XVIII Encontro de Pesquisa em Fisiologia e Farmacologia · 2010-12-02 · Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas Fisiologia e Farmacologia XVIII Encontro de Pesquisa

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas

Fisiologia e Farmacologia

XVIII Encontro de Pesquisa em Fisiologia e

Farmacologia

09 a 11 de Dezembro de 2010 Auditório - 1007 - Faculdade de Letras (FALE)

Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte

Minas Gerais – Brasil

Bem vindos ao XVIII Encontro de Pesquisa em Fisiologia e Farmacologia

Prezados Participantes,

Bem-vindos ao XVIII Encontro de Pesquisa em Fisiologia e Farmacologia. Temos o enorme prazer em recebê-los neste tradicional evento do nosso programa de Pós-graduação. O evento é uma excelente oportunidade de interação entre os grupos de pesquisa, divulgação e discussão dos trabalhos que estão sendo desenvolvidos.

Este ano o XVIII-EPFF terá início com o Simpósio de comemoração dos 10 anos do Núcleo de Neurociências (NNC). Em seguida, serão discutidos temas importantes para a Pós-graduação, entre os quais os recém-criados: Programa Multicêntrico de Pós-graduação em Ciências Fisiológicas e Curso de Mestrado Profissional em Inovação Biofarmacêutica.

A Comissão Organizadora se empenhou para que este evento seja o mais agradável e proveitoso e deseja a todos um excelente intercâmbio científico.

Comissão Organizadora

Comissão Organizadora

Professores

Prof. Dr. Frederic Frezard (Coordenador) Profa. Dra. Maria José Campagnole Santos (Sub-coordenadora)

Prof. Dr. André Ricardo Massensini Profa. Dra. Grace Schenatto Pereira

Profa. Dra. Juliana Carvalho Tavares Prof. Dr. Márcio Flávio Dutra Moraes

Alunos

Ana Flávia Santos Almeida Ana Cláudia Raslan

Brisa Marina de Meireles Monteiro Bruno Lapertosa Drummond Celso Tarso Rodrigues Viana

Dalton Dittz Júnior Daniel de Castro Medeiros

Danielle Bernardes Erly Guilherme Azevedo

Flaviana Ribeiro Fernandes Flávio Afonso Gonçalves Mourão

Hércules Ribeiro Leite Kátia Michell Freitas Kelly Cristina Kato

Leandro Francisco Silva Bastos Marcelo Limborço Filho

Onésia Cristina Oliveira Lima

Apoio Financeiro

Pró-reitoria de Pós-graduação - UFMG Fundação de Apoio à Pesquisa de Minas Gerais (FAPEMIG)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Ensino Superior (CAPES) Sellex

Guanabara Koogan Copiadora Expresso

Omega – Produtos e equipamentos para laboratório FUNDEP – Fundação de Desenvolvimento da Pesquisa

Coordenadores do Programa

1972 – 1977: Wilson T. Beraldo 1977 – 1979: Teófilo A. C. Cruz 1979 – 1981: Fernando Alzamora 1981 – 1983: Lineu-Freira-Maia 1983 – 1987: José Afonso A. Rodrigues 1987 – 1991: Álvaro D. Azevedo 1991 – 1995: Robson Augusto S. Santos 1995 – 1997: Luiz Armando C. Marco 1997 – 1999: Cândido Celso Coimbra 1999 – 2003: Adelina Martha dos Reis 2006 – 2009: Maria José Campagnole Santos 2009 – presente: Frederic Frezard

Secretaria

Cyntia Menezes Fonseca Nilda Lucas Laurindo

NOTAS DA COMISSÃO ORGANIZADORA A versão eletrônica deste livro de resumo, o programa final, o cartaz de divulgação e demais arquivos de suporte podem ser encontrados no HTTP:/www.nnc.icb.ufmg.br (no link para o Congresso).

PROGRAMAÇÃO

Homenagem ao Professor Fernando Pimentel de Souza O primeiro laboratório de pesquisas do sistema nervoso foi criado por Romualdo José do Carmo, neurologista especialista em eletroencefalografia. Foi contratado por volta de 1962 em regime de tempo parcial de 12 horas semanais como assistente do Professor Wilson Beraldo, catedrático na época. Em meados dos anos 60 passou a tempo integral em conseqüência de ter obtido uma bolsa da Fundação Rockefeller, intermediada pelo Professor Beraldo, quando este regime não era concedido pela UFMG. Esta Fundação também doou equipamentos que marcaram época de grande transformação no Departamento, porque deram início e apoiaram de maneira sustentada hábitos para executar pesquisas e para ministrar muitas aulas práticas, bem elaboradas e realizadas pelos próprios alunos, substituindo as apenas eventuais demonstrações mais genéricas até então praticadas. Poucos pesquisadores vieram a se equipar diferentemente daquelas, ora com aparelhos ocasionais, provenientes de um “enxoval” trazido depois de uma bolsa no exterior e outros construídos com a engenhosidade local de nossos eletrônicos, hialotécnicos e torneiros-mecânicos sob a orientação de algum professor. Os laboratórios de pesquisas não possuíam verbas para compra de equipamentos prontos e eram muito artesanais, específicos e pagavam um preço alto pela sua lentidão. Romualdo participou da revitalização da Sociedade de Biologia de Minas Gerais, sob a orientação do Professor Beraldo, que era o fórum onde se apresentavam e discutiam trabalhos de pesquisa e especulavam sobre teorias. Participou também dos manuscritos iniciais do sistema nervoso dos primeiros livros de Fisiologia feitos no Brasil por autores brasileiros, sob a coordenação do Professor Beraldo, que só vieram finalmente a ser publicados em 1968 e 1970. Romualdo procurou introduzir pesquisas em animais (coelho e rato) analisando o eletrocorticograma. No final dos anos 60 foi para os EUA, estagiando em laboratório especializado em Depressão Alastrante (DA). Voltou no início dos anos 70 direto para o Instituto de Biofísica da UFRJ, tornando-se ele e Gustavo de Oliveira Castro os principais colaboradores no laboratório de Hiss Martins Ferreira e Aristides Leão, descobridor da DA. O Rio de Janeiro tinha se tornado a “Meca” de pesquisadores dos EUA, França, Inglaterra, Japão, Tchecoslováquia, Rússia e do próprio Brasil para estes estudos. A DA foi descoberta por Aristides Leão, descrita pela primeira vez na sua tese de Doutorado na Universidade de Harvard, EUA, publicada em 1944, quando foi encontrada uma acentuada redução do EEG, que se iniciava no local estimulado e se espalhava lenta e concentricamente, como uma onda cortical, restaurando o traçado do EEG de aspecto inicial só após 20 a 30 minutos. Leão trabalhou sob orientação do mexicano Arturo Rosenblueth e Hollowell Davies e continuou publicando internacionalmente com seus colaboradores no Brasil, onde foi presidente da Academia Brasileira de Ciências por 14 anos. A importância das pesquisas em DA não se limitam a estudos ligados à epilepsia: sua descoberta abriu novas perspectivas para o entendimento de outras patologias e também para estudos sobre o comportamento animal e a organização funcional do sistema neural, a memória e o aprendizado. Em março de 1972, a contratação do Professor Fernando Pimentel de Souza como Adjunto na vaga deixada pelo professor Romualdo foi recomendada pelos Professores Beraldo e Diniz para endossar a pós-graduação em Fisiologia, que começou a funcionar naquele ano no Departamento, quando assumiu por décadas as disciplinas de Neurofisiologia e a de Seminários e o Laboratório de Psicofisiologia, por ele organizados. Pimentel participou do reconhecimento da Pós-graduação pela CAPES/MEC em 1974, juntamente com 6 docentes titulados do Departamento e outros da UFMG. Obteve o DEA em 1968 em Neurofisiologia pela Faculdade de Ciências d’Orsay da Universidade de Paris-Sud, o Doutorado em Psicofarmacologia pela Escola Paulista de Medicina em 1980, além do Mestrado em Eletrônica Espacial pela ENSA-Paris, e ter formado em engenharia eletrônica pelo ITA/SP (1961). Antes da UFMG trabalhou como Professor Assistente na Engenharia Biomédica da COPPE-UFRJ e como Projetista Assistente no Instituto de Pesquisas Eletrônicas do CTA/São José dos Campos/SP. Pesquisou 3 anos em Neurofisiologia sob orientação do Professor do Collège de France e Membro Titular da Academia de Ciências da França, Alfred Fessard.

Na UFMG Pimentel participou da organização dos cursos de graduação programados na gestão do Diretor do ICB, Professor Cisalpino, sob a orientação da pedagoga Maria Lisboa. Estes cursos do Departamento eram baseados em curtas exposições da matéria pelo professor, grupos de discussão e aulas práticas para cerca de 20 alunos no curso de Medicina. Detalhou a ementa de Neurofisiologia em um questionário de 81 pontos a serem minimamente abordados, que serviu de orientação para docentes e alunos por mais de duas décadas em várias disciplinas. Com o passar dos anos o número de alunos por sala subiu como em Medicina para mais de 40, devido, de um lado, pela abertura de novos cursos e expansão de vagas discentes e, por outro lado, pelo congelamento da lotação docente e o licenciamento de professores, para estágios no exterior, para conclusão de Doutorado e realização de pós-Doutorado. Na disciplina de Psicofisiologia, Pimentel implementou uma pesquisa monográfica para grupo de 6 alunos em turma de no mínimo 30, abordando vários temas, quando recebiam orientação específica, bibliografia mínima e tinham acompanhamento para tirar dúvidas para finalmente apresentarem um trabalho com a participação de todos do grupo. Algumas das melhores monografias foram publicadas na Revista de Psicofisiologia no seu site “Saúde Mental” na internet (www.icb.ufmg.br/lpf), depois de selecionadas e corrigidas com ajuda de um Conselho Editorial. Entre estas duas se destacaram por fornecer trechos sobre Estresse e Câncer a Isa Oliveira, alegando que esse conteúdo foi convincente para sua cura, inspiração para a fundação da ONG “Sobreviva” em São Paulo e foram transcritos com permissão no livro “Elogia à Loucura” (2001), Prêmio de romance revelação em 2002 pela Associação Brasileira de Letras. De outra feita, um processo de construção educacional foi aplicado no ensino de Psicofisiologia e avaliado, usando a classificação de Bloom e cols, para 238 alunos do Curso de Graduação de Psicologia, 77% do sexo feminino, a maioria entre 20 e 23 anos durante um semestre e repetido em 4, com análise estatística conduzida pela PhD Suely Mingoti do Departamento de Estatística do ICEX-UFMG, por testes feitos no início e final do processo. Ganhos cognitivos significativos foram alcançados nas questões de teste objetivo de conhecimentos e no teste subjetivo sobre “hábitos mentais”. O domínio afetivo só foi avaliado por questionário. “Estrutura da disciplina” e “processos pedagógicos” e alguns pontos de “metaciência” também obtiveram resultados significativos. Tiveram ganhos pequenos “Filosofia de ciência”, sendo significativos só em alguns casos, porque os alunos já chegaram com conhecimentos elevados, e outros aspectos de metaciência, referentes a funções superiores do cérebro. Enfim, este trabalho mostra importantes ganhos, que, além da atenção à subjetividade, à afetividade e ao amadurecimento do aluno, procura dar formação científica em ciências biológicas para aluno em curso de formação humanística, em que esta disciplina é a última de apenas 4 da área biológica, usando um método de construção educacional em uma disciplina de apenas 60 horas. Sob a coordenação na UFMG da Professora Regina Helena do Departamento de Computação, Pimentel integrou um consórcio nacional com a UFPE e a direção da PUC-Rio financiado pela FINEP, montando ensino a distância e informatizado, que serviu de linha auxiliar para a disciplina Psicofisiologia, fornecendo bibliografias selecionadas para estudo e consultas na matéria a um monitor via internet, e para Neurofisiologia médica. Professor Pimentel comprometido com a melhoria do Departamento forneceu sua colaboração para estudo e solução de problemas locais. Defendeu a qualificação do seu corpo docente, que contava com poucos doutores, para obtenção desse título no exterior e fora da UFMG. Em 1981 foi eleito membro fundador por 3,5 anos da Comissão Permanente de Pessoal Docente a nível de Reitoria da UFMG, que estimulou a qualificação docente na universidade como um todo, baseando-se nos seguintes pontos: 1) regulamentação da concessão de vagas aos departamentos em todas as categorias docentes e de acordo com a utilização da lotação em cargas didáticas ou atividades especiais como a pós-graduação, 2) preferência de contratação de docentes com doutorado, com plano de pesquisa exeqüível na UFMG e em dedicação exclusiva, 3) criação de critérios gerais de promoção vertical e horizontal na carreira baseada na produção em todas atividades docentes, com mais ênfase em pesquisa, regulamentada em 1980 por decreto do governo federal, 4) divulgação de

uma política docente para que todos pudessem concorrer, 5) fiscalização e exigência de avaliação de desempenho anual em todas as áreas de atuação docente . Uma das primeiras pesquisas realizadas pelo Laboratório de Psicofisiologia foi em comportamento de uma espécie de caramujo transmissor da esquistossomose, pela qual receberam na época o Prêmio de Jovem Cientista concedido pela SBPC em 1975. Na tese de Mestrado de Schall foi sugerida uma armadilha para capturar este molusco, baseado na atração pela luz. Em outra pesquisa em peixes elétricos sul-americanos mostrou-se queda na freqüência de descarga do órgão elétrico intoxicado, na sua estadia no Instituto de Oceonografia Scripps da UCLA em La Jolla, EUA, à convite do Dr. Bullock. Baseado nisto desenvolveu modelo de monitoramento de poluição de águas na vazão industrial. Essa idéia foi patenteada indevidamente na França em 1996 por pesquisadora da Universidade de Nancy. Com a aparelhagem eletrônica cedida pela Fundação Rockefeller para Gilberto Belizário Campos, Professor Titular de Neurologia na Faculdade de Medicina da UFMG, montada sob a coordenação do Dr. John Irwing Johnson da Michigan State University tomou a frente de realizar e coordenar pesquisas de mapeamento cerebral de cutia e de sagui, com os pesquisadores acima e com o Dr. Ramon Cosenza do Departamento de Morfologia do ICB-UFMG no Laboratório de Psicofisiologia. Um desses trabalhos foi premiado em 1980 pela Associação Brasileira da Industria Farmacêutica pela contribuição à compreensão da dor em pontada, em Jury presidido pelo Dr. Lauro Sollero, Professor Titular de Farmacologia da UFRJ e entregue pelo Dr. Adib Jatene, Professor Titular da USP, na época Secretário de Saúde de São Paulo. Outra pesquisa do Laboratório de Psicofisiologia foi conduzida nos Hospitais de Clínicas da UFMG e da Baleia, demonstrando o efeito danoso do ruído no sono para pacientes em alta, o que deve ser pior antes da cura e em estado mais crítico nos CTIs, no Mestrado do médico Júlio César de Carvalho, com a estatística da Dra. Arminda Siqueira do ICEX e estagiárias de psicologia.

Texto por Fernando Pimentel de Souza, Professor Titular aposentado

RESUMOS

01 - TIPO DA APRESENTAÇÃO: PÔSTER

Estudo comparativo do antimoniato de meglumina sintético e comercial: características físico-químicas e concentração

plasmática e hepática de Sb após administração oral Ferreira , AAF (1); Kato , KC (1); Fernandes, F R(1): Demicheli, C (2); Frezard, FJG (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Ciências Biológicas – ICB, Universidade Federal de Minas Gerais

– UFMG, Belo Horizonte - MG, Brasil; (2) Departamento de Química - DQ, Instituto de Ciências Exatas – ICEX, Universidade Federal de Minas Gerais – UFMG, Belo Horizonte – MG, Brasil

Objetivo/Aim: Em 2003, o AM1, obtido por nova síntese de antimoniato de meglumina (droga-referência para o tratamento de leishmaniose), mostrou similar composição química e eficácia que o produto comercial. E apresentou menos efeitos no TGI por via oral em camundongos. Para explicar a diferença de toxicidade entre os antimoniais e avaliar o potencial para uso oral, propôs-se uma comparação entre AM1 e Gluc, por medidas de osmolaridade, dicroísmo circular (DC) e de concentração de Sb após administração oral em modelo murino. Métodos/Methods: O composto AM1 foi preparado segundo Demicheli et al 2003 e o Glucantime® (Aventis) foi obtido do Centro de Pesquisas René Rachou. A osmolaridade (Wescor - Vapro® 5520) e o espectro no DC (Chirascam – Applied Photophysics) dos compostos foi determinada na concentração de 0,35M de Sb e na temperatura de 25°C ou imediatamente após aquecimento por 15min a 60°C (T0) ou 30min após este procedimento (T30). As preparações foram administradas em uma dose única de 300mg de SbV/kg de peso a 0,35M de Sb com auxílio de agulha de gavage em camundongos machos Swiss ( n=5/grupo ), sendo as formulações administradas a 25°C ou foram submetidas a aquecimento a 60°C por 15 minutos. Após 1 hora da administração, os animais foram eutanasiados por deslocamento cervical e coletou-se sangue e fígado dos mesmos. O Sb contido no soro e fígado (previamente digeridos) foram quantificados por espectrometria de absorção atômica (AA) em forno grafite. Resultados/Results: No estudo de DC, AM1 e GLU apresentam espectros diferentes. Para osmolaridade, obtivemos (316,1 ± 4,941 mOsm/kg) para AM1 e (284,3 ± 11,4 mOsM/kg) para GLU. Os dados de concentração de Sb apontam para uma tendência a maior concentração sérica de Sb após a administração de AM1 (11378 ± 5628 !g/L) quando comparado ao GLU ( 9391 ± 3152 !g/L) e o mesmo para a concentração do fármaco no fígado cujos valores foram: 1,349 ± 0,3085 !g/g para o AM1 e 1,120 ± 0,372 !g/g para GLU. Entretanto, esta diferença não foi significativa estatisticamente. Conclusão/Conclusion: Os dados apontam para diferença nas características físico-químicas entre o antimoniato de meglumina sintetizado e o antimoniato de meglumina comercial, o que pode explicar a diferença observada nos efeitos adversos. Ambos os compostos quando administrados por via oral promoveram concentrações plasmáticas e hepáticas similares no modelo murino. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, CAPES, CPqRR

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Adriel Araújo Fernandes ferreira: [email protected])


Estudo farmacocinético de lipossomas ultra-deformáveis para administração nasal de fármacos hidrofílicos utilizando a

calceína como marcador fluorescente Neves, FTP(1); Bahia, APCO(1); Frézard, FJG(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Investigar as implicações das vesículas ultra-deformáveis na farmacocinética de fármacos hidrossolúveis por via nasal, em comparação com o colato de sódio em solução etanólica e o fármaco livre, empregando a calceína como marcador hidrofílico fluorescente. Métodos/Methods: Administraram-se 5 !L de formulações de calceína à 30 mM, por via nasal, em camundongos Swiss. Os grupos foram (n =3-7): calceína livre; solução etanólica de calceína e colato de sódio; e calceína encapsulada em vesículas ultra-deformáveis. Retiraram-se 15 !L de plasma dos animais nos tempos definidos e os submeteram à centrifugação. Os sobrenadantes foram lidos em espectrofluorímetro (Ex: 488 nm, Em: 515 nm), permitindo obter as concentrações plasmáticas. Determinaram-se os parâmetros farmacocinéticos com o programa RSTRIP e realizou-se a análise estatística pelo teste One-way ANOVA (pós teste de Tukey). O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal, número 044/07. Resultados/Results: O colato de sódio propiciou um aumento da velocidade de absorção da calceína comparado à forma livre, evidenciado pela diminuição do tempo máximo (Tmáx) e tempo de residência médio (MRT). As vesículas ultra-deformáveis também resultaram em valores significativamente menores do Tmáx e MRT. Essas atuaram como promotoras de absorção, aumentando a taxa de absorção em relação à calceína livre, mas não promoveram uma liberação sustentada, demonstrado pela diminuição do MRT. Conclusão/Conclusion: As vesículas ultra-deformáveis permitem alterar a farmacocinética da calceína por via nasal, atuando como promotores de absorção. Por outro lado, estas vesículas não atuaram como um sistema de liberação prolongada. As suas vantagens esperadas em comparação às do colato de sódio seriam o menor efeito irritante da mucosa nasal e o maior tempo de residência médio do fármaco hidrofílico. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Flávia Tavares Pontello Neves: [email protected])


Absorção do antimoniato de meglumina por via oral: influência da interação com diferentes açúcares

Fernandes, FR (1), Ferreira, WA (2), Librelon, BCF (1), Demicheli C (2), Frézard, F (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Departamento de Química ICEX-UFMG.

Objetivo/Aim: A fim de elucidar o mecanismo de absorção da droga por via oral bem como a capacidade de outros açúcares promoverem esta absorção, foram realizados estudos físico-químicos e farmacocinéticos dos compostos de associação entre o AM e os ligantes beta-CD, maltose e ribose. Métodos/Methods: As composições investigadas foram preparadas numa razão molar de 7:1 de AM/beta-CD e 1:1 para os demais ligantes polares, maltose e ribose, através de aquecimento de solução aquosa da mistura desses componentes seguida de liofilização. A formação de complexos entre o AM e os diferentes açúcares foi demonstrada por espectropolarimetria, explorando o espectro de dicroísmo circular (DC) do AM na região de 200 a 270 nm. Foi investigada a dissociação desses complexos após diluição em água a 37°C, através do acompanhamento do sinal de DC em 215 nm em função do tempo. O estudo da absorção oral dessas formulações foi feito através da determinação da concentração sérica de antimônio em camundongos Swiss nos tempos de 1 e 3hs após a administração por via oral na dose de 300 mg Sb/kg. O Sb foi dosado no soro por espectroscopia de absorção atômica com forno de grafite. Resultados/Results: Cinética de variação do sinal de DC em 215 nm: todos os complexos mostraram uma dissociação lenta. Após 3 horas de incubação, o complexo AM/beta-CD mostrou 100% de AM liberado, o complexo AM/maltose dissociou-se parcialmente e o complexo AM/ribose não mostrou dissociação. Concentração de Sb no soro de camundongos no tempo de 1 após a administração oral de diferentes formulações do AM: após 1h da administração o AM/Ribose apresentou quantidade de Sb significativamente menor que o AM. Conclusão/Conclusion: Os dados sustentam o modelo de liberação sustentada das composições AM/beta-CD, AM/Maltose e AM/Ribose resultante do prolongamento da duração de absorção do AM por via oral e, consequentemente, do tempo médio de permanência da droga no soro. Agradecimentos: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Flaviana Ribeiro Fernandes: [email protected])


Atividade citotoxica de hidrazonas e complexos de antimonio e bismuto em células tumorais

Miranda, LF (1); Ferraz, K.S.O(2) ; Beraldo, H (2); Souza-Fagundes, E.M (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica/ICB/UFMG, (2) Departamento de Química/ UFMG, Belo Horizonte/MG.

Objetivo/Aim: Hidrazonas atuam como agentes antimicrobianos e antitumorais. Compostos de Sb(IIII) e Sb(V) também tem potencialidade para as mesmas funções. Complexos de bismuto(III) têm apresentado funções antimicrobianas. Neste trabalho foram triados 14 substâncias da classe 2,6-diacetilpiridina-bis(fenilhidrazona) (H2AcPh), seus derivados bis(p-clorofenil) (H2AcpCl) e bis(p-nitrofenil) (H2AcpNO2) e seus respectivos complexos de Sb(III) e Bi(III) quanto à atividade citotóxica para células tumorais HL60, Jurkat, MCF-7 e HCT pela avaliação da viabilidade celular por ensaio de MTT. Métodos/Methods: Células HL60, MCF-7 e HCT (50.000 células por poço), bem como células Jurkat (100.000 células/poço) foram incubadas por em placas de 96 poços por 24 horas para estabilização (37°C, 5%CO2). Seguiu-se a adição das diferentes substancias (10!M ) e posterior incubação por 48 horas. A viabilidade/proliferação foi avaliada pelo ensaio de MTT. As substâncias que reduziram a viabilidade em mais de 50% foram posteriormente submetidas a determinação da concentração inibitória mínima de 50% da viabilidade (IC50) empregando diluições seriadas das substancias que variaram entre 10!M a 100 !M. Como controle positivo, foi utilizado o fármaco na clínica, cisplatina (10 !M). Todos experimentos foram realizados em triplicata, em pelo menos três (triagem) ou cinco (IC50) experimentos independentes. Resultados/Results: Das 14 substâncias testadas na triagem, três substâncias (HBK1,HBK2 e HBK3) apresentaram atividade maior que 50% para as células Jurkat, HL60, MCF-7 e HCT e foram submetidas a determinação da concentração inibitória de 50% da proliferação celular. Os valores de IC50 encontrados para as substâncias HBK 1, HBK2 e HK3 foram de 1,29 !M, 44,72 !M e 2,76 !M respectivamente em Jurkat, de 0,28 !M, 1,08 !M e 0,55 !M respectivamente em HL60, de 1,29 !M, 44,72 !M e 2,76 !M, respectivamente em MCF7,e de 3,34 !M, 10,41 !M e 3,80 !M respectivamente em HCT. Conclusão/Conclusion: Dos complexos de bismuto (III) de bis (hidrazonas) derivadas de 2,6-diacetilpiridina, os compostos HBK1 [Bi(HAcPh)Cl2], HBK2 [Bi(HAcpCl)Cl2] e HBK3 [Bi(HAcpNO2)Cl2], apresentaram atividade citotóxica. Outros testes serão feitos para a investigação de seu potencial pró – apoptótico e atividade citotóxica para células normais (ensaio PBMC). Este projeto contribuirá para a descoberta de potenciais protótipos na classe de compostos indutores de apoptose que poderão ser utilizados no desenvolvimento de fármacos anticancer. Agradecimentos: FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Luana Ferraz de Miranda: [email protected])


Efeitos do canabinoide sintético WIN-55,212-2 no modelo de convulsão induzida por pentilenotetrazol em ratos

Vilela LR(1), Medeiros, DC (2), Resende, G (2), Oliveira AC(2), Moraes MD(2), Moreira FA(2)

(1) PPG Neurociências e (2) PGG Fisiologia e Farmacologia

Objetivo/Aim: O objetivo desse estudo é caracterizar os efeitos de canabinoides em um modelo animal de crise convulsiva generalizada induzida por pentilenotetrazole (PTZ). Métodos/Methods: Ratos Wistar, machos, pesando 280-310g, foram submetidos a cirurgia estereotáxica para implantação de eletrodos corticais para eletroencafalografia (EEG). Após três dias de recuperação, os animais tinham a veia da cauda canulada para a injeção de PTZ, numa velocidade de 0,5ml/min na concentração de 10mg/ml. O canabinoide sintético, WIN 55,212-2, ou veículo, foram injetados 30 minutos antes da infusão do PTZ. Durante todo procedimento, o animal era monitorado para EEG e medida dos comportamento de crise mínima e máxima, determinada respectivamente por mioclonia parcial de membros anteriores e hiperextensão de membros anteriores e posteriores com flexão de cabeça. Resultados/Results: Os dados preliminares, analizados por teste T de Student, sugerem que esta substância, na dose de 1 mg/kg, reduzem o limiar para a ocorrência de crises convulsivas. Conclusão/Conclusion: Concluindo, o WIN-55,212-2, a presente dose, pode facilitar o efeito convulsivante do PTZ. Os próximos experimentos visam a completar o tamanho das amostras e a caracterizar outras doses desse canabinoide nesse modelo. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Luciano Rezende Vilela: [email protected])


2-ACETILPIRIDINA N4-FENIL TIOSSEMICARBAZONA: uma ferramenta para o diagnóstico de tumores

Soares MA (1), Mendes IMC (2), Beraldo H (2), Gouvêa dos Santos R (3), Pesquero JL (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, Universidade Federal de Minas Gerais; (2) Departamento de Química, Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG); (3) Centro de Desenvolvimento da Tecnologia Nuclear (CDTN/CNEN -

MG)

Objetivo/Aim: Os objetivos deste trabalho foram: radiomarcar a 2-acetilpiridina N4-fenil- tiossemicarbazona (Ph) usando o 125I como radiotraçador; realizar os controles de qualidade da molécula radiomarcada e determinar sua possível aplicabilidade para o diagnóstico de tumores através de estudos de biodistribuição em animais com tumor de Ehrlich. Métodos/Methods: Ph foi radiomarcada com 125I pelo método da lactoperoxidase e os controles de qualidade radioquímicos foram realizados por cromatografia ascendente, utilizando papel Whattman como fase estacionária e metanol saturado com iodeto de potássio como fase móvel. Para obtenção do tumor de Ehrlich na forma sólida, as células de tumor de Ehrlich (2,5?106) foram inoculadas entre os coxins plantares do membro posterior esquerdo dos animais e, seis dias após o implante do tumor, os animais foram utilizados nos experimentos de biodistribuição. A biodistribuição foi feita injetando 125I–Ph (20 KBq) diluída em salina nos animais implantados com tumor de Ehrlich por via intravenosa (i.v.) caudal. Após diferentes tempos de injeção (10minutos – 24 horas), os animais foram eutanasiados e tiveram seus órgãos vitais e patas removidos para avaliação do perfil de biodistribuição e da interação com o tumor. Os resultados foram expressos como fração percentual da dose injetada por grama do órgão (%DI/g). Resultados/Results: A radiomarcação da Ph foi realizada com sucesso. A molécula radiomarcada apresentou alta pureza radioquímica (86 ± 9.2%) e alta atividade específica (17 TBq /mmol). Os dados de biodistribuição da 125I-Ph demonstram que ela apresenta um rápido clareamento sanguíneo e meia vida biológica relativamente curta (T1/2= 97,2 min.), e indicaram os rins como a principal via de excreção. A captação da 125I-Ph foi significativa no tumor (2,5 %ID/g). A captação pelo coração, pulmões, estômago e fígado seguiu a perfusão sanguínea. Conclusão/Conclusion: Os resultados obtidos demonstram que a 125I-Ph possui características indispensáveis a um radiofármaco eficiente, como o rápido clareamento sanguíneo e alta captação pelo tumor. O próximo passo será radiomarcar a Ph com 131I e avaliar a qualidade das imagens tumorais SPECT fornecidas pelo composto radiomarcado. Agradecimentos: FAPEMIG, CDTN/CNEN, INCT-MM.

