枚から購入可能 あらゆるスケールのプロジェクトにも対応
• 迅速にお届け 既製品のため、迅速にお届け可能
• 使いやすい プライマー・プローブが乾燥状態で96ウェルフォーマットで供給されるため、あとはマスターミックスとサンプルを添加するだけ
TaqMan アレイプレート(96ウェルタイプ)
製品名 製品番号Standard Fast
Human Alzheimer's Disease 4414070 4418715Human Angiogenesis 4414071 4418716Human Apoptosis 4414072 4418717Human Immune Response 4414073 4418718Human Inflammation 4414074 4418719Human Phosphodiesterase 4414075 4418720Human Protein Kinase Pathways 4414076 4418721Human Stem Cell Pluripotency 4414077 4418722Mouse Alzheimer's Disease 4414078 4418723Mouse Immune Response 4414079 4418724Mouse Stem Cell Pluripotency 4414080 4418725Rat Inflammation 4414081 4418726Rat Phosphodiesterase 4414082 4418727Human Androgens 4414083 4418728Human Chemokines 4414084 4418729Human CYP450 & other Oxygenases 4414085 4418730Human Diabetes 4414086 4418731Human Estrogens 4414087 4418732Human Heat Shock Proteins 4414088 4418733Human Hedgehog Pathway 4414089 4418734Human Hypoxia 4414090 4418735Human LDL Pathways 4414091 4418736Human Ligand Gated Ion Channels 4414092 4418737Human MAPK Pathways 4414093 4418738Human Neurotransmitters 4414094 4418739Human NFkB Pathway 4414095 4418740Human Osteogenesis 4414096 4418741Human TGF β Pathway 4414097 4418742Human Tumor Metastasis 4414098 4418743Human Voltage-Gated Ion Channels 4414099 4418744Human WNT Pathway 4414100 4418745Human 14-3-3 Induced Intracellular Signaling 4414101 4418746Human Activation of cAMP-Dependent PKA 4414102 4418747Human HOX Genes 4414103 4418748Human Antigen Processing and Presentation by MHCS
4414104 4418749
Human Apoptosis via Death Receptors 4414105 4418750Human Apoptotic Pathways Triggered By HIV1 4414106 4418751Mouse ABC Transporters 4414107 4418752Human Nuclear Receptors 4414108 4418753Human Cell Surface Markers 4414109 4418754Human BMP Pathway 4414110 4418755
製品名 製品番号Standard Fast
Human BRCA1 Pathway 4414111 4418756Human Breast Cancer Regulations by Stathmin1 4414112 4418757Human c-Myc and Apoptosis 4414113 4418758Human cAMP Pathway 4414114 4418759Human Cardiomyocyte Differentiation by BMP Receptors
4414115 4418760
Human Cell Cycle Control of Chromosomal Replication
4414116 4418761
Human Cellular Apoptosis Pathway 4414117 4418762Human Drug Transporters 4414118 4418763Human Antioxidant Mechanisms 4414119 4418764Human Complement Pathway 4414120 4418765Human Colorectal Cancer Metastasis 4414121 4418766
Human CREB Pathway 4414122 4418767Human Cyclins & Cell Cycle Regulation 4414123 4418768Human Cytokine Network 4414124 4418769Human Developmental Phases of Colorectal Cancer
4414125 4418770
Human DNA Damage Induced 14-3-3 Sigma Signaling
4414126 4418771
Human DNA Methylation & Transcriptional Repression
4414127 4418772
Human DNA Repair Mechanisms 4414128 4418773Human EGF Pathway 4414129 4418774Human Signal Transduction Pathways 4414130 4418775Human eNOS Signaling 4414131 4418776Human Erythropoietin Pathway 4414132 4418777Human Extracellular Matrix & Adhesion Molecules 4414133 4418778Human Factors for Cardiogenesis 4414134 4418779Human FAS Signaling 4414135 4418780Human FGF Pathway 4414136 4418781Human GPCR Pathway 4414137 4418782Human Guidance & Growth Cone Motility 4414138 4418783Human Transcription Factors (Non-Hox) 4414139 4418784Human Huntington Disease Pathway 4414140 4418785Human IGF1R Signaling 4414141 4418786Human IL-1 Pathway 4414142 4418787Human IL-10 Pathway 4414143 4418788Human IL-2 Active 8 & Quiescent T-Cell 4414144 4418789Human IL-2 Pathway 4414145 4418790Human AHR Pathway 4414146 4418791Human IL-3 Pathway 4414147 4418792Human IL-4 Pathway 4414148 4418793
サイズ:1枚 価格:¥38,700
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製品名 製品番号Standard Fast
Human IL-6 Pathway 4414149 4418794Human IL-9 Pathway 4414150 4418795Human ILK Signaling 4414151 4418796Human iNOS Signaling 4414152 4418797Human Insulin Receptor Pathway 4414153 4418798Human Interferon Pathway 4414154 4418799Human Intracellular Calcium Signaling 4414155 4418800Human JAK-STAT Pathway 4414156 4418801Human Growth Factors 4414157 4418802Human Hematopoiesis 4414158 4418803Human Melatonin Signaling 4414159 4418804Human Prion Pathway 4414160 4418805Human Molecular Mechanisms of Cancer 4414161 4418806Human NGF Pathway 4414162 4418807Human nNOS Signaling at Neuronal Synapses 4414163 4418808Human nNOS Signaling in Skeletal Muscle 4414164 4418809Human Notch Signaling 4414165 4418810Human ABC Transporters 4414166 4418811Human P53 Mediated Apoptosis 4414167 4418812Human P53 Signaling 4414168 4418813Human CMV & MAPK Pathways 4414169 4418814Human Patho Rheumatoid Arthritis 4414170 4418815Human PDGF Pathway 4414171 4418816Human PI3K Signaling 4414172 4418817Human PI3K Signaling in B-Lymphocyte 4414173 4418818Human PKA Signaling 4414174 4418819Human Cholera Infection 4414175 4418820Human RAS Pathway 4414176 4418821Human Pancreatic Adenocarcinoma 4414177 4418822Human Phagocytosis of Microbes 4414178 4418823Human RHO Family GTPases 4414179 4418824Human RHOA Pathway 4414180 4418825Human Pathogenesis of ALS 4414181 4418826Human Signaling in Gap Junctions 4414182 4418827Human NFAT & Cardiac Hypertrophy 4414183 4418828Human SMAD Signaling Network 4414184 4418829Human Sperm Motility 4414185 4418830Human T-Cell Receptor and CD3 Complex 4414186 4418831Human Telomere Extension by Telomerase 4414187 4418832Human Thrombin Signaling 4414188 4418833Human TNF Superfamily Pathway 4414189 4418834Human TNFR1 Pathway 4414190 4418835
製品名 製品番号Standard Fast
Human TNFR2 Pathway 4414191 4418836Human Toll Comparative Pathway 4414192 4418837Human Toll-Like Receptors Pathway 4414193 4418838Human Transcription of mRNA 4414194 4418839Human Transcription of rRNA 4414195 4418840Human Transcription of tRNA 4414196 4418841Human Transcriptional Regulatory Network in Embryonic Stem Cell
4414197 4418842
Human Ubiquitin-Proteasome Dependent Proteolysis
4414198 4418843
Human VEGF Pathway 4414199 4418844Human Maturity-Onset Diabetes of Young(MODY) 4414200 4418845Mouse Lipid Regulated Genes 4415461 4418846Rat Endogenous Control 4426698 4426697Mouse Endogenous Control 4426701 4426699Human Endogenous Control 4396840 4426700
サイズ:1枚 価格:¥38,700
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TaqMan Custom Arrays (Micro Fluidic Card)Applied Biosystems™ TaqMan™ Custom Arrays は、7900HT Fast、 ViiA 7、QuantStudio リアルタイム PCRシステムでお使いいただける384ウェルフォーマットのアレイ型アッセイシステムです。相対定量によって遺伝子発現定量を効果的に、かつ容易に行うことができます。1サンプルに対して12
遺伝子から最大で384遺伝子(内在性コントロール遺伝子を含む)に対して
1 ~ 8サンプルの発現定量が行えるので、「定量性のあるカスタムアレイ」としてお使いいただけます。TaqMan Custom Arraysは、7900HT、ViiA 7、QuantStudio システムのTaqMan Arrayシステムでご利用いただけます。システムの他、Micro
Fluidic Card対応の遠心機が必要となります。
製品名 製品番号 1 枚当たりの価格10~19 枚 20‒49 枚 50‒99 枚 100 枚以上
TaqMan Array, Format 12 4342247 ¥77,200 ¥63,600 ¥51,200 ¥45,400TaqMan Array, Format 16 4346798 ¥79,400 ¥65,900 ¥52,300 ¥46,600TaqMan Array, Format 24 4342249 ¥79,400 ¥65,900 ¥52,300 ¥46,600TaqMan Array, Format 32 4346799 ¥84,000 ¥70,300 ¥54,500 ¥48,800TaqMan Array, Format 48 4342253 ¥84,000 ¥70,300 ¥54,500 ¥48,800TaqMan Array, Format 64 4346800 ¥86,300 ¥72,600 ¥56,800 ¥49,900TaqMan Array, Format 96a 4342259 ¥88,500 ¥73,900 ¥63,600 ¥52,300TaqMan Array, Format 96b 4342261 ¥88,500 ¥73,900 ¥63,600 ¥52,300TaqMan Array, Format 192 4346802 ¥110,200 ¥81,700 ¥70,300 ¥56,800TaqMan Array, Format 384 4342265 ¥140,900 ¥95,300 ¥74,900 ¥61,300
* TaqMan Gene Expression Assays, Inventoried(24ページ)からアッセイをご選択ください。 TaqMan Gene Expression Assays, Made-to-Order(24ページ)から選択することはできません。
Human製品名 サイズ 製品番号 価格Human Immune Array 4 枚 4370573 ¥227,000Human Endogenous Control Array 2 枚 4367563 ¥102,100Human Protein Kinase Array 4 枚 4367784 ¥227,000Human GPCR Array 4 枚 4367785 ¥249,700Human ABC Transporter Array 4 枚 4378700 ¥227,000Human Apoptosis Array 4 枚 4378701 ¥227,000Human Phosphodiesterase Array 4 枚 4378705 ¥227,000Human Inflammation Array 4 枚 4378707 ¥227,000Human Angiogenesis Array 4 枚 4378710 ¥227,000Human Alzheimer's Array 4 枚 4378713 ¥227,000Human Nuclear Receptor Array 4 枚 4379961 ¥227,000Human Stem Cell Pluripotency Array 4 枚 4385344 ¥227,000TaqMan Array Human MicroRNA A Cards v2.0 4 枚 4398965 ¥227,000TaqMan Arrays Human MicroRNA B Cards v3.0 4 枚 4444910 ¥227,000TaqMan Arrays Human MicroRNA A+B Cards v3.0 8 枚 4444913 ¥292,800
ご注文にはオンラインオーダーシステムへの事前登録が必要です。詳細は60ページをご覧ください。
• サンプルとターゲット遺伝子の組み合わせにより、自由にカスタマイズ• 2 µLの反応系によりランニングコストを低減• 分注ロボットを必要とせず、384ウェルフォーマットで高いスループッ
トを実現• ターゲットとなる遺伝子を事前にスポット済みのTaqMan Gene
Signature Arraysも提供
Mouse製品名 サイズ 製品番号 価格Mouse Immune Array 4 枚 4367786 ¥227,000Mouse Endogenus Control Array 2 枚 4378702 ¥102,100Mouse GPCR Array 4 枚 4378703 ¥249,700Mouse Alzheimer's Array 4 枚 4378714 ¥227,000Mouse Stem Cell Pluripotency Array 4 枚 4385363 ¥227,000TaqMan Array Rodent MicroRNA A Cards v2.0 4 枚 4398967 ¥227,000
Rat製品名 サイズ 製品番号 価格Rat Endogenous Control Array 2 枚 4378704 ¥102,100Rat Phosphodiesterase Array 4 枚 4378706 ¥227,000Rat Inflammation Array 4 枚 4378708 ¥227,000Rat GPCR Array 4 枚 4378709 ¥249,700TaqMan Array Rodent MicroRNA A Cards v2.0 4 枚 4398967 ¥227,000
搭載されている遺伝子については、弊社ウェブサイトをご覧ください。 www.lifetechnologies.com
TaqMan Gene Signature ArraysApplied Biosystems™ TaqMan™ Gene Signature Arraysは、384ウェルのカード型アレイに14種類の疾病関連遺伝子や特定の遺伝子パスウェイなどの遺伝子群を、弊社独自に選択して、スポットした既製のTaqMan アレイです。このカード型アレイは、プライマー・プローブが乾燥状態で、384ウェルフォーマットで供給されるため、マスターミックスを添加、遠心、シールするだけです。
• 複雑な分注作業を一切排除しているため、384ウェルへのサンプルロードが5分以内に完了
• 小さいパッケージでご提供
TaqMan アレイ(384ウェルタイプ)
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TaqMan 内在性コントロール
TaqMan Array Endogenous Control PlateApplied Biosystems™ TaqMan™ Array Endogenous Control Plateは、実験に最適な内在性コントロール遺伝子を簡単に選択できるツールです。搭載されているのは、32の内在性コントロールの候補遺伝子です。これらの遺伝子は、多くの組織にわたって、構成的、かつ適度な量が発現していることが知られています。
・ 実験に最適な内在性コントロール遺伝子を簡単に決定・ 32の内在性コントロール遺伝子の候補がトリプリケート (反復3)で搭載・ 個別TaqMan アッセイと同じ特異性と再現性
TaqMan Human Endogenous Control Array Applied Biosystems™ TaqMan™ Human Endogenous Control Array
は、TaqMan Gene Signature Arrays(28ページ)を用いた解析における内在性コントロール遺伝子の選択に最適なツールです。内在性コントロールとして広く利用されている16種類のヒト用 Gene Expression
Assaysが搭載されています。TaqMan Human Endogenous Control Arrayは、7900HTシステム、
ViiA 7、QuantStudio のTaqMan Arrayシステムでご利用いただけ
ます。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Array Human Endogenous Controls, 96-well Plate
1 枚 4396840 ¥38,700
TaqMan Array Human Endogenous Controls, Fast 96-Well Plate
1 枚 4426700 ¥38,700
TaqMan Array Mouse Endogenous Controls, 96-well Plate
1 枚 4426701 ¥38,700
TaqMan Array Mouse Endogenous Controls, Fast 96-Well Plate
1 枚 4426699 ¥38,700
TaqMan Array Rat Endogenous Controls, 96-well Plate
1 枚 4426698 ¥38,700
TaqMan Array Rat Endogenous Controls, Fast 96-Well Plate
1 枚 4426697 ¥38,700
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Human Endogenous Control Array
2 枚 4367563 ¥102,100
表6. TaqMan Array Human Endogenous Control Plateに搭載されているAssay IDとGene Symbol
30
TaqMan Gene Expression Assays (Endogenous Control)Applied Biosystems™ TaqMan™ Gene Expression Assays(24ページ)でラインナップされている内在性コントロール遺伝子検出に使用できるアッセイです。ご注文にはオンラインオーダーシステムへの事前登録が必要です。詳細は60ページをご覧ください。
TaqMan 内在性コントロール
Human内在性コントロールGene
SymbolRefSeq Gene Name
TaqMan Gene Expression Assays
TaqMan Endogenous Controls
Assays ID製品番号
*VIC/MGB FAM/MGB
18S X03205.1 Eukaryotic 18S rRNA Hs99999901_s1 4319413E 4352930E
ACTB NM_001101.2 actin, beta Hs99999903_m1 4326315E 4352935E
GAPDH NM_002046.3 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Hs99999905_m1 4326317E 4352934E
RPLP0 NM_001002.3 ribosomal protein, large, P0 Hs99999902_m1 4326314E -PPIA NM_021130.3 peptidylprolyl isomerase A (cyclophilin A) Hs99999904_m1 4326316E -PGK1 NM_000291.2 phosphoglycerate kinase 1 Hs99999906_m1 4326318E -B2M NM_004048.2 beta-2-microglobulin Hs99999907_m1 4326319E -GUSB NM_000181.1 glucuronidase, beta Hs99999908_m1 4326320E -
HPRT1 NM_000194.1hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1(Lesch-Nyhan syndrome)
Hs99999909_m1 4326321E -
TBP M55654.1 TATA box binding protein Hs99999910_m1 4326322E -TFRC NM_003234.1 transferrin receptor (p90, CD71) Hs99999911_m1 4326323E -IPO8 NM_006390.2 importin 8 Hs00183533_m1 - -
YWHAZ NM_003406.2tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein, zeta polypeptide
Hs00237047_m1 - -
UBC NM_021009.4 ubiquitin C Hs00824723_m1 - -POLR2A NM_000937.3 polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide A, 220kDa Hs00172187_m1 - -HMBS NM_000190.3 hydroxymethylbilane synthase Hs00609297_m1 - -
* VIC ラベルの試薬は、マルチプレックスでの使用を前提としてプライマー濃度が制限されています。TaqMan Fast Universal Master Mixで反応を行う場合には、アニール / エクステンションの温度を60 ℃(デフォルト)から62 ℃に変更して使用します。
TaqMan Endogenous Controls プローブ遺伝子発現の相対定量の実験における内在性コントロール遺伝子検出用アッセイとして、Applied Biosystems™ TaqMan™ Endogenous
Controlsアッセイをご用意しています。VIC ラベルの試薬はプライマー濃度が制限されており、FAM ラベルのターゲット遺伝子とのマルチプレックス反応にご利用いただけます。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Gene Expression Assays, Inventoried
50 µL 反応系:100 反応20 µL 反応系:250 反応
4331182 ¥33,500
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Endogenous Control VIC/MGBプローブなど
1,000 反応 ** ¥111,300
* 50 µLの反応系として計算**製品番号は以下の表をご参照ください。
31
Mouse内在性コントロールGene
SymbolRefSeq Gene Name
TaqMan Gene Expression Assays
TaqMan Endogenous Controls
Assays ID製品番号
*VIC/MGB FAM/MGB
