Rev. peru. biol.ISSN 1561-0837Universidad nacional Mayor de san MarcosFacUltad de ciencias BiolgicasvolUMen 18dicieMBre, 2011nMero 2LIMA, PERrevistaPerUana deBiologa2RectorDr. Pedro Atilio Cotillo Zegarra Vicerrector de Investigacin Dr. Bernardino Ramrez BautistaConsejo Superior de InvestigacinDr. Eugenio Cabanillas Lapa Decana de la Facultad de Ciencias BiolgicasMag. Martha Valdivia CuyaDirectora Instituto de Investigacin en Ciencias Biolgicas Antonio RaimondiMag. Ins Miriam Grate CamachoLa Revista Peruana de Biologa es una publicacin cientfca arbi-trada, editada por el Instituto de Ciencias Biolgicas Antonio Raimondi, FacultaddeCienciasBiolgicasdelaUniversidadNacionalMayor de San Marcos, Lima, Per, y auspiciada por el Consejo Superior de Investigacin.LaRevistaaparececonunaperiodicidadsemestral (agostoydiciembre)yestadedicadaalapublicacindeartculos cientfcos originales e inditos en las reas de Biodiversidad, Biotec-nologa, Manejo ambiental, Ecologa y Biomedicina. La Revista publica los trabajos realizados por acadmicos e investigadores nacionales y extranjeros, en idioma espaol o ingls. Los trabajos recepcionados son evaluados por rbitros segn criterios internacionales de calidad, creatividad, originalidad y contribucin al conocimiento. La Revista es publicada simultneamente en la pgina web de la Universidad. Revista Peruana de Biologa - Rev. peru. biol. - ISSN 1561-0837Rev. peru. biol. - ISSN 1727-9933 (on line)http://www.unmsm.edu.pe/revperubiolhttp://www.scielo.org.pehttp://redalyc.uaemex.mx/Copyright 2011Facultad de Ciencias Biolgicas, UNMSMHecho el Depsito Legal98-3017Informacin adicional a: Revista Peruana de BiologaFacultad de Ciencias Biolgicas UNMSMCiudad Universitaria, Av. Venezuela Cdra. 34 s/n. LimaCasilla Postal: 11-0058 Lima-11, Per.Telfono 619-7000-1502 / Telefax 619-7000-1509Editor Jefe, email: editor.revperubiol@gmail.comrevista PerUana de Biologargano Ofcial de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional Mayor de San MarcosResumida/Indizada (Abstracted/Indexed) en:Peridica (ndice de Revistas Latinoamericanas en Ciencias), LIPECS (Literatura Peruana en Ciencias de la Salud), Zoological Record (BIOSIS), Scielo (Scientifc Electronic Library Online), Index to American Botanical Literature (Te New York Botanical Garden), BIOSIS Previews, Biological Abstracts (BIOSIS), ProQuest (Biological Science Journals), Redalyc.Foto en cartula: Stangea rhizantha, cortesia Huber Trinidad.Editor jefe Leonardo Romero Comit EditorCsar Arana Carlos ParedesRina RamrezCarlos Pea Comit consultivo en los recientes nmerosMaximilian WeigendFreie Universitt Berlin- AlemaniaSebastin BarrionuevoFundacin Miguel Lillo- ArgentinaLuis AguirreUniversidad Mayor de San Simn, BoliviaRodney Ramiro CavichioliUniversidade Federal do Paran- BrasilHlio Ricardo da SilvaUniversidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BrazilCarlos Frederico Duarte da RochaUniversidade do Estado do Rio de Janeiro- BrasilFabrcio Rodrigues dos SantosUniversidade Federal de Minas Gerais- BrasilSuzete Rodrigues GomesInstituto Butantan- BrasilDavor VrcibradicUniversidade do Estado do Rio de Janeiro- BrasilStefan DennenmoserUniversity of Calgary, CanadaRoberto MelndezMuseo Nacional de Historia Natural- ChilePedro Alejandro Orihuela DiazUniversidad de Santiago de Chile- ChileBerta Calonge CamargoPontifcia Universidad Javeriana, Bogot, ColombiaSergio SolariUniversidad de Antioquia- ColombiaJos Mara GutirrezUniversidad de Costa Rica, Costa RicaFinn BorchseniusAarhus University- DenmarkJulissa RoncalAarhus University- DenmarkJuan Rigoberto Tejedo HuamanUniversidad Pablo de Olavide- EspaaArnaud BertrandIRD. Institut de recherche