UJI AKTIVITAS AMILASE

Mega Trinova D, Rico S, Nur Fitriatuzzakiyyah, Ani Hanifah, Hendita F

Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran

megatrinovadurika@gmail.com

ABSTRAK

Enzim merupakan molekul biopolimer yang tersusun dari serangkaian asam amino

dalam komposisi dan susunan rantai yang teratur dan tetap. Salah satunya adalah

amilase yang dapat memecah ikatan pada amilum hingga terbentuk maltosa.

Percobaan ini bertujuan untuk menentukan aktivitas amilase dari fraksi protein.

Dalam percobaan ini bahan yang digunakan berupa fraksi protein, kalium iodide,

HCl, Iodin, Kalium dihidrogen fosfat dan dikalium hydrogen fosfat. Pengukuran

aktivitas amilase dilakukan berdasarkan kepada kemampuan enzim tersebut dalam

mengurai substrat (polisakarida) menjadi monosakarida dalam bentuk gula pereduksi,

pada satuan waktu tertentu. Proses pengujian aktivitas amilase dilakukan dengan

pembuatan kurva standar pati (duplo),uji aktivitas amilase pada variasi suhu (duplo)

dan uji aktivitas amilase pada variasi pH (duplo). Hasil yang didapatkan berupa suhu

lingkungan dan pH sangat mempengaruhi aktivitas enzim amilase, dari percobaan

aktivitas amilase yang optimal terdapat pada suhu 270C dengan konsentrasi pati

terbesar berada pada fraksi 3 yaitu 1,1257 sedangkan pada variasi pH aktivitas

amilase optimal terdapat pada pH 4,5 dengan konsentrasi pati terbesar berada pada

fraksi 3 yaitu 1,780.

Kata kunci : Absorbansi, aktivitas amilase, kurva standar, pati

ABSTRACT

Enzymes are molecules composed of a series biopolymer amino acids in the

composition and arrangement of chain constant and regular. One is the amylase that

can break bonds in the starch to form maltose. This experiment aims to determine the

amylase activity of the protein fraction. In this experiment, the materials used in the

form of a protein fraction, potassium iodide, HCl, iodine, potassium dihydrogen

phosphate and hydrogen phosphate dikalium. Measurement of amylase activity is

based on the ability of these enzymes in breaking down the substrate

(polysaccharides) into monosaccharides in the form of a reducing sugar, at a certain

time unit. Amylase activity test process is done by making the standard curve starch

(Duplo), amylase activity test at temperature variations (Duplo) and amylase activity

test at various pH (Duplo). Results obtained in the form of environmental temperature

and pH affect the activity of the enzyme amylase, amylase activity of optimal

experiment contained at a temperature of 270C with the largest starch concentrations

are in the third fraction is 1.1257 while the optimum pH variation contained amylase

activity at pH 4.5 with starch concentration is highest in fraction 3 is 1.780.

Keywords: Absorbance, amylase activity, standard curves, starch

PEDAHULUAN

Enzim merupakan protein yang

berfungsi sebagai biokatalis dalam sel

hidup. Kelebihan enzim dibandingkan

katalis biasa adalah (1) dapat

meningkatkan produk beribu kali lebih

tinggi; (2) bekerja pada pH yang relatif

netral dan suhu yang relatif rendah;

dan (3) bersifat spesifik dan selektif

terhadap subtrat tertentu. Enzim telah

banyak digunakan dalam bidang

industri pangan, farmasi dan industri

kimia lainnya. Dalam bidang pangan

misalnya amilase, glukosa-isomerase,

papain, dan bromelin, sedangkan

dalam bidang kesehatan contohnya

amilase, lipase, dan protease. Enzim

dapat diisolasi dari hewan, tumbuhan

dan mikroorganisme (Azmi, 2006).

Enzim bekerja dengan cara

menempel pada permukaan molekul

zat-zat yang bereaksi dan dengan

demikian mempercepat proses reaksi.

