Tipos de Cromatografia

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  • 5/25/2018 Tipos de Cromatografia

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    Cromatografia

    La cromatografa puede definirse como una tcnica que separa una mezcla desolutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que seestablece al ser arrastrados por una fase mvil (lquida o gaseosa) a travs de un lecho

    cromatogrfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser lquida o slida Laspropiedades de los componentes de una mezcla determinan su movilidad entre s ! conrespecto a la fase mvil La base de la separacin cromatogrfica ser, por tanto, ladiferencia en la migracin de los mismos

    Clasificacin de la Cromatografa

    "#isten muchas maneras de clasificar los mtodos cromatogrficos, seg$n su fasemvil se clasifica en Cromatografa de gases que puede ser a travs de dos sistemas,gas% lquido ! gas%slido ! Cromatografa lquida donde el eluente es un lquido ! puede

    ser lquido%liquido, liquido%slido &or el mecanismo de retencin%separacin, es decir eltipo de equilibrio implicado en la transferencia de los solutos entre las fases seencuentra la Cromatografa de reparto, de adsorcin ! de e#clusin 'eg$n la forma decontacto entre las fases se denomina de columna o superficie plana ambin se puedeclasificar teniendo en cuenta la fase estacionaria, la dimensionalidad, escala fsica !gradientes

    Cromatografa en capa fina

    &or este mtodo se pueden analizar mezclas de aminocidos La muestra paraanlisis se aplica por medio de un tubo capilar en la superficie de una capa finaadsorbente en forma de banda, punto o mancha ! es adsorbida en la superficie por laaccin de fuerzas electrostticas (uerzas de *an der +aals, puentes de hidrogeno,efectos inductivos, etc) Los adsorbentes ms utilizados son gel de silica, alumina,tierra silcea, celulosa ! poliamidas Como soportes del adsorbente se utilizan laminas oplacas de vidrio, plsticas o metlicas, algunas placas tienen indicador defluorescencia f-./ f011

    La placa seca se coloca en el tanque cromatogrfico o cmara, en el cual debeencontrarse saturado el eluente (ase 2vil lquida)"l eluente ascender o desplazara

    por capilaridad en la placa ! arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo3manchas4 que representan a los componentes, la separacin se da por migracindiferencial, es decir que la fase mvil arrastra a las substancias apolares ! aquellas mspolares son retenidas por la fase estacionaria dando lugar a la separacin&osteriormente se evapora el eluente ! la placa se analiza por medio de mtodosqumicos en el que por inmersin o rociado se obtienen derivados coloreados ofluorescentes (5dicin de 6inhidrina a aminas, 7cido sulf$rico para carbonizarcompuestos orgnicos, etc), o por medio de mtodos fsicos pticos utilizando radiacin

  • 5/25/2018 Tipos de Cromatografia

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    8* o luz visible

    Cromatografa en papel

    "l proceso es bsicamente el mismo, solo que se usan tiras de papel cromatogrficoen el tanque cromatogrfico

    Cromatografa en Columna

    'e utilizan columnas de vidrio rellenas de 5l$mina (5l-90), 'lica u 9#ido de2agnesio La fase estacionaria esta constituida por un slido poroso, el cual quedasoportado en el interior de una columna generalmente fabricada en plstico o vidrio Lafase mvil se encuentra formada por la solucin que lentamente va atravesando la fase

    estacionaria La solucin que sale al final de la columna se reemplaza constantementepor nueva solucin que se suministra desde un contenedor por la parte superior de lacolumna

    Cromatografa de gases

    'e utiliza para la separacin de sustancias gaseosas La ase 2vil es un :as(llamado :as &ortador) ! la ase "stacionaria puede ser un slido (Cromatografa :as%'lido) o una &elcula de lquido de alto punto de ebullicin (:eneralmente &olietiln%:licol o 'ilicn) recubriendo un slido inerte (Cromatografa :as%Lquido) "lcromatgrafo de gases esta constituido normalmente por un suministro ! una entradadel gas portador, un puerto de in!eccin, una columna normalmente localizada en elinterior de una cmara termostatizada (horno), un detector ! un sistema computarizadopara analizar, registrar e imprimir el cromatgrama

    La muestra se introduce a travs del sistema de in!eccin dentro de la columna quees el sitio donde ocurre la separacin La columna de aluminio, acero ino#idable, vidrioo tefln contiene la fase estacionaria slida o lquida ! esta su;eta a la superficie por unsoporte que es generalmente de slice La fase mvil o gas portador transporta loscomponentes de la muestra a travs de la columna, por esta razn debe ser inerte paraevitar interacciones con la muestra o la fase estacionaria, ! ser capaz de minimizar ladifusin gaseosa 5l final de la columna e#iste el detector que permite la deteccin !cuantificacin de las sustancias, midiendo conductividad trmica ! electronegatividadde las sustancias eludas

    Cromatografa Liquida de alta eficiencia o rendimiento (

  • 5/25/2018 Tipos de Cromatografia

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    "s una Cromatografa de alta presin es decir se aplica el flu;o a presin (entre =.>>a -->> psi) "l tama?o de partcula es entre 0 ! => micras, la longitud de la columna esentre . ! -. cm ! requiere de equipo sofisticado 'e pueden analizar muestrasproteicas La reduccin del tiempo en que la sustancia se encuentra en el interior de lacolumna, limita el ensanchamiento por difusin de las bandas, aumentando por tanto la

    resolucin

    "l sistema