TUGAS PENDAHULUAN (TP) 1. Jelaskan mekanisme isolasi pada
kromatografi kolom ! 2. Apa keuntungan dan kerugian kromatografi
kolom, jelaskan ! 3. Apa yang menjadi dasar pertimbangan untuk
menggunakan metode kromatografi kolom dalam isolasi ekstrak! 4.
Bilakah isolasi dikatakan sempurna pada kromatografi vakum cair? 5.
Gambarkan alat yang digunakan pada kromatografi vakum cair beserta
bagian-bagiannya? Jawaban :1. Sampel yang akan dipisahkan
dilarutkan terlebih dahulu dalam pelarut,
kemudian diletakkan di bagian atas kolom yang telah diisi oleh
fasa diam. Kemudian fasa gerak yang sudah disiapkan dialirkan
pelan-pelan dan dibiarkan mengalir melalui kolom sampai pelarut
habis. Fasa gerak akan membawa campuran komponen ke bawah, sehingga
di dalam kolom terjadi kesetimbangan dinamis antara komponen
teradsorbsi pada fasa diam dengan komponen yang terlarut dalam fasa
gerak. Maka fasa gerak akan mengalir ke bawah. Pelarut (fase gerak)
dibiarkan mengalir melalui kolom karena aliran yang disebabkan oleh
gaya berat ayau gaya gravitasi atau didorong dengan tekanan. Pita,
merupakan senyawa yang larut yang bergerak melalui kolom dengan
laju yang berbeda,jika telah terpisah maka dapat dikumpulkan dalam
vial atau tabung reaksi maupun dalam botol UC yang hasilnya berupa
fraksi ketika keluar dari kolom.
2. Adapaun keuntungan dan kerugian dari kromatografi kolom
adalah
sebagai berikut : a. Keuntungan 1. Konsumsi fase gerak KCV hanya
80% atau lebih kecil disbanding dengan kolom konvensional karena
pada kolom mikrobor kecepatan alir fase gerak lebih lambat
(10-100l/menit) 2. Adanya aliran fase gerak lebih lambat membuat
kolom mikrobor lebih ideal jika digabung dengan spectrometer massa.
3. Sensitivitas kolom mikrobor ditingkatkan karena solute lebih
pekat karenanya jenis kolom ini sangat bermanfaat jika jumlah
sampel terbatas missal sampel klinis b. Kerugian KCV (Kromatografi
Vakum Cair) : 1. Membutuhkan waktu yang cukup lama 2. Sampel yang
dapat digunakan terbatas 3. Dasar pertimbangan pemilihan
kromatografi kolom yaitu : Pemisahan dengan kromatografi kolom baik
untuk memisahkan campuran dalam jumlah besar( lebih dari 1 gram).
Untuk komponen yang jumlahnya sangat kecil dapat digunakan
kromotografi gas maupun kromatografi kinerja tinggi, karena dalam
kromatografi ini di gunakan: 1. Adsorben yang lebih kecil dan luas
2. Tekanan dari suatu pompa untuk mendorong pelarut 3. Detektor
dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif senyawa-
senyawa yang ter elusi 4. Cara cara pengemasan baru adsorben dalam
kolom
4. Isolasi pada kromatografi vakum belum bisa dikatakan semurna,
karena pada proses kromatografi vakum masih memisahkan
senyawa-senyawa kimia yang terdapat pada sampel, tapi dalam proses
kromatografi ini senyawa yang kita dapatkan bisa lebih sedikit
daripada pada proses KLT biasa maka dari itu tahap selanjutnya
setelah memperoleh fraksi dari proses kromatografi vakum yaitu
dengan melakukan KLT. 5. Gambar alat kromatografi kolom beserta
keterangannya :
Cari di 9oo9le aja