Percepatan terjadi karena enzim

menurunkan energi pengaktifan yang

dengan sendirinya akan mempermudah

terjadinya reaksi. Sebagian besar

enzim bekerja secara khas, yang

artinya setiap jenis enzim hanya dapat

bekerja pada satu macam senyawa atau

reaksi kimia. Hal ini disebabkan

perbedaan struktur kimia tiap enzim

yang bersifat tetap. Sebagai contoh,

enzim -amilase hanya dapat

digunakan pada proses perombakan

pati menjadi glukosa (Taufik, 2007).

Beberapa enzim membutuhkan

baik koenzim maupun satu atau lebih

ion logam bagi aktivitasnya. Pada

beberapa enzim, koenzim atau ion

logam hanya terikat secara lemah atau

dalam waktu sementara pada protein,

tetapi pada enzim lain senyawa ini

terikat kuat, atau terikat secara

permanen yang dalam hal ini disebut

gugus prostetik. Enzim yang

strukturnya sempurna dan aktif

mengkatalisis, bersama-sama dengan

koenzim atau gugus logamnya disebut

holoenzim. Koenzim dan ion logam

bersifat stabil sewaktu pemanasan,

sedangkan bagian protein enzim akan

terdenaturasi oleh pemanasan

(Lehninger, 1982).

Fungsi suatu enzim adalah

sebagai katalis untuk proses biokimia

yang terjadi dalam sel maupun luar sel.

Suatu enzim dapat mempercepat reaksi

108 sampai 1011 kali lebih cepat

apabila reaksi tersebut dilakukan tanpa

katalis. Jadi enzim dapat berfungsi

sebagai katalis yang sangat efisien, di

samping itu mempunyai derajat

kekhasan yang tinggi. Seperti juga

katalis lainnya, maka enzim dapat

menurunkan energi aktivasi suatu

reaksi kimia. Reaksi kimia ada yang

membutuhkan enenrgi (reaksi

endergonik) dan ada pula yang

menghasilkan energi atau

mengeluarkan energi (eksergonik)

(Poedjiadi, 2005).

Menurut Poedjiadi (2005),

faktor-faktor yang mempengaruhi kerja

enzim, antara lain :

1. Konsentrasi enzim, seperti pada

katalis lain kecepatan suatu reaksi

yang menggunakan enzim

bergantung pada konsentrasi enzim

tersebut. Pada suatu konsentrasi

substrat tertentu, kecepatan reaksi

bertambah dengan bertambahnya

konsentrasi enzim.

2. Konsentrasi substrat, pada

konsentrasi substrat rendah, bagian

aktif enzim ini hanya menampung

substrat sedikit. Bila konsentrasi

substrat diperbesar, makin banyak

substrat yang dapat berhubungan

dengan enzim pada bagian aktif

tersebut.

3. Suhu, enzim merupakan suatu

protein sehingga kenaikan suhu

dapat menyebabkan terjadinya

proses denaturasi. Apabila terjadi

denaturasi, maka bagian aktif

enzim akan terganggu dan dengan

demikian konsentrasi efektif enzim

menjadi berkurang dan kecepatan

reaksinya menurun.

4. Pengaruh pH, struktur ion enzim

bergantung pada pH

lingkungannya. Perubahan pH

lingkungan akan berpengaruh

terhadap efektivitas bagian aktif

enzim dalam membentuk kompleks

enzim substrat. Di samping

pengaruh terhadap struktur ion

pada enzim, pH rendah atau tinggi

dapat pula menyebabkan

menurunnya aktivitas enzim.

5. Pengaruh inhibitor, molekul atau

ion yang yang dapat menghambat

reaksi dinamakan inhibitor.

Hambatan merupakan mekanisme

pengaturan reaksi-reaksi yang

terjadi dalam tubuh kita. Inhibitor

ini dapat menyebabkan

menurunnya aktivitas enzim.

Di dalam sel dan lingkungan

sel sekelilingnya, pH dalam keadaan

normal harus tetap sebab adanya

perubahan akan menyebabkan

pergeseran aktivitas enzim. Hal ini

akan mempengaruhi dan mengacaukan

sistem katabolik dan anabolik dalam

sel jaringan (Girindra, 1993).

METODE

Alat dan Bahan

a. Alat

Tabung reaksi, beaker glass 100

mL, batang pengaduk, gelas ukur

25 mL, pipet tetes.

b. Bahan

Pati larut, Kalium dihidrogen

fosfat, Dikalium hidrogen fosfat,

HCl, Iodin, Kalium iodide

Prosedur

1. Gelatinisasi pati larut

Ditambahkan 40 mL pati larut 1%

pada 50 mL aquades mendidih

dalam beaker glass, sambil

diaduk. Digenapkan hingga 100

mL dengan air. Larutan pati

tergelatinisasi dibiarkan dingin

pada suhu kamar (konsentrasi pati

4 mg/mL). Diambil 1 mL larutan

pati tergelatinisasi, diencerkan

hingga 100 mL dengan aquades.

Larutan ini digunakan sebagai

larutan stok (substrat) untuk

pengujian (konsentrasi 0,04

mg/mL = 40 g/mL).

2. Pembuatan kurva standar pati

(duplo)

Tabung reaksi diisi 2,5 mL larutan

stok, 1,75 mL dapar fosfat 0,1 M

pH 5,6 dan 0,75 mL aquades.

Diambil campuran reaksi (variasi

volume, lihat tabel) dan pindahkan

ke tabung reaksi lain berisi 1,5 mL

HCl 10% untuk menghentikan

reaksi. Ditambahkan 1,5 mL

indikator (larutan iodin-kalium

iodida). Absorbansi dibaca pada

620 nm. Blanko dibuat dengan

komposisi yang sama dengan

campuran reaksi kecuali tanpa

penambahan indikator.

3. Uji aktivitas amilase pada

variasi suhu (duplo)

Tabung reaksi diisi 2,5 mL larutan

stok, 1,75 mL dapar fosfat 0,1 M

pH 5,6 dan 0,75 mL ekstrak

amilase. Diinkubasi campuran

reaksi pada 27 dan 57C selama

30 menit. Diambil 1 mL campuran

reaksi dan pindahkan ke tabung

reaksi lain berisi 3 mL HCl 10%

untuk menghentikan reaksi.

Ditambahkan 3 mL indikator

(larutan iodin-kalium iodida).

Absorbansi dibaca pada 620 nm,

konsentrasi pati terhidrolisis

dikalikan dengan faktor

pengenceran. Blanko dibuat.

Jumlah pati terhidrolisis per

satuan waktu ditentukan dari

kurva standar konsentrasi pati

(substrat) terhadap absorbansi.

4. Uji aktivitas amilase pada

variasi pH (duplo)

Tabung reaksi diisi 2,5 mL larutan

stok, 1,75 mL dapar pH 4,5; 5,6

dan 0,75 mL ekstrak amilase.

Diinkubasi campuran reaksi pada

37 C selama 30 menit.3. Diambil

1 mL campuran reaksi dan

pindahkan ke tabung reaksi lain

berisi 3 mL HCl 10% untuk

menghentikan reaksi.

Ditambahkan 3 mL indikator

(larutan iodinkalium iodida).

Absorbansi dibaca pada 620 nm,

konsentrasi pati terhidrolisis

dikalikan dengan faktor

pengenceran. Blanko dibuat.

Jumlah pati terhidrolisis per

satuan waktu ditentukan dari

kurva standar konsentrasi pati

(substrat) terhadap absorbansi.

PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini

praktikan hanya melakukan tiga

prosedur yaitu pembuatan kurva

standar pati (duplo),uji aktivitas

amilase pada variasi suhu (duplo) dan

uji aktivitas amilase pada variasi pH

(duplo).Untuk bahannya sendiri antara

prosedur satu dengan prosedur lainnya

sama ,yang berbeda hanya dalam

berbagai pengujiannya.Yang pertama

mengenai pembuatan kurva standar

pati dimana tabung reaksi diisi dengan

larutan stok,larutan stok adalah larutan

yang berisi satu atau lebih komponen

media yang konsentrasinya lebih besar

dari konsentrasi komponen tersebut

dalam formulasi media akan dibuat

(Manullang et al 2006). Lalu

ditambahkan dapar fosfat dimana

sangat berguna dalam cairan

intraseluler sebab besarnya konsentrasi

fosfat dalam cairan ini beberapa kali

besarnya konsentrasi fosfat dalam

cairan ekstraseluler, dan juga oleh

karena besarnya pH cairan intraseluler

biasanya lebih dekat ke besarnaya pK

sistem dapar fosfat daripada ke

besarnya pH cairan ekstraseluler

(Guyton, 2012) lalu menambahkan

aquades setelah itu di ambil campuran

reaksi dengan variasi volum yang

berbeda dan dipindahkan ke tabung

reaksi lain yang telah berisi HCL 10%

untuk menghentikan reaksi. Suatu

enzim amylase akan terhenti

aktivitasnya sebab enzim memiliki

gugus protein. HCl yang ditambahkan

kedalam larutan sampel akan

mempengaruhi gugus karboksil dalam

enzim sehingga H+ pada HCl akan

mengikat gugus karboksil dan

meningkatkan asam. Berdasarkan hal

tersebut struktur protein yang

seharusnya memiliki gugus yang

berlawanan yaitu negative dan positif.

Dari penambahan H+ ini akan

membuat muatan pada struktur protein

tersebut akan cenderung keduanya

positif maka rantai atau struktur

protein tersebut akan pecah.Dengan

begitu enzim akan inaktif atau tidak

memiliki aktivitas.Lalu di tambahkan

indikator yaitu iodin-kalium iodida

dimana nama lain untuk indikator ini

adalah Larutan iodium Lugol yang

mana sering digunakan sebagai

antiseptik dan desinfektan, untuk

desinfeksi darurat air minum, dan

sebagai reagen untuk melacak pati

dalam uji rutin laboratorium dan

medis. Penggunaan tersebut mungkin

karena larutan ini merupakan sumber

dari unsur iodium bebas yang efektif,

yang mudah dihasilkan dari ekuilibrasi

antara molekul-molekul unsur iodium

dan ion triodida dalam larutan

tersebut.Selain itu, metode yang

digunakan untuk uji amylase ini yaitu

metode caraway-somogyi dimana

menggunakan iodine atau kalium

iodide. Metode ini menggunakan

spektrofotometer dalam pengukuran

penurunan absorbansi pati yang terjadi

karena aktivitas amylase yang

mendegradasi pati pada ikatan

glikosidiknya. Setelah penambahan

iodine-kalium iodide ke dalam larutan

maka iodine-kalium iodide akan

berikatan dengan sisa pati yang tidak

terhidrolisis. Sehingga pada

spektrofotometer dapat terbaca

absorbansinya.Lalu absorbansi dibaca

pada 620 nm.Setelah itu dibuatkanlah

blanko dimana fungsi dari blanko itu

sendiri adalah untuk mengoreksi

serapan yang disebabkan pelarut

pereaksi, sel ataupun pengaturan alat

(febrianto,2013).

Prosedur yang kedua adalah uji

aktivitas amilase terhadap variasi suhu

dimana hanya digunakan dua variasi

suhu saja yaitu suhu 27 dan 57C.

Aktivitas enzim sangat dipengaruhi

oleh suhu. Untuk enzim hewan suhu

optimal antara 35C dan 40C, yaitu

suhu tubuh. Pada suhu di atas dan di

bawah optimalnya, aktivitas enzim

berkurang. Di atas suhu 50C enzim

secara bertahap menjadi inaktif karena

protein terdenaturasi. Pada suhu 100C

semua enzim rusak. Pada suhu yang

sangat rendah, enzim tidak benar-

benar rusak tetapi aktivitasnya sangat

banyak berkurang (Gaman &

Sherrington, 1994). Enzim memiliki

suhu optimum yaitu sekitar 180-230C

atau maksimal 400C karena pada suhu

450C enzim akan terdenaturasi karena

merupakan salah satu bentuk protein.

