Thermo Scientific

PikoREAL 荧光定量PCR仪

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PCR系列产品背景介绍

PCR系列产品研发生产中心：位于芬兰Espoo的

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核心产品：PCR、荧光定量PCR仪器及试剂

仪器

PCR试剂盒

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功能：

绝对定量

双探针法 HRM法

相对定量

基因型分析

熔解曲线分析

选配模块

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PikoReal 荧光定量PCR检测系统介绍

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特点总结：

1、硬件组合优越，设计创新

2、5-10ul小反应体系，成倍节省实验成本

3、小巧、快速、稳定、安静无声

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实时荧光定量PCR仪

热循环仪 荧光信号探测器 数据分析软件

硬件组合优越，设计创新！

硬件系统

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光源: 5x LED

• 寿命长，终身无需更换，为qPCR实验提供持续，稳定的激发信号

• 无需使用ROX染料进行光强校正

探测器：CCD 相机

• 能同时快速收集整板多重荧光信号数据

• 高灵敏度

PCR模块：半导体PCR

• 24孔

• 96孔

PikoREAL 的硬件系统:

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设有独特的高灵敏度单色检测通道

激发波长 (nm) 发射波长 (nm) 预校正的染料

475–500 520–550 FAM, SYBR Green

515–535 557–590 HEX, Yakima Yellow

570–590 615–650 ROX, Texas Red

600–640 666–740 Cy 5

475–500 520–590 单色通道，HRM通道

第五通道专用于单荧光检测，在没有其他荧光干扰的情况下加宽发射光带宽，使更多的信号进入CCD探测器，提高灵敏度

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设有独特的高灵敏度单色检测通道

绿色为第五通道检测结果；紫红为第一通道检测结果

单色检测通道的灵敏度显著高于第一通道

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每组通道包括：

• LED

• 激发光滤光片

• 二分镜

• 发射光滤光片

Motor Optics Path Optics Shuttle

Linear Slide

(above)

各通道高度整合，无相对位移，系统稳定性高

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独特的小体系反应槽设计

- 孔小聚光，提高灵敏度

- 适合5-10ul小体系反应，成倍节省试剂

• 样品槽尺寸：¼ 块标准384孔板大小

• 样品孔容量：50ul

• 反应体系：5ul- 20μl

• 可用耗材：UTW 96 孔Piko PCR板

Piko 系列PCR板的孔间距和容量完全符合

行业标准, 可用标准的单道,多道移液器及全

自动样品处理工作站上样

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成本比较：

SYBR Green 染料标记或自己合成荧光探针

20ul体系：试剂成本 3元/孔，300元/块板

PikoReal 10ul体系：150 元/块板

5ul体系：75元/块板

MGB探针试剂盒

20ul体系：试剂成本 20元/孔，2000元/块板

PikoReal 10ul体系：1000元/块板

5ul体系：500元/块板

一年以300块板的实验计算则至少能节省4.5万RMB – 30万RMB

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用于荧光定量PCR的耗材和小仪器

微孔板上样辅助仪 ：简化上样，防止出错

底部白色LED照亮PCR管底，实现实时样品跟踪，无需记忆，避免出错

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PikoREAL 控制分析软件

•个人PC控制

•一台电脑联网可控制多达10台PikoREAL

•通过以太网接口连到工作电脑就可控制PikoREAL

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PikoREAL软件分析功能

绝对定量

双探针法 HRM法

相对定量

基因型分析

熔解曲线分析

选配模块

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PikoREAL 控制分析软件：编程界面

软件：简单易用

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一键点击，分析报告自动生

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PikoREAL 性能展示 – 96孔均一性

Log scale

Linear scale

Ave Cq 21.082

Max Cq 21.28

Min Cq 20.88

d Cq 0.4

SD Cq 0.090

Dynamo SYBR Flash in all 96 wells

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PikoREAL 性能展示

两倍区分：

5,000 和 10,000 拷贝轻松区分

5000copy 10000copy

22.34 23.46

22.34 23.61

22.36 23.63

22.43 23.7

mean 22.3675 23.6

SD 0.011547005 0.09291573

CV 0.051624032 0.39371073

p value 2.5361E-07

confidence 99.99997%

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Figure X: Two-fold discrimination on the PikoReal 96 Real-Time System. Four technical replicates amplifying HRH1

from HeLa cDNA (32 ng- 62.5 pg of total RNA equivalents/10 µL) using Thermo Scientific Solaris qPCR Gene Expression

Assay and Master Mix. Amplification and standard curve shown for 10 × 2-fold dilutions of template.

R2 = 0.999

PikoREAL 性能展示

两倍区分：

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小体积反应的均一性

Figure 1. Replicate reactions (21) amplifying ALDOA from HeLa cDNA (5, 7.5 or 12.5 ng of total RNA equivalents) using

Thermo Scientific

Solaris qPCR Gene Expression reagents either with 10, 15 or 25 μL qPCR reaction volumes. The pipetting was prepared with

Finnpipette. Novus Electronic pipettes (A) or with Finnipipette Manual pipettes (B). Three NTC reactions were included in all test setups

and did not result in amplification as expected (at RFUs 5-20).

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Efficiency: 105 %

R2 = 0.995

Channel 1

Efficiency: 101 %

R2 = 0.998

Channel 2

Efficiency: 99 %

R2 = 0.999

Channel 4

Channel 3

Quadruplicate multiplexed reactions amplifying Staphylococcus aureus,

Enterococcus sp.,Corynebacterium bovis DNA (50,000 to 50 copies/10 µL

reaction) and internal control (500 copies of Lambda DNA/10 µL reaction) using

Thermo Scientific PathoProof Mastitis PCR Assay, Complete-12 Kit. Amplification

and standard curves are shown for each channel.

四通道试验

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高分辨率溶解曲线法（HRM）SNP检测

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PikoREAL 其他特点

• 尺寸

• 20cm x 30cm x 32cm (W x D x H)

• 重量：10kg

• 系统稳定，长途运输也无需做光路校正。

• 断电自动重启

• USB接口数据交换

• 以太网接口连接 PC

• 运行安静，无噪音

• 低能耗

• 中文软正式上市

• 标配HRM分析软件

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谢谢各位老师！