[1] Manuale d’uso - QuickToxTM Kit for QuickScan Aflatoxin FREE - Rev. 8 - 19/05/2017
QuickToxTM Kit for QuickScan
Aflatoxin FREE (AQ-209-BG) Cat. # GX11178
Manuale d’uso Leggere attentamente il manuale prima di procedere all’uso del kit
Via San Geminiano, 4
41030 San Prospero (MO)- Italy
: +39 059 8637161
: +39 059 7353024
: www.generon.it
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Il kit AflatoxinFREE consente di testare molte nuove matrici oltre a quelle tradizionalmente disponibili (mais verde e secco e
frumento) rilevando la presenza di Aflatossine a partire da 1.5 a 300 ppb a seconda delle matrici , come indicato di seguito:
Tabella 1
Gruppo Limite di rilevabilità
(LOD)
Limite “alto”
senza diluizione
Limite “alto”
con diluizione
MG1 – MG8 2.5-2.7 ppb*
(vd Tab.2) 30 ppb >30-100 ppb
MG9 – Mais (alta sensibilità) ** 1.5 ppb 20 ppb >20-100 ppb
MG10-12 7.5 ppb 99 ppb >99-300 ppb***
MG13-16 2.7 ppb 30 ppb >30-100 ppb
MG17 – Semi di arachidi (alta sensibilità) 2.5 ppb 30 ppb N/A
*In base al gruppo di matrice
**MG9 – Mais (alta sensibilità) dà risultati fino a 0, ma il LOD è di 1.5 ppb: considerare una minore accuratezza dei risultati al di sotto del LOD ***Per la matrice Seme di nocciola del gruppo MG10 non è possibile ottenere un'estensione del range tramite diluzione addizionale.
Per poter sfruttare questa possibilità bisogna prima di tutto andare a calibrare lo strumento utilizzando il foglio con i codici a
barre inserito nella scatola.
Note importanti:
La scansione del codice a barre è necessaria per tutte le matrici alla ricezione del kit;
Una volta eseguita questa prima scansione il codice a barre viene memorizzato per l’intero lotto di strip in uso;
Il foglio con i codici a barre è specifico per il lotto; alla ricezione di un nuovo kit è dunque necessario ricalibrare lo
strumento;
Altri kit appartenenti alla linea QuickTox™ possono contenere un foglio con codici a barre utile a calibrare lo strumento
per altre specifiche tossine; il software QuickScan™ riconosce e memorizza le diverse calibrazioni distinguendo le varie
tossine in maniera indipendente;
Si raccomanda inoltre di mantenere costantemente aggiornato il software all’ultima versione disponibile; sarebbe
preferibile pertanto che il PC a cui lo scanner è collegato fosse on-line in modo che gli aggiornamenti vengano «visti»
automaticamente.
Per calibrare lo scanner dopo averlo acceso e lanciato il software QuickScan™:
1. Aprire il coperchio dello scanner e mettere il foglio con i codici a barre sul vetro rivolti verso il basso;
2. Chiudere il coperchio e cliccare il tasto Read Test (lo stesso che si usa per fare le analisi) in alto a destra nella schermata
principale;
3. Un messaggio di avvenuta calibrazione, con l’elenco dei nuovi gruppi di
matrici riconosciuti, apparirà sullo schermo (vedi immagine).
Se testate soltanto le matrici del Gruppo DF MG1, piegate il Multi
Matrix Barcode e scannerizzate soltanto il codice a barre DF MG1.
Se testate soltanto le matrici del Gruppo DF MG2, piegate il Multi
Matrix Barcode e scannerizzate soltanto il codice a barre DF MG2.
Questo permetterà al programma di saltare la tappa che obbliga
l’utilizzatore a selezionare un gruppo di matrici.
Tutte le matrici validate sono elencate in Tabella 2 (pagina seguente).
1 – Calibrazione dello scanner
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Tabella 2
* Validazione effettuata su trinciati di mais al termine del processo di “maturazione” con umidità compresa tra il 50-70%.