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Marcella Araugio Soares: [email protected])

07 - TIPO DA APRESENTAÇÃO: ORAL

Efeito da estimulação colinérgica com Piridostigmina em um modelo de disfunção cardíaca induzida por Isoproterenol

Gavioli, M (1); Almeida, PWM (1); Lara, A(1), Damasceno, DD (1), Lima, AM (1); Resende, RR (2); Fontes, MAP (1); Almeida, AP (1) Guatimosim, S(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB- UFMG; (2) Departamento de Biotecnologia - UFSJ

Objetivo/Aim: A função cardíaca é regulada pelo Sistema Nervoso Autônomo, e apesar de ser bem conhecido o papel da hiperatividade simpática no desenvolvimento de insuficiências cardíacas, pouco se sabe sobre a participação do tônus parassimpático nesse processo. Desse modo o objetivo do nosso trabalho foi investigar a ação da estimulação colinérgica através da administração de piridostigmina em um modelo de disfunção cardíaca induzida por isoproterenol. Métodos/Methods: Foram utilizados ratos Wistar machos, tratados durante 7 dias, com administração intraperitonial de isoproterenol e piridostigmina. Os grupos foram separados em CT, ISO, ISO+PIR0.4, ISO+PIR 1 e PIR. A fim de verificar a ação dessas drogas na atividade autonômica cardíaca, realizamos a técnica de bloqueio farmacológico com atropina e propranolol. Para análise da morfologia do coração, realizamos a medida do peso do coração (g) pelo comprimento da tíbia (cm) e a medida do diâmetro dos cardiomiócitos através da técnica de morfometria. Para analisar a contração cardíaca in vitro, realizamos a técnica de coração isolado e posteriormente analisamos a dinâmica do Ca2+ em cardiomiócitos, através da medida do transiente de Ca2+. Para análise da expressão de proteínas envolvidas nessa via de sinalização do Ca2+ utilizamos a técnica de Western Blot . Para verificar a expressão de RNAm utilizamos a técnica de PCR em tempo real. Resultados/Results: Tratamento com ISO promoveu aumento do tônus simpático, aumento da área dos cardiomiócitos, reexpressão do ANP e "-MHC, diminuição da força contrátil, redução no pico do transiente de Ca2+ e na expressão da SERCA. O tratamento concomitante de PIR com ISO reverteu todos esses parâmetros. Além disso, o ISO reduziu a expressão e funcionalidade do receptor "1 adrenérgico e aumentou a expressão de componentes da síntese de ACh, o VAChT e a ChAT , que foi prevenido pelo tratamento com PIR Conclusão/Conclusion: Nosso estudo mostrou que a estimulação colinérgica com piridostigmina foi capaz de prevenir e atenuar as alterações na expressão gênica, no remodelamento cardíaco e na maquinaria intracelular de Ca2+ apresentadas no grupo tratado com isoproterenol, mostrando a importância do sistema colinérgico na manutenção da função cardíaca. Em conjunto estes resultados apontam para um importante papel da estimulação colinérgica em impedir o desenvolvimento da disfunção cardíaca. Agradecimentos: Capes, CNPq, Fapemig

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 15:30hs - Mariana Gavioli de Oliveira: [email protected])


Antimonial pentavalente originado de nova síntese oferece semelhante eficácia e menor hepatotoxicidade do que

Glucantime no tratamento de Leishmania (Leishmania) chagasi em modelo murino

Kato, KC(1), Morais-Teixeira, E (2) , Freitas, VA (1), Demicheli, C (3), Corrêa-Junior, JD(4), Rabello, A (2) , Frézard, FJG (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofisica ICB-UFMG; (2) Laboratório de Pesquisas Clínicas Centro de Pesquisas René Rachou, Belo Horizonte, MG; (3) Deparatamento de Química ICEX-UFMG; (4) Departamento de Morfologia ICB-UFMG

Objetivo/Aim: O objetivo desse trabalho foi comparar eficácia e hepatotoxicidade de compostos antimoniais: AM sintetizado pelo grupo da UFMG (AM1) e AM comercial (Glucantime Aventis) (GLU) e ainda quantificar e correlacionar o teor de SbIII residual contido nas formulações. Métodos/Methods: Fêmeas BALB/C (n=5/grupo) infectadas com L. (L.) chagasi foram submetidas ao tratamento intraperitoneal com os compostos antimoniais, na dose de 80mgSbV/kg/dia por 20 dias. O grupo controle recebeu salina (CONTROLE). O SbIII foi determinado pelo método de interação de SbIII com vermelho de bromopirrogalol. Para análise dos dados utilizou-se o One Way ANOVA, seguida de teste de comparações múltiplas de Bonferroni, considerando p< 0,05. Fragmentos de fígado dos animais foram processados para histologia e corados com hematoxilina-eosina. Dez campos de cada lâmina foram analisados para observação de alterações histopatológicas. O fragmento restante do fígado foi homogeneizado e cultivado para semi-quantificação de parasitas pela técnica de diluição limitante. Resultados/Results: A quantidade de SbIII detectada com o vermelho de bromopirrogalol foi: 0,015% (p/p) para GLU e 0,05). Na análise histopatológica, o grupo GLU apresentou intensa turgidez dos hepatócitos, alta freqüência de necrose e peliose. AM mostrou citoplasma granuloso e lesões menos extensas. Os fragmentos de fígado correspondentes ao CONTROLE foram considerados com aspecto típico normal. A hepatotoxicidade foi mais evidente no grupo GLU que apresentou maior teor de SbIII residual. Conclusão/Conclusion: Em conclusão, os dados obtidos apontam para o possível papel do SbIII residual na toxicidade in vivo do AM e indicam que antimoniais pentavalentes com baixo teor de SbIII são fármacos promissores para o tratamento da leishmaniose, uma vez que apresentou equivalente eficácia ao produto comercial e menor hepatotoxicidade. Agradecimentos: CNPq/FAPEMIG/CPqRR-Fiocruz

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - kelly Cristina kato: [email protected])


High targeting of antimony to the liver of dogs with visceral leishmaniasis from medium sized (400 nm) liposomes

Azevedo,E.G(1)*; Ferreira,C.S(1); Ribeiro,R.R(1);Schettini, D.A(1),; Da Silva,S.M(2); Ferreira,A.A.F(1); Demicheli C(3), Frézard,F(1)

(1)Laboratório de Biofísica de Sistemas Nanoestruturados, Dep. de Fisiologia e Biofísica, (2)Dep. de Parasitologia, ICB,

(3)Dep. de Química, ICEX – Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, Brasil.

Objetivo/Aim: In the 1970s, a major advance occurred when it was found that liposome-encapsulated antimonial drugs were hundreds of times more effective than non-encapsulated drug for the treatment of visceral leishmaniasis (VL). Recent observation that reduction of liposome diameter from 1200 nm to 400 nm improved the targeting of antimony (Sb) to bone marrow of infected dogs suggested the small sized liposomes are more effective in promoting parasitic reduction. Métodos/Methods: In this work, we investigated the influence of reduction in mean vesicle diameter from 400 to 200 nm on the pharmacokinetics of liposome-encapsulated Sb in dogs with VL.Two liposome formulations differing in their mean size were prepared. Formulation 1 (LP1) was obtained by the dehydration-rehydration, in the presence of cryoprotectant sucrose (diameter 410±75 nm, encapsulation 40±4%). Formulation 2 (LP2) was obtained by further extrusion of the liposomes through 200 nm-pore membrane (diameter 175±25 nm, encapsulation 34±3%). The formulations were applied as intravenous bolus injection at 4.2 mg Sb/Kg body weight (LP1) or 6.5 mg Sb/kg (LP2), plasma pharmacokinetics were evaluated and Sb were determined in liver, spleen and bone marrow after 24 h. Resultados/Results: LP1 exhibited a significantly shorter plasma half-life of Sb than LP2 (27±8 h vs. 127±24 h). Surprisingly, even though a higher dose of Sb (LP2), a lower level of Sb was found in the liver, and similar levels were found in the bone marrow and spleen. Our data suggests that saturation of the mononuclear phagocyte system (MPS) took place with LP2, because of higher lipid dose and total vesicle surface area, resulting in a reduced liver capture efficiency and slower plasma elimination of Sb. Conclusão/Conclusion: In conclusion, our data indicates that medium sized liposomes (400 nm) are more effective in the targeting of Sb to the infected sites of dogs with VL than small sized liposomes (200 nm). Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 12:15hs - Erly Guilherme Azevedo: [email protected])


Characterization of hematologic changes in an experimental model of dengue

Lívia Duarte Tavares2, Vivian V. Costa2, Caio T. Fagundes1,2, Cristiano Xavier Lima2, Kátia D. Silveira1, Daniel Cisalpino2,Irla Paula2, Stephanie Ádila2, Lucas M. Kangussu3, Mauro M. Teixeira1, Danielle G.

Souza2.

(1) Immunopharmacology, ICB/UFMG, Brazil; (2) Laboratory of Host Microorganism Interaction, ICB/UFMG, Brazil; (3) Laboratory of Cardiovascular Physiology, ICB/UFMG, Brazil.

Objetivo/Aim: Dengue is a mosquito-borne infection which has become a major international public health concern. Our group has recently developed murine Dengue virus (DENV) infection models.The primary signs of severe dengue include hemorrhage, increase in vascular permeability and hypovolemic shock, suggesting defects in hemostasis which is maintained by the balance between the activation of coagulation and fibrinolysis. Here we evaluated the role played of these systems after primary DENV infection in mice. Métodos/Methods: WT-infected (C57BL/6) mice were infected i.p with 10 LD50 of DENV-3 and after 3, 5 or 7 days of infection we performed the analysis. Resultados/Results: On day 7 after infection, mice presented important hematological alterations, as assessed by the occurrence of thrombocytopenia, hemoconcentration, prolonged partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time (PT) in comparison with mice infected in previous periods or non-infected mice. In addition, coagulation was measured by whole blood thromboelastography and showed smaller and weaker clot formation after 7 days of infection (represented by reduction of maximum amplitude and K values). Conclusão/Conclusion: So, coagulopathy was found in our experimental model of dengue and showed good association with disease severity. These data corroborate with other findings in literature, including in humans, and allows us to study more broadly of the impact of changes in this system in the protection or exacerbation of disease. As well, may represent a new therapeutic approach in severe dengue disease. Agradecimentos: CAPES, CNPq, INCT in dengue, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Lívia Duarte Tavares: [email protected])


O envolvimento da iNOS na inflamação e dano hepático em modelo experimental de malária

Oliveira-Lima, OC(1); Bernardes, D(1); Pinto, MCX(1); Arantes, RME(2); Carvalho-Tavares, J(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB, UFMG; (2) Departamento de Patologia, ICB, UFMG

Objetivo/Aim: A Malária é uma doença infecciosa sistêmica causada por protozoários do gênero Plasmodium. Evidências indicam que a enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS) participe da resposta imune á malária, entretanto o seu papel na imunofisiopatologia da doença não foi totalmente elucidado. O objetivo deste trabalho foi avaliar o envolvimento da iNOS no recrutamento leucocitário e dano hepático em camundongos infectados com P. berghei NK65. Métodos/Methods: Camundongos C57Bl/6 selvagens e geneticamente deficientes em iNOS (iNOS-/-), com 6 a 8 semanas de idade foram utilizados . A infecção foi feita com inóculo de 1x106 hemácias parasitadas. A parasitemia foi avaliada a partir do 3° dia pós-infecção (dpi) até a morte do animal. A interação leucócito-endotélio na microvasculatura hepática foi avaliada através da microscopia intravital. Através da análise histopatológica foi avaliada a adesão leucocitária em vênulas centro-lobulares e a migração de células inflamatórias para o parênquima hepático. Os níveis séricos das enzimas transaminase-glutâmico-piruvica (TGP) e transaminase-glutâmico-oxalacética (TGO) foram dosados como indicativo do dano hepático. Resultados/Results: A parasitemia foi significativamente maior no grupo iNOS-/-. Não houve diferença significativa na sobrevida entre grupos. Camundongos iNOS-/- infectados apresentaram aumento significativo no rolamento e adesão de leucócitos na microvasculatura hepática, aumento no número de leucócitos infiltrados no fígado bem como aumento nos níveis séricos de TGO e TGP quando comparados aos selvagens infectados. Conclusão/Conclusion: No modelo experimental de malária por P.berghei NK65, a iNOS apresenta um importante papel modulador do recrutamento leucocitário hepático, sendo que sua deleção gênica acarreta em aumento no rolamento, adesão e migração leucocitária com subseqüente aumento no dano tecidual local. Agradecimentos: CAPES, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 14:45hs - Onésia Cristina Oliveira Lima: [email protected])


Bloqueio do complexo NADPH-Oxidase e da produção de NO agrava manisfestação da dengue por infecção com DENV-3

Avila TV(1), Costa VV(1), Fagundes CT(1), Morcatty TQ(1), Valadão DF(1), Silva TA(3), Teixeira MM(2), Souza DG(1)

(1) UFMG - Microbiologia; (2) UFMG - Bioquímica e Imunologia; (3) UFMG - Patologia,Clínica e Cirurgia Odontológicas

Objetivo/Aim: Embora o conhecimento sobre os mecanismos envolvidos na patogênese da dengue ainda sejam incipientes, estudos relatam a geração de radicais livres de oxigênio e nitrogênio (ROS e RNS) após infecções virais, no entanto, o papel desses radicais durante a infecção pelo vírus da dengue é controverso. O objetivo deste trabalho é avaliar o papel de radicais livres de oxigênio e nitrogênio (ânion superóxido, peróxido de hidrogênio (H2O2), óxido nítrico (NO) e peroxinitrito (ONOO-)) durante a infecção pelo sorotipo 3 do vírus da dengue. Métodos/Methods: Este projeto foi previamente aprovado pelo CETEA/UFMG (113/09). Camundongos selvagens (WT), tratados com inibidor de NADPH-oxidase (apocinina, 20mg.kg-1, i.p.), sequestradores de ONOO- (FeTPPs, 3mg.kg-1 e ácido úrico, 100mg.kg-1, i.p.), conversor de superoxido em H2O2 (SOD, 1000U, i.p.) e deficientes para iNOS (iNOS-/-), foram infectados com 10PFU/100µL de DENV-3 (i.p.) A produção de ROS foi verificada por pela medida da oxidação de DCF-DA por FACS e a analise de expressão de iNOS por imuno-histoquimica e RT-PCR em fígados de animais WT. No sétimo dia após a infecção, os animais foram sacrificados para analise dos níveis de hematócrito (%), plaquetas e transaminases hepáticas no soro (Bioclin / Quibasa Kits), citocinas e quimiocinas no soro e tecidos por ELISA (kit B&D) e recrutamento de neutrófilos nos tecidos pela medida da atividade da MPO. O dano hepático foi verificado por análises histológicas (HE) e a recuperação da carga viral foi feita por titulação em cultura de células. Para verificação da capacidade antiviral, culturas de células foram infectadas com DENV-3 e incubadas com doadores de espécies reativas Resultados/Results: Níveis de ROS e expressão de iNOS foram aumentados durante a infecção em animais selvagens não tratados. Animais tratados com apocinina, SOD, seqüestradores de ONOO- e animais iNOS-/- desenvolveram a doença de forma mais grave do que animais do grupo controle, comprovado por aumento da letalidade e alterações graves nos parâmetros hematológicos e inflamatórios, além de elevação dos níveis de transaminases no soro. Esta maior susceptibilidade à infecção foi correlacionada com o aumento da carga viral nestes animais. In vitro, o doador de ONOO- apresentou atividade antiviral. Conclusão/Conclusion: As vias de produção de anion superóxido pelo complexo NADPH-oxidase e NO pela iNOS são fundamentais para a geração de ONOO-, espécie que exerce papel crucial na modulação da resposta inflamatória à infecção pelo DENV-3, principalmente no controle da replicação viral, como foi demonstrado in vitro. Na ausência destas espécies de radicais livres, há uma redução na capacidade de controlar a replicação viral do hospedeiro, resultando em uma manifestação mais grave da doença, seguida de morte. Agradecimentos: INCT em Dengue, CAPES, CNPq e FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 14:30hs - Thago Vinicius Ávila: [email protected])


Angiotensin-(1-7) Prevents Cardiomyocyte Pathological Remodeling Through a Nitric Oxide/cGMP–Dependent Pathway

Gomes, ERM (1); Lara, AA (1); Almeida, PWM (1); Guimarães, DA (1); Resende, RR (2); Campagnole-Santes, MJ (1), Bader, M (3); Santos, RAS (1); Guatimosim, S (1)

(1) Universidade Federal de Minas Gerais; (2) Universidade Federal de São João del-Rei; (3) Max-Delbru¨ck Center for

Molecular Medicine

Objetivo/Aim: The renin-angiotensin (Ang) system plays a pivotal role in the pathogenesis of cardiovascular disease, with Ang II being the major effector of this system. Multiple lines of evidence have shown that Ang-(1-7) exerts cardioprotective effects in the heart by counterregulating Ang II actions. The questions that remain are how and where Ang-(1-7) exerts its effects. Métodos/Methods: By using a combination of molecular biology, confocal microscopy, and a transgenic rat model with increased levels of circulating Ang-(1-7) (TGR[A1-7]3292), we evaluated the signaling pathways involved in Ang-(1-7) cardioprotection against Ang II–induced pathological remodeling in ventricular cardiomyocytes. Rats were infused with Ang II for 2 weeks.We found that ventricular myocytes from TGR(A1-7)3292 rats are protected from Ang II pathological remodeling characterized by Ca2_ signaling dysfunction, hypertrophic fetal gene expression, glycogen synthase kinase 3_ inactivation, and nuclear factor of activated T-cells nuclear accumulation. Moreover, cardiomyocytes from TGR(A1-7)3292 rats infused with Ang II presented increased expression levels of neuronal NO synthase. Resultados/Results: To provide a signaling pathway involved in the beneficial effects of Ang-(1-7), we treated neonatal cardiomyocytes with Ang-(1-7) and Ang II for 36 hours. Treatment of cardiomyocytes with Ang-(1-7) prevented Ang II–induced hypertrophy by modulating calcineurin/nuclear factor of activated T-cell signaling cascade. Importantly, antihypertrophic effects of Ang-(1-7) on Ang II–treated cardiomyocytes were prevented by L-NAME and ODQ, suggesting that these effects are mediated by NO/cGMP. Conclusão/Conclusion: Taken together, these data reveal a key role for NO/cGMP as a mediator of Ang-(1-7) beneficial effects in cardiac cells. Agradecimentos: CNPq, CAPES, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Enéas Ricardo de Morais Gomes: [email protected])


Resistance exercise induces antinociception in rats with participation of nitric oxide/cGMP/KATP pathway

GALDINO, GS(1); Silva, GC(1); Almeida, RT(1); Duarte, ID(1); Perez, AC(1)

(1) Departamento de Farmacologia ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Resistance exercise is characterized by increased strength, tone, mass, and/or muscular endurance and also for more beneficial effects, such as blood pressure and osteoporosis reduction, diabetes mellitus control, and analgesia. The aim of this study was to evaluate whether resistance exercise induces antinociception and the participation of the nitric oxide/CGMP/KATP pathway in this effect. Métodos/Methods: Wistar rats were submitted to acute resistance exercise (RE) in a weight-lifting model adapted for rat. The nociceptive threshold was measured by the nociceptive test of paw-withdrawal5. To investigate the involvement of the NO/CGMP/KATP pathway the following nitric oxide synthase (NOS) unspecific and specific inhibitors were used: N-nitro-L-arginine (NOArg), N#-Propyl-L-arginine (L-NPA), N5-(1-Iminoethyl)-L-ornithine dihydrocloride (L-NIO), Aminoguanidine; guanylyl cyclase inhibitor, 1H-[1,2,4]oxidiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one (ODQ); and KATP channel blocker, Glybenclamide; all administered subcutaneously at a dose of 2 mg/kg 10 min before resistance exercise started. Plasma and cerebrospinal fluid (CSF) nitrite levels were determined by spectrophotometry. Resultados/Results: On the paw-withdrawal, tail-flick and face flick tests, the acute aerobic exercise protocol produced antinociception, which lasted for more than 15 min. This effect was significantly reversed (P<0.05) by nitric oxide synthase (NOS) specific and unspecific inhibitors, guanylyl cyclase inhibitor (ODQ) and KATP channel blocker (Glybenclamide). Acute exercise was also responsible for increased levels of nitrite in both plasma and cerebrospinal fluid. Conclusão/Conclusion: Our work demonstrated that acute resistance exercise produced antinociception in rats, with participation of the endogenous NO/CGMP/KATP pathway. This effect may be due shear stress, increased neuronal depolarization and inflammatory madiators in muscle during exercise. This finding is important to clarify endogenous analgesic mechanisms related to exercise. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Giovane Galdino de Souza: [email protected])


Involvement of selectins in stem cell-endothelium interactions during homing to ischemic hindlimb – an intravital microscopy

study *§Almeida, B.G.; *§Fernandes, F.M.; *§Castro, T.B.R.; *Andrade, S.P.; #§Pinho, V.; +§Teixeira, M.M. &

*§Barcelos, L.S.

*Angiogenesis and §Immunopharmacology lab, Departments of *Physiology and Biophysics, #Morphology and +Biochemistry and Immunology, Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG, Brazil.

Objetivo/Aim: The clinical application of stem cells in ischemic diseases is hindered by poor engraftment. Efficient migration to target tissues is required for successful therapy. However, adhesive mechanisms governing progenitor/stem cell trafficking through the microcirculation of ischemic muscles are broadly unknown. Here, we evaluated the rolling and adhesion events of circulating cells to the ischemic hindlimb microcirculation and the relevance of Selectins for transplanted bone marrow-derived progenitor/stem cells-endothelium interactions in a model of limb ischemia. Métodos/Methods: Hindlimb ischemia was induced by permanent occlusion of the femoral artery of C57Bl/6 mice. The method of sodic fluorescein diffusion into the bloodstream after plantar cushion injection was used for evidence of ischemia. Rhodamine-labeled circulating cells-endothelium interactions were analyzed by intravital fluorescence microscopy (IVFM). In another experiment setting, bone marrow-derived mononuclear cells (BM-MNC) obtained from GFP transgenic mice were i.v. injected 24h post-ischemia and just before IVFM recording. Resultados/Results: The fluorescein peak in the systemic circulation before arterial occlusion occurred at 7.5±1.6 min and increased to 30±0.1 min just after occlusion (p<0.001, n=5/group). By using IVFM, we observed that the number of circulating cells rolling and adherent to the endothelium of the quadriceps muscle was higher at days 1 and 3 when compared with sham-operated animals (61±4.8 at day 1 and 45.4±7.5 at day 3 vs 24±4.8 rolling cells/min, p<0.01 for both, n=5-7/group; 3.5±0.5 at day 1 and 1.7±0.4 at day 3 vs 0.75±0.2 adherent cells, p<0.01 for day 1 and p<0.05 for day 3, n=5-7/group). No significant differences were observed at day 7 post-ischemia. Similar results were obtained when analyzing gastrocnemius muscle. After i.v. transplantation of GFP BM-MNC, we observed a greater number of rolling GFP BM-MNC when compared with sham animals (p<0.05, n=6/group). This behavior was significantly reduced after i.v. injection of fucoidan (10 min before transplantation) when compared with untreated ischemic animals (p<0.05, n=6/group). Conclusão/Conclusion: We demonstrate that leukocyte-endothelium interactions are increased in affected limbs at least until 3 days following ischemia. In addition, our results suggest a possible behavior of rolling transplanted BM-MNC cells to endothelium-dependent selectins. Agradecimentos: CNPq/FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Brígida gomes de Almeida: [email protected])


Reactive Oxygen Species and PGF2alfa receptor activation modulate SNP relaxation in denuded mice aorta

Kangussu, L(1); Olivon, VC (1); Côrtes, SF (1) and Bonaventura, D (1).

Laboratory of Cardiovascular Pharmacology, Department of Pharmacology, Institute of Biological Sciences (ICB). Federal University of Minas Gerais -UFMG. Belo Horizonte, MG – Brazil.

