ScanGel™

ABO Complete/RH/K Duo86719 2 x 24 tarjetas 86709 2 x 144 tarjetasScanGel ABO Complete/RH1 Duo y ScanGelMonoclonal RH/K Phenotypes Duo tarjetas

GELES FORMULADOS CON REACTIVOSMONOCLONALES DE ORIGEN MURINO O HUMANO O GEL NEUTROGrupaje ABO. Determinación de los Ag RH1, RH2,RH3, RH4, RH5 y KEL1

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Todos los productos fabricados y comercializados por la sociedad Bio-Radse hallan bajo un sistema de garantía de calidad desde la recepción de lasmaterias primas hasta la comercialización de los productos finales. Cada lotede producto final se somete a un control de calidad y sólo se comercializa si estáen conformidad con los criterios de aceptación. El fabricante conserva ladocumentación referente a la producción y al control de cada lote.

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I - UTILIZACIÓN Y PRINCIPIO DEL REACTIVOEstas tarjetas están estrictamente reservadas para el empleo profesional ypara los diagnósticos in vitro.Diseñada para grupaje ABO y la determinación de antígenos RH1 (D), RH2(C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) y KEL1 (K), el test combina los principios deaglutinación y filtración en gel.La reacción se obtiene y se lee tras la centrifugación de unos microtubosespecialmente diseñados, rellenos de gel impregnado del reactivoespecífico del antígeno eritrocitario a determinar (prueba globular delgrupaje ABO y determinación de antígenos RH1, RH2, RH3, RH4, RH5 yKEL1) o bien de gel neutro para la prueba sérica de grupaje ABO.La suspensión de glóbulos rojos y el plasma o el suero (para la pruebasérica del grupaje ABO) se depositan en el pocillo de cada microtubo y secentrifuga inmediatamente. Los glóbulos rojos no aglutinados se depositanen el fondo del microtubo, mientras que los aglutinados se retienen portodo el gel en función de su tamaño. Su posición en el gel determina laintensidad de la reacción.

II - CARACTERÍSTICAS DE LOS REACTIVOSOBSERVACION IMPORTANTE : La tarjeta ScanGel ABOComplete/RH1 Duo debe utilizarse obligatoriamente al mismotiempo que la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo

1. Tarjetas ScanGel ABO Complete/RH1 DuoLos tres primeros microtubos de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duocontienen cada uno un gel impregnado con un reactivo monoclonal de origenmurino respectivamente de especificidad anti-ABO1 (A), anti-ABO2 (B) yanti-ABO3(AB). Estos anticuerpos se producen a partir de los siguientes clones :• anti-ABO1 (A) : 15750F7• anti-ABO2 (B) : X9• Anti-ABO3 (AB) : AB5-63A5A2 / X9El cuarto microtubo contiene un gel impregnado con un reactivo monoclonalde origen humano de especificidad anti-RH1 (D). Este anticuerpo monoclonales una IgM secretada por el clon B9A4-B2A6A6A1A1.Este anti-RH1(D) no permite la detección del fenotipo RH1 parcial categoríaVI (DVI).

- + ++ +++ ++++

El quinto y el sexto microtubo contienen gel neutro (Neutr.)Estos reactivos contienen azida sódica (< 0,1 %) como conservante.El código del producto y el número de tarjetas por caja se indican en laetiqueta de la caja.

2. Tarjetas ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes DuoLos cinco primeros microtubos de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/KPhenotypes Duo contienen cada uno un gel impregnado con un reactivomonoclonal de origen humano respectivamente de especificidad anti-RH2(C), anti-RH3 (E), anti-RH4 (c), anti-RH5 (e) y anti-KEL1 (K). Estosanticuerpos se producen a partir de los siguientes clones:• Anti-RH2 (C) : MS-24• Anti-RH3 (E) : MS-260/MS-258• Anti-RH4 (c) : MS-33• Anti-RH5 (e) : MS-63/MS-21/MS-16• Anti-KEL1 (K) : MS-56El sexto microtubo contiene el gel sin anticuerpos y corresponde alcontrol (Ctl) válido para las dos tarjetas ScanGel ABO Complete/RH1Duo y ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo.Estos reactivos contienen azida sódica (< 0,1 %) como conservante.El código del producto y el número de paneles por caja se indican en laetiqueta de la caja.

