Su Tai to Hop Adn 6431

7/24/2019 Su Tai to Hop Adn 6431

http://slidepdf.com/reader/full/su-tai-to-hop-adn-6431 1/28

Báo cáo chuyên đề

KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC BẠC LIÊU

KHOA NÔNG NGHIỆP - MÔN DI TRUYỀN ĐẠI CƯƠNG

LỚP 2NT ! T"

CHƯƠNG V KỸ THUẬT DI T!U"#N



KỸ THUẬT TÁI TỔ HỢP ADN $% G&'

Khá( n()*

ADN +á( +, h-. đ/-c 01n2 đ3 ch4 các .h5n+6 ADN đ/-c +7o 89 +: h9( h9y nh(ều .h5n đo7n

ADN ;u<+ ;= +: các n2u>n 2?c @hác nh9u

K +hu+ +á( +, h-. ADN cn đ/-c 2E( F +7o0n2 .h5n +6 *oFcuF98 cFon(n2J

CHƯƠNG V KỸ THUẬT DI T!U"#N$P LNTM TỔ M



K +hu+ +á( +, h-. ADN đ/-c +hOc h()n nh/ +h no'

B#$ %&' ( )*+,

M H9( Fo7( ADN đ/-c Fy +8Qch ADN cR ch=9 2n cSn +7o 0n2 .F9*(0 c9 ( @huWn đRn2 9( +8 c9 *X+ c+o8

L CY ADN .F9*(0 đ/-c ;6 FZ [( c1n2 *X+ Fo7( n\y* 2([( h7n]n\y* 2([( h7n +7o 89 đSu 0Qnh ^ .F9*(0 ADN cSn +7o 0n2

_ `o7n ADN cSn +7o 0n2 đ/-c +8Xn [( .F9*(0

a Nhb n\y* F(29 các d9 ^ đSu 0Qnh c9 .F9*(0 e 2fn [(các d9 d, un2 ^ đSu 0Qnh c9 ADN +7o +hnh .F9*(0 +á( +, h-.

g PF9*(0 +á( +, h-. đ/-c chn o + do ( @huWn

i jO +7o 0n2 2n V( @huWn cR ch=9 .F9*(0 +á( +, h-. e (nh YnKh( ( @huWn +7o +hnh *X+ 0n2 + do +<+ cY các 2n c9 .F9*(0 +á( +,h-. ckn2 đ/-c +7o 0n2

Hlnh M +8am

$P LNTM TỔ M CHƯƠNG V KỸ THUẬT DI T!U"#N



Các n\y* 2([( h7nPh/n2 .há. đ()n 0(

Các c+o8 chuy3n 2n

jO +7o ADN +á( +, h-.

Chn ADN +á( +, h-. o + do ch

CHƯƠNG V KỸ THUẬT DI T!U"#N

NI DUNG

$P LNTM TỔ M



]n\y* 2([( h7n F n\y* cR @hY npn2 nhnd(+ nhqn2 đo7n +8lnh +O ADN nh<+ đrnh cf+ ADN ^ n29y +hb( đ(3* ny h9y ^ đ(3* @ cn

CR L đsc +Qnht Khn2 cf+ các F(ên @+ .ho+.ho0(+

^ đSu +n c1n2 +h9y o đR F cf+ dên +8on2 .h5n+6 ADN

t Ch4 cf+ @h( nhn 89 các +8lnh +O đsc+h1 +8lnh +O nhn d(+J d9o 2>* a đn v nucFo+(0 +h/bn2 F a h9y iJ


Các n\y* 2([( h7n 8+8(c+(on n\y*J



1. Hiện tượng giới hạn:

Các .h92 ;5* nh(w* + do ( @huWn (nh ( nhb dX *áy (nh +,n2 h-. c9 (@huWn Kh( ? F/-n2 .h92 +pn2 Fên hn2 +8()u dYn9o chxn2 e .há + do ( @huWn Tuy nh(ên

