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EL SISTEMA RHESUS (Rh)
En 1940 Landsteiner descubre otro antígeno en los hematíes, que era el
responsable de que los recién nacidos de madres que no tenían ese antígeno en
sus hematíes pero si el anticuerpo correspondiente en su plasma, murieran
dentro del útero durante el embarazo o padecieran una enfermedad muy grave
tras el nacimiento (enfermedad hemolítica del recién nacido). A este antígeno lo
denominó “Rh” por haberse realizado los primeros descubrimientos en el mono
“MACACO RHESSUS”. Observó que al introducir hematíes humanos a estos
monos, estos fabricaban un anticuerpo que era capaz de “aglutinar” los hematíes
del 85% de la población blanca. Llamó “ Rh positivos “ a los hematíes que eran
aglutinados por ese anticuerpo, (llevaban el antígeno Rh en su superficie) y “Rh
negativos” a los que no eran aglutinados (no tenían antígeno Rh en su
superficie).
El sistema Rhesus está constituido por unos cuarenta antígenos distintos cinco
de los cuales revisten una importancia especial. Para designar los diferentes
antígenos del sistema Rh existen dos nomenclaturas principales que se utilizan
indistintamente la de Fisher-Race y la de Wiener.
La terminología de Fisher-Race se basa en la suposición de que se heredan de
cada progenitor tres genes situados en loci muy próximos. Los alelos más
comunes que pueden ocupar dichos loci se designan con los símbolos D y d, C
y, E y e. Cada gen (con excepción del d) codifica un antígeno específico, que
puede ser detectado en la membrana del hematíe. Es posible que sea una alelo
silencioso. La presencia o ausencia del antígeno D es la que determina si un
individuo es Rh positivo o negativo.
La nomenclatura de Wiener se basa en la herencia de un solo gen procedente
de cada progenitor. Cada gen tendría una estructura en mosaico, que
comprendería un número variable de antígenos sanguíneos. Así, el gen R1
codificaría factores que corresponderían a C, D, y e de la nomenclatura de
Fisher-Race. El gen reproduciría los antígenos c y e pero no D, C ni E.
El 85% de los individuos caucasoides expresan el antígeno D y se les denomina
Rh positivos. Si el antígeno D no se expresa se denomina al individuo Rh
negativo, estos heredan los antígenos C o E pero no el D. El genotipo de la
mayoría de los individuos Rh negativos es rr (dce/dce).
El antígeno D es un potente inmunógeno. Aproximadamente el 70% de los
individuos Rh negativos producen anti-D si reciben sangre Rh positiva. Los
antígenos C y E no son tan inmunógenos.
TEORIA DE FISHER-RACE TEORIA DE WIENER
3 GENES ESTRECHAMENTE
UNIDOS, HEREDADOS
DE CADA PROGENITOR
1 GEN Rh
HEREDADO DE
CADA PROGENITOR
GEN EN MOSAICO
QUE CODIFICA MULTIPLES
FACTORES SANGUÍNEOS
Finalmente, Rosenfield, tan solo propone una nomenclatura, en la cual cada uno
de los diversos antisueros Rh recibe un número Rh1, Rh2, etc. Este sistema
hace posible una determinación del fenotipo basada tan solo en los resultados
observados con los antisueros empleados.
NOMENCLATURA ANTIGENOS DEL SISTEMA Rh
FISHER-RACE WIENER ROSENFIELD
D Rh Rh1
C rh Rh2
E rh” Rh3
C hr Rh4
E hr” Rh5
Tabla 1.
ANTÍGENOS DEL SISTEMA Rh
Los antígenos del sistema Rh son proteínas que forman parte integrante de la
membrana de los eritrocitos únicamente. (No se encuentran en otras células o en
las secreciones.
A parte del antígeno D, que permite clasificar a los individuos en Rh positivos y
Rh negativos, existen otros antígenos en el sistema Rh. De estos los principales
son C, c, E, e. Anticuerpos hacía cualquiera de estos antígenos pueden ser
producidos por un individuo cuyos glóbulos rojos carecen de los mismos.
EL D
El D es una variante débil del antígeno D poco frecuente entre los individuos
caucasoides, pero común entre los individuos de raza negra (22%). Los
hematíes D generalmente dan reacciones débiles o negativas con el anti-D,
siendo generalmente detectados gracias a la prueba indirecta de la antiglobulina
(prueba D). Los hematíes D pueden ser clasificados en tres categorías.
D ADQUIRIDO. La herencia del gen C en posición trans con relación al gen D
(dce/DcE) tiene como resultado una expresión débil del antígeno D en los
hematíes (D). Los individuos que representan estas características no producen
anti-D si reciben sangre Rh positiva.
D DEPRIMIDO
GENOTIPO Dce/dce Dce/dCe
C en posición cis con
respecto a D
C en posición trans con
respecto a D
Expresión normal del
antígeno D Fenotipo como D
VARIANTE D. El antígeno D presenta una estructura que consta como mínimo
de cuatro partes. Si faltan una o más partes del antígeno el resto de este puede
tener una expresión débil. Un individuo con la variante D puede producir
aloanticuerpos contra la parte del antígeno D que le falta. Estos deben ser
transfundidos con sangre Rh negativa.
VARIANTE D
Antígeno D Normal
Variante D falta parte del antígeno D
D HEREDITARIO. Algunos individuos D no pueden ser clasificados como D
adquirido ni como variante D, puesto que, si bien poseen el antígeno D completo,
éste está débilmente expresado, desconociéndose la causa de este hecho.