18S X03205.1 Eukaryotic 18S rRNA Hs99999901_s1 4319413E 4352930E
ACTB NM_007393.1 actin, beta, cytoplasmic Mm00607939_s1 4352341E 4352933E
Gapdh NM_008084.2 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Mm99999915_g1 4352339E 4352932E
Rplp2 (AK012402.1) ribosomal protein, large P2 Mm00782638_s1 - -Ppia NM_008907.1 peptidylprolyl isomerase A Mm02342430_g1 - -Pgk1 NM_008828.2 phosphoglycerate kinase 1 Mm00435617_m1 - -B2m NM_009735.3 beta-2 microglobulin Mm00437762_m1 - -Gusb NM_010368.1 glucuronidase, beta Mm00446953_m1 - -Hprt1 NM_013556.2 hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase 1 Mm00446968_m1 - -Tbp NM_013684.2 TATA box binding protein Mm00446973_m1 - -Tfrc NM_011638.3 transferrin receptor Mm00441941_m1 - -Ipo8 NM_001081113.1 importin 8 Mm01255158_m1 - -
Ywhaz NM_011740.2tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein, zeta polypeptide
Mm01158417_g1 - -
Ubc - ubiquitin C Mm01201237_m1 - -Polr2a NM_009089.2 polymerase (RNA) II (DNA directed) polypeptide A Mm00839493_m1 - -Hmbs NM_013551.2 他 hydroxymethylbilane synthase Mm00660262_g1 - -
Rat内在性コントロールGene
SymbolRefSeq Gene Name
TaqMan Gene Expression Assays
TaqMan Endogenous Controls
Assays ID製品番号
*VIC/MGB FAM/MGB
18S X03205.1 Eukaryotic 18S rRNA Hs99999901_s1 4319413E 4352930E
Actb NM_031144.2 actin, beta Rn00667869_m1 4352340E 4352931E
Gapdh NM_017008.3 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Rn99999916_s1 4352338E -Rplp2 NM_001030021.1 ribosomal protein, large P2 Rn01479927_g1 - -Ppia NM_017101.1 peptidylprolyl isomerase A Rn00690933_m1 - -Pgk1 NM_053291.3 phosphoglycerate kinase 1 Rn00821429_g1 - -B2m NM_012512.1 beta-2 microglobulin Rn00560865_m1 - -Gusb NM_017015.2 glucuronidase, beta Rn00566655_m1 - -Hprt NM_012583.2 hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase Rn01527840_m1 - -Tbp NM_001004198.1 TATA box binding protein Rn01455648_m1 - -Tfrc M58040.1 transferrin receptor Rn01474695_m1 - -Hmbs NM_013168.2 hydroxymethylbilane synthase Rn00565886_m1 - -
Ywhaz NM_013011.3tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein, zeta polypeptide
Rn00755072_m1 - -
Ubc NM_017314.1 ubiquitin C Rn01789812_g1 - -Ppib NM_022536.1 peptidylprolyl isomerase B Rn00574762_m1 - -Arbp NM_022402.1 acidic ribosomal phosphoprotein P0 Rn00821065_g1 - -
* VIC ラベルの試薬はマルチプレックスでの使用を前提として、プライマー濃度が制限されています。 TaqMan Fast Universal Master Mixで反応を行う場合には、アニール / エクステンションの温度を60 ℃(デフォルト)から62 ℃に変更して使用します。
32
RNAi解析
RNAi(RNA干渉)とは
RNAi(RNA干渉)とは、細胞や生体に2本鎖のRNA(dsRNA)が取り込まれることにより、dsRNAとホモロジーを持つmRNAが特異的に分解され、発現が抑制される現象です。RNAi実験では、以下のような研究に活用されています。
・ 遺伝子の機能解析・ パスウェイの研究・ ターゲットの発見と確認・ ノックアウト モデルに代わる新しい解析手法・ RNAiの医薬としての応用の可能性
RNAiのメカニズム
多くの非哺乳動物の系では、長い二本鎖 RNA(dsRNA)を導入するかあるいは発現させることで、RNAiのパスウェイからsiRNAが生成されます。細胞質にあるDicerというヌクレアーゼが長いdsRNAを21 ~ 23
塩基対のsiRNA(small interfering RNA)に切断します。このsiRNAが二本鎖から一本鎖になり、RISC(RNA-induced silencing complexes)に取り込まれます。すると、siRNAのアンチセンス鎖がガイド役となり、RISCが相補的なmRNAに結合します。そしてRISCがmRNAを切断することで、特定の遺伝子発現が抑制されます。ほとんどの哺乳動物細胞では30塩基対以上の長さのdsRNAが導入されると強力な抗ウイルス応答が起こるため、哺乳動物細胞の系ではsiRNAを導入するか(②)、DicerによってsiRNA分子にプロセシングされるshRNA(short hairpin RNA)を発現するDNAベクターを用いてRNAi
(③)を誘導します。
1. siRNAの選択
RNAi実験では、最低2種類の配列のsiRNAと、ポジティブコントロールおよびネガティブコントロールを使用します。抑制効果が保証されたsiRNAを使用することで、信頼性の高い実験が行なえます。→siRNA合成オリゴ(33 ~ 35ページ)
2. siRNAの導入
培養細胞へのsiRNAの導入には、トランスフェクション、またはエレクトロポレーションが用いられます。ポジティブコントロールsiRNAとネガティブコントロール siRNAを用いた至適化実験を行ない、細胞株ごとに最適なsiRNAの導入条件を決定します。→siRNA導入用試薬(36ページ)
3. siRNA抑制効果の検証
ターゲット遺伝子のmRNAを定量することにより、siRNAの抑制効果を確認します。リアルタイム PCRとTaqMan アッセイにより正確で簡便なmRNA定量が可能です。→TaqMan マスターミックス(18 ~ 21ページ)→TaqMan 遺伝子発現アッセイ(24 ~ 31ページ)
図20. RNAi実験のワークフロー
33
siRNA合成オリゴ
Silencer Select siRNAInvitrogen™ Silencer™ Select siRNA は、デザインアルゴリズム、オフターゲット効果予測アルゴリズム、化学修飾 LNA など、さまざまな最新技術を取り入れて開発された次世代のsiRNAです。有効性、特異性、安定性において優れた発現抑制効果を提供します。
• 低濃度でも効果的にノックダウン- 他のsiRNAに比べて1/10 ~ 1/100の量で抑制可能- 濃度5nMでの製品保証
• オフターゲット効果を削減 - 化学修飾LNAを採用。センス鎖によるオフターゲット効果を防いだ特異性の高い抑制効果
• スクリーングにも有効- プリメイドからカスタムまで、便利なライブラリ製品もご用意
図21. Silencer Select siRNAおよび他社 siRNAの抑制効果の比較10個の異なる遺伝子に対するsiRNAをそれぞれ用意し、0.03 ~ 30nMのsiRNAを使用して、HeLa細胞に導入しました。各 siRNA濃度についてtriplicateで実験を行ない、48時間後のmRNAレベルを測定しました。結果は各 siRNAごとの残存mRNAレベルの平均値(%)を示します。
充実した製品保証(siRNA濃度5nM以上)
Silencer Select Pre-designed siRNA
• Silencer Select Pre-designed siRNA を同一ターゲットに対して 2種類ご購入の場合、両方が70%以上のmRNA抑制を示すことを保証します。
• Silencer Select Pre-designed siRNA を同一ターゲットに対して 3種類ご購入の場合、3種類中2種類が80%以上のmRNA抑制を示すことを保証します。
Silencer Select Validated siRNA
• Silencer Select Validated siRNA をご購入の場合、それぞれが80%以上のmRNA抑制を示すことを保証します。
表7. Silencer Select siRNA シリーズ
製品 概要Silencer Select Pre-designed Silencer Select Pre-designed siRNA は、ターゲットに対して抑制効果を持つことを保証しています。
ヒト、マウス、ラットの全遺伝子のうち 98%以上がデザイン済で、精製済のすぐにご使用できるフォーマットとなっています。シーケンス情報はすべての製品に添付されています。
Silencer Select Validated Silencer Select Validated siRNA は、ターゲット遺伝子の発現をメッセンジャー RNAレベルで 80%以上減少させることを実験で検証済みです。製品に添付されるデータシートには、実験で観察されたメッセンジャー RNA 抑制のレベルと、シーケンス情報が含まれています。
Custom Design Select siRNA ご希望のターゲット配列に対してカスタムデザインした Silencer Select siRNA をご提供できます。特にスプライスバリアントやヒト、マウス、ラット以外の哺乳動物をターゲットとした siRNA をご希望の際に最適なサービスです。
Custom Select siRNA 合成 カスタム Select siRNA 合成サービスでは、お好きな 21 塩基の配列の siRNA に、弊社の Silencer Select siRNA と同じ化学修飾を加えて合成することができます。
Silencer SelectNegative Control #1 siRNA
Silencer Select ネガティブ コントロール siRNA はマウス、ラット、ヒトの遺伝子配列との間に相同性がなく、どの遺伝子の転写産物もターゲットにしない配列の siRNA のことです。この 2 種類のネガティブコントロールはマイクロアレイを使用した解析により、遺伝子発現にごくわずかな影響しかもたらさないことが確認されています。さらに細胞を使ったマルチパラメータアッセイにより、細胞の増殖、生存率、形態に有意な影響が無いことが確認されています。
Silencer SelectNegative Control #2 siRNA
Silencer SelectGAPDH Positive Control siRNA
Silencer Select GAPDH ポジティブコントロール siRNA は、ヒト、マウス、ラットの GAPDH に対して複数の細胞株で機能することが確認されています。GAPDH の抑制をモニターすることによりsiRNA の導入効率を測定するのに最適です。
図22. ネガティブ / ポジティブコントロールの設定 RNAi実験ではネガティブとポジティブのコントロールを毎回設定することをおすすめします。
34
Silencer Select Pre-designed siRNA
製品名 サイズ * 製品番号 価格Silencer Select Pre-designed siRNA, inventoried, standard purity
1 nmol 4427037 ¥13,700
5 nmol 4392420 ¥45,200
20 nmol 4392421 ¥69,300
40 nmol 4392422 ¥87,200
Silencer Select Pre-designed siRNA, non-inventoried, standard purity
5 nmol 4390771 ¥45,200
20 nmol 4390815 ¥69,300
40 nmol 4390816 ¥87,200
Silencer Select Pre-designed siRNA, HPLC purified
20 nmol 4390817 ¥100,800
40 nmol 4390818 ¥118,700
* 1 nmolサイズは4 本からの注文になります。
Silencer Select Validated siRNA
製品名 サイズ * 製品番号 価格Silencer Select Validated siRNA, standard purity
1 nmol 4427038 ¥15,800
5 nmol 4390824 ¥57,800
20 nmol 4390825 ¥81,900
40 nmol 4390826 ¥99,800
Silencer Select Validated siRNA, HPLC purified
20 nmol 4390821 ¥113,400
40 nmol 4390822 ¥131,300
* 1 nmolサイズは4 本からの注文になります。
Silencer Select Negative Control siRNA
製品名 サイズ 製品番号 価格Silencer Select Negative Control #1 siRNA
5 nmol 4390843 ¥31,500
40 nmol 4390844 ¥94,500
250 nmol 4404020 ¥294,000
Silencer Select Negative Control #2 siRNA
5 nmol 4390846 ¥31,500
40 nmol 4390847 ¥94,500
Silencer Select GAPDH Positive Control siRNA
製品名 サイズ 製品番号 価格Silencer Select GAPDH siRNA (Hs, Mm, Rn)
5 nmol 4390849 ¥31,500
40 nmol 4390850 ¥94,500
250 nmol 4404024 ¥294,000
Custom Select siRNA
製品名 サイズ 製品番号 価格Custom Select siRNA, standard purity
5 nmol 4390827 ¥47,300
20 nmol 4390828 ¥71,400
40 nmol 4390829 ¥89,300
Custom Select siRNA, HPLC purified
20 nmol 4390830 ¥102,900
40 nmol 4390831 ¥120,800
siRNA合成オリゴ
プリメイド siRNA ライブラリ機能別に遺伝子およびsiRNAを選択済みのプリメイドライブラリです。各遺伝子につき3種のsiRNAで構成されています。大規模なスクリーニング解析に有効です。
製品名 siRNA本数 遺伝子数 製品番号 価格Silencer Select Human Kinase siRNA Library V4
2,130 710 4397918
お問い合わせ
Silencer Select Human Phosphatase siRNA Library V4
894 298 4397919
Silencer Select Human GPCR siRNA Library V4
1,140 380 4397916
Silencer Select Human Nuclear Hormone Receptor siRNA Library V4
141 47 4397914
Silencer Select Human Ion Channel siRNA Library V4
1,014 338 4397915
Silencer Select Human Protease siRNA Library V4
1,482 494 4397917
Silencer Select Human Druggable Genome siRNA Library V4 - 96-well
27,096 9,032 4397920
Silencer Select Human Druggable Genome V4 siRNA Ext Set - 96-well
4,149 1,383 4397921
Silencer Select Human Extended Druggable Genome siRNA Library V4 - 96-well
31,245 10,415 4397927
Silencer Select Human Druggable Genome siRNA Library V4 - 384-well
27,096 9,032 4397922
Silencer Select Human Druggable Genome V4 siRNA Ext Set - 384-well
4,149 1,383 4397924
Silencer Select Human Genome siRNA V4 Extension Set - 384-well
33,510 11,170 4397923
Silencer Select Human Genome siRNA Library V4 - 384-well
64,755 21,585 4397926
上記製品のサイズは0.25 nmolです。 0.5 nmolサイズやプールタイプ(各遺伝子の3つのsiRNAを混合)など、サイズやフォーマットの異なるライブラリのご要望もお受けしています。
カスタム siRNA ライブラリ36本以上のsiRNAを同時にご注文される場合は、任意のsiRNAで構成されたカスタムライブラリとしてのご注文が可能です。
siRNA本数: 36本以上サイズ: 0.1 nmol, 0.25 nmol, 1 nmol, 2 nmol
プレートフォーマット: 96ウェル、384ウェル価格: siRNAのタイプ (Inventoried siRNAまたはnon- Inventoried
siRNA)サイズ、ご注文本数によって異なります。
ライブラリ製品の価格に関するお問い合せ・ご注文は、弊社営業担当者または販売代理店までご連絡ください。
35
Ambion In Vivo siRNA Invitrogen™ Ambion™ In Vivo siRNA は、in vivo RNAi実験に最適なsiRNA合成オリゴです。Silencer Select と同様に、最新のデザインアルゴリズムと化学修飾を採用しています。ヌクレアーゼに対して高い安定性を有しているので、トランスフェクション後、生体内で長時間維持されます。
• Silencer Select(33ページ)と同様の高い抑制効果が、in vivo RNAi実験でも得られる
• 化学修飾LNA によりオフターゲット効果を最大90%減少させ、特異性を向上
• RNAi効果に影響を与えることなく血清中での高い安定性 time (h)si
RN
A r
emai
ning
inta
ct (%
)
Unmodified siRNA: t 1/2 5 min
Ambion In Vivo siRNA: t 1/2 ≥≥
24 h
図23. 非修飾 siRNAと比べ100倍以上の血清安定性8つの異なるシーケンスのAmbion In Vivo siRNAと同じ8つの非修飾 siRNAを90%血清でインキュベート。全長 siRNAの残存をHPLCにて確認しました。
TaqMan siRNA AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ siRNA Assaysは、Silencer Select
siRNAの持続性や、in vivo実験における特定組織・臓器へのsiRNAのデリバリーが検証可能なTaqMan Assaysです。また、この製品を用いることにより、細胞内等のsiRNA発現レベルの解析や、プラスミドやウィルスベクターのshRNAの発現量解析も行えます。
製品名 サイズ 製品番号 価格Ambion In Vivo Pre-designed siRNA, Standard Purity
5 nmol 4457298 ¥47,300
Ambion In Vivo Pre-designed siRNA,HPLC
250 nmol 4457302 ¥315,000
1 µmol 4457304 ¥504,000
Ambion In Vivo Pre-designed siRNA, HPLC In Vivo Ready
250 nmol 4457308 ¥336,000
1 µmol 4457310 ¥525,000
Ambion In Vivo Custom siRNA Standard Purity
5 nmol 4457297 ¥47,300
Ambion In Vivo Custom siRNA, HPLC
250 nmol 4457301 ¥337,100
1 µmol 4457303 ¥539,300
Ambion In Vivo Custom siRNA, HPLC In Vivo Ready
250 nmol 4457307 ¥336,000
1 µmol 4457309 ¥525,000
Ambion In Vivo Custom Designed Standard Purity
5 nmol 4457296 ¥47,300
ポジティブコントロール
Ambion In Vivo GAPDH Positive Control siRNA
5 nmol 4457288 ¥39,900
Ambion In Vivo GAPDH Positive Control siRNA, HPLC In Vivo Ready
50 nmol 4459407 ¥126,000
250 nmol 4457291 ¥336,000
Ambion In Vivo Factor VII siRNA, HPLC In Vivo Ready, 50 nmol
50 nmol 4459408 ¥126,000
Ambion In Vivo Factor VII Positive Control siRNA, HPLC In Vivo Ready, 250 nmol
250 nmol 4457292 ¥336,000
ネガティブコントロール
Ambion In Vivo Negative Control #1 siRNA, 5 nmol
5 nmol 4457287 ¥39,900
Ambion In Vivo Negative Control #1 siRNA, HPLC In Vivo Ready, 50 nmol
50 nmol 4459405 ¥126,000
Ambion In Vivo Negative Control #1 siRNA, HPLC In Vivo Ready, 250 nmol
250 nmol 4457289 ¥336,000
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan siRNA Assays, Made-to-Order, S
150 反応 4440878 ¥43,900
TaqMan siRNA Assays, Made-to-Order, M
750 反応 4440879 ¥88,500
TaqMan siRNA Assays, Made-to-Order, L
2,900 反応 4440880 ¥164,600
*20 µLの反応系として計算
36
RNA(siRNA、miRNA)導入用試薬
図24. Lipofectamine RNAiMAXは幅広い試薬レンジにおいて、高いノックダウン効果と細胞生存率0.1 ~ 1.0 µLのRNAiMAX試薬量を用いて実験を行なったところ、p53遺伝子レベルが効果的に抑制されていること、試薬量が多い条件においても優れた細胞生存率が得られていることが確認されました。
図26. 高いノックダウン効果Invivofectamine 3.0 ReagentとFactor VIIまたはPPIBに対するsiRNAiとの複合体を、肝臓への一回の静脈注射によって導入したところ、mRNAレベルで最大85%の高いノックダウン効果が確認されました。
図27. siRNA使用量を大幅に削減Invivofectamine 3.0 ReagentとFVIIに対するsiRNAとの複合体を、0.02 ~ 2 mg/kgの範囲で投与しました。血清を分離し、FVIIタンパク質を定量しました。ノックダウン効果の高さは、複合体中のsiRNA量と相関し、Invivofectamine 3.0 ReagentのED50は、0.1 mg/kgとなり、従来試薬の10分の1でした(従来の試薬では、1.0 mg/kg)。
細胞生存率(%)
p53 発現レベル
Lipofectamine RNAiMAX試薬量
p53 発現レベル 細胞生存率(%)
図25. Lipofectamine RNAiMAXと他社トランスフェクション試薬との比較
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.2
1.0
1.4
1.6
10 nM +
Lipofectamine™
RNAiMAX
10 nM + B社製品
10 nM + T社製品
10 nM + Q社製品
1 nM +
Lipofectamine™
RNAiMAX
1 nM + B社製品
1 nM + T社製品
1 nM + Q社製品
Nontransfe
cted
p53
, rel
ativ
e to
non
tran
sfec
ted Scrambled control p53 siRNA
Lipofectamine RNAiMAX Invitrogen™ Lipofectamine™ RNAiMAXは、細胞へのsiRNAやmiRNA
の導入に適したトランスフェクション試薬です。Silencer Select siRNA
(33ページ)やmirVana miRNA mimics & inhibitors(43ページ)の導入に最適です。
• 少ないsiRNA量でも高効率にノックダウン• 幅広い試薬レンジにおいて高い細胞生存率を維持• 様々な細胞株で使用可能
製品名 サイズ 製品番号 価格Lipofectamine RNAiMAX 0.1 mL 13778-100 ¥10,200
0.3 mL 13778-030 ¥29,500
0.75 mL 13778-075 ¥71,300
1.5 mL 13778-150 ¥101,300
15 mL 13778-500 ¥831,300
Invivofectamine 3.0 ReagentInvitrogen™ Invivofectamine™ 3.0 Reagentは、大幅に性能が改良された肝臓へのin vivoRNAi導入用のトランスフェクション試薬です。マイクログラムレベルのsiRNAで最大85%のノックダウンを達成します。
• 数ステップの作業で、簡単にsiRNA複合体を調製可能• 最大85%の高いノックダウン効果• siRNA使用量を、従来試薬より最大90%まで削減可能• 1回の投与でノックダウン効果が長時間持続• 低毒性
製品名 サイズ 製品番号 価格Invivofectamine 3.0 Reagent 10 反応 IVF3001 ¥158,400
50 反応 IVF3005 ¥588,000
37
microRNA解析
microRNAとは
microRNA(miRNA)は、ゲノム領域に配列情報がコードされており、一定の転写制御の元にpol Ⅱを介して転写され、precursor miRNA(前駆体 miRNA)からいくつかのプロセスを経て、21-23nt程度の一本鎖のmature miRNA(成熟型)になります。この短い成熟型 miRNAは、タンパク質をコードしないnon-coding RNA