Definizione Inglese Definizione Italiana Gruppo Soluzione Estraente Guida rapida
Peanut hull Arachidi - Gusci MG12 Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo Pagina 12
Peanut seeds Arachidi - Semi MG10 Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo Pagina 12
Peanut seeds
(High Sensitivity)
Arachidi-Semi
(alta sensibilità) MG17 Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo Pagina 12
Whole Peanut Arachidi grezze MG11 Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo Pagina 12
Oats Avena MG7 50% Etanolo Pagina 11
Copra coconut
meal Cocco - Panello MG3 50% Etanolo Pagina 11
Cotton seed meal Cotone - Panello MG4 Acetonitrile 50% Pagina 10
Cottonseed,
Delinted Cotone - Semi defibrati MG2 50% Etanolo Pagina 11
Wheat Frumento MG1 Bustina Buffer EB17 e acqua Pagina 10
Corn Mais
(Estratto ad acqua) MG1 Bustina Buffer EB17 e acqua Pagina 10
Corn flour Mais - Farina MG8 50% Etanolo Pagina 11
Hominy Feed Mais - Farina Tostata MG3 50% Etanolo Pagina 11
Corn germ Mais - Germe MG2 50% Etanolo Pagina 11
Corn germ meal Mais - Panello di germe MG6 80% Etanolo Pagina 10
Corn gluten meal Mais - Panello di glutine MG3 50% Etanolo Pagina 11
Corn gluten feed Mais - Semola glutinata MG5 Acetonitrile 84% Pagina 10
Corn Silage Mais - Trinciato* MG3 80% Etanolo Pagina 10
Corn
(High Sensitivity)
Mais
(alta sensibilità) MG9 50% Etanolo Pagina 11
Hazelnut Seed Nocciola - Semi MG10 Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo +
Acido Acetico 7% Pagina 12
Barley Orzo MG8 50% Etanolo Pagina 11
DDGS Residuo secco di
distilleria MG2 50% Etanolo Pagina 11
Rice Bran Riso - Crusca MG2 50% Etanolo Pagina 11
Rice Hulls Riso - Lolla MG16 50% Etanolo Pagina 11
Rice, White Riso Bianco MG15 50% Etanolo Pagina 11
Rice, White
Glutinous Riso bianco glutinoso MG14 50% Etanolo Pagina 11
Rice, Rough Riso grezzo MG7 50% Etanolo Pagina 11
Brown Rice Riso Integrale MG1 Bustina Buffer EB17 e acqua Pagina 10
Rice, Black
Glutinous Riso nero glutinoso MG13 50% Etanolo Pagina 11
Rye, Whole Segale - Semi grezzi MG6 50% Etanolo Pagina 11
Soybean Meal Soia - Panello MG8 50% Etanolo Pagina 11
Sorghum Sorgo MG7 50% Etanolo Pagina 11
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Ogni kit contiene: 50 strip QuickTOX (Tubo bianco), 50 bustine di Buffer EB17 (bustine in alluminio), una bottiglietta di Buffer
DB5, 100 puntali per pipetta (sacchetto trasparente), 50 bicchierini per eseguire il test (sacchetto blu) e Multi-Matrix Barcode
(lotto-specifico). Nel caso si renda necessario ulteriore buffer DB5 è possibile acquistarlo (Cat. # GX11665) ricordando che il
lotto di buffer è legato al lotto di strip pertanto nell’ordine va indicato il numero di lotto di strip da abbinarvi.
Generon può fornire anche tutti i materiali necessari ad eseguire l’analisi non forniti con il kit: Bilance (Cat. # ACC3039) e
barattoli per la pesata (Cat. # ACC3525); Pipette a volume variabile da 200 microlitri (Cat. # ACC3015) e 1000 microlitri (Cat.
# ACC3014); Microcentrifughe (Cat. # ACC1064) o filtri (Cat. # ACC3504) per chiarificare gli estratti; Puntali da 1 ml (Cat. #
ACC3514) e microtubi (Cat. # ACC1564) per utilizzare la microcentrifuga; Termoblocco per realizzare l’analisi a temperatura
costante (GX12458); Molino Golia con crivello 1,5 mm (Cat. # ACC3081) per macinare i campioni; Cilindro graduato (Cat. #
ACC1506) per misurare il liquido estraente.