(Tranggono & Setiadji, 1989).

Suhu yang tinggi akan

menaikkan aktivitas enzim namun

sebaliknya juga akan mendenaturasi

enzim (Martoharsono, 1994).

Peningkatan temperatur dapat

meningkatkan kecepatan reaksi karena

molekul atom mempunyai energi yang

lebih besar dan mempunyai

kecenderungan untuk berpindah.

Ketika temperatur meningkat, proses

denaturasi juga mulai berlangsung dan

menghancurkan aktivitas molekul

enzim. Hal ini dikarenakan adanya

rantai protein yang tidak terlipat

setelah pemutusan ikatan yang lemah

sehingga secara keseluruhan kecepatan

reaksi akan menurun (Lee, 1992).

Yang terakhir adalah pengujian

amilase dengan variasi pH dimana

variasi pH yang di gunakan adalah 4,5

dan 5,6.Salah satu lingkungan yang

berpengaruh terhadap kerja enzim

adalah pH. pH optimal enzim adalah

sekitar pH 7 (netral) dan jika medium

menjadi sangat asam atau sangat

alkalis enzim mengalami inaktivasi

(Gaman & Sherrington, 1994).

Suasana yang terlalu asam atau

alkalis menyebabkan denaturasi

protein dan hilangnya secara total

aktivitas enzim. Pada sel hidup,

perubahan pH sangat kecil. Enzim

hanya aktif pada kisaran pH yang

sempit. Oleh karena itu media harus

benar-benar dipelihara dengan

menggunakan buffer (larutan

penyangga). Jika enzim memiliki lebih

dari satu substrat, maka pH

optimumnya akan berbeda pada suatu

substrat (Tranggono & Sutardi, 1990).

Tiap enzim memiliki karakteristik pH

optimal dan aktif dalam range pH yang

relatif kecil, dalam banyak kasus,

bentuk kurva menandakan dari

keaktifan enzim berbanding pH yang

terkandung di dalamnya (Almet &

Trevor, 1991).

Pengukuran aktivitas amilase

dilakukan berdasarkan kepada

kemampuan enzim tersebut dalam

mengurai substrat (polisakarida)

menjadi monosakarida dalam bentuk

gula pereduksi, pada satuan waktu

tertentu. Akurasi pengukuran dapat

dicapai bila proses deteksi gula

pereduksi berlangsung optimum. Oleh

karena itu dalam menentukan aktivitas

amilase dan glukanase diperlukan

reagen yang bisa menjaga kestabilan

produk hidrolisisnya, dalam percobaan

ini digunakan kalium iodide.

.Kandungan pati pada fraksi

protein merupakan gambaran kuantitas

enzim amilase yang terkandung, dan

berfungsi untuk menentukan aktivitas

enzim amilase dari fraksi protein.

Konsentrasi pati ditetapkan

berdasarkan larutan pati tergelatinisasi

(kurva baku). Kurva standar dibuat

dari larutan pati tergelatinisasi

ditambah dapar posfat, HCl dan

indikator, kemudian absorbansidibaca

pada panjang gelombang 620 nm.

Sampel diukur dengan cara yang sama

dengan mengganti larutan pati

tergelatinisasi dengan sampel.

Absorbansi dan konsentrasi larutan

pati tergelatinisasi (kurva baku)

No. Konsentrasi Absorbansi

1 0.4 1.183

2 0.6 1.2411

3 0.8 1.4075

4 1 1.7355

Kurva baku

Dari kurva baku di atas didapatkan

a = 0.91195

b = 0.75341

r = 0.9486832981

Persamaan garis

Y = ax + b

y = 0.91195x + 0.75341

a. Pengaruh suhu

Aktivitas enzim dipengaruhi

oleh suhu lingkungannya. Suhu

optimum aktivitas amilase adalah

sekitar 25 C - 30 C. Suhu yang

optimal bagi aktivitas amilase diikuti

dengan semakin efisiennya pengikatan

gula pereduksi oleh kalium iodida.