Objetivo/Aim: The aim of this study was to investigate if the endothelium modulates SNP vasorelaxation by using pharmacological parameters as maximal relaxation effect (Emax) and potency (pD2). Métodos/Methods: Male C57BL/6J mice 08 to 12-week-old (28–32 g) were used for the study. The animals were killed by decapitation and thoracic aorta was quickly removed and vascular reactivity experiments were performed. The aortic rings were placed between two stainless-steel stirrups and connected to an isometric force transducer. The rings were placed in organ chamber containing Krebs solution was maintained at pH 7.4 gassed with 95% O2 and 5% CO2 at 37 °C. The rings were initially stretched to a basal tension of 0.5 g and then were allowed to equilibrate for 60 min. Endothelial integrity was assessed qualitatively by the degree of relaxation induced by acetylcholine (1 uM) in the presence of contractile tone induced by phenylephrine (0.1 uM). All these procedures were in accordance with the guidelines of the Animal Experimentation Ethics Committee, Federal University of Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brazil. (Protocol number: 164/2009). Resultados/Results: The vasorelaxation induced by SNP was less potent in the absence than in the presence of endothelium. This effect was not abolished by L-NAME. On the other hand, in the presence of Tiron, the difference observed in SNP vasorelaxation between denuded and intact endothelium aortas was completely abolished. We have also investigated the involvement of vasoconstrictor prostanoids in this negative modulation. Ibuprophen, and AH 6809, abolished the differences in SNP relaxation between denuded and intact endothelium aorta. Conclusão/Conclusion: The present findings indicate that lower potency of the SNP-relaxation in aortas without endothelium could be associated with an intense oxidative stress that leads to an enhancement of COX activation and PGF2a receptor activation. Agradecimentos: FAPESP, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Lucas Miranda Kangussu Gomes Oliveira: [email protected])


Apoptose em cardiomiócitos de camundongos Mas KO Nunes,SLA(1); Gomes, ERM(1); Parreira, AB(1);Santos, RAS(1) & Guatimosim, S(1)


Objetivo/Aim: Investigar expressão de proteínas das vias apoptóticas nos cardiomiócitos de camundongos Mas- KO, sendo que esses animais não apresentam o receptor da Ang-(1-7), o Mas. Métodos/Methods: Para análise das vias apoptóticas dos cardiomiócitos foi realizado o isolamento de cardiomiócitos ventriculares de animais FVBN WT (controle) e FVBN Mas-KO. As células isoladas foram submetidas à extração protéica e em seguida o homogenato foi usado para a técnica de western blotting, onde as proteínas foram transferidas para gel de poliacrilamida e em seguida para membrana de PVDF. Essa membrana foi incubada com anticorpos primários anti-caspase-3, anti-BCL-2, anti-AIF e anti-Tubulin, e posteriormente com anticorpos secundários respectivos. Os anticorpos utilizados correspondem respectivamente às seguintes proteínas: Caspase-3 (apoptosis-related cysteine peptidase), BCL-2, AIF (Apoptosis- Inducing Factor) e Tubulina. A Caspase-3 é uma importante efetora da morte celular programada e BCL-2,ao contrário,é responsável por bloquear a apoptose ao inibir translocação do citocromo c para citosol e AIF induz apoptose por via independente de caspase. A Tubulina foi utilizada para normalização. Resultados/Results: Com a realização da técnica de Western Blotting foi analisada a expressão protéica e demonstrada uma maior expressão de Caspase-3 nos cardiomiócitos de camundongos Mas-KO e com relação à BCL-2, ao contrário, foi obtida uma maior expressão nos camundongos WT do que nos Mas-KO. Não foi observada alteração significativa na expressão de AIF nas células dos camundongos Mas-KO, quando comparadas as dos camundongos WT. Conclusão/Conclusion: Os resultados obtidos sugerem uma relação entre a via do eixo Ang-(1-7)/Mas com as vias apoptóticas dependentes de caspase, devido ao fato dos camundongos Mas KO, que não detém o receptor para Angiotensina-(1-7), apresentarem um aumento de expressão de proteínas pró-apoptóticas (caspase-3) e uma diminuição das proteínas anti-apoptóticas(BCL-2), sugerindo assim um efeito cardioprotetor desse heptapeptídeo do sistema renina-angiotensina. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq e CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Sasha Luísa de Azevedo Nunes: [email protected])


Alterações induzidas pelo tratamento com fenilefrina em cardiomiócitos de animais selvagens e knockout para o

receptor Mas Parreira, AB; Guatimosim, S

Laboratório de Sinalização Intracelular em Cardiomiócitos - Departamento de Fisiologia e Biofísica - ICB - UFMG

Objetivo/Aim: Identificar alterações induzidas pelo tratamento com fenilefrina nos cardiomiócitos de animais selvagens e knockout para o receptor Mas. Métodos/Methods: Foram utilizados corações de camundongos C57BL/6 selvagens (WT) e com deleção gênica do receptor da Angiotensina-(1-7), o receptor Mas (Mas-KO), machos com 14 semanas de vida tratados ou não com fenilefrina durante 7 dias. Para avaliar a dinâmica do Ca2+, os miócitos ventriculares foram isolados e incubados com flúor-4-AM. Para avaliar a expressão de espécies reativas de oxigênio, os cardiomiócitos foram incubados com a sonda fluorescente Diidroetídeo (DHE). Logo em seguida ambos foram analisados através da microscopia confocal. Foi utilizada a técnica de western blot para verificar a expressão da enzima antioxidante catalase e SOD1. Para análise morfométrica do cardiomiócito, foi feito cortes histológicos. Resultados/Results: O tratamento com fenilefrina levou a um aumentono pico do transiente de Ca2+ nos cardiomiócitos dos camundongos WT e Mas-KO e um aumento da fluorescência do DHE. Houve um aumento concomitante na expressão da catalase e SOD1 nos animais WT tratados, no entanto o aumento da catalase não foi observado em animais Mas-Ko.Cardiomiócitos dos animais WT tratados com fenilefrina apresentaram hipertrofia significativa, o mesmo não foi observado nos cardiomiócitos provenientes de camundongos Mas-KO. Conclusão/Conclusion: Camundongos com deleção gênica do receptor Mas apresentaram menores alterações induzidas por fenilefrina no pico do transiente de cálcio e no tamanho dos cardiomiócitos. No entanto, cardiomiócitos Mas-KO apresentaram maior estresse oxidativo, caracterizado por um desbalanço entre a produção de espécies reativas de oxigênio e a expressão de enzimas antioxidantes. Agradecimentos: CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Amanda Borges Parreira: [email protected])


Efeito inotrópico positivo promovido pela Erythrina velutina Willd em átrio isolado de cobaia

Passos, AGS(1); Estevam, CS(2); Araújo Neto, V(2); Conde-Garcia, EA(1); Oliveira, VR(1); Vasconcelos, CML(1)

(1) Laboratório de Biofísica do Coração, (2) Laboratório de Bioquímica e Química de Produtos Naturais, Departamento de

Fisiologia CCBS-UFS

Objetivo/Aim: Estudos mostraram que extratos obtidos das folhas de Erythrina velutina (mulungu) têm ação tranquilizante, analgésica, anti-inflamatória e anti-bacteriana. O presente estudo tem como objetivo caracterizar os efeitos de extratos e frações obtidos das folhas da E. velutina sobre a contratilidade do miocárdio atrial de cobaia. Métodos/Methods: As folhas de E. velutina foram coletadas no município de São Cristóvão (SE) e um exemplar da planta foi depositado no Herbário da UFS (ASE 4126). O extrato bruto hidroetanólico (EBH) foi obtido por maceração das folhas em etanol e água (1:1, v/v, 7 dias). O EBH foi ressuspenso em MeOH/H2O (2:3) e submetido à extração por partição líquido:líquido com hexano (n-C6H14), clorofórmio (CHCl3), acetato de etila (AcOEt) e água. Os experimentos foram feitos em átrio esquerdo de cobaia (cuba: 5 mL, Tyrode, 29 ± 0,1 oC; estirado a 0,5 gf, estimulação: 1 Hz; 400 V; 0,5 ms). A força foi captada isometricamente por um transdutor (HP FTA10) acoplado a um amplificador (HP 8805B). Curvas concentração-efeito dessa fração acetato de etila (FAcOEt) foram obtidas antes e após a pré-incubação do átrio com 1 uM de propranolol ou 1 uM de nifedipina. Resultados/Results: A FAcOEt apresentou efeito inotrópico positivo. Seu efeito máximo foi alcançado em 0,8 mg/mL aumentando a força contrátil em 108 ± 29 % (n = 13). A pré-incubação do átrio, tanto com o propranolol (antagonista beta-adrenérgico) quanto com a nifedipina (bloqueador de canais de cálcio tipo-L), aboliu o efeito inotrópico positivo, mantendo o seu efeito inotrópico negativo. A resposta contrátil da fração foi 50% menor em átrios obtidos de animais previamente reserpinizados (5 mg/kg, ip, 24 h). Conclusão/Conclusion: Os resultados mostram que a FAcOEt promove aumento da força contrátil por um mecanismo que envolve tanto a participação de receptores adrenérgicos quanto de canais de cálcio tipo-L. A fração estimula a liberação de noradrenalina dos terminais adrenérgicos aumentando a força contrátil. Agradecimentos: FAPITEC/SE, CNPq/UFS, UFS

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Amilton Gustavo da Silva Passos: [email protected])


O papel anti-hipertrófico da maquinaria de síntese de acetilcolina no cardiomiócito

ROCHA-RESENDE, C (1); RESENDE, R (2); GUATIMOSIM, S (1)

(1) Laboratório de Sinalização Intracelular em Cardiomiócitos - Departamento de Fisiologia e Biofísica - ICB - UFMG; (2) Laboratório de Nanobiotecnologia - Departamento de Engenharia de Biossistemas - UFSJ

Objetivo/Aim: Recentemente, nosso grupo demonstrou que o tratamento com piridostigmina (PYR) (um agente inibidor da acetilcolinesterase) em ratos tratados com isoproterenol previne o remodelamento cardíaco. Baseando em dados da literatura que indicam a existência de uma maquinaria de síntese de acetilcolina (ACh) no cardiomiócito, nosso trabalho objetiva investigar o efeito da administração de piridostigmina em cultura de cardiomiócitos de ratos neonatos tratados com isoproterenol (ISO). Métodos/Methods: Cardiomiócitos de ratos Wistar machos, com idade entre 3 e 5 dias, foram submetidos a cultura primária. As células foram tratadas com ISO (10microM) e/ou PYR (1mM) por um período de 48h. Após esse período, as células foram fixadas e marcadas com anticorpo anti-NFAT e analisadas quanto a localização nuclear ou citosólica desse fator por meio de microscopia confocal. Também foram realizadas medidas de área celular nos diferentes grupos para avaliar o efeito da PYR na resposta anti-hipertrófica. Além disso, por meio da técnica de qPCR, foi avaliada a expressão diferencial de marcadores hipertróficos, tais como ANP e beta-MHC, e também a expressão da VAChT e do receptor muscarínico tipo M2. Experimentos adicionais foram realizados em cardiomiócitos ventriculares de ratos adultos. Resultados/Results: Nossos resultados indicam que a PYR reduz a translocação do fator de transcrição de genes hipertróficos NFAT para o núcleo em cardiomiócitos tratados com ISO. Os resultados de medida da área celular também indicam o antagonismo da ação da PYR em relação ao ISO. O tratamento com ISO induz ao aumento na expressão de marcadores hipertróficos (ANP e beta-MHC) e aumento nos níveis de mRNA da VAChT e do receptor M2. Contudo, a administração concomitante de ISO e PYR preveniu os efeitos acima citados. Conclusão/Conclusion: Pudemos observar que a PYR inibe a resposta hipertrófica desencadeada pelo ISO em cultura primária de cardiomiócitos de ratos neonatos e de ratos adultos, indicando um possível papel protetor da maquinaria de síntese de ACh no cardiomiócito que ainda não foi descrito. Agradecimentos: CAPES, CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Cibele Rocha Resende: [email protected])


Nuclear Inositol 1,4,5-trisphosphate (InsP3) is an absolut requIrEment for Cardiomyocyte hypertrophy

Lilian A. M. Arantes1, Carla J. Aguiar1,2, M. Jimena Amaya3, S. Guatimosim1, M. Fátima Leite1, 4.

1 Department of Physiology and Biophysics, Federal University of Minas Gerais, Brazil. 2 Izabela Hendrix Institute, Brazil. 3 Yale School of Medicine, USA. 4 Howard Hughes Medical Institute.

Objetivo/Aim: Ca2+ mediates a wide range of cellular responses and the release of this ion from inositol 1,4,5-triphosphate receptor (InsP3R) is known to play a critical role in transcription of genes involved in cardiac hypertrophy. The goal of this work is to investigate the relative role of nuclear InsP3 in hypertrophy response induced by endothelin-1 (ET-1). Métodos/Methods: For that, we used an adenovirus construct that has the ability to act as selective InsP3 sink in the nucleus (InsP3-sponge-NLS), inducing local changes in Ca2+ levels. We used a primary culture of neonatal cardiomyocytes, and cells were examined by confocal microscopy and immunofluorescence. Resultados/Results: We found that ET‑1 increased cell surface area by 54.3 ± 6.87% compared to control (p<0.05), and that InsP3-sponge-NLS prevented hypertrophy induced by ET-1. We also found that ANP expression levels remained at control levels when ET-1 treated cardiomyocytes had InsP3 buffered in the nucleus. Then, we investigated whether buffering nuclear InsP3 would affect the signaling pathway as calcineurin (Cn)/ nuclear factor of activated T cells (NFAT) and histone deacetilase 5 (HDAC-5) preventing the activation of hypertrophic genes. We observed that buffering nuclear InsP3 decreased translocation of Cn, and NFAT (1.22 ± 0.13 and 0.46 ± 0.16 pixel/nuclear area for control and buffered cells, respectively, p<0.001) upon ET-1 stimulation. On the other hand, the HDAC-5 exportation to citosol was prevented by InsP3-sponge-NLS (2.965 ± 0.13 and 5.548 ± 0.25 pixel/nuclear area for ET-1 treated cells and InsP3-sponge-NLS infected plus ET-1 cardiomyocytes, respectively, p<0.001). Conclusão/Conclusion: Together, these results show that nuclear InsP3 plays a central role in the hypertrophic effect induced by ET-1. Agradecimentos: CNPq/HHMI/FAPEMIG/CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 15:15hs - Lilian Anee Muniz Arantes: [email protected])


Nanotecnologia Aplicada ao tratamento das disfunções cardiovasculares

Ladeira, M.S.(1); Capettini, L.S.(1); Tavares, F.A.(2); Pinheiro, M.V.B.(2); Ladeira, L.O.(2); Lemos. V.S.(1); Resende, R.R.(3); Guatimosim, S.(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Departamento de Física ICEX-UFMG; (3) Departamento de

Biotecnologia UFSJ

Objetivo/Aim: O estresse oxidativo está associado à progressão de diversas disfunções cardiovasculares, podendo afetar a estrutura e função do miocárdio, estimulando o processo de hipertrofia e promovendo alterações do tônus vascular. Diante disso, o presente estudo objetiva elucidar os efeitos do fulerol, um poderoso antioxidante, nas alterações moleculares e bioquímicas induzidas pelo tratamento com agentes hipertróficos e seu efeito sob o tônus vascular em modelo de disfunção vascular. Métodos/Methods: Através da técnica de imunofluorescência observamos o efeito do fulerol na expressão das proteínas relacionadas à cascata de sinalização hipertrófica induzida por isoproterenol e fenilefrina, a via da calcineurina/NFAT. Também foi avaliada a área celular dos cardiomiócitos provenientes de ratos neonatos tratados com os agentes hipertróficos e o tratamento concomitante com o fulerol. No intuito de verificar o efeito do fulerol em um modelo de disfunção endotelial, utilizamos a técnica de vaso isolado proveniente de animais knockout para apolipoproteína E (APOE KO), onde foram observados os efeitos sobre a reatividade vascular. Resultados/Results: O tratamento com isoproterenol e fenilefrina levou a um aumento da expressão das proteínas calcineurina e NFAT, resultando em um aumento da área celular dos cardiomiócitos, esses efeitos foram abolidos com o tratamento concomitante com o fulerol. No modelo de disfunção endotelial, os vasos provenientes de animais APOE KO apresentam redução da capacidade de relaxamento e o tratamento com o fulerol foi capaz de restaurar o tônus vascular, promovendo uma melhoria na reatividade vascular. Conclusão/Conclusion: Nossos dados sugerem que, o tratamento com o antioxidante fulerol é capaz de atenuar as disfunções cardiovasculares induzidas pelo estresse oxidativo. Podemos concluir que, o tratamento com o antioxidante fulerol é capaz de prevenir os efeitos hipertróficos induzidos pela administração dos agonistas adrenérgicos isoproterenol e fenilefrina, além de melhorar a reatividade vascular em modelo de lesão endotelial, sugerindo um possível efeito terapêutico dessas nanoesferas de carbono. Agradecimentos: Capes, INCT Nanomaterias de carbono

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Marina de Souza Ladeira: [email protected])


O bloqueio dos receptores NMDA do hipotálamo dorsomedial não altera as respostas cardiovasculares e comportamental do

quimiorreflexo SILVA, N.T., HAIBARA, A. S.

Departamento de Fisiologia e Biofísica – UFMG, Belo Horizonte/MG

Objetivo/Aim: Estudos do nosso laboratório mostraram que os receptores glutamatérgicos ionotrópicos do hipotálamo dorsomedial (HDM) participam de forma importante da integração das respostas reflexas à estimulação dos quimiorreceptores em ratos não-anestesiados. No presente estudo, avaliamos o papel dos receptores NMDA do HDM sobre as respostas cardiovasculares e comportamental induzidas pela estimulação dos quimiorreceptores periféricos. Métodos/Methods: Ratos Wistar (290-310g) foram submetidos à estereotaxia para implante bilateral de cânulas-guia no HDM e canulação da artéria e veia femoral, para mensuração dos parâmetros cardiovasculares e administração sistêmica de drogas, respectivamente.Foram utilizados dois grupos experimentais. No primeiro grupo (n=9), o quimiorreflexo foi ativado com KCN (40 ug/0,1 ml i.v.) antes e após a microinjeção bilateral do antagonista de receptores NMDA, o AP-5 (100 pmol/100 nl), no HDM. No segundo grupo experimental (n=9) foi avaliada a eficácia do AP-5, na dose de 100 pmol/100 nl, em bloquear os receptores NMDA. Para isso, as respostas cardiovasculares e comportamentais induzidas pela microinjeção unilateral do agonista NMDA (10 pmol/100 nl) foram avaliadas antes e após a microinjeção ipsilateral do AP-5. Para análise da resposta comportamental do quimiorreflexo o experimento foi filmado e através de um aplicativo do MATLAB® a resposta comportamental foi expressa como atividade locomotora do animal. Resultados/Results: A microinjeção bilateral de AP-5 no HDM (n=9) não promoveu alterações significativas sobre os parâmetros cardiovasculares basais (116 ± 3 vs 115 ± 2 mmHg; 402 ± 9 vs 412 ± 18 bpm), bem como não alterou as respostas pressora (+47 ± 2 vs +44 ± 3 mmHg), bradicárdica (-245 ± 24 vs -244 ± 27 bpm) e comportamental do quimiorreflexo. Todavia, a microinjeção de AP-5 no HDM foi capaz de reduzir significativamente as respostas cardiovasculares (+21 ± 1 vs +8 ± 2 mmHg; +135 ± 13 vs +69 ± 18 bpm) induzidas pelo agonista NMDA (n=7). Conclusão/Conclusion: Esses resultados indicam que os receptores NMDA do HDM não estão envolvidos na integração das respostas cardiovasculares e comportamental do quimiorreflexo ou na manutenção dos parâmetros cardiovasculares basais. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq e CAPES.

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 16:30hs - Nathália Teodoro da Silva: [email protected])


Mecanismo envolvido no efeito cardioprotetor da super expressão da Ang-(1-7) em ratos submetidos ao modelo de

hipertensão DOCA-Sal Almeida, PWM (1); Gavioli, M; (1), Lima, RF (1); Gomes, ERM (1); Resende, RR (2); Greco, L (1); Melo,MB

(1); Campagnole-Santos, MJ (1); Santos, RAS (1); Guatimosim, S(1).

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB- UFMG; (2) Departamento de Biotecnologia - UFSJ

Objetivo/Aim: Evidências recentes têm sugerido que os benefícios da Ang-(1-7) no coração são mediados por seu receptor, Mas. No, entanto, as vias de sinalização envolvidas neste processo são desconhecidas no cardiomiócito. Desse modo o objetivo do nosso trabalho foi avaliar o mecanismo envolvido no efeito protetor da Ang (1-7) em ratos submetidos a 6 semanas de tratamento DOCA-Sal. Métodos/Methods: Foram utilizados ratos SD e TG ([TGR(A1-7)3292]) machos, submetidos ou não a 6 semanas de tratamento DOCA-Sal. A medida da pressão arterial sistólica (PAS) foi realizada através de pletismografia de cauda. A razão do peso do coração pelo comprimento da tíbia foi realizada para análise da hipertrofia cardíaca. Para análise da função cardíaca, utilizamos eco cardiografia. Posteriormente analisamos a dinâmica do Ca2+ em cardiomiócitos, através da medida do transiente de Ca2+. Para análise da expressão de proteínas envolvidas nessa via de sinalização do Ca2+ utilizamos a técnica de Western Blot. Para verificar a expressão de RNAm para marcadores de stress cardíaco , componentes do Sistema Renina Angiotensina (SRA) e Receptor de mineralocorticoide (RMM) utilizamos a técnica de PCR em tempo real. Resultados/Results: Tratamento DOCA-Sal durante 6 semanas em ratos SD promoveu aumento da PAS, hipertrofia cardíaca, reexpressão de genes fetais ANP e B-MHC, alterações na expressão de componentes do SRA, RMM e alterações na função cardíaca. Promoveu também redução no pico do transiente de Ca2+ e diminuição na expressão de proteínas envolvidas na sinalização de Ca2+. A Super expressão de Ang –(1-7) em ratos submetidos ao tratamento DOCA-Sal foi capaz de reverter todos essas alterações. Conclusão/Conclusion: Nosso estudo mostrou que a super expressão de Ang-(1-7) foi capaz de prevenir e atenuar o aumento da PAS induzida pelo modelo de hipertensão DOCA-Sal, alterações na expressão gênica, no remodelamento cardíaco, na função cardíaca e na maquinaria intracelular de Ca2+. Em conjunto estes resultados apontam para um importante papel cardioprotetor da Ang-(1-7) em impedir o desenvolvimento da disfunção cardíaca. Agradecimentos: CNPq, CAPES e FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Pedro William Machado de Almeida: [email protected])


Reduced Cardiovascular Alterations of Tartar Emetic Administered in Long-Circulating Liposomes in Rats

Maciel, NR (1) ; Reis PG (2) ; Kato KC (2) ; Vidal AT(1) ; Guimarães, HN (1) ; Frézard, F (2) ; Silva-Barcellos, NM (1); Grabe-Guimarães, A (1).

(1) Departamento de Farmácia EF-UFOP; (2) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Trivalent antimonial drugs, including tartar emetic (TA), are known to induce important cardiotoxicity observed by electrocardiographic abnormalities. Liposome encapsulation was found to reduce the overall acute toxicity of TA. Thus, the aim of the present work was to compare the cardiovascular parameters, mainly the cardiotoxic markers, in rats submitted to the treatment with free TA and TA encapsulated in long-circulating liposomes. Métodos/Methods: Liposomes were made using lipids DSPC, DSPE-PEG and cholesterol by freeze-thawed and extrusion. The cardiovascular signals, electrocardiogram (ECG) and arterial blood pressure (AP), were recorded from anaesthetized Wistar rats after intravenous (IV) administration of a single specially high dose (17 mg/kg) of TA in liposomes and in free form. Resultados/Results: The IV administration of TA solution caused significant increase of QT interval of ECG and significant reduction of AP when compared to the control group. These alterations were not observed when liposomes TA were administered and the profile of ECG and AP data was quite similar to the control groups. Conclusão/Conclusion: A liposomal formulation of TA showed a reduced cardiotoxic profile for TA when compared to the free form. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq, CAPES, UFOP and UFMG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Priscila Gomes dos Reis: [email protected])


Efeito do bloqueio dos receptores purinérgicos do núcleo do trato solitário sobre as respostas cardiovasculares induzidas

pela estimulação dos receptores nmda do hipotálamo dorsomedial

Bessa, R.N.; Silva, N.T.; Haibara, A.S.

Departamento de Fisiologia e Biofísica, UFMG, Belo Horizonte/MG.

Objetivo/Aim: Tem sido descrito que a estimulação da área hipotalâmica de defesa (AHD) libera ATP no núcleo do trato solitário (NTS) e facilita as respostas cardiorrespiratórias do quimiorreflexo. Estudos de nosso laboratório mostraram que o bloqueio dos receptores glutamatérgicos ionotrópicos do hipotálamo dorsomedial (HDM), integrante da AHD, reduz as respostas cardiovasculares do quimiorreflexo. O presente estudo avaliou o papel dos receptores purinérgicos do NTS na neurotransmissão das respostas cardiovasculares induzidas pela microinjeção do agonista NMDA do HDM. Métodos/Methods: Foram utilizados ratos Wistar com peso entre 270-320g. Previamente os animais foram submetidos à cirurgia estereotáxica para implante bilateral de cânulas-guia em direção ao HDM e ao NTS, e canulação da artéria e veia femoral, para mensuração dos parâmetros cardiovasculares e administração sistêmica de drogas, respectivamente. As respostas cardiovasculares induzidas pela microinjeção unilateral do agonista NMDA (10 pmol/100nl) no HDM foram avaliadas antes e após o bloqueio bilateral dos receptores purinérgicos do NTS com o antagonista Suramin (4 nmol/100nl). Resultados/Results: A estimulação do HDM com agonista NMDA promoveu aumento da pressão arterial (+11,3 ± 0,9 mmHg) e taquicardia (+55,7 ± 4,2 bpm). O bloqueio dos receptores purinérgicos do NTS com Suramin foi capaz de reduzir significativamente as respostas pressora (-1,3 ± 2,0 mmHg) e taquicárdica (+0,3 ± 1,8 bpm) induzidas pelo agonista NMDA microinjetado no HDM. Conclusão/Conclusion: Estes resultados sugerem que as respostas cardiovasculares induzidas pela estimulação dos receptores glutamatérgicos do subtipo NMDA do HDM podem depender de receptores purinérgicos do NTS. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq e CAPES.

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Renata de Bessa Nascimmento: [email protected])


Resposta vascular na lesão pulmonar aguda induzida por paraquat

Aires, RD(1); Capettini, LSA(1); Pinho, JF(1); Silva, JF(1); Côrtes, SF(2); Pinho, V(3) e Lemos, VS(1).

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG; (2) Departamento de Farmacologia, ICB-UFMG e (3) Departamento de Morfologia, ICB-UFMG.

Objetivo/Aim: O presente estudo objetiva investigar a resposta vascular da aorta em ratos com Lesão Pulmonar Aguda (LPA) induzida por paraquat (PQ). Métodos/Methods: Os animais foram sacrificados 24 horas após injeção de paraquat (20 mg/Kg) ou salina por via intraperitoneal. A aorta torácica foi retirada e foi utilizada nos experimentos de reatividade vascular no sistema de banho de órgãos. Além disso, foi realizada a dosagem da produção basal de óxido nítrico (NO) pelo método de DAN (2,3-diaminonaftaleno) e a avaliação da expressão e imunolocalização das óxido nítrico sintases (NOS) por Western blot e Imunofluorescência. Para a análise estatística foram utilizados os testes Two-Way ANOVA e Teste T de Student. Resultados/Results: A LPA induzida por PQ não alterou a resposta vasodilatadora, mas reduz a contração induzida pela fenilefrina. A remoção do endotélio, inibição não seletiva das NOS (L-NAME: 300 !M) e/ou inibição seletiva da NOS induzida (iNOS) com L-NIL (10 !M) restaurou a contração dos animais para o nível do controle. A produção basal de NO na aorta dos animais com LPA estava aumentada comparada ao controle. Houve aumento na expressão da iNOS no endotélio da aorta dos animais com LPA. Conclusão/Conclusion: Os resultados sugerem que a LPA induzida pelo PQ aumenta a expressão endotelial de iNOS e a produção basal de NO e reduz a resposta da aorta à agentes vasoconstritores. Agradecimentos: FAPEMIG/Capes/CNPq.

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Rosária Dias Aires: [email protected])


The novel MAS agonists, CGEN-856S and CGEN-857, attenuates heart failure induced by myocardial infartion

Savergnini, SQ; Silva, GA; Ferreira, AJ; Marques, FD; Rotman, G; Cojocaru, G; Cohen, Y; Cohen-Dayag, A; Zauberman, A; Almeida, AP; Beiman, M; Santos, RAS.

(1) Department of Physiology - UFMG, Brazil; (2) Department of Morphology - UFMG, Brazil; (3) Compugen, Israel.

Objetivo/Aim: We have recently reported that the novel Mas agonists, CGEN-856S and CGEN-857, identified through a computational biology discovery platform, have similar cardiovascular actions to those elicited by Angiotensin-(1-7). In this study, we evaluated the cardiac effects of CGEN-856S and CGEN-857 in infarcted male Wistar rats. Métodos/Methods: Myocardial infarction (MI) was induced by left coronary artery ligation under anesthesia with 10% ketamine/ 2% xylazine. At the end of the 2-week treatment (CGEN-856S and CGEN-857 at 1.2 nmol/Kg/h or saline, 0.5 uL/h; ALZET 2002 osmotic mini-pumps) the Langendorff technique was used to analyze cardiac function. Left ventricle serial sections were staining with Masson dye to quantify the infarcted area. Resultados/Results: CGEN-856S and CGEN-857 markedly attenuated the decrease in systolic tension induced by myocardial infarction (Sham: 10.98 ± 0.18 g, n=7; MI+vehicle: 6.19 ± 0.17 g, n=8; MI+CGEN-856S: 10.75 ± 0.13 g, n=9; MI+CGEN-857: 11.02 ± 0.24 g, n=7). Similar data were obtained for +dT/dt and -dT/dt. Additionally, both peptides significantly decreased the infarcted area when compared to the vehicle treatment (MI+vehicle: 23.68 ± 2.78 %, n=8; MI+CGEN-856S: 13.95 ± 4.37 %, n=9; MI+CGEN-857: 12.55 ± 2.24 %, n=7). Conclusão/Conclusion: These results show that the novel Mas agonists, CGEN-856S and CGEN-857, attenuate the postischemic heart failure in rats. In addition, these data further support a protective role of Mas in the cardiovascular system. Agradecimentos: CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (10/12 as 17:15hs - Silvia S. Quintão: [email protected])


Altered hypertension-induced activation of the nucleus tractus solitarius in juvenile and adult obese zucker rats

Guimaraes, PS(1,2), Campagnole-Santos, MJ(1), Schreihofer, AM(2)

(1) Department of Physiology and Biophysics, Federal University of Minas Gerais, Belo Horizonte, MG Brazil 31270-901; (2) Department of Physiology, Medical College of Georgia, Augusta, GA USA 30912.

Objetivo/Aim: We sought to determine if attenuated sympathetic baroreflexes in adult obese Zucker rats (OZR) could be explained by a reduced hypertension-induced activation of the nucleus of the solitary tract (NTS). Moreover, we evaluated if the activation of the NTS is normal in juvenile OZR, which have intact baroreflexes function. Métodos/Methods: Age-matched, juvenile (6 - 8 wks) and adult (14 - 20 wks) male, conscious lean Zucker rats (LZR) and OZR with indwelling arterial and venous femoral catheters received phenylephrine (PE; 0.5 mg/ml, 4.2 – 30 ml/min/90 min, i.v) to raise AP, or saline as a control infusion. Changes in mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) were measured for 90 min, and then rats were transcardially perfused with formaldehyde for histological analysis. Data were analyzed using Two-way ANOVA repeated measures or unpaired t-test, as required. Resultados/Results: Baseline MAP was higher in adult OZR (131 ± 1 vs LZR: 118 ± 2 mmHg) and in juvenile OZR (122 ± 3 vs LZR: 108 ± 1 mmHg). PE increased MAP (~ 40 mmHg) comparably in LZR and OZR. However, the fall in HR was markedly blunted in adult OZR (61 ± 9 vs LZR: 103 ± 8 beats/min), while it was similar in juvenile rats. Interestingly, the increase in AP evoked fewer Fos+ neurons in the intermediate NTS in adult OZR than in LZR (40 ± 5 vs 70 ± 5). In contrast, in juvenile OZR it evoked more Fos+ neurons than in LZR (64 ± 6 vs 38 ± 4). Saline evoked minimal and comparable Fos expression in the NTS of adult or juvenile LZR and OZR. Conclusão/Conclusion: These results show that in adult OZR there is an impaired ability of increased MAP to activate the NTS. Furthermore, despite the fact that baroreflex is normal in juvenile OZR, the NTS of these rats is overactive when stimulated by increased MAP. In conclusion, the altered function of the NTS in OZR may contribute to the observed attenuated baroreflex in these rats. Agradecimentos: CAPES (1203-09-6), NIHHL086759

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (10/12 as 16:45hs - Priscila da Silva Guimaraes: [email protected])


Antagonista não-peptídico do receptor MAS, AVE 0991, melhora parâmetros séricos de ratos alimentados com frutose Mario, EG; Cordeiro, LMS; Heringer, A; Moreira,CCL; Novais,MVM; Mendes, W; Santos, RAS; Botion, L.M.

