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© Universidad Industrial de Santander
Todos los derechos reservados. Se autoriza la reproducción del material únicamente con fines educativos y se prohíbe para su uso
comercial.
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1. LAS BACTERIAS
Las bacterias pertenecen a las células procariotas, es decir son microorganismos
unicelulares carentes de núcleo, su ADN esta disuelto en el citoplasma y solo
cuenta con ribosomas como organelos que le sirven para la fabricación de
proteínas. Cuentan con una pared de polisacáridos que le da rigidez y
protección, el más importante de ellos es el péptidoglucano que sirve de
fundamento para clasificar las bacterias según la tinción.
1.1 TINCIÓN:
Según la tinción de GRAM(autor) las bacterias se clasifican en: gram positivas
las que tiene mayor cantidad de péptidoglucano y por tanto toman el color
violeta y gram negativas las que tiene menor cantidad e péptido glucano
tomando el colorante de contraste que es la safranina de color rosado.
En el siguiente video tomado de YouTube se explica n todos los pasos de la
coloración de gran que se realizara en el laboratorio de bacterias.
https://youtu.be/nqzDzuwOvXo
1.2 . MORFOLOGIA
Las bacterias toman diferentes nombres de acuerdo a su morfología:
a. Cocos de forma esférica
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Estos a su vez se pueden agrupar en pares llamados diplocos, en grupos de 4
llamados tétradas, en cadenas llamados estreptococos, en racimos llamados
estafilococos o grupos de 8 llamados sarcinas.
Para profundizar sobre morfología y tinción bacteriana puede consultar
las diapositivas sobre clasificación bacteriana y el Manual de práctica de
microbiología pag20-27 y 78, disponibles en la plataforma Moodle unidad
uno).
1.3 NORMAS DE BIOSEGURIDAD PARA LABORATORIO MICROBIOLOGÍA
Para la realización de los laboratorios de microbiología se deben tener
en cuenta las siguientes normas de bioseguridad:
Presentarse con ropa adecuada como pantalón largo y zapatos cerrados.
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Antes de ingresar al laboratorio dejar sus objetos personales en el locker
y solo llevar a la práctica cuaderno y lapicero.
Colocarse los elementos de barrera como bata, guantes, tapabocas,
gafas, gorro antes de ingresar al laboratorio.
En el siguiente video se muestras las medidas de bioseguridad en el
laboratorio de microbiología para evitar accidentes de riesgo biológico.
https://www.youtube.com/watch?v=g9cmQXjpRAI
1.4 TOMA DE MUESTRAS
En el tracto respiratorio superior se encuentran una gran cantidad de
bacterias que hacen parte de la microbiota normal, entre ellas tenemos
estafilococos, estreptococos, neisserias, Moraxella catarrhalis. Algunas
de ellas pueden ser potencialmente patógenas como el Streptococo
pyógenes, Streptococo pneumoniae, los cuales pueden ser trasmitidos de
persona a persona o a los medicamentos a través de secreciones
eliminadas por la tos o el estornudo, de ahí la importancia de una
adecuada higiene personal y de la utilización de los elementos de barrera
en el caso de sufrir un tipo de infección en las vías respiratorias.
El laboratorio de bacterias se hace con la finalidad de identificar esas
bacterias presentes en secreciones de la faringe, oído, y nariz y tomar las
medidas preventivas para evitar su diseminación.
Materiales y métodos para el laboratorio de toma de muestras y cultivo
de secreciones del tracto respiratorio superior:
Los materiales que vamos a emplear en esta práctica son:
Láminas portaobjeto
Marcador de vidrio sharpie
Hisopos de algodón
Mechero de bunsen
Agar sangre
Agar mckonkey
Coloración de gran que incluye: violeta de genciana, Lugol de gram,
alcohol acetona, safranina.
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Incubadora.