Absorbansi dan konsentrasi larutan

pati terhidrolisis pada variasi suhu

Suh

u

(oC)

Fraks

i

Konsentra

si pati

Absorban

si

27o

C

1 0.577 1.280

2 0.866 1.543

3 1.154 1.806

57o

C

1 0.687 1.380

2 0.655 1.351

3 0.808 1.490

Perhitungan konsentrasi pati variasi

suhu

Suhu 27oC

Fraksi 1

y = 1.280

y = 0.91195x + 0.75341

1.280 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.52659

X = 0.577

Fraksi 2

y = 1.543

0

0.5

1

1.5

2

0.4 0.6 0.8 1

Absorbansi

Absorbansi

y = 0.91195x + 0.75341

1.543 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.78959

X = 0.866

Fraksi 3

y = 1.806

y = 0.91195x + 0.75341

1.806 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 1.05259

X = 1.154

Suhu 57oC

Fraksi 1

y = 1.380

y = 0.91195x + 0.75341

1.380 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.62659

X = 0.687

Fraksi 2

y = 1.351

y = 0.91195x + 0.75341

1.351 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.59759

X = 0.655

Fraksi 3

y = 1.490

y = 0.91195x + 0.75341

1.490 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.73659

X = 0.808

Jika dilihat dari grafik diatas,

aktivitas amilase cenderung menurun

dengan adanya peningkatan suhu dan

dari ketiga fraksi, fraksi 3

menunjukkan konsentrasi pati tertinggi

jadi kemungkinan kadar amilase

tertinggi terdapat pada fraksi ke 3.

Suhu lingkungan yang lebih

tinggi dari suhu optimal suatu enzim

dapat menyebabkan aktivitas enzim

amilase terhambat. Penurunan aktivitas

pada suhu tinggi terjadi karena struktur

molekul enzim tersebut mengalami

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2

fraksi 1fraksi 2fraksi 3

Ab

sorb

ansi

aktivitas amilase variasi suhu

suhu27oC

suhu57oC

denaturasi. Akibatnya sisi aktif enzim

tidak sesuai lagi dengan substratnya.

Selain itu, struktur molekul dari

substrat pun dapat mengalami

perubahan konformasi, sehingga

mengalami hambatan untuk mencapai

lokasi aktif enzim.

Hal lain yang menyebabkan

penurunan aktivitas diduga karena

ekskresi enzim protease yang dapat

menyebabkan autolisis protein enzim,

sehingga afinitasnya terhadap substrat

mengalami penurunan dan mungkin

pada akhirnya hilang.

b. Pengaruh pH

Umumnya enzim memiliki

efektifitas maksimum pada pH

optimum, yang lazimnya berkisar

antara pH 4,5 - 8.0. Tetapi ada

beberapa enzim yang kisaran pHnya

sempit, misalnya peptin yang kisaran

pHnya 1,8 dan arginase yang

mempunyai pH optimum 10,0. Pada

pH yang terlalu tinggi atau terlalu

rendah umumnya enzim menjadi non

aktif secara irreversibel karena

menjadi denaturasi protein

Absorbansi dan konsentrasi larutan

pati terhidrolisis pada variasi pH

pH Fraksi Konsentrasi

pati Absorbansi

4.5

1 0.576 1.279

2 0.9196 1.592

3 1.0785 1.737

5.6

1 0.575 1.278

2 1.052 1.713

3 1.1257 1.780

Perhitungan konsentrasi pati

variasi pH

pH 4.5

Fraksi 1

y = 1.279

y = 0.91195x + 0.75341

1.279 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.52559

X = 0.576

Fraksi 2

y = 1.592

y = 0.91195x + 0.75341

1.592 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.83859

X = 0.9196

Fraksi 3

y = 1.737

y = 0.91195x + 0.75341

1.737 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.98359

X = 1.0785

pH 5.6

Fraksi 1

y = 1.278

y = 0.91195x + 0.75341

1.278 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.52459

X = 0.575

Fraksi 2

y = 1.713

y = 0.91195x + 0.75341

1.713 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 0.95959

X = 1.052

Fraksi 3

y = 1.780

y = 0.91195x + 0.75341

1.780 = 0.91195x + 0.75341

0.91195x = 1.02659

X = 1.1257

Berdasarkan grafik dari hasil

percobaan dapat dilihat bahwa

aktivitas amilase menjadi lebih efektif

pada ph lebih tinggi yaitu pada pH 5.6

dan pada ph yang lebih rendah yaitu

pada Ph 4.5 aktivitasnya menurun.

