HC CH
OH
CH2OH
NH
O
CHCl2
R
R = -NO2 KloramfenikolR = -SO2CH3 Tiamfenikol
Kloramfenikol dapat direduksi dg pe + an Zn & HCl
NO2RZn + HCl
NH2R
Zn + HCl ZnCl2 + H2
Hasil diazotasi membentuk kopling dg ß-naftol/ N-1-naftil etilendiamin Didestruksi dg serbuk castellana Na2CO3 + Mg (2:1) Kloramfenikol NaCl Argentometri Hidrolisis Kloramfenikol
HC CH
OH
CH2OH
NH
O
CHCl2
O2N
basaasam /
HC CH
OH
CH2OH
NH2
O2N
+ H OH
Penetapan Kadar Kloramfenikol
. Dasar
HC CH
OH
CH2OH
NH
O
CHCl2
O2N
Kloramfenikol
Reduksi
DiazotasiDestruksi
Reduksi, D
iazotasi
Kopling
Reduksi, D
iazotasi
Argentometri
Spektrofotometri UV
Kolorimetri
Nitrimetri
Bromometri
1. Bromometri
NO2
R
NH2
R
2 HBr2
- 2 HBr
NH2
R
BrBr
Zn + HCl
Br2 + 2 KI I2 + 2 KBr
Dititrasi dg Na2S2O3 0,1 N BE = BM/4
2. Argentometri
NO2RNa2CO3 + Mg (2:1)
NaCl
Titrasi dg AgNO3BE = BA Cl/1
Kadar Cl =
(V X N) AgNO3 X BE
mg sampelX 100 %
Kadar Kloramfenikol =BM Kloramfenikol
BA Cl X 2X kadar Cl
Cara :
Zat + (2-5X) camp Na2CO3 + Mg (2:1)
Panaskan ad sisa pemijaran putih
3. Spektrofotometri UV
4. Penetapan kadar kloramfenikol FI edisi IV
Dalam air, A1cm 278 nm = 2981%
kloramfenikol Na-suksinat kloramfenikol Na-suksinat steril
: lihat
Penetapan kadar Tiamfenikol
1. ArgentometriLarutkan 300 mg dlm 3 ml etanol + 20 ml KOH 50 %
Kocok dan refluks + 4 jam
Dinginkan, encerkan dg 100 ml air, netralkan dg HNO3 2 N + lagi 5 ml HNO3 2 N
Titrasi dg AgNO3 0,1 M
potensiometri
buat blangko
HC CH
OH
CH2OH
NH
O
CHCl2
S
O
O
H3C KOH 50 %
Refluks 4 jam2 KCl
Titrasi dg AgNO3
Rasulullah bersabda:”Permudahlah, jangan mempersulit, dan jadikan suasana yang tentram, jangan menakut-nakuti” (HR. Muslim) *
Rasulullah bersabda:”Permudahlah, jangan mempersulit, dan jadikan suasana yang tentram, jangan menakut-nakuti” (HR. Muslim) *
11
Rumus Umum :
A. Cincin TiazolidinB. Cincin ß-laktam
R C
O
HN
HC CH
C N
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
1
6
7
5
3
B A
Penisilin R G Benzil
X p-OH benzil
V Fenoksimetil
O Alilmerkaptometil
K n-heptil
F 2-pentenil
H2C
H2CHO
OH2C
H2CHC
H2C S
H2C
H3CH2C
H2C
H2C
H2C
H2C
H2C
H3CH2C
HC
HC CH2
Ampisilin R = α- aminobenzil Amoksisilin R = α- amino-p-OH-benzil Atom H pada gugus –COOH dapat diganti dg kation anorganik/organik
Misal : K, Na, AlProkain, benzatin membentuk garam
penisilin
R = H AmpisilinR = OH Amoksisilin
HC C
O
HN
HC CH
C N
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
NH2
R
R C
O
HN
C N
O
S CH3
CH3
C
O