Los métodos empleados para el diagnóstico de bacterias en el tracto
respiratorio superior se pueden observar en los siguientes videos:
1-El video presentado a continuación nos muestra el procedimiento para la
toma de secreciones de la faringe para observar la microbiota colonizante
en esa zona
https://www.youtube.com/watch?v=6g0PYqbTA-Y
2- Para la observación de las bacterias presentes en la cavidad nasal debemos
tomar la muestra del frotis nasal cuyo procedimiento lo podemos ver en el
siguiente video.
https://www.youtube.com/watch?v=35JDyhm1hFg
3- Para detectar que bacterias se encuentran en el conducto auditivo externo
se debe tomar una muestra de frotis de oído los pasos para la toma de la
muestra se muestran a continuación en el siguiente video.
https://www.youtube.com/watch?v=VKbpvK3GByc
Materiales y métodos: Se puede hacer una animación donde se muestren
los elementos de la práctica para ello se pueden observar en el manual
de práctica de microbiología en formato digital por Altagracia y
colaboradores, paginas, 7,9,10,11,12,15,17,18 y de la 38-46 que se
encuentra en la plataforma Moodle unidad uno.
https://es.slideshare.net/Altajimenez/manual-digital-de-laboratorio-
de-microbiologia
Las bacterias identificadas en este laboratorio servirán para realizar la
prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos en el laboratorio número
4.
El día programado para el laboratorio número 4 se tomará una colonia de
las bacterias halladas en el laboratorio 1 y se le hará una dilución al 0.5
según la escala de Mcfarland. Posteriormente se tomará un hisopo y se
humedecerá en la dilución y se hará la siembra masiva en el agar Muller
Hinton, sobre el cual se colocarán sensidiscos con antibióticos para
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determinar la resistencia o susceptibilidad de la bacteria a los
antibióticos.
En el siguiente artículo de la OMS se menciona cómo ciertas bacterias se
están haciendo cada vez mas resistentes a los antibióticos y se establecen
medidas preventivas que el Regente de Farmacia puede promulgar en la
comunidad para reducir ese fenómeno. https://www.who.int/es/news-
room/fact-sheets/detail/resistencia-a-los-antibi%C3%B3ticos
Para la prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos consultar el
manual práctico de bacteriología clínica por Judith Velasco y
colaboradores páginas 25-29, que se encuentra en la unidad dos y que
corresponde al laboratorio 4.
https://www.academia.edu/8609808/Manual_práctico_de_bacteriología
_clínica
Resumen o Conclusión
Las bacterias son un grupo de microorganismos que pertenecen a las células
procariotas, muchas de ellas se encuentran como flora o biota normal del cuerpo
humano, otras se adquieren a través del aire y pueden producir enfermedades
infecciosas o contaminar los alimentos o los medicamentos si no mantenemos
unas medidas de higiene en los hogares y en el servicio farmacéutico como
lavado previo de manos a la hora de la dispensación y un adecuado
almacenamiento
Es importantes como regentes de farmacia conocer la forma como se adquieren
estos microorganismos y así evitar el deterioro de los medicamentos que pueden
llegar a causar alteraciones graves a la salud de los consumidores. Así mismo el
uso irracional de los antibióticos puede conducir a una generación de
multiresistencia como es el caso de las superbugs.
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2. LOS PARÁSITOS
2.1 TAXONOMIA
Los parásitos son organismos que viven sobre o dentro de otros llamados
huéspedes. Según la taxonomía se clasifican en dos reinos: el reino Protista al
que pertenecen los protozoarios y el reino animalia al que pertenecen los
helmintos.
Los protozoarios son parásitos unicelulares que se adquieren por vía fecal oral,
por vectores, por contacto íntimo o por vía inhalatoria, ingresan al organismo
en forma de quiste que es la forma infectante y luego se transforman en
trofozoíto que es el patógeno, produciendo diferentes patologías como por
ejemplo: la amebiasis intestinal producida por la Ehntamoeba hystolítica o la
Gyardia lamblia, la tricomoniasis producida por la Trichomona vaginalis, la
toxoplasmosis por el Toxoplasma gondii, la leishmaniasis por la Leishmania
brasiliensis y la enfermedad de Chagas por el Trypanosoma Cruci, entre otras
más.
