Sistema diagnSistema diagnóóstico das doenstico das doençças as metabmetabóólicas de ruminanteslicas de ruminantes

Rafael Rafael TonietoTonietoEduardo SchmittEduardo Schmitt

PopulaPopulaççãoão

• Suspeita de desequilíbrio na dieta

• Elevada incidência de transtornos metabólicos

• Controle do balanço energia-proteína

• Balanço de minerais

• Problemas Produtivos

• Problemas de fertilidade

IndivIndivííduoduo

• Ferramenta para diagnóstico clínico

Quando Utilizar ???Quando Utilizar ???

Sistema de Diagnóstico das Doenças Metabólicas em Ruminantes

• Anamnese – análise de registros – análise da dieta

• Exame físico do animal – coleta de amostras

• Análise das amostras em nível de campo e

laboratório

• Interpretação dos resultados

Provas de Campo

Análise de liquido ruminal• Exame organoléptico• Determinação do pH• Atividade redutiva da flora

Análise da urina• Exame organoléptico• Determinação do pH• Proteínas• Fitas reativas – acetona, bilirrubina...

Análise de Leite• Exame organoléptico • Prova de Califórnia (CMT) - mastite

Exames LaboratoriaisExames Laboratoriais

SangueSangue

Pato

logi

a C

línic

aPa

tolo

gia

Clín

ica

Hemograma

LeucócitosLeucócitosContagemDiferenciação

AnAnáálises Bioqulises Bioquíímicasmicas

BalanBalançço Energo Energééticotico• Glicose

– Pouca variação – mecanismos de homeostase• ( cetose, idade, diabetes, subnutrição)

• β-hirdoxibutirato– Mobiloização de gordura

• ( ruminantes ↑ 1,00mMol/L)

• Colesterol– Total de lipídeos no plasma – correspondem a 30% do total– hormônios tiroidianos hipofisários e adrenais

• ↓ Deficiência de alimentos energéticos, lesão hepática, periparto• ↑ hipotireoidismo, diabetes e pancreatite

• AGL ou NEFA– Oscilações diárias

• ↑ periparto

BalanBalançço o ProteicoProteicoUréia

– Proteína na dieta (Indicador a curto prazo de ingestão proteica)– Funcionamento Renal– Jejum

Proteínas Totais– Desidratação– Falhas hepáticas, transtorpos intestinais, estado nutricional (periparto)

Albumina– Indicador a longo prazo de ingestão proteica

Hemoglobina– Aumenta com a idade e desidratação– Diminuição deficiência de minerais, proteínas, hemólise, hematozoários

Globulinas– Totais – Albumina– Inflamação– Vacinações– Correlação negativa com a Albumina– Verificar as adaptações ao estresse – maior, mais estressados

Perfil de Perfil de MacromineraisMacrominerais

• Cálcio (Ca)

• Fósforo inorgânico (Pi)

• Magnésio (Mg)

• Sódio (Na)

• Potássio (K)

Perfil de Perfil de MicromineraisMicrominerais

• Cobre

• Glutation-peroxidase (GSH-Px)

• Se

• Zinco

Perfil EnzimPerfil Enzimááticotico

• Asparto Amino transferase (AST)– Fígado, Tec. Musc. Cardíaco e esquelético,

eritrócitos

• Gama-glutamiltransferase (GGT)– Lesão hepática ou renal

• Glutamato desidrogenase (GDH)– Enzima hepato-específica

UrináliseUrinUrinááliselise

Importância da Coleta e Análise de Urina

• Principal fluído de excreção de substâncias nocivas ao organismo

• Produto de seletiva e específica filtração do sangue pelos rins

• Importante no diagnóstico de algumas enfermidades metabólicas (acetonemia e acidose ruminal)

• Taxa de filtração, reabsorção e excreção de alguns nutrientes e catabólitos pelos rins

Coleta das Amostras

• Fácil coleta - sem estresse ao animal

• Sonda uretral - vacas de grande porte

• Diuréticos – Furosemida (0,8 – 1,5 mg/Kg/PV)