pour le dveloppement- FranciaFrancis KahnIRD. Institut de recherche pour le dveloppement, - FranciaJean-Christophe PintaudInstitut de Recherche pour le Dveloppement- FranciaMutsunori TokeshiKyushu University - JaponFrancisco Alonso Sols MarnUniversidad Nacional Autnoma de Mxico- MxicoRoss RobertsonSmithsonian Tropical Research Institute- PanamMnica RomoAsociacin Peruana para la Conservacin de la Naturaleza- PerRenato Guevara-CarrascoInstituto del Mar del Per- PerCsar NquiraInstituto Nacional de Salud- PerReynaldo Linares-PalominoUniversidad NacionalAgraria La Molina- PerMarcel Gutirrez-CorreaUniversidad Nacional Agraria La Molina - PerGretty K. VillenaUniversidad Nacional Agraria La Molina - PerGerardo LamasUniversidad Nacional Mayor de San Marcos- PerPablo RamrezUniversidad Nacional Mayor de San Marcos- PerDiana SilvaUniversidad Nacional Mayor de San Marcos- PerJuan TarazonaUniversidad Nacional Mayor de San Marcos- PerArmando YarlequUniversidad Nacional Mayor de San Marcos- PerManuel TantalenUniversidad Peruana Cayetano Heredia- PerNigel PitmanDuke University- USASergio SolariTexas Tech University- USALucia LunaUniversity of Michigan- USAMaria del Carmen Ulloa UlloaUniversity of Missouri- USABlanca LenUniversity of Texas at Austin - USAKenneth YoungUniversity of Texas at Austin USAPaul VelazcoAmerican Museum of Natural History, USA141 (Contina...)Revista PeRuana de BiologaVolumen 18Agosto, 2011Nmero 2Rev. peru. biol.ISSN 1561-0837ContenidoHomenaje143Armando Yarleque ChocasLeonardo RomeroEditorial147Buscando la calidad en un artculo cientfcoLeonardo RomeroTrabajos originales149Composicin qumica y actividad antibacteriana del aceite esencial de Ambrosia peruviana Willd. de los llanos venezolanosChemical composition and antibacterial activity of the essential oil of Ambrosia peruviana Willd. from Venezuelan plainsCarlos A. Ynez C., Nurby Rios, Flor Mora, Luis Rojas, Tulia Diaz, Judith Velasco, Nahile Rios y Pablo Melendez153Activity of ethanolic extracts leaves of Machaerium foribundum against acne-inducing bacteria, and their cytoprotective and antioxidant efects on fbroblastActividad del extracto etanlico de las hojas de Machaerium foribundum contra bacterias que inducen el acn y su efecto citoprotector y antioxidante sobre fbroblastosLorena Daz, Soumi De Montijo, Ana L. Medina, Pablo Melndez, Vian Laurence and Gilberte Marti-Mestres159Potential use of low-NDGA Larrea divaricata extracts as antioxidant in foodsUso potencial de extractos de Larrea divaricata con bajo contenido de NDGA como antioxidantes en comidasSebastian Turner, Roberto Davicino, Rosario Alonso, Graciela Ferraro, Rosana Filip and Claudia Anesini165Una nueva especie de Teagueia (Orchidaceae: Pleurothallidinae) del norte del PerA new species of Teagueia (Orchidaceae: Pleurothallidinae) from Northern of PeruMiguel Chocce, Nanette Vega, Margoth Acua-Tarazona, Jorge Arnaiz y Betty Milln169Flora y vegetacin de suelos crioturbados y hbitats asociados en los alrededores del abra Apacheta, Ayacucho - Huancavelica (Per)Flora and vegetation on cryoturbated and associates habitats around abra Apacheta, Ayacucho - Huancavelica (Peru)Asuncin Cano, Amalia Delgado, Wilfredo Mendoza, Huber Trinidad, Pal Gonzles, Mara I. La Torre, Magda Chanco, Hctor Aponte, Jos Roque, Niels Valencia y Eduardo Navarro179Vegetative adaptability of the Peruvian palm Astrocaryum perangustatum to deforestationAdaptabilidad vegetativa a la deforestacin de la palma peruana Astrocaryum perangustatumHctor Aponte, Francis Kahn and Betty Milln185Deschampsia danthonioides (Poaceae - Pooideae) unnuevo registro para la fora peruanaDeschampsia danthonioides (Poaceae Pooideae) a