CUADRO COMPARATIVO DE LAS PARASITOSIS HUMANAS MAS FRECUENTES
AGENTE VÍA DE TRANSMISIÓN INFECCIÓN
Entamoeba hystolítica Fecal oral Colitis amebiana,
absceso hepático
Gyardia lamblia Fecal oral Diarrea del viajero
Trichomona vaginalis Fecal oral Vaginitis
Toxoplasma gondii Heces del gato, carne de
ganado, transfusión
sanguínea, transplacentaria
Coriorretinitis
Leishmaniasis Picadura de Lutzomia Ulceras en piel, hepato y
esplenomegalia
Tripanosoma cruzi Picadura del pito cardiomegalia
Plasmodium vivax Picadura de mosquito
anopheles
malaria
Taenia solium Fecal oral, consume de
carne mal cocida
Teniasis
Cisticercosis
Faciola hepática Consumo de peces hepatomegalia
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Los helmintos son parásitos pluricelulares que se adquieren por vía fecal oral,
por contacto directo a través de la piel, o por vía inhalatoria. Ingresan en forma
de huevos que se encuentran en alimentos contaminados. O al sacudir las ropas
de cama por vía inhalatoria, las larvas penetran la piel al caminar descalzos
sobre la tierra. Los helmintos se clasifican en dos grupos los nematelmintos que
son de cuerpo cilíndrico como el Ascaris lumbricoides, Uncinarias, Strongyloides
stercoralis, Enterobius vermicularis, o los de cuerpo plano como la Taenia solium
y la Faciola hepática.
Para mayor información sobre las parasitosis intestinales y tisulares dirigirse a
los siguientes link:
https://www.minsalud.gov.co/sites/rid/Lists/BibliotecaDigital/RIDE/VS/PP/E
T/encuesta-nacional-de-parasitismo-2012-2014.pdf
https://www.elsevier.es/es-revista-offarm-4-articulo-parasitosis-comunes-
internas-externas-consejos-X0212047X11247484
2.2 EXAMEN COPROLOGICO
El examen coprológico es una prueba que se realiza en heces fecales , las cuales
se recolectan en un recipiente limpio y seco y se deposita aproximadamente un
gramo en el recolector comprado en drogueria. Con esta prueba se pueden
observar los diferentes parásitos intestinales.
La técnica y los materiales empleados se describe en el siguiente video:
https://www.youtube.com/watch?v=RWU0zU52YJo
1.3 TRATAMIENTO DE LAS PARASITOSIS.
El tratamiento de las infecciones por parásitos depende de la clase:
Para los protozoarios se emplean medicamentos como el metronidazol,
secnidazol tinidazol y para los helmintos el pamoato de pirantel,
E#chinococcus granulosus
Fecal oral Quiste hidatídico
Wuchereria bancrofti Picadura de mosquito culex
elefantiasis
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albendazol mebendazol. Para conocer las dosis de cada uno de los
medicamentos empleados en el tratamiento de las parasitosis pueden
consultar en el siguiente link de la página 492 a la 520:
https://www.clinicalascondes.cl/Dev_CLC/media/Imagenes/PDF%20rev
ista%20m%C3%A9dica/2014/3%20abril/12-Dr.Apt.pdf
2.4 MEDIDAS PREVENTIVAS
Para evitar contraer una enfermedad parasitaria se deben adoptar medidas
preventivas: Hacer una animación tomando como guía el siguiente rotafolio de
la página 17 a la 21:
https://www.paho.org/nic/index.php?option=com_docman&view=download&c
ategory_slug=documentos-estrategicos&alias=661-rotafolio-de-prevencion-de-
parasitos-intestinales&Itemid=235
Resumen o Conclusión
Los parásitos son microorganismos pertenecientes a las células eucariotas,
según la clasificación taxonómica podemos encontrar dos grupos; los
protozoarios pertenecientes al reino protista que son unicelulares y los
helmintos pertenecientes al reino animalia que son pluricelulares.
La inadecuada manipulación de excretas e higiene individual pueden contaminar
las aguas y los alimentos que el hombre consume produciendo las enfermedades
parasitarias. Para el diagnóstico de las parasitosis intestinales se realiza el
examen coprológico con el cual podemos saber la clase de parásito que está
produciendo la enfermedad y poder así indicar el tratamiento adecuado.
