tehnica histologica

Embed Size (px)

Citation preview

TEHNICA HISTOLOGIC 1. FIXARE a.alegerea fixatorului si realizarea lui: alcool, formol, Bouin-Hollande, Jenner, etc. b. recoltarea materialului i practicarea fixrii c.splarea materialului fixat la un curent de ap de robinet 2. INCLUDERE a. Deshidratarea: cu alcool 70, 95, absolute b. Impregnarea (infiltrarea) cu un solvent al parafinei: benzen, toluen, xilen c.Impregnarea cu parafin: in 3 bi succesive, la etuv la 56 d. Turnarea blocului de parafin 3. SECIONARE a.Fasonarea (modelarea) blocului i lipirea lui pe port obiect b. Secionarea propriu-zis la microtom (microtomie) c.ntinderea i lipirea seciunilor pe lama de sticl cu: albumina lui Mayer, soluie de gelatin, etc d. Uscarea seciunilor la temperatura laboratorului sau la etuv la 37-40 4. COLORARE a.Deparafinarea seciunilor cu xilen b. Eliminarea xilenului, cu alcool la 95 c.Hidratarea treptat cu alcool la 70, 50 ap distilat d. Colorarea propriu-zis cu diferii colorani histologici Exemplu: Hematoxilina colorant nuclear; difereniere cu ap de robinet; eozin colorant citoplasmatic; cltire cu ap distilat e.Deshidratare cu alcool la 70, 95, absolut f. Clarificare i transparentizare cu xilen g. Montare cu balsam de Canada h. Etichetarea preparatelor i. Uscarea preparatelor MODUL DE UTILIZARE AL MICROSCOPULUI OPTIC Pregtirea microscopului pentru examinare necesit urmtoarele operaiuni: - Se conecteaz transformatorul la reea - Se conecteaz becul microscopului la transformator - Se verific dac filtrul mat este in faa becului - Se verific dac diafragma de cmp i diafragma de apertur sunt deschise - Se ridic condensorul la maximum - Prin rotirea revolverului, n sensul acelor de ceasornic, se aduce n axul optic obiectivul de 10X - Se aeaz preparatul (lama) pe msua microscopului, cu lamela n sus, i se imobilizeaz cu ajutorul dispozitivelor de fixare - Cu ajutorul urubului dublu care mobilizeaz n 2 planuri perpendiculare carul microscopului, se aduce obiectul de examinat (seciunea colorat de pe lam) exact deasupra focarului luminos al condensorului. Punerea la punct a imaginii cu obiectiv 10X - Privind lateral, coborm obiectivul cu ajutorul vizei macrometrice, pn cnd lentila frontal a a acestuia ajunge la civa mm de lamel - Privind prin cele 2 oculare, ridicm ncet tubul microscopului, tot cu viza macrometric, pn cnd ne apare imaginea preparatului. Clarificm apoi aceast imagine cu viza micrometric i reglm intensitatea luminii din viza condensorului. Punerea la punct a imaginii cu obiectiv 20X - Lsm neschimbat reglajul fcut pentru obiectivul 10X i aducem n axul optic obiectivul 20X, clarificnd imaginea numai din viza micrometric i reglnd lumina cu ajutorul vizei condensorului Punerea la punct a imaginii cu obiectiv 40X - Lsm neschimbat reglajul fcut pentru obiectivul 20X, aducem n axul optic obiectivul 40X i procedm ca mai sus