New Record for Peruvian FloraPal Gonzles, Mara Isabel La Torre y Asuncin Cano189La familia Poaceae del distrito de Arahuay (Canta, Lima, Per)Te family Poaceae from Arahuay district (Canta, Lima, Peru)Pal Gonzles, Eduardo Navarro, Mara. I. La Torrey Asuncin Cano197Diversidad del gnero Polylepis (Rosaceae, Sanguisorbeae) en los Andes peruanosDiversity of the genus Polylepis (Rosaceae, Sanguisorbeae) in the Peruvian AndesWilfredo Mendoza y Asuncin Cano201Divergencia intraespecfca y cdigo de barras de ADN en Systrophia helicycloides (Gastropoda, Scolodontidae)Intraspecifc divergence and DNA barcodes in Systrophia helicycloides (Gastropoda, Scolodontidae)Pedro Romero y Rina Ramrez209Colepteros coprfagos (Scarabaeidae: Scarabeinae) de la Reserva Nacional Tambopata, Madre de Dios, PerDung beetles (Scarabaeidae: Scarabeinae) from the Reserva Nacional Tambopata, Madre de Dios, PeruLuis Figueroa y Mabel Alvarado142213Descripcin del cromosoma profsico en la meiosis I de Bostryx conspersusDescription of the profasic chromosome in Meiosis I of Bostryx conspersusMara Siles-Vallejos, Olga Bracamonte G. , Alberto Lpez S., Betty Shiga y Misael Guevara P.217Ecologa de Phyllodactylus angustidigitus y P. gerrhopygus (Squamata: Phyllodactylidae) de la Reserva Nacional de Paracas, PerEcology of Phyllodactylus angustidigitus and P. gerrhopygus (Squamata: Phyllodactylidae) from the Reserva Nacional de Paracas, PeruJos Prez Z.yKatya Balta225Hunting pressure on cracids (Cracidae: Aves) in forest concessions in PeruPresin de caza sobre crcidos (Cracidae: Aves) en concesiones forestales en PerJavier Barrio231Diversidad de mamferos en la cuenca media del ro Tambopata, Puno, PerMammal diversity in the middle basin of the river Tambopata, Puno, PeruVctor Pacheco, Gisella Mrquez, Edith Salas y Oscar Centty245Primer registro de Florometra magellanica (Bell, 1882) (Echinodermata: Crinoidea) para el PerFirst record of Florometra magellanica (Bell, 1882) (Echinodermata: Crinoidea) in PeruElba Prieto Rios, Mauricio Valds de Anda, Francisco Alonso Sols-Marn y Alfredo Laguarda Figueras249Registro de Xenopsylla cheopis como hospedero intermediario natural de Hymenolepis diminuta en Lima, PerXenopsylla cheopis record as natural intermediate host of Hymenolepis diminuta in Lima, PeruIns Grate, Paolo Jimnez, Karen Flores y Bertha EspinozaNotas cientfcas253Note on the diet of Ameiva edracantha (Squamata, Teiidae) in Cerros de Amotape National Park, Tumbes, PeruNota sobre la dieta de Ameiva edracantha (Squamata, Teiidae) en el Parque Nacional Cerros de Amotape, Tumbes, PerJuan C. Jordn and Diana Amaya257Notas sobre la ecologa de Tecadactylus solimoensis (Squamata, Phyllodactylidae) de la Amazona PeruanaEcological notes on the ecology of Tecadactylus solimoensis (Squamata, Phyllodactylidae) from Peruvian AmazonJuan C. Jordn, Juana Surez S. y Lidia Snchez261Optimizacin del test de microncleos en linfocitos cultivados usando una metodologa de gradiente y frotisImproving the micronuclei test in cultured lymphocytes by gradient and cell spreading methodologyErika Castillo, Mara Luisa Guevara-Fujita y Ricardo FujitaComentarios265Mtodos de inferencia flogenticaCarlos Pea143 HomenajeRev. peru. biol. 18(2): 143 - 146 (August 2011)Rev. peru. biol. 18(2): 143 - 146 (Agosto 2011) Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSMArmando Yarlequ ChocasHOMENAJELeonardo RomeroEditor Jefe, Instituto de Investigacin de Ciencias Biolgicas Antonio Raimondi, Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Apartado 11-0058, Lima 11, Per. Email: lromeroc@unmsm.edu.peISSN 1561-0837Armando Yarlequ es un cientfco sanmarquino que resalta por sus aportes, logros y