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3. LOS HONGOS
Los hongos pertenecen al reino fungi, cuyas especies habitan en el agua, suelo,
materia orgánica en descomposición. Se diferencian de las bacterias por ser
células eucariotas con núcleo definido rodeado por una membrana nuclear,
organelos citoplasmáticos, y una pared celular compuesta por polisacáridos
como glucano, manano y quitina.
Los hongos pueden ser saprofitos (se alimentan de materia orgánica en
descomposición), o parásitos obligados (se alimentan de materia viva causando
daño).
3.1 CLASIFICACION GENERAL DE LOS HONGOS
La clasificación general los divide en dos formas fundamentales:
1. Levaduras
Son unicelulares, esféricas o elípticas, se reproducen por gemación dando
origen a la formación de pseudohifas. En medios de cultivo se desarrollan
dando colonias pálidas u opacas la mayoría de color crema.
2. Mohos
Son pluricelulares, formados por unos filamentos llamados hifas que se
entrelazan formando una estructura llamada micelio vegetativo que
penetra en la superficie del medio de cultivo o difunden en la superficie
absorbiendo nutrientes y el micelio aéreo que se proyecta por encima de
la superficie hacia el aire y lleva las estructuras reproductoras del hongo
llamadas esporas.
3. Setas
Pertenecen a la clase de los basidiomicetos que se caracterizan por tener
una hifa dicariota que forma un micelio llamado basidiocarpo y en los
extremos se forman los basidios que son células de gran tamaño en forma
de bastón que se unen formando una especie de sombrero.
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3.1.2 Medios de cultivo para hongos
La mayoría de los hongosse desarrollan en medios que contengan hidratos de
carbono (glucosa, maltosa, sacarosa, almidón, celulosa).
Hay tres tipos de medios de cultivos para hongos:
a. Medios naturales: trozos o infusiones de frutas, vegetales, granos de
cereales o tejidos de animales.
b. Medios semisintéticos: Extractos de plantas, peptonas, agar y otros
compuestos.
c. Medios sintéticos: de composición química definida. El más usado es el
agar Sabouraud, compuesto por pluripeptona, glucosa, agar y agua.
3.2 HONGOS CONTAMINANTES
Entre las medidas preventivas para evitar la contaminación de hongos
con alimentos están:
Al servir los alimentos, manténgalos cubiertos para prevenir el exponerlos
a las esporas de hongos en el aire.
Use una envoltura de plástico para cubrir los alimentos que usted quiere
que se mantengan húmedos – como frutas y vegetales frescos o picados y
ensaladas de vegetales verdes y mixtos.
Vacíe las latas abiertas de alimentos perecederos en envases limpios y
refrigérelos inmediatamente.
No deje ningún alimento perecedero fuera del refrigerador por más de 2
horas.
Utilice los sobrantes de comida dentro de 3 a 4 días para que el hongo no
tenga oportunidad de crecer.
Mantener Los niveles de humedad por debajo del 50%
El lugar de almacenamiento de los medicamentos debe ser mínimo 20 cm
sobre el suelo y no deben estar cerca de muros o paredes.
Las paredes deben tener pintura antimoho.
Lavar los baños con productos antifúngicos
No colocar alfombras en baños o sótanos.
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En el siguiente artículo podemos observar cuando se deben usar y cuando
descartar los alimentos contaminados con hongos.
https://www.fsis.usda.gov/wps/wcm/connect/03e22c03-8062-4ca1-a8c2-
fe94bafc0222/Molds_Are_They_Dangerous_SP.pdf?MOD=AJPERES
En la farmacia se debe tener la precaución de no tener alimentos contaminados
con hongos ya que pueden afectar a los medicamentos en el siguiente artículo
se puede observar cómo se ven afectados los medicamentos por este hecho
http://www.minsa.gob.pa/sites/default/files/alertas/nota_informativa.pdf
3.3 CASIFICACIÓN HONGOS SEGÚN OBSERVACIÓN
De ellos se identificarán de acuerdo a las características macroscópicas y
microscópicas los siguientes:
Penicillium: Las colonias son de textura lanosa, algodonosa, al inicio verdes y
luego blancas
Microscópicamente las hifas son septadas hialinas con conidióforo simple o
ramificado (1), ramificaciones secundarias llamadas métulas (2), las cuales
llevan las fiálides en forma de botella (3) y de ellas salen las conidias de forma
redonda (4).
