Upload
clarissa-adhyatman
View
291
Download
2
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Tugas Biokat 6
Citation preview
Tugas Kelompok Biokatalisis
ClarissaDwini Normayulisa Putri Fitrah Humala Harahap
Haqqyana Nindya Bestari
Kelompok 1
Produksi dan Aplikasi Enzim β-glucanase di Bidang Pertanian
Bid
an
g P
ert
an
ian
Enzim β-glucanase
Sumber Enzim
Proses Produksi Enzim
Bentuk Produk Enzim
Industri Enzim
Perkembangan Terkini Enzim
Sumber Enzim
Enzim Glucanase
Enzim Glucana
se
Enzim Glucanase merupakan
enzim ekstraseluler yang dapat
menghidrolisis karbohidrat
golongan glukan.
Enzim yang akan dibahas.
Enzim -glucanase
Enzim -1,3-glucanase
Enzim ini memecah ikatan -
1,3-glukan
Enzim -1,6-glucanase
Enzim ini memecah ikatan -
1,6-glukan
dihasilkan
?
Enzim β-glucanase
Sumber Enzim
Trichoderma sp. merupakan sejenis fungi yang banyak
ditemukan di tanah pertanian atau di tanah hutan.
Trihoderma sp.
Suhu hidup : 7°C - 41°CSuhu tumbuh optimum : 25°C - 30°CSuhu tida dapat tumbuh : 35°C
pH : 3-7
Reproduksi secara aseksual dengan menggunakan konidia.
Contoh : Trichoderma harzianum (salah satu spesies yang memiliki aktivitas antifungal yang tinggi.
Sumber Enzim
• Trichoderma harzianum dapat memproduksi enzim litik, antibiotic antifungal, dan senyawa metabolit (asam sitrat, etanol, urease, selulase, glukanase, dan kitinase).
• Trichoderma harzianum dapat berkompetisi dengan pathogen atau fungi lain sehingga membantu pertumbuhan tanaman.
• Trichoderma harzianum dapat memproduksi pigmen yang bervariasi tergantung media yang digunakan untuk menumbuhkannya.
• Trichoderma harzianum merupakan agen biokontrol.
Proses Produksi Enzim
Proses Produksi Enzim
Kultivasi
Trichoderma spp.
Pemisahan Kultur dari
Miselium
Enzim Assay
Purifikasi Enzim
Kultivasi Trichoderma sp.
Trichoderma sp. diinokulasi dalam 250 ml medium
TLE cairKultur diinkubasi selama
72 jam pada suhu 28oC
Inkubasi dilakukan dengan agitasi 250 rpm
1
Pemisahan Kultur dari Miselium
Pemisahan dilakukan dengan filtrasi
Proses filtrasi menggunakan kertas saring
2
Enzim Assay
Aktivitas β-glucanase diamati dalam sistem reaksi
Reaksi menggunakan larutan laminarin yang dilarutkan dalam
buffer sodium asetat dan
larutan enzim
Reaksi berlangsung selama 30 menit pada suhu 37oC
1 unit enzim (U) didefinisikan sebagai jumlah protein yang dibutuhkan untuk
memproduksi 1 mikromol gula reduksi per menit
3
Purifikasi Enzim
Purifikasi dengan menambahkan (NH4)2SO4 dengan konsentrasi 40%
Campuran dijaga selama 15 menit pada suhu 4oC dengan agitasi
perlahan
Suspensi dilakukan sentrifugasi pada 28,800 g dalam waktu 30
menit
4
Bentuk ProdukEnzim
Bentuk Produk Enzim
Name of Enzyme Product Specific Activity
Price
endo-1,4-β-D-glucanase(Trichoderma longibrachiatum)
Liquid (40°C, pH 4.5, CM-
cellulose 4M as
substrate).
€142.00
endo-1,3-β-D-Glucanase
(Trichoderma sp)
Liquid (40°C, pH 4.5, CM-
Curdlan as substrate).
€130.00
exo-1,3-β-D-Glucanase
(Trichoderma sp.)
Liquid (40°C, pH 4.0,
laminarin as substrate).
€137.00
exo-1,3-β-D-Glucanase
(Trichoderma-virens) (Recombinant)
Liquid (40oC, pH 4.5 on
laminarin).