capacidades, los que adquieren especial valor porque son una respuesta exitosa a las condiciones adversas que una enfermedad ocular (retinosis) le ha impuesto, y que nos muestran un ejemplo de persona, investigador, profesor, acad-mico y ser humano decidido a dejar huella en esta vida. Fue el primer Editor Jefe de la Revista Peruana de Biologa despus que la Asociacin de Bilogos de San Marcos cediera los derechos a la Facultad de Ciencias Biolgicas y en las siguientes palabras rendiremos homenaje a su trayectoria.Armando YarlequChocasnaciel5demayode1948,su vida acadmica y profesional se inici en 1972 cuando obtuvo el grado de bachiller en Ciencias Biolgicas y su ttulo profesional de Bilogo. En este mismo ao ingreso a la docencia. Su inters por la investigacin en bioqumica y biologa molecular adquiri cuerpo cuando en 1976 asumi la Jefatura del Laboratorio de Biologa Molecular, de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la UniversidadNacionalMayordeSanMarcos,laboratorioque haconducidohastaelpresenteconvirtindoloenunodelos msproductivosenpublicacionescientfcasytesis,tantode pregradocomodepostgrado.Enelao1985fuebecariodel Consejo Britnico en el Queen Elizabeth College, Universidad de Londres. En el ao 1987 obtuvo el grado de doctor en Ciencias Biolgica con la tesis Enzima similar a trombina del veneno de la serpiente peruana Lachesis muta: Aislamiento, Caracterizacin, Bioqumica y Accin Biolgica. ArmandoYarlequtambinhamanifestadointersenla organizacin y la poltica de investigacin, como parte de un compromisodelaUniversidadconlasociedadperuana.En 1986 fue elegido Director del Instituto de Ciencias Biolgicas AntonioRaimondi(ICBAR)ydesempeelcargohastael ao2001.EnesteperiodosedieroninicioalasReuniones Cientfcas del Instituto que recientemente en el 2011 llegaron a la XX edicin. Las Reuniones Cientfcas se han convertido en un evento acadmico de mucha importancia en el Per y que suelen congregar a cientos de investigadores para intercambiar ideas e informacin. Desde el ao 2005 ha ocupado diversos cargos en la direccin denuestraUniversidad,lamayoriadeellosligadoalainves-tigacin,fueAsesordelaOfcinaGeneraldeCooperaciny Relaciones Interinstitucionales, Asesor de la Ofcina General de Admisin, Jefe de la Ofcina de Coordinacin de Servicios de Investigacin e Innovacin, y recientemente entre el ao 2009 y 2011 fue Presidente del Consejo Superior de Investigacin.Armando Yarlequ fue Editor Jefe de la Revista Peruana de Biologa en el periodo de 1998 al 2001. En ese periodo tambin era Director del Instituto de Ciencias Biolgicas y a l le toco 144HomenajeRev. peru. biol. 18(2): 143 - 146 (Agosto 2011)asegurar los principios y elaborar la poltica editorial de la revista, aspecto que casi no ha cambiado hasta el presente. Como una actividad de extensin, en 1993 implemento el Serpentario Oswaldo Meneses que tiene sede en el Museo de Historia Natural y lo dirige hasta la fecha. Ha participado en la coordinacin y ejecucin de diversos conveniosdenuestraUniversidadcomolosrealizadoscon: elQueenElizabethCollege(19841990),laAcademiade Ciencias de la Ex Unin Sovitica (1986 1992),el Research Institute of Chemistry - University of Karachi, Pakistan (1990 1994),elInstitutodeInvestigacionesBiolgicasClemente Estable de Uruguay (1992 2006), la Fundao Ezequiel Dias (Funed-Brasil) (2000 hasta la fecha), el Centro de Red Ibe-roamericana sobre venenos y antivenenos ofdicos, San Jos de Costa Rica, CYTED (2005 2010),las Universities of Oxford andLiverpool(20002005),elInstitutonacionaldeSalud (2004 2011)Su actividad como investigador y docente ha sido reconocida, tanto fuero como dentro de la Universidad; le han sido otorgados el Primer