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Aspergillus fumigatus: La colonia es aterciopelada, afelpada, inicialmente
blanca y a los 7 días verde-azulada
Microscópicamente los conidióforos son no ramificados de pared gruesa,
hialinos, rugosos, las vesículas son globosas y producen fiálides uni o biseriadas
a su alrededor...
Rhizopus: Inicialmente las colonias son blancas y al cuarto día cuando alcanzan
la madurez se tornan de color gris oscuro, son vellosas, algodonosas y secas.
Microscópicamente presenta un micelio macrosifonado (5-10µm), hialino,
cenocítico. Los esporangióforos son largos y no se ramifican y culminan en
esporangios de gran tamaño que contienen las esporangiosporas.
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Syncephalastrum spp: Las colonias son blancas los primeros días y se tornan
grisáceas, planas y vellosas con el paso de los días.
Microscópicamente: Presenta un micelio macrosifonado cenocítico hialino, los
esporangioforos son cortos y terminan en una vesícula que contiene los
mesosporangios tubulares.
Geotrichum: Presenta colonias de color blanco húmedo levaduriforme
Microscópicamente: Contiene hifas verdaderas, gruesas que se tabican
formando numerosos artroconidios hialinos rectangulares.
Técnica para la observación macroscópica y microscópica de hongos
La técnica empleada para la observación de los hongos en el laboratorio es la
técnica con azul de lactofenol, que consiste en colocar una gota del reactivo en
esporangioforo
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una lamina y colocar en ella una porcion del hongo encontrado en los alimentos
lo invito a observar el procedimiento en el siguiente video.
Ver el siguiente video tomado de YouTube: https://youtu.be/5hQSreyd--I
3.4 Utilidad de los hongos en la industria farmacéutica
En la producción de nuevos antibióticos y el mejoramiento de los ya existentes
ver : https://www.infosalus.com/farmacia/noticia-hongos-tienen-fuerte-
potencial-desarrollo-nuevos-antibioticos-20170421144231.html
Como tratamiento para el cáncer y las enfermedades pulmonares ver:
https://www.cancer.gov/espanol/cancer/tratamiento/mca/pro/hongos-pdq
En el tratamiento de infecciones del tracto genitourinario y gastrointestinal.
Ver:
http://www.bdigital.unal.edu.co/11550/7/Anexo%20Micoterapia.2013.pdf
Resumen o Conclusión
Los hongos son células eucariotas, se desarrollan mejor en zonas húmedas y
oscuras, se clasifican en unicelulares como las levaduras que son empleadas en
la industria alimenticia en la elaboración de pan, vino y cerveza. Los
pluricelulares son los mohos cuyas colonias son algodonosas o pulverulentas y
suelen contaminar alimentos y medicamentos cuando los dejamos mal
almacenados. Existen otros mohos que son de gran importancia en la industria
farmacéutica y en la medicina para la elaboración de medicamentos como
antibióticos y otros con propiedades curativas para las infecciones respiratorias
y el cáncer. El otro grupo de los pluricelulares pertenece a las Setas llamadas
los hongos de sombrero, algunas de ellas son comestibles como el champiñón y
otras las de colores más vistosos son venenosas.
Los hongos necesitan de compuestos orgánicos para su crecimiento, es por eso
que si dejamos alimentos expuestos al medio ambiente estos aprovechan para
obtener la fuente de carbono que necesitan y multiplicarse en ellos formando
colonias en ocasiones de color blanco, negro, gris o verde.
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En el laboratorio observaremos los hongos en los alimentos dejando previamente
los alimentos expuestos al ambiente por un periodo de 15 días y posteriormente
se tomará parte de la colonia a la que se le agregará unas gotas del reactivo
azul de lactofenol para observar al microscopio.