+8on2 *X+ ? +8/bn2 h-. + do ( @huWn znn2uyên {n .h92 ckn2 @hn2 (nh ( N2uyênnh5n F 0o ADN c9 .h92 dr *X+ h) +h?n2 dYo ) c9 ( @huWn +(êu 0()+ @h( :9 *[( ;5* nh. `5ychQnh F h()n +/-n2 2([( h7n




2. Tên gọi:

N2uyên +fc

t Chq +h= nh<+ (+ ho9 F chq đSu +ên c9 2(?n2 ( @huWn +:đR n\y* 2([( h7n đ/-c Fy +8Qch

t Chq +h= h9( +h= d9 @hn2 (+ ho9 =n2 [( +ên Fo( c9 (@huWn nR( +8ênt Chq +h= +/ (+ ho9 đ3 ch4 chn2 ( @huWn 6 0|n2 nu cRJt Chq ? $9 *} ch4 +h= +O n\y* 2([( h7n đ/-c .há+ h()n

+8on2 +8/bn2 h-. nh(ều n\y* 2([( h7n c1n2 đ/-c +l* +h<y ^ *X+

Fo( ( @huWnJ ~VQ 0| +8g• n\y* ]co!I

] € 2(?n2 ]ch8(ch(9co € Fo( coF(! € chn2 !"I_I € n\y* đSu +(ên đ/-c +l* +h<y ^ ]coF(CHƯƠNG V KỸ THUẬT DI T!U"#N$P LNTM TỔ M



3. Phân loại:

CR _ nhR* chQnh

t $o7( I Kh( n\y* nhn d(+ đ/-c +8lnh +O nR e 0( chuy3n+8ên ADN đn cách đR @hoYn2 M••• tg•••nucFo+(0

t $o7( II ]n\y* nhn d(+ +8lnh +O cf+ n29y r +8Q đRt $o7( III ]n\y* nhn d(+ +8lnh +O cf+ ADN ^ r +8Q cách đR

@hoYn2 L• nucFo+(0

]n\y* 2([( h7n Fo7( II đ/-c 6 0|n2 ch yu l nR cf+ +7( r +8Q 2([(h7n Th/bn2 cf+ ^ +8lnh +O ch(ều ;u( n2/-c nh/ nh9u VD ]co!I





ENZYME NGUỒN TRÌNH TỰ NHẬN BIẾT VÀ VỊ TRÍ CẮT

Alu I Athrobacter lutues5’ ------- A G C T ------ 3’3’ ------- T C G A ------ 5’

Bl I Brevibaterium5’ ------- T G G C C A ------ 3’3’ ------- A C C G G T ------ 5’

B! H I Bacillus amyloliquefaciens5’ ------- G G A T C C ------ 3’3’ ------- C C T A G G ------ 5’

E"# RI Escherichia coli 5’ ------- G A A T T C ------ 3’3’ ------- C T T A A G ------ 5’

H$ III Haemophylus aegypticus5’ ------- G G C C ------ 3’3’ ------- C C G G ------ 5’

H%&' III Haemophylus influenzae5’ ------- A A G C T T ------ 3’

3’ ------- T T C G A A ------ 5’

(u 3A Staphylococcus aureus5’ ------- G A T C ------ 3’3’ ------- C T A G------ 5’

T) I Thermus aquaticus5’ ------- T C G A ------ 3’3’ ------- A G C T ------ 5’

BYn2 M N2u>n +8lnh +O nhn d(+ r +8Q cf+ c9 *X+ ? n\y* 2([( h7n +8gMJ



Ph/n2 .há. đ()n 0( Fc+8o.ho8(JPh/n2 .há. đ()n 0( F uá +8lnh .h5n +ách *X+ h‚n

h-. các .h5n +6 ADN nhb *X+ ch<+ nền c? đrnh 2FJ +8on2

*X+ đ()n +8/bn2

`()n 0( ADNt ƒ đX .H 2Sn +8un2 +Qnh ADN +Qch đ()n 5* nên @h(

chru +ác đXn2 c9 đ()n +8/bn2 chxn2 e 0( chuy3n ề đ()n0/n2 c9 đ()n +8/bn2




`()n 0( ADN

t BYn 2F ho7+ đXn2 nh/ *X+ 2(á +h3 .h5n +ách các đo7n

ADNt Các F‚ đ/-c +7o 89 +8on2 dYn 2F đ/-c ;* nh/ các2(n2 ch=9 0un2 0(ch ADN

t H9( Fo7( 2F +h/bn2 đ/-c 6 0|n2 +8on2 n2h(ên c=u ADN F 2F .oFy9c8yF9*(0 2F 9298o