Departamento de Fisiologia e Biofísica-ICB/UFMG.

Objetivo/Aim: Vários estudos demonstram que a administração de dietas ricas em frutose contribui para o desenvolvimento da resistência insulínica. Estudos anteriores mostram a participação da angiotensina-(1-7) no aumento da tolerância à glicose e sensibilidade insulínica. Entretanto, a participação do agonista não-peptídico da angiotensina-1-7 (AVE 0991), no metabolismo intermediário ainda não foi avaliada. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação deste agonista sobre parâmetros séricos de ratos tratados com dieta rica em frutose. Métodos/Methods: Foram utilizados ratos machos Sprague-Dawley com 5 semanas de idade. Os animais foram randomizados em quatro grupos: Grupo C: animais com dieta comercial (controle) tratados com veículo; Grupo CA: animais com dieta comercial tratados com AVE 0991 (gavagem na concentração 1mg/Kg);Grupo F: animais tratados com 10% de frutose na água de beber tratados com veículo;Grupo FA: animais tratados com 10% de frutose na água de beber tratados com AVE 0991 (gavagem na concentração 1mg/Kg). O teste oral de tolerância a glicose (OGTT) foi realizado em animais jejuados, através da administração por gavagem de solução de glicose (2g de glicose/Kg). A glicemia foi avaliada nos tempos 0 (se refere ao tempo antes da gavagem), 15, 30 e 60 minutos após a gavagem. Após o sacrifício o soro foi coletado para a dosagem de colesterol total, triacilglicerol (TAG) e ácidos graxos livres (AGL), utilizando kits enzimáticos e a concentração de insulina foi verificada por ELISA. Os tecidos foram pesados e normalizados com o peso corpóreo. Resultados/Results: O ganho de peso corporal, e os pesos do fígado e dos tecidos adiposos epididimal e retroperitoneal, a concentração de colesterol total, a glicemia jejum e no estado alimentado não foram diferentes entre os grupos. Entretanto os animais do grupo FA apresentaram uma diminuição da glicemia no tempo 15 minutos no OGTT. O tratamento com AVE 0991 diminuiu a concentração sérica da insulina (F 3,14±0,17 vs FA 2,22±0,17, p<0,01), AGL (F 0,707±0,02 vs FA 0,558±0,06) e TAG (F 163,9 ±18,18 vs FA 108,7 ± 11,65) em animais alimentados com frutose. Conclusão/Conclusion: O tratamento com o agonista não-peptídico da angiotensina-(1-7), AVE 0991 foi eficiente em reduzir alterações nas concentrações de insulina, AGL e TAG causado pela ingestão de dieta rica em frutose. Agradecimentos: CNPq, CAPES, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Erica Guilhen Mario: [email protected])


Increased leptin accounts for vascular hyporeactivity in a rat model of obesity induced by a palatable diet

Silva, JF(1); Mendes, VC(1); Rezende, BA(1); Capettini, LSA(1); Côrtes, SF(2); Coimbra, CC(1); Lemos, VS(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2)Departamento de Farmacologia ICB-UFMG.

Objetivo/Aim: Chronic consumption of a high-palatable diet induces obesity and vascular abnormalities. The aim of this study was to investigate the alterations in vascular function in a model of obesity induced by a palatable diet. Métodos/Methods: Wistar rats (4 weeks old) were fed either standard laboratory chow (controls) or a palatable diet (diet-fed) for 5 weeks. The gonadal and retro-peritoneal fat masses were dissected and weighted. Leptin plasma levels was measured by RIA kit. Vascular reactivity in aortic rings was assessed in an organ bath using isometric transducers. Nitric oxide (NO) was measured by fluorescence microscopy in aortas stimulated with acetylcholine. Endothelial and inducible NO synthase (NOS) expression were evaluated by Western blot. All experimental procedures were approved by the animal ethics committee of the Federal University of Minas Gerais (protocol # 226/08). Resultados/Results: Obese rats had improved relaxation to ACh and decreased contraction to phenylephrine (Phe) Decreased contraction was endothelium-dependent and reversed by inhibition of eNOS but not iNOS. The basal production of NO was increased in obese animals. Western blot showed increased levels of eNOS but not iNOS expression. Plasmatic level of leptin was increased in obese animals. Vessels from control rats pre-incubated with leptin also showed reduced contraction to Phe and increased relaxation to ACh. Conclusão/Conclusion: These data suggest that the alterations in vascular function observed in obese animals are due to an increase in NO production as a consequence of a rise in leptin levels. Agradecimentos: CAPES/CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (10/12 as 17:00hs - Josiane Fernandes da Silva: [email protected])


A influência do estado nutricional no recrutamento de leucócitos pelo encéfalo em modelo de inflamaçao sistêmica

induzida por LPS Lourenço, N., Bernardes D, Carvalho-Tavares, J. C.

Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia-Biofísica, ICB, UFMG

Objetivo/Aim: O objetivo do trabalho foi avaliar a influência do estado nutricional no recrutamento de leucócitos pelo encéfalo em modelo de inflamação sistêmica induzida por LPS. Métodos/Methods: Foram utilizados camundongos Swiss, machos, com três semanas de vida. Os estados nutricionais envolvidos no estudo foram obtidos com a privação alimentar de um dos grupos durante 24horas e a oferta para o outro grupo, durante oito semanas, de uma dieta hiperlipídica composta por dieta padrão alterada, contendo 35% de gordura animal. O peso dos animais e de ração consumida foi registrado uma vez por semana. O término do experimento se deu na décima primeira semana de vida dos animais. No último dia experimental os grupos representando o modelo de inflamação sistêmica receberam uma injeção i.p. de 2!g de LPS às 7:00 hs. Após seis horas da injeção, foi realizada a microscopia intravital. A microcirculação da pia-máter foi exposta por uma craniotomia e o número de leucócitos em rolamento/min e aderidos/área (100 um) foi determinado. Resultados/Results: Os animais mantidos em jejum por 24 horas apresentaram uma variação do delta de massa corporal de - 0,123%, perdendo ~ 4 gramas do peso inicial, com diferença estatisticamente significativa quando comparada a variação do delta de massa do grupo controle, que foi de 0,0115% p<0,001. A massa corporal do grupo controle apresentou diferença estatisticamente significativa da do grupo tratado com dieta hiperlipídica a partir da segunda semana de tratamento. A diferença final de massa entre os grupos foi estatisticamente significativa (7.15g ± 1.21; p<0,001). Ambos os grupos que não receberam injeção de LPS não apresentaram diferenças no número de leucócitos aderidos e rolando na microcirculação cerebral. Os animais mantidos em jejum que receberam LPS apresentaram uma redução estatisticamente significativa tanto na adesão (8,57±1,4), quanto no rolamento (3,33±1,4), quando comparados ao grupo controle LPS (adesão - 14,5±0,9/ rolamento – 9,0±1,2 p<0,05). Também houve redução estatisticamente significativa de adesão leucocitária encefálica nos animais que receberam a dieta hiperlipídica e LPS (19,7±1,4), quando comparados ao grupo controle LPS (29,3±1,4 p<0,05). Não houve diferença estatisticamente significativa entre o grupo tratado LPS e grupo controle LPS no rolamento de leucócitos, Conclusão/Conclusion: O estado nutricional influencia o recrutamento de leucócitos pelo encéfalo em modelo de inflamação sistêmica induzida por LPS. Agradecimentos: CAPES, FAPEMIG, Cnpq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Natália Lourenço de Almeida: [email protected])


Redução do Recrutamento de Neutrófilos na Artrite Induzida pelo Antígeno em Camundongos com Alergia Alimentar

N. V. Batista1, M. L. M. Noviello2, L. P. A. Dourado1, F. M. Coelho3, A. M. C. Faria3, M. M. Teixeira3, e D. C. Cara1

(1) Departamento de Morfologia, (2) Departamento de Patologia Geral, (3) Departamento de Bioquímica e Imunologia.

Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte

Objetivo/Aim: Antígenos da dieta podem ativar muitas células imunes no intestino e, se ocorre uma sensibilização, o contato com este antígeno induz consequências como a alergia alimentar. Sabe-se que a alergia alimentar pode interferir em algumas doenças. Além disso, estudos mostram uma relação entra a ingestão de alimentos e a gravidade da doença reumatóide. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a alergia alimentar interfere na artrite, utilizando-se modelos animais. Métodos/Methods: Camundongos BALB/c do grupo Experimental foram sensibilizados por via subcutânea (sc) com 10 µg OVA em Al(OH)3 no dia 0 e um reforço no dia 14 com o mesmo antígeno. Os outros dois grupos não foram sensibilizados com OVA (Controle e Artrite). Do dia 21 ao dia 35, todos os grupos foram alimentados com uma dieta de OVA. Além disso, no dia 21, o grupo Experimental e Artrite foram sensibilizados sc com 500 µg de albumina bovina metilada (mBSA) em adjuvante CFA. No dia 35, eles receberam 10 µg mBSA na cavidade articular. Estudos de microscopia intravital foram realizados para avaliar o rolamento e a adesão dos leucócitos na microcirculação sinovial. O acúmulo de neutrófilos foi medido pela sua contagem na cavidade sinovial e ensaio da atividade da mieloperoxidase (MPO) no tecido. Resultados/Results: O grupo Artrite apresentou um aumento de 19 vezes na adesão celular e de 6 vezes no rolamento, uma intensificação de 7 vezes da atividade de MPO e um recrutamento de leucócitos para a cavidade sinovial composta por 85% de neutrófilos. Quando a artrite foi associada com alergia alimentar, houve uma acentuada inibição da adesão celular em 73%, uma diminuição de 46% no nível de MPO e uma redução de 90% sobre o recrutamento de neutrófilos. Conclusão/Conclusion: Como o rolamento de leucócitos não foi alterado nos grupos Experimental e Artrite, e os demais parâmetros foram alterados, sugerimos que a alergia alimentar está interferindo na etapa de adesão da cascata de inflamação na microcirculação sinovial. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Nathália Vieira Batista: [email protected])


Pharmacological blockade of the CXCL-ELR+ chemokine / receptor CXCR2 axis accelerates wound closure in mice

Castro TBR(1), Canesso MCC(1), ALMEIDA BG(1), Colotta F(2), Bertini R(2), Proudfoot AEI(3), Andrade SP(1), TEIXEIRA MM(4), Barcelos L(1)

(1)ICB-UFMG, Belo Horizonte, MG, Brazil - Physiology and Biophysics; (2)Dompé Research and Development - Dompé S.p.A.; (3)Serono Pharmaceutical Research Institute - Merck Serono Geneva Research Centre, Geneva, Switzerland.;

(4)ICB-UFMG, Belo Horizonte, MG, Brazil; - Biochemistry and Immunology

Objetivo/Aim: The aim of this study was to evaluate the kinetics of skin wound healing in C57BL/6J mice and the effects of Evasin-3, a CXC-ELR+ binding protein isolated from salivary gland of the tick Rhipicephalus sanguineus, and Meraxin (DF2156A), a non-competitive allosteric inhibitor of CXCR2, on skin wound healing in mice. Métodos/Methods: Excisional wounds were created on the dorsum with the aid of a circular punch, removing the entire thickness of the skin. The area of the wounds was measured with the aid of a digital caliper for monitoring the closure of wounds. The activity of the enzymes myeloperoxidase and N-acetyl-glucosaminidase was used to indicate the accumulation of neutrophils and macrophages, respectively. Chemokine levels were quantified by ELISA assay. Animals received daily i.p. injection of Evasin-3 at doses of 40, 4 and 0.4 ug / kg or Meraxin (DF2156A) at doses 10, 1, 0.1 mg / kg and the control group received PBS vehicle. All treatment schedule started just after wounding and last until day 3 post surgery. The animals were sacrificed at different time points and their wounds collected for posterior analysis. All procedures described here had prior approval from the local animal ethics committee (CETEA-UFMG, license 254/08). Resultados/Results: In control animals, we observed peak of neutrophils at 12 hours after surgery, while the peak of macrophages occurred on day 3. The groups treated with Evasin-3 showed faster closure of wounds in all doses evaluated when compared with the control group. Any difference in neutrophil content or CXCL2 levels after the treatment with Evasin-3 was observed. Furthermore, animals treated with Meraxin also displayed faster closure of wounds when compared to control group, although only at lower doses. Conclusão/Conclusion: These data suggest that Evasin-3 accelerates wound closure in mice without affect neutrophil content or CXCL2 level. Likewise, Meraxin accelerates wound closure in mice. Experiments are being made in order to keep investigating the mechanisms responsible for these effects. In conclusion, pharmacological blockade of the CXCL-ELR+ chemokine / receptor CXCR2 axis accelerates wound closure in mice and may have therapeutical potential to treat non-healing wounds. Agradecimentos: Supported by CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Tiago Bruno Rezende de Castro: [email protected])


Local inflammation is essential for triggering neuroplastic changes which lead to hyperalgesia induced by sciatic nerve

constriction in rats Bastos, LFS(1); Medeiros, DC(1); Vieira, RP(2); Coelho, MM(3); Moraes, MFD(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofisica ICB-UFMG; (2) Departamento de Quimica ICEx-UFMG; (3) Departamento de

Produtos Farmaceuticos FaFar-UFMG

Objetivo/Aim: Neuroimmune interactions associated with the development of hypernociception in models of peripheral neuropathic pain have been widely studied. Nevertheless, the mechanisms by which neuropathic pain develops are poorly understood. Thus, we aimed to evaluate whether the local injection of the dexamethasone (DEXA; a potent anti-inflammatory, immunosuppressant drug), proximal to where the constriction of the nerve was performed, delays the development of thermal and mechanical hyperalgesia in rats. Métodos/Methods: Male Wistar rats (220-260 g) were used. Hargreaves test for thermal hyperalgesia was performed. Mechanical hyperalgesia was assessed by an electronic anesthesiometer. The chronic constriction injury (CCI) model of neuropathic pain was implemented by loosely tying 4 ligatures around the right sciatic nerve under isoflurane anesthesia. In order to evaluate the time-course for sensitization, thermal and mechanical sensitivity were measured every 2 days after operation for 15 days, starting at day 1, using naïve (non-operated), sham-operated (SO) and CCI rats (n = 5-7). Resultados/Results: CCI rats displayed significant hypersensitivity when compared with both naïve and SO groups at day 3 and 7, for thermal and mechanical stimuli, respectively. In a second experiment, rats were divided into 5 groups: SO-saline, SO-DEXA 250 µg/kg, CCI-saline, CCI-100 or 250 µg/kg. Saline or DEXA were injected via intraneural route between the two outermost ligatures. DEXA delayed the development of sensitization for both stimuli when compared with CCI-saline group (250 but not 100 µg/kg, n = 7-8). Conclusão/Conclusion: Since these doses are much lower than those typically used systemically in rats, the dose-dependent effect induced by DEXA is likely to be local. Moreover, due to its single injection at day 0, it is likely that DEXA is eliminated from the rat bodies before the time-point at which the shift in hyperalgesia development was observed. Altogether, results reinforce the evidence that inflammation at the site of nerve lesion is an essential trigger for neuroplastic changes which lead to hyperalgesia. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES, CNPq, PRPq-UFMG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Leandro Francisco Silva Bastos: [email protected])


Estudo da participação de serino-proteases e de receptores ativados por proteases (PAR) no recrutamento de leucócitos e

na produção de mediadores inflamatórios em pleurisia experimental

Gomides, L.F., Ferreira, R.G., Matsui,T.C., Klein, A.

Departamento de Fisiologia e de Farmacologia - ICB-UFMG

Objetivo/Aim: As serino-proteases atuam através de receptores acoplados à proteína G, PAR (protease-activated receptors). Existem 4 subtipos de PAR, presentes na membrana celular de plaquetas e leucócitos. Assim, surgem perspectivas quanto à estratégia farmacológica para o controle das ações de serino-proteases, e o sobre o seu papel em fenômenos biológicos, como a resposta inflamatória. Dessa forma, o objetivo desse estudo é avaliar a importância das serino-proteases tripsina e triptase, e da ativação de PAR-2/PAR-4 no recrutamento de neutrófilos e eosinófilos em modelo de pleurisia. Métodos/Methods: Animais: camundongos BALB/c fêmeas, com peso entre 25-30 gramas. Para as contagens total e diferencial das células presentes no exsudato inflamatório, 4 horas após a administração de Aprotinina, Carragenina ou Tripsina, os animais foram submetidos à eutanásia em câmara de CO2, e o lavado pleural obtido após injeção de 2 ml de PBS estéril nesta cavidade. Os lavados foram centrifugados (1200 rpm por 5 minutos), os sobrenadantes descartados e as células resuspendidas em 0.1 mL de PBS-albumina. 20 !l da solução de células resuspensas em PBS-albumina foram diluídos em 180 !l de solução diluidora de leucócitos (solução de Turk), e desta diluição retirada uma alíquota para a contagem em câmara de Neubauer. As lâminas para realização das contagens diferenciais dos tipos celulares foram feitas através da cito-centrífugação, sendo em seguida coradas com Giemsa/May-Grunwald. Foi padronizada uma dose baixa de carragenina, possível de controlar a resposta inflamatória com doses baixas de aprotinina e ao mesmo tempo avaliar a atuação dessa no recrutamento de células. Resultados/Results: A carragenina na dose de 30 !g/cav foi capaz de recrutar um número de leucócitos suficiente (60x104 neutrófilos/cav), Tukey (P<0,05), para permitir a avaliação da aprotinina, inibidor clássico de proteases. Observou-se que as concentrações de 0,01 !g/cav, 0,03 !g/cav, Turkey (P<0,05) e 0,1 !g/cav de aprotinina, Turkey (P<0,05) reduziram significativamente a migração de neutrófilo. Conclusão/Conclusion: Sugerimos que a aprotinina, como um inibidor clássico de proteases, participa do processo de ativação e recrutamento celular, envolvidos no processo inflamatório. Os próximos protocolos experimentais envolverão o estudo dessa via de inibição com antagonistas de PAR-2 e PAR-4, bem como inibidores de proteases. Agradecimentos: CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Lindisley Ferreira Gomides: [email protected])


Is there a involvement of endocannabinoid system in the peripheral antinociception of NSAIDs?

Resende,LC

Departamento de Fisiologia e de Farmacologia - ICB-UFMG

Objetivo/Aim: The aim of this work is to investigate the participation of endocannabinoid system in the peripheral antinociception effect of NSAIDs dipyrone, diclofenac and indomethacin. Métodos/Methods: The rat paw pressure test was used and hyperalgesia induced by intraplantar injection of prostaglandin E2. All drugs were administered locally into the right hind paw of Wistar male rats. We used the antinociceptive drugs, dipyrone, diclofenac and indomethacin, the antagonists of CB1 and CB2 receptors, AM251[N-(piperidin-1-yl)-5-(4-iodophonyl)-1-(2,4-dichlorophenyl)-4-methyl-1H-pyrazole-3-carboxamide] and AM630 [6-Iodo-2-methyl-1-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1H-indol-3-yl](4-methoxyphenyl)methanone], respectively. Resultados/Results: Dipyrone 40µg/paw, diclofenac 20µg/paw and indomethacin 40µg/paw, elicited a local peripheral antinociceptive effect. This effect was not antagonized by CB1-AM251(80µg) and CB2-AM630 (100µg) antagonists. Conclusão/Conclusion: The results provide evidences that the endocannabinoid system is not important for peripheral antinociceptive activity of NSAIDs dipyrone, diclofenac and indomethacin. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 10:00hs - Lívia Caroline Resende Silva: [email protected])


Skin wound healing in germfree mice *aCanesso, MCC; *aCastro, TBR; *aAlmeida, BG; #aVieira, AT; +Nicoli, RJ; *Andrade, SP; #aTeixeira, MM;

*aBarcelos, LS

aImmunopharmacology group, Departments of *Physiology and Biophysics, #Biochemistry and Immunology and +Microbiology, ICB-UFMG, Belo Horizonte, MG, Brazil.

Objetivo/Aim: Immune cells are involved in virtually every aspect of the wound repair process. Traditionally, is believed that a strong immune response, especially inflammation, is advantageous for wound healing, but the validity of this idea has been questioned. The commensal microbiota has been proposed to influence inflammation both inside and outside the gut. Here, we evaluated the kinetics of skin wound healing and compared the mechanisms of tissue repair in conventional (Cv) and germfree (GF) mice. Métodos/Methods: Excisional wounds were created on the dorsum with the aid of a 5-mm circular punch, removing the entire thickness of the skin. The area of wounds was measured with a digital caliper and the results were expressed as percentage closure relative to original size [1 (wound area)/(original wound area)x100]. Animals were sacrificed at days 1, 3, 7 and 14 after injury and their wounds collected for analysis. The activity of the enzymes myeloperoxidase and N-acetyl-b-D-glucosaminidase was used to indicate the accumulation of neutrophils and macrophages, respectively. Toluidine blue histological staining was used to quantify the number of mast cells at wound sites. Growth factor levels were quantified by sandwich ELISA assay. Resultados/Results: GF mice showed a significant improvement in percentage wound closure compared to Cv mice. Interesting, the basal number of macrophages and mast cells were higher in GF mice than Cv mice. Nevertheless, the number of macrophages in GF mice didn´t change. At day 1 after injury, neutrophils accumulated into wounds of GF mice were significantly lower than Cv mice. Similarly, wound VEGF levels in GF mice were higher and remaining stable till day 3, while in Cv mice, VEGF levels decreased from day 3. Conclusão/Conclusion: Our data suggest that skin wound healing is accelerated in the absence of commensal microbiota partially due to low accumulation of neutrophils at wound sites after tissue injury. Agradecimentos: Financial support: CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Maria Cecilia Campos Canesso: [email protected])


Evaluation of effects induced by nicotinic acid or nicotinamide on neutrophils migration induced by carrageenan or

leukotriene B4 in mice Ferreira, R.G.1; Gomides, L.F. 1; Matsui, T.C. 1; Godin, A.M. 2; Coelho, M.M2; Klein, A.1

(1) Laboratório de Inflamação e Dor - Departamento Fisiologia/Farmacologia - ICB - UFMG; (2) Laboratório de

Farmacologia - Departamento de Produtos Farmacêuticos - FAFAR - UFMG.

Objetivo/Aim: Nicotinic Acid and Nicotinamide, representatives of vitamin B3, act as precursors of NAD+ and NADP+, coenzymes that participate in important physiological processes. It has been demonstrated antinociceptive and anti-inflammatory effects of these compounds in different experimental models. Our aim was to investigate the effects induced by Nicotinic Acid or Nicotinamide on the recruitment of neutrophil induced by carrageenan or leukotriene B4 in an experimental model of pleurisy. Métodos/Methods: Male Balb/c mice (20-25g) were used. Solutions of Nicotinic Acid (150, 300 or 600mg/Kg) or Nicotinamide (250, 500 or 1000mg/Kg) were prepared in suspension of carboxymethylcellulose (0,5% W/V) with sodium chloride (0,9% w/v) immediately before each administration. The drug were given per os (p.o) on a volume of 8ml/Kg, 30 min before and 1h after administration of carrageenan (600!g/cavity) or leukotriene B4 (500ng/cavity). After an interval of 4h, mice were sacrificed and the pleural cavity was washed with 2ml PBS + albumin (3%) 1:1000. Lavage was centrifuged (100 x g, 4C0, 4 min.) and the precipitated was resuspended in albumin (3%). Aliquots of the resuspended material were used to total count (Neubauer chamber) and differential count (light microscopy) of leukocytes. Data were analyzed by one way ANOVA followed by Bonferroni post hoc test. Asterisk represents significance level compared to control group (*P<0,05; **P<0,01; ***P<0,001). Resultados/Results: Only the highest doses of the Nicotinic Acid (600mg/Kg) or Nicotinamide (1000mg/Kg) decreased the number of neutrophils/cavity after administration of carrageenan (P<0,05 and P<0,01 respectively) or leukotriene B4 (P<0,001). Conclusão/Conclusion: The results demonstrated the effects induced by Nicotinic Acid or Nicotinamide on neutrophils in a model of pleurisy induced by carrageenan or leukotriene B4. Further studies are necessary to define possible mechanisms involved in inhibition of leukocyte migration by these compounds, since this process recruits the participation of different mediators and receptors that can affect the process of migration, development and resolution of the inflammatory response. Agradecimentos: FAPEMIG (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais).

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Raphael Gomes Ferreira: [email protected])


Cannabinoid and opioid receptors activation induces peripheral antinociception by noradrenaline release and ?2C adrenoceptor

interaction Romero TRL(1); Duarte IDG(2)

Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG

Objetivo/Aim: The aim of this study was verified if cannabinoid and opioid agonists could induce the peripheral antinociception by noradrenaline release and $2 adrenoceptor activation. Métodos/Methods: The rat paw pressure test was used and hyperalgesia was induced by intraplantar injection of prostaglandin E2 (2 !g/paw). All drugs were administered locally into the right hind paw of Wistar male rats. Resultados/Results: CB1 and CB2 cannabinoid agonists, !, % and & opioid agonists elicited a local antinociception. The non selective $2 adrenoceptor antagonist and the selective $2C adrenoceptor antagonist inhibited the antinociceptive effect of all drugs used. The selective $2A-B-C adrenoceptor antagonists were ineffective at blocking the peripheral effect of this drugs. In addition depleting peripheral noradrenaline, it was verified a reduction (30-50%) of antinociceptive effect of all drugs tested and the noradrenaline reaptaker inibitor was able to potentiate the low doses of all analgesic drugs tested. Conclusão/Conclusion: The results provide evidences that cannabinoid and opioid agonists probably induce their peripheral antinociceptive effect by release of endogenous noradrenaline and selective activation of the ?2C adrenoceptors. Agradecimentos: Financial support: CNPq (473758/2007-5), FAPEMIG and fellowships from CNPq.

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Thiago Roberto Lima Romero: [email protected])


Administração de 2-araquidonoilglicerol (2AG) na Substância Cinzenta Periaquedutal Dorsolateral (SCPdl) de ratos promove

efeito ansiolítico Ortiz, NR(1); Rosa, LC(1); Almeida-Santos, AF(1); Gobira, PHN(1); Aguiar, DC(1)


Objetivo/Aim: Os receptores canabinoides (rCB1) são expressos em diversas regiões encefálicas relacionadas com a ansiedade, como a substância cinzenta periaquedutal (SCP). A administração do endocanabinoide anandamida intra-SCP dorsolateral exerce efeitos bifásicos em modelos animais de ansiedade, possivelmente devido à sua ação nos rCB1 e nos receptores vaniloides TRPV1. O objetivo deste trabalho foi verificar a hipótese de que a injeção do endocanabinoide, 2-araquidonoilglicerol (2AG) na SCPdl promoverá efeitos ansiolíticos em animais submetidos ao Labirinto em Cruz Elevado (LCE). Métodos/Methods: Ratos Wistar (n= 6/grupo) foram submetidos à cirurgia estereotáxica (coordenadas: AP-lambda 0 mm, L-1,9 mm, P-4,3 mm, ângulo-16º) para introdução da cânula guia (11 mm) dirigida à SCPdl. Após 7 dias os animais receberam a injeção (0,2 !l, a uma velocidade de 0.4!l/min) de veículo (salina) ou de 2-AG (5pmol, 50pmol, 500pmol) na SCPdl e 10 minutos após a injeção foram submetidos ao LCE por 5 minutos. Resultados/Results: A administração de 2AG (50pmol) aumentou significativamente o número de entradas nos braços abertos do LCE (veículo: 13,4 ±7,83; 2AG (50 pmol): 43,0 ±5,77; F(3,16)=2,004 p=0,1539 ; Duncan p<0,05 em relação ao grupo veículo), sugerindo o efeito tipo-ansiolítico. Não foram observadas diferenças entre os grupos no tempo de permanência nesse braço e no número de entradas nos braços fechados do LCE . Conclusão/Conclusion: Considerando-se que o 2AG é um endocanabinoide que não exerce efeito nos receptores de TRPV1, os resultados obtidos corroboram a hipótese de que a ativação dos receptores CB1 exerce efeitos ansiolíticos na SCPdl. Esse efeito não foi decorrente de alterações na atividade locomotora dos animais, pois não houve diferenças no número de entradas nos braços fechados do LCE. Agradecimentos: CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Natasha Ribas de Figueiredo Ortiz: [email protected])


Memória Social em Camundongos Knockdown para o Transportador Vesicular de Acetilcolina

Raslan, A.C.S., Gusmão I.D., Pereira, G.S.