Premio en el rea de Ciencias afnes a la Salud de la Fundacin Hiplito Unanue (1984); el Premio en el rea de Ciencias Biolgicas otorgado por la Academia de Ciencias para el Tercer Mundo TWAS (1987); la Distincin otorgada por la Municipalidad de Lurigancho - Chosica entre los 100 personajes ilustres, con motivo del centenario del Distrito (1995); el Primer Premio en el rea de Ciencias afnes a la Salud otorgado por la Fundacin Hiplito Unanue (1996); el Premio como Cientfco ms destacado entre 1998 1999 en Ciencias Biolgicas y en el rea de Ciencias Bsicas otorgado por la UNMSM (2000); y Reconocimiento al merito cientfco otorgado por el Colegio de Bilogos del Per lo recibi en dos oportunidades en el ao 2001 y en 2009.Es miembro de la Sociedad Qumica del Per, la Sociedad Internacional de Toxinologa (IST), la Sociedad Internacional de Ecologa Qumica (ISCE), la Red Latinoamericana de Productos Naturales (LANBIO), el Colegio de Bilogos del Per, la Socie-dad Peruana de Inmunologa y la Products Research Networks in Africa, Asia and South America (AFASSA) .ArmandoYarlequesunapersonamuydisciplinada,de puntualidadytiemposexactos,decididoarealizarycumplir objetivos. Pero a la vez es capaz de dar un tiempo para orientar asusalumnos,escucharalosamigosydiscutirsobreideas. Gusta de leer y dedicarle mucho tiempo a buscar informacin, preparar sus clases y organizar sus cursos; en esto ltimo es un implacable organizador, perseverante en los detalles y un acicate consusasistentes.Enestosmomentosenquelosmediosde informacinsolodancuentadelasenfermedadesdenuestra sociedadysistemasquebradosporlafaltadeprincipiosyla inversin de la moral, seres como Armando Yarlequ nos recuer-dan el compromiso de los investigadores, los acadmicos y los sanmarquinos con la sociedad; nos marcan un ritmo, porque nos falta mucho por lograr; nos sealan problemas, de los muchos que nos faltan por resolver; nos muestran lo que hemos hecho porque slo continuando la obra podremos avanzar y respetarnos a nosotros mismos como comunidad.Por eso, este homenaje esademscomounaclaseanuestrosalumnos,unaclasesin horario ni aula, pero que ellos podrn entender y sentir en cada momento y lugar.Publicaciones de Armando Yarlequ en libros y revistas especializadas1. Yarlequ A. & S. Campos. 1973. Actividadde una Fosfodiesterasa en el veneno de la serpiente Lachesis muta. Boletn de La Sociedad Qumica del Per. XXXIX(3):141-147.2. Campos S. & A. Yarlequ 1974. 5nucleotidasa en el veneno de la serpiente Lachesis muta. Boletn De La Sociedad Qumica Del Per. XL(3): 202-212.3. Morante Y. & Yarlequ A. 1980. Proteasas del veneno de serpien-tes infuencia de algunos agentes qumicos en la actividad proteoltica del veneno de Lachesis muta Shushupe. Acta Cientfca Venezolana. 31: 148-153.4. HerediaV.,CamposS.& Yarlequ A.1982. Actividaddeuna 5nucleotidasa en el veneno de Bothrops atrox (L) Jer-gn. Acta Cientifca Venezolana. 33: 333-347.5. Yarlequ A., Escobar E. & Campos S. 1983. Exonucleasas y otras actividades nucleolticas en los venenos de Lachesis muta y Bothrops atrox. Acta Cientifca Venezolana. 34: 336-340.6. CruzL. & Yarlequ A. 1984. Hemlisis de eritrocitos humanos por accin del veneno de Lachesis muta y Bothrops atrox. Boletin De La Sociedad Quimica Del Peru. L(1): 41-48.7. Zavaleta A., O. Castro De La Mata, M. Salas, R. Castro De La Mata& A.Yarlequ.1984.Loxocelismoexperimental: Aspectosfarmacolgicosyanatomopatolgicos.Diag-nostico. 14(6): 163-173.8. Loayza S., Y. Morante, S. Campos & A. Yarlequ. 1985. Enzi-mas proteolticas en el veneno de las serpientes peruanas Lachesis muta y Bothrops atrox. Boletin De La Sociedad Quimica Del Peru. LII (3): 151-163.9. Yarlequ A., V. Heredia, E. Arvