Spekrofotometri UV

7/25/2019 Spekrofotometri UV

1/12

ANALISIS KADAR KAFEIN DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI

ULTRAVIOLET (SPEKTROFOTOMETRI UV)

Wilda Sholihaturrabiah

260110130159

Laboratorium Analisis Fisikokimia Fakultas Farmasi, Universitas ad!ad!aran e"mail#

$ilda$ildas11%&mail'(om

Fakultas Farmasi Universitas ad!ad!aran, )am*us +atinan&or 5363

A-S./A)

)aein den&an rumus kimia 1042 adalah alkaloid xanthineberbentuk kristal

*utih dan *ahit rasana, an& berun&si seba&ai obat stimulan' Untuk men&etahui

(ara *eneta*an kadar suatu sena$a men&&unakan instrumen s*ektrootometri'

7etode an& di*akai dalam *raktikum kali ini adalah metode s*ektrootometri U8'

ada metode s*ektrootometri U8 *en&ukuran absorbansi kelima larutan den&an

konsentrasi berbeda memberikan data seba&ai berikut, untuk konsentrasi 1 **m

0,012:6: ; 2 **m 0,03:: ; 2'5 **m 0,02033; 5**m 0,1663;10 **m

0,16596:; 20 **m 0,6122 ; 25 **m 0,56033'


2/12

S*ektrootometri Ultraviolet' rinsi*

ker!ana berdasarkan *enera*an (ahaa

atau ener&i radiasi oleh suatu larutan'

+umlah (ahaa atau ener&i radiasi an&

disera* memun&kinkan *en&ukuran

!umlah @at *enera* dalam larutan

se(ara kuantitati' ner&i radiasi terdiri

dari se!umlah besar &elomban&

elektroma&netik den&an *an!an&

&elomban& an& berbeda B beda' -a&ian

B ba&ian suatu radiasi da*at di*isah B

*isahkan men!adi s*e(trum

elektroma&netik >e(sok et al. 19:6;

Skoo& C West 19:1?'

S*ektrootometer adalah alat untuk

men&ukur transmitan atau absorban

suatu sam*el seba&ai un&si *an!an&&elomban&' Sedan&kan *en&ukuran

men&&unakan s*ektrootometer ini,

metoda an& di&unakan serin& disebut

den&an s*ektrootometri >-asset, 199?'

7etode S*ektrootometri Ultraviolet

telah banak ditera*kan untuk *eneta*an

sena$a B sena$a or&anik an&

umumna di*er&unakan untuk

*enentuan sena$a dalam !umlah an&

san&at ke(il'


3/12


4/12

Penent"an Pan#an! Gel$man!

Sebanak 1 mL di*i*et ke dalamlabu tentukur 10 mL, ditambah etanol

hin&&a 10 mL >50 **m?'


5/12

dien(erkan hin&&a 10 mL' Sera*an

sam*el diukur *ada *an!an& &elomban&

maksimum kaein'

HASIL DAN PEMBAHASAN

ada *raktikum kali ini aitu

dilakukan analisis kadar kaein den&an

metode Se*ektometri Ultra 8iolet'

.u!uan dari *raktikum kali ini aitu

untuk men&etahui kadar kaein den&an

analilsis S*ektrootometri U8' Analisis

den&an metode Se*ektrometer U8 aitu

berdasarkan larutan *erbandin&an

konsentasi an& tidak diketahui, den&an

larutan standar aitu larutan kaein an&

diketahui konsentrasina' .eta*i *ada

*raktikum kali ini, sam*el adalah larutan

kaein an& telah diketahui

konsentrasina, dan tu!uan *en&u!ian ini

adalah untuk membandin&kan a*akah

konsentrasi an& dida*at dari analisis

men&&unakan s*ektrootometer U8

sesuai den&an konsentrasi sebenerna

atau tidak'

rinsi* dasar dari metode

S*ektrootometer U8 ini adalah radiasi

ultaviolet diabsorbsi oleh molekul

or&anik aromatik, molekul an&

men&andun& elektron *hi terkon!u&asi

dan atau atom an& men&andun&

ele(tron"n, meebabkan transisi elektron

di orbital terluarna dari tin&kat ener&i

ele(tron dasar ke tin&kat ener&i

tereksitasi lebih tin&&i' -esarna sera*an

radiasi tersebut sebandin& den&an

banakna molekul analit an&

men&absorbsi sehin&&a da*at di&unakan

untuk analisis kuantitati >Setiadarma,

200?'