Il buffer EB17 è infiammabile ed irritante per pelle, occhi e vie aeree, evitarne pertanto il contatto. Evitare che il buffer venga
a contatto con sostanze ossidanti come la varechina in quanto potrebbe reagire violentemente.
Etanolo ed acetonitrile sono sostanze infiammabili da maneggiare con prudenza.
L’acetonitrile è una sostanza tossica da maneggiare sotto cappa chimica.
Le strip sono sensibili all’umidità pertanto si consiglia di conservarle all’interno del tubo ben tappate. Il tappo contiene silice
disseccante che le proteggerà. Evitare di piegare le strip in quanto questo ne comprometterebbe il normale flusso.
Prima di utilizzare le strip portarle a temperatura ambiente (20-25° C) in quanto esse sono state tarate a queste temperature.
Estrarre dal frigo almeno mezz’ora prima delle analisi: le strip necessarie e il tampone DB5 BUFFER. Riporre le altre strip in frigo.
ATTENZIONE: L’analisi deve essere eseguita a temperatura ambiente, a 20-25° C. Se eseguito a temperature inferiori o superiori,
il test può dare risultati errati.
Preparate anche la soluzione estrattiva necessaria in modo che sia a temperatura ambiente. Nella preparazione delle
soluzioni utilizzare acqua demineralizzata o acqua minerale non gasata.
ATTENZIONE: se si segue il protocollo Semi di arachidi (alta sensibilità) l’analisi deve essere eseguita a 22° C. Una temperatura
inferiore o superiore può falsare i risultati. Accendere quindi il termoblocco e regolare la temperatura a 22° C almeno 10
minuti prima dell’esecuzione dell’analisi. Assicurarsi che la temperatura sia stabile e che lo schermo indichi “OK” prima di
cominciare l’analisi. Se sono state programmate analisi durante tutto il giorno, si raccomanda di accendere l’incubatore al
mattino e lasciarlo acceso durante tutta la giornata.
Le Guide Rapide in fondo al manuale forniscono una breve guida per testare ognuna delle matrici. Maggiori dettagli sono
descritti in seguito per ogni passaggio dell’analisi, e sono utili per poter ottenere risultati ottimali e precisi.
2 – Componenti del Kit
3 – Precauzioni
4 – Preparazione dei reagenti
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1. Raccogliere un campione rappresentativo del materiale da analizzare seguendo le indicazioni sul campionamento della
UE e comunque possibilmente almeno 1 - 2 Kg. Macinare finemente tutto il campione arrivando ad una granulometria di
almeno 20 Mesh (0.8 mm). Granulometrie più grossolane possono limitare l’efficienza estrattiva portando a sottostime.
Mescolare accuratamente tutto il materiale macinato prima di effettuare il subcampionamento per minimizzare la
variabilità.
a. Attenzione: è preferibile macinare le arachidi previo congelamento o insieme a ghiaccio secco; il riscaldamento
conseguente la macinazione creerebbe una massa oleosa difficilmente gestibile
b. Non eccedere nella macinazione del frumento in quanto una sfarinatura eccessiva causa problemi all’esecuzione del
test
c. Per l'insilato di mais è utile usare un macinatore da caffè (o simile), per 1 minuto, per raggiungere la giusta consistenza
2. Prendere un barattolo pulito e rimuovere il coperchio. Posizionare il barattolo sulla bilancia e premere il pulsante TARA.