III - CADUCIDAD Y CONSERVACIÓNLa fecha de caducidad y las condiciones de almacenamiento se indican en la caja.Las tarjetas deben conservarse a temperatura ambiente, de +15°C a +25°C.Las tarjetas deben almacenarse verticalmente, protegidas de las fuentes decalor, en un local con escasas variaciones de temperatura y humedad relativa.

IV - PRECAUCIONESLa calidad de los resultados depende del respeto de las buenas prácticasde laboratorio siguientes :• No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada en la

etiqueta.• No utilizar tarjetas que muestren signos de desecación o burbujas, o si la

lengüeta de sellado muestra signos de deterioro.• Como los reactivos contenidos en los microtubos tienen una

naturaleza diferente, es indispensable tomar las precaucionesnecesarias para no provocar contaminaciones inter-microtubos,especialmente cuando se retira la lengüeta de aluminio y en lasetapas de distribución.

• Utilizar una punta de pipeta para cada muestra.

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• Comprobar la precisión y el correcto funcionamiento de las pipetas y delos otros equipos.

• Llevar guantes y gafas de protección durante la manipulación de losreactivos y de las muestras.

• No pipetear directamente con la boca.• Evitar las salpicaduras. En caso de salpicaduras, limpiar las superficies

manchadas con lejía de 12ºCl diluida al 10% y secar con papelabsorbente. El material utilizado para la limpieza deberá ser desechado enun contenedor especial para residuos contaminados.

• Producto y fungible que hayan estado en contacto con muestras oreactivos que contenga material de origen humano deben ser descartadosuna vez descontaminados.

• Las fichas de seguridad están disponibles bajo petición.

V - RECOGIDA Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRASLa sangre debe obtenerse en condiciones de asepsia en un tubo sin o conanticoagulante (EDTA, CPD).Tras la obtención, la prueba debe realizarse lo antes posible. Las muestrasque no puedan analizarse rápidamente deberán conservarse entre +2°C y+8°C para ser sometidas a prueba en las 48 horas siguientes. En ningúncaso debe observarse hemólisis.No calentar las muestras.

VI - TÉCNICASMaterial suministradoABO Complete/RH/K Duo 2 x 24 tarjetas que incluye • ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 24 tarjetas• ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo 24 tarjetasABO Complete/RH/K duo 2 x 144 tarjetas que incluye• ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 144 tarjetas• ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo 144 tarjetas

Material necesario pero no suministrado• Medios de suspensión de los glóbulos rojos

86441 ScanLiss 100 ml86442 ScanLiss 500 ml86448 ScanSol 100 ml86449 ScanSol 500 ml

• IH QC : Control de serología de grupos sanguíneos86745 IH QC 4 x 6 ml

• ReverScan A1 y B : Hematíes para grupo sérico del grupaje ABO86790 ReverScan A1, B, 2 x 5 ml

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• Centrífuga : ScanGel Centrifuge • Pipetas automáticas o semiautomáticas• Puntas de pipetas• Tubos de un solo uso• Contenedor especial para residuos con riesgo biológico• Lejía• Guantes de látex• Papel absorbente• Gafas de protección

Controles• Grupo hemático ABO y la determinación de antígenos RH1, RH2,

RH3, RH4, RH5 y KEL1Controles positivo y negativo : glóbulos rojos encontrados positivos ynegativos para el antígeno estudiado. Estos controles deben ser testadossimultáneamente con los glóbulos rojos de la muestra a probar para validarla actividad propia del reactivo.

