Uji penapisan fitokimiaA.KOMPETENSI
setelah melakukan percobaan ini diharapkan mahasiswa dapat
memahami beberapa aspek dasar dalam menentukan kandungan metabolit
sekunder di dalam objek tumbuhan . pada percobaan ini akan
dilakukan uji alkaloid, saponin, flavonoid, tannin, kuinon dan
steroid/triterpenoid
B. DASAR TEORI
Senyawa kimiia dalam tumbuhan dapat diklasifikasi menurut
beberapa cara, antara lain atas dasar alur pembentukannya dalam
tumbuhan, struktur kimia dan efek atau aktivitas farmakologinya.
Untuk analisis kandungan kimia dalam tumbuhan dilakukan
langkah-langkah sebagai berikut :
1. determinasi dan telaah ekologi serta penyebaran tumbuhan
2. karakterisasi simplisia
3. penapisan golongan kimia
Pada percobaan ini, dilakukan penapisan tumbuhan obat Indonesia.
Golongan senyawa kimia yang akan ditentukan antara lain : alkaloid,
saponin, flavonoid, tannin, kuinon, dan steroid/triterpenoid.
Beberapa metode penapisan kimia dapat digunakan untuk
mengidentifikasi golongan kimia dalam simplisia nabati. Salah satu
diantaranya adalah cara yang dikemukakan oleh fransworth (1996),
pada dasarnya penapisan harus dilakukan dengan metode cepat,
sederhana, memerlukan peralatan sedikit, selektif untuk suatu
golongan kimia, relative peka dan apabila mungkin dapat member
informasi tentang ada atau tidaknya senyawa spesifik yang berasal
dari golongan kimia yang sedang diidentifikasi .
C. ALAT
Krus porselin, corong gelas, pipet tetes, tabung reaksi, rak
tabung reaksi, gelas beker 250 ml, plat tetes, Bunsen, kapas,
corong pisah.
D. BAHAN
Ammonia 25%, kloroform, HCl, pereaksi Dragendorg, pereaksi
Meyer, Serbuk Mg, amil alkohol, larutan FeCl 1%, larutan gelatin,
pereaksi steasny, larutan NaOH 1M, anhidrida asam asetat, asam
sulfat pekat.E. CARA KERJA
1. Uji Alkaloid
Ditimbang 5 g serbuk simplisia dilembabkan dengan 5mL ammonia
25% lalu digerus dalam krus porselin. Setelah itu, hasil gerusan,
dituang 20 mL kloroform digerus kuat-kuat dan disaring. Untuk
pemeriksaan alkaloid, 10 mL larutan organic diekstraksi 2x dengan
larutan asam klorida (1:10). Sebanyak 5 ml larutan masing-masing
dituang ke dalam 2 tabung reaksi. Keberadaan alkaloid diuji dengan
pereaksi dragendorf (endapan merah) maupun meyer (awan putih).
Amati yang terjadi
2. uji saponin
Ditimbang 5 g serbuk simplisia didihkan dalam 100 mL air selama
5 menit, lalu disaring dalam keadaan panas , selanjutnya 10 mL
larutan tersebut dikocok kuat-kuat secara vertikal selama 10 detik.
Amati apa yang terjadi. Setelah kurang lebih 10 menit, tetesi
dengan asam klorida 2N (untuk menguji kestabilan)
3. uji flavonoid
Sebanyak 5 mL dari larutan (2) ditambahkan serbuk magnesium, 1
mL asam klorida ( gas H2O) pekat dan 2 mL amilalkohol (polar),
dikocok kuat dan dibiarkan memisah. Amati apa yang terjadi
4. uji tanin/senyawa fenolik (coklat kehitaman)Ditimbang 10 g
srbuk simplisia dididihkan dalam 10 mL air selama 5 menit, kemudian
didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dibagi 3. Kedalam
larutan pertama ditambahkan larutan besi (III) klorida 1 % (atom
pusat). Filtrat ke dua ditambah gelatin. Setelah itu ditambahkan
pereaksi steasny untuk membuktikan keberadaan tannin katekat.
Endapan disaring, filtratnya ditambahkan natrium asetat hingga
jenuh, kemudian ditetesi larutan besi (III) klorida 1% untuk
menunjukkan keberadaan tannin galat.
5. uji kuinon ( warna merah )Ditimbang 1 g serbuk sampel
dididihkan dalam 10 mL air selama 5 menit, kemudian didinginkan dan
disaring, ke dalam 5 mL filtrat hasil penyaringan ditambahkan
larutan Na0H 1 N (deprotonasi). Kejadian apa yang menunjukkan
adanya kuinon?6. uji steroid dan triterpenoid
Ditimbang sebanyak 5 g serbuk/ekstrak dimaserasi dengan 20 mL
eter (non polar) selama 2 jam. Kemudian disaring. Selanjutnya 5 mL
filtrat diuapkan dalam cawan penguap sampai kering , ke dalam
residu diberi 2 tetes anhidrida asam asetat (membentuk kompleks
asetil steroid) dan 1 tetes asam sulfat pekat (mendetruksi).
Terbentuknya warna biru ungu menunjukkan adanya steroid , sedangkan
terbentuknya warna merah menunjukkan adanya triterpenoid.
