TAPA Seminario Enfermedades resproductivas [Modo de ......inmune (regulación de las citoquinas) favorece la reactivación de los bradizoitos y ... menores de 4 meses) Sitio Argentino

NEOSPOROSISDr. Pedro Bañales

NEOSPOROSIS

Tacuarembó22 de setiembre/2011

Neosporosis: ¿ qué es ?Enfermedad de distribución mundial causadaEnfermedad de distribución mundial, causada por el protozoario Neospora caninum

Afecta seriamente a caninos y bovinos, pero también a otras especies de animales domésticos.

Caracterizada por desórdenes neurológicos y aborto en varios huéspedes mamíferos

Sitio Argentino de Producción Animal

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? Neospora caninum: ¿ qué es

P t i á it idi id tifi dProtozoario parásito coccidiano identificado en 1988 (estudios retrospectivos: 1957)

Apicomplexa, Sarcocystidae

Similar a Toxoplasma gondii peroSimilar a Toxoplasma gondii pero inmunológicamente diferente

Ciclo biológico descripto en 1998

CRONOLOGÍA (1)

1984 Bjerkas (Noruega): Enfermedad neurológica en perros1984 Bjerkas (Noruega): Enfermedad neurológica en perros Perros boxer de 2 – 6 meses edad Lesiones en cerebro y músculos → Toxoplasma gondiiSerología negativa y no transmisible a ratones

1988 Dubey (USA): Enfermedad muy similar a la descrita por BjerkasAislamiento y tipificación

1989 Thilsted: Brote de aborto bovino en USAThilsted & Dubey: IHQ

1992 Conrad: Aislamiento de bovino

1998 McAllister: El perro como un huésped definitivo


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CRONOLOGÍA (2)

URUGUAY1ª referencia: caninos - Barber (1997): IFI

20 % de 414 perros de estancias

DILAVE (1999):canino: IFI, ELISA, IHQ

Reproducción experimental en ratones (ELISAReproducción experimental en ratones (ELISA e IHQ)

aborto bovino: IFI, ELISA e IHQ

CICLO BIOLOGICOHuésped definitivo :

Perro y coyotes¿Otros carnívoros? Anticuerpos en zorros, lobos y dingos

Húespedes intermediarios:Infección natural: caninos, bovinos, ovinos, equinos, caprinos y cérvidos.equinos, caprinos y cérvidos.Anticuerpos: mapaches, búfalos, gato, ciervo de cola blanca, camellos y cánidos silvestres.Infección experimental: primate (M. rhesus)

Zoonosis: hasta el momento no hay ninguna evidencia


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CICLO BIOLOGICOInfección post natal (transmisión horizontal):p ( )

de huésped definitivo a huéspedes intermediariosvía de ingreso: oralno se transmite por semen o embriones

Infección congénita (transmisión vertical):vía transplacentaria

fi i i l 90 % (81 100% ú t )eficiencia mayor al 90 % (81 a 100% según autores)

French (1999): necesario al menos 5 % de infección horizontal para persistencia en un rodeo

En la mayoría de los casos infección de por vida

CICLO BIOLOGICOOoquistes:

11.7 x 11.3 um, sin micropiloExcretados no esporulados, esporulan en 24 horasPeríodo prepatente: 5 días o más

Perros:Negativos para IgG mientras excretan ooquistesSeroconversión: 2 3 semanas luego de finalizar excreciónSeroconversión: 2-3 semanas luego de finalizar excreciónAlgunos no seroconviertenExperimentalmente se logró la re-excreción


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Pathogenesis of Bovine NeosporosisJ.P. Dubey, D. Buxton and W. Wouda

Taquizoitos

En huéspedes intermediarios y definitivosFormas de división rápida, hasta 100 por célulaPueden observarse dentro o fuera de las célulasOvoideos, semilunares o globulares (3-7 um x 1-5 um)


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Quiste

En huéspedes intermediarios y definitivosRedondeados u ovoideos, hasta 107 umEn tejidos nerviosos (cerebro, médula, retina)En músculo de perros y vacunos (Peters, 2001)Bradizoitos: dentro de los quisteBradizoitos: dentro de los quiste

Ovales, 6-8 x 1-2 umDivisión lenta

Infecciosos vía oral para huespedes intermediarios y perrosViables hasta 14 días a 4ºCInactivados en 24 horas a –20ºC

