Schulung Mikroskopie II - hund.de · Dunkelfeldmikroskopie Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld??? Hund H600 LL HP 100 Novex B mit DF Tubus (Standard) binokular trinokular, 100/100 Okulare

Gliederung

• Phasenkontrast – wozu?

• Geschichtliches

• Funktionsprinzip

we bring technologies together. optics – electronics – precision mechanics © Helmut Hund GmbH, 2008

• Funktionsprinzip

• Dunkelfeldmikroskopie

• Polarisationsmikroskopie

• Das inverse Mikroskop

Phasenkontrast – wozu?

• Hellfeldmikroskop:

Detektion von “Amplitudenobjekten”:


Obje

kt



Detektion von “Amplitudenobjekten”:




Detektion von “Phasenobjekten”:


Obje

kt





Schleimhautzellen





Schleimhautzellen,Aperturblende geschl.

Geschichtliches

Frits Zernike (1888 – 1966):

1930: Erfindung Phasenkontrastmikroskop,

1941: Industrielle Umsetzung (Wehrmacht),

1953: Nobelpreis für Physik


Funktionsprinzip

Strahlengang:


Funktionsprinzip

Objektive:

• Ph-Objektiv ↔ Lichtring!

• Numerierung nach Positionim Kondensor


im Kondensor

• Vorsicht: Zählkammern!

• Achtung: Aperturblende vollöffnen!

Funktionsprinzip

Kontrolle: Einstellfernrohr

Phasenring

Lichtring


FALSCH!

RICHTIG!

Funktionsprinzip


Schleimhautzellen

Funktionsprinzip


Schleimhautzellen

Dunkelfeldmikroskopie


Warum sind Lichtstrahlen sichtbar?

Photo: © Dr. Jörg Haus, 2007


Schattenwurf: Geometrische Optik


Physikalisch: Licht als Teilchen bzw. ebene Wellenfront, ohneBeugung, Lichtstrahlen entsprechen Normalen


Schattenwurf: Kleine Strukturen, Wellenoptik?


Physikalisch: Licht als Wellenfront,Huygenssches Prinzip


Schattenwurf: Kleine Strukturen, Wellenoptik?


Doppelspaltversuch nach Young


Vergleich Hellfeld - Dunkelfeld

ObjektivObjektiv


Kondensor

Präparatebene Präparatebene

Kondensor

Hellfeld Dunkelfeld


Kondensor: Blende oder Kardioid-System



H600 LL HP 100: Optische Komponenten

Objektiv, SPL 100/1,25,mit Irisblende


Kondensor,NA 1,4


H600 LL HP 100: Optische Komponenten



H600 LL HP 100: Nativblut im Dunkelfeld



Wettbewerb: Billiges Dunkelfeld???




Hund H600 LL HP 100 Novex B mit DF

Tubus (Standard) binokular trinokular, 100/100

Okulare WF 10x/18 WF 10x/(k. A.)

Objektive Achro 10/0,25 Plan 4/0,10

SPL 100/1,25 – 0,60 Oel Plan 10/0,25


SPL 100/1,25 – 0,60 Oel Plan 10/0,25

Plan S40/0,65

Plan 100/1,25 Oel

Dunkelfeldkondensor NA 1,4 NA 1,2

Beleuchtung an Stativ angeflanscht, extern,

100 W Halogen 150 W Halogen

Preis inkl. MWSt. [€] 4474,40 1649,95



Novex


Hund



Novex:Schließen derIrisblende amObjektiv.

Kein hoch-auflösendes DF


auflösendes DFmöglich!!!

Polarisation smikroskopie

Physikalisch: Welleneigenschaft

UnpolarisierteLichtwelle

PolarisierteLichtwelle

Vollständige


Polfilter(Polarisator)

VollständigeLöschung

Polfilter(Analysator)

Polarisation smikroskopie

Physikalisch: Welleneigenschaft


Photo: © Dr. Jörg Haus, 2008

Polarisationsmikroskopie

Doppelbrechung: Drehung Polarisationsebene




Glaskeramik zwischengekreuzten Polarisatoren,

mit Verzögerungsplatte


Glaskeramik zwischengekreuzten Polarisatoren



H 600 mit Polarisationseinheit HP I:

Analysator mit Kompensator Rot 1. Ordng.

Spannungsfreie Optik


Spannungsfreie Optik

Dreh- und Zentriertisch mit Objektführer

Polarisator


Zwei Beobachtungstechniken:

• Orthoskopisch:Polarisator – Präparat – Analysator,Beobachtung durch Okulare


• Konoskopisch:Beobachtung der hinteren Objektiv-Fokus-ebene mit klappbarer Bertrand-Linse oderEinstellfernrohr, hohe Kondensor-NA!!


Zwei Beobachtungstechniken:

• Konoskopisch:


Das inverse Mikroskop

Spezielle Gefäße für Zellkulturen


Petri-Schale

Terasaki-(96-well-) Platte

Kulturflasche

Das inverse Mikroskop

Anwendungen:

• In-Vitro-Fertilisation(mit Mikromanipulatoren)

• Untersuchungen an


• Untersuchungen anZellkulturen

• Untersuchungen “vonunten”

Wilovert Standard HF 40

Eigenschaften:

• Lampe 12 V / 30 W

• Kondensor NA 0,25 mit Aperturblende

• Objektive mit großem


• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:

A 4/0,10A 10/0,25SPL 20/0,50 (LD)SPL 40/0,60 (LD),Korrektionsfassg

Wilovert Standard PH 40

Eigenschaften:

• Lampe 12 V / 30 W

• Kombikond. NA 0,25mit Aperturblende



• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:A 4/0,10A PH1 10/0,25SPL PH2 20/0,50 (LD)SPL PH2 40/0,60 (LD),Korrektionsfassung

Wilovert AFL 40 PH

Zusätzl. Eigenschaften:

• HBO 100 W

• Filterschieber

• Objektführer



• Objektive mit großemfreiem Arbeitsabstand:AC 4/0,10A PH1 10/0,25SPL 20/0,35 (LD)SPL PH2 20/0,50 (LD)SPL PH2 40/0,60 (LD),Korrektionsfassung

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