Antígeno D Normal
D Hereditario
HEMATÍES CON DELECCIÓN Rh (- D -) y Rh nulo
De los hematíes que no poseen los antígenos dependientes de los loci C ni E se
dice que presentan delección (- D -). El número de lugares antigénicos D está
muy aumentado en estos hematíes y por tanto el anti-D de tipo IgG puede
aglutinarlos.
De los individuos que no expresan ninguno de los antígenos del sistema Rh en
sus hematíes se dice que tiene Rh nulo (- - -). Los hematíes de éstos tienen
alterado el transporte de sodio y potasio. Esto da lugar a una anemia hemolítica
caracterizada por estomatocitosis, esferocitosis y aumento de la fragilidad
osmótica.
ANTICUERPOS DEL SISTEMA Rh
Los anticuerpos del sistema Rh son casi siempre IgG, siendo estimulada su
producción por transfusión o por embarazo (Enfermedad hemolítica del recién
nacido). No activan el complemento debido a que la situación de los antígenos
Rh de la membrana del hematíe no permite la formación de dobletes de IgG
necesarios para la activación del mismo.
Los anticuerpos anti-D se emplean para prevenir la inmunización de las
personas Rh negativas que han recibido hematíes Rh positivos a través de una
transfusión o de un embarazo. La administración antes de 72 horas de
inmunoglobulina anti-D consigue destruir los hematíes Rh positivos circulantes
antes de que el sistema inmune del receptor se active.
GENOTIPO
El término Rh positivo se refiere tan sólo a la presencia del antígeno D en los
glóbulos rojos. No indica si la formación genética de la persona es homocigota
(D/D) o heterocigota (D/d). En cualquier persona puede determinarse el genotipo
presuntivo.
DETERMINACION DEL Rho
TIPOS DE MUESTRAS Y CONSERVACIÓN:
Ver el apartado referido a la determinación del grupo ABO.
TÉCNICAS:
Se emplean anticuerpos anti-D de tipo IgG conseguidos a partir de una mezcla
de sueros humanos obtenida de donantes inmunizados.
Prueba en porta.
Se toman dos portaobjetos convenientemente rotulados. En uno
ponemos una gota de suero anti-D, en el otro una gota del CD (Control
negativo).
Añadimos dos gotas de sangre total, a cada uno de los dos portas.
Se mezcla bien la sangre y el reactivo con distintos palillos
mezcladores.
Se colocan los portas sobre el visualizador precalentado.
Conviene mover el visualizador durante dos minutos. A continuación
se observa macroscópicamente la presencia de aglutinación.
La lectura de cada uno de los portaobjetos admite dos posibilidades.
o Reacción negativa: no hay ningún signo visible de aglutinación, debe ser
confirmada con la prueba del D.
o Reacción positiva: la sangre con anti-D muestra aglutinación visible, y el
control negativo no.
Prueba en tubo.
Rotular dos tubos, uno para el anti-D, y el otro para el control negativo
(CD).
Preparar una suspensión de hematíes del paciente al 5%. Lavar tres
veces con salino, centrifugando durante un minuto a 3.500 r.p.m.
En el tubo del D poner una gota de anti-D, y añadir una gota de la
suspensión de hematíes, en el tubo del control poner una gota del control
negativo y una gota de la suspensión de hematíes.
Agitar ligeramente los dos tubos y centrifugar 15 segundos.
Leer los resultados macroscópicamente en el visualizador.
Siempre que resulte, el control del D, positivo, hacer test de Coombs Directo.
A todo Rho negativo se le efectuará un D y un CDE.
TEST PARA EL D
1. Incubar a 37° C durante media hora, el mismo tubo en el que se haya
realizado el anti-D, que dio negativo.
2. Lavamos 3 veces, los hematíes con solución salina isotónica.
Decantamos el último sobrenadante.
3. Se añade una gota e suero antiglobulina humana y se mezclan.
4. Se centrifuga durante 30 segundos. Leemos macroscópica y
microscópicamente.
5. Si no hay aglutinación se dará como D (-) y D (-).
6. Si hay aglutinación se hará un anti-D salino, para ello:
o Echar en un tubo 1 gota de anti-D salino, más una gota de
suspensión de hematíes al 5%.
o Incubar a 37° C durante 15 minutos.
o Centrifugar y leer macroscópicamente. Sólo si el anti-D salino da
negativo se considera D positivo. En caso contrario se dará como
D positivo.
CDE
1. Rotular un tubo CDE y poner en el mismo una gota de anti-CDE.
2. Añadirle una gota de suspensión de hematíes al 5% del paciente.
3. Incubar a 37° C durante 15 minutos.
4. Centrifugar 15 segundos y leer microscópicamente si hay aglutinación.
GENOTIPO
1. Rotular cuatro tubos: C, E, c, e.
2. Preparar una suspensión de hematíes al 5% del sujeto a genotipar.
3. Poner en cada tubo, una gota de la suspensión de hematíes, y una gota
del antisuero correspondiente. (anti-C, anti-E, anti-c, anti-e).
4. Incubar durante 15 minutos, los cuatro tubos, a 37° C en baño María.
5. Centrifugar 15 segundos a 3.500 r.p.m., y leer macroscópicamente.
6. Apuntar resultados, ver en tablas genotipo correspondiente.
Rho positivo
D C E c e Genotipo Símbolo
+ + - + + Dce/dce Rr
Rho negativo
D C E c e Genotipo Símbolo
- + - - + dCe/dCe rr