TAQUIZOITOS (SEM)


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PATOGENIAMuerte celular por multiplicación activa de taquizoitosMuerte celular por multiplicación activa de taquizoitos en neuronas, macrófagos, fibroblastos, endotelios, músculos, hepatocitos

Lesiones degenerativas e inflamatorias no supurativas en SNC, corazón, músculo esquelético e hígado

Quistes en cerebro, médula, retinaPeters (2001): músculo

Aborto - edad gestacional

PATOGENIAGestación: modulación de la respuestaGestación: modulación de la respuesta inmune (regulación de las citoquinas) favorece la reactivación de los bradizoitos y ruptura de quistes tisulares.Gestación temprana: sin respuesta del fetoGestación media y tardía: respuesta inmunitaria del fetoInfección día 70: muerte fetal en 24 díasInfección en último tercio: feto seropositivo, infectado y clínicamente sano


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NEOSPOROSIS BOVINAPredomina la infección congénita silentegAborto

Infección temprana: momificaciónInfección media: aborto medio o tardío y mortalidad neonatal.Infección tardía: no ocurre abortoInfección tardía: no ocurre aborto, nacimiento terneros seropositivos con infección persistente

NEOSPOROSIS BOVINAAbortos . porcentaje variablej

esporádicos

endémicos: tasa mayor a 5 % a lo largo delos años

epidémicos: al menos 10 % de las vacas pen riesgo abortan en un período de 6 a 8 semanas

URUGUAY → endémica


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NEOSPOROSIS BOVINAesporádicos y endémicos:

propagación vertical

reactivación infección crónica

Vaquillonas congénitamente infectadas: riesgo 7.4 veces mayor a seronegativas

riesgo disminuye: 2 a 3 5 vecesriesgo disminuye: 2 a 3.5 veces

epidémicos: por transmisión horizontal, a partir de una fuente de exposición

NEOSPOROSIS BOVINAA i l i i i d bAnimales seropositivos: mayor riesgo de abortoVaquillonas seropositivas: mayor riesgo que vacasGanado lechero mayormente afectado

Aborto en determinadas líneas familiares

Abortos a lo largo de todo el año

Repetición de aborto: 5 – 7 %Raramente signos neurológicos en neonatos (siempre menores de 4 meses)


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NEOSPOROSIS BOVINA

Baja incidencia de seroconversión en rodeos

infectados endémicamente → baja tasa de infección

postnatal.

Infección postnatal alrededor del 7 %

Transmisión transplacentaria endógena y exógena

TECNICAS DE DIAGNOSTICO

HistopatologíaHE IHQ – técnica de referencia (Gold Standard)

Serología ( IFI y ELISA )Animales adultosAnimales adultosFetos

Aislamiento (inoculación y citocultivo)PCR


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Histopatología – Foco necrosis

Histopatología – Quiste


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Histopatología – Quiste

Histopatología – Taquizoitos


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Serología - IFI

Muy alta especificidad y sensibilidadNo hay reacción cruzada con T. gondiiPuntos de corte:

Bovinos adultos: 1:200 a 1:640Fetos: 1:25 a 1:80Caninos 1:50

Permite titular los suerosPermite titular los suerosInsume tiempoEs costosaNo se usa para estudios poblacionales

Serología - IFI


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Serología – IFI positiva

Serología - ELISA

Varios test de ELISAIndirecto, competitivo, ISCOMAvidity ELISA

Alta especificidad y sensibilidadDiferentes cut offEstudios poblacionalesMás económico que IFIMás económico que IFIMenos laborioso pues se procesan muchas muestras simultáneamenteNo es tan sencillo la titulación


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AISLAMIENTOMaterial infectado

Ratones Inmuno deprimidos

Cultivos celulares

Estudios serológicos- bovinos -

Bovinos adultos:o os adu osno siempre hay correlación entre título y aborto (1:800 o mayores)fluctuación: ¿reactivación? ¿reinfección ?