• Urina mais ácida e menor osmolaridade

• Maior excreção de NH4+, reabsorção diminuída na alça de

henle

Conservação da Amostras

• Colhida e analisada rapidamente

• Volatilização de substâncias – acetona

• Instabilidade química do ß-hidróxibutirato e acetoacetato

• Análise 30 min após coleta – perda 40% concentrações

• Degradação da uréia – bactérias contaminantes - ↓pH

• Refrigeração á 4°c até 12 horas

• Adição ácidos fortes (sulfúrico ou clorídrico)

• Bloqueio da urease – uréia → amônio → amônia

Exame de Urina1. 1. CorCor• Amarela clara a escura leve - normal• Incolor • Amarela ouro• Vermelha-marron a vemelha-escura2. 2. ViscosidadeViscosidade• Líquido aquosa - normal• Mucosa – muco ou pus3. 3. CheiroCheiro• Levemente aromático – normal• Adocicado – acetonemia• Amoniacal - infecções bacterianas

Proteínas na Urina

• Ausentes ou muito baixas concentrações (<10mg/l)

• Prova de precipitação - Àcido Sulfosalicílico

• Concentração de proteína = grau de turbidez da mescla

• Avaliar a mudança

• Comparando amostra problema com outra amostra sem

reagente do mesmo animal

• Fazer uma marca na parte posterior do tubo

Critério de Leitura e Interpretação

ResultadoResultado SignificadoSignificado DiagnDiagnóósticosticonegativo não hnão háá turbidezturbidez

+ turbidez leveturbidez leve Lesão localizada crônica

+ + turbidez elevadaturbidez elevada Lesão traumática localizada aguda

+ + + precipitaprecipitaççãoão hepatite e esplenite traumática

+ + + + coagulacoagulaçção ão imediataimediata

Inflamação difusa

pH Urinário

• Balanço de íons H+ e de bicarbonato na urina

• Reflete o estado de acidose ou alcalose do organismo

• Não espelha o que acontece no sangue - compensatório do

íon oposto

• Utilizado como rotina para avaliar a eficiência da

administração de sais aniônicos para prevenir a hipocalcemia

da parturiente em vacas secas no final da gestação

• Aferição através de potenciômetro

Variação do pH

• Ao longo do dia - mais ácido após alimentação

• Dieta ↑↓[Na+ e K+] em relação aos ↑↓[Cl- e S-- ] =↑↓pH

• Dieta ricas em carboidratos – Maior formação de AGV

• Acidose e alcalose metabólica ou respiratória

• pH urinário e concentração ácido-base do sangue

2. Corpos Cetônicos

• Formados pelos metabolismo das gorduras

• Existência CC são insignificantes <7mg/ml

• 4 moles CC na urina = 1 mol sangue e 0,5 mol

no leite

• Prova de triagem = outros fluidos

Provas para detecção de Corpos Cetônicos

1. Fitas Reativas

Sensível e específica - ác.acetoacético

Reação positiva rosa ++++ púrpura

Indicativos de Estado de Cetose

• Ovelha prenhe de dois fetos = 1mM/L (8mg/dl) – risco

• Jejum e estado de anorexia por 24 horas• Vacas leiteiras em lactação

• Ovelhas e cabras em bom estado nutricional

• ++ não deve ser considerado estado de cetose

Toxemia da prenhez ovinos= 12 mM/LCetose em bovinos = 8 mM/L

Análise do Fluído Ruminal

Análise do Fluído Ruminal

Obtenção e Análise do fluído Ruminal

• Sonda ruminal

• Ruminocentese

• 3 a 5 horas após a alimentação

• Eliminar primeiros 100-200 ml

Exame do Líquido Ruminal

corcor cheirocheiro consistênciaconsistência pHpH transtornotranstornoVerde oliva-marron-cinzento

aromático viscosa 6,0 – 7,0 normal

Leitoso cinza ácido aquosa 3,8 – 5,05,1 – 5,9

acidose ruminalsubclínica

Verde escuro pútrido amoniacal

- - - 7,3 – 8,5 putrefação ruminal/alcalose

1.1. SedimentaSedimentaçção e Flutuaão e Flutuaççãoão- Esperado 4-8 min- Anormalidade – ausência ou retardo- Ausência de flutuação = acidose/ indigestão simples

2.2. Atividade Redutiva BacterianaAtividade Redutiva Bacteriana- Reação com azul de metileno- 3 – 6 min = normal- + 8 min = Indigestão simples- + 30 min = acidose aguda