• Grupo sérico ABOControl positivo (plasma o suero conocido que contenga al menos un anticuerpoespecífico), control negativo (plasma o suero conocido que no contenga ningúnanticuerpo). IH QC : Control de serología de grupos sanguíneos.

ProcedimientoSeguir estrictamente el protocolo propuesto.La tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo debe utilizarseobligatoriamente al mismo tiempo que la tarjeta ScanGelMonoclonal RH/K Phenotypes, con la misma suspensión deglóbulos rojos que habrá que comprobar.Antes de su utilización, llevar todos los reactivos a temperatura ambiente.Por centrifugación, separar el suero o el plasma de los glóbulos rojos de lamuestra a probar.Cuando la obtención se sangre se realiza en tubo seco, el suero se debecentrifugar.

VI.1 - Suspensión en ScanLissa) Previa preparación de la suspensión de globulos rojos 1% para testarse en

ScanLiss• Poner 1 ml de ScanLiss en un tubo de un solo uso identificado.• Añadir 10 μl del precipitado globular.• Mezclar.• La suspensión de glóbulos rojos está lista para su uso.

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b) Técnica1. Identificar cada tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo y ScanGel

Monoclonal RH/K Phenotypes Duo por el nombre o el número de muestracorrespondiente.Retirar las lengüetas de aluminio de los paneles con cuidado para evitarlas contaminaciones interpocillos.Resuspender los hematíes antes de usar.

2. Distribuir 50 μl de ReverScan A1 en el pocillo de microtubo 5 de la tarjetaScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

3. Distribuir 50 μl de ReverScan B en el pocillo de microtubo 6 de la tarjetaScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

4. Añadir 50 μl de plasma o de suero a ensayar en el pocillo de los microtubos5 y 6 de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

5. Distribuir 50 μl de suspensión globular a ensayar en los pocillos de losmicrotubos 1, 2, 3 y 4 de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo, y enel pocillo de cada microtubo de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/KPhenotypes Duo.

6. Centrifugar 10 minutos en ScanGel Centrifuge.7. Leer las reacciones.

VI.2 - Suspensión en ScanSola) Preparación extemporánea de una suspensión de glóbulos rojos 5% en

ScanSol• Poner 0,5 ml de ScanSol en un tubo de un solo uso identificado.• Añadir 25 μl del precipitado globular.• Mezclar.• La suspensión de glóbulos rojos está lista para su uso.

b) Técnica1. Identificar cada tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo y ScanGel

Monoclonal RH/K Phenotypes Duo por el nombre o el número demuestra correspondiente.Retirar las lengüetas de aluminio de los paneles con cuidado para evitarlas contaminaciones interpocillos.Resuspender los hematíes antes de usar.

2. Distribuir 50 μl de ReverScan A1 en el pocillo de microtubo 5 de la tarjetaScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

3. Distribuir 50 μl de ReverScan B en el pocillo de microtubo 6 de la tarjetaScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

4. Añadir 50 μl de plasma o de suero a ensayar en el pocillo de losmicrotubos 5 y 6 de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo.

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5. Distribuir 10 μl de suspensión globular a ensayar en los pocillos de losmicrotubos 1, 2, 3 y 4 de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo, yen el pocillo de cada microtubo de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/KPhenotypes Duo.

6. Centrifugar inmediatamente 10 minutos en ScanGel Centrifuge. Elretraso entre el final de la distribución y el principio de la centrifugaciónno debe exceder los 10 minutos.

7. Leer las reacciones.

VII - INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS• La presencia de aglutinados en la superficie o dispersos en el gel

corresponde a un resultado positivo. • Un sedimento de glóbulos rojos en el fondo del microtubo corresponde a

un resultado negativo.• Una reacción positiva en los microtubos 1 a 4 de la tarjeta ScanGel ABO

Complete/RH1 Duo, o en los microtubos 1 a 5 de la tarjeta ScanGelMonoclonal RH/K Phenotypes Duo solamente se podrá validar si el microtuboCtl de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo es negativo.