Núcleo de Neurociências: Departamento de Fisiologia e Farmacologia, ICB-UMG.

Objetivo/Aim: Animais knockdown para o transportador vesicular de acetilcolina (VAChT KD) representam uma ferramenta para a elucidação da interação dos sistemas colinérgico e vasopressinérgico na formação da memória social. O objetivo deste trabalho foi avaliar a memória social de curta (MCD) e longa duração (MLD) em animais VAChT WT, VAChT KDhet e VAChT KDhom, bem como a imunopositividade para a vasopressina no PVN do hipotálamo. Métodos/Methods: Camundongos machos VAChT WT, VAChT KDHET e VAChT KDHOM foram avaliados na Tarefa de Reconhecimento Social. Os animais passaram por uma habituação de 30min, seguida de uma sessão de treino de 5min, com a apresentação de um camundongo juvenil durante 5min. Após 1h30min ou 24hs, foram realizados, respectivamente, os testes para avaliação da memória social de curta (MSCD) e de longa duração (MSLD), com a apresentação do mesmo indivíduo juvenil por 5min. Foram comparados os tempos de exploração durante as sessões de treino e de teste, e calculado o índice de reconhecimento social para cada grupo. Os cérebros dos animais foram coletados após perfusão com PBS/PFA 4% e fatiados a 40!m para realização da técnica de imunohistoquímica pelo método indireto de imunoperoxidase. Avaliou-se o número total de neurônios imunopositivos para a vasopressina e a porcentagem de área marcada na região magnocelular do PVN do hipotálamo. Resultados/Results: Todos os grupos dedicaram menor tempo de exploração durante os testes de MCD e de MLD, em relação aos respectivos treinos, pelo teste T pareado. Não há diferença entre os grupos nos índices de MCD e de MLD, bem como no número de células imunopositivas para vasopressina e quanto à porcentagem de área marcada na região magnocelular do PVN, pelo teste one way ANOVA com post-hoc de Dunnett. Conclusão/Conclusion: Animais VAChT KD apresentam memória social de curta e de longa duração intactas e o número de células vasopressinérgicas no PVN do hipotálamo destes animais é equivalente ao de animais VAChT WT. Diante destas observações, é possível afirmar que o sistema colinérgico não exerce papel fundamental sobre a memória social. Entretanto, mecanismos compensatórios ao déficit colinérgico e/ou queda na síntese de vasopressina, podem estar presentes nos animais VAChT KD. Agradecimentos: CAPES, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Ana Cláudia Schneider Raslan: [email protected])


O efeito do ambiente enriquecido sobre a memória social de longa duração em camundongos isolados socialmente

Monteiro, B.M.M. (1); Gusmão I.D. (1); Pereira, G.S.(1)

Núcleo de Neurociências, Programa de Pós Graduação em Ciências Biológicas, Departamento de Fisiologia, ICB, UFMG, Belo Horizonte, MG.

Objetivo/Aim: Avaliar o efeito do ambiente enriquecido sobre a memória social de longa duração, em animais isolados socialmente. Métodos/Methods: Camundongos da linhagem SWISS, machos, com 6 - 8 semanas de vida foram divididos em três grupos: animais que ficaram agrupados (3 a 5/gaiola) numa gaiola contendo apenas maravalha, água e ração (gaiolas padrão), animais que ficaram isolados em gaiolas padrão e animais que ficaram isolados em gaiolas enriquecidas (rolo de papelão, fitas, legos além de água e maravalha). Após uma semana (7 dias), esses animais passaram pela tarefa de reconhecimento social para avaliação da memória social de longa duração. Posteriormente, os animais que estavam em gaiolas padrão foram colocados em gaiolas enriquecidas e os animais que estavam em gaiolas enriquecidas foram colocados em gaiolas padrão. Após essa segunda semana, foi realizado novamente o teste de reconhecimento social para avaliação da memória social de longa duração. Os dados foram analisados atraves de Teste-t de Student pareado e a análise de variância (ANOVA) de 1 via, quando mais de dois grupos estavam presentes. Os valores estão expressos como média e desvio padrão. Resultados/Results: Os animais agrupados e isolados por 1 semana em ambiente enriquecido lembram do intruso 24 horas após a primeira exposição, quando se compara o tempo de exploração no treino (TR) com o tempo de exploração no teste (TT). Entretanto, os animais isolados por 1 semana em gaiolas padrão, não lembram, não havendo diferença estatisticamente diferente entre o tempo de exploração no TR e no TT. Também não houve diferença estatística quanto ao tempo de exploração no TR e no TT, para os animais que na segunda semana de isolamento estavam em gaiolas padrão ou enriquecidas. Conclusão/Conclusion: O ambiente enriquecido foi capaz de preveni o déficit de memória social gerado pelo isolamento de 7 dias, no entanto, esse efeito de prevenção parece não durar por mais 7 dias quando o estímulo é removido. Também foi verificado que o ambiente enriquecido, aplicado na segunda semana de isolamento não foi capaz de reverter o déficit de memória social de longa duração nos animais isolados na primeira semana em gaiolas padrão. Agradecimentos: CAPES, CNPq e FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Brisa Marina de Meireles Monteiro: [email protected])


Hippocampal cell damage in mice with cholinergic hypofunction is gender-dependent and genotype-independent

Gonçalves, D.F. (1), Prado, V. F. (2); Prado, M. A. M. (2); Schenatto, G. P.(1), Massensini, A. R.(1)

(1) Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Brazil; (2) Robarts Research Institute and University of Western Ontario, Canada.

Objetivo/Aim: Gender-specific responses are studied in different models of cerebral injuries. Female mice in the proestrus phase of the normal estrous cycle have shown lower cell damage than male mice when both groups were submitted to oxygen and glucose deprivation. This sexual-dependent difference seems to be attributed to female hormones levels. This work evaluated cell damage in hippocampal slices of mice with cholinergic hypofunction for both genders submitted to cerebral ischemic insults in vitro. Métodos/Methods: Homozygous knockdown mice for the vesicular acetylcholine transporter (KDHOM VAChT) and wild type (WT) mice were divided in four groups: female group WT (n=4) and KDHOM VAChT (n=5); male group WT (n=4) and KDHOM VAChT (n=4). Female mice were sacrificed in the proestrus phase. Hippocampus were dissected out and divided in two sets: control condition, not oxygen and glucose deprivated (NOGD), and in vitro ischemic condition, oxygen and glucose deprivated (OGD). Ischemic slices were submitted to 20 minutes of oxygen and glucose deprivation and 4 hours of reperfusion with oxygen and glucose. Then, slices were labeled with ethidium homodimer to evaluate cell death and analyzed in a fluorescent microscope. Data were expressed as mean ± sem, and analyzed using two-way ANOVA. Resultados/Results: There was no statistical difference between KDHOM VAChT and WT mice for cell damage after ischemia (p > 0.05). However, male animals (KDHOM VAChT: 24.8 ± 1.2%; WT: 24.7 ± 1.3%) were more susceptible to cerebral ischemia than female mice (KDHOM VAChT: 16.3 ± 3.4%; WT: 15.1 ± 1.4%; p<0.01). Conclusão/Conclusion: Female mice are less susceptible to cerebral ischemia than male mice in both genotypes evaluated. These data suggest that, at least in the animal and experimental models utilized here, the cholinergic hypofunction did not abolish the neuroprotective effect of female hormones. Furthermore, it has to be considered that not all female hormones effects are mediated by cholinergic system. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Daniela Fontes Gonçalves: [email protected])


Padronização de lipossomas contendo GABA para utilização em estudos funcionais do sistema nervoso central Vaz, GC; Bahia APCO; Carvalho, A; Santos, RAS; Moreira, F; Frézard, F; Fontes, MAP

Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB - UFMG

Objetivo/Aim: Lipossomas são vesículas lipídicas esféricas, que isolam o meio aquoso interno do externo. São sistemas versáteis que permitem a liberação sustentada de fármacos encapsulados por eles. O GABA é o neurotransmissor inibitório mais prevalente no sistema nervoso central. Evidências sugerem seu envolvimento em diversas patologias, dentre elas transtornos de ansiedade. O objetivo do presente estudo foi padronizar a técnica de encapsulação de GABA em lipossomas e testá-los no comportamento típico de ansiedade. Métodos/Methods: Lipossomas foram preparados a partir de uma composição lipídica contendo fosfatidilcolina e colesterol. Após formação do filme lipídico, este foi hidratado com solução de GABA 0,3M ou salina 0,9%. Os lipossomas foram submetidos à extrusão em membranas de policarbonato com poros de diâmetro de 200 nm, para calibração do seu tamanho. A separação do GABA não encapsulado nos lipossomas foi feita através de diálise por 24 horas. Para caracterização dos lipossomas, foi determinada a taxa de encapsulação e realizado teste de estabilidade para avaliar a liberação de GABA ao longo do tempo (9 dias) a 37°C, ambos por fluorimetria. O tamanho do lipossoma foi medido através do espalhamento dinâmico de luz no equipamento Zetasizer. Para testar a viabilidade dos lipossomas, ratos Wistar receberam cânula-guia no ventrículo lateral através de estereotaxia. Após 5 dias de recuperação foi feita a microinjeção intracerebroventricular (ICV) de lipossomas (2µL) contendo GABA (n=5) ou salina (n=6). 48 horas após, os animais foram submetidos ao labirinto em cruz elevado. Resultados/Results: Lipossomas contendo GABA apresentaram taxa de encapsulação de aproximadamente 30% e tamanho médio de 195,4 nm. Lipossomas de salina apresentaram tamanho médio de 198,4 nm. O estudo de estabilidade demonstrou uma taxa de liberação do GABA de 2% a 4% após 48 horas. Quando submetidos ao labirinto em cruz elevado, animais que receberam microinjeção de lipossomas contendo GABA no ICV apresentaram aumento no tempo de permanência nos braços abertos quando comparados ao controle (17±5 vs. 6±2, p<0,03). Conclusão/Conclusion: Lipossomas contendo GABA apresentaram uma taxa de encapsulação e liberação satisfatórias. Animais que receberam lipossomas de GABA no ICV apresentaram comportamento ansiolítico quando submetidos ao labirinto em cruz elevado. De acordo com os resultados apresentados, os lipossomas contendo GABA encapsulado apresentam características adequadas para serem utilizados como uma ferramenta para estudos funcionais no sistema nervoso central. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 09:45hs - Gisele Cristiane Vaz: [email protected])


Terapia com células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo em modelo animal de epilepsia de lobo temporal

Rezende, GHS(1); Medeiros, DC(1); Moraes, MFD(1)


Objetivo/Aim: Avaliar se a implantação de CTMs seria capaz de diminuir os efeitos deletérios provocados pela indução do status epilepticus pela administração de pilocarpina, no modelo animal de epilepsia de lobo temporal sobre aspectos funcionais e morfológicos. Métodos/Methods: Um grupo de ratos foi submetido à injeção de pilocarpina (320mg/Kg) para induzir o modelo de epilepsia de lobo temporal e após o período de 24 horas, foi submetido à cirurgia para enxerto de células tronco mesenquimais intracerebroventricular (1.000.000 células na concentração de 100.000 céls/!L). Trinta e cinco dias pós-SE, os ratos foram submetidos a testes de aprendizado e memória. Os ratos foram monitorados através de sistema de vídeo por um período de 6 horas por dia durante 5 dias aos 40 dias após status epilepticus para a avaliação das crises recorrentes espontâneas. Posteriormente foi realizada a técnica marcação histoquímica de Neo-Timm para a detecção e quantificação do brotamento das fibras musgosas. Resultados/Results: A quantidade de crises recorrentes espontâneas, em um período de registro de 30 horas, 6 horas por dia durante 5 dias consecutivos, foi menor no grupo Pilo Enxerto ICV (3,37+-1,051) quando comparado ao grupo Pilo (10,75+-2,176), pelo teste t não pareado. A análise densitométrica mostrou que o brotamento das fibras musgosas do grupo Pilo Enxerto ICV (21,83+-3,928) foi menor que o grupo Pilo Controle (56,83+-4,116), comparado pelo teste t não pareado. Os resultados estão expressos como média ± EPM. Não houve diferença estatística no teste de reconhecimento de objetos. Conclusão/Conclusion: O enxerto de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo por via i.c.v. 24 horas após o SE, promoveu um menor número de crises recorrentes espontâneas quando comparado ao grupo que foi induzido ao SE sem enxerto das células-tronco. Da mesma forma, encontramos um menor brotamento das fibras musgosas na camada supra-granular do hipocampo no grupo que recebeu o enxerto das células-tronco após o SE. No entanto não foi observada nenhuma melhora no déficit cognitivo encontrado nos animais submetidos ao SE produzido pelo enxerto de células tronco intracerebroventricular. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 16:45hs - Gustavo Henrique de Souza e Rezende: [email protected])


Changes in gadolinium uptake after tityustoxin: a whole brain MRI study

Guidine, PAM(1); Gonçalves, DF(1); Mesquita, M(3); Cash, D(3); Massensini, A(1); Moraes-Santos, T(2); Williams, S(3); Moraes, M(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG; (2) Faculdade de Farmácia, UFMG; (3) Kings College London, UK

Objetivo/Aim: Envenomation with TsTX causes symptoms such as cardiac arrhythmias, lung edema and neurologic alterations, and these effects are manifested more severely in young children. Given that children have a more permeable blood brain barrier (BBB), the aim of the current study was to evaluate the BBB permeability by MRI in weanling rats inoculated with TsTX. Métodos/Methods: We used gadolinium-based (Gd) contrast-enhanced magnetic resonance imaging (MRI) to compare 13 weanling (21 day-old) and 13 adult (60 day-old) male Wistar rats. Animals were kept under isofluorane anesthesia during acquisition of whole brain T1-weigthed scans (with and without iv Gd) before and after sc injection of saline or TsTX. Physiologic parameters were monitored throughout the experiment. Statistical parametric maps (spm’s) of differences between adult and young rats were created with SPM5. Resultados/Results: Spm’s showed larger areas of gadolinium uptake in the brains of weanling rats injected with saline when compared with adults, especially near the forth ventricle. Nevertheless, TsTX injection decreased the difference in Gd uptake between weanling and adult rats, suggesting that this toxin affects the Gd entrance into the brain by either changing the permeability of the BBB or the tissue perfusion. Conclusão/Conclusion: Experiments evaluating cerebral perfusion are crucial for furthering our understanding of the central effects of scorpion toxins and may well play a fundamental role in defining the most efficient therapeutic approaches, especially in infant subjects. Agradecimentos: CAPES, FAPEMIG, CNPq, PRPq-UFMG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Patricia Alves Maia Guidine: [email protected])


Efeito do canabinóide WIN 55,212-2 no labirinto em t elevado, um modelo animal de ansiedade

Gobira,PHN(1); Moreira FA(1)


Objetivo/Aim: O labirinto em T elevado (LTE) é um modelo animal que avalia dois comportamentos relacionados a transtornos de ansiedade: a esquiva no braço fechado, relacionada à ansiedade generalizada, e o escape do braço aberto, relacionado ao pânico. O objetivo do presente estudo foi o de testar a hipótese de que agonista canabinoide WIN 55,212-2 induziria efeito tipo-ansiolítico neste modelo. Grupos independentes de animais foram submetidos ao teste do campo aberto (CA) para avaliar a locomoção. Métodos/Methods: Ratos Wistar com peso entre 200 e 300g receberam injeções I.P. de veículo (etanol, cremofor e salina 1:1:18) ou WIN 55,212-2 (0,1/0,3/ 1,0mg/kg). Após 30 minutos foram submetidos ao LTE (n=5/grupo) ou ao CA (n=4-5/grupo). Antes de serem submetidos ao labirinto, os animais foram habituados ao experimentador por 3 dias. No quarto dia cada animal foi pré-exposto por 30 minutos a um dos braços abertos. O teste foi realizado no quinto dia e nele cada animal foi submetido a três sessões partindo da extremidade do braço fechado e três sessões partindo da extremidade do braço aberto ao qual o animal havia sido pré-exposto. Cada sessão se encerrava assim que o animal atingisse o centro do labirinto. Após 30 segundos, ele era novamente exposto. A locomoção de cada animal foi registrada por 10 minutos no CA. Os dados foram analisados por ANOVA de duas vias seguida de teste de Bonferroni. Um valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados/Results: Houve efeito dos fatores droga [F(3,16)=5,68, p=0.0084] e sessão [F(3,16)= 29,70, p<0.0001], com uma tendência à interação entre eles [F(3,16)=2,32, p=0,058]. A análise post-hoc mostrou que as doses de 0,1 e 0,3 mg/kg diminuiram o tempo de latência para saída do braço fechado na terceira exposição, sugerindo um efeito tipo-ansiolítico. Não houve efeitos sobre o tempo de escape do braço aberto ou a atividade locomotora. Conclusão/Conclusion: A diminuição da esquiva inibitória sugere um efeito tipo-ansiolítico do WIN 55212-2 nas dose de 0.1 e 1 mg/kg, corroborando resultados obtidos no labirinto em cruz elevado. Os próximos objetivos são aumentar o tamanha das amostras e verificar o envolvimento de receptores CB1 neste efeito. Agradecimentos: CAPES / FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Pedro Henrique Gobira Nunes: [email protected])


Ação promnésica da ingestão crônica de café em ratos adultos ABREU, RV(1-2); SILVA-OLIVEIRA, EM(2); PEREIRA, GS(1); MORAES-SANTOS, T(2)

(1)Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG; (2)Laboratório de Nutrição

Experimental, Departamento de Alimentos, FAFAR-UFMG

Objetivo/Aim: O café é uma bebida de grande popularidade, consumida mundialmente. Estudos epidemiológicos sugerem que o consumo de café favorece os processos cognitivos. Além disso, pesquisas têm demonstrado que a cafeína, um dos principais constituintes do café, possui efeitos na estimulação do sistema nervoso central e da atividade motora e na melhora da performance cognitiva. O presente estudo teve como objetivo investigar o efeito do consumo crônico de café sobre processos cognitivos em ratos adultos. Métodos/Methods: O teste de campo aberto foi realizado para verificar a atividade exploratória e locomotora dos animais, bem como a memória não-associativa de habituação. A avaliação da memória foi realizada pelo teste de reconhecimento de objetos (preferência por novo objeto). Para isso, cinco grupos de ratos foram utilizados: grupo controle (GC), alimentado com dieta controle, composta de ração para ratos enriquecida de 20% de ração para cães; grupo café 3% (G3%), alimentado como o GC, mas com dieta adicionada da mesma quantidade de extrato de café a 3% e a massa secada até o peso original; grupo café 6% (G6%), alimentado como G3%, mas com de extrato de café a 6%; grupo cafeína 0,04% (G0,04%), alimentado com dieta controle suplementada com 0,04% de cafeína e grupo cafeína 0,08% (G0,08%), alimentado com dieta controle suplementada com 0,08% de cafeína. Resultados/Results: A ingestão crônica de café na dieta, de modo similar à de cafeína, melhorou a memória de longo prazo dos animais no teste de reconhecimento de objetos, o que não foi acompanhado de um aumento na atividade exploratória e locomotora dos animais. Conclusão/Conclusion: Os dados obtidos indicam que o consumo de café ao longo da vida dos animais exerceu função promnésica, podendo ser apontado como um alimento protetor contra o declínio cognitivo normal que ocorre ao longo da vida adulta e em especial, em desordens neurodegenerativas como a Doença de Alzheimer. Agradecimentos: CAPES, CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Renata Viana Abreu: [email protected])


Restrição maternal de tiamina induz, na prole, alterações motoras e gabaérgicas centrais que persistem na idade adulta

Ferreira-Vieira, TH (1); Freitas-Silva, DM (2); Pereira, SRC; Ribeiro, AM (2)

(1) Programa de Pós-Graduação em Neurociências ICB-UFMG; (2) Departamento de Bioquímica e Imunologia ICB-UFMG; (3) Faculdade de Filosofia e Ciências Humanas FaFiCH-UFMG.

Objetivo/Aim: Considerando a importância da tiamina para o desenvolvimento cerebral e funções motoras, o objetivo do estudo foi investigar os efeitos da deficiência parcial de tiamina, durante o período perinatal, na motricidade e nas concentrações de ácido gama-aminobutírico (GABA) e glutamato, em diferentes estruturas do sistema nervoso central da prole na idade adulta. Métodos/Methods: Vinte ratos Wistar machos (437±41 gramas) foram utilizados, sendo: dez provenientes de mães alimentadas ad libitum (Mães Controle - grupo MC) e outros dez de mães alimentadas com dieta restrita (10% em relação ao controle) em tiamina (Mães Restrita - grupo MR) durante o período perinatal. Todos os animais foram submetidos a testes comortamentais (rotarod e teste de impressão das patas) para análise do comportamento motor (equilíbrio, coordenação motora e marcha). Após os testes comportamentais os animais foram mortos por decapitação e o cerebelo, tálamos e medula espinhal foram retirados para análise da concentração de GABA e glutamato por cromatografia líquida (HPLC: High Performance Liquid Chromatography). Resultados/Results: A restrição de tiamina reduziu a latência dos animais no rotarod e aumentou a largura do passo. Além disso, afetou as concentrações de glutamato no cerebelo e GABA no tálamo. Houve correlação entre a latência no rotatod e a concentração de GABA no tálamo, bem como entre a média da largura do passo e as concentrações de GABA no tálamo e cerebelo para os animais do grupo controle. Para os animais do grupo restrito houve correlação entre o comprimento do passo e a concentração de GABA no cerebelo. Conclusão/Conclusion: Os resultados obtidos indicam que os circuitos GABAérgicos no tálamo são importantes em aspectos relacionados à função motora e que a restrição maternal de tiamina durante estágio precoce do desenvolvimento pode induzir déficits motores e alterações neuroquímicas, na prole, que persistem em períodos posteriores da vida. Agradecimentos: FAPEMIG/Capes/CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Talita Hélen Ferreira e Vieira: [email protected])


Estudo das memórias relacionadas ao medo e extinção em animais nocautes para o receptor Mas

Lazaroni, TLN(1) ; Santos, RAS(2) ; Pereira, GS(1)

(1) Núcleo de Neurociências do Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG ; (2) Laboratório de Hipertensão Bioquímica do Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG

Objetivo/Aim: O SRA, além de regular a pressão de fluidos corporais, também atua, através principalmente das ang II e (1-7) na regulação do comportamento animal agindo diretamente no SNC. Estudos mostram que tais peptídeos modulam a LTP, LTD, ansiedade e memória. Animais MasKo apresentam maior LTP, mostram-se mais ansiosos, porém há pouca caracterização sobre a memória destes animais. Diante disso, nosso objetivo é estudar o efeito da deleção do receptor Mas sobre a memória de condicionamento ao medo (CM), esquiva inibitória (EI) e a extinção destas memórias. Métodos/Methods: Animais machos, adultos, FVB/N WT e MasKo foram submetidos as seguintes tarefas: 1) CM: Animal é colocado em uma caixa fechada com o assoalho de barras metálicas e é habituado por 2min ao ambiente, depois um som de 80dB a 1KHz é dado por 30s, sendo que nos últimos 2s o som é pareado com choque de 0.7mA. 24h depois o animal é testado na mesma caixa (contexto) e depois em outra caixa recebendo apenas o som (dica). A resposta é medida em n. de freezings. Na extinção submete-se o animal por 2 dias seqüenciais apenas ao som. 2) EI - Animal é colocado sobre uma plataforma que encontra-se nas extremidade de uma caixa de acrílico. O assoalho consiste em barras metálicas paralelas. Quando o animal desce da plataforma e pisa com as 4 patas no gradil, recebe um choque de 0.3mA por 2s, e é imediatamente removido da caixa. Nas sessões de teste, 1.5h (MCD) e 24h (MLD) pós-treino, o animal é colocado novamente sobre a plataforma e mediu-se o tempo de descida (latência), porém na ausência de choque. A extinção foi medida colocando o animal em dias seqüentes sobre a plataforma e quando ele descia ao gradil não recebia choque, mas era retirado da caixa. Resultados/Results: Na EI os MasKo (n=12) e WT (n=17) apresentaram MCD e MLD intactas (Teste T: WT Tr x MCD P<0.05 e Tr x MLD P< 0.01; MasKo Tr x MCD ou MLD P<0.001). WT aumentam a latência e extinguiram a partir do 4ºdia (Anova1via posthoc Bonferroni P=0.002), já os MasKo mantém a latência e não extinguiram (P<0.001). No protocolo de CM (WT n= 8, MasKo n=8) a % freezings imediato não diferiu (P=0.2186), porém os MasKo apresentaram maior % freezings no teste contextual e de dica do que os WT (P=0.0142 e P=0.0426). MasKo e WT extinguiram a memória de CM a partir do primeiro dia (Ambos P<0.0001 Anova1via posthoc SNK). Conclusão/Conclusion: MasKo não apresentam déficits na EI. Já no CM apresentam mais episódios de freezings tanto no teste contextual quanto no de dica. A extinção da memória de CM está preservada, porém está prejudicada na EI. Nossa hipótese é que a extinção destas duas memórias recruta diferentes substratos neurais. Na extinção da EI, o hipocampo e a amígdala estão envolvidos, já no CM há recrutamento de cortex pré-frontal e amígdala. Estudos prévios nossos sugerem que o hipocampo nos MasKo pode ser substrato de outros déficits de memória apresentados por estes animais. Agradecimentos: CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 16:00hs - Thiago Luiz do Nascimento Lazaroni: [email protected])


Existe um sistema que funciona de acordo com o modelo de Jeffress nas vias auditivas de mamíferos?

Jorge, VO(1); Kushmerick, C(2)

(1) Especialização em Neurociências e Comportamento, ICB-UFMG; (2) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Diversos modelos têm sido propostos com o intuito de determinar os mecanismos neurais da localização de uma fonte sonora. Um dos mais relatados na literatura é o de Jeffress (1948), que enfatiza a detecção de coincidências temporais das entradas excitatórias de ambas as orelhas. Assim, o objetivo deste trabalho é descrever, se há ocorrência deste sistema em mamíferos, expondo dificuldades auditivas de indivíduos surdos unilaterais e práticas terapêuticas que contribuem para a neuroplasticidade. Métodos/Methods: Foi realizada uma busca detalhada de artigos científicos nas principais bases de dados: Scientific Electronic Library Online, Latin American and Caribbean Health Sciences, The Cochrane Library, International Database for Medical Literature e PubMed Central, durante o período de março a setembro de 2010 utilizando-se as palavras-chave Jeffress model e unilateral deafness. Desta forma, foram selecionados artigos que contemplavam o objetivo desta pesquisa, com data de publicação entre os anos de 1948 a 2010. Resultados/Results: Entradas excitatórias bilaterais chegam à oliva superior medial responsável por comparar a diferença de tempo interaural (DTI); corroborando ao modelo de Jeffress. Porém, além de excitação, há necessidade de inibição decorrente do núcleo medial do corpo trapezóide. Surdos unilaterais apresentam dificuldade em localizar sons, pois não há comparação acústica binaural. A utilização de aparelhos auditivos, aparelhos auditivos ancorados ao osso e implantes cocleares contribuem para bons prognósticos. Conclusão/Conclusion: O modelo de Jeffress constitui importante base para a compreensão dos mecanismos neurais envolvidos na localização de uma fonte sonora. Contudo, coincidências de entradas excitatórias bilaterais são insuficientes para explicar satisfatoriamente a seletividade dos neurônios para realizar DTI. Indivíduos com surdez unilateral apresentam dificuldade em localizar sons, mas pode ocorrer melhora devido à neuroplasticidade decorrente de práticas terapêuticas específicas. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Vivian Oliva Jorge: [email protected])


Efeito neuroprotetor do treinamento físico sobre o estresse oxidativo em fatias cerebrais submetidas à privação de

oxigênio e glicose Leite, HR(1); Drumond, LE(1); Ferreira-Vieira, TH(1); Mourão, FAG(1); Bernardes, D(1); Viana, R(1); Silva,

JF(1) Lemos, VS(1); Pereira, GS(1); Tavares, JC(1); Massensini, AR(1)


Objetivo/Aim: Avaliar o efeito neuroprotetor do treinamento físico sobre o estresse oxidativo em fatias corticais e hipocampais em modelo de privação de oxigênio e glicose. Métodos/Methods: Os animais foram divididos em dois grupos, definidos como grupo treinado (TRE) (n=18) e grupo sedentário (SED) (n=19). O grupo TRE foi submetido a um protocolo de natação 5x/semana, 30 min./dia, durante 8 semanas, com intensidade de treinamento moderado (60% da carga máxima). Após o término do protocolo de treinamento os animais foram decapitados, e os córtices cerebrais e os hipocampos rapidamente removidos, fatiados numa espessura de 400 !m, e randomicamente divididos em fatias: grupo SED e TRE, que foram privadas (POG) ou não de oxigênio e glicose (nPOG). Os seguintes parâmetros foram avaliados: níveis de glutamato, LDH, nitrito (NO2-), viabilidade celular, atividade da superóxido dismutase (SOD) e peroxidação lipídica (TBARS). Para a análise estatística utilizou-se ANOVA two-way, post hoc SNK. Os resultados foram expressos como erro padrão da média (± EPM), e nível de significância p<0,05. Resultados/Results: Houve uma redução da morte celular nas fatias corticais TRE POG (92.64 ± 19.18), e hipocampais TRE POG (183,4 ± 46,84), bem como menores níveis de glutamato no TRE POG (2.26 ± 0,31), neste último. Em relação aos níveis de NO2- houve uma diminuição apenas das fatias corticais TRE POG (1,0 ± 0,28), e aumento per si do exercício sobre à atividade da SOD cortical nPOG (0.10 ± 0.22). O exercício não alterou a atividade da SOD hipocampal e os níveis de TBARS. Conclusão/Conclusion: O treinamento físico foi capaz de induzir uma neuroproteção no córtex cerebral e hipocampo submetido à POG. Observou-se uma redução dos níveis de NO2- apenas nas fatias corticais TRE. A excitotoxicidade avaliada pela liberação de glutamato foi menor apenas nas fatias hipocampais POG TRE. Entretanto a avaliação do status antioxidante foi estatisticamente maior no córtex quando comparado ao hipocampo, embora o exercício não tenha alterado o perfil da lipoperoxidação nestes dois substratos avaliados. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES, CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Hércules Ribeiro Leite: [email protected])


Chronic swimming training alters NCS1 (neuronal calcium sensor 1) expression in hippocampal but not in cortical slices

submitted to oxygen and glucose deprivation DRUMOND, L. E.1; LEITE, H. R.1; MOURÃO, F. A. G.1; REIS, H. J.2.; PEREIRA, G. S. ; MASSENSINI, A.