3. Avalia3. Avaliaçção de Protozoão de Protozoááriosrios- Densidade da população- Intensidade dos movimentos

DoenDoençças e mas e méétodos todos diagndiagnóósticossticos

Indigestão SimplesIndigestão Simples

Diagnóstico

• Complementação provas de líquido ruminal e urina

Cor Marrom-verde pH 6,8 - 7,2Cheiro Mofado Atividade

redutiva> 8 min

Viscosidade Aquosa Protozoários DiminuídosSedimentação Diminuída Ac.graxos

voláteisDiminuídos (propiônico)

flutuação Aumentada Urina pH 7,0 – 7,5C.cetônicos

Alterações do líquido ruminal e urina

Alcalose RuminalAlcalose Ruminal

Diagnóstico

• Complementação prova de líquido ruminal, urina e leite

Cor Marrom-verde pH 7,2-8,0 aguda7,2-7,5 subclínica

Cheiro Amoniacal Atividade redutiva

> 10 min

Viscosidade Aumentada Protozoários Diminuídos

Sedimentação Retardada Ac.graxos voláteis

↓Propiônico↑Butírico

Flutuação Retardada-variável

Alterações no líquido ruminal

pH 7,0 - 7,5 Excesso de substâncias nitrogenadas (corpos cetônicos ocasionais)

8,5 - 9,0 Excesso compostos alcalinizantes

Alterações na Urina

Acidez Diminuída Uréia Aumentada

Proteínas e lactose

Diminuída Celularidade Diminuída

Alterações no Leite

IntoxicaIntoxicaçção por Urão por Urééiaia

Diagnóstico

• Avaliação da dieta

• Ingestão de uréia independente da quantidade

deve ser levada em conta em casos sem adaptação

prévia

• pH ruminal pode achegar à 8,0

• Forte cheiro amoniacal no ar expirado

Acidose Ruminal Acidose Ruminal SubclSubclíínicanica

Distribuição dos parâmetros no líquido ruminal segundo o nível de produção

Nível produtivo

pH** ORAM**(min) Sedimentação* (min)

Protozoários**/ml

Alto 5,90 4:00 5 163.800

Médio 6,28 5:30 7,8 200.600

Baixo 6,67 6:40 5,9 260.500

*P < 0,05; **P < 0,01

DiagnDiagnóóstico diferencial dos transtornos stico diferencial dos transtornos ruminaisruminais

Fonte: Jan Bouda & Gerardo Rorcha

Lipidose Hepática e CetoseLipidose Hepática e Cetose

Provas de CampoProvas de Campo

• Corpos Cetônicos na urina• “Condição Corporal”

LaboratLaboratóóriorioSangue– β-hirdoxibutirato (Sangue)– Glicose– AGL– AST e GGT

HipocalcemiaHipocalcemia

Provas de campoProvas de campo• PH da urina• “Diagnóstico Terapêutico”

LaboratLaboratóóriorio• Níveis Cálcio• Diferencial com Hipomagnesemia

Interpretação de Dados

Alterado ????

– 19% de indivíduos com valores superior a média da população

– O desvio padrão é maior que o da referência;

– Confrontar estas informações com Manejo (nutricional, sanitário etc.)

– Avaliar o “TODO”

Whitaker e Kelly (1995)

Animal Peso C.C.Estado

Fisio. PESOCa

mg/dl

27 40 2,5 prenha 53 6,57

294 47 2 prenha 52 7,27

20 42 2,5 prenha 43 7,71

10 39 2 prenha 35 7,44

21 55 2,5 prenha 56 7,83

9 50 2,5 prenha 51 8,13

14 65 3 prenha 58 8,49

23 52 3 prenha 53 7,33

28 41 2,5 prenha 42 8

31 40 2 vazia 44 6,68

30 48 2,5 vazia 46 6,89

36 38 2 vazia 40 7,55

38 24 2 vazia 38 7,83

8 43 2,5 vazia 43 7,89

17 47 2 vazia 55 7,88

33 52 2 vazia 55 8,08

22 45 2,5 vazia 50 7,9

Média DPGrupo 7,62 0,53

População 12,5 4,53

100% dos animais estão com Padrões Alterados

FisiolFisiolóógico = 11,5 gico = 11,5 -- 12,8 12,8 mgmg//dldl

Obrigado Obrigado Pela Pela

AtenAtençção!!!ão!!!