Si el microtubo Ctl presenta una reacción positiva :Lavar los glóbulos rojos con solución salina isotónica (NaCl 0,9%).Repetir el procedimiento como se indica en VI.1 o VI.2.

Si el microtubo Ctl es negativo, la interpretación para los microtubos 1 a 4de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo es la siguiente :

Resultado positivo Resultado positivo bajo Resultado negativo++++ + a +++ -

Si el microtubo Ctl es negativo, la interpretación para los microtubos de latarjeta ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo es la siguiente :

Resultado positivo Resultado positivo bajo Resultado negativo+++ a ++++ + a ++ -

Si el microtubo Ctl da siempre una reacción positiva repetir la pruebautilizando otra técnica que no sea la técnica de filtración en gel.• La interpretación de les microtubos 5 y 6 de la tarjeta ScanGel ABO

Complete/RH1 Duo es la siguiente :

Resultado positivo Resultado negativo+ a +++ -

• Los resultados sólo son válidos si los controles positivo ynegativo dan los resultados esperados.

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a) Interpretación del grupaje ABOUn agrupamiento ABO completo conlleva 2 pruebas complementarias : laprueba globular realizada con los reactivos anti-ABO1 (A), anti-ABO2 (B) yanti-ABO3 (AB) y la prueba sérica realizada con los glóbulos rojos problemaA1 y B. En la tabla siguiente se muestran los perfiles de las reaccionesesperadas con los reactivos anti-ABO1 (A), anti-ABO2 (B), anti-ABO3 (AB) ylos glóbulos rojos problema A1, B así como sus interpretaciones :

La prueba globular y la prueba sérica deben dar resultados concordantes.Cualquier divergencia entre ambas pruebas deberá resolverse antes de darun resultado de agrupamiento ABO.Cada vez que se observe una divergencia entre las pruebas globular y sérica,habrá que realizar pruebas complementarias con los controles adecuados.

b) Interpretación del microtubo RH1 (D)Un resultado positivo en al microtubos RH1 (D) indica la presencia delantígeno RH1 (D) en la superficie de los glóbulos rojos.A pesar de estos resultados, el anti-RH1 (D) de la tarjeta ScanGel ABOComplete/RH1 Duo no permite la detección de todos los antígenos RHW1(D débil) ni la detección del fenotipo RH1 parcial de categoría VI (DVI). Si ladetección de estos antígenos particulares fuera necesaria, se efectuará unaprueba complementaria con el reactivo ScanGel MonoclonalAnti-RH1(D)/RHW1 asociado a la tarjeta ScanGel COOMBS Anti-IgG, -C3d.

c) Interpretación de los microtubos RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c) y RH5 (e)Un resultado positivo en uno de los microtubos RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c) yRH5 (e) indica la presencia del antígeno correspondiente en la superficie delos glóbulos rojos probados.

d) Interpretación del microtubo KEL1 (K)Un resultado positivo en el microtubo KEL1 (K) indica la presencia delantígeno KEL1 (K) en la superficie de los glóbulos rojos probados.

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GROUPOS PRUEBA GLIBULAR PRUEBA SÉRICA

Anti-ABO1 (A) Anti-ABO2 (B) Anti-ABO3 (AB) ReverScan A1 ReverScan B

A + - + - +

B - + + + -

AB + + + - -

O - - - + +

VIII - COMPORTAMIENTO a) Comportamiento específico de los reactivos anti-ABO1 (A),

anti-ABO2 (B) y anti-ABO3 (AB)Se evaluaron los reactivos anti-ABO1 (A), anti-ABO2 (B) y anti-ABO3 (AB)utilizando un panel de 1.641 muestras no seleccionadas (1.150 donantes,332 pacientes, y 159 recién nacidos) que se completó con un panel demuestras seleccionadas (antígenos débiles o variantes).Cada resultado ha sido comparado con el obtenido en técnica de placa,tubo, microplaca o filtración de gel.Las 1.641 muestras han dado resultados compatibles con los esperados. Se comprobó un panel de 17 muestras seleccionadas (Ax, B3, AxB, Bh,CisAB, A3B, ABf). Todas las muestras fueron detectadas con unareactividad de 1+ a 3+.Los antígenos B adquiridos comprobados no fueron detectados con elanti-ABO2(B) de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo .Los reactivos anti-ABO1 (A), anti-ABO2 (B) y anti-ABO3 (AB) de la tarjetaScanGel ABO Complete/RH1 Duo mostraron una buena reproducibilidadinteranálisis e intraanálisis.