Pesare 25g di campione macinato. Il barattolo deve essere grande a sufficienza da garantire un'adeguata agitazione del
campione;
3. Aggiungere la soluzione di estrazione nelle proporzioni solido: liquido corrette, sulla base della matrice
Per mais (se non si usa l’alta sensibilità), grano, riso integrale: aggiungere una bustina di EB17, fornita all ’interno del kit, e
versare 75 ml di acqua distillata;
Per tutte le altre matrici vedere la Tabella 3 (Pag.6) ed aggiungere la soluzione estraente indicata nell’appropriato
rapporto di diluizione;
4. Chiudere il recipiente. Agitare vigorosamente per due minuti assicurandosi che tutto il campione venga bagnato dalla
soluzione estraente e che non si formino grumi nei quali l'estrazione non sarebbe completa. Qualora si utilizzi un agitatore
meccanico (Cat. # ACC1912) il tempo di estrazione può ridursi ad un minuto;
5. Sulla base della matrice, sono possibili più metodi per rimuovere il particolato dall'estratto*:
Centrifugazione Filtrazione Sedimentazione
1. Tagliare la punta del puntale per evitare
che si intasi col pulviscolo;
2. Prelevare 800 µl di surnatante dell'estratto e
trasferirlo in un microtubo da centrifuga;
3. Centrifugare per 30 secondi a 7200 rpm
bilanciando correttamente il rotore.
1. Inserire un apposito filtro in carta
plissettata (Cat. # ACC3504) in
un recipiente vuoto;
2. Versare l'estratto nel filtro;
3. Estrarre il filtro per recuperare
l'estratto filtrato nel recipiente.
1. Lasciar sedimentare il
campione fino alla formazione
di uno strato superiore;
2. Usare lo strato superiore
dell'estratto.
*Dove possibile è preferibile chiarificare il campione per centrifugazione.
5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione
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Tabella 3
Definizione Italiana Soluzione Estraente Rapporto di estrazione
Arachidi - Gusci *Soluzione NaCl (30%)+80% Etanolo 0.8 ml/g +3 ml/g
Arachidi – Semi *Soluzione NaCl (30%)+80% Etanolo 0.8 ml/g +3 ml/g
Arachidi-Semi (alta sensibilità) *Soluzione NaCl (30%)+80% Etanolo 0.4 ml/g + 2 ml/g
Arachidi grezze *Soluzione NaCl (30%)+80% Etanolo 0.8 ml/g +3 ml/g
Avena 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Cocco - Panello 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Cotone - Panello Acetonitrile 50% 1:2 (50 ml su 25 g)
Cotone - Semi defibrati 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Frumento Bustina EB17 + acqua 1:3 (75 ml su 25 g)
Mais (Estratto ad acqua) Bustina EB17 + acqua 1:3 (75 ml su 25 g)
Mais - Farina 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Mais - Farina Tostata 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Mais - Germe 50% Etanolo 1:1,6 (40 ml su 25 g)
Mais - Panello di germe 80% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Mais - Panello di glutine 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Mais - Semola glutinata Acetonitrile 84% 1:4 (100 ml su 25 g)
Mais - Trinciato 80% Etanolo* 1:4 (100 ml su 25 g)
Mais (alta sensibilità) 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Nocciola - Semi *Soluzione NaCl (30%) + 80% Etanolo +
Acido Acetico 7%
0.8 ml/g + 2.88 ml/g + 0.12 ml/g
Orzo 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Residuo secco di distilleria 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Riso - Crusca 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Riso - Lolla 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Riso Bianco 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Riso bianco glutinoso 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Riso grezzo 50% Etanolo 1:3 (75 ml su 25 g)
Riso Integrale Bustina EB17 + acqua 1:4 (100 ml su 25 g)
Riso nero glutinoso 50% Etanolo 1:4 (100 ml su 25 g)
Segale - Semi grezzi 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Soia - Panello 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
Sorgo 50% Etanolo 1:2 (50 ml su 25 g)
*Per preparare la soluzione di NaCl al 30%: sciogliere 29.4g di sale da tavola (non ionizzato) ogni 100 ml di acqua
minerale. Mescolare bene fino al completo scioglimento del sale.