Fetos bovinos:Edad gestacional: IgG al 5º - 6º mesNivel de exposición → aborto o noNivel de exposición → aborto o noPeríodo infección → aborto o no

Técnicas: IFI y ELISA


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Serología diagnóstica bovinos1999 - 2011

4513 sueros de bovinos adultos 55 % ganado lechero43 % ganado de cría

2 % sin datos

3228 sueros de ganado abortado1258 + (39 %)

1285 sueros de ganado no abortado203 + (16 %)

820 fluídos fetales129 + (16 %)

Serología diagnóstica1999 - 2011

IFI sueros bovinos (n=4513)

32%

68%

IFI POSITIVA IFI NEGATIVA


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Resultados de la IFI en ganado abortado (n=3228)

39%

61%



R lt d d l IFI dResultados de la IFI en ganado no abortado (n=1285)

16%

84%



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Comparación resultados IFI:1999-2011 vs 2008-2011


1999-2011

39%


2008-2011

31%

61%


69%


Comparación resultados IFI:1999-2011 vs 2008-2011

Resultados de la IFI en ganado no abortado (n=465)

2008-201114%

Resultados de la IFI en ganado no abortado (n=1285)

1999-201116%

86%


84%



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Resultados serológicos según tipo y status

28.1%

51.6%

71.9%84.2% 84.1%

40%50%60%70%80%90%

100%

48.4% 15.8% 15.9%

0%10%20%30%

Lecheabortados

Carneabortados

Leche noabortados

Carne noabortados

% IFI POSITIVA % IFI NEGATIVA


DISTRIBUCION TITULOS ABORTADOS

800

1600

250300350400450500

n

200400

3200

6400 12800050

100150200

0 5000 10000 15000

Títulos


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DISTRIBUCION TITULOS NO ABORTADOSDISTRIBUCION TITULOS NO ABORTADOS

200

400304050607080

N

400800

160032000

102030

0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500

título


MEDIANA

ABORTADO: 1:1600

NO ABORTADO: 1:200


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DIAGNOSTICODiagnóstico presuntivo / definitivoDiagnóstico presuntivo / definitivo

Clínica → diferencialesSerología → orienta, no confirma

títulosEstudios histopatológicos – grado de lesionesLesiones o anticuerpos: ¿enfermedad?

Clínica + serología + histopatología

Fetos - coexistencia de más de un agente

Aborto – clasificación por etiología(DILAVE, Dra. M.C. Easton)

Bact.s/det.

9%5%

3%6%

26%

ViralBrucelosisCampylobacterLeptospirosisNeosporaTraumatico /DistociaS/d

22%25%

4%


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Aborto – clasificación por etiología(DILAVE, Dra. M.C. Easton)

Distribución de etiología de aborto bovinoDepartamentos de Tacuermbó, Rivera, Artigas, Salto,

Paysandú y DuraznoPeríodo 2002 - julio 2007

7% 1%8%5% 6%

23%

16%34%

Aborto infeccioso Brucelosis Campylobacteriosis LeptospirosisNeosporosis S/d Distocia Viral

Neosporosis bovina:control

C t l d l i f ió ti lControl de la infección vertical (transplacentaria)

Eliminación de bovinos abortados: 5 – 7% repitenEliminación seropositivos: evaluación económica de pérdidas probables y costo de sueconómica de pérdidas probables y costo de su eliminaciónReposición con seronegativosRiesgos de transmisión horizontalChequeo de receptoras para T.E.


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Control de la infección horizontalPresencia de perros: ¿ riesgo? – referenciasReexcreción de ooquistes: experienciasEliminación de los perros: ¿soluciona el problema?Perros nuevos en el establecimientoEvitar ingestión de fetos y membranas


VacunaciónVacunaciónEn evaluación, por ahora resultados preliminaresInoculación con taquizoitos previo a la preñez: protegió contra inoculación a mitad gestaciónVacas expuestas previamente tienen menor probabilidad de abortar durante un brote epidémicoeivdencia de que infección previa puede proteger contra laeivdencia de que infección previa puede proteger contra la TPI exógeno pero no endógenaCepas atenuadas?Vacunas deberían disminuir la tasa de aborto en animales previamente infectados y prevenir la infección postnatal de vacas no infectadas.


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Dr. Pedro BañalesDI.LA.VE. “Miguel C. Rubino

Sección ReproducciónTel.: 2222 10 63 interno 114

Email: [email protected]


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TAPA Seminario Enfermedades resproductivas [Modo de ......inmune (regulación de las citoquinas) favorece la reactivación de los bradizoitos y ... menores de 4 meses) Sitio Argentino