OH
H+, HOH
OH-, HOH atau
R C
O
HN
C HN
O
S CH3
CH3
C
O
OH
OH
Penisilin
Asam penisiloat
R C
O
HN
H2C
HN
S CH3
CH3
C
O
OH
Asam peniloat
-CO2
CN
OR O
HC
HN
HC COOH
C CH3
CH3
HS
Asam penisilenat
Penataulangan
C C
N N
S CH3
CH3
C
O
OH
O
HO
R
Asam penilat
R CONH CHC
COOH
NHHC COOH
C CH3
CH3
HS
Asam penamaldat
H2NHC COOH
C CH3HS
CH3
+ R CONHHC CH3
COOH
PenisilaminAsam penaldat
HOH
+ H+, -CO2
CONHHCR CHO
H2 Peniloaldehid
ß-laktamase
Ciri khusus penisilin1. Ada 3 atom C asimetris pd struktur dasar ß-laktam C3, C5 dan C6 penisilin alam/sintetik2. Posisi gugus asil amino pd C6 thd gugus karboksil pada C3 adalah trans3. Variasi rantai samping asilamino pd C6 mempengaruhi efek antimikroba & sifat fisik kimia
Aktivitas dipengaruhi olehStabilitas cincin ß-laktam
R C
O
HN
HC CH
C NH
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
OH
alkali/penisilinase
Penislin
Asam penisiloat
+ I2 >>
hasil reaksi
dititrasi dg Na2S2O3
I2 + 2 NaOH NaOI + NaI + H2O (Na hipoiodid)
I2 + Na2S2O3 2 NaI + Na2S4O6
NaOI + Na2S2O3 Na4SO4 + NaI + SOksidasi
BE ditetapkan dg mengunakan penisilin murni
Dilakukan titrasi blangko
1 ml Na2S2O3 0,01 N ~ 0,4656 mg penisilin(Dihitung sbg K-benzil penisilin)
Penisilin hanya akan bereaksi dg I2 cincin ß-laktam putus/rusak/terbuka banyak I2 yang bereaksi dg as penisiloat tgt :
pH [I-] dalam I2
Penetapan Kadar Ampisilin
DasarSampel dihidrolisis dg lar NaOH
ß-laktam terbuka
Senyawa tiol
Senyawa dimmer
asam
I2 >>
HC C
O
HN
HC CH
C NH
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
OH
NH2
OH -
Na-ampisilin
H +
HC C
O
HN
HC
C
NH3
O
CH
HSC
CH3
CH3
C
O
OHOH
NH2
CH3
2
+
NH3 CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
S
C
H3C
H3CHC NH3
O
HO
+ 2 HI
Penisilin as penisiloatpenisilinase
pH 7,5/30’
Dititrasi dg lar NaOH
1 ml NaOH ~ 6023 UI Penisilin1 ml NaOH ~ 6023 UI Penisilin
Metode ini cocok untuk P.Kgaram penisilin dlm tablet dan suspensi
Penisilin Pelarut m (nm) E H2O 257 ; 263 X H2O 275 V H2O 268 ; 274 CHCl3 270 ; 276
DasarPenisilin dg hidroksilamin membentuk turunanHidroksamat, kemudian dg penambahan lar Fe3+
komp warna merah
R C
O
HN
HC CH
C NH
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
NH2OH R C
O
HN
HC CH
C NH
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
NHOH
Turunan as hidroksamat
Fe2+
R C
O
HN
HC CH
C NH
O
CH
SC
CH3
CH3
C
O
OH
NHO-
3
Fe
Senyawa kompleks warna merah ( m 515 nm)
PK Amoksisilin (FI edisi IV)
PK Ampisilin (FI edisi IV)