€137.00
exo-1,3-β-D-Glucanase/β-Glucosidase
Liquid 40oC, pH 4.5. €158.00(sumber: megazyme.com; diakses pada 2 November 2014)
Paten
PREPARATION OF THE ENZYME beta-
GLUCANASE BY FERMENTATION OF
FUNGIWO 1984002533 A1
METHOD FOR PRODUCING .BETA.-
GLUCANASE AND XYLANASE USING
WHEAT BRAN, AND LIQUID CULTURE
MEDIUMCA 2771413 A1
Paten Terkait Enzim β-glucanase
Industri Enzim
Industri Enzim
Sigma Aldrich
Nama Enzim AplikasiUnit
DefinitionNomor Dagang (SKU Pack
size)
Harga
β-Glucanase dari Trichoderma longibrachiatum
EC 3.2.1.6
Enzim selulase dalam metode pretreatment biologi dan kimia gabungan untuk produksi etanol lignoselulosa dari energi tebu. Ini juga digunakan dalam sakarifikasi enzimatik selulosa dan produksi etanol
1unit enzim dapat melepaskan 1 mol glukosa dari selulosa dalam 1 jam pada pH 5 dan suhu 37ºC (waktu inkubasi 2 jam)
G4423-100G
SGD 234,50
Industri Enzim
Prozomix
Nama Enzim SpesifikasiNomor Katalog Produk
Harga
Beta-Glucanase (bubuk)
Manufacturer=Sunson
Activity (beta-glucanase) = 60,000,000 U/g
pH range = 3.0 - 7.0 (optimum 5.0)
Temperature = 30 - 75oC (optimum 50oC)
PRO-IE0023
10 g = £10.00
100g= £25.00
1kg- 1000kg=negosiasi
Industri Enzim
Industri Lain Perusahaan Nama
DagangProduk Enzim
Organisme Produksi
Referensi
Altech Inc. Alzyme BG β-Glucanase
T. viride CBS 517.94
SCAN (2002)
Danisco-Genencor
Avizyme 1110Porzyme 9110
β-Glucanase
T. longibrachiatum ATCC 2106
SCAN (2002)
Huvepharma
Hostazym C
Endo 1,4-Beta glucanase (EC 3.2.1.4)
T. longibrachiatum IMI SD 142
SCAN (2002)
Kemin Kemzyme W Dry
β-Glucanase
T. reesei CBS 592.94
SCAN (2002)
Roal Econase BG 300
β-Glucanase
T. reesei CBS 526.94
SCAN (2002)
Industri Enzim
Industri LainPerusahaan Nama
DagangProduk Enzim
Organisme Produksi
Referensi
LeSaffre Salizyme GP, GL
β-Glucanase
T. longibrachiatum CNCM MA 6-10 W
SCAN (2002)
Novo-DSM Roxazyme G
β-Glucanase
T. viride NIBH FERM/BP 447
SCAN (2002)
Roxazyme G2 G/Liquid
β-Glucanase
T. longibrachiatum ATCC 74 252
SCAN (2002)
Roal Econase Wheat Plus
β-Glucanase
T. reesei CBS 529.94 dan CBS 526.94
EFSA (2005)
Perkembangan Terkini Enzim
Perkembangan Terkini Enzim• Production of Chitinase and β-1,3-glucanase by Trichoderma harzianum for
Control of the Phytopatogenic Fungus Sclerotium rolfsii
Judul Jurnal
• 2001Tahun Publikasi
• Isolasi dari Trichoderma harzianum untuk aktivitas beta-1,3-glukanase dan chitinase. Produksi in vitro dari beta-1,3-glucanase
dan chitinase dari T.harzianum , mikoparasit dari jamur fitopatogenik, diuji
dengan kondisi kultur yang bervariasi. Produksi enzim dipengaruhi oleh sumber karbon di dalam media yang terstimulai
oleh pH asam 5.5 hingga 6. Produksi enzim juga ditingkatkan melalui polisakarida yang
mengandung miselium dari S.rolfsii. Pertumbuhan dari S.rolfsii ter-inhibisi
secara signifikan (hingga 61,8%) melalui preparasi enzim dari T.harzianum.
Pembahasan Jurnal
Perkembangan Terkini Enzim
• Production of β-glucanase enzyme from Penicillium oxalicum and Penicillium
citrinumJudul Jurnal
• Department of Microbiology, School of Pure and Applied Sciences, Federal University of Technology
• 2011
Institusi dan Tahun Publikasi
• Penicillium oxalicum dan Penicillium citrinum dikembangbiakkan dengan
metode fermentasi permukaan menggunakan dedak terhogenisasi dengan
0,5% (w/v) (NH4)2SO4 sebagai sumber pelarut nitrogen dan kertas saring
Whatman no.1 sebagai media produksi substrat enzim beta-glucanase. Hasil dari
produksi beta-glucanase dari kedua Penicillium adalah aktivitas enzim beta-glucanase berada pada kondisi optimum pada suhu 50 hingga 55˚C dan pH 5-6,5.
Pembahasan Jurnal
Perkembangan Terkini Enzim
• Microbial Cellulases and Their Industrial ApplicationsJudul Jurnal
• SAGE-Hindawi Access to Research• 2011
Institusi dan Tahun Publikasi
• β-1,3-glucanase dan N-asetil-glukosaminidase dari T.haziarnum strain P1 secara sinergis dapat
menginhibisi germinasi spora dan tabung elongasi dari B.cinerea. Promoter
eksoglukanase dari Trichoderma telah digunakan untuk mengekspresi chymiosin dan
protein lainnya, seperti: glukoamilase, ligin peroksidase, dan laccase. Banyak penelitian
yang telah membuktikan bahwa jamur selulotik seperti Aspergillus, Chaetonium, dan Trichoderma memberikan hasil yang
menjanjikan dalam menghasilkan selulase untuk menyuburkan tanah.
Pembahasan Jurnal
Daftar Pustaka
de Marco, Janice Lisboa., Felix, Carlos Roberto. 2007. Purification and characterization of a b-Glucanase produced by Trichoderma harzianum showing biocontrol potential. Braz. arch. biol. technol. vol.50 no.1 Curitiba. http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1516-89132007000100003&script=sci_arttext
El-Katatny, et al. 2000. Production of Chitinase and -1,3-glucanase by Trichoderma harzianum for Control of the Phytopathogenic Fungus Sclerotium rolfsii . Food technol. biotechnol. 38 (3) 173–180.
Microbial Cellulases and Their Industrial Applications. 2011.Production of Chitinase and β-1,3-glucanase by Trichoderma
harzianum for Control of the Phytopatogenic Fungus Sclerotium rolfsii. 2001.
Pertanyaan
• Ibnu : Produksi enzim sama aja, yang beda pake laminarin dan buffer. Jadi apa bedanya?
• Ghilan : Kultivasi pake fermentor atau reactor?
• Bapak Yopi : Laminarin itu apa?• Denia : fokus utama ke industry apa?• Ramadhan : uji aktivitas enzim bukannya
setelah purifikasi?