R.1

(1) Núcleo de Neurociências (NNC), Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG, Brazil. (2) Laboratório de Neurofarmacologia, Departamento

de Farmacologia, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG, Brazil

Objetivo/Aim: Investigate the NCS1 expression in hippocampal and cortical slices of animals submitted to physical activity and oxygen and glucose deprivation. Métodos/Methods: Wistar rats were divided in two groups: exercise group (swimming training) and sedentary group. The Exercise group was trained 5 times per week, 30min per day, during 8 weeks, with a moderate intensity. After the animal was submitted to euthanasia, both hippocampus and cortex were dissected out and divided in two sets: control condition, not oxygen and glucose deprivated (NOGD), and in vitro ischemic condition, i.e., oxygen and glucose deprivated (OGD). The ischemic slices were submitted to 20min of oxygen and glucose deprivation and 4h of reperfusion with oxygen and glucose. Then, slices were homogenized in a lysis buffer and used to measure NCS1 by immunoblot. The actin was used as protein loading control. Data were expressed as mean ± SEM, and analyzed by student t- test. Resultados/Results: There was no difference in NCS1 expression in cortex of the control NOGD slices (Sedentary: 1.49±0.12 n=6; Exercise: 1.44±0.13 n=4) and OGD slices, (Sedentary: 1.49±0.08 n=6; Exercise: 1.52 ± 0.08 n=5; p>0.05). However, in the hippocampus the expression of NCS1 in exercise NOGD group (1.67± 0.14 n=3) was significantly higher (p<0.05) than in sedentary NOGD group (1.16± 0.07 n= 5). Conclusão/Conclusion: NCS1 expression was increased in the hippocampus of animals submitted to physical activity when compared with sedentary control group. This result indicates that NCS1 is associated with the pathway involved in synaptical plasticity and neuroprotection. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Luciana Estefani Drumond de Carvalho: [email protected])


Mecanismos neuroprotetores do exercício físico envolvendo a liberação de glutamato e a apoptose celular

MOURÃO, FAG(1), LEITE, HR(1), DRUMOND, LE(1), VIEIRA, THF(1), MEDEIROS, DC(1), ANDRADE, ILL(2), PEREIRA, GS(1), MORAES, MFD(1), MASSENSINI, AR(1)

(1) Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Centro Universitário de Belo

Horizonte. Departamento de Ciências Biológicas, Ambientais e da Saúde, Uni-BH

Objetivo/Aim: Analisar os mecanismos neuroprotetores do exercício físico, envolvendo a liberação de glutamato e a apoptose celular, após privação de oxigênio e glicose (isquemia in vitro), em fatias cerebrais de ratos submetidos a um programa crônico de exercício de natação. Métodos/Methods: Os animais foram divididos em dois grupos: exercício e sedentário. O grupo exercício foi submetido à natação, durante 8 semanas, enquanto o grupo sedentário foi exposto as mesmas condições experimentais, mas sem realizar esforço físico algum. No decorrer e no final do período de exercício, foram avaliados tanto as características adaptativas ao esforço, como o estado emocional/estresse e aprendizado/memória dos animais. Ao final das avaliações das características adaptativas e fisiológicas, fatias cerebrais destes animais foram submetidas a um protocolo de privação de oxigênio e glicose, para análise do glutamato liberado, a expressão de proteínas apoptóticas como caspase-3, -8, -9 e AIF, além da análise da viabilidade celular. Resultados/Results: De acordo com os nossos resultados os animais apresentaram uma resposta adaptativa significativa e benéfica ao protocolo proposto. Após o insulto isquêmico a liberação de glutamato e a expressão de proteínas apoptóticas apresentaram-se significativamente menores para o grupo exercício, comparado ao grupo sedentário, além de uma viabilidade celular significativamente mais alta para o primeiro grupo. Conclusão/Conclusion: Nossos resultados corroboram com a literatura a respeito dos efeitos benéficos e protetores do exercício físico, demonstrando possíveis vias que adaptativamente podem ser influenciadas, garantindo uma maior resistência a insultos isquêmicos cerebrais. Agradecimentos: CAPES, CNPq, FAPEMIG, INCT/INCeMaq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 16:15hs - Flávio Afonso Gonçalves Mourão: [email protected])


Vascular function in conduit vessels and cardiac tonin specific activity after swimming training in TGM (rTon)

Motta, DF (1);Pinho, JF(1); Almeida, PW(1); Lemos,VS(1) ;Lima, MP(2); Montalvão,BS(1); Simões, HG(3); Pesquero, JL(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Escola de Enfermagem-UFMG; (3)Programa de mestrado e

doutorado em atividade física e saúde-UCB

Objetivo/Aim: Analyze levels of cardiac specific tonin activity and vascular function of aorta in mice overexpressing tonin (TGM (rTon)) after six weeks of swimming training. Métodos/Methods: TGM 13 (rTon) (n = 7 trained, sedentary n = 6) and 8 controls (wild, S) (n = 4 trained, n = 4 sedentary) had a maximum swimming test (TM) to obtain the maximum load ( CM), training load determination (60% of CM) and performance verification assessed by the TM duration. The training consisted 1 h / day, 5 times a week per six weeks. The CM was re-evaluated and adjusted each two weeks. The animals were 8 hours fasted before the sacrifice, carried out by beheading for at least 48 hours after the last exercise session. For vascular reactivity tests, the aorta was removed, divided into segments 3-4 mm, mounted on myography. The tension of vascular smooth muscle were measured using isometric tension transducers. Tonin specific activity in the heart was determined by RIA in the left ventricle (LV), right ventricle (RV) and atria (AT, right + left). Resultados/Results: TGM(rTon) train (n = 7) increased performance after training (p = 0.05). Tonin activity increased after training only in the LV of the TGM (rTon) (0.106 ± 0.010 vs 0.958 ± 0.346 pmol of Ang II per minute and mg of protein for TGM(rTon) sed and train, respectively, p = 0.05). The vascular reactivity shows an increased in contractile response of the to alfa1-adrenergic agonist in TGM(rTon) (Emax = 7.303 ± 0.133 mN / mm) compared to S (Emax = 5.008 ± 0.056 mN / mm). Student\'s t test and two-way ANOVA. Conclusão/Conclusion: Tonin, an enzyme able to release Ang II, is probably affect various systems in the body including an increase in contractile response of the aorta of TGM(rTon) more evidence after swimming training. Agradecimentos: CNPq, CAPES, Procad

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 10:15hs - Bárbara Soares Montalvão Ferreira: [email protected])


Peso e conteúdo de glicogênio do músculo gastrocnêmio em camundongos submetidos à encefalomielite autoimune experimental após treinamento moderado de natação Bernardes, D; Vitarelli-Silva, T; Oliveira-Lima, OC; Limborço-Filho, M; Carvalho-Tavares, J.

Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB, UFMG

Objetivo/Aim: Analisar o peso e o conteúdo de glicogênio do músculo gastrocnêmio de camundongos submetidos à encefalomielite autoimune experimental (EAE) após 08 semanas de treinamento moderado de natação. Métodos/Methods: 22 camundongos fêmeas C57BL/6J com 21 dias de idade foram divididas em 02 grupos: 12 sedentárias (S) e 10 treinadas (T). O treinamento consistiu de natação 05 X/sem, 30 min/dia, durante 08 semanas com 60% da carga máxima atada a cauda. Após 08 semanas, metade dos animais de cada grupo recebeu injeção de solução contendo MOG (indução da EAE) e foram monitorados por 14 dias, sendo os grupos controles monitorados pelo mesmo período. Os animais foram sacrificados por decapitação, sendo o músculo gastrocnêmio (GAST) retirado, pesado e avaliado quanto ao conteúdo de glicogênio por método colorimétrico tendo sido a concentração de glicosil-glicose estimada contra um padrão contendo 100 nmols de glicose e expresso em mg/100 mg de tecido. Resultados/Results: Para os grupos SC, TC, SEAE e TEAE, o peso relativo do músculo foi de 0,54 +/-0,04; 0,57 +/-0,03; 0,52 +/-0,03 e 0,51 +/-0,02 e o glicogênio 0,32 +/-0,02; 0,44 +/-0,03; 0,30 +/-0,02 e 0,27 +/-0,02, respectivamente. Houve interação (P< 0,0001) entre treinamento e EAE para o conteúdo de glicogênio e os animais do grupo TC apresentaram os maiores valores tanto de peso quanto de conteúdo de glicogênio do músculo gastrocnêmio em relação aos outros grupos. Conclusão/Conclusion: O treinamento físico regular foi eficiente em aumentar peso e conteúdo de glicogênio do músculo gastrocnêmio para os animais saudáveis. Porém, quando os animais foram submetidos à indução da encefalomielite autoimune experimental esse efeito benéfico foi abolido, com o peso de músculo e conteúdo de glicogênio tendo voltado para valores similares aos dos animais sedentários. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Danielle Bernardes: [email protected])


Adaptações metabólicas induzidas pelo treinamento aeróbio de ratos

Cordeiro, LMS(1); Heringer, A(1); Mario, EG(1); Moreira, CCL(1); Novais, MVM(1); Mendes, W(1); Soares, DD(2); Botion, LM(1)

(1)Laboratório de Metabolismo de Celular, ICB; (2)Laboratório de Fisiologia do Exercício, EEFFTO; Universidade Federal

de Minas Gerais, Belo Horizonte, MG / Brasil.

Objetivo/Aim: Estudar os efeitos do treinamento aeróbico de alta intensidade sobre as respostas adaptativas do metabolismo de lipídios. Métodos/Methods: Ratos Wistar (200 g) mantidos num ciclo claro-escuro (14-10h), com água e ração à vontade. Os animais foram adaptados a corrida na esteira rolante, durante 5 dias consecutivos, sendo que inicialmente permaneceram em repouso durante 5 minutos e, depois correram por 5 min a 18 m.min-1. Em seguida, foram divididos aleatoriamente em grupo sedentário e treinado. No inicio do treinamento foi realizado um protocolo de teste de esforço máximo (TEMP) para determinar a velocidade máxima de corrida (VMAX), durante o treinamento foram realizados outros TEMPs, para ajuste da intensidade do treinamento e, no final foi realizado o TEMP para determinação da VMAX. O treino foi de 10 semanas, 5 dias consecutivos, com intensidade de 75%VMAX durante 60 minutos. A eutanásia foi feita 72 horas após o 4º TEMP. O protocolo experimental foi aprovado pelo comitê de ética em experimentação animal da UFMG (29/2009). Foi utilizada a técnica de qRT-PCR para determinação quantitativa do RNAm do PPAR alfa e da CPT 1. Resultados/Results: Dados expressos como média ± EPM e significância adotada de 5%. O treinamento físico melhorou o desempenho de corrida dos animais (26 min no 4° TEMP, controle X 45 min no 4° TEMP, treinados), sem modificar a massa corporal (414 g controle X 407 g treinado). No entanto, o treinamento foi eficiente em reduzir acentuadamente os depósitos de gordura. A CPT 1 teve sua expressão aumentada (126%) nos animais treinados, enquanto, não foi observada diferença entre os grupos na expressão de PPAR alfa. Conclusão/Conclusion: O treinamento aeróbico de alta intensidade, parece promover ajustes metabólicos no tecido muscular para otimizar a utilização de substratos energéticos. Contudo, há evidencias de que as modificações nas expressões dos genes avaliados não são sinérgicas. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (10/12 as 16:30hs - Letícia Maria de Souza Cordeiro: [email protected])


Accounting for the size and shape of juxtacellular recordings of extracellular EPSPs and Aps

Christopher Kushmerick (1); Silviu I. Rusu (2); J. Gerard G. Borst (2)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Ciências Biológicas, UFMG (2) Department of Neuroscience, Erasmus MC, The Netherlands.

Objetivo/Aim: The juxtacellular recording configuration, in which a patch pipette electrode is advanced into neural tissue until large single unit action potentials are obtained, permits labeling, stimulation, and recording of single cells in vivo. Despite growing popularity of this technique, the underlying relationship between the membrane potential of the cell and the size and shape of the juxtacellular potential it generates is poorly understood. Our objective was to elucidate this relationship. Métodos/Methods: We compared the potentials obtained by paired whole cell current clamp and juxtacellular recordings from mouse medial nucleus of the trapezoid body (MNTB) neurons in brainstem slices.We find that the shape of the juxtacellular potential can be well approximated as the scaled sum of the intracellular potential and its first derivative, suggesting it is generated by ionic and capacitive current through a patch of membrane close to the pipette tip. Resultados/Results: We show that especially in the case of a passive soma, these recordings can provide information about synaptic conductance and postsynaptic excitability. We obtained extracellular potentials of 1 mV, as commonly observed during in vivo juxtacellular recordings Under these conditions, however, the size of the juxtacellular potential was much larger than that predicted based on the size of the pipette tip assuming a specific membrane capacitance of 1 !F/cm2. Conclusão/Conclusion: To account for this discrepancy, we present a model of the loose patch space formed by membrane surrounding the juxtacellular pipette and show that this membrane contributes directly to the coupling between intracellular potential and the juxtacellular recording, thus explaining the large amplitude of the latter. Agradecimentos: FP6 EU-grant (EUSynapse, LSHM-CT-2005-019055), ALW-NWO (Moving vesicles, 814.02.004) and a Neuro-Bsik grant (Senter, The Netherlands). CK is supported by CNPq and FAPEMIG (Brazil)

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Christopher Kushmerick: [email protected])


Evoked potentials triggered by electrical stimulation signal seizure onset: A new approach to seizure prediction

Medeiros, DC (1); Guidine, P(1); Mourão, FAG(1); Massensini, AR(1); Oliveira, LB(2); Mendes, EMAM(2); Moraes, MFD(1)

(1) Núcleo de Neurociências, Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG; (2) , Escola de Engenharia,

Departamento de Engenharia Eletrônica, UFMG

Objetivo/Aim: The aim of this study was to use deep brain electric stimulation to probe the changes in connectivity and facilitated recruitment of neural circuits shortly before seizure onset. These evoked field potentials (EFPs) would reflect changes in neural excitability, synchronization and connectivity, which are associated with seizure onset, thus functioning as predictors. Métodos/Methods: Male Wistar rats (n=12, 280-300 g) were used. Rats were implanted, under urethane anesthesia (140 mg/ml; 10 ml/kg, i.p.), with bipolar electrodes in the right amygdala (AP: -2.8, LL: -5.0, DV: -7.2), in the right dorsal hippocampus (AP: -2.4, LL: -2.4, DV: -2.2) as well as superficial electrodes on both parietal cortexes. Immediately after surgery, the medial tail vein was cannulated for pentilenetetrazol (PTZ) infusion (4mg/ml/min). Rats were then divided into 2 groups: stimulated (ES) and non-stimulated (noES). Electric stimulation was applied to the amygdala (0.5 Hz monophasic square pulse, 0.1 ms duration, 0.6 mA intensity). In both groups, electroencephalographic (EEG) recordings of the hippocampus and parietal cortexes were performed for at least half an hour. The PTZ infusion was interrupted at the beginning of the EEG seizure (EEGs). The latency for EEGs onset and the time between EFP onset and EEGs were measured. Resultados/Results: At the beginning of the experiment, no EFPs were observed. However, at 98 s (±32 s) before seizures onset, EFPs were evident at the right hippocampus and parietal cortexes. All animals had EFPs before EEGs, which continued until the end of the recording. EEGs onset was not statistically different between the 2 groups (ES: 1557 s ± 80.56 s; noES: 1403 s ± 59.9 s, Mann Whitney test, P=0.39). Conclusão/Conclusion: Results indicate that PTZ infusion facilitates neural circuitry recruitment by ES, probably through facilitated connectivity and larger neural mass synchronous involvement. We conclude that although the precise moment of pre-ictal to ictal transitions is in general unpredictable, it may be possible to estimate the probability of occurrence of EEGs by probing neural circuits using very low frequency ES. Agradecimentos: CAPES; CNPq; FAPEMIG; INCT/INCeMaq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Daniel de Castro Medeiros: [email protected])


Inferência sobre o mecanismo de ação de substâncias modificadoras de canais para íons baseado nos seus efeitos no

potencial de ação Everton Alhados(1); Éder Moraes(1); Lígia Naves(1); Christopher Kushmerick(1)


Objetivo/Aim: A geração dos potenciais de repouso e de ação são funções essenciais e definidoras da comunicação neuronal. Sendo o resultado da atividade dos canais para íons, o estudo das alterações no formato do potencial de ação induzidas por drogas, toxinas, hormônios, e neurotransmissores nos permite fazer inferências sobre o alvo destas substâncias. Apresentamos condições experimentais e de análise adequadas para este tipo de ensaio, bem como algumas das suas limitações. Métodos/Methods: Obtivemos registros estáveis por mais que 30 minutos, tempo suficiente para os testes pretendidos. Detectamos pouca correlação entre os vários parâmetros estudados, indicando que eles medem fatores independentes. Surpreendentemente, bloqueio de canais para potássio com TEA, além de retardar a repolarização, reduziu o valor máximo de dV/dt (fator normalmente associado com a disponibilidade de canais para sódio), provavelmente devida à recuperação incompleta da inativação. Resultados/Results: Obtivemos registros estáveis por mais que 30 minutos, tempo suficiente para os testes pretendidos. Detectamos pouca correlação entre os vários parâmetros estudados, indicando que eles medem fatores independentes. Surpreendentemente, bloqueio de canais para potássio com TEA, além de retardar a repolarização, reduziu o valor máximo de dV/dt (fator normalmente associado com a disponibilidade de canais para sódio), provavelmente devida à recuperação incompleta da inativação. Conclusão/Conclusion: O ensaio desenvolvido serve para rapidamente detectar substâncias com atividade em canais para íons. O efeito de bloqueadores de canais para potássio no valor máximo de dV/dt ilustra as possíveis interações entre as diferentes tipos de canais presentes no neurônio que afetam o formato do potencial de ação. Devido a estas interações não lineares, a modelagem matemática do potencial de ação é ferramenta valiosa para testar hipóteses específicas. Agradecimentos: FAPEMIG (Universal e Programa Pesqusador Mineiro) e CNPq (Universal)

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Everton Alhados: [email protected])


Efeito das frontoxinas no tamanho dos quanta na junção neuromuscular de rã

Andrade, FAC(1);Kushmerick, C(1); Naves LA(1)


Objetivo/Aim: Testar três novas toxinas isoladas do veneno de Micrurus frontalis para efeitos pré ou pós-sinápticos na junção neuromuscular. Métodos/Methods: Foram utilizadas rãs (Lithobates catesbeianus) de ambos os sexos, pesando entre 70-90 g. Os animais foram sacrificados por decaptação e os músculos sartórios e peitorais cutâneos retirados e fixados a uma base de “sylgard” em uma câmara de acrílico contendo solução de Ringer. O potencial de membrana muscular foi medido utilizando a técnica de current clamp, por um eletrodo intracelular inserido na JNM, e a liberação espontânea de acetilcolina, avaliada pelo registro dos potenciais de placa em miniatura (MEPPs). O efeito pós-sináptico da aplicação das FTxs foi testado através de sua atuação na alteração da amplitude dos MEPPs. Resultados/Results: A aplicação das FTx II, III e IV (1 !M, n = 3 a 6) sobre a junção neuromuscular de rã promoveu a diminuição da amplitude dos potenciais de placa terminal em miniatura semelhante àquela provocada pela d-Tubocurarina, um conhecido antagonista nicotínico. Observa-se uma tendência de redução na frequência dos potenciais em miniatura, tanto após a aplicação das frontoxinas quanto de d-Tubocurarina. Conclusão/Conclusion: As frontoxinas, assim como indicado por sua estrutura primária, são neurotoxinas capazes de inibir os receptores nicotínicos de acetilcolina da junção neuromuscular, com potência semelhante à d-Tubocurarina. E sua atividade bloqueadora pós-sináptica, evidenciada pela redução da amplitude dos potenciais de placa motora em miniatura e pela ausência de efeito em sua freqüência, nos permite classificá-las como típicas ?-neurotoxinas de serpentes. Agradecimentos: FAPEMIG (Universal e Programa de Pesquisador Mineiro) e CNPq (Universal)

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 09:30hs - Fabyola Andrade: [email protected])


Preparo de células dissociadas do MNTB para estudos eletrofisiológicos

Andrade, FAC (1); Silveira NA(1); Naves LA(1); Kushmerick Christopher(1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB, UFMG

Objetivo/Aim: O Núcleo Medial do Corpo Trapezóide (MNTB) é um importante relé sináptico nas vias auditivas envolvidas com a localização de fontes sonoras e representa um valioso modelo para estudar a neurotransmissão glutamatérgica. A maioria de estudos do MNTB tem sido realizados em fatias de encéfalo ou in vivo. Entretanto, para estudos biofísicos onde o controle do potencial de membrana é de suma importância, uma preparação de neurônios dissociados do MNTB é desejável e a sua obtenção foi o nosso objetivo. Métodos/Methods: Ratos Wistar de 5-15 dias de idade foram utilizados para obter fatias de tronco encefálico contendo o MNTB. Após microdissecção, fragmentos da fatia contendo o MNTB foram transferidos para tubos para tratamento enzimática com papaína e dissociação mecânica. As células obtidas foram transferidas para placas de vidro tratadas com poli-lisina e utilizadas depois de 30 min ou mantidas em cultura por 24 horas. Sobre microscopia com aumento de 400 vezes, células com tamanho e formato compatível com o esperado para neurônios do MNTB foram selecionados para estudo. Utilizou-se a técnica de whole-cell patch clamp para medir correntes de Na e K e o potencial de membrana. Resultados/Results: A maioria das células que satisfizeram os critérios morfológicos expressavam correntes de Na+ e K+ com propriedades características de neurônios do MNTB.A maioria dos neurônios estavam com potencial de repouso baixo, e nestes neurônios nós não conseguimos gerar potencias de ação. Entretanto, a pequena fração de neurônios com potencial de repouso mais negativo do que -60 mV mostravam potenciais de ação extremamente rápidos, característicos dos nerônios deste núcleo. Conclusão/Conclusion: Embora ainda não termos conseguido de forma corriqueira o número e a qualidade de nerônios MNTB que precisamos, os dados preliminares são promissores. Pretendemos estudar ajustes nos parâmetros de dissociação na tentativa de otimizar os protocolos. Agradecimentos: Agradecemos ao Adriano Jesus da Silva (M.S.) pela ajuda no desenvolvimento da técnica de microdissecção do MNTB. Apoio de FAPEMIG (Universal e Programa Pesquisador Mineiro) e CNPq (Universal)

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Fabyola Andrade: [email protected])


Estudo dos padrões de respostas evocadas auditivas em regime permanente

Lopes GC(1); Mesquita MBS (2); Moraes MFD (1)

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Institute of Psychiatry - King\'s College London

Objetivo/Aim: Analisar os padrões das respostas evocadas auditivas em regime permanente em relação a variações dos estímulos auditivos Métodos/Methods: Animais: 10 Ratos Wistar Machos (250-300g). Eletrodos: Monopolares de aço revestido por Teflon; microparafusos cirúrgicos; agulha hipodérmica. Cirurgia: Animais anestesiados com uretana na dose de 1,4mg/100g. Fixação dos animais em aparelho de estereotaxia. Perfuração da calota craniana e fixação dos eletrodos. Introdução do eletrodo monopolar no colículo inferior inclinado a 30° para registro do EEG. Histologia: Marcação, perfusão, laminação a 40µm, coloração, visualização das lâminas em lupa e digitalização das imagens, determinação da posição dos eletrodos. Estímulo Auditivo: Ondas sonoras senoidais de diferentes frequências moduladas em amplitude por senóides de diferentes frequências. Aquisição dos dados: Realizado or meio de sistema de aquisisção de sinais bioelétricos. Quantificação da intensidade do esimulo auditivo. Tratamento dos dados no domínio da frequência e análise quantitativa das respostas. Resultados/Results: Protocolo 1 (Variação da Intensidade): Observamos alteração da amplitude da resposta de acordo com a variação da intensidade do estímulo; Protocolo 2 (Varredura de Portadora): Observamos variação do pico de resposta em relação à posição anatômica da ponta do eletrodo, caracterizando a organização tonotópica do Colículo Inferior; Protocolo 3 (Varredura Contínua de Moduladora): As respostas mantiveram constância em determinada faixa de modulação do estímulo. Protocolo 4 (Varredura Discreta De Moduladora): as respostas mantiveram o mesmo padrão do protocolo 3. Conclusão/Conclusion: As Respostas Evocadas em Regime Permanente mostraram-se sensíveis à variação da intensidaded o estímulo, capazes de identificar o localizacionismo tonotópico e apresentam resposta constante numa determinada faixa de variação da moduladora. Agradecimentos: Papi; Mami; CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Gustavo Coelho Lopes: [email protected])


Padrões temporais de eletroestimulação amigdalar como pista em condicionamento de ratos wistar

Nitzsche, J; Moraes, MFD; Pereira, GS

Núcleo de Neurociências - UFMG

Objetivo/Aim: Desenvolver um sistema automatizado de condicionamento para o fornecimento de padrões temporais de eletroestimulação como dica para ratos privados de alimento encontrar a recompensa. A estimulação é feita na amígdala cada vez que o animal volta sua face para a região onde está a recompensa, dentro de um campo aberto. A automatização deste processo é feita por um sistema controlador que identifica qual região que a face do animal está voltada e aciona a estimulação correspondente. Métodos/Methods: 1-) Ratos com implante de eletrodo bipolar no complexo amigdalóide, um sensor de infra-vermelho apontado para a região focal da visão e um conector elétrico, fixos no osso frontal com acrílico auto-polimerizável. 2-) Eletroestimulador que fornece sequências de pulsos com codificação temporal programável, acionado pela saída de áudio do computador e cuja saída é desacoplada. 3-) Campo aberto com emissores de infra-vermelho na borda, com compartimento para esconder uma recompensa alimentar. O campo é filmado e a filmagem digitalizada. 4-) Sistema eletônico/software que identifica qual emissor está no foco do sensor e aciona o padrão de eletroestimulação correspondente Resultados/Results: Todos os materiais já foram construídos, faltando apenas ajustes. Experimentos realizados em condicionamento ao medo na gaiola de Skinner, com som ou com eletroestimulação como estímulo condicionado. Identificado comportamento de busca evocado pela eletroestimulação do complexo amigdalóide. Conclusão/Conclusion: O sistema de condicionamento está sendo submetido a ajustes finais quanto aos parâmetros utilizados. Agradecimentos: NNC, UFMG, CAPES, CNPQ, FAPEMIG, BRASIL

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - João Nitzsche: [email protected])


Microinjeção de angiotensina-(1-7) na amígdala basolateral atenua a resposta cardiovascular provocada pelo estresse

agudo em ratos Oscar, CG(1); Lima, AM(1) ; Xavier, CH(1); Santos, RAS(1) ; Fontes, MAP(1)