としての機能が注目をされています。miRNAの生物学的な機能は完全には解明されていませんが、ショウジョウバエなどを用いた研究や様々な実験データより、成熟型のmiRNAはいくつかのタンパク質複合体を介して、ターゲットとする遺伝子のmRNAにおける3'UTR領域を主な認識対象部位としてmRNAの分解や翻訳の抑制などにかかわることが示唆されています。miRNAはHumanでは、初期発生や癌を始めとした様々な疾患、代謝など幅広い生物学的な現象にかかわっていることが報告されています。
miRNAの情報は、miRBaseデータベースに登録されています。
www.mirbase.org
表8. miRNA解析の概要
Precursor miRNA
Mature miRNA
サンプル調製 miRNA発現プロファイリング
ターゲットmiRNAの定量 miRNAの機能解析
・mirVana miRNA Isolation Kit
・mirVana PARIS Kit
・TaqMan miRNA ABC Purlfication Kit
・TaqMan MicroRNA Cells-to-CT Kit
・TaqMan Array MicroRNA Cards
・TaqMan Universal PCR Master Mix II
・Megaplex Primer Pools
・TaqMan MicroRNA RT Kit
・TaqMan MicroRNA Assays
・TaqMan Universal PCR Master Mix II
・TaqMan MicroRNA RT Kit
・mirVana miRNA mimic
・mirVana miRNA inhibitor
・Lipofectamine RNAiMAX
・TaqMan Gene Expression Cells-to-CT Kit
・TaqMan Gene Expression Assays
図28. 成熟型miRNA (Mature miRNA)の形成メカニズム 生物学的活性を持つと考えられている成熟型miRNAは活性を持たない前駆体から切り出されてきます。前駆体と成熟型で保存されている配列が、miRNAの解析を困難にしています。
図29. miRNA経路
38
mirVana miRNA Isolation Kit 組織や細胞からトータル RNAを抽出するほとんどのRNA精製法では、microRNA(miRNA)などのsmall RNAを回収できませんが、Invitrogen™ mirVana™ miRNA Isolation Kitは、miRNAを含むトータルRNAを効率的に抽出することができます。
・ miRNAを含むTotal RNAの抽出・ 最大250mgの組織からTotal RNA抽出可能・ 30分間で完了するシンプルなプロトコール
製品名 サイズ 製品番号 価格mirVana miRNA Isolation Kit <40 回 AM1560 ¥57,000
mirVana miRNA Isolation Kit (without Phenol)
<40 回 AM1561 ¥49,800
microRNA抽出キット
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan miRNA ABC Purification Kit-Human Panel A
40 回 4473087 ¥67,500
TaqMan miRNA ABC Purification Kit-Human Panel B
40 回 4473088 ¥67,500
mirVana PARIS Kit同一サンプルからのsmall RNAを含むトータル RNA、およびタンパクを抽出します。2種類のキットが1つになってSmall RNAとタンパク質を効率的に抽出できます。血清、血漿などの液体サンプルからのRNA抽出やmiRNAの解析を行う場合に最適です。
• わずか30分で同じサンプルからsmall RNAを含むトータルRNAと未変性タンパク質を抽出可能
• タンパク質と、mRNA、miRNA、siRNAの相関を調べる実験に理想的なキット
• 102 ~ 107個の培養細胞、最大100mgの哺乳動物組織から抽出可能• 200塩基以下のsmall RNAを濃縮でき、ダウンストリーム実験での感度を向上
• 血液やパラフィン包埋サンプルを除く、ほぼすべての細胞や組織サンプルからのRNA抽出に適合
血液、血清、または血漿中等の特定のmiRNAを有機溶媒やグアニジン塩を用いず、約75分程で精製できます。Human Panel A またはBが選択でき、それぞれに含まれる754の特異的 miRNAアッセイに対応する
miRNAを、Anti-miRNA oligosとコンジュゲートしたDynabeadsを用いて精製します。少量のサンプルからmiRNA発現解析用の高品質なmiRNAを回収することができます。
• 全血10µLから、血清または血漿は50µLから精製可能• 血液関連サンプル中のRT-qPCR阻害剤を容易に除去することが可能• フェノール、クロロホルム、TRIzol試薬等の有機溶媒またはグアニジン塩は不使用
• 約75分でmiRNAを精製可能
TaqMan miRNA ABC(Anti-miRNA Bead Capture)Purification Kit
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
40.00
cel-
miR
-39
hsa-
miR
-16
hsa-
let-
7a
hsa-
miR
-150
hsa-
let-
7c
hsa-
miR
-135
b
Avg
. Ct
Assay ID
expression profile—serum sample (50 µL)
製品名 サイズ 製品番号 価格mirVana PARIS Kit 40 反応 AM1556 ¥65,500
図30. TaqMan miRNA ABC Puri�cation Kit を使用した発現プロファイル(血清サンプル50µL)
図31. ABC Puri�cation Kitのワークフロー
39
microRNA用逆転写試薬
TaqMan MicroRNA RT KitApplied Biosystems™ TaqMan™ MicroRNA RT Kitは、TaqMan
MicroRNA Assays(40ページ)用の逆転写反応試薬です。TaqMan
MicroRNA Assaysに付属されているRTプライマーと組み合わせて逆転写反応を行ないます。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan MicroRNA RT Kit 200 反応 4366596 ¥27,300
1,000 反応 4366597 ¥81,800
Megaplex Primer PoolsApplied Biosystems™ Megaplex™ RT Primersは、新たに開発されたstem-looped構造の逆転写用プライマーをプールしたもので、最新のSanger miRBaseに対して網羅的なカバレッジを有しています。数百のmiRNA遺伝子のプロファイリングを一回の反応に集約し、網羅的miRNA発現解析に必要な逆転写反応とトータル RNAの量を低減することができます。Megaplex Primer Poolsは、TaqMan MicroRNA Assaysと併用することも可能です。TaqMan MicroRNA Arraysとの組み合わせにより効率的なプロファイリングワークフローを構築できます。
Megaplex PreAmp Primersでは、1ngの微量のトータル RNAからでも網羅的な発現解析が可能になります。
Megaplex RT Primers Pool(Rodent)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex RT Primers, Rodent Pool A・逆転写用プライマーのみ
50 反応 4399970 ¥97,600
Megaplex RT Primers, Rodent Pool B v3.0・逆転写用プライマーのみ
50 反応 4444292 ¥97,600
Megaplex RT Primers, Rodent Pool Set v3.0・RT Primers Pools A&B(4399970 & 4444292)
50 反応 4444746 ¥112,400
Megaplex PreAmp Primers Pool(Rodent)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex PreAmp Primers, Rodent Pool A ・PreAmp用プライマーのみ
50 反応 4399203 ¥97,600
Megaplex PreAmp Primers, Rodent Pool B v3.0・PreAmp用プライマーのみ
50 反応 4444308 ¥97,600
Megaplex PreAmp Primers, Rodent Pool Set v3.0・PreAmp Primers Pools A&B(4399203 & 4444308)
50 反応 4444747 ¥112,400
Megaplex RT Primers Pool(Human)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex RT Primers, Human Pool A・逆転写用プライマーのみ
50 反応 4399966 ¥97,600
Megaplex RT Primers, Human Pool B v3.0 ・逆転写用プライマーのみ
50 反応 4444281 ¥97,600
Megaplex RT Primers, Human Pool Set v3.0 ・RT Primers Pools A&B(4399966 & 4444281)
50 反応 4444745 ¥112,400
Megaplex PreAmp Primers Pool(Human)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex PreAmp Primers, Human Pool A ・PreAmp用プライマーのみ
50 反応 4399233 ¥97,600
Megaplex PreAmp Primers, Human Pool B v3.0 ・PreAmp用プライマーのみ
50 反応 4444303 ¥97,600
Megaplex PreAmp Primers, Human Pool Set v3.0 ・PreAmp Primers Pools A&B(4399233 & 4444303)
50 反応 4444748 ¥112,400
Megaplex RT and PreAmp Primers Package(Human)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex Primer Pools, Human Pools A ・RT Primers(4399966)・PreAmp Primers(4399233)
50 反応 4401009 ¥136,300
Megaplex Primer Pools, Human Pools B v3.0 ・RT Primers(4444281) ・PreAmp Primers(4444303)
50 反応 4444749 ¥136,300
Megaplex Primer Pools, Human Pools Set v3.0 ・RT Primers Pools A&B(4444745) ・PreAmp Primers Pools A&B(4444748)
50 反応 4444750 ¥154,500
・ TaqMan MicroRNA ArraysのAおよびBアレイに搭載されている遺伝子は、それぞれ固有のMegaplex Primer Poolsに対応しています。
Megaplex RT and PreAmp Primers Package(Rodent)製品名 サイズ 製品番号 価格Megaplex Primer Pools, Rodent Pools A・RT Primers(4399970) ・ PreAmp Primers(4399203)
50 反応 4401090 ¥136,300
Megaplex Primer Pools, Rodent Pools B v3.0・RT Primers(4444292) ・ PreAmp Primers(4444308)
50 反応 4444752 ¥136,300
Megaplex Primer Pools, Rodent Pools Set v3.0 ・RT Primers Pools A&B(4444746) ・PreAmp Primers Pools A&B(4444747)
50 反応 4444766 ¥154,500
40
TaqMan MicroRNA AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ MicroRNA
Assaysは、リアルタイム PCRでmicroRNA
(miRNA)を定量するためのアッセイです。高い特異性と高い検出感度、そして幅広いダイナミックレンジを実現します。TaqMan
MicroRNA Assaysは、前駆体 miRNAと切り出された成熟型 miRNAを区別して検出できるので、特異性の高い正確なmiRNAの定量が可能です。
・ 高い特異性特異性のある逆転写プライマーとTaqMan プローブの組み合わせにより、前駆体miRNAではなく、生物学的に活性のある成熟型miRNAを検出
・ 短時間逆転写反応とリアルタイムPCRで約3時間の反応時間で高品質のデータを検出
・ 高感度1-10ng相当のトータルRNAから測定可能
・ 幅広いダイナミックレンジ7桁ものダイナミックレンジがあり、低発現から高発現までの同一の検出系で測定可能
microRNA アッセイ
高い特異性いくつかの事例においては、TaqMan MicroRNA Assaysを用いて一塩基のミスマッチを持つmiRNA間の識別が可能であり、このことは、前駆体ではなく、生物学的に重要視され高い相同性を持つ完成型のmiRNAs
に対して、特異的な識別が可能であるということを示しています。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan MicroRNA Assays, Inventoried*・各miRNA特異的RT primer: 5X reaction mix (50 サンプル分 / 15 µL 反応系 )・各miRNA特異的TaqMan® Assay: 20X reaction mix (150 反応分 / 20 µL 反応系 )
50 サンプル・ 150 反応分
4427975 ¥33,500
TaqMan MicroRNA Assays, Made-to-Order, Small・各miRNA特異的RT primer: 5X reaction mix (50 サンプル分 / 15 µL 反応系 )・各miRNA特異的TaqMan® Assay: 20X reaction mix (150 反応分 / 20 µL 反応系 )
50 サンプル・ 150 反応分
4440886 ¥43,900
TaqMan MicroRNA Assays, Made-to-Order, Medium
750 サンプル・750 反応分
4440887 ¥88,500
TaqMan MicroRNA Assays, Made-to-Order, Large
2,900 サンプル・2,900 反応分
4440888 ¥164,600
*販売中の生物種 ヒト、マウス、ラット、Arabidopsis thaliana、Caenorhabditis elegans、 Drosophila melanogaster
Made-to-Order製品はご注文後に合成を開始する製品で、Sangerデータベース Release 16に登録されているヒト・マウス・ラット以外の生物種のmiRNAに対応しています(2011年2月現在)。
例えば、最も高い相同性(1塩基の違い)を示しているlet-7aファミリーのlet-7aとlet-7cではクロスした検出が3.7%を示していますが、その他のファミリー内でのメンバー間ではほとんどクロスした検出を示すことはありませんでした。この結果はノザンハイブリダイゼーションなどの既存の手法と比較して、非常に高い特異性を持つことを示しています。
TaqMan MicroRNA AssaysのデザインTaqMan MicroRNA Assaysの基礎となる技術は、各ターゲットmiRNAに
特異的なloop構造をもつ逆転写プライマーを用いるという革新的なデザインにあります。完成型 miRNAを特異的に認識すること、さらに、RTプライマーと完成型miRNAのキメラを作ることによりmiRNAの5'末端側の長さを延長させることが挙げられます。延長された逆転写産物は非常に高い特異性を持つTaqMan アッセイを用いたリアルタイムPCRの最適なテンプレート
(鋳型)になるため、「完成型 miRNAは短いので検出が困難である」という問題が解決されています。
TaqMan probe
Mature miRNALooped RT primer
Forward primer
Reverse primer
図32. TaqMan MicroRNA Assaysのメカニズム
Synthetic miRNA Target
miR
NA
Ass
ays
Rel
ativ
e D
etec
tion
(%)
No. of base differences
図33. 1塩基の違いを識別する能力を持つTaqMan MicroRNA Assays
Custom TaqMan Small RNA Assays
製品名 サイズ * 製品番号 価格Custom TaqMan Small RNA Assays, S
50 サンプル・150 反応
4398987 ¥56,200
Custom TaqMan Small RNA Assays,M
750 サンプル・750 反応
4398988 ¥136,300
Custom TaqMan Small RNA Assays,L
2,900 サンプル・2,900 反応
4398989 ¥288,300
*20 µLの反応系として計算
41
TaqMan Array MicroRNA CardApplied Biosystems™ TaqMan™ Array MicroRNA Cardは、TaqMan
アッセイの利点を十分に生かした、『定量性のあるアレイ』です。384ウェルのカードにTaqMan プローブとプライマーがロードされており、8つのポートからサンプルを加えて遠心するだけで、分注作業が終了します。381種類のmiRNAを1本のチューブでいっぺんに逆転写することができるMegaplex RT Primers(39ページ)を用いて作成した逆転写産物をそのままTaqMan MicroRNA Array v2.0 / v3.0に移行することができます。使用するサンプル量が少ない場合にはMegaplex PreAmp
Primersでプリアンプリフィケーションすることにより、高感度で正確な定量を行うことができます。TaqMan MicroRNA Arrays v2.0 / v3.0とMegaplex Primer Poolsの組み合わせで、Sanger miRBase の最新情報に基づいた網羅的な遺伝子発現解析を5時間足らずで簡単に行うことができます。TaqMan Arrayをご利用になるには、Applied Biosystems
7900HT、ViiA 7、QuantStudioシステムのTaqMan Arrayシステムが必要になります。
・ 生物学的意味を有するmature miRNAのみを高感度に検出・ 高度に合理化されたワークフローが逆転写のステップを削減・ ピペッティング作業を激減させることにより、スループットが向上・ ヒト、マウス、ラットをカバー
Human
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Array Human MicroRNA A Cards v2.0
4 枚 4398965 ¥227,000
TaqMan Array Human MicroRNA A+B Cards Set v3.0 ・A array (4398965) + B Array (4444910)
8 枚(各4枚)
4444913 ¥292,800
TaqMan Array Human MicroRNA B Cards v3.0
4 枚 4444910 ¥227,000
Rodent
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Array Rodent MicroRNA A Cards v2.0
4 枚 4398967 ¥227,000
TaqMan Array Rodent MicroRNA A+B Cards Set v3.0・A array (4398967) + B Array (4444899)
8 枚(各4 枚)
4444909 ¥292,800
TaqMan Array Rodent MicroRNA B Cards v3.0
4 枚 4444899 ¥227,000
図34. miRNAサンプル抽出からデータ解析までのワークフロー
MegaplexPreAmp Primers &TaqMan PreAmp
Master Mix
Diluted RTproduct
& TaqManUniversal
PCR Master Mix II
Applied BiosystemsQuantStudio 12K Flex ViiA 7 / 7900 HT Fast
リアルタイムPCR システム
MegaplexRT Primers & TaqMan
MicroRNA ReverseTranscription Kit
mirVana miRNAIsolation Kit
TaqMan miRNAABC Puri�cation Kit
RT-PCRExpression Suite
Software
42
Non-coding RNA アッセイ
TaqMan Pri-miRNA Assays で基幹的miRNA の発現を検出
TaqMan Pri-miRNA AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ Pri-miRNA Assays は、 microRNA
(miRNA)の生物学的生成過程で最も初期に生じるprimary microRNA
(Pri-miRNA)を定量するアッセイです。
microRNA“遺伝子”は、長いPri-miRNAとして転写され、 1つ以上のmicroRNAを含みます。そして核内で、Droshaと呼ばれる酵素によって、各miRNAに切り離されます。これら前駆体のmiRNAであるstem-loopは、細胞質に放出され、Dicerでプロセスされたのち、RNA
Induced Silencing Complex
(RISC)を形成します。そして成熟型 miRNAは遺伝子発現制御に働きます。
アッセイの設計と選択
Pri-miRNAは、まだ十分な解析がされていませんが、 Sanger miRBase
sequence repository で定義される独立のstem-loopの近傍にアッセイをデザインしました。これにより、目的のmiRNAを含む初期の転写産物を検出することが可能です。さらに、 TaqMan Pri-miRNA Assay と
TaqMan MicroRNA Assayを相関づけることにより、miRNAの成熟過程を独立に定量的解析することが可能となります。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Pri-miRNA Assays, S 360 反応 4427012 ¥43,900
TaqMan Pri-miRNA Assays, M 750 反応 4427013 ¥88,500
TaqMan Pri-miRNA Assays, L 2,900 反応 4427014 ¥164,600
*20 µLの反応系として計算
TaqMan Non-coding RNA Assays で未知の機能へのアプローチ
TaqMan Non-coding RNA AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ Non-coding RNA Assays は、長鎖のnon-cording 転写産物の発現を検出できる高い信頼のアッセイツールです。これらのアッセイは、TaqMan Gene Expression Assaysで実績のあるTaqMan アッセイ技術を踏襲しています。この技術を利用すれば、高い特異性と検出感度をもって、お客様の定量および検定作業に確実にお応えします。
・ 高感度、高い特異性、幅広いダイナミックレンジそして明瞭なデータ品質
・ 結果を最速で提供
・ 高い操作性と再現性
・ Non-coding RNAの転写産物のみを検出
TaqMan Non-coding RNA Assaysは、TaqMan PreAmp Master Mix
を使用したPre-Ampli�cationを組み合わせて、微量検体からの検出も可能です。
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Non-coding RNA Assays, S 360 反応 4426961 ¥43,900
TaqMan Non-coding RNA Assays, M 750 反応 4426962 ¥88,500
TaqMan Non-coding RNA Assays, L 2,900 反応 4426963 ¥164,600
*20 µLの反応系として計算
図35. microRNAの生成経路
図36. TaqMan Pri-miRNA AssaysのデザインアプローチSangerのmiRBaseに登録されているStem-loopの配列をゲノム配列上にマッピングし、その前後500塩基以内の配列上にアッセイをデザインしました。
図37. 高い特異性を持つアッセイ成熟型 hsa-miR-26の配列を共に持つmiR-26a-1とmiR-26a-2のPri-miRNA Stem-loop配列を組み込んだプラスミドを用いて実験したところ、Pri-miR-26a-2に特異的なTaqMan Pri-miRNA Assayは、hsa-miR-26a-2の配列を持つプラスミドのみ検出することが確認されました。
43
microRNA機能解析用試薬
mirVana miRNA mimic & inhibitors新たに開発されたmiRNA合成分子です。従来の製品に比べて性能が大幅に向上しており、特異性と信頼性の高いmiRNA機能解析を行うことができます。
• 低濃度の導入で 高い効果が得られる• 最新のmirBaseの情報を元にデザイン• 細胞への導入だけでなく、in vivo 実験にも使用可能 (in vivo ready 製品)• スクリーニングに便利なライブラリ製品もご用意 (ヒト用、マウス用)
mirVana miRNA mimicInvitrogen™ mirVana™ miRNA mimic は、内在性のmiRNAを模してデザインされた合成 miRNA分子です。内在性 miRNAと同様に振る舞い、細胞内の目的のmiRNAレベルを上昇させます。2本鎖の合成ヌクレオチドで、目的としないスター側配列が機能しないようにした革新的な化学修飾を持っており、より特異性の高いmiRNA 活性促進効果が得られます。
Anti-miR miRNA Inhibitor製品名 サイズ 製品番号 価格Anti-miR miRNA Inhibitor 5 nmol AM17000 ¥57,800
20 nmol(4×5 nmol)
AM17001 ¥214,200
Customer Defined Anti-miR miRNA Inhibitor
20 nmol(4×5 nmol)
AM17003 ¥214,200
Anti-miR Negative Control #1 5 nmol AM17010 ¥57,800
Cy3 Anti-miR Negative Control 5 nmol AM17011 ¥63,000
FAM Anti-miR Negative Control 5 nmol AM17012 ¥59,900
Pre-miR miRNA Precursor Molecule製品名 サイズ 製品番号 価格Pre-miR miRNA Precursor Starter Kit
1 キット AM1540 ¥98,700
Pre-miR miRNA Precursors Molecule
5 nmol AM17100 ¥57,800
20 nmol(4×5 nmol)
AM17101 ¥214,200
Customer-Defined Pre-miR miRNA Precursor
20 nmol(4×5 nmol)
AM17103 ¥214,200
Pre-miR Negative Control #1 5 nmol AM17110 ¥57,800
Pre-miR Negative Control #2 5 nmol AM17111 ¥57,800
Cy3 Pre-miR Negative Control 5 nmol AM17120 ¥65,100
FAM Pre-miR Negative Control 5 nmol AM17121 ¥59,900
Pre-miR hsa-miR-1 miRNA Precursor 5 nmol AM17150 ¥57,800
製品名 サイズ 製品番号 価格mirVana miRNA mimic 5 nmol 4464066 ¥60,900
20 nmol 4464067 ¥186,900
mirVana miRNA mimic, in vivo Ready
250 nmol 4464070 ¥535,500
Customer-Defined mirVana miRNA mimic
5 nmol 4464068 ¥102,900
20 nmol 4464069 ¥189,000
Customer-Defined mirVana miRNA mimic, in vivo Ready
250 nmol 4464071 ¥535,500
mirVana miRNA mimic Negative Control #1
5 nmol 4464058 ¥59,900
20 nmol 4464059 ¥182,700
mirVana miRNA mimic Negative Control #1, in vivo Ready
50 nmol 4464060 ¥262,500
250 nmol 4464061 ¥525,000
mirVana miRNA mimic miR-1 Positive Control
5 nmol 4464062 ¥59,900
20 nmol 4464063 ¥182,700
mirVana miRNA mimic miR-1 Positive Control, in vivo Ready
50 nmol 4464064 ¥262,500
250 nmol 4464065 ¥525,000
mirVana miRNA mimic ライブラリ(mirBase v 20)※
0.25 nmol each
4464074 お問い合わせ
1 nmol each
4464075 お問い合わせ
※2015年6月現在
製品名 サイズ 製品番号 価格mirVana miRNA inhibitor 5 nmol 4464084 ¥60,900
20 nmol 4464085 ¥186,900
mirVana miRNA inhibitor, in vivo Ready
250 nmol 4464088 ¥535,500
Customer-Defined mirVana miRNA inhibitor
5 nmol 4464086 ¥102,900
20 nmol 4464087 ¥189,000
Customer-Defined mirVana miRNA inhibitor, in vivo ready
250 nmol 4464089 ¥535,500
mirVana miRNA inhibitor Negative Control #1
5 nmol 4464076 ¥59,900
20 nmol 4464077 ¥182,700
mirVana miRNA inhibitor Negative Control #1 , in vivo Ready
50 nmol 4464078 ¥262,500
250 nmol 4464079 ¥525,000
mirVana miRNA inhibitor let-7 Positive Control
5 nmol 4464080 ¥59,900
20 nmol 4464081 ¥182,700
mirVana miRNA inhibitor ライブラリ(mirBase v 20)※
0.25 nmol each
4464092 お問い合わせ
1 nmol each
4464093 お問い合わせ
※2015年6月現在
mirVana miRNA inhibitorInvitrogen™ mirVana™ miRNA inhibitorは、内在性のmiRNAを特異的に阻害するようにデザインされた合成分子です。細胞内の目的とするmiRNA活性を阻害し、miRNAレベルを低下させます。1本鎖のオリゴヌクレオチドで、新規の化学修飾を持つことでより高い抑制効果を発揮します。
miRNA導入用試薬については、36ページをご覧ください。• Lipofectamine RNAiMAX
• Invivofectamine 3.0
44
SNP解析
検出原理
TaqMan アッセイを用いたSNP解析では、異なる蛍光色素で標識されたアレル特異的な2種類のTaqManプローブとその領域を増幅するようにデザインされたプライマーを作成します。TaqManプローブの5'末端はレポーターの蛍光色素(VIC dyeやFAM
dye)で標識され、3'末端にはクエンチャー(Q)が結合しています。レポーターの蛍光色素はクエンチャーが近接する状態では検出されませんが、PCRにおいてDNAポリメラーゼのエキソヌクレアーゼ活性により
™
図38. TaqMan アッセイを用いたSNP解析の原理
図39. タイピング例Allele1用のTaqManプローブが機能した場合 VICの蛍光、Allele2用のTaqManプローブが機能した場合 FAMの蛍光が検出されます。横軸にVICの蛍光強度、縦軸にFAM の蛍光強度の相対値をとると、それぞれAllele1のホモ郡、Allele2のホモ群、Allele1、2のヘテロ群というように空間的に分かれてプロットされます。
プローブが分解されることで検出され、検出される蛍光の種類によりアレルを識別することができます。VIC dye、またはFAM dyeのみが検出されればそれぞれのホモ接合型、両方が検出されればヘテロ接合型ということになります。TaqMan SNP Genotyping Assayの増幅領域は、通常100塩基程度であるため、断片化したDNAに対する適用性が高いという特徴があります。
45
SNPジェノタイピングアッセイ
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping AssaysApplied Biosystems™ TaqMan™ SNP Genotyping Assaysは、SNP
タイピング用のプローブとプライマーのセットです。高い再現性をもち、簡便な手法によりSNPをタイピングすることができます。450万種類を超えるヒトのアッセイと約1万種類のマウスのアッセイの中から、遺伝子名やSNP ID等より簡単に目的のアッセイを検索することができます。
ヒトSNPジェノタイピングアッセイラインナップ
・ アミノ酸置換に関わる機能cSNP:約7万種類・ 頻度解析がなされているマーカー SNP:約16万種類・ 国際ハップマッププロジェクト解析済みSNP:約350万種類・ 薬物代謝およびトランスポーター遺伝子の機能SNP:約2600種類
Human
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays, (Human, non-Inventried) Small scale
300 反応 1,500 反応
4351379 ¥59,600
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays, (Human, non-Inventried) Medium scale
1,000 反応5,000 反応
4351376 ¥107,900
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays, (Human, non-Inventried) Large scale
2,400 反応 12,000 反応
4351374 ¥208,900
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
non-Human
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays (Non-Human non-Inventoried) Small scale
300 反応 1,500 反応
4351384 ¥59,600
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays (Non-Human non-Inventoried) Medium scale
1,000 反応5,000 反応
4351382 ¥107,900
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays (Non-Human non-Inventoried) Large scale
2,400 反応 12,000 反応
4351380 ¥208,900
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
Custom TaqMan SNP Genotyping AssaysApplied Biosystems™ Custom TaqMan™ SNP Genotyping Assaysは、いかなる生物種のSNPにも対応可能なカスタムメイドのSNPタイピング試薬です。目的のSNP近傍配列から最適なSNPタイピング試薬をデザイン・合成いたします。SNPの他にも、挿入欠失(6塩基まで)や複数塩基の置換(MNP)にも対応可能です。ヒトSNPの場合にはゲノムサンプルを用いた機能テストを行います。
Human
製品名 サイズ * 製品番号 価格Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, S-scale, Human
300 反応 1,500 反応
4331349 ¥65,900
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, M-scale, Human
1,000 反応5,000 反応
4332072 ¥124,900
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, L-scale, Human
2,400 反応 12,000 反応
4332073 ¥249,700
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
non-Human
製品名 サイズ * 製品番号 価格Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, S-scale, non-Human
300 反応 1,500 反応
4332077 ¥65,900
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, M-scale, non-Human
1,000 反応5,000 反応
4332075 ¥124,900
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays, L-scale, non-Human
2,400 反応 12,000 反応
4332076 ¥249,700
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays薬物代謝酵素および薬物輸送タンパク質をコードする約220遺伝子の多型を対象としたタイピング用試薬です。2,000以上のアッセイの中から、任意のアッセイをお選びいただけます。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays
150 反応750 反応
4362691 ¥67,000
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
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SNPジェノタイピング用試薬
SNPタイピングのゴールドスタンダード
TaqMan Genotyping Master MixApplied Biosystems™ TaqMan™ Genotyping Master Mixは、リアルタイム PCRを利用したジェノタイピング専用のマスターミックスです。GC
やAT含量の高いテンプレートにおいても高いパフォーマンスが得られます。またTaqMan™ Universal Master Mixのプロトコールをそのまま使用することができます。
・ 高い再現性とタイトなクラスタリング・ GCやAT含量の高いターゲットに対する高いパフォーマンス・ 試薬分注後、72時間室温で安定
TaqMan Genotyping Master Mix製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Genotyping Master Mix, 1 mL
80 反応400 反応
4371353 ¥15,800
TaqMan Genotyping Master Mix,10 mL
800 反応4,000 反応
4371355 ¥129,300
TaqMan Genotyping Master Mix, 10 mL × 2
1,600 反応8,000 反応
4381656 ¥247,200
TaqMan Genotyping Master Mix, 50 mL
4,000 反応20,000 反応
4371357 ¥561,800
TaqMan Genotyping Master Mix, 50 mL × 2
8,000 反応40,000 反応
4381657 ¥1,089,800
TaqMan Genotyping Master Mix プロトコール
1 冊 4371131 無償
TaqMan Genotyping Master Mix クイックリファレンスカード
1 冊 4371130 無償
*上段25 µL、下段5 µL反応系として計算
図40. TaqMan Genotyping Master Mixを用いたGC-rich領域における一貫性と信頼性の高いジェノタイピングTaqMan Genotyping Master Mixを使 用した94サンプ ル(gDNA)での 実 験 例。TaqMan SNP Assay :C__12050942_10を 用 い て、PCRはGeneAmp PCR System 9700で、プレートリードは7900HTリアルタイム PCRシステムを使用しました。ターゲットはGC-richであるCatjespin D遺伝子のrs12214(dbSNP)です。
Fastモードでの高速 SNPタイピングには
TaqMan GTXpress Master Mix
Applied Biosystems™ TaqMan™ GTXpress™ Master MixはFast PCR対応のSNPジェノタイピング専用マスターミックスです。 SNP解析に至適化された TaqManマスターミックスです。
・PCR反応が50分以内でも、データの信頼性はスタンダードPCRと同等
・ 最大50サイクルまで再増幅可能・ 室温での温度安定性が向上・ “Tracking Dye”の採用により、マスターミックス溶液が青色なので確実に分注可能
・スタンダードモードにも対応可能
表9. システム別 PCR反応条件
TaqMan GTXpress Master Mix製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan GTXpress Master Mix, 1 mL
80 反応200 反応400 反応
4403311 ¥15,800
TaqMan GTXpress Master Mix, 10 mL
800 反応2,000 反応4,000 反応
4401892 ¥129,300
TaqMan GTXpress Master Mix, 50 mL
4,000 反応10,000 反応20,000 反応
4401890 ¥561,800
TaqMan GTXpress Master Mix, 100 mL(2 × 50 mL)
8,000 反応20,000 反応40,000 反応
4401857 ¥1,089,800
*PCR反応容量上段 96ウェル(Standard Block,0.2 µL):25 µL中断 96ウェル(Fast Block,0.1 µL):10 µL下段 384ウェル :5 µL
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サンプルからSNPタイピングまでをワークフロー化
TaqMan Sample-to-SNP KitApplied Biosystems™ TaqMan™ Sample-to-SNP™ Kitは、サンプルからのゲノム DNA抽出、TaqManアッセイを用いたSNPジェノタイピング解析までを、1つの製品で行えるキットです。キットはゲノム DNA抽出試薬と、Fast PCR対応のジェノタイピング専用マスターミックスである“TaqMan GTXpress Master Mix”で構成されています。このキットを使うと、サンプルからのゲノム DNA抽出に5分、PCR反応は50分以内で終了するので、サンプルからSNPジェノタイピング解析までが1時間以内で完了します。
・ 全血 / FTAカード塗布血液 / 細胞 / 組織 / Buccal swab / Rat・Mouse tail / Leaf punch / 種子 / FFPE組織切片など、あらゆるサンプルに対応
・ ゲノムDNA抽出は室温または95℃で3分インキュベートするだけで、DNA定量不要で規定量をPCR反応するだけの簡単操作
・ Fast PCR対応のTaqMan GTXpress Master Mixを採用しているので、ジェノタイピングPCR反応を50分以内に短縮可能
A. Buccal swab, B. Mouse tail, C. Corn leaf, D. FFPE組織切片
図42. TaqMan Sample-to-SNP KitのSNP ジェノタイピング例
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Sample-to-SNP Kit 5 mL sample prep, 1 mL PCR
DNA調製: 100 反応 PCR反応: 80 反応
4403313 ¥38,200
TaqMan Sample-to-SNP Kit 20 mL sample prep, 10 mL PCR
DNA調製: 400 反応 PCR反応: 800 反応
4403083 ¥202,300
TaqMan Sample-to-SNP Kit 20 mL sample prep, 50 mL PCR
DNA調製: 400 反応 PCR反応:4,000 反応
4403087 ¥618,000
TaqMan Sample-to-SNP Kit 200 mL sample prep, 10 mL PCR
DNA調製:4,000 反応PCR反応: 800 反応
4403081 ¥629,200
* PCR反応容量:25 µL
図41. TaqMan Sample-to-SNP Kitのワークフロー
詳細は、www.lifetechnologies.com/taqmanjpのSNP解析用試薬 /
キットをご覧ください。
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わずかな変異も検出
TaqMan Mutation Detection Assays
Applied Biosystems™ TaqMan™ Mutation Detection Assaysは、Competitive Allele-Speci�c TaqMan PCR (castPCR)テクノロジーをベースにデザインされています。アレル特異性の高いMGBブロッカーオリゴにより、ターゲット外の非特異的な反応を抑制することに成功し、わずかな変異でも検出が可能になりました。
• 高感度検出 0.1から1%までの変異アレルを検出可能
• 高い特異性 ワイルドタイプを抑制し、特異的に変異を検出可能
• 幅広いダイナミックレンジ 対数7ケタにおよぶ広範囲な検出が可能
• 迅速でシンプルなワークフロー シンプルで使い易く、約3時間で結果を入手
• 1アッセイ毎に購入可能 必要な遺伝子・変異のみ購入可能
表10. TaqMan Mutation Detection Assayのタイプ
アッセイのタイプ
説明 模式図
Mutant Allele Assay
• 特定の変異型アレルを検出します。(EGFR_exlqdels_mu*は19種類の変異を検出)
• アレル特異的プライマーが変異型アレルを検出します。
• MGBブロッカーオリゴスクレオチドが野生型アレルを抑えます。
ASP = 対立遺伝子特異的プライマーASB = 対立遺伝子特異的ブロッカー(MGB)LST = 遺伝子特異的TaqManプローブLSP = 遺伝子特異的プライマー
Wild type Allele Assay
• 野生型アレルを検出します。• アレル特異的プライマーが野生型アレルを検出します。
• MGBブロッカーオリゴヌクレオチドが変異型アレルを抑えます。 ASP = 対立遺伝子特異的プライマー
ASB = 対立遺伝子特異的ブロッカー(MGB)LST = 遺伝子特異的TaqManプローブLSP = 遺伝子特異的プライマー
Gene Reference Assay
• 変異を含む遺伝子を検出します。• 遺伝子特異的なプライマーペアで遺伝子内の変異のない領域を増幅します。 FP = フォワードプライマー
RP = リバースプライマーLST = 遺伝子特異的TaqManプローブ
MGB: マイナーグルーブバインダーASB: アレル特異的ブロッカー(MGB)FP: フォワードプライマー RP: リバースプライマー
ASP: アレル特異的プライマーLST: 遺伝子座特異TaqManプローブLSP: 遺伝子座特異的プライマー
変異があるかどうかを見たい(定性)
変異がどれくらいあるのかを見たい(定量)
EGFR exon19のいずれかのdeletion変異があるかどうかを見たい(定性)
見たい遺伝子のReference Assayと、見たい変異の数のMutant Assay
見たい変異のWild type AssayとMutant Assay
EGFR のReference Assay と、EGFR のExon19 Deletion Assay
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Mutation Detection Assays (46遺伝子778アッセイから選択)** 150 µL 75 反応 4465804 ¥90,800
TaqMan EGFR Exon 19 Deletions Assay 1遺伝子(EGFR)19変異のパッケージ(1)** 150 µL 75 反応 4465805 ¥90,800
TaqMan Mutation Detection Reference Assays 46遺伝子から選択 ** 150 µL 75 反応 4465807 ¥56,200
TaqMan Mutation Detection IPC Reagent Kit 1 kit 500 反応 4467538 ¥31,800
*20 µLの反応系として計算 **ウェブオーダー
変異解析
表11 . アッセイ組み合わせ
Mutation Detectorソフトウェア(無償)TaqMan Mutation Detection Assayで得られたデータを専用のソフトウェアを用いて解析します。
遺伝子数、アッセイ数は2015年6月現在の情報です。随時リストは更新されておりますので、最新のアッセイ一覧は、www.lifetechnologies.comのTaqMan Mutation Detection Assays 製品ページをご覧ください。
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コピー数多型解析
TaqMan Copy Number Assaysゲノム構造変化に起因して起こるコピー数多型(Copy Number
Variations, CNVs)は、近年疾患との関連性や薬剤応答性との関連が指摘されつつあります。これを受けてゲノムワイドにCNVsを探索する手法が開発され、世界中の 研究者の努力の成果としてデータベースが構築され、日々情報が更新されています。しかし一方で、誰もが定量的に多くの検体のターゲットCNVsをバリデー ションできる技術は、これまでそれほど多く存在しませんでした。Applied Biosystems™ TaqMan™ Copy
Number Assaysは、CNVsバリデーションに適した製品で、ヒト用にデザインされた160万種以上のTaqManプローブとプライマーのセットです。ターゲットCNVs用のTaqMan Copy Number Assaysと、内部コントロールとなるTaqMan Copy Number Reference Assaysを用いて、リアルタイム PCR装置にてコピー数を3 ~ 4時間で決定することができます。
• リアルタイムPCRシステムを使用したシンプルなワークフローで、ゲノムDNAから3 ~ 4時間でコピー数を決定
• ヒト用160万種以上の遺伝子を含むゲノム領域のコピー数を決定するための、デザイン済みCopy Numberバリデーション用プローブとプライマーセットをご用意
• 高い特異性と再現性を持ち、4コピー以上のコピー数が決定可能
製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Copy Number Assays, Small
360 assays 720 assays
4400291 ¥50,700
TaqMan Copy Number Assays, Medium
750 assays 1,500 assays
4400292 ¥96,600
TaqMan Copy Number Assays, Large
2,900 assays5,800 assays
4400293 ¥181,600
*上段20 µL反応、96ウェルプレート、下段10 µL反応、384ウェルプレートで計算
Custom TaqMan Copy Number AssaysApplied Biosystems™ Custom TaqMan™ Copy Number Assaysは、当社独自のアルゴリズムを用いて、ヒト用デザイン済みTaqMan Copy
Number Assays以外のゲノム領域や、ヒト以外の生物種のCNVsアッセイを行うためのプローブとプライマーのカスタム合成サービスです。GeneAssist™ Copy Number Assay Toolに目的の塩基配列を入力するだけの簡単な操作で、高い特異性と再現性を持つCNVsアッセイをご利用いただけます。
製品名 サイズ * 製品番号 価格Custom TaqMan Copy Number Assays, Small
360 assays720 assays
4400294 ¥56,200
Custom TaqMan Copy Number Assays, Medium
750 assays1,500 assays
4400295 ¥110,200
Custom TaqMan Copy Number Assays, Large
2,900 assays5,800 assays
4400296 ¥204,300
*上段20 µL反応、96ウェルプレート、下段10 µL反応、384ウェルプレートで計算
CopyCaller ソフトウェアTaqMan Copy Number Assays専用解析ソフトウェアです。使いやすいインターフェースで、数秒で解析結果を視覚化します。Applied
Biosystems™ CopyCaller™ ソフトウェアは、弊社ホームページより無償ダウンロードできます。www.lifetechnologies.com/CopyCaller
TaqMan Copy Number Reference Assays Applied Biosystems™ TaqMan™ Copy Number Reference Assaysは、TaqMan Copy Number AssaysまたはCustom TaqMan Copy Number
Assaysのヒト用コントロールで、反応時に反応溶液中に混合して使用します。第一選択としてはRNase Pを推奨しており、Ribonuclease P RNA
component H1 (H1RNA) gene (RPPH1) on chromosome 14, cytoband
14q11.2をターゲットにデザインされています。TERTはRNase Pの代替的な位置付けの製品で、telomerase reverse transriptase (TERT) gene
located on chromosome 5, cytoband 5p15.33をターゲットにデザインされています。
Human製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Copy Number Reference Assay, RNase P
750 assays1,500 assays
4403326 ¥20,500
3,000 assays6,000 assays
4403328 ¥57,900
TaqMan Copy Number Reference Assay, TERT
750 assays1,500 assays
4403316 ¥20,500
3,000 assays6,000 assays
4403315 ¥57,900
Mouse製品名 サイズ * 製品番号 価格TaqMan Copy Number Reference Assay, TFRC
750 assays1,500 assays
4458366 ¥20,500
3,000 assays6,000 assays
4458367 ¥57,900
TaqMan Copy Number Reference Assay, TERT
750 assays1,500 assays
4458368 ¥20,500
3,000 assays6,000 assays
4458369 ¥57,900
*上段20 µL反応、 96ウェルプレート、下段10 µL反応、384ウェルプレートで計算
Custom Plus TaqMan Copy Number AssaysApplied Biosystems™ Custom Plus TaqMan™ Copy Number Assays
は、ヒトおよびマウスにのみ対応した製品で、Custom TaqMan Copy
Number Assaysでは行わない、公共ゲノム情報を参照することで、デザイン上避けるべきSNPおよび繰返し配列を除外した配列からTaqMan
アッセイをデザインするサービスが付加されており、プレデザインTaqMan Copy Number Assaysが準備されていない領域でも、同等品質のアッセイをデザインできます。
製品名 サイズ * 製品番号 価格Custom Plus TaqMan Copy Number Assays, Small
360 assays720 assays
4442487 ¥56,200
Custom Plus TaqMan Copy Number Assays, Medium
750 assays1,500 assays
4442520 ¥110,200
Custom Plus TaqMan Copy Number Assays, Large
2,900 assays5,800 assays
4442488 ¥204,300
*上段20 µL反応、96ウェルプレート、下段10 µL反応、384ウェルプレートで計算
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High Resolution Melt (HRM)解析
MeltDoctor HRM マスターミックスHigh Resolution Melting(HRM)解析は、核酸配列の遺伝的バリエーションを同定するのに使われるポストPCR解析技術です。MeltDoctor HRM
マスターミックスは、テンプレートとプライマー以外の全ての試薬が含まれ、多様なゲノミックターゲットに優れたパフォーマンスを示すように設計されています。
・ 低バックグラウンド・高輝度そして耐熱性に優れた蛍光色素“SYTO 9”の採用
・ 蛍光色素の結合によるDNAのTm値の変動を最小化・PCR中の温度安定性も向上
・ dUTPを含むdNTPの使用で、PCR産物のキャリーオーバーを防止
ステップ 1:装置のキャリブレーション *
ステップ 5:データ解析
HRMの蛍光色素とバックグラウンドのキャリブレーションを行います
*Only required once
every six months
ステップ 2:PCRの準備
プライマーの設計を行い、必要に応じて PCR条件の最適化を行います
ステップ 3:PCR
PCR増幅を行います。ステップ 3~ 5はリアルタイムPCRを使った場合の一連の操作となります
ステップ 4:HRM解析
リアルタイム PCRで融解曲線を描きます
融解曲線のデータを解析します
見えなかったものが見えてきたHigh Resolution Melting (HRM)解析は、核酸配列の遺伝的バリエーションを同定するのに使われるポストPCR解析技術です。目的の領域をPCR増幅した後に、そのPCR産物の解離曲線を描くことで、そこに含まれる変異により解離曲線が変形することを利用した、簡便で迅速な検出法です。すべての試薬がプレミックスになった “Applied Biosystems™ MeltDoctor™
HRM マスターミックス”といかなるターゲットにも対応できる “MeltDoctor
HRM 試薬キット”で新しいゲノムスキャニングが可能となります。
注意:HRM対応リアルタイムPCRシステムにつきましては、弊社営業担当者にお問い合せください。
本製品の使用には、キャリブレーション試薬、HRM解析ソフトウェアなどの設定が必要になります。
図43. HRM解析ワークフロー
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MeltDoctor HRM マスターミックス つづき
• マグネシウムやその他のバッファー 最適なHRM解析ができるよう厳密な濃度に調製されています。
• AmpliTaq Gold 360 DNA Polymerase 精製度の高いDNAポリメラーゼで、ホットスタート機能を持つために、非特
異的なPCR増幅を極限まで回避するのと同時に、室温でのサンプル調製を可能にしました。
• MeltDoctor HRMの蛍光色素 2本鎖DNAに選択的に結合して強い蛍光を発する“SYTO 9”を採用しました。
製品名 サイズ * 製品番号 価格MeltDoctor HRM マスターミックス 5 mL
500 反応 4415440 ¥41,000
MeltDoctor HRM マスターミックス 5 × 5 mL
2,500 反応 4415452 ¥189,000
MeltDoctor HRM マスターミックス 10 × 5 mL
5,000 反応 4415450 ¥357,000
MeltDoctor HRM マスターミックス 50 mL
5,000 反応 4409535 ¥336,000
*20 µLの反応系として計算
図44. 当社のHRM ワークフローによる変異のスキャン3種類の細胞株(HeLa, Raji, and Jurkat)由来のゲノミックDNAをサンプルとして、HRM 解析を行った後、シーケンス解析を行いました。プライマーはp53ガン抑制遺伝子の第4エクソン上に152bpのPCR産物が生じるように設計し、3種類のジェノタイプが明瞭に区別されました。(上図)HRM解析後、各サンプルのジェノタイプ(GC, GG, CC) は、シーケンス解析によって同定しました。HRM は、MeltDoctor HRMマスターミックスを使用して、Applied Biosystems 7500 Fast リアルタイム PCRシステムとApplied Biosystems HRM Software v2.0にて解析しました。シーケンス解析はHRM解析でのPCR産物を希釈して、BigDye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit にてシーケンス反応を行い、Applied Biosystems 3130 ジェネティックアナライザにて解析を行いました。
MeltDoctor HRM 試薬キットMeltDoctor HRM 試薬キットは、HRM解析に必要なPCR試薬と蛍光色素が個々のチューブに入っており、各アプリケーションに柔軟に対応することができます。
製品名 サイズ 製品番号 価格MeltDoctor HRM 試薬キット 1 キット(500 units) 4425557 ¥50,400 ・ AmpliTaq Gold 360 DNA Polymerase・ GeneAmp dNTP Blend・ MeltDoctor HRM Dye
MeltDoctor HRM ポジティブコントロールキットApplied Biosystems™ MeltDoctor HRMポジティブコントロールキットは、プライマーセットと3つのジェノタイプ(AA, AB, BB)を示す3種類のDNAテンプレートが含まれます。主にデモンストレーションやトラブルシューティングに使用します。
製品名 サイズ 製品番号 価格MeltDoctor HRM ポジティブコントロールキット
1 キット(450 反応) 4410126 ¥42,000
MeltDoctor HRM キャリブレーション試薬Applied Biosystems™ MeltDoctor™ HRMキャリブレーションプレートは、キャリブレーションに必要な試薬が分注されたプレートです。プレートタイプは、96ウェル Fastタイプと384ウェルタイプの2種類です。MeltDoctor HRM キャリブレーションスタンダードは、DNAテンプレート・プライマーおよび蛍光色素のプレミックスになっています。
製品名 サイズ 製品番号 価格MeltDoctor HRM キャリブレーション プレート、96ウェル Fast
1 枚 4425618 ¥52,500
MeltDoctor HRM キャリブレーション プレート、384ウェル
1 枚 4425559 ¥52,500
MeltDoctor HRM キャリブレーション スタンダード(20×)
1 mL 4425562 ¥42,000
HRMソフトウェアHRMソフトウェアは、HRM解析のために開発された専用ソフトウェアです。お使いのリアルタイム PCRシステムによってバージョンが異なります。詳しくは弊社ホームページをご覧ください。www.lifetechnologies.com/hrm
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ポリクローナル抗体または抗体ペアを用いて独自のTaqMan Protein Assaysを構築
図45. TaqMan Protein Assays原理
タンパク質発現解析
3末端オリゴ
5末端オリゴ
エピトープ1 エピトープ2
コネクター
化変量現発対相
サイクル数
度強光蛍
高濃度
中濃度
低濃度
バックグラウンド
Prepare Sample 30 min Binding 60 min
Ligation/Inactivation
25 min TaqMan® FastReal-Time PCR
40 min Data Analysis
市販または自家調製抗体
SA-オリゴA
アッセイプローブA
アッセイプローブB
SA-オリゴB
Build Your Assay 90 min
ビオチン - ストレプトアビジン結合により、目的タンパク質に特異的なビオチン化抗体が、ストレプトアビジンオリゴヌクレオチドと結合します。• TaqMan Protein Assay Open Kit
オリゴヌクレオチドプローブが「コネクター」オリゴヌクレオチドとハイブリダイズします。これによりオリゴヌクレオチドプローブ同士が一列に並び、オリゴヌクレオチドプローブ同士をDNAリガーゼによりライゲーションします。その後、プロテアーゼ処理でリガーゼを失活させます。• TaqMan Protein Expression Core
Reagents Kit with Master Mix
未精製の細胞ライセートを直接使用するので、タンパク質精製の必要はありません。培養細胞サンプルには下記の製品をご使用ください。• Protein Quant Sample Lysis Kit• Protein Expression Sample Lysis Kit
組織細胞には下記の製品をご使用ください。• Ambion PARIS Kit
Universal TaqMan Assay(PCRプライマーとTaqManプローブのセット)を用いてライゲーションされたオリゴヌクレオチドプローブを増幅・検出します。• リアルタイム PCRシステム
サンプルライセートとTaqMan Protein
Assayを混合します。抗体がターゲットタンパク質に結合し、オリゴヌクレオチド同士が接近します。• TaqMan Protein Assay Open Kit 独自のアッセイが構築可能• TaqMan Protein Assay Kit特定のターゲットタンパク質に対応した既成のアッセイ
単一のプラットフォームでタンパク質と核酸を相対定量し、タンパク質発現とmRNA
またはmiRNAとの相関性を評価します。• ProteinAssist Software v1.0
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TaqMan Protein Assays
Applied Biosystems™ TaqMan™ Protein Assays は、TaqMan 5’ヌクレアーゼ技術を応用してタンパク質の発現量を定量するためのアッセイ試薬です。この技術によりmRNAやmiRNAとタンパク質の発現量の相関を直接的に解析することが可能になりました。
• 少量サンプルから検出可能 アッセイあたり500細胞以下
• 高感度な検出能 低発現のタンパク質も検出
• シンプルワークフロー ステップの細胞溶解と洗浄ステップが不要
• 迅速な定量 細胞から4時間以内に結果が得られる
• 高い再現性 • 定量的
TaqMan Protein Expression Core Reagents Kit with Master Mix
Applied Biosystems™ TaqMan™ Protein Expression Core Reagents
Kit with Master Mixアッセイ技術を応用してタンパク質の発現量を定量する際に必要な希釈バッファー、リアルタイム PCR用プライマー・プローブ、マスターミックスが含まれています。TaqMan Protein Assays KitもしくはTaqMan Protein Assays Open Kitとともに使用します。
• TaqMan Protein Assay Core Reagent Base Kit
DNA Ligase, Protease, Ligase 希釈バッファー、リアルタイム PCR用のプライマー / プローブが含まれています。
• TaqMan Protein Assays Fast Master Mix
酵素濃度、イオン強度、pHをプロテインアッセイでの使用を想定して、PCR効率と特異性を最大化できるように最適化したマスターミックスです。
製品名 サイズ 製品番号 価格 TaqMan Protein Assay Kit (hCSTB) 100 反応 4405465 ¥63,600
TaqMan Protein Assay Kit (hICAM1) 100 反応 4405471 ¥63,600
製品名 サイズ 製品番号 価格 TaqMan Protein Expression
Core Reagents Kit with Master Mix100 反応 4405501 ¥65,900
・TaqMan Protein Expression Core Reagents Base Kit (4405460)・TaqMan Protein Assays Fast Master Mix (4400088)
TaqMan Protein Expression Core Reagents Kit with Master Mix
500 反応 4448591 ¥193,000
・TaqMan ProteinExpression Core Reagents Base Kit (4448592)・TaqMan Protein Assays Fast Master Mix (4448616)
TaqMan Protein Assays Core Reagents Base Kit
100 反応 4405460 ¥54,500
500 反応 4448592 ¥156,700
TaqMan Protein Assays Fast Master Mix
100 反応 4400088 ¥22,700
500 反応 4448616 ¥63,600
TaqMan Protein Assays Kit (hESC用抗体付きオリゴ)
Applied Biosystems™ TaqMan™ Protein Assays Kit は、偏在して発現しているタンパク質(hICAM1 とhCSTB)を検出する標的タンパク質特異的抗体を付加したオリゴヌクレオチドです。
TaqMan Protein Assay Open Kit
Applied Biosystems™ TaqMan™ Protein Assay Open Kitは、お客様の抗体を使用してTaqMan Protein Assay プローブを作成する試薬です。ビオチン化された抗体をご用意いただき、その抗体にストレプトアビジンラベルのオリゴヌクレオチドを添加し、2種類の抗体-オリゴヌクレオチドのアッセイプローブを作成します。この複合体に対して、 TaqMan PCR
アッセイ技術を応用して、タンパク質の発現量を定量します。この技術により、mRNAやmiRNAとタンパク質の発現量の相関を直接的に解析することが可能です。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan Protein Assays Open Kit・TaqMan Protein Assays Oligo Probe Kit・TaqMan Protein Assays Buffer Kit
4,000 反応 4453745 ¥145,400
TaqMan Protein Assays Oligo Probe Kit・5'Prox-Oligo 200 nM, 50 µL・3'Prox-Oligo 200 nM, 50 µL
4,000 反応 4448549 ¥61,400
TaqMan Protein Assays Buffer Kit・Antibody Dilution Buffer, 1 mL・Assay Probe Strage Buffer, 1 mL・Assay Probe Dilution Buffer, 7 mL・Lysate Dilution Buffer, 25 mL
4,000 反応 4448571 ¥94,300
54
Protein Expression Sample Preparation Kit
非イオン性界面活性剤を使用して細胞を溶解するキットです。このキットは、この他の精製ステップを必要としません。粗精製のサンプルをTaqMan Protein Assay Kit またはTaqMan Protein Assay Open Kit のアッセイプローブペアと直接混合することで、ターゲットタンパク質と結合させることができます。このキットは、10,000 ~ 50,000細胞程度の少数の細胞の溶解に用います。キャリアタンパクを溶解溶液中に含むので、全タンパク量を測定することができないため、データの標準化はサンプル細胞数で行います。
Protein Quant Sample Lysis Kit50,000細胞以上のサンプルを溶解するキットで、全タンパク質の量を測定することができます。そのため全タンパク質の量でデータを標準化することができます。
表12. 各サンプルプレップキットの比較Protein Expression Sample Preparation Kit
Protein QuantSample Lysis Kit
サンプルタイプ 哺乳類の培養細胞サンプルサイズ 10,000 ~ 50,000 細胞 50,000 細胞以上Lysis 試薬にキャリアタンパク含有の有無
Yes No
TaqMan Protein Assays のデータの標準化に使うパラメーター
細胞数 細胞数または全タンパク量
推奨する溶解細胞濃度 500 cells/µL 2,500 cells/µLTaqMan Protein Assayで必要な希釈
1:2 1:10
Protein Expression Lysate Control KitsApplied Biosystems™ TaqMan™ Protein Expression Lysate Control
Kitsのポジティブコントロールライセートです。Protein Expression
Lysate Control Kit(Raji)では、 hCSTB とhICAM1タンパク質を検出することができます。
製品名 サイズ 製品番号 価格Protein Expression Sample Prep Kit (cell counting)
1,000 反応 4405443 ¥81,800
Protein Quant Sample Lysis Kit (cell counting or total protein quant)
25 mL 4448536 ¥31,800
製品名 サイズ 製品番号 価格Protein Expression Lysate Control Kit (Raji)
100 反応 4405448 ¥68,100
ProteinAssist ソフトウェアApplied Biosystems™ TaqMan™ ProteinAssist ソフトウェア専用無償解析ソフトウェアです。使いやすいインターフェースで簡単に結果を得ることができます。ProteinAssist ソフトウェアは弊社ホームページより
ダウンロードできます。www.appliedbiosystems.com/proteinassist
タンパク質発現解析
55
タンパク質解析をリアルタイムPCRシステムを使って、さらに便利に
Protein Thermal Shift ソフトウェア・試薬Applied Biosystems™ Protein Thermal Shift™ ソフトウェア・試薬は、タンパク質熱安定性のハイスループット解析に最適なソフトウェアと試薬です。遺伝子発現解析で広く実績のあるリアルタイム PCR システムを使用することで、タンパク質の解析がさらに便利になりました。今まで時間がかかっていた大量サンプルの準備や、煩わしいテンプレートのセットアップ・グラフの作成を、素早く直感的に行うことができます。
• 簡単な作業 サンプルと試薬を混ぜてリアルタイムPCR システムにセットするだけ
• 直感的な操作 短時間で結果を提供
• 低価格 魅力的なコストパフォーマンス
1 サンプル約10 円 *
• 大量サンプル処理 各リアルタイムPCRシステムに対応した48 ウェル、96 ウェル、384 ウェルプレートを用いて大量のタンパク質サンプルのハイスループット解析が可能
* 試薬コスト(1 ウェルあたり)
製品名 サイズ 製品番号 価格Protein Thermal Shift ソフトウェア バージョン1.0
10 ライセンス 4466037 ¥513,600
Protein Thermal Shift 追加ライセンス
1 追加ライセンス 4466038 ¥256,800
Protein Thermal Shift Dye Kit
2,000 反応 4461146 ¥21,400
Protein Thermal Shift Starter Kit
2,000 反応 + 100 コントロール反応
4462263 ¥49,500
対応機種StepOne /StepOnePlus、7500 / 7500 Fast QuantStudio 7 / QuantStudio 12K Flex
リアルタイム PCRシステム
タンパク質熱安定性解析
図47. Protein Thermal Shift のワークフロー
図46. リガンドの結合に伴うタンパク質安定性の変化 タンパク質のTmがリガンドの結合後に上昇 (上)蛍光融解曲線プロット (下)微分曲線プロット
Fluo
resc
ence
30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 45.0 47.5 50.0 55.052.5
0
40,000
20,000
60,000
80,000
100,000
Protein
Protein + Ligand
d(Fl
uore
scen
ce)/
dT
30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 45.0 47.5 50.0 55.052.5
0
-5,000
5,000
10,000
15,000
Temperature (oC)
~7oC Tm
Di�erence
温度(℃)
d(蛍光)/
dT蛍光
簡単なサンプル準備
約30分でタンパク質解析のワークフローを完了
シンプルに素早くデータ解析リアルタイム PCRシステムにセット
56
プラスチック製品
StepOnePlus / StepOneリアルタイム PCR システム
QuantStudio 12K Flex リアルタイムPCRシステム
QuantStudio 7 リアルタイムPCRシステム
Applied Biosystems 7500 Fast / 7500 リアルタイム PCR システム
7500 Fast
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Fast 96-Well Reaction Plate(製品番号 4346907 / 4346906)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
Fast 8-Tube Strip, 0.1mL(製品番号 4358293)
+
+
75007300 注:Optical 8-Tube Strip を使用の
場合には縦向きにセット
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737)
Optical Tubes(製品番号 N8010933)
orand
Optical 8-Tube Strip(製品番号 4316567)
+
+
7900HT
Compression Pad(製品番号 4312639)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737)
Fast 96-Well Reaction Plate(製品番号 4346907 / 4346906)
384-Well Clear Optical Reaction Plate(製品番号 4309849)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737)
+
+
+
+
+
StepOnePlus
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
96-Well Tray for VeriFlex Blocks(製品番号 4379983)
Fast 96-Well Reaction Plate(製品番号 4346907 / 4346906)
96-Well Tray for VeriFlex Blocks(製品番号 4379983)
Fast Reaction Tube with Cap, 0.1mL(製品番号 4358297)
Fast 8-Tube Strip, 0.1mL(製品番号 4358293)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
+
+
+
+
StepOne
48-Well Optical Adhesive Film(製品番号 4375928 / 4375323)
Fast 48-Well Tray(製品番号 4375282)
Fast Optical 48-Well Reaction Plate(製品番号 4375816)
Fast 8-Tube Strip, 0.1mL(製品番号 4358293)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
Fast 48-Well Tray(製品番号 4375282)
Fast Reaction Tube with Cap, 0.1mL(製品番号 4358297)
+
+
+
+
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Optical Caps (Flat Cap)(製品番号 4323032)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737)
Fast 96-Well Reaction Plate(製品番号 4346907 / 4346906)
384-Well Clear Optical Reaction Plate(製品番号 4309849)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737)QuantStudio
12K Flex
QuantStudio 7
+
+
+
+
96-Well Tray for VeriFlex Blocks(製品番号 4379983)
96-Well Tray for VeriFlex Blocks(製品番号 4379983)
Fast Reaction Tube with Cap, 0.1mL(製品番号 4358297)
Fast 8-Tube Strip, 0.1mL(製品番号 4358293)
Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)+
+
+
Optical Caps (Flat Cap)(製品番号 4323032)
Tray / Retainer Set(製品番号 4381850)
Optical Tubes(製品番号 N8010933)
orand
Optical 8-Tube Strip(製品番号 4316567) + +
Applied Biosystems 7900HT Fast リアルタイム PCR システム
QuantStudio 3QuantStudio 5
(96 ウェル) Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
Tray / Retainer Set(製品番号 4381850)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Optical 8-Tube Strip(製品番号 4316567)
96-Well Reaction Plate(製品番号 N8010560 / 4306737) +
+ +
QuantStudio 3QuantStudio 5
(Fast 96 ウェル) Optical 8-Cap Strip(製品番号 4323032)
96-Well Tray for VeriFlex Blocks(製品番号 4379983)
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
Fast 8-Tube Strip, 0.1mL(製品番号 4358293)
Fast 96-Well Reaction Plate(製品番号 4346907 / 4346906) +
+ +
QuantStudio 5(384 ウェル )
Adhesive Film(製品番号 4311971 / 4360954)
384-Well Clear Optical Reaction Plate(製品番号 4309849) +
QuantStudio 3 / QuantStudio 5リアルタイムPCRシステム
表13. モデル別チューブ・プレートセレクションガイド
57
Fast 96-Wellプレート使用可能機種: 7900HT(Fast 96ウェルブロック)/ 7500 Fast / StepOnePlus
ViiA 7 / QuantStudio (Fast 96ウェルブロック)システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Fast 96-Well Reaction Plate(0.1 mL)
10 枚 4346907 ¥7,200
MicroAmp Fast Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode(0.1 mL)
20 枚 4346906 ¥18,000
200 枚 4366932 ¥163,000
96-Wellプレート使用可能機種: 7900HT(96ウェルブロック)/ 7700 / 7500 / 7300 / 7000 / 5700 ViiA 7 / QuantStudio (Standard 96ウェルブロック)システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate 10 枚 N8010560 ¥7,200
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode
20 枚 4306737 ¥17,800
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode
500 枚 4326659 ¥381,900
・MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode(4306737) × 25
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode and Optical Caps
1 式 403012 ¥29,700
・MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode(4306737)×1・MicroAmp Optical 8-Cap Strip(4323032)×1
384-Wellプレート使用可能機種: 7900HT(384ウェルブロック) / ViiA 7 / QuantStudio(384ウェルブロック) システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp® Optical 384-Well Reaction Plate with Barcode
50枚 4309849 ¥56,200
MicroAmp® Optical 384-Well Reaction Plate with Barcode
500枚 4326270 ¥449,300
・MicroAmp® Optical 384-Well Reaction Plate with Barcode(4309849)×10
MicroAmp® Optical 384-Well Reaction Plate with Barcode
1,000枚 4343814 ¥741,400
・バーコードシールが貼られているOptical 384-Well Reaction Plate 1000枚入りの バルクパック。(Code 128バーコード有り)
MicroAmp® Optical 384-Well Reaction Plate 1,000枚 4343370 ¥718,900 ・バーコードシールが貼られていないOptical
384-Well Reaction Plate 1000枚入りの バルクパック。(バーコード無し)
Enduraプレートシリーズが加わりました 高い安定性 ポリカーボネイトの使用で、熱にも強いとっても便利 カラフルなプレートで実験ごとに管理もしやすい 見やすい 黒字の印字でウェルポジションがわかりやすい
製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast PlateClear 20 枚
500 枚44834854483494
¥21,000¥483,000
Multicolor(Clear、Yellow、Blue、Green、Red)
5 枚500 枚
44834934483496
¥5,300¥483,000
Yellow 20 枚 4483495 ¥21,000
Blue 20 枚 4483486 ¥21,000
Green 20 枚 4483487 ¥21,000
Red 20 枚 4483492 ¥21,000
EnduraPlate96-Well Fastプレート(バーコード付き)
製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp EnduraPlate Optical 96-WellClear 20 枚
500 枚44833544483352
¥31,500¥410,100
Multicolor(Clear、Yellow、Blue、Green、Red)
5 枚500 枚
44833554483356
¥8,000¥410,100
Yellow 20 枚 4483395 ¥31,500
Blue 20 枚 4483343 ¥31,500
Green 20 枚 4483349 ¥31,500
Red 20 枚 4483350 ¥31,500
96-Wellプレート(バーコード付き)
製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp EnduraPlate Optical 384-WellClear 20 枚
500 枚44832854483273
¥36,000¥494,300
Multicolor(Clear、Yellow、Blue、Green、Red)
5 枚500 枚
44833164483317
¥9,000¥494,300
Yellow 20 枚 4483315 ¥36,000
Blue 20 枚 4483320 ¥36,000
Green 20 枚 4483321 ¥36,000
Red 20 枚 4483322 ¥36,000
384-Wellプレート(バーコード付き)
58
カバーシール使用可能機種:7900HT / 7700 / 7500 / 7500 Fast / 7300 / 7000 / 5700 / StepOnePlus / ViiA 7 / QuantStudioシステム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical Adhesive Film 25 枚 4360954 ¥11,300
100 枚 4311971 ¥36,600
MicroAmp Adhesive Film Applicator 5 枚 4333183 ¥11,300・シーリング用アプリケーター 5 枚セット
キャップ使用可能機種: 7900HT(96ウェルブロック)* / 7700 / 7500 / 7500Fast / 7000 / 5700 / StepOnePlus / StepOne / ViiA 7 / QuantStudio システム用* 384ウェルブロック、TaqMan Array ブロックではOptical Capを使用しません。
製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical 8-Cap Strip (Flat) 300 ストリップ 4323032 ¥17,900・N8010935と同等品です。キャップ部の形状がフラットになり 形状の改良があります。 使用方法等には変更はありません。
96-Well カバーシール& Compression Padキット使用可能機種: 7900HT* / 7700 / 7000 / 5700システム用 96ウェルプレート+Optical Adhesive Film+Compression Padの順にセットします。焦げ茶色の面が見える(上面となる)ように載せて使用します。* Fast 96ウェルブロック、384ウェルブロック、TaqMan Low Density ArrayブロックではCompression Padは使用しません。
製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical Adhesive Film Kit 1 式 4313663 ¥9,700・MicroAmp Optical Adhesive Film(20 枚)・シーリング用アプリケータ(1 個)・MicroAmp Optical Film Compression Pad(1 枚)
チューブ使用可能機種: 7700 / 7500 / 7000 / 5700 / ViiA 7 / QuantStudio
(Standard 96ウェルブロック)システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical 8-Tube Strip (0.2 mL)
125 ストリップ 4316567 ¥17,900
MicroAmp Optical Tube without Cap(0.2 mL)
2,000 本 N8010933 ¥43,000
59
プラスチック製品・その他消耗品
StepOnePlus システム用トレー使用可能機種:StepOnePlus システム(96ウェルブロック)製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp 96-Well Tray for VeriFlex Blocks
10 個 4379983 ¥10,200
ViiA 7 / QuantStudio システム用トレー使用可能機種:ViiA 7 / QuantStudio システム(Standard 96ウェルブロック)製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp 96-Well Tray/Retainer Set for Veriti System
10 組 4381850 ¥11,800
使用可能機種:ViiA 7 / QuantStudio システム(Fast 96ウェルブロック)製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp 96-Well Tray for VeriFlex Blocks
10 個 4379983 ¥10,200交換用ハロゲンランプ製品名 サイズ 製品番号 価格LAMP for GeneAmp 5700 and ABI PRISM 7000 System
1 個 4309224 ¥18,000
LAMP for Applied Biosystems 7300/7500
1 個 4345287 ¥25,700
Replacement Lamp for ViiA 7/QuantiStudio 6 / QuantStudio 7
1 個 4443978 ¥25,700
トレー &リテーナー使用可能機種: 7700 / 7000 / 5700システムでのチューブ使用時トレー + チューブ +
リテーナー + キャップの順にセットします。製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp 96-Well Tray/Retainer Set 10 組 403081 ¥13,700
ベース使用可能機種: 96ウェルプレート用96ウェルプレートを安定化するプレートスタンドです。
必ずご使用ください。*StepOne システムには、製品番号4379590をご使用ください。製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Splash Free 96-Well Base 10 個 4312063 ¥15,500
MicroAmp 96-Well Support Base 10 個 4379590* ¥15,600
Compression Pad使用可能機種: 7900HT* / 7700 / 7000 / 5700システム用 96ウェルプレート + Optical Adhesive Film + Compression Padの順にセットします。焦げ茶色の面が見える(上面となる)ように載せて使用します。* Fast 96ウェルブロック、384ウェルブロック、TaqMan Low Density ArrayブロックではCompression Padは使用しません。製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Optical Film Compression Pad
5 枚 4312639 ¥8,600
StepOne 専用48-Well プレート・カバーシール使用可能機種: StepOne システム(48ウェルブロック)製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Fast Optical 48-Well Reaction Plate
20 枚 4375816 ¥13,500
MicroAmp Optical 48-Well Adhesive Film
25 枚 4375928 ¥11,100
100 枚 4375323 ¥32,700
MicroAmp Fast 48-Well Trays 10 枚 4375282 ¥12,500
MicroAmp 48-Well Base Adaptor 5 枚 4375284 ¥6,700
キャップ付 Fastチューブ使用可能機種: StepOnePlus / StepOne システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Fast Reaction Tube with Cap(0.1 mL)
1,000 本 4358297 ¥23,800
Fastチューブ使用可能機種: 7500Fast / StepOnePlus / StepOne / ViiA 7 / QuantStudio
(Fast 96ウェルブロック)システム製品名 サイズ 製品番号 価格MicroAmp Fast 8-Tube Strip (0.1 mL)
125 ストリップ 4358293 ¥20,400
60
TaqMan プローブカスタム合成サービス
当社のカスタムオリゴヌクレオチド合成サービスでは、Applied Biosystems™
TaqMan™ プローブのカスタム合成を行っております。カスタム合成では、異なるレポーター蛍光色素、クエンチャー、合成サイズ(量)が選択できます。HPLC精製グレードです。
TaqMan MGB プローブTaqMan プローブの3'側にTmエンハンサーであるMinor Groove Binder(MGB)を結合することにより、従来のTaqMan TAMRA プローブに比べてより短い塩基数で同等のTm値が得られます。低いバックグランドノイズと高い特異性を特長としています。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan MGB Probe(Small size) 6,000 pmol 4316034 ¥69,700
TaqMan MGB Probe(Medium size) 20,000 pmol 4316033 ¥145,400
TaqMan MGB Probe(Large size) 50,000 pmol 4316032 ¥186,200
TaqMan MGB 遺伝子発現検出キット(MGB プローブ + プライマーペア)
製品名 製品番号 価格TaqMan MGB遺伝子発現検出キット(Small size)・プローブ 6,000 pmol×1・プライマー 27,000 pmol×2
4324034 ¥73,100
TaqMan MGB遺伝子発現検出キット(Medium size)・プローブ 20,000 pmol×1・プライマー 90,000 pmol×2
4324035 ¥152,200
TaqMan MGB遺伝子発現検出キット(Large size)・プローブ 50,000 pmol×1・プライマー 225,000 pmol×2
4324036 ¥198,600
TaqMan MGB SNP 検出キット(MGB プローブ×2+プライマーペア)
製品名 製品番号 価格TaqMan MGB SNP検出キット(Small size)・プローブ 6,000 pmol×2・プライマー 27,000 pmol×2
4323297 ¥134,900
TaqMan MGB SNP検出キット(Medium size)・プローブ 20,000 pmol×2・プライマー 90,000 pmol×2
4323298 ¥283,700
TaqMan MGB SNP検出キット(Large size)・プローブ 50,000 pmol×2・プライマー 225,000 pmol×2
4323300 ¥363,200
TaqMan QSY プローブ新しいApplied Biosystems™ TaqMan™ QSYプローブは最大4色までのマルチプレックスアッセイに最適な新しいクエンチャーを使用したプローブです。同一サンプルから複数ターゲットを同時に検出する際、ターゲット数が 3種以上の場合はMGBプローブよりもQSYプローブをお勧めします。
製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan QSYプローブ 6,000 pmol 4482777 ¥58,500
20,000 pmol 4482778 ¥110,200
50,000 pmol 4482779 ¥153,300
プライマーおよびTaqMan プローブの濃度について
以下のマスターミックスを使用するときのプローブとプライマーの推奨濃度は以下の通りです。
TaqMan プローブアッセイ: TaqMan Universal Master Mix II
TaqMan Gene Expression Master Mix
TaqMan Universal PCR Master Mix
TaqMan Fast Universal PCR Master Mix
TaqMan Fast Advanced Master Mix
SYBR Green アッセイ: Power SYBR Green PCR Master Mix
Fast SYBR Green Master Mix
SYBR Green PCR Master Mix
SYBR Select Master Mix
TaqMan TAMRA プローブ製品名 サイズ 製品番号 価格TaqMan TAMRA Probe(Small size) 6,000 pmol 450025 ¥58,500
TaqMan TAMRA Probe(Medium size) 20,000 pmol 450024 ¥110,200
TaqMan TAMRA Probe(Large size) 50,000 pmol 450003 ¥153,300
TaqMan TAMRA プローブキット(TAMRA プローブ+プライマーペア)
製品名 製品番号 価格TaqMan Probe キット・プローブ 6,000 pmol×1・プライマー 27,000 pmol×2
4323969 ¥63,600
アプリケーション レポーター蛍光色素First Choice Second Choice
核酸定量(DNA/RNA) FAM VIC
Minor Allele Major Allele
SNP ジェノタイピング FAM VIC
*レポーターの蛍光色素はFAMもしくはVICを推奨いたします。
TaqManプローブ SYBR Green
アッセイ* アッセイプローブ
▲
終濃度 250 nM ーフォワードプライマー
▲
終濃度 900 nM 終濃度 50 nM~リバースプライマー
▲
終濃度 900 nM 終濃度 50 nM~
* 2プローブアッセイを行う際には、ターゲットおよび内在性コントロール増幅のためにプライマー使用 濃度条件の検討が必要になります。
表14. レポーター蛍光ラベリングガイド*
61
オンラインオーダーシステムのご案内
TaqMan AssaysやsiRNAなど一部製品については、オンラインオーダーシステムを採用しています。このオーダーシステムのご利用には、事前登録が必要となります。一度ご登録いただければ、次回以降、ユーザーIDとパスワードを用いて簡単にご注文いただけます。オンラインオーダーシステムには、インターネットオーダーとEメールオーダーがあります。
ご登録方法新規ユーザーアカウントのご登録は、弊社のウェブサイトをご参照くだ
さい。
www.lifetechnologies.com/taqman-order
ご登録に関してご不明な点がありましたら弊社ヘルプデスクまでお問い合わせください。
Eメール : [email protected]
電 話 : 03-6832-6980
( 音声ガイダンス①、次にアプライドバイオシステムズ オリゴ・ウェブ受注品④を選択してください。)
Applied Biosystems 製品取扱代理店に登録用紙を渡す
ユーザー IDとパスワードをご登録者にEメールでお知らせ
ウェブ登録画面に必要事項を記入する
代理店が必要事項を記入し弊社宛に Email / FAX
Eメールオーダーが利用可能な製品
・TaqMan MGBプローブ合成 (60ページ)・TaqMan プローブ合成 (60ページ)
インターネットオーダーが利用可能な製品
・TaqMan Gene Expression Assays, Inventoried (24ページ)・TaqMan Gene Expression Assays, Made to Order (24ページ)・Custom TaqMan Gene Expression Assays (24ページ)・Custom Plus TaqMan RNA Assays (24ページ)・TaqMan Array Plate (25ページ)・TaqMan Custom Arrays (28ページ)・Silencer Select siRNA (33ページ)・TaqMan siRNA Assays (35ページ)・TaqMan Micro RNA Assays (40ページ)・Custom TaqMan Small RNA Arrays (40ページ)・TaqMan Pri-miRNA Assays (42ページ)・TaqMan Non-coding RNA Assays (42ページ)・mirVana miRNA mimics (43ページ)・mirVana miRNA Inhibitors (43ページ)・Pre-miR miRNA Precursor Molecule (43ページ)・Anti-miR miRNA Inhibitor (43ページ)・TaqMan SNP Genotyping Assays (45ページ)・Custom TaqMan SNP Genotyping Assays (45ページ)・TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assays (45ページ)・TaqMan Mutation Detection Assays (48ページ)・TaqMan Copy Number Assays (49ページ)・Custom TaqMan Copy Number Assays (49ページ)
62
TaqMan Custom Plating ServiceApplied Biosystems™ TaqMan™ Custom Plating Serviceは、お 望 みのTaqMan Assayを96ウェルプレートもしくは384ウェルプレートにお望みの形で分注してお届けするサービスです。TaqMan Gene Expression
AssaysやTaqMan MicroRNA Assays だけではなく、SNP Genotyping
Assay、Copy Number AssayおよびNon coding RNA Assayからも選択できるようになり、更に活用範囲が広がりました。本サービスをご利用いただくことで、コンタミネーションを防いだり、ピペット作業などに割いていた時間を削減することができます。大切な実験の効率化にお役立てください。
こんな用途に最適です。 •バイオマーカースクリーニング •毒性スクリーニング •食品テスト •siRNAノックダウン •病原菌検出
お選びいただける項目 •プレートにのせるアッセイ数 •プレートレイアウト•プレート数 •アッセイタイプ
•プレートタイプ
•反応系 •オーダー枚数
お選びいただけるアッセイ、プレート、反応系
•アッセイタイプTaqMan Gene Expression Assays, Inventoried (デザイン済アッセイ:在庫あり) TaqMan Gene Expression Assays, Made-to-order(デザイン済アッセイ:受注後製造) TaqMan MicroRNA Assays, Inventoried(デザイン済アッセイ:在庫あり) TaqMan MicroRNA Assays, Made-to-order(デザイン済アッセイ:受注後製造) TaqMan Non-coding RNA Assays, Inventoried(デザイン済アッセイ:在庫あり) TaqMan Non-coding RNA Assays, Made-to-order(デザイン済アッセイ:受注後製造) TaqMan SNP Genotyping Assays(デザイン済アッセイ、DME:受注後製造) TaqMan Copy Number Assays(デザイン済アッセイ、カスタム:受注後製造)
•プレートタイプ 96ウェル Standard 96ウェル Fast 384ウェル
•反応系 10 µL(384ウェルプレートに最適) 20 µL(96ウェルプレートに最適)
•オーダー枚数 20枚からのオーダーが可能
63
■ INDEX (製品番号順)
-1-
10296010 ………………10
10296028 ………………10
11754050 ………………16
11754250 ………………16
11755050 ………………16
11755250 ………………16
11755550 ………………16
12183016 ………………10
12183018A ……………10
12183020 ………………10
12183025 ………………10
12183026 ………………10
12183555 ………………10
12185010 ………………10
13778-030 ……………36
13778-075 ……………36
13778-100 ……………36
13778-150 ……………36
13778-500 ……………36
15596018 ………………10
15596018SP …………10
15596026 ………………10
-4-
402929 …………………17
403012 …………………57
403081 …………………59
4304134 ………………17
4304437 ………………20
4304449 ………………20
4305719 ………………20
4306737 ………………57
4307281 ………………17
4309155 ………………23
4309224 ………………59
4309849 ………………57
4310251 ………………23
4311235 ………………17
4311971 ………………58
4312063 ………………59
4312639 ………………59
4312660 ………………17
4312704 ………………23
4313663 ………………58
4316032 ………………60
4316033 ………………60
4316034 ………………60
4316567 ………………58
4318157 ………………20
4319413E ………… 30,31
4323032 ………………58
4323297 ………………60
4323298 ………………60
4323300 ………………60
4323969 ………………60
4324018 ………………20
4324020 ………………20
4324034 ………………60
4324035 ………………60
4324036 ………………60
4326270 ………………57
4326314E ………………30
4326315E ………………30
4326316E ………………30
4326317E ………………30
4326318E ………………30
4326319E ………………30
4326320E ………………30
4326321E ………………30
4326322E ………………30
4326323E ………………30
4326614 ………………20
4326659 ………………57
4326708 ………………20
4331182 ………… 24,30
4331348 ………………24
4331349 ………………45
4332072 ………………45
4332073 ………………45
4332075 ………………45
4332076 ………………45
4332077 ……………9,45
4332078 ………………24
4332079 ………………24
4333183 ………………58
4334973 ………………23
4342247 ………………28
4342249 ………………28
4342253 ………………28
4342259 ………………28
4342261 ………………28
4342265 ………………28
4343370 ………………57
4343814 ………………57
4344463 ………………23
4345287 ………………59
4346798 ………………28
4346799 ………………28
4346800 ………………28
4346802 ………………28
4346906 ………………57
4346907 ………………57
4351368 ………………24
4351370 ………………24
4351372 ………………24
4351374 ………………45
4351376 ………………45
4351379 ………………45
4351380 ………………45
4351382 ………………45
4351384 ………………45
4351891 ………………18
4352042 ………………18
4352338E ………………31
4352339E ………………31
4352340E ………………31
4352341E ………………31
4352405 ………………21
4352930E ………… 30,31
4352931E ………………31
4352932E ………………31
4352933E ………………31
4352934E ………………30
4352935E ………………30
4358293 ………………59
4358297 ………………59
4360954 ………………58
4362691 ………………45
4364103 ………………18
4364338 ………………20
4364340 ………………20
4364341 ………………20
4364343 ………………20
4366072 ………………18
4366073 ………………18
4366596 ………………39
4366597 ………………39
4366932 ………………57
4367218 ………………23
4367563 ………… 28,29
4367659 ………………23
4367660 ………………23
4367784 ………………28
4367785 ………………28
4367786 ………………28
4367846 ………………18
4368577 ………………23
4368702 ………………23
64
■ INDEX (製品番号順)
4368706 ………………23
4368708 ………………23
4368813 ………………17
4368814 ………………17
4369016 ………………20
4369510 ………………20
4369514 ………………20
4369542 ………………20
4370048 ………………20
4370074 ………………20
4370573 ………………28
4371130 ………………46
4371131 ………………46
4371134 ………………20
4371135 ………………20
4371353 ………………46
4371355 ………………46
4371357 ………………46
4374966 ………………17
4374967 ………………17
4375282 ………………59
4375284 ………………59
4375323 ………………59
4375575 ………………17
4375816 ………………59
4375928 ………………59
4378700 ………………28
4378701 ………………28
4378702 ………………28
4378703 ………………28
4378704 ………………28
4378705 ………………28
4378706 ………………28
4378707 ………………28
4378708 ………………28
4378709 ………………28
4378710 ………………28
4378713 ………………28
4378714 ………………28
4379590 ………………59
4379961 ………………28
4379983 ………………59
4381656 ………………46
4381657 ………………46
4381850 ………………59
4383547 ……………… 9
4384267 ………………21
4385344 ………………28
4385363 ………………28
4385371 ………………23
4385372 ………………23
4385610 ………………23
4385612 ………………23
4385614 ………………23
4385616 ………………23
4385617 ………………23
4385618 ………………23
4386995 ………………13
4387299 ………………13
4387406 ………………17
4387951 ………………17
4389986 ………………15
4390771 ………………34
4390815 ………………34
4390816 ………………34
4390817 ………………34
4390818 ………………34
4390821 ………………34
4390822 ………………34
4390824 ………………34
4390825 ………………34
4390826 ………………34
4390827 ………………34
4390828 ………………34
4390829 ………………34
4390830 ………………34
4390831 ………………34
4390843 ………………34
4390844 ………………34
4390846 ………………34
4390847 ………………34
4390849 ………………34
4390850 ………………34
4391003 ………………15
4391112 ………………15
4391128 ………………21
4391178 ………………15
4391524 ………………25
4391525 ………………25
4391526 ………………25
4391527 ………………25
4391528 ………………25
4391529 ………………25
4391848 ………………13
4392339 ………………17
4392420 ………………34
4392421 ………………34
4392422 ………………34
4392653 ………………15
4392656 ………………15
4392938 ………………15
4393463 ………………15
4393464 ………………15
4396840 ………… 27,29
4397914 ………………34
4397915 ………………34
4397916 ………………34
4397917 ………………34
4397918 ………………34
4397919 ………………34
4397920 ………………34
4397921 ………………34
4397922 ………………34
4397923 ………………34
4397924 ………………34
4397926 ………………34
4397927 ………………34
4398965 ………… 28,41
4398967 ………… 28,41
4398987 ………………40
4398988 ………………40
4398989 ………………40
4399002 ………………13
4399003 ………………13
4399203 ………………39
4399233 ………………39
4399966 ………………39
4399970 ………………39
4400088 ………………53
4400291 ………………49
4400292 ………………49
4400293 ………………49
4400294 ………………49
4400295 ………………49
4400296 ………………49
4401009 ………………39
4401090 ………………39
4401857 ………………46
4401890 ………………46
4401892 ………………46
4402953 ………………13
4402954 ………………13
4402955 ………………13
4402956 ………………13
4402957 ………………13
4402959 ………………13
4402960 ………………13
4403081 ………………47
65
■ INDEX (製品番号順)
4414151 ………………27
4414152 ………………27
4414153 ………………27
4414154 ………………27
4414155 ………………27
4414156 ………………27
4414157 ………………27
4414158 ………………27
4414159 ………………27
4414160 ………………27
4414161 ………………27
4414162 ………………27
4414163 ………………27
4414164 ………………27
4414165 ………………27
4414166 ………………27
4414167 ………………27
4414168 ………………27
4414169 ………………27
4414170 ………………27
4414171 ………………27
4414172 ………………27
4414173 ………………27
4414174 ………………27
4414175 ………………27
4414176 ………………27
4414177 ………………27
4414178 ………………27
4414179 ………………27
4414180 ………………27
4414181 ………………27
4414182 ………………27
4414183 ………………27
4414184 ………………27
4414185 ………………27
4414186 ………………27
4414187 ………………27
4414114 ………………26
4414115 ………………26
4414116 ………………26
4414117 ………………26
4414118 ………………26
4414119 ………………26
4414120 ………………26
4414121 ………………26
4414122 ………………26
4414123 ………………26
4414124 ………………26
4414125 ………………26
4414126 ………………26
4414127 ………………26
4414128 ………………26
4414129 ………………26
4414130 ………………26
4414131 ………………26
4414132 ………………26
4414133 ………………26
4414134 ………………26
4414135 ………………26
4414136 ………………26
4414137 ………………26
4414138 ………………26
4414139 ………………26
4414140 ………………26
4414141 ………………26
4414142 ………………26
4414143 ………………26
4414144 ………………26
4414145 ………………26
4414146 ………………26
4414147 ………………26
4414148 ………………26
4414149 ………………27
4414150 ………………27
4414077 ………………26
4414078 ………………26
4414079 ………………26
4414080 ………………26
4414081 ………………26
4414082 ………………26
4414083 ………………26
4414084 ………………26
4414085 ………………26
4414086 ………………26
4414087 ………………26
4414088 ………………26
4414089 ………………26
4414090 ………………26
4414091 ………………26
4414092 ………………26
4414093 ………………26
4414094 ………………26
4414095 ………………26
4414096 ………………26
4414097 ………………26
4414098 ………………26
4414099 ………………26
4414100 ………………26
4414101 ………………26
4414102 ………………26
4414103 ………………26
4414104 ………………26
4414105 ………………26
4414106 ………………26
4414107 ………………26
4414108 ………………26
4414109 ………………26
4414110 ………………26
4414111 ………………26
4414112 ………………26
4414113 ………………26
4403083 ………………47
4403087 ………………47
4403311 ………………46
4403313 ………………47
4403315 ………………49
4403316 ………………49
4403326 ………………49
4403328 ………………49
4404020 ………………34
4404024 ………………34
4405443 ………………54
4405448 ………………54
4405460 ………………53
4405465 ………………53
4405471 ………………53
4405501 ………………53
4409535 ………………51
4410126 ………………51
4413255 ………………25
4413256 ………………25
4413257 ………………25
4413258 ………………25
4413259 ………………25
4413260 ………………25
4413261 ………………25
4413262 ………………25
4413263 ………………25
4413264 ………………25
4413265 ………………25
4413266 ………………25
4414070 ………………26
4414071 ………………26
4414072 ………………26
4414073 ………………26
4414074 ………………26
4414075 ………………26
4414076 ………………26
66
■ INDEX (製品番号順)
4418809 ………………27
4418810 ………………27
4418811 ………………27
4418812 ………………27
4418813 ………………27
4418814 ………………27
4418815 ………………27
4418816 ………………27
4418817 ………………27
4418818 ………………27
4418819 ………………27
4418820 ………………27
4418821 ………………27
4418822 ………………27
4418823 ………………27
4418824 ………………27
4418825 ………………27
4418826 ………………27
4418827 ………………27
4418828 ………………27
4418829 ………………27
4418830 ………………27
4418831 ………………27
4418832 ………………27
4418833 ………………27
4418834 ………………27
4418835 ………………27
4418836 ………………27
4418837 ………………27
4418838 ………………27
4418839 ………………27
4418840 ………………27
4418841 ………………27
4418842 ………………27
4418843 ………………27
4418844 ………………27
4418845 ………………27
4418772 ………………26
4418773 ………………26
4418774 ………………26
4418775 ………………26
4418776 ………………26
4418777 ………………26
4418778 ………………26
4418779 ………………26
4418780 ………………26
4418781 ………………26
4418782 ………………26
4418783 ………………26
4418784 ………………26
4418785 ………………26
4418786 ………………26
4418787 ………………26
4418788 ………………26
4418789 ………………26
4418790 ………………26
4418791 ………………26
4418792 ………………26
4418793 ………………26
4418794 ………………27
4418795 ………………27
4418796 ………………27
4418797 ………………27
4418798 ………………27
4418799 ………………27
4418800 ………………27
4418801 ………………27
4418802 ………………27
4418803 ………………27
4418804 ………………27
4418805 ………………27
4418806 ………………27
4418807 ………………27
4418808 ………………27
4418735 ………………26
4418736 ………………26
4418737 ………………26
4418738 ………………26
4418739 ………………26
4418740 ………………26
4418741 ………………26
4418742 ………………26
4418743 ………………26
4418744 ………………26
4418745 ………………26
4418746 ………………26
4418747 ………………26
4418748 ………………26
4418749 ………………26
4418750 ………………26
4418751 ………………26
4418752 ………………26
4418753 ………………26
4418754 ………………26
4418755 ………………26
4418756 ………………26
4418757 ………………26
4418758 ………………26
4418759 ………………26
4418760 ………………26
4418761 ………………26
4418762 ………………26
4418763 ………………26
4418764 ………………26
4418765 ………………26
4418766 ………………26
4418767 ………………26
4418768 ………………26
4418769 ………………26
4418770 ………………26
4418771 ………………26
4414188 ………………27
4414189 ………………27
4414190 ………………27
4414191 ………………27
4414192 ………………27
4414193 ………………27
4414194 ………………27
4414195 ………………27
4414196 ………………27
4414197 ………………27
4414198 ………………27
4414199 ………………27
4414200 ………………27
4415440 ………………51
4415450 ………………51
4415452 ………………51
4415461 ………………27
4418715 ………………26
4418716 ………………26
4418717 ………………26
4418718 ………………26
4418719 ………………26
4418720 ………………26
4418721 ………………26
4418722 ………………26
4418723 ………………26
4418724 ………………26
4418725 ………………26
4418726 ………………26
4418727 ………………26
4418728 ………………26
4418729 ………………26
4418730 ………………26
4418731 ………………26
4418732 ………………26
4418733 ………………26
4418734 ………………26
67
■ INDEX (製品番号順)
4461146 ………………55
4461881 ………………22
4461882 ………………22
4461884 ………………22
4462263 ………………55
4464058 ………………43
4464059 ………………43
4464060 ………………43
4464061 ………………43
4464062 ………………43
4464063 ………………43
4464064 ………………43
4464065 ………………43
4464066 ………………43
4464067 ………………43
4464068 ………………43
4464069 ………………43
4464070 ………………43
4464071 ………………43
4464074 ………………43
4464075 ………………43
4464076 ………………43
4464077 ………………43
4464078 ………………43
4464079 ………………43
4464080 ………………43
4464081 ………………43
4464084 ………………43
4464085 ………………43
4464086 ………………43
4464087 ………………43
4464088 ………………43
4464089 ………………43
4464092 ………………43
4464093 ………………43
4465804 ………………48
4465805 ………………48
4448486 ………………24
4448489 ………………24
4448490 ………………24
4448491 ………………24
4448536 ………………54
4448549 ………………53
4448571 ………………53
4448591 ………………53
4448592 ………………53
4448616 ………………53
4453745 ………………53
4457287 ………………35
4457288 ………………35
4457289 ………………35
4457291 ………………35
4457292 ………………35
4457296 ………………35
4457297 ………………35
4457298 ………………35
4457301 ………………35
4457302 ………………35
4457303 ………………35
4457304 ………………35
4457307 ………………35
4457308 ………………35
4457309 ………………35
4457310 ………………35
4458235 ………………14
4458236 ………………14
4458237 ………………14
4458366 ………………49
4458367 ………………49
4458368 ………………49
4458369 ………………49
4459405 ………………35
4459407 ………………35
4459408 ………………35
4441114 ………………24
4441117 ………………24
4441118 ………………24
4442487 ………………49
4442488 ………………49
4442520 ………………49
4444281 ………………39
4444292 ………………39
4444303 ………………39
4444308 ………………39
4444432 ………………21
4444434 ………………21
4444436 ………………21
4444556 ………………18
4444557 ………………18
4444558 ………………18
4444745 ………………39
4444746 ………………39
4444747 ………………39
4444748 ………………39
4444749 ………………39
4444750 ………………39
4444752 ………………39
4444766 ………………39
4444899 ………………41
4444909 ………………41
4444910 ………… 28,41
4444913 ………… 28,41
4444963 ………………18
4444964 ………………18
4444965 ………………18
4445552 ………………14
4445553 ………………14
4445554 ………………14
4445555 ………………14
4448484 ………………24
4448485 ………………24
4418846 ………………27
4425557 ………………51
4425559 ………………51
4425562 ………………51
4425618 ………………51
4426697 ………… 27,29
4426698 ………… 27,29
4426699 ………… 27,29
4426700 ………… 27,29
4426701 ………… 27,29
4426961 ………………42
4426962 ………………42
4426963 ………………42
4427012 ………………42
4427013 ………………42
4427014 ………………42
4427037 ………………34
4427038 ………………34
4427975 ………………40
4440038 ………………19
4440039 ………………19
4440040 ………………19
4440041 ………………19
4440042 ………………19
4440043 ………………19
4440044 ………………19
4440045 ………………19
4440046 ………………19
4440047 ………………19
4440048 ………………19
4440049 ………………19
4440878 ………………35
4440879 ………………35
4440880 ………………35
4440886 ………………40
4440887 ………………40
4440888 ………………40
68
■ INDEX (製品番号順)
N8080119 ………………17
N8080127 ………………17
N8080128 ………………17
N8080234 ………………17
N8080260 ………………17
N8080270 ………………17
-Q-
QS3D-PF ……………… 9
AM1728 …………………13
AM1729 …………………13
AM1812 …………………11
AM1830 …………………11
AM1836 …………………11
AM1837 …………………11
AM1840 …………………11
AM1907 …………………11
AM1911 …………………11
AM1912 …………………11
AM1914 …………………11
AM1920 …………………11
AM1931 …………………11
AM1939 …………………11
AM7000 …………………11
AM7001 …………………11
AM7020 …………………11
AM7021 …………………11
AM7022 …………………11
AM7023 …………………11
AM7024 …………………11
AM7030 …………………11
AM9860 …………………11
AM9861 …………………11
AM9912 …………………11
AM9930 …………………20
AM9932 …………………20
AM9937 …………………20
AM9938 …………………20
AM9939 …………………20
-I-
IVF3005 …………………36
IVF3001 …………………36
-N-
N8010560 ………………57
N8010933 ………………58
N8080096 ………………17
4485714 ………………22
4485715 ………………22
4486295 ………………22
450003 …………………60
450024 …………………60
450025 …………………60
-A-
A25316 ………………… 9
A26358 ………………… 9
A26359 ………………… 9
A25599 …………………13
A25600 …………………13
A25601 …………………13
A25602 …………………13
A25603 …………………13
A25605 …………………13
AM10026 ………………11
AM10027 ………………11
AM10050 ………………11
AM1540 …………………43
AM1556 …………………38
AM1560 …………………38
AM1561 …………………38
AM17000 ………………43
AM17001 ………………43
AM17003 ………………43
AM17010 ………………43
AM17011 ………………43
AM17012 ………………43
AM17100 ………………43
AM17101 ………………43
AM17103 ………………43
AM17110 ………………43
AM17111 ………………43
AM17120 ………………43
AM17121 ………………43
AM17150 ………………43
4465807 ………………48
4466037 ………………55
4466038 ………………55
4467538 ………………48
4473087 ………………38
4473088 ………………38
4482777 ………… 22,60
4482778 ………… 22,60
4482779 ………… 22,60
4483273 ………………57
4483285 ………………57
4483315 ………………57
4483316 ………………57
4483317 ………………57
4483320 ………………57
4483321 ………………57
4483322 ………………57
4483343 ………………57
4483349 ………………57
4483350 ………………57
4483352 ………………57
4483354 ………………57
4483355 ………………57
4483356 ………………57
4483395 ………………57
4483485 ………………57
4483486 ………………57
4483487 ………………57
4483492 ………………57
4483493 ………………57
4483494 ………………57
4483495 ………………57
4483496 ………………57
4484262 ………………22
4484263 ………………22
4485712 ………………22
4485713 ………………22
69
■ INDEX (製品名順)
Customer Defined Anti-miR miRNA Inhibitor ……………… 43
Customer Defined Pre-miR miRNA Precursor …………… 43
Customer-Defined mirVana miRNA Inhibitor ……………… 43
Customer-Defined mirVana miRNA Mimic ………………… 43
Cy3 Anti-miR Negative Control ……………………………… 43
Cy3 Pre-miR Negative Control ………………………………… 43
-F-
FAM Anti-miR Negative Control ……………………………… 43
FAM Pre-miR Negative Control ……………………………… 43
Fast SYBR Green Cells-to-CT Kit …………………………… 13
Fast SYBR Green Master Mix ………………………………… 23
-G-
GeneAmp dNTP Blend ………………………………………… 17
-H-
High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit …………… 17
High Capacity RNA-to-cDNA Kit ……………………………… 17
-I-
Invivofectamine 3.0 Reagent ………………………………… 36
-L-
LAMP for Applied Biosystems 7300/7500/ViiA 7 System …… 59
LAMP for GeneAmp 5700 and ABI PRISM 7000 System …… 59
Lipofectamine RNAiMAX ……………………………………… 36
-M-
MagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit …………………… 11
MagMAX Viral RNA Isolation Kit ……………………………… 11
MagMAX -96 Blood RNA Isolation Kit ……………………… 11
MagMAX -96 Total RNA Isolation Kit ………………………… 11
MagMAX -96 Viral RNA Isolation Kit ………………………… 11
Magnetic Stand-96 ……………………………………………… 11
Megaplex PreAmp Primers, Human Pool ………………… 39
Megaplex PreAmp Primers, Human Pool Set ……………… 39
Megaplex PreAmp Primers, Rodent Pool ………………… 39
Megaplex PreAmp Primers, Rodent Pool Set ……………… 39
Megaplex Primer Pools, Human Pools ……………………… 39
Megaplex Primer Pools, Human Pools Set ………………… 39
Megaplex Primer Pools, Rodent Pools ……………………… 39
Megaplex Primer Pools, Rodent Pools Set ………………… 39
-0-
0.1 mM EDTA …………………………………………………… 11
-2-
20% Glycerol Solution Molecular Biology Grade …………… 17
-9-
96 well Magnetic-Ring Stand ………………………………… 11
-A-
Ambion In Vivo Custom Designed …………………………… 35
Ambion In Vivo Custom siRNA ……………………………… 35
Ambion In Vivo Factor VII Positive Control siRNA,
HPLC In Vivo Ready ………………………………………… 35
Ambion In Vivo Factor VII siRNA, HPLC In Vivo Ready …… 35
Ambion In Vivo GAPDH Positive Control siRNA …………… 35
Ambion In Vivo Negative Control #1 siRNA ………………… 35
Ambion In Vivo Pre-designed siRNA ………………………… 35
Ambion Single Cell Lysis Kit …………………………………… 14
Ambion Single Cell-to-CT Kit ………………………………… 14
AmpErase Uracil N-glycosylase(UNG) …………………… 17
Anti-miR miRNA Inhibitor ……………………………………… 43
Anti-miR Negative Control #1 ………………………………… 43
-C-
Cells-to-CpG Bisulfite Conversion &
Quantitation Control Kit …………………………………… 14
Cells-to-CpG Bisulfite Conversion Kit ……………………… 14
Cells-to-CpG Methylated and
Unmethylated gDNA Control Kit ………………………… 14
Cells-to-CT 1-Step TaqMan Kit ……………………………… 13
Cells-to-CT 1-Step Power SYBR Green Kit ………………… 13
Cells-to-CT Stop Solution ……………………………………… 13
Custom Plus TaqMan Copy Number Assays ……………… 49
Custom Plus TaqMan RNA Assay …………………………… 24
Custom Select siRNA ………………………………………… 34
Custom TaqMan Copy Number Assays …………………… 49
Custom TaqMan Gene Expression Assays ………………… 24
Custom TaqMan Small RNA Assays ………………………… 40
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays ………………… 45
Custom TaqMan SNP Genotyping Assays
for Rare Mutation Analysis …………………………………… 9
70
■ INDEX (製品名順)
Megaplex RT Primers, Human Pool ………………………… 39
Megaplex RT Primers, Human Pool Set …………………… 39
Megaplex RT Primers, Rodent Pool ………………………… 39
Megaplex RT Primers, Rodent Pool Set …………………… 39
MeltDoctor HRM マスターミックス …………………………… 51
MeltDoctor HRM キャリブレーション スタンダード ………… 51
MeltDoctor HRM キャリブレーション プレート………………… 51
MeltDoctor HRM ポジティブコントロールキット ……………… 51
MeltDoctor HRM 試薬キット …………………………………… 51
MicroAmp 48-Well Base Adaptor …………………………… 59
MicroAmp 96-Well Support Base …………………………… 59
MicroAmp 96-Well Tray for VeriFlex Blocks ………………… 59
MicroAmp 96-Well Tray/Retainer Set ………………………… 59
MicroAmp 96-Well Tray/Retainer Set for Veriti System …… 59
MicroAmp Adhesive Film Applicator ………………………… 58
MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast Plate………… 57
MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Plate ……………… 57
MicroAmp EnduraPlate Optical 384-Well Plate …………… 57
MicroAmp Fast 48-Well Trays ………………………………… 59
MicroAmp Fast 8-Tube Strip(0.1mL) ……………………… 59
MicroAmp Fast 96-Well Reaction Plate(0.1mL) ………… 57
MicroAmp Fast Optical 48-Well Reaction Plate …………… 59
MicroAmp Fast Optical 96-Well Reaction Plate
with Barcode(0.1mL) ……………………………………… 57
MicroAmp Fast Reaction Tube with Cap(0.1mL) ………… 59
MicroAmp Optical 384-Well Reaction Plate ………………… 57
MicroAmp Optical 384-Well Reaction Plate
with Barcode ………………………………………………… 57
MicroAmp Optical 48-Well Adhesive Film …………………… 59
MicroAmp Optical 8-Cap Strip(Flat) ……………………… 58
MicroAmp Optical 8-Tube Strip(0.2mL) ………………… 58
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate ………………… 57
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate with Barcode … 57
MicroAmp Optical 96-Well Reaction Plate
with Barcode and Optical Caps …………………………… 57
MicroAmp Optical Adhesive Film …………………………… 58
MicroAmp Optical Adhesive Film Kit ………………………… 58
MicroAmp Optical Film Compression Pad ………………… 59
MicroAmp Optical Tube without Cap(0.2mL) …………… 58
MicroAmp Splash Free 96-Well Base ……………………… 59
mirVana miRNA inhibitor ……………………………………… 43
mirVana miRNA inhibitor ライブラリ ………………………… 43
mirVana miRNA Inhibitor let-7 Positive Control …………… 43
mirVana miRNA Inhibitor Negative Control #1 ……………… 43
mirVana miRNA Isolation Kit …………………………………… 38
mirVana miRNA mimic ………………………………………… 43
mirVana miRNA mimic miR-1 Positive Control …………… 43
mirVana miRNA mimic Negative Control #1 ………………… 43
mirVana miRNA mimics ライブラリ ………………………… 43
mirVana PARIS Kit ……………………………………………… 38
MultiScribe Reverse Transcriptase …………………………… 17
-N-
Nuclease-free Water …………………………………………… 20
-O-
Oligo d(T)16 Primers ……………………………………………… 17
-P-
Power SYBR Green Cells-to-CT Kit ………………………… 13
Power SYBR Green PCR Master Mix ……………………… 23
Power SYBR Green RNA-to-CT 1-Step Kit ………………… 15
Pre-miR hsa-miR-1 miRNA Precursor ……………………… 43
Pre-miR miRNA Precursor Starter Kit ……………………… 43
Pre-miR miRNA Precursors Molecule ……………………… 43
Pre-miR Negative Control ……………………………………… 43
Protein Expression Lysate Control Kit ……………………… 54
Protein Expression Sample Prep Kit ………………………… 54
Protein Quant Sample Lysis Kit ……………………………… 54
Protein Thermal Shift Dye Kit ………………………………… 55
Protein Thermal Shift Starter Kit ……………………………… 55
Protein Thermal Shift ソフトウェア バージョン1.0 …………… 55
Protein Thermal Shift 追加ライセンス ………………………… 55
PureLink DNase Set …………………………………………… 10
PureLink Homogenizer ………………………………………… 10
PureLink RNA Micro Kit ………………………………………… 10
PureLink RNA Mini Kit ………………………………………… 10
71
■ INDEX (製品名順)
Single Place Magnetic Stand ………………………………… 11
SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit ……………………… 16
SuperScript VILO Master Mix ………………………………… 16
SYBR Green Cells-to-CT Control Kit ………………………… 13
SYBR Green PCR Core Reagents …………………………… 23
SYBR Green PCR Master Mix ………………………………… 23
-T-
TaqMan Array Gene Signature 96-Well Plate …………… 26,27
TaqMan Array Human Endogenous Control Plate ………… 29
TaqMan Array Human Endogenous Controls ……………… 29
TaqMan Array Human MicroRNA Cards ………………… 28,41
TaqMan Array Human MicroRNA Cards Set …………… 28,41
TaqMan Array Mouse Endogenous Controls ……………… 29
TaqMan Array Plates …………………………………………… 25
TaqMan Array Rat Endogenous Controls …………………… 29
TaqMan Array Rodent MicroRNA Cards ………………… 28,41
TaqMan Array Rodent MicroRNA Cards Set …………… 28,41
TaqMan Custom Arrays ………………………………………… 28
TaqMan Cells-to-CT Control Kit ……………………………… 13
TaqMan Control Genomic DNA(Human) ………………… 17
TaqMan Control Total RNA(Human) ……………………… 17
TaqMan Copy Number Assays ……………………………… 49
TaqMan Copy Number Reference Assay …………………… 49
TaqMan Drug Metabolism Genotyping Assay ……………… 45
TaqMan EGFR Exon 19 Deletions Assay …………………… 48
TaqMan Endogenous Control ……………………………… 30,31
TaqMan Fast Advanced Master Mix ………………………… 18
TaqMan Fast Cells-to-CT Kit …………………………………… 13
TaqMan Fast Universal PCR Master Mix …………………… 18
TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix ……………………… 21
TaqMan GAPDH Assay, JUN dye/QSY probe ……………… 22
TaqMan GAPDH Assay, JUN dye/QSY probe,
primer-limited ………………………………………………… 22
TaqMan Gene Expression Assays, Inventoried ………… 24,30
TaqMan Gene Expression Assays, Made-to-Order ……… 24
TaqMan Gene Expression Cells-to-CT Kit …………………… 13
-Q-
QuantStudio 3D デジタル PCR システム ……………………… 9
QuantStudio 3D デジタル PCR Chips ………………………… 9
QuantStudio 3D デジタル PCR Master Mix …………………… 9
-R-
Random Hexamers……………………………………………… 17
RNA later -ICE …………………………………………………… 11
RNA later Solution ……………………………………………… 11
RNAqueous Kit ………………………………………………… 11
RNAqueous Midi Kit …………………………………………… 11
RNAqueous -4PCR Kit ………………………………………… 11
RNAqueous -96 Automated Kit ……………………………… 11
RNAqueous -96 Kit …………………………………………… 11
RNAqueous -Micro Kit ………………………………………… 11
RNase Inhibitor ………………………………………………… 17
-S-
Silencer Select GAPDH siRNA (Hs, Mm, Rn) ……………… 34
Silencer Select Human Druggable Genome
siRNA Library V4 …………………………………………… 34
Silencer Select Human Druggable Genome V4
siRNA Ext Set ……………………………………………… 34
Silencer Select Human Extended Druggable Genome
siRNA Library V4 …………………………………………… 34
Silencer Select Human Genome
siRNA Library V4 …………………………………………… 34
Silencer Select Human Genome
siRNA V4 Extension Set …………………………………… 34
Silencer Select Human GPCR siRNA Library V4 …………… 34
Silencer Select Human Ion Channel siRNA Library V4 …… 34
Silencer Select Human Kinase siRNA Library V4 ………… 34
Silencer Select Human Nuclear Hormone Receptor
siRNA Library V4 …………………………………………… 34
Silencer Select Human Phosphatase siRNA Library V4 … 34
Silencer Select Human Protease siRNA Library V4 ……… 34
Silencer Select Negative Control siRNA …………………… 34
Silencer Select Pre-designed siRNA ………………………… 34
Silencer Select Validated siRNA ……………………………… 34
72
■ INDEX (製品名順)
TaqMan RNase P Assay, ABY dye/QSY probe …………… 22
TaqMan RNase P Assay, ABY dye/QSY probe,
primer-limited ………………………………………………… 22
TaqMan Sample-to-SNP Kit …………………………………… 47
TaqMan siRNA Assays, Made-to-Order …………………… 35
TaqMan TAMRA Probe ………………………………………… 60
TaqMan Universal Master Mix II, no UNG …………………… 19
TaqMan Universal Master Mix II, with UNG ………………… 19
TaqMan Universal PCR Master Mix ………………………… 20
TaqMan Universal PCR Master Mix,
No AmpErase UNG ………………………………………… 20
TE Buffer pH7.0 ………………………………………………… 11
THE RNA Storage Solution …………………………………… 11
TRIzol LS Reagent ……………………………………………… 10
TRIzol Plus RNA Purification System ………………………… 10
TRIzol Reagent ………………………………………………… 10
TURBO DNA-free Kit …………………………………………… 11
TaqMan Gene Expression Master Mix ……………………… 20
TaqMan Gene Signature Arrays ……………………………… 28
TaqMan Genotyping Master Mix …………………………… 46
TaqMan GTXpress Master Mix ……………………………… 46
TaqMan Human Endogenous Control Array ……………… 29
TaqMan MGB Probe …………………………………………… 60
TaqMan MGB SNP検出キット ………………………………… 60
TaqMan MGB遺伝子発現検出キット ………………………… 60
TaqMan MicroRNA Assays, Inventoried …………………… 40
TaqMan MicroRNA Assays, Made-to-Order ………………… 40
TaqMan MicroRNA Cells-to-CT Kit …………………………… 13
TaqMan MicroRNA RT Kit ……………………………………… 39
TaqMan miRNA ABC Purification Kit-Human Panel ……… 38
TaqMan Multiplex Master Mix ………………………………… 22
TaqMan Mutation Detection Assays ………………………… 48
TaqMan Mutation Detection IPC Reagent Kit ……………… 48
TaqMan Mutation Detection Reference Assays …………… 48
TaqMan Non-coding RNA Assays …………………………… 42
TaqMan PCR Core Reagents Kit …………………………… 21
TaqMan Pre-Designed SNP Genotyping Assays ………… 45
TaqMan PreAmp Cells-to-CT Kit ……………………………… 13
TaqMan PreAmp Master Mix ………………………………… 21
TaqMan PreAmp Master Mix Kit ……………………………… 21
TaqMan Pri-miRNA Assays …………………………………… 42
TaqMan Probe キット …………………………………………… 60
TaqMan Protein Assay Kit ……………………………………… 53
TaqMan Protein Assays Buffer Kit …………………………… 53
TaqMan Protein Assays Core Reagents Base Kit ………… 53
TaqMan Protein Assays Fast MasterMix …………………… 53
TaqMan Protein Assays Oligo Probe Kit …………………… 53
TaqMan Protein Assays Open Kit …………………………… 53
TaqMan Protein Expression Core Reagents Kit
with MasterMix ……………………………………………… 53
TaqMan QSYプローブ ……………………………………… 22,60
TaqMan Reagents Starter Kit ………………………………… 21
TaqMan Reverse Transcription Reagents …………………… 17
TaqMan RNA-to-CT 1-Step Kit ……………………………… 15
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