Upload
others
View
9
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
UJI HA(Hemaglutination Assay)
Laboratorium Mikrobiologi dan ImunologiVeteriner
Fakultas kedokteran hewanUniversitas brawijaya
Pengertian
Uji serologis untuk mendeteksi mikrooganisme yang memiliki glikoprotein permukaan hemaglutinin dan sertauntuk mengukur titer mikroorganisme tersebut.
Ag bentuk partikel direaksikan dengan Ab spesifikmembentuk Aglutinasi
Faktor yang mempengaruhi: Muatan listrikprotein,molaritas medium,vaksositas media,danfenomena prozone
TujuanUntuk mengukur titer mikroorganisme (ag) yaitu
kemampuan m.o untuk menginfeksi yang ditandaidengan adanya hemaglutinasi eritrosit
Mengetahui keberadaan virus yang mampumenghemaglutinasi RBC.
Prinsip kerjaMikroorganisme yang memiliki glikoprotein
permukaan hemaglutinin dapat dideteksi melaluiadanya reaksi eritrosit yang mengalamihemaglutinasi setelah diberi antigen.
Alat danBahan
ALAT
Mikropipet berbentukU
Mikropipet
Yellow dan Blue Tip
Plastic Wrap
Mechanical Vibrator
BAHAN
PBS Steril
Antigen : ND
Eritrosit Ayam 0.5%
LangkahKerja
→Diisi sumuran pada mikroplet berbentuk u (A1-A12) dengan PBS sebanyak 25μl
→Dimasukan antigen sebanyak 25μl ke sumuranA1
→Dilakukan pengenceran berseri dengan caramengambil 25μl antigen dari sumuran pertama(A1) yang dilanjutkan ke sumuran berikutnya(A2) sampai sumuran akhir (A11), Lalu sisa 25μl dibuang.
→Ditambah semua sumuran dengan eritrosisayam 0.5% sebanyak 25 μl.
→Dicampur eritrosit dan antigen menggunakanmechanical vibrator, lalu diinkubasi pada suhuruangan 30 menit. (Sumuran A12 berfungsisebagai kontrol negatif yang hanya berisi PBS dan eritrosis sehingga tidak terjadi aglutinasi)
→Dibaca titer antigen setelah 30 menit
Hasil
Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan ada aliran sel darah merah (tilt and flow)
Hemaglutinasi terlihat sebagai aglutinat, berupa lapisaneritrosit secara merata pada dasar sumuran denganpenjernihan dari cairan bagian atas, dan tidak terjadipengendapan eritrosit (berbentuk titik) di tengah dasarsumuran.
InterpretasiHasil
- Sumuran 1 sampai 6 menunjukan hasil positif (terjadiaglutinasi
- Sumuran 7 sampai 12 menunjukan hasil negatif
tilt and flow
InterpretasiHasil
InterpretasiHasil