Hal ini sesuai dengan literature

yang menyatakan bahwa pH optimum

untuk aktivitas amilase terjadi pada

daerah dengan pH asam rendah (nilai

pH berkisar antara 5,5 dan 6,5),

walaupun aktivitas amilase total juga

kemungkinan dapat terjadi pada nilai

pH dengan interval yang lebih luas

(5,5 7,0), yaitu sesuai dengan data

dari literatur ydimana pH untuk

0

0.5

1

1.5

2

Ab

sorb

ansi

kurva aktivitas amilase

variasi pH

pH 4.5

pH 5.6

amilase signifikan berada antara 4,5

dan 8,0.

Pada seluruh kelompok

percobaan (variasi suhu dan variasi

pH) aktivitas amilase tertinggi

ditunjukkan oleh fraksi 3, dengan

konsentrasi pati sebesar 1.1257 pada

pH 5.6; 1.0785 pada pH 4,5; pada

suhu 270C 1.154 dan pada suhu 570C

0.808.

SIMPULAN

Suhu lingkungan dan pH sangat

mempengaruhi aktivitas enzim

amilase, dari percobaan aktivitas

amilase yang optimal terdapat pada

suhu 270C dengan konsentrasi pati

terbesar berada pada fraksi 3 yaitu

1,1257 sedangkan pada variasi pH

aktivitas amilase optimal terdapat pada

pH 4,5 dengan konsentrasi pati

terbesar berada pada fraksi 3 yaitu

1,780.

Daftar Pustaka

Azmi, J. 2006. Penentuan Kondisi

Optimum Fermentasi

Aspergillus oryzae Untuk

Isolasi Enzim Amilase Pada

Medium Pati Biji Nangka

(Arthocarphus heterophilus

Lmk). Tersedia online di

http://www.kimiawan.org/journ

al [diakses tanggal 25 Oktober

2010, pukul 17.03 WITA].

DWI NUGRAHA FEBRIANTO.

2013. Tugas Penkom. Tersedia

online di

http://dwinf11s.student.ipb.ac.id/

[diakses tanggal 28 april 2015

pukul 22.34]

Girindra, A. 1993. Biokimia 1.

Gramedia Pustaka Utama.

Jakarta.

Guyton. 2012. Buku Ajar Fisiologi

Kedokteran. Penerbit Buku

Kedokteran: Jakarta.

Lee, J. M. 1992. Biochemical

Engineering. Prentice Hall Inc.

New Jersey.

Lehninger, A. L., 1995, Dasar-Dasar

Biokimia jiid 1, diterjemahkan

oleh Maggy Thenawidjaja,

Erlangga, Jakarta.

Manullang, I.N., Ellok D.S., dan N.

Suswantini. 2006. Respon

Pertumbuhan Jahe Putih

(Zingiber officinale

var.officinale) Secara In-Vitro

pada Media Murashige-Skoog

dengan Penambahan NAA dan

BAP.Jurnal Budidaya Pertanian

No. 2 : 88 97.

Martoharsono, S. 1994. Biokimia jilid

1. Gadjah Mada University

Press. Yogyakarta.

Poedjiadi, A.. 2005. Dasar-Dasar

Biokimia, UI Press, Jakarta.

Taufik, H. 2007. Laporan Aktivitas

Enzim (online),

(http://www.x3-

prima.com/2009/09/laporan-

aktivitas-enzim.html), diakses

25 Oktober 2010, pukul 16.08

WITA.

Tranggono, B. S. 1989. Petunjuk

Laboratorium Biokimia Pangan.

Pusat Antar Universitas Pangan

dan Gizi. Yogyakarta.