Amoksisilin KapsulSuspensi oral
Na-amoksisilin
AmpisilinAmpisilin –Na sterilKapsul –Tablet –Suspensi oral -
Kapsul Ampisilin
Prosedur :1. Pada 2,0 ml lar baku dan lar uji dalam labu terpisah
masing-masing di + 2,0 ml lar NaOH 1,0 N
campur, goyang dan biarkan + 15 ‘
2. Pada tiap labu + 2,0 ml HCl 1,2 N+ 10,0 ml lar I2 0,01 N LV
Segera tutupnya, diamkan 15 ‘3. Titrasi dg Na2S2O3 0,01 N LV
Pada saat titik akhir
Lanjutkan titrasi ad warna biru hilang+ 1 tetes pasta kanji iodida LP
“Amalan yang dicintai oleh Allah Ta’ala
adalah amalan yang kontinyu walaupun itu
sedikit”. (HR, Muslim :783)
“Amalan yang dicintai oleh Allah Ta’ala
adalah amalan yang kontinyu walaupun itu
sedikit”. (HR, Muslim :783)
OH O OH
OH
O
H3C CH3
N
CH3H3C
OH
C
O
NH3
78
910
6
11
5
12
43
21
D C B A
Tetrasiklin C22H24N2O8 sda
Klortetrasiklin C22H23N2O8Cl 7-Cl
Oksitetrasiklin C22H24N2O9 5-OH
Bentuk base tidak larut dlm airDgn asam garam larut dlm air garam HCl
1. - Tetrasiklin - Oksitetrasiklin + Lar NaOH 0,25 N
OHPanaskan 6'
OH O O
OH
O
H3C
N
CH3H3C
OH
C
O
NH2
O
Isotetrasiklin ( 380 nm)
Klortetrasiklin > 20 % kuning memucat
(tdk stabil)KlortetrasiklinHCl 2 NPanaskan 5'
OH OH O
OH
O
N
CH3H3C
OH
C
O
NH2
CH3Cl
5,6-Anhidroklortetrasiklin (kuning, nm = 380)
Klortetrasiklin Isoklortetrasiklin
fluoresensi biru ( = 365 dan 428 nm)
NaOH 5 N15 – 20 '
Oksi –Tetrasiklin sny kompleks coklat jinggaKlor -
FeCl3 0,05%HCl 0,01 N, 10'
2 Tetrasiklin HCl + (CH3COO)2Hg
2 tetrasiklin + HgCl2 + 2 CH3COOHAsetat glasial
Titik akhir hijau kekunungan1 ml HClO4 0,1 N ~ 48,09 mg Tetrasiklin HCl
BE = BM/1
Tetrasiklin + HClO4 Tetrasiklin-H+ + ClO4-Asetat glasialKristal violet
Sampel campuran tetrasiklin HCl (Ts-HCl) dan klortetrasiklin HCl ( Klor Ts- HCl)
Prinsip Ts-HCl dan Klor Ts- HCl membentuk
warna kuning dg penambahan NaOH 0,25 N isotetrasiklin
Prinsip Serapan (A) diukur pd 6 menit setelah penambahan NaOH : Ts-HCl 380 nm
Klor Ts-HCl = 345 nmA
345 Klor Ts-HCl
380Ts-HCl
( nm)
Lar Baku Kons A 345 A380Ts-HCl 0,5 g/100 ml 0,513 0,760Klor Ts-HCl 0,5 g/100 ml 0,250 0,185
Satu gram sampel (camp Ts-HCl, Klor Ts-HCl dan laktosa) dikerjakan dg cara yg sama seperti pd baku diatas (1g/100ml). Kemudian diukur serapan pada kedua tsb dg kuvet 1cm dan diperoleh :
A380 = 0,715
A345 = 0,657
Hitung Kadar Ts-HCl dan Klor Ts-HCl dlm sampel
Ingat : A = a . b . C
A = a . b . c345
Ts-HCl
345
Ts-HCl Ts-HCl
a = A 345
Ts-HCl
345Ts-HCl
b . cTs-HCl