Sam*el an& di&unakan adalah

kaein anhidrat'


6/12

an& mem*unai &u&us aromatik

terkon!u&asi' Gu&us un&si an&

menera* radiasi di daerah ultraviolet

dekat disebut kromoor dan ham*ir

kromoor mem*unai ikatan tak !enuh'

+adi, kaein ini bias dideteksi oleh

s*ektrootometer U8, karena

mem*unai &u&us aromati( terkon!u&asi

dan &u&us kromoor'

al *ertama an& dilakukan adalah

den&an *embuatan larutan standar dari

kaein anhidrat an& dilarutkan *ada

etanol 96E an& dibuat *ada variasi

konsentrasi 1 **m; 2 **m; dan 2,5 **m;

5 **m; 10 **m; 15 **m; 20 **m dan 25

**m' 8ariasi konsentrasi di&unakan

untuk membuat kurva standar' )elarutandari kaein sendiri aitu sedikit larut

dalam etanol, sehin&&a 50 m& kaein

akan dilarutkan dalam 100 mL etanol'

Selain itu dibuat !u&a larutan

blanko an& berisi etanol 96E' Larutan

blanko dibuat den&an tu!uan untuk

men&oreksi sera*an an& disebabkan

*elarut *ereaksi, sel atau*un *en&aturan

alat dan men&ukur sera*an *ereaksi an&

di&unakan untuk analisis kadar kaein

anhidrat'

Selan!utna melihat *an!an&

&elomban& maksimum den&an (ara

men&ukur absorbansi larutan standar

diukur *ada H 250"300 nm an&

di&unakan dalam analisis kadar kaein

anhidrat' en&ukuran sera*an atau

absorbansi dilakukan *ada suatu *an!an&

&elomban& an& sesuai den&an sera*an

maksimum karena konsentrasi besar

terletak *ada titik ini, artina sera*an

larutan en(er masih terdeteksi' an!an&

&elomban& an& maksimum memiliki

ke*ekaan maksimal karena ter!adi

*erubahan absorbansi an& *alin& besar

serta *ada *an!an& &elomban&

maksimum bentuk kurva absorbansi

memenuhi hukum Lambert-eer' an!an&&elomban& maksimum *ada *en&ukuran

nilai absorbansi ini adalah 2: nm'

an!an& &elomban& maksimum untuk

menera* absorbansi maksimum

terda*at *ada *an!an& &elomban& 2:3

"2: nm'

asil *en&ukuran absorbansi dari

larutan standar besi ter(antum dalam

Tael

)onsentrasi >**m? Absorbansi /ata"rata

1 0,012:6:

6


7/12

2 0,03:: 2'5 0,02033

7


8/12

5 0,1663 10 0,16596:

8


9/12

y = 0,025771x-0,01622

R = 0,932

-0.5000

0.0000

0.2500

0.5000

0.7500

1.0000

0 25

Absorbansi

Konsentrasi

Kurva Baku Kafein

20 0,6122

25 0,56033

Tael asil en&ukuran Absorbansi

Larutan Standard den&an -erba&ai

)onsentrasi *ada H 2: nm'

Setelah menda*atkan dataabsorbansi dari berba&ai variasi

konsentrasi kemudian di*lotkan terhada*

konsentrasi sumbu meru*akan sera*an

atau absorbansi sumbu = meru*akan

konsentrasi dari kaein sehin&&a

terbentuk kurva kalibrasi dan *ersamaan

linear' -erikut meru*akan kurva

kalibrasi larutan kaein anhidrat standar'

Gama% ' )urva )alibrasi Larutan

Standar )aein Anhidrat'

-erdasarkan kurva an& dida*at

dari data abrosrbansi, hal ini sesuai

den&an hukum Lambert -eer, A I b (,

dimana absorbansi berbandin& lurus

den&an konsentrasi artina semakin

besar nilai konsentrasi larutan maka

semakin tin&&i konsentrasi larutan

kaein anhidrat maka semakin besar *ula

nilai absorbansina'

Selan!utna aitu dilakukan

*en&ukuran untuk sam*el larutan kaein

anhidrat an& belum diketahui

konsentarsina an& telah ditambahkan

den&an etanol 96E' en&ukuran

dilakukan den&an men&&unakan

s*ektrootometer U8 *ada *an!an&

&elomban& maksimum an& telah

ditentukan sebelumna, aitu 2: nm'

asil absorbansi an& di*eroleh da*at

dilihat *ada Tael *

9


10/12

Tael * asil en&ukuran Absorbansi

Larutan Sam*el *ada H 2: nm'

)adar kaein dalam sam*el da*at

dihitun& den&an men&&unakan

*ersamaan &aris re&resi dari kurva

standar

0,025::1="0,01622

a=Jb; =

dimana# = # )onsentrasi kaein anhidrat

*ada sam*el

# Absorbansi rata"rata

a # 0,025::1= b # 0,01622

r2 0,932


11/12

DAFTAR PUSTAKA

-asset, +' 199'Kimia Analisis

Kuantitatif Anorganik' +akarta#

G'

7aramis, /')' 2013' Analisis )aein


12/12

Documents

Spekrofotometri UV