t Dun2 0rch ADN ch=9 h‚n

h-. các đo7n ADN cR@Qch +h/[c @hác nh9uđ/-c đ, o các 2(n2+8on2 dYn 2F

t Ch<+ nền 2F ho7+ đXn2nh/ *X+ +<* n2(J Các .h5n +6 ANDF[n đ( u9 các F‚ +8on2

dYn 2F @hR @hpn hn e dr ch* F7( o [( các.h5n +6 AND nh„


`()n 0( ADN



T?c đX 0( chuy3n .h| +huXc do @Qch +h/[c c9đo7n ADN đ()n +h +hnh .hSn 0un2 0rch đ)* n>n2 đXc9 2F nh()+ đX


`()n 0( ADN



Ph/n2 .há. đ()n 0( Fc+8o.ho8(J

Các đo7n ADN +8on2 2F e đ/-c h()n hlnh 0/[( +(9 +6

n2o7( nhb *X+ hoá ch<+ cR +ên F ethidium bromide Thu?c+h6 ny +7o F(ên @+ nhuX* [( các d9 n(+ chxn2 e.há+ hu…nh u9n2 0/[( +ác 0|n2 c9 +(9 +6 n2o7( d/[c Rn2Li• n*J các đo7n ADN h()n hlnh 0/[( 07n2 nhqn2 7ch*u đ„ c9*

N2o( 89 +hl cn *X+ .h/n2 .há. @hác đ3 h()n hlnh cácđo7n ADN +8ên dYn 2F đ()n 0( đR F phưng ph!p nhu"m bạ#.

Ph/n2 .há. nhuX* d7c

BYn 2F 9u đ()n 0( đ/-c n25* o 0un2 0(ch A2N†_ ADN e +/n2 +ác [( A2N†_ @h( d, un2 ‡o8*9F0hy+ ^ .H@(ề* (on d7c chuy3n +hnh d7c n2uyên +6 +7o các h7+ d7c@+ +9 cR *u ;á* cR +h3 .há+ h()n 0w 0n2





`()n 0(

t GF đ/-c đsc +8ên 2(á đ choo hX. đ()n 0( cR 0un2 0(ch đ)*

t Dun2 0rch ADN đ/-c cho ocác 2(n2

t Cho đ()n +8/bn2 ch7y u9 2F




Các đo7n ADN 9u @h( đ()n 0( đ/-c nhu* +h(0(u* d8o*(0



Các c+o8 chuy3n 2n

ˆu?n chuy3n đ/-c 2n *on2 *u?n +: +h3 cho

9n2 +h3 nhn hosc +ách 0n2 2n đ(ều c dYn F cSn.hY( cR + chuy3n 2n c+o8 chuy3n 2nJVc+o8 chuy3n 2n F .h5n +6 ADN cR @hY npn2

*9n2 đ/-c 2n cSn +h(+ +h/bn2 cR 07n2 n2 cR*X+ ? đsc +Qnh 9u

t CR đ(3* @h^( đSu 9o ch‰. o8(2(n o‡ 8.F(c9+(onJđ3 +O 9o ch‰. * +>n +7( đXc F. +8on2 + dot CR các đo7n +8lnh +O nhn d(+ cho n\y* 2([(

h7n 8>( đ3 h +7o n( Ff. 8áo cho các đo7n 2n F7t Co +8lnh +O @h^( đ(3* .8o*o+8J

t CR 0<u chuWn chEn FEc cho .h‰. 0w 0n2 .há+h()n nhn d(+ chxn2 +8on2 + do ch nhn Thn2+h/bn2 đR F +Qnh @hán2 [( @hán2 (nh 2(x. ( @huWn cR*9n2 c+o8 ?n2 đ/-c +8ên *( +8/bn2 cR @hán2 (nh