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1. Preparare un bicchierino di quelli contenuti nel sacchetto blu del kit (per Semi di arachidi -alta sensibilità- preparare un tubo
di reazione 12x75mm). Utilizzando la micropipetta calibrata con un puntale pulito trasferire all’interno del bicchierino/tubo
di reazione i volumi di buffer DB5 e campione secondo quanto riportato nelle Guide Rapide divise per matrice in fondo al
manuale. Cambiare il puntale tra l’aggiunta del buffer e quella del campione.
2. Mescolare accuratamente con la pipetta (aspirare ed espellere delicatamente il liquido 2/3 volte). Evitare di fare schiuma
in quanto le bolle provocano dei problemi di flusso nella strip che si traducono in bande non completamente sviluppate e
quindi in errori di lettura o errori di quantificazione.
• NOTA: Qualora il volume complessivo sia superiore ai 300 µL (ad es. nella semola glutinata di mais) trasferire 200 µL della
miscela in un secondo bicchierino pulito.
3. Solo per Semi di arachidi -alta sensibilità- accertarsi che l’incubatore abbia raggiunto i 22° C e inserire il tubo di reazione
all’interno. Se la temperatura ambiente è sconosciuta o è al di fuori dell’intervallo 20-24°C (68-75°F), lasciare acclimatare il
campione nell’incubatore per 2 minuti prima di procedere all’analisi.
4. Inserire la strip nel bicchierino/tubo di reazione. La parte da immergere nel liquido è quella colorata.
5. Attendere lo sviluppo della strip per il tempo indicato nelle Guide Rapide divise per matrice in fondo al manuale.
6. Estrarre la strip e tagliare via con le forbici la parte finale colorata. Procedere con la lettura della strip.
1. Aprire il programma di lettura, facendo doppio clic sull’icona Quickscan (QS) sullo schermo. Apparirà il menu principale.
2. Estrarre dal Quickscan il supporto per le strip (fig.1 parte nera a punta);
3. Aprire lo sportellino e posizionare la strip sul numero 1. La strip deve avere la parte col codice a barre rivolta verso il basso.
È possibile posizionare fino a 4 strip contemporaneamente, sfruttando le 4 posizioni disponibili (Fig.2);
4. Chiudere lo sportellino. Tenendolo premuto con un dito, inserire di nuovo il supporto nello scanner (Fig.3);
5. Cliccare sul comando “READ TEST” sulla schermata principale del programma (Fig.4). Attendere che il Quickscan
termini la scansione.
6 – Corsa della strip
7 – Lettura della strip
1 2 3 4 1 2 3
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1. Dopo che il software ha eseguito la lettura selezionare il «matrix group» di appartenenza per ogni strip analizzata
selezionandolo dall’apposito menu a tendina (Fig. 5);
2. A questo punto i risultati compariranno nella finestra in cui andare ad inserire i dettagli identificativi dell’analisi (Fig. 6)
Affinché l’immagine delle strip venga salvata inserire almeno il nome del campione nello spazio “Sample ID” e premere Invio
(Enter) sulla tastiera;
3. Un eventuale risultato <LOD significa inferiore al limite di rilevazione, quindi Aflatossine totali inferiori a 3 ppb;
4. Un eventuale risultato >30 ppb significa che il campione supera i 30 ppb. Se si necessita di una misurazione precisa del
valore, procedere al paragrafo “Campioni che superano 30 ppb”;
5. Se si desidera stampare immediatamente il report di analisi, premere il comando PRINT in basso a destra;
6. Premere CLOSE per chiudere la finestra di lettura. Per rivedere o stampare i risultati in un secondo momento, doppio clic
sulla cartella REPORTS sul desktop;
7. Per visualizzare il registro di tutte le analisi eseguite, cliccare sul comando DATA LOG nella schermata iniziale del programma.
