7/25/2019 CROMATOGRAFIA, FUNDAMENTOS
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CROMATOGRAFA
Introduccin
La cromatografa es una tcnica de
separacin basada en la diferente velocidadcon que se mueven los solutos a travs deun medio estacionario mediante el flujo de
un disolvente o eluente.
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CROMATOGRAFA
Introduccin
La cromatografa se origin alrededor de
1!", cuando #.#. $unge, qumico alemndescribe el proceso de separacin decolorantes por un procedimiento
cromatogrfico en papel.
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CROMATOGRAFAIntroduccin
%orresponde a &ijail 's(ett, botnico
ruso, quien entre 1)"* y 1)1",establece las ventajas de lacromatografa y adopta parcialmente la
terminologa, sustentando las bases delos principales procedimientose+perimentales relativos a esta tcnica
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CROMATOGRAFAIntroduccin
's(ett logr la separacin de lospigmentos de las ojas verdes en unacolumna de sulfato clcico, dndole elnombre a esta tcnica de
%romatografa, croma - color ygrapos - escritura.
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CROMATOGRAFAIntroduccin
pesar de que la cromatografa permita
simplificar la separacin de sustancias deme/clas complejas, no fue asta fines de ladcada de los treinta y principio de loscuarenta cuando se empe/ a desarrollar
esta tcnica, encontrndose m0ltiplesaplicaciones.
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CROMATOGRAFAIntroduccin
Las 0nicas sustancias que no pueden
separarse por cromatografa son lasinsolubles y aquellas que sedescomponen con el solvente o con la
fase estacionaria.
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CROMATOGRAFA
Introduccin 'odo esto llevo a que en 1)!, . 2. 3.
&artin y $. L. &. 4ynge recibieran elpremio 5obel por sus trabajos encromatografa.
dems, se otorgaron ms de una decena depremios 5obel a trabajos basados en datoscromatogrficos.
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CROMATOGRAFA
Introduccin La cromatografa como tcnica de anlisis puede
compararse con tcnicas instrumentales como
6..&. 7$, 6 de &asa u otra similar8 siendo todastcnicas de identificacin, mientras que lacromatografa es a la ve/ tcnica de separacin y deidentificacin.
9urante los 0ltimos a:os la cromatografa apermitido el desarrollo de los ms efectivosmtodos de anlisis qumicos.
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%romatografa Tcnica de separacin cromatogrfica:
; Permite separar componentes estrecamentere!acionados en me"c!as comp!e#as
; $a muestra %ue se desea separar& se disue!'e en !afase m'i!& %ue norma!mente puede ser un gas&!(%uido o f!uido supercr(tico)
; $a fase m'i! se ace pasar a tra's de una fase
estacionaria& inmisci*!e& !a cua! se mantiene fi#a enuna co!umna o en una superficie s!ida %ue act+acomo soporte)
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,eparacin cromatogrfica
Las dos fases se eligen de tal forma que loscomponentes de la muestra, se distribuyan deforma distinta entre ambas.
quellos componentes que son fuertementeretenidos por la fase estacionaria, se muevenlentamente con el flujo debido a la fase mvil.
quellos componentes de la muestra que tienenuna reducida afinidad por la fase estacionaria sedespla/an con una mayor rapide/ al serarrastrados por la fase mvil.
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,eparacin cromatogrfica
%omo diferencia en la movilidad, lasdistintas sustancias que componen la
muestra sometida a la cromatografa, seseparan en una serie de bandas que puedenser anali/adas cualitativamente o
cuantitativamente.
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,eparacin cromatogrfica
#ortale/as analticas de las tcnicascromatogrficaso
&ecanismo< e+clusin por tama:o
#ase &vil< Lquido #ase estacionaria< Lquido en los intersticios de un slidopolimrico
6quilibrio establecido durante el procesoan 9eemter
;'eora para columnas capilares< ?olay
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(roceso cromatogrfico
Teor(a de !os P!atos Tericos:&artin y4ynge
;$a co!umna cromatogrfica estconstituida por una serie de p!atoscontenidos en !a fase estacionaria)
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(roceso cromatogrfico
Teor(a de !os P!atos Tericos:&artin y 4ynge
;,upone %ue: e! 'o!umen de fase estacionaria en cada p!ato es
constante %ue e! 'o!umen de fase m'i! es constante de
p!ato a p!ato
%ue en cada p!ato !as dos fases estn en
e%ui!i*rio& - %ue e! Coeficiente de istri*ucin es constante e
independiente de !a concentracin de! so!uto
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(roceso cromatogrfico
Teor(a de !os P!atos Tericos:&artin y4ynge
1P
=
w
tN
R
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(roceso cromatogrfico
Teor(a de !os P!atos Tericos:&artin y4ynge
;5o considera< Re!acin entre eficiencia co!umna - e!
tama>o de !a part(cu!a& !a difusin de !osso!utos& !a 'e!ocidad de f!u#o - !atemperatura
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(roceso cromatogrfico
Teor(a Cintica o de !a 'e!ocidad de !a cromatograf(a; 0=p!ica en trminos cuantitati'os !as formas de !os
pic - !os efectos de !as distintas 'aria*!es so*re !a
ancura de estos pic; Considera e! proceso cromatogrfico en funcin de!os factores cinticos %ue inter'ienen en !
Tra-ectorias %ue e! so!uto toma durante su migracin atra's de !a co!umna& %ue generan cam*ios en !a 'e!ocidad
de f!u#o ifusin a=ia! o $ongitudina! de! so!uto en !a fase m'i! Cintica en !a transferencia de masa entre !a fase m'i! - !a
estacionaria& resistencia)
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(roceso cromatogrfico
Teor(a Cintica
0cuacin de ?an eemter
GsegHaireR
GcmH
t
$u
Cuu
/A60TPG6H
=
++=
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(roceso cromatogrfico
0cuacin de ?an eemter
;A / C . Coeficientes de difusin aparenteQ $ongitudina!& transferencia de masa
;6. a!tura efecti'a de !a *anda cromatogrfica
;u . 'e!ocidad !inea! de !a fase m'i!
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#orma de los pic cromatogrficos
!e forma gaussiana
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#orma de los pic cromatogrficos
Comportamiento de una mol.cula de soluto; 6+perimenta miles de transferencias entre la fase
estacionaria y la fase mvil
; 6l tiempo de permanencia en cada una de las fasesdepende del tiempo en que ocurren cada una de estastransferencias,
; La variabilidad promedio de la velocidad con que se
mueven cada una de estas partculas en la fase mvil esmuy irregular
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#orma de los pic cromatogrficos
Comportamiento de una mol.cula desoluto
;%omo consecuencia, la migracin de laspartculas a travs de la columna es muyirregular, y su consecuencia es una dispersinsimtrica de las velocidades alrededor del valor
medio. %omportamiento ms frecuente de laspartculas.
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#orma de los pic cromatogrficos
Comportamiento de una mol.cula desoluto
;La ancura de la banda aumenta a medida quese mueve a travs de la columna.
;@mientras ms tiempo transcurre mayor es ladispersin que puede tener lugarA
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#orma de los pic cromatogrficos
Comportamiento de una mol.cula desoluto
;La ancura de la banda est directamenterelacionada con el tiempo de residencia en lacolumna, e inversamente con la velocidad ala que fluye la fase mvil.
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Eficiencia de la Columna
4e mide, generalmente por