CR nh(ều Fo7( c+o8 .F9*(0 +hOc @huWn +h3 co*(0 "ACŠ$o7(

c+o8 đ/-c chEn 6 0|n2 +1y +huXc o @Qch +h/[c c9 đo7n ADNcSn +7o 0n2 *|c đQch +7o 0n2

Plasmid F nhqn2 đo7n ADN n2fn Ltg @dJ 07n2 n2 *7ch đ(n‹* n2o( NjT 9o ch‰. đXc F. [( O 9o ch‰. NjT c9 ( @huWn

CR +h3 nhn các ADN +7o 0n2 +[( M• @d

Thực khuẩn thể (phage) F (8u ;5* nh(w* F* .h5n 2(Y( (@huWn PhSn F[n các .h92 đ/-c 01n2 F* c+o8 h()n n9y đều df+n2u>n +: .h92 V()c 01n2 .h92 F* c+o8 cR nh(ều /u đ(3*

hn o [( các c+o8 .F9*(0 lt H()u uY ;5* nh(w* c9 +hOc @huWn +h3 o + do c9o hn nh(ềuo [( chuy3n .F9*(0 o + do ( @huWn

t KQch +h/[c đo7n ADN * c+o8 cR +h3 +(. nhn F[n hn L• @dJ


Các c+o8 chuy3n 2n

λ




Các c+o8 chuy3n 2nVD

t Vc+o8 .F9*(0 .B!__L0o BoF(98 !o0(2u\MmŒŒJ +h(+ @ cho .h‰.*9n2 đo7n ADN 0( đn i@d

t Ph92 ˆM_ +h/bn2đ/-c 6 0|n2 F* c+o8+ách 0n2 nR cR ADN -(đn ch=9 M• 2n cR @Qch+h/[c @hoYn2 ia @d ch45* nh(w* o ]coF(



Cosmid F c+o8 F9(c9 .F9*(0 .h92*9n2 các /u đ(3* c9h9( c+o8 MJ @hY npn2+O +á( dYn ? F/-n2 F[nc9 .F9*(0 LJ cR @hYnpn2 đRn2 2R( (nt(+8onh/ .h92 CR @hY npn2*9n2 các đo7n ADN cR

@Qch +h/[c 0( đn _g ag @d


Các c+o8 chuy3n 2n



Các NST nhân tạo của nm men (!"C# !east "$ti%iciakCh$omomes)& ƒ n<* *n các j9cch98o*c c8(9 các NjT

*u?n nh5n đ( .h5n Fy +?+ cSn cR _ +8lnh +O F T$% +Fo*8(cunc +8lnh +O đSu cu?( c9 NjTJ &$' cn+8o*8(unc +8lnh +O +8un2 +5* c9 NjTJ ()* Au+ono*ou!.F(c9+(n2 junc +8lnh +O 9o ch‰. +O chJ "AC cho .h‰.+7o 0n2 nhqn2 đo7n NjT cR @Qch +h/[c F[n +: Mg• M•••@d


Các c+o8 chuy3n 2n



Các c+o8 chuy3n 2n cR các =n20|n2 ch yu

t T7o 0n2 nh5n 0n2 các đo7n +8lnh +O hosc 2nđ3 +7o nh(ều dYn 9o 2(?n2 nh9u

t N2h(ên c=u O d(3u h()n c9 *X+ đo7n +8lnh +O ADN hosc *X+ 2n

t Chuy3n 2n o + do ( (nh + @hác + chnhnJ

t jYn ;u<+ các A!N

t jYn ;u<+ .8o+(n đ/-c +,n2 h-. +: 2n đ} đ/-c+7o 0n2




jO +7o ADN +á( +, h-.

















Documents

Su Tai to Hop Adn 6431