b) Comportamiento específico del reactivo anti-RH1 (D)Se evaluó el reactivo anti-RH1 (D) utilizando un panel de 1.641 muestras noseleccionadas (1.150 donantes, 332 pacientes, y 159 recién nacidos) que secompletó con un panel de muestras seleccionadas (antígenos débiles o variantes).Cada resultado ha sido comparado con el obtenido en técnica de placa,tubo, microplaca o filtración de gel.Las 1.641 muestras han dado resultados compatibles con los esperados. Se ha ensayado un panel de 24 muestras especiales (Ag débiles, variantes yfenotipos especiales). Se ha detectado el conjunto de las variantes y de losfenotipos especiales, excepto una muestra de fenotipo RH1 parcialcategoría VI (DVI).Fue detectado el 94% de los antígenos RHW1 (D débil) comprobados.Ambos reactivos anti-RH1 (D) de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1Duo mostraron buena reproducibilidad interanálisis e intraanálisis.

c) Comportamiento específico del reactivo neutro (pocillos A1 y B,posición 5 y 6 de la tarjeta ScanGel ABO Complete/RH1 Duo)

Los hematíes ReverScan (A1, B) se han evaluado en un panel de 1.132 muestras.Cada resultado se ha comparado con el obtenido en la técnica de placa,microplaca o por filtración sobre gel.En el conjunto de las muestras, 1.130 han dado resultados conforme a lo esperadoy 2 han presentado discordancias, con uno de los métodos utilizados en paralelo,que han podido eliminarse tras la comparación con la prueba globular.

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Los hematíes ReverScan asociados a la tarjeta ScanGel ABOComplete/RH1 Duo presentan una buena reproducibilidad tanto intra comointerensayo, sea cual sea la muestra probada.

d) Comportamiento especifico de la tarjeta ScanGel MonoclonalRH/K Phenotypes Duo

Se ha evaluado el comportamiento de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/KPhenotypes Duo en un panel de 1518 muestras no seleccionadas (1.149donantes, 332 pacientes, y 37 recién nacidos) que se completó con unpanel de muestras seleccionadas (antígenos débiles).Cada resultado ha sido comparado con el obtenido en técnica de placa,tubo, microplaca o filtración de gel.Las 1518 muestras han dado resultados compatibles con los esperados. Se ha analizado un panel de 13 muestras débiles y fenotipos raros. Se handetectado todos con una reactividad de 2+ a 4+. Los reactivos de la tarjeta ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duomostraron una buena reproducibilidad interanálisis e intraanálisis.

LÍMITESLos resultados anormales pueden ser consecuencia de :• una contaminación bacteriana o química del suero, del plasma, de los

glóbulos rojos o del material.• una medicación o un estado patológico del paciente que provoque una

reacción cruzada.• el uso de un medio de suspensión para los glóbulos rojos diferente al

recomendado.• una preparación de los glóbulos rojos diferente a la recomendada.• una hemólisis de los glóbulos rojos problema.• la presencia de fibrina (imagen de un sedimento celular compacto en el

fondo de un microtubo acompañado de una fina banda rosada en la zonasuperior del gel correspondiente a los glóbulos rojos retenidos por losresiduos de fibrina).

• contaminación entre microtubos.• uso de otro procedimiento del descrito anteriormente.

“Con la licencia de DIAMED, S.A., 1785 Cressier-sur-Morat, Suiza”

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