Készítette: Zöld Zsófia
Tengeri malac (Cavia porcellus)› Kis testű (25-30cm; 800-1500g)› Gyorsan szaporodik› Emlős› Kedvelt tesztállat
Házi egér (Mus musculus)› Érzékenyebb, mint a tengeri malac› Rövid idő alatt, kevés állat, objektív eredmény› Előtesztelés (MEST, LLNA)
1 fajt alkalmazó, akut, állati teszt
› Hatásfokozó teszt
› Nem hatásfokozó teszt
Intradermális vagy epidermális adagolás 10-14 napos pihenőidőszak=>
immunválasz Kontrollcsoport szükséges Fiatal egyedek Megfelelő körülmények
› 20°C, 30-70% páratart., 12/12 fény/sötét, víz 5 nap akklimatizálódás Szőrtelenítés Tömegmérés tesz előtt, után
MAXIMÁLÓ TESZT
10 teszt, 5 kontroll állat Előkezelő koncentráció: jól tolerált,
legnagyobb, ami enyhe-közepes irritációt okoz
Teszt koncentráció: egnagyobb nem irritáló koncentráció
3 pár injekció (0,1ml) a váll régióba:
1)1:1 (V/V) FCA: víz v. fiziológiás sóoldat2)Vizsgált anyag megfelelő vivőanyaggal a
kívánt koncentrációban3)Vizsgált anyag a kívánt koncentrációja egy
1:1 (V/V) FCA: víz v. fiziológiás sóoldat elegyében
3 pár injekció (0,1ml) a váll régióba:
1)1:1 (V/V) FCA: víz v. fiziológiás sóoldat2)Hígítatlan vivőanyag3)50 (m/V)% vivőanyag1:1 (V/V) FCA: víz v.
fiziológiás sóoldat elegyében
Ha a vizsgált anyag nem vált ki bőrirritációt, 24 órával a felületi kezelés előtt (szőrtelenítés után) 0,5 ml 10%-os nátrium-lauril-szulfát (vazelinben) oldattal kezelik a vizsgált felületet.
A szőrtelen bőrfelületre vizsgált anyaggal átitatott szűrőlapot helyeznek és 48h át szoros érintkezést biztosítanak.
Szilárd anyagot megfelelő hordozóközegben, folyadékot lehet hígítatlanul, közvetlenül.
A szőrtelen bőrfelületre vivőanyaggal átitatott szűrőlapot helyeznek és 48h át szoros érintkezést biztosítanak.
Állatok lágyékának szőrtelenítése Teszt koncentrációjú anyaggal
átitatott tapaszt helyeznek rá, majd 24 h szoros érintkezést biztosítanak.
Ha releváns, csupán vivőanyaggal átitatott tapaszt is elhelyeznek hasonlóan.
Tapasz levétele után 21 órával szőrtelenítenek
3 órával ezután (48 h felhelyezés után) nézik a reakciót
24 órával később (72 h felhelyezés után) újra rögzítik a megfigyeléseket
0 – nincs látható elváltozás
1- foltos bőrpír
2 – mérsékelt vagy egybefüggő bőrpír
3 – erős bőrpír és duzzanat
BUEHLER TESZT
20 teszt, 10 kontroll állat Előkezelő koncentráció: legnagyobb,
ami enyhe irritációt okoz Teszt koncentráció: legnagyobb nem
irritáló koncentráció
TESZT: 4-6 cm2 felületű, vizsgált anyaggal (hígítatlan vagy szükség esetén vivőanyaggal kevert) átitatott tapaszt helyeznek a szőrtelenített lágyékra és 6h át szoros érintkezést biztosítanak. Megfelelő anyagátadás biztosítása elengedhetetlen.
Kontroll: Előző eljárás, de pusztán vivőanyaggal van átitatva a tapasz.
A 0. napi teendők megismétlése azonos helyen, azonos módon, azonos csoporton a 6-8. és 13-15. napokon.
A nem tesztelt lágyéki rész szőrtelenítése
Tapasz átitatása a legnagyobb nem-irritáló koncentrációval
6 h át szoros érintkezés biztosítása az eddig nem tesztelt felülettel.
Teszt és kontroll csoportban azonos eljárás
Tapasz levétele után 21 órával szőrtelenítenek
3 órával ezután (30 h felhelyezés után) nézik a reakciót
24 órával később (54 h felhelyezés után) újra rögzítik a megfigyeléseket
Osztályozás Magnusson és Kligman szerint
Vizsgált anyag jellemzői Vivőanyag jellemzői, választás indoklása Teszt állatok jellemzése – körülmények,
adottságok, fizikai jellemzők, … Vizsgálati körülmények – koncentrációk,
készítési módok, mennyiségek, … Megbízhatóság ellenőrzése Eredmények – osztályba sorolás,
szöveges értékelés, szövettan