S S SSTUDI KASUS

VERIFIKASI ANALISIS COLIFORM PADA AMDK DENGAN

METODE MPNMETODE MPN

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 1

Kasus Suatu Laboratorium akan menggunakan

metode sesuai dengan SNI 19-2897-1992 butir 2.2 untuk pengujian Coliform

Metode tersebut akan digunakan untuk analisis rutin pada contoh AMDK

Sebelum digunakan maka harus dicek dahulu apakah metode tersebut layak dan dapatapakah metode tersebut layak dan dapat digunakan untuk matriks contoh dan lab tersebut

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 2

tersebut

Metode Pengujian Sesuai dengan SNI 19-2897-1992 butir 2.21 Pipet 10 ml dari masing-masing dalam 5 tabung yang berisi 10 1. Pipet 10 ml dari masing masing dalam 5 tabung yang berisi 10

ml LSTB double streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik

2. Pipet masing-masing 1 ml dan 0.1 ml contoh kedalam 5 tabung p g g gyang kedua dan ketiga yang berisi 10 ml LSTB single streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik

3. Inkubasi semua tabung dalam inkubator pada suhu 36 ± 1C s l 24 48 jselama 24-48 jam

4. Setelah 24 jam, catat jumlah tabung yang membentuk gas pada masing-masing pengenceran dan simpan lagi tabung yang tidak membentuk gas dalam inkubator pada suhu 36 ± 1C tidak membentuk gas dalam inkubator pada suhu 36 ± 1 C selama 24 jam

5. Kemudian catat tabung yang membentuk Gas

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 3

Uji Penegasan

Pindahkan sebanyak 1 ose dari tiap tabung yg membentuk gas pada media LSTB ke dalam tabung yang berisi 10 ml BGLB.

Masukkan semua tabung kedalam inkubator pad suhu 36±1°C selama 24-48 jam. Adanya gas pada tabung BGLB memperkuat adanya bakteri coliform dalam contoh

Catat jumlah tabung yang membentuk gas

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 4

Bakteri Coliform (MPN 5 Tabung)

+ 10 mL sampel p+ 10 mL LSTB (DS)

+ 1 mL sampel

Sampel

+ 1 mL sampel + 10 mL LSTB (SS)

Inkubasi 36oC

+ 0,1 mL sampel + 10 mL LSTB(SS)

24-48 jam

Catat jumlahtabung yangmembentuk gas

Uji Penegasan

Tabung yang membentuk gas

1 ose (sengkelit) + 10 mL BGLBB

Inkubasi 36 1oC

Catat jumlah tabung yang

membentuk gas

24-48 jamtabung yang membentuk gas

Hitung jumlah bakteri berdasarkan

t b l MPN i 5

LSTB = Lauryl Sulfate Tryptose BrothBGLBB = Brilliant Green Lactose Bile Broth

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 5

tabel MPN seri 5 tabung

Metode Pengujian

Prosedur dilakukan menurut diatas Metode tidak mengalami perubahan

dalam hal media peralatan maupundalam hal media, peralatan maupun cara kerja

VERIFIKASIM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 6

Verifikasi Metode

Kriteria: - Sensitifitas- Spesifisitas- Spesifisitas- False positif rate

F l tif t- False negatif rateConfidence limit 95%

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 7

Verifikasi Metode

SampelSa pe- Sampel rutin- Sampel rutin yang dispike- Kultur bakteri (satu strain atau lebih)Kultur bakteri (satu strain atau lebih)

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 8

Verifikasi Metode Prosedur

Persiapkan contoh sesuai prosedur (dalam tingkat- Persiapkan contoh sesuai prosedur (dalam tingkat konsentrasi berbeda)

- dikerjakan oleh analis yang berbeda misal: 1 analisdikerjakan oleh analis yang berbeda misal: 1 analis 15 x pengulangan jadi 2 analis ada 30 x pengulangantotal pengerjaan 450 tabung

- Inokulasikan contoh pada media atau tabung-tabung pertumbuhanHit j l h itif d tif- Hitung jumlah positif dan negatif

- Konfirmasi dgn uji kimia untuk tabung yg positif

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 9

Verifikasi Metode Hasil Analisa

Tabung negatif 50 tabung- Tabung negatif 50 tabung- Tabung positif pada LSTB 400 tbg

Konfirmasi pada BGLB

Positif ?Positif..?

False Negatif…?

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 10

Verifikasi Metode Hasil Analisis

Verifikasi Metode

S CSusu CairKonfirmasi

Dugaan

positif negatif

Positif A.Positif400 tbg

B. False Negatif0 tbg

Negatif C False positif D NegatifNegatif C. False positif0 tbg

D. Negatif50 tbg

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 11

Verifikasi Metode

PERHITUNGAN

Sensitifitas = 400/(400+0) X 100 = 100 %

S ifit 50/(50+0) 100 100 %

Metode Baik

Spesifitas = 50/(50+0) x 100 = 100 %

False positive rate = 0

False negative rate = 0

E = (400+50/450) x 100 = 100 %E = (400+50/450) x 100 = 100 %

Jumlah tabung = 450 tabung

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 12