1. Se il risultato iniziale è maggiore del limite “alto”, i campioni possono essere diluiti e ritestati per estendere la quantificazione
(vedere Tabella 1 a pag. 2);
2. Combinare il reagente e l’appropriato reagente di estrazione (soluzione di diluizione EB17, Etanolo, Acetonitrile) per creare
una diluizione 1:6. Esempio: 1 parte di estratto chiarificato (100 µl) + 5 parti di diluente (500µl). Misure accuratamente e
mescolare bene;
Nota: per le matrici estratte con EB17, bisogna preparare una soluzione di diluizione EB17. Mescolare 1 bustina di polvere
EB17 con 300 ml di acqua e mescolare bene; la soluzione di diluizione appare torbida. Può essere conservata, dopo la
preparazione, fino a 30 giorni a temperatura ambiente. Risospendere la soluzione prima di ogni utilizzo;
3. Riprendere l’analisi come descritto in precedenza, aggiungendo il buffer + l’estratto diluito nel tubo di reazione, ed
inserendo una nuova strip per il tempo specificato. Esempio: per mais, piepattre 100 µl di DB5 + 100 µl di estratto doluuito
con al Soluzione di Diluizione in un nuovo tubo, aggiungere une nuova strip e attendere 4 minuti per i risultati;
4. Procedere con la lettura mediante Quickscan. Nella finestra dei risultati (fig. 6), selezionare nella colonna “Dilution” dal
menu a tendina il fattore 1: A, il software calcolerà automaticamente il livello di contaminazione tenendo conto della
diluizione effettuata.
8 – Analisi del risultato
9 – Campioni che superano 30 ppb
5 6
[9] Manuale d’uso - QuickToxTM Kit for QuickScan Aflatoxin FREE - Rev. 8 - 19/05/2017
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duplicazione l’acquirente si impegna a compiere ogni ragionevole sforzo per impedire l'uso non autorizzato e la distribuzione
delle informazioni sulla proprietà. Questo manuale è la semplice traduzione in lingua italiana del manuale in lingua straniera
presente nel kit.
10 – Dichiarazione di non responsabilità
[10] Manuale d’uso - QuickToxTM Kit for QuickScan Aflatoxin FREE - Rev. 8 – 19/05/2017
29/07/2016
Matrice Gruppo LOD
(ppb)
*Aggiungere al recipiente
nell’ordine
*Immergere completamente il
campione e agitare *Purificare
**Aggiungere al tubo di
reazione poi mescolare
**Immergere la
strip per
Riso Integrale
MG-1 2.7
25g campione+
1 bustina EB17 +
75 ml acqua
1 min agitatore
(velocità massima)
o
2 min a mano
Centrifugare
(30 sec a 7200 rpm)
o
filtrare
100 µl DB5 +
100 µl estratto
4 min Mais
Frumento Centrifugare
(30 sec a 7200 rpm) 5 min
*per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5)
** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
Matrice Gruppo LOD
(ppb)
*Aggiungere al recipiente
nell’ordine
*Immergere completamente il
campione e agitare *Purificare
**Aggiungere al tubo di
reazione poi mescolare
**Immergere la
strip per
Mais - Panello di
germe MG-6
2.7 25g campione+
50 ml EtOH 80% 1 min agitatore
(velocità massima)
o
2 min a mano
Sedimentare
(2 min)
200 µl DB5 +
100 µl estratto
5 min
Mais - Trinciato MG-3 Centrifugare
(1 min a 7200 rpm)
Cotone - Panello MG-4
2.5
25g campione+
***50 ml Acetonitrile 50%
Sedimentare
(almeno 2 min)
Mais - Semola
glutinata MG-5 25g campione+
***40 ml Acetonitrile 84%
2 min agitatore
+(velocità massima)
o
2 min a mano
Sedimentare
(1 min)
Premiscelare in un recipiente
pulito 500 µl DB5 +100 µl
estratto
Poi aggiungere 200 µl di
miscela al tubo di reazione
*per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5)
** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
*** l’acetonitrile può perdere. Fare riferimento al paragrafo 3 – Precauzioni (pag.3) per le misure preventive.
11 – Guide rapide
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29/07/2016
Matrice Gruppo LOD
(ppb)
**Aggiungere al recipiente
nell’ordine
**Immergere completamente
il campione e agitare **Purificare
***Aggiungere al tubo di
reazione poi mescolare
**Immergere la
strip per
*Mais (alta sensibilità) MG9 1.5
25g campione+
50 ml EtOH 50%
1 min agitatore
(velocità massima)
o
2 min a mano
Centrifugare
(1 min a 7200 rpm)
300 µl DB5 +
200 µl estratto
5 min
Orzo MG8 2.7
200 µl DB5 +
100 µl estratto
Mais - Farina MG8 2.7
Avena MG7 2.7
Riso grezzo MG7 2.7
Segale - Semi grezzi MG6 2.7
Sorgo MG7 2.7
Soia - Panello MG8 2.7
Cotone - Semi
defibrati MG2 2.5
25g campione+
100 ml EtOH 50%
100 µl DB5 +
100 µl estratto
7 min
Cocco - Panello MG3 2.7
5 min
Mais - Germe MG2 2.5
Mais - Panello di
glutine MG3 2.7
Residuo secco di
distilleria MG2 2.5
Mais - Farina Tostata MG3 2.7
Riso nero glutinoso MG13 2.7
Riso - Crusca MG2 2.5
Riso - Lolla MG16 2.7
Riso bianco MG15 2.7 200 µl DB5 +
100 µl estratto Riso bianco glutinoso MG14 2.7
* dà risultati fino a 0, ma bisogna l’accuratezza dei risultati è minore al di sotto del LOD
**per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5). Per avena, centrifugare immediatamente dopo l’agitazione, o si
formerà una sostanza collosa
*** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
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Matrice Gruppo LOD
(ppb)
*Aggiungere al recipiente
nell’ordine
*Immergere completamente il campione
e agitare *Purificare
**Aggiungere al tubo di
reazione poi mescolare
**Immergere la
strip per
Arachidi -
Gusci MG12
7.5
25g campione+
***20 ml soluzione NaCl 30%
(mescolare bene e lentamente)
+ 75 ml EtOH 80%
1 min agitatore (velocità massima)
o
2 min a mano
Filtrare; mescolare
bene l’estratto
chiarificato prima di
procedere
200 µl DB5 +
100 µl estratto
4 min Arachidi - Semi MG10
400 µl DB5 +
100 µl estratto Arachidi grezze MG11
*per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5)
** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
Matrice Gruppo LOD
(ppb)
*Aggiungere al recipiente
nell’ordine
*Immergere completamente il campione
e agitare *Purificare
**Aggiungere al tubo di
reazione poi mescolare
**Immergere la
strip per
Nocciola –
Semi MG10 7.5
25g campione+
20 ml soluzione NaCl 30%
(mescolare bene e lentamente)
+ 72 ml EtOH 80%+
***3 ml Acido Acetico 7%
1 min agitatore (velocità massima)
o
2 min a mano
Filtrare; mescolare
bene l’estratto
chiarificato prima di
procedere
400 µl DB5 +
100 µl estratto 4 min
*per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5)
** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
*** Può essere usato aceto commerciale con 7% di acido acetico
*per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 5 – Estrazione dell’aflatossina dal campione (pag.5)
** per i dettagli operativi della procedura, leggere il paragrafo 6 – Corsa della strip (pag.7)
*** Il passaggio di acclimatazione del tubo è richiesto soltanto se la temperatura ambiente dell’analisi è sconosciuta o non cade nel range 20-24°C (68-75°F).
Matrice Gruppo LOD
(ppb)
*Aggiungere al recipiente
nell’ordine
*Immergere
completamente il
campione e agitare
*Purificare
**Aggiungere al tubo
di reazione poi
mescolare
Inserire il tubo di reazione
nel termoblocco a 22°C
**Immergere la
strip per
Arachidi – Semi
(alta sensibilità) MG17 2.5
25g campione+10 ml soluzione
NaCl 30%
(mescolare bene e lentamente)
+ 50 ml EtOH 80%
1 min agitatore
(velocità massima)
o
2 min a mano
Filtrare; mescolare
bene l’estratto
chiarificato prima
di procedere
300 µl DB5 +
200 µl estratto
***Lasciare acclimatare
per 2 min 4 min