(1)Laboratório de Hipertensão,Departamento de Fisiologia e Biofísica,ICB-UFMG

Objetivo/Aim: A microinjeção central de angiotensina 1-7[Ang-(1-7)] atenua a resposta cardiovascular ao estresse em ratos. Entretanto, o sítio de ação da Ang-(1-7) no SNC ainda não foi determinado. O receptor da Ang-(1-7), Mas, é expresso predominantemente na amígdala, núcleo crítico no SNC na geração das respostas de medo condicionado e ansiedade. O objetivo desse trabalho foi avaliar a contribuição da Ang-(1-7) no núcleo basolateral da amígdala (BLA) na resposta cardiovascular ao estresse agudo. Métodos/Methods: Ratos Wistar (±315g.)foram anestesiados (tribromoetanol 250mg/kg) para implantação bilateral de cânulas-guia direcionadas ao BLA, para posterior microinjeção de drogas. Após quatro dias, os animais foram novamente anestesiados para canulação de artéria femoral para o registro dos parâmetros cardiovasculares. Os experimentos foram realizados somente após um período de 24 horas. Após estabilização (20 min.), foi feita a microinjeção de Ang-(1-7) (25pmol/200 nl) ou salina (sal, 200 nl, controle) no BLA (n=6 cada grupo). Imediatamente após as microinjeções, os animais foram submetidos ao estresse por jato de ar por 10 min. (10L/min.) seguidos de 25 min. para recuperação (período pós-estresse). Ao final do experimento, os animais foram eutanasiados e foi microinjetado alcian blue (2%) para posterior análise histológica. Resultados/Results: Comparado com o grupo salina, a microinjeção de Ang-(1-7) no BLA reduziu a amplitude da resposta pressora (' PAM:sal 30±2 vs. Ang-(1-7) 11±2 mmHg, P< 0,001) bem como atenuou a taquicardia evocadas pelo estresse(' FC: sal 157±9 vs. Ang-(1-7) 82±14 bpm, P < 0,01). Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos na fase de recuperação. Conclusão/Conclusion: Os resultados preliminares indicam que a Ang-(1-7) na amígdala pode reduzir a reatividade cardiovascular ao estresse agudo. Experimentos adicionais são necessários para melhor elucidar o papel do eixo Ang (1-7)-Mas nessa resposta. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Charles Gonzaga Oscar: [email protected])


Participação da região infralímbica do córtex pré-frontal medial na resposta cardiovascular ao estresse emocional

Muller-Ribeiro, FCF; Zaretsky, DV; DiMicco, JA; Fontes, MAP


Objetivo/Aim: O córtex pré-frontal medial (mPFC) encontra-se envolvido na integração de respostas autonômicas, neuroendócrinas e comportamentais frente um estímulo emocional. Evidências anatômicas mostraram que o mPFC, em particular, a região infralímbica (IL) modula funções autonômicas através de projeções para regiões subcorticais envolvidas na organização da resposta central ao estresse. Este estudo reavaliou a participação da IL na resposta cardiovascular, termogênica e comportamental ao estresse emocional. Métodos/Methods: Um sistema de aquisição de dados por telemetria foi utilizado para medida da temperatura corporal, PAM, FC e atividade locomotora. Os animais foram submetidos a implante de cânulas-guia bilaterais na IL (+2,7mm anterior, ±0,6mm lateral, -4,7mm ventral) 6 dias após o implante do probe. Cada rato foi submetido a 4 experimentos diferentes: microinjeção bilateral do agonista de receptor GABAA, muscimol (100pmol/100nl) ou salina (100nl) seguido pelo estresse ou permanecendo na caixa sem ser perturbado (controle). Cage switch stress (n=4) e contenção associado ao barulho do jato de ar (n=4) foram realizados nesses experimentos. Em outra série de experimentos foi feito implante de cateter na artéria femoral 5 dias após estereotaxia. Os animais receberam microinjeção bilateral de muscimol (n=7) ou salina (n=5) na IL, seguido pelo estresse por jato de ar. Em outro grupo foi realizado microinjeção unilateral do aminoácido excitatório, NMDA (6pmol/100nl) seguido pelo estresse por jato de ar (n=5). Resultados/Results: A inibição bilateral da região IL utilizando muscimol (100pmol/100nl) não alterou os parâmetros cardiovasculares, temperatura corporal e atividade locomotora basais. A inibição da região IL também não alterou a resposta cardiovascular, termogênica e comportamental nos diferentes paradigmas de estresse. No entanto, a ativação unilateral da região IL com NMDA (6pmol/100nl), atenuou em 93% a resposta taquicárdica ao estresse por jato de ar sem alterar a resposta pressora. Conclusão/Conclusion: Os resultados descartam o papel tônico da região IL na manutenção dos parâmetros cardiovasculares, termogênese e atividade locomotora basais ou na resposta cardiovascular, termogênica e comportamental ao estresse emocional. Por outro lado este estudo mostra que a ativação unilateral da IL pode modular de maneira inibitória a resposta taquicárdica evocada pelo estresse emocional, sugerindo uma possível participação fásica de receptores NMDA na resposta cardiovascular ao estresse emocional. Agradecimentos: FAPEMIG, CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Flávia Camargos de Figueirêdo Müller Ribeiro: [email protected])


Avaliação da reatividade cardiovascular ao estresse agudo e do comportamento em ratos tratados com BPP-10c

Bernardes, ISF(1); Xavier, CH(1), Saito, VM(2); Camargo, AC(3); Santos, RAS(1); Moreira, FA(2); Fontes, MAP(1); Ianzer, D(3).

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG; (2) Departamento de Farmacologia, ICB-UFMG; (3)LETA–

CAT/Cepid, Instituto Butantan, São Paulo/SP.

Objetivo/Aim: O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do BPP-10c na reatividade cardiovascular ao estresse agudo e no comportamento de ratos SHR. Métodos/Methods: Após anestesia (tribromoetanol 2,5mg/Kg), veia e artéria femorais foram canuladas. Após 24h, os ratos foram submetidos à injeção i.v. (0,5mL) de BPP-10c (71nmol/Kg) ou veículo (NaCl 0,9%), e em seguida foram avaliados: A) reatividade cardiovascular ao estresse agudo (jato de ar, 10L/min-10min); B) atividade exploratória (episódios de locomoção, levantar e limpar por 10min a cada 30min, durante 120min); C) comportamento tipo-ansiedade: (entradas e tempo de permanência nos braços abertos do labirinto em cruz elevado, LCE, por 5min); D) comportamento de depressão: (24h após pré-expor animais ao nado forçado, medimos a imobilidade por 5min). Resultados/Results: O BPP reduziu a taquicardia induzida pelo estresse (':43±17bpm vs.94±15bpm), e acelerou a recuperação da FC no período pós-estresse (':12±7vs.56±21bpm). A reatividade pressórica não foi alterada. O BPP reduziu os episódios de locomoção (54±9vs.93±12), levantar (38±7vs.79±11) e limpar (2,7±0,4vs.5,8±1,4). SHRs tratados com BPP exploraram por menos tempo os braços abertos do LCE (35±13vs.71±9%). O BPP não alterou a imobilidade durante o nado forçado. Conclusão/Conclusion: Os resultados sugerem que o BPP-10c pode agir centralmente. O aparente efeito tipo-ansiogênico observado se contrapõe à resposta cardiovascular. Sabendo que SHR é um modelo de déficit de atenção e hiperatividade (Behavioural Brain Research, 94:153,1998), o BPP-10c pode ter reduzido esse comportamento, conforme observado na avaliação da atividade locomotora/exploratória. Estudos são necessários para elucidar mecanismos e estruturas envolvidas. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, FAPESP

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Isabella Bernardes Silva Freitas: [email protected])


Crises audiogênicas durante a gestação: associação com o peptídeo natriurético atrial (ANP) central

Gouvêa, M.P(1); Silva, M.S.B., Doretto, M.C. , Reis, A.M.


Objetivo/Aim: O objetivo deste trabalho foi estabelecer relações entre a severidade das crises epilépticas e as concentrações de peptídeo natriurético atrial e seus receptores em animais geneticamente predispostos à epilepsia audiogênica (WAR) durante a gestação. Métodos/Methods: Fêmeas WAR, selecionadas após 3 testes para avaliação do Índice de Severidade (IS) das crises, foram acasaladas com ratos Wistar. Aos 19 dias de gestação foram novamente testadas e divididas em dois grupos: ratas que apresentaram redução no IS e ratas que não apresentaram alteração no IS. As ratas foram sacrificadas por decapitação aos 20 dias de gestação. O ANP foi quantificado por RIE no plasma, hipocampo e hipotálamo. Os receptores para o ANP (NPR-A – receptor biologicamente ativo e NPR-C – receptor de clearance) foram analisados por autorradiografia nos rins e PCR em tempo real nos rins, hipocampo e hipotálamo. Resultados/Results: Animais WAR com redução da severidade das crises epilépticas aos 20 dias de gestação apresentam redução dos níveis de ANP plasmático e aumento de receptores para ANP nos rins. As ratas WAR que não tiveram redução das crises apresentaram concentração elevada de ANP no hipotálamo e no hipocampo, ao passo que, as ratas com redução das crises, apresentaram redução na expressão dos receptores para esse peptídeo. Conclusão/Conclusion: A redução de ANP plasmático pode ser explicada, ao menos em parte, pelo aumento de expressão do receptor do tipo C em animais WAR. Entretanto, o aumento da expressão do receptor do tipo A sugere um mecanismo compensatório, responsável por estabilizar e manter o equilíbrio hidroeletrolítico no organismo desses animais, apesar dos níveis plasmáticos reduzidos do hormônio. Em conjunto, esses dados sugerem aumento das ações centrais do ANP nos animais sem redução de crises indicando sua possível participação em mecanismos pró-convulsivantes. Agradecimentos: CNPq, Capes e FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Mauro Sérgio Batista da Silva: [email protected])


Purificação e caracterização de eCG (gonadotrofina coriônica eqüina) para indução de ovulação.

Marliére, ALL(1); Santos, IC(1); Amaral, JP(1); Limna, MP(1); Pedro, PS(1); Silva, TR(1); Nogueira, Y(1); Pesquero, JL(1)

(1) Universidade Federal de Minas Gerais

Objetivo/Aim: Isolar, a partir de plasma de éguas gestantes, e caracterizar em termos de atividade biológica, o hormônio gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) para uso em indução de ovulação. Métodos/Methods: Sangue de égua prenha com 60 a 80 dias de gestação foi puncionado em bolsas contendo EDTA e o plasma tratado com sulfato de amônio até 50% de saturação do sal. O material foi centrifugado a 10.000xg por 15 minutos a 4ºC, o sedimento ressuspendido em água destilada e aplicado em centricon de 30 kDa para purificar e dializar a amostra. Após diálise o material foi aplicado em gel de poliacrilamida 10%. Para procedimentos in vivo foram utilizadas 15 ratas Wistar com 21 dias de idade, divididas em 3 grupos com 5 animais. Animais do grupo controle positivo (CP), receberam duas doses (20 UI) de Folligon, sendo a primeira no tempo zero e a segunda dose 48 horas após a primeira dose. Animais do grupo controle negativo (CN) receberam NaCl 0,9% e os animais do grupo tratamento (T) receberam a primeira dose de Folligon e na segunda dose 1 mg da amostra parcialmente purificada. Após 12 horas da ultima aplicação os animais foram sacrificados e a tuba uterina retirada para análise por microscopia óptica. Resultados/Results: O material obtido de plasma a 50% de saturação com sulfato de amônio apresentou a banda de massa molecular 70 kDa confirmando a presença da proteína de interesse. Após tratamento com ratas impúberes observamos que animais do grupo T apresentaram maior número de ovulações que os animais do grupo CP (40 ± 4 vs 18 ± 2). Nenhuma ovulação foi observada para o grupo CN. Conclusão/Conclusion: Em torno de 90% do componente ativo (eCG) de plasma precipitou com o tratamento com sulfato de amônio. O tratamento com 1 mg deste material foi mais eficiente para induzir ovulação que o comercial. Entretanto, como o produto comercial, o purificado mostrou-se pouco estável mesmo quando mantido sob refrigeração ou congelado. Novos estudos são necessários para maior grau de purificação e identificação de dosagens mais eficientes. Agradecimentos: FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Ana Luisa Lamas Marliere: [email protected])


Efeitos da ovariectomia sobre o sistema cardiovascular e a produção de ANP em camundongos FVB/N Mas knockout

Fernanda B. Machado1, Paula L. Bonfá1, Roberto Q. Lautner1, Marcos B. Melo1, Robson A. S. Santos1, Michael Bader2, Adelina M. Reis1

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo

Horizonte, MG, Brasil; (2) Max-Delbrück-Center for Molecular Medicine, Berlin-Buch, Alemanha.

Objetivo/Aim: O eixo vasodilatador Ang-1-7/Mas, novo componente do Sistema renina- angiotensina (SRA), foi descrito em diferentes tecidos e é importante para a regulação da pressão arterial (PA). Camundongos machos knockout para o receptor Mas possuem aumento na PA e disfunção endotelial. Essas características também são comuns entre as mulheres na pós-menopausa, que apresentam, ainda, uma deficiência no sistema de peptídeos natriuréticos. Esse trabalho avaliou a influência da ovariectomia (ovx) sobre a função cardiovascular e produção de ANP em camundongos FVB/N Mas knockout (KO). Métodos/Methods: As fêmeas foram castradas com dez semanas de idade e tiveram a PA e frequência cardíaca monitoradas por pletismografia. A ecocardiografia foi realizada cinco meses após a ovx, posteriormente os animais foram eutanasiados para retirada dos tecidos. A aorta torácica foi dissecada para a realização dos experimentos de reatividade vascular, e o ANP plasmático foi dosado por radioimunoensaio. Resultados/Results: A PA sistólica dos animais KO foi menor comparada à dos selvagens (WT) (107,0 ± 1,8 vs. 118,0 ± 4,7 mmHg, p < 0,05), e não foi alterada pela ovx. A resposta vasoconstritora à adrenalina foi aumentada nos anéis de aorta do grupo KO em relação ao WT, e esse efeito foi totalmente revertido após ovx. A resposta vasodilatadora à acetilcolina foi diminuída no grupo KO em relação ao WT (Emax: 37, 6 ± 4 , 4 vs. 83,6 ± 4,0 %; p<0.05). Após a ovx, esse efeito foi reduzido entre os animais WT, mas não entre os KO. A concentração de ANP plasmática verificada por radioimunoensaio, também foi menor nos camundongos KO ovariectomizados (82,0 ± 6,0 vs. 132,0 ± 12,0 pg / mL, p < 0,05). O ecocardiograma revelou que os corações dos animais KO apresentaram redução da fração de encurtamento (35,0 ± 0,8 vs. 39 ± 0,8 %, p < 0,05), indicando um prejuízo na função global do ventrículo esquerdo. Conclusão/Conclusion: Nossos resultados sugerem que a deleção do receptor Mas provoque uma disfunção no sistema cardiovascular simultânea à causada pela ovx. Agradecimentos: CNPq/Capes

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (10/12 as 16:15hs - Fernanda Brandão Machado: [email protected])


Influência do ciclo estral sobre o desempenho físico e a termorregulação em ratas

Aquino, NSS (1); Nascimento, KKF(1); Chagas, C(1), Leite, LHR(1); Guimaraes, GB(1); Coimbra, CC(2)

Departamento de Biofísica e Fisiologia UFMG

Objetivo/Aim: Verificar a influência do ciclo estral sobre a regulação da temperatura corporal e o desempenho físico em ratas, além da influência desse sobre a variação da temperatura corporal ao longo do ciclo circadiano em ratas intactas e castradas. Métodos/Methods: Foram utilizadas ratas Wistar com cerca de três meses e peso corporal entre 200-300 g, provenientes do CEBIO/UFMG. Os animais foram divididos em grupos de ratas intactas e castradas e mantidos em gaiolas individuais, com fotoperíodo de 14h luz/10h escuro, sob uma temperatura ambiente de 22 +/- 2° C, tendo livre acesso à ração para ratos (Nuvilab) e água. Durante duas semanas foi feita verificação diária do ciclo estral, através de coleta de secreção vaginal e avaliação em microscópio óptico. Posteriormente, os animais foram submetidos à cirurgia para implantação de sensor de temperatura (G2 E-Mitter Mini Mitter) intraperitonialmente. O grupo castrado foi ovarectomizado, através de incisão da cavidade peritonial e remoção dos ovários. Então, foi realizada verificação da temperatura corporal durante todo o ciclo estral utilizando-se o Vital View Data Acquisition System Software versão 4.0, além da submissão dos animais ao exercício progressivo em esteira até a fadiga. Resultados/Results: A atividade locomotora média dos animais nas diferentes fases do ciclo estral, ao longo de um período de 24 horas foram respectivamente: 11,69 + 7,34 para o Diestro-2; 9,00 + 3,56 para o Proestro; 11,32 + 4,99 para o Diestro-1 e 11,41 + 5,71 para o Estro (n=6). A temperatura interna média dos animais nas diferentes fases do ciclo estral, ao longo de um período de 24 horas foi respectivamente: 37,38 + 033 em Diestro 2; de 37,83 + 0,10 em Proestro; 37,60 + 0,32 em Diestro 1 e 37,59 + 0,3 para Estro (n=6). Conclusão/Conclusion: Os resultados preliminares mostram que esses animais realmente possuem hábito noturno e que os hormônios ovarianos podem influenciar nos parâmetros atividade locomotora e temperatura corporal interna durante o ciclo circadiano. Observa-se maior temperatura corporal interna no proestro, fase onde há um pico dos hormônios gonadais e uma queda dessa no Diestro 2, no qual a concentração hormonal é menor. Os dados referentes aos testes progressivos até o momento não foram significativos o suficiente para permitir qualquer análise, até o momento, o que levou à omissão deles. Agradecimentos: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Nayara Soares Sena Aquino: [email protected])


Subfração PnTx 3-6 do veneno da aranha armadeira (Phoneutria nigriventer) no tratamento de ratos submetidos ao

trauma medular agudo compressivo Drummond, BL(1), Caldeira, FMC(1), Fukushima, FB(1), Costa, PM(1), Silva, CMO(1), Motta, GR(1),

Massensini, AR(2), Melo, EG(1)

(1) Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias - Escola de Veterinária - UFMG, (2) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG

Objetivo/Aim: A elevação de cálcio no meio intracelular é um dos principais responsáveis pelos mecanismos de lesão secundária após o trauma medular (TME). Tratamentos complementares que minimizem essa sobrecarga iônica vêm sendo testados e neste contexto frações do veneno da aranha armadeira Phoneutria nigriventer apresentam-se como terapêutica promissora. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da subfração PnTx3-6 em ratos com TME. Métodos/Methods: Dezoito machos adultos foram igualmente distribuídos em três grupos: controle (CT), placebo (PL) e veneno (VN). Sob anestesia geral, realizou-se laminectomia de T12 em todos os animais. Além disto, PL e VN foram submetidos ao TME com uma haste (peso de 70g) por cinco minutos. Após 30 minutos, administraram-se, por via intralesional, 2µl de PBS e 200pMol de PnTx3-6 em 2µl de PBS, respectivamente, em PL e VN. A recuperação neurológica baseou-se no Teste BBB, sendo avaliada 24 h após a cirurgia e diariamente por oito dias. No oitavo dia, os animais foram eutanasiados e o tecido medular colhido. Para avaliação da integridade medular, foram realizadas técnicas de HE e imunoistoquímica (IHQ), esta com o emprego do anticorpo anti-NeuN. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado e os resultados comparados pelos Testes de Mann & Whitney e SNK (p<0,05). O Teste BBB de PL e VN não apresentou diferença significativa. Em relação à morfologia medular, foram observadas lesões mais brandas nos animais do VN quando comparadas ao PL, que apresentou maiores regiões de malácia. Em relação à IHQ, não foi observada diferença significativa entre os tratamentos (p>0,05). Sugere-se que a subfração PnTx3-6, na dose de 200pMol, não foi capaz de diminuir a gravidade das lesões secundárias decorrentes do TME. Deste modo, sugere-se que outros estudos, com diferentes doses e tempos de administração, sejam realizados. Resultados/Results: O Teste BBB de PL e VN não apresentou diferença significativa. Em relação à morfologia medular, foram observadas lesões mais brandas nos animais do VN quando comparadas ao PL, que apresentou maiores regiões de malácia. Em relação à IHQ, não foi observada diferença significativa entre os tratamentos (p<0,05). Conclusão/Conclusion: Sugere-se que a subfração PnTx3-6, na dose de 200pMol, não foi capaz de diminuir a gravidade das lesões secundárias decorrentes do TME. Deste modo, sugere-se que outros estudos, com diferentes doses e tempos de administração, sejam realizados. Agradecimentos: CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Bruno Lapertosa Drummond: [email protected])


Fração proteolítica do látex de Carica candamarcensis HOOK F. 1875 acelera a cicatrização de feridas excisionais cutâneas em

camundongos Freitas, KM1; Stehling, LFO1; Barcelos, LS2 & Lopes, MTP1

Deptos de (1) Farmacologia, (2) Fisiologia e Biofísica, ICB/UFMG.

Objetivo/Aim: Nosso grupo demonstrou atividade cicatrizante da fração proteolítica (P1G10) do látex de C. candarmacensis em modelos de abrasão e de queimadura cutâneas e de úlceras gástricas, sendo que estão envolvidas nesse efeito a proliferação celular e angiogênese. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos da fração P1G10 de C. candarmacensis sobre a cicatrização em modelo de lesão excisional cutânea. Métodos/Methods: Feridas excisionais (5 mm Ø) foram criadas na região dorsal de camundongos C57Bl/6J com auxílio de um furador circular que logo após, foram cobertas com Polawax® contendo ou não a fração P1G10 (0,01% ou 0,05%). Nos dias 0, 3, 7 e 14 de tratamento a área das feridas foi mensurada com paquímetro digital. O tecido de granulação (TG) foi analisado por histomorfometria em cortes corados com H&E e a apoptose pela técnica de TUNEL. As quantificações das atividades enzimáticas de mieloperoxidase e N-acetilglicosaminidase foram utilizadas como indicativo do acúmulo de neutrófilos (PMN) e macrófagos (Mac), respectivamente. Resultados/Results: Nos 3º e 7º dias de tratamento, os animais do grupo P1G10 0,05% apresentaram percentual de fechamento das feridas de cerca de 40% e 80%, e o grupo controle de 20% e 70% (p<0,05, ANOVA, Bonferroni), respectivamente. Nos mesmos animais tratados com P1G10, observou-se redução significativa na área de TG (6,2±3,2 cm2) e no índice de apoptose (10,0±1,6 cels/campo) das feridas (p<0,05 para ambos vs. Controle: 35,0±14,5 cm2 e 21,0±3,1 cels/campo, respectivamente). Por outro lado, a fração, em ambas as doses, induziu aumento significativo do infiltrado de PMN (p<0,01 vs. controle no 3º dia), mas apenas a dose de 0,01% induziu aumento significativo de Mac (p<0,01 vs. controle no 7º dia). Conclusão/Conclusion: Neste modelo, mostramos que P1G10 na dose de 0,05% acelera a cicatrização. Esse efeito é evidenciado pela redução da área de TG, que pode ser conseqüência da não infiltração de Mac e da diminuição da apoptose. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 11:15hs - Kátia Michele Freitas: [email protected])


Efeito antimetastático e possíveis mecanismos de ação de frações derivadas de Carica candamarcensis Hook F. 1835

sobre carcinoma murino de cólon Dittz D(1), Viana CTR(1), Stehling LFO(1), Diniz MLL(1), Arao DR(1), Salas CE(2), Lopes MTP(1)

(1) Departamento de Farmacologia, ICB-UFMG; (2) Departamento de Bioquímica e Imunologia, ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Avaliar a atividade antimetastática de P1G10 e da fração derivada (CMS2 obtida por cromatografia em CM-Sephadex 25) em modelo de carcinoma de cólon murino, bem como seus perfis citotóxicos e ações na adesão celular como parte do estudo do mecanismo de ação. Métodos/Methods: Camundongos Balb/C receberam inoculo, no baço, de células CT26.WT (5x10^4 cel/animal). Um dia após, iniciou-se o tratamento diário com P1G10 ou CMS2 nas doses de 1, 5 mg/kg ou solução salina (controle), s. c., por 15 dias. Logo após, os animais foram sacrificados e determinados os números de pontos metastáticos no pulmão. Para a determinação da atividade citotóxica, células normais (CHO e BHK-21) e tumoral (CT26.WT) foram semeadas em placas de 96 cavidades e expostas a P1G10 ou CMS2 (0,1 a 1000 !g/mL) por 72 h, e a viabilidade celular determinada através do método do MTT. A capacidade de P1G10 em inibir a adesão de células CT26.WT foi avaliada através do kit comercial Cytomatrix Adhesion Assay, Millipore, em substratos de colágeno IV e vitronectina. Resultados/Results: No ensaio antimetastático, observou-se redução de aproximadamente 75% do número de metástases hepáticas com as doses de P1G10 e CMS2 5 mg/kg (P1G10: 6,4±1,6; n=8 e CMS2: 6,0±0,9; n=8) em relação aos grupos controle (P1G10: 28,5±5,4; n=8 e CMS2: 23,8±3,4; n=8). Em células CT26.WT e epitélios normais BHK-21 e CHO, a IC-50 para P1G10 foi, respectivamente, de 20, 28 e 52 !g/mL e de 7, 208 e 111 !g/mL para CMS2. Observou que a inibição máxima da adesão das células CT26.WT, causada por P1G10, ocorreu na concentração de 50 !g/mL (p<0,05, ANOVA pós teste Bonferroni). Conclusão/Conclusion: Dessa forma, pôde-se observar que P1G10 e CMS2 demonstraram atividade antimetastática em carcinoma de cólon murino, exercendo a fração CMS2 atividade citotóxica maior que P1G10 e seletiva para a linhagem tumoral. Além disso, os resultados evidenciam que a fração P1G10 modula a adesão da linhagem tumoral, o que pode contribuir para a sua atividade antimetastática. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Dalton Dittz Junior: [email protected])


Avaliação da genotoxidade e mutagenicidade da fração proteolítica P1G10 obtida do látex de Carica candamarcensis

Hook F. 1875 Arão, DR(1); Villalba MIC(1); Viana CTR(1); Silva ACA(1); Salas CE(2); Lopes MTP(1).

(1) Departamento de Farmacologia ICB-UFMG; (2) Departamento de Bioquímica e Imunologia ICB-UFMG.

Objetivo/Aim: A fração proteolítica obtida do látex de Carica candamarcensis P1G10, é rica em cisteíno-proteases e exibe atividades cicatrizantes cutânea e gástrica sobre lesões de diferentes etiologias. Em preparação para os ensaios clínicos, este estudo visa avaliar os efeitos pré-clínicos genotóxico e mutagênico induzidos pela fração. Métodos/Methods: Para definição das doses utilizadas no ensaio do micronúcleo, a Dose Máxima Tolerada (DMT) de P1G10 em camundongos Swiss machos (n=3) por via i.p. foi determinada de acordo com o teste preconizado pela “Organization for Economic Co-operation and Development” (OECD) no protocolo 423 (OECD Publications, 2001). A avaliação da genotoxicidade foi realizada em camundongos através do teste de micronúcleos (SCHMID, Mut Res,12 (4): 417, 1971) e a avaliação mutagênica pelo teste de Ames (MARON & AMES, Mut Res, 113:173, 1983), expondo diferentes linhagens de Salmonella typhimurium (TA97, TA98, TA100, TA102), na presença ou na ausência de um indutor enzimático (S9), a P1G10 (0,1; 1 ou 10mg/mL) ou seus respectivos controles positivo e negativo. Resultados/Results: A DMT de P1G10 foi de 10 mg/kg. No ensaio de micronúcleo, o quantitativo de eritrócitos policromáticos com micronucleação nos animais tratados com todas as doses de P1G10 foi significativamente diferente do controle positivo (ciclofosfamida 50 mg/kg, p<0,001) e não apresentou diferença em relação ao controle negativo (óleo de rícino) (Anova, pós-teste de Bonferroni). Da mesma forma, no teste de Ames o número de colônias que sofreram reversão foi significativamente diferente quando comparado ao controle positivo (p<0,001), mas sem significância quando comparado ao controle negativo (ANOVA, pós-teste Bonferroni) para todas as linhagens avaliadas. Conclusão/Conclusion: Considerando esses resultados, podemos inferir que P1G10 é tolerado até a dose de 10 mg/kg nas condições testadas e não apresentou potencial genotóxico ou mutagênico, abrindo caminhos para futuros estudos clínicos. Agradecimentos: CAPES, CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Denise Regina Arão: [email protected])


Antiproliferative effect of toxin GI-TX1 from the tarantula venom - Grammostola iheringi (mygalomorphae: theraphosidae) on

tumor cell lines MONTANDON, GG (1,2), GOMES, DA (3), CORRÊA, NCR (3), CAMPOS, AC(3), GOES, AM (3), DINIZ,

MRV (4), De LIMA, ME (1,2)

(1)Laboratório de Venenos e Toxinas Animais (LVTA), Departamento de Bioquímica e Imunologia ICB-UFMG; (2) Núcleo de Biomoléculas, ICB - UFMG; (4) Laboratório de Imunologia Celular e Molecular, Departamento de Bioquímica e

Imunologia ICB-UFMG; (4) Laboratório de Biologia Molecular, Fundação Ezequiel Dias, Belo Horizonte, Minas Gerais.

Objetivo/Aim: Some compounds from poisonous animals that can inhibit the proliferation of tumor cells have potential as anticancer agents. Venoms from arachnids are rich sources of bioactive peptides that act mainly in ion channels and these molecules are currently being used to understand certain types of cancers. In this work we examined the antiproliferative effects of Gi-Tx1, a small protein toxin (3.585Da) isolated from the venom of the spider Grammostola iheringi against three breast tumor cell lines (MDAMB-231, MACL1 and MGSO3) and one hepatoma cell line (SKHep-1). Métodos/Methods: Cell growth inhibition was monitored by two different assays: MTT reduction and [3H]thymidine incorporation and all cell lines tested were sensitive to Gi-Tx1 at nanomolar concentrations. Resultados/Results: The growth inhibitory effect of Gi-Tx1 was evident in the four cell lines, especially SKHep-1, apparently without inducing cell death. The effects of the Gi-Tx1 was not time neither dose dependent. Conclusão/Conclusion: Toxins isolated from arachnid are very helpful in understanding the role of ion channels in various pathophysiological processes. Considering sequence similarities of Gi-Tx1 with some toxins active on potassium channels, it is possible that the antiproliferative effect of this toxin can be mediated by these channels. However other studies are necessary to demonstrate the possible role of Gi-Tx1 on ion channels. The antiproliferative studies of Gi-Tx1 can reveal a new potential drug active on tumor cells, being a possible model to anticancer drug. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG, CAPES, INCTTOX

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 12:00hs - Gabriela Gontijo Montandon: [email protected])


Isolamento de substâncias pró-apoptoticas derivadas do extrato de uma planta do gênero Mitracarpus

Gabriele Mendes de Matos Cardoso1, Rodrigo Luiz Fabri2, Jussara Reis2, Juliana Correia Guerra1, Carla F. Dolabella Romeiro1 , Elita Scio2, Elaine Maria de Souza-Fagundes1

(1) Departamento de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Departamento de Bioquímica, Instituto de Ciências Biológicas

Universidade Federal de Juiz de Fora

Objetivo/Aim: Com a finalidade de identificar compostos bioativos pro-apoptóticos úteis no desenvolvimento de novos fármacos antitumorais, foi realizado o biomonitoramento do fracionamento químico do extrato E084, obtido de uma planta do gênero Mitracarpus, coletada no Cerrado Mineiro. Métodos/Methods: O biomonitoramento das frações deste extrato quanto à atividade citotóxica in vitro foi realizado utilizando-se as linhagens tumorais Jurkat (leucemia linfóide), HL60 (leucemia mielóide) e MCF-7(carcinoma mamário), avaliando-se a viabilidade celular pelo ensaio de MTT. O extrato E084 em solvente diclorometano foi selecionado para fracionamento quimico e biomonitoramento de suas frações ativas quanto seu potencial em induzir fragmentação do DNA celular como indicativo de apoptose, por marcação com iodeto de propídeo e análise por citômetro de fluxo. Do fracionamento químico biomonitorado do extrato E084 foram identificadas 20 frações ativas, das quais foram isoladas quatro substâncias puras denominadas F7L1, F7L2, F7L3 e F3C3. Resultados/Results: Os valores de IC50 determinados para estas substâncias variaram de 0,9 a 25,5 !g/mL para células HL60; de 1,2 a 36,40 !g/mL para células Jurkat e para a linhagem MCF-7 de 0,2 a 8,9 !g/mL. Os resultados da citometria de fluxo demonstraram que as quatro substâncias induziram mais de 70% de fragmentação do DNA em células HL60. Em células MCF-7 somente as substâncias F7L1, F7L3 E F7L2 induziram mais de 70% e em Jurkat este efeito foi menor que 50% para todas as substâncias. Conclusão/Conclusion: Os resultados são promissores, o que justifica a continuação dos experimentos para caracterizar o potencial pro-apoptótico das amostras ativas, elucidação da estrutura química, bem como seus efeitos citotóxicos para células normais. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq, Santander

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Gabriele Mendes de Matos Cardoso: [email protected])


Involvement of renin-angiotensin system and nitric oxide on hypotensive effect of a standardized fraction from Hancornia

speciosa gomes Silva, GC(1); Braga, FC(2); Lima, MP(3); Pesquero, JL(4); Lemos, VS (4); Côrtes, SF(1)

(1) Departamento de Farmacologia, ICB;(2) Faculdade de Farmácia;(3) Escola de Enfermagem; (4) Departamento de

Fisiologia e Biofísica, ICB. UFMG, Belo Horizonte, Brazil

Objetivo/Aim: To investigate the hypotensive effect and its mechanism of action of a standardized fraction of Hancornia speciosa leaves (SFH) in normotensive mice. Métodos/Methods: Male Swiss mice were used. Systolic blood pressure (SBP) was measured by tail pletismography. Each mouse received single dose of SFH by oral (po) route and SBP was monitored every hour until 5 hours. ACE inhibitory activity was measured by colorimetric methods in the serum 1 hour after po administration of SFH (1 mg/kg) or Captopril (10 mg/kg). Levels of angiotensin II in the plasma were determined by radioimmunoassay. Nitrite levels were measured by spectrophotometry in the serum 1 hour after po administration of SFH (1 mg/kg) or L-NAME (20 mg/kg, ip). Experimental procedures were performed in at least 5 animals. Results were considered statistically significant when P<0,05 Resultados/Results: SFH at doses from 1-100 mg/Kg induced significant and long-lasting reductions on SBP compared to saline. SFH in the dose of 1mg/kg produced ACE inhibition of about 80%, similar to Captopril in the dose 10mg/kg. SFH was able to reduce by 56% the plasmatic level of angiotensin II. SFH induced increase on plasmatic content of nitrite. Pre-treatment of mice with L-NAME blunted the effect of SFH. This effect was confirmed by the inhibitory effect of L-NAME on the hypotensive effect of SFH. Conclusão/Conclusion: We demonstrated that a SFH reduced the SBP in mice through inhibition of plasmatic ACE activity, reduction of plasmatic angiotensin II level and by increase on plasmatic level of NO. Therefore, these results strongly suggest that SFH possess a great potential for its use on the treatment of hypertension. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Grazielle Caroline da Silva: [email protected])


Estudos da atividade imunomoduladora da fração proteolítica do látex de Carica candamarcensis HOOK F. 1875 em animais

portadores do carcinoma de Ehrlich ascítico Viana, C.T.R.; Silva, A.C.A.; Dittz, D.; Villalba, M. I. C; Barcelos, L.S.; Guimarães, T.M.P.D.; Salas, C. E.;

Lopes, M. T. P.

Pós graduação em fisiologia e farmacologia

Objetivo/Aim: Nosso grupo vem demonstrando que a fração proteolítica do látex de Carica candamarcensis (P1G10), apresenta atividade antitumoral sobre o tumor ascítico de Ehrlich. Sabe-se que a imunossupressão provocada pelo tumor de Ehrlich tem papel chave em seu desenvolvimento. Neste trabalho visou-se avaliar o efeito da fração P1G10 sobre eventos relacionados à resposta imune de animais portadores do tumor ascítico de Ehrlich. Métodos/Methods: Após a inoculação das células tumorais (107/100!l/animal) em camundongos Swiss fêmeas (25-35g), os animais foram tratados por 10 dias com P1G10 nas dose de 1, 3, 5 mg/kg ou PBS e imunizados com uma suspensão de hemácias de carneiro (2x106 células/100!l/animal s.c.) como antígeno, nos dias 1, 3, 7 e 10 do experimento. Após o tratamento, foram coletadas amostras de sangue para a determinação dos títulos de anticorpos contra hemácias de carneiro (IgG e IgM). O sobrenadante do líquido ascítico foi utilizado para dosagem de TGF-" e TNF-$. Os baços foram coletados e a suspensão de linfócitos esplênicos incubada com P1G10 (10!g/mL) ou concanavalina (40!g/mL) e, após 72h, foi quantificada a proliferação celular pelo método do MTT. Resultados/Results: Não foram observadas diferenças significativas nos títulos de anticorpos entre os grupos avaliados. O tratamento com P1G10 promoveu uma redução significativa dos níveis de TNF-alpha (3mg/kg - 22,30 ± 2,78*, 5 mg/kg - 16,28 ± 3,60**, controle 34,24 ± 3,19 pg/mL) e da fração ativa do TGF-beta (5 mg/kg - 108,13± 4,39*; controle - 96,34 ± 4,18 pg/mL). Houve aumento significativo na metabolização do MTT com os linfócitos esplênicos dos animais tratados com a dose de 5mg/Kg (DO - 0,42 ± 0,01*; controle: 0,36 ± 0,01). Conclusão/Conclusion: Os dados sugerem que o tratamento com P1G10 apesar de não aumentar os níveis de anticorpos, apresenta uma provável ação sobre a imunidade celular já que tem uma ação sobre os níveis de citocinas e promove a proliferação de linfócitos. Agradecimentos: CNPq, FAPEMIG e CAPES

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Celso Tarso Rodrigues Viana: [email protected])


Bradykinin potentiating peptides derived from Bothrops jararaca snake venom (BJ-BPP) stimulate bone marrow

progenitor cell and therapeutic angiogenesis in a mouse model of hindlimb ischemia

Barcelos, L.S.+§; Ianzer, D.A.*; Almeida, B.G.+ §; Castro, T.B.R.+ §; Canesso, M.C.C.+ §; Prado, L. B.+ §; Russo, R.C.+ §; Andrade, S.P.+; Camargo, A.C.M.* & Teixeira, M.M.§

Angiogenesis and §Immunopharmacology lab, Departments of +Physiology and Biophysics and §Biochemistry and

Immunology, Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, MG; *Center for Appl

Objetivo/Aim: Kinin and angiotensin systems are known to modulate angiogenesis and progenitor cell function. Although the BPPs potentiating activity on bradykinin classically occur through an angiotensin-converting enzyme inhibitory mechanism, synthetic BPPs show remarkable functional differences. Here, we evaluated the effects of the synthetic peptides Bj-BPP-7a and -10c on angiogenesis and on bone marrow progenitor cell number in the context of ischemia. Métodos/Methods: The method of sodic fluorescein diffusion into the bloodstream after plantar cushion injection was used for evidence of ischemia. Animals received intraperitoneal (i.p.) daily injection of Bj-BPP-7a or 10c at the dose of 71 nmol/Kg and the control group received PBS vehicle. Treatment started 30 min. after artery occlusion. Animals were sacrificed either at day 3 for flow cytometry analysis of bone marrow cells or at day 14 post-ischemia for histological evaluation of capillary density of adductor muscles. Resultados/Results: After plantar cushion injection (10 !l) of 10% fluorescein, blood samples were collected from the tail vein at different time points and the fluorescence detected in a spectrofluorimeter. The fluorescence peak in the systemic circulation before the occlusion occurred at 7.5±1.6 min. Shortly after ischemia, this time increased to 30±0.1 min and remained until day 3 post-ischemia (p<0.001, n=5/group). Through the technique of intravital microscopy, we observed that the number of cells rolling and adhering to the endothelium in the quadriceps muscle after 1 day post-ischemia was significantly higher when compared with sham animals (43.7±8.4 vs 11±3.2 rolling cells/min, p<0.01, n= 5/group; 3.5±0.5 vs 0.5±0.1 adherent cells, p<0.01, n=5/group). After angiogenic stem cells transplantation, isolated from GFP mice, we observed a greater number of rolling cells in ischemic animals compared with Sham animals (p<0.05, n = 6). After treatment with fucoidan was observed a significant reduction in rolling cell when compared with untreated ischemic animals (2.2 ±0.7, N=5 vs 7.7±1.0, N=7, p<0.05). Conclusão/Conclusion: Conclusions: Our data suggests that both synthetic Bj-BPP-7a and -10c have great proangiogenic capacity, although only Bj-BPP-10c is able to increase the number of bone marrow-derived progenitor cells. Agradecimentos: CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 15:00hs - Leandro Barbosa do Prado: [email protected])


Efeito da própolis verde em aderência intraperitoneal e cicatrização do músculo esquelético

Lima, LDC(1), Moura, SAL(1), Rocha, MA(1), Araujo, AF (1), 1Andrade, SP (1), Ferreira, MAND (2)

(1) Departamente de Fisiologia e Biofísica ICB-UFMG; (2) Departamento de Patologia Geral ICB-UFMG

Objetivo/Aim: A própolis tem apresentado atividades anti-tumoral, anti-inflamatória e anti-angiogênica em vários modelos experimentais. Entretanto, seus efeitos no reparo de lesões da cavidade peritoneal e da musculatura esquelética abdominal não foram investigados. Utilizando um modelo de esponja indutor de crescimento de um tecido fibrovascular similar a aderências humanas, testamos o efeito da própolis verde em componentes relevantes do reparo tecidual. Métodos/Methods: Matrizes sintéticas foram implantadas na cavidade abdominal e lesão por incisão cirúrgica no músculo abdominal foram feitas em diferentes grupos de camundongos Swiss machos anestesiados com 0,1mg/10g (via intra-peritoneal) da associação de xilazina (10mg)/ketamina (100mg). Os animais receberam diariamente por gavagem 500mg/kg do extrato aquoso de própolis verde. No 7º dia após os procedimentos cirúrgicos os animais foram sacrificados e os implantes e fragmentos da musculatura da parede abdominal foram retirados para determinação do conteúdo de hemoglobina (índice vascular), de colágeno (índice fibrogênico) e das atividades de NAG (avaliação de macrófagos) e MPO (avaliação indireta de neutrófilos). Resultados/Results: Os resultados mostraram um aumento do conteúdo de hemoglobina em implantes abdominais e no músculo dos animais tratados em relação aos controles. A deposição de colágeno foi menor no implante abdominal do grupo tratado quando comparado ao grupo controle. Os níveis de colágeno não se alteraram no músculo dos animais tratados. Com relação à atividade de NAG, observou-se um aumento significativo nos implantes abdominais e no músculo dos animais tratados em relação aos controles. Conclusão/Conclusion: Os dados sugerem que o aumento da vascularização induzida pelo extrato aquoso da própolis verde poderia favorecer a oxigenação e aporte de mediadores nas lesões, isto por sua vez, aceleraria o processo de cicatrização tecidual. A menor deposição de colágeno nos implantes dos animais tratados com própolis indica uma importante atividade moduladora da matriz extracelular do extrato com potencial efeito no tratamento de aderências intraperitoneais. Agradecimentos: FAPEMIG e CNPq

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 11:30hs - Luiza Dias da Cunha Lima: [email protected])


Avaliação da atividade vasodilatadora e mecanismo de ação de uma fração polifenólica de Inga edulis Mariano, MCF(1); Souza JNS (2); Lemos, VS(3) ; Côrtes, SF(1)

(1) Departamento de Farmacologia, ICB-UFMG; (2) Faculdade de Engenharia de Alimentos, UFPA; (3) Departamento de

Fisiologia e Biofísica, ICB-UFMG

Objetivo/Aim: Investigar a reatividade vascular e o mecanismo de ação de uma fração padronizada enriquecida em polifenóis obtida de folhas da espécie Inga edulis (FPI). Métodos/Methods: Ratos machos Wistar com idade entre 12 e 14 semanas foram utilizados. Preparações de aorta foram montadas como descrito por Lemos et al. (1999) e as respostas registradas com transdutores isométricos. A presença de endotélio funcional foi confirmada com acetilcolina em anéis de aorta pré-contraídos com fenilefrina. Curvas concentração-resposta cumulativas para a FPI foram obtidas em anéis pré-contraídos com fenilefrina. A participação de fatores relaxantes derivados do endotélio (EDRF) na atividade vasodilatadora da FPI foi investigada em anéis de aorta desprovidos de endotélio. O envolvimento do óxido nítrico (NO), principal EDRF em aorta de rato, no efeito vasodilatador de FPI foi investigado na presença de L-NAME, um inibidor não-seletivo de NO sintase. Inibidores seletivos de proteínas cinases foram utilizados para investigar o mecanismo de ação da FPI. A participação de receptores muscarínicos e de estrógeno foi investigada com antagonistas seletivos. Resultados/Results: A FPI provoca vasodilatação concentração-dependente de anéis de aorta (pIC50: 6.31±0.03, Emax: 93.5±1.2, n=5). Esse efeito é inibido na ausência de endotélio funcional ou na presença de L-NAME. Na presença de atropina o relaxamento não é alterado. Com ICI 182,780, antagonista de receptor de estrógeno, a curva da FPI foi significativamente deslocada para a direita. Wortmannin, inibidor de PI3K, e PP2, inibidor de Src cinase, também inibiram o efeito vasodilatador. Conclusão/Conclusion: A fração polifenólica de Inga edulis induz vasodilatação concentração-dependente em aorta de rato, por um mecanismo dependente da presença de endotélio funcional, da produção de NO, via ativação de receptores de estrógeno e das vias de sinalização envolvendo PI3K e Src cinase. Agradecimentos: CNPQ e FAPEMIG

Data, horário e responsável pela apresentação Oral (11/12 as 11:45hs - Maria Cecília Ferreira Mariano: [email protected])


Subchronic toxicity of a proteolytic fraction from C. candamarcensis latex: qualitative histopathological analysis

MARIA IMACULADA DO CARMO VILLALBA (1), ROGÉRIO PEREIRA BILHEIRO (1), CARLOS EDMUNDO SALAS (2), GIOVANNI DANTAS CASSALI (3), ANILTON CESAR VASCONCELOS (3), CARLOS ALBERTO

TAGLIATI (4), MIRIAM TERESA PAZ LOPES (1)

(1) Departamentos de Farmacologia, (2) Bioquímica e Imunologia, (3) Patologia General, Instituto de Ciências Biológicas, (4) Departamento de Análises Clinicas e Toxicológicas, Faculdade de Farmácia; Universidade Federal de Minas Gerais.

Objetivo/Aim: The properties of a fraction (P1G10) from Carica candamarcensis latex has been studied. In previous assays, P1G10 has shown many effects upon animal pathophysiological systems, such as mitogenesis, angiogenesis, antitumor and antimetastatic effect, gastric wound healing and cicatrization of skin injuries. Based on these findings, our group evaluated its toxicology. The histopathology assays followed the protocol 408 of OECD (1998), as part of the Subchronic Toxicity Assays performed to P1G10. Métodos/Methods: The biochemical, pharmacological and toxicological characteristis of a proteolytic fraction (P1G10) from Carica candamarcensis latex has been studied by our group. In previous studies, P1G10 has shown many effects upon animal pathophysiological systems, such as mitogenesis, angiogenesis, antitumor and antimetastatic effect, gastric wound healing and cicatrization of skin injuries. Based on these findings, our group evaluated its toxicology. The histopathological analysis reported in this abstract, which followed the protocol 408 of OECD (1998), are part of the Subchronic Toxicity Assays performed to P1G10. Resultados/Results: In animals treated with P1G10 (10, 50 e 100 mg/kg), no differences in organ weight, nor changes in aspect were found, compared to controls. However, 70% of the animals that were treated with 300 mg/kg died between the 30th and the 40th days after the beginning of the treatment. Remaining animals showed hepatization with thickning of the interalveolar septa with mixed inflammatory infiltration, characterizing interstitial pneumonitis, while apoptotic bodies were found in the liver. Conclusão/Conclusion: These findings suggest that P1G10 produces lung toxicity if given in repeated high doses (300 mg/kg). Our results also showed that P1G10 produced traces of apoptosis in the liver in the higher dosage tested. According to the European Medicines Agency, the clinical dosage of a test substance must be at least 10-fold lower than the one found toxic in repeated doses. Agradecimentos: CNPq, CAPES and FAPEMIG.

Data, horário e responsável pela apresentação Pôster (10/12 as 13:30hs - Rogério Pereira Bilheiro: [email protected])

Abreu, RV 49 Ádila, S 10 Aguiar, CJ 21 Aguiar, DC 41 Aires, RD 27 Alhados, E 61 Almeida, AP 07; 28 Almeida, BG 15; 34; 38; 81 Almeida, PWM 07; 13; 24; 56 Almeida, RT 14 Almeida-Santos, AF 41 Amaral, JP 70 Amaya, MJ 21 Andrade, FAC 62; 63 Andrade, ILL 55 Andrade, SP 15; 34; 38; 81; 82 Aquino, NSS 72 Arantes, LAM 21 Arantes, RME 11 Arão, DR 75; 76 Araújo Neto, V 19 Araujo, AF 82 Avila, TV 12 Azevedo, EG 09; Bader, M 13; 71 Bahia, APCO 02; 45 Barcelos, LS 15; 34; 38; 74; 80; 81 Bastos, LFS 35 Batista, NV 33 Beiman, M 28 Beraldo, H 04; 06 Bernardes, D 11; 32; 53; 57 Bernardes, ISF 68 Bertini, R 34 Bessa, RN 26 Bilheiro, RP 84 Bonaventura, D 16 Bonfá, PL 71 Borst, JGG 59 Botion, LM 30; 58 Braga, FC 79 Caldeira, FMC 73 Camargo, AC 68 Camargo, ACM 81 Campagnole-Santos, MJ 13; 24; 29 Campos, AC 77 Canesso, MCC 34; 38; 81 Capettini, LSA 22; 27; 31 Cara, DC 33 Cardoso, GMM 78 Carvalho, A 45 Carvalho-Tavares, J. 11; 32; 53; 57 Cash, D 47; Cassali, GD 84 Castro, TBR 15; 34; 38; 81 Chagas, C 72 Cisalpino, D 10 Coelho, FM 33 Coelho, MM 35; 39 Cohen, Y 28 Cohen-Dayag, A 28 Coimbra, CC 31; 72 Cojocaru, G 28 Colotta, F 34 Conde-Garcia, EA 19 Cordeiro, LMS 30; 58 Corrêa, NCR 77 Corrêa-Junior, JD 08; Côrtes, SF 16; 27; 31; 79, 83 Costa, PM 73 Costa, VV 10; 12

Da Silva, SM 09; Damasceno, DD 07; De Lima, ME 77 Demicheli, C 01; 03; 08; 09 DiMicco, JA 67 Diniz, MLL 75 Diniz, MRV 77 Dittz, D 75; 80 Doretto, MC 69 Dourado, LPA 33 Drummond, BL 73 Drumond, LE 53; 54; 55 Duarte, IDG 14; 40 Estevam, CS 19 Fabri, RL 78 Fagundes, CT 10; 12 Faria, AMC 33 Fernandes, FM 15 Fernandes, FR 01;03 Ferraz, KSO 04; Ferreira, AAF 01; 09 Ferreira, AJ 28 Ferreira, CS 09; Ferreira, MAND 82 Ferreira, RG 36; 39 Ferreira, WA 03; Ferreira-Vieira, TH 50; 53; 55 Fontes, MAP 07; 45; 66; 67; 68 Freitas, KM 74 Freitas, VA 08; Freitas-Silva, DM 50 Frézard, FJG 01; 02; 03; 08; 09; 25;45 Fukushima, FB 73 Galdino, GS 14 Gavioli, M 07; 24 Gobira, PHN 41; 48; Godin, AM 39 Goes, AM 77 Gomes, DA 77 Gomes, ERM 13; 17; 24 Gomides, LF 36; 39 Gonçalves, DF 44; 47 Gouvêa dos Santos, R 06; Gouvêa, MP 69 Grabe-Guimarães, A 25 Greco, L 24 Guatimosim, S 07; 13; 17; 18; 20; 21; 22; 24; Guerra, JC 78 Guidine, PAM 47; 60 Guimarães, DA 13 Guimaraes, GB 72 Guimarães, HN 25 Guimaraes, PS 29 Guimarães, TMPD 80 Gusmão, ID 42; 43 Haibara, AS 23; 26 Heringer, A 30; 58 Ianzer, DA 68; 81 Jorge, VO 52 Kangussu, LM 10; 16 Kato, KC 01; 08; 25 Klein, A 36; 39 Kushmerick, C 52; 59; 61; 62; 63 Ladeira, LO 22 Ladeira, MS 22 Lara, AA 07; 13 Lautner, RQ 71 Lazaroni, TLN 51 Leite, HR 53; 54; 55 Leite, LHR 72 Leite, MF 21

Lemos, VS 22; 27; 31; 53; 56; 79; 83 Librelon, BCF 03; Lima, AM 07; 66 Lima, CX 10 Lima, LDC 82 Lima, MP 56; 79 Lima, RF 24 Limborço Filho, M 57 Limna, MP 70 Lopes, GC 64 Lopes, MTP 74; 75; 76; 80; 84 Lourenço, N 32 Machado, FB 71 Maciel, NR 25 Mariano, MCF 83 Mario, EG 30; 58 Marliére, ALL 70 Marques, FD 28 Massensini, AR 44; 47; 53; 54; 55; 60; 73 Matsui, TC 36; 39 Medeiros, DC 05; 35; 46; 55; 60 Melo, EG 73 Melo, MB 24; 71 Mendes, EMAM 60 Mendes, IMC 06; Mendes, VC 31 Mendes, W 30; 58 Mesquita, MBS 47; 64 Miranda, LF 04; Montalvão, BS 56 Montandon, GG 77 Monteiro, BMM 43 Moraes, E 61 Moraes, MFD 05; 35; 46; 47; 55; 60; 64; 65 Moraes-Santos, T 47; 49 Morais-Teixeira, E 08; Morcatty, TQ 12 Moreira, CCL 30; 58 Moreira, FA 05; 45; 48; 68 Motta, DF 56 Motta, GR 73 Moura, SAL 82 Mourão, FAG 53; 54; 55; 60 Muller-Ribeiro, FCF 67 Nascimento, KKF 72 Naves, LA 61, 62; 63 Neves, FTP 02; Nicoli, RJ 38 Nitzsche, J 65 Nogueira, Y 70 Novais, MVM 30; 58 Noviello, MLM 33 Nunes, SLA 17 Oliveira, AC 05; Oliveira, LB 60 Oliveira, VR 19 Oliveira-Lima, OC 11; 57 Olivon, VC 16 Ortiz, NR 41; Oscar, CG 66 Parreira, AB 17; 18 Passos, AGS 19 Paula, I 10 Pedro, PS 70 Pereira, GS 42; 43; 44; 49; 51; 53; 54; 55; 65 Pereira, SRC 50 Perez, AC 14 Pesquero, JL 06; 56; 70; 79 Pinheiro, MVB 22 Pinho, JF 27; 56 Pinho, V 15; 27; Pinto, MCX 11

Prado, LB 81 Prado, MAM 44; Prado, VF 44; Proudfoot, AEI 34 Rabello, A 08; Raslan, ACS 42 Reis, AM 69; 71 Reis, H. J. 54 Reis, J 78 Reis, PG 25 Resende, LC 37 Resende, RR 07; 13; 20; 22; 24 Rezende, BA 31 Rezende, GHS 05; 46 Ribeiro, AM 50 Ribeiro, R.R 09; Rocha, MA 82 Rocha-Resende, C 20 Romeiro, CFD 78 Romero, TRL 40 Rosa, LC 41 Rotman, G 28 Russo, RC 81 Rusu, SI 59 Saito, VM 68 Salas, CE 75; 76; 80; 84 Santos, IC 70 Santos, RAS 13; 17; 24; 28; 30; 45; 51; 66; 68; 71 Savergnini, SQ 28; Schettini, DA 09; Schreihofer, AM 29 Scio, E 78 Silva, ACA 76; 80 Silva, CMO 73 Silva, GA 28 Silva, GC 14; 79 Silva, JF 27; 31; 53 Silva, MSB 69 Silva, NT 23; 26 Silva, TA 12 Silva, TR 70 Silva-Barcellos, NM 25 Silva-Oliveira, EM 49 Silveira, KD 10 Silveira, NA 63 Simões, HG 56 Soares, MA 06; Soares, DD 58 Souza, DG 10; 12 Souza, JNS 83 Souza-Fagundes, EM 04; 78 Stehling, LFO 74; 75 Tagliati, CA 84 Tavares, FA 22 Tavares, LD 10 Teixeira, MM 10; 12; 15; 33; 34; 38; 81 Valadão, DF 12 Vasconcelos, AC 84 Vasconcelos, CML 19 Vaz, GC 45 Viana, CTR 75; 76; 80 Viana, R 53 Vidal, AT 25 Vieira, AT 38 Vieira, RP 35 Vilela, LR 05; Villalba, MIC 76, 84; 80 Vitarelli-Silva, T 57 Williams, S 47 Xavier, CH 66; 68 Zaretsky, DV 67 Zauberman, A 28

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XVIII Encontro de Pesquisa em Fisiologia e Farmacologia · 2010-12-02 · Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas Fisiologia e Farmacologia XVIII Encontro de Pesquisa