a = = 0,103 345
Ts-HCl
0,513
1 . 5
Dengan cara sama dihitung :
a 0,037380Klor Ts-HCl
a 0,050345
Klor Ts-HCl
a 0,152380
Ts-HCl
Pada serapan di atas :a. Serapan pada 345 nm (A )
AA = aA . b . CA
AB = aB . b . CB
345
A = a . b . c + a . b . c345 345
A A345B B
b. Analog dg atas serapan pd 380 nm (A )380
380A = a . b . c + a . b . c380 380A A B B
Dari sampel campuran diperoleh :
A = 0,657
B = 0,715
345
380
Pada 345 :
0,657 = 0,103 . 1. c + 0,050 . 1. c ... (1)
Pada 380
0,715 = 0,152 .1 . c + 0,037 . 1. c …(2)
Ts-HCl Klor Ts-HCl
Ts-HCl Klor Ts-HCl
Dari persamaan (1) dan (2) dapat dihitung : kadar tetrasiklin HCl (Ts-HCl)
kadar klortetrasiklin (Klor Ts-HCl)
Spektrofotometri secara simultan dapat pula digunakanuntuk menentukan kadar campuran dari :
Ts-HCl, Klor Ts-HCl, dan Oksi Ts-HCl
Cara :Campuran tersebut dilarutkan dalam :
HCl 0,1 N ukur A 268 nm NaOH 0,25 N ukur A 380 nm HCl 2 N ukur A 440 nm
Masing-masing komponen dapat dihitung kadarnyadengan persamaan :
Ts-HCl = - 54,8 A268 + 67,7 A380 + 68,32 A440
Klor Ts-HCl = 65,4 A268 - 78,47 A380 + 13,85 A440
Oksi Ts-HCl = 61,07 A268 + 5,27 A380 - 77,5 A440
P.K Ts-HCl (FI edisi IV) KCKT
Ts-HCl kapsul KCKT Oksi Ts-HCl Oksi Ts-injeksi
Penetapan potensiantibiotika mikrobiologi
Hitung kesetaraan (F) dalam μg (atau unit) tiapml lar Na2S2O3 0,01 N yang digunakan oleh lar baku dengan
Rumus :
Keterangan : C = kadar baku pembanding dlm mg/ml lar baku P = potensi dlm μg (atau unit)/g baku pembanding B = volume dlm ml lar Na2S2O3 0,01 N blangko I = volume dlm ml lar Na2S2O3 0,01 N titrasi
sampel
( 2 C P )
( B – I )
Hitung potensi zat uji dg rumusSeperti tertera dlm masing-masing monografi
HN
CN
NH2
HO O
NH
C NH
NH
OH
CH
HC
R OH
CH
O
O
CH3
CH
HC NH
CH CH3HO
HC OH
O
CH2OH
Streptidin Streptobiosamin
Streptosa N-metilglukosamin
R BM Streptomisin - CHO 581,58 Dihidrostreptomisin - CH2OH 583,59
Beda kedua senyawa hanya pd bagian streptosa
Membentuk garam dg asam mineral
1 mg Streptomisin ~ 1000 Unit I
Sulfat, hidroklorida,fosfat
Penetapan Kadar :
1. Metode Maltol (Streptomisin)O CH3
CH3
O
Streptomisin NaOH 0,1 N
Streptomisin NaOH 0,1 N
1000C, 3'
Maltol m = 322 nm
Diukur m 322 sebelum dansesudah hidrolisis
Setelah dingin, + FeNH4(SO4)2 ungu
Kolorimetri : - encerkan, diamkan 20‘ ukur 540 nm
2. Spektrofotometri (DHS) Dihidrostreptomisin
dinginkan, encerkan, ukur A 265 + A 280
Streptomisin
H2SO4 0,5 N
245
H2SO4 0,5 N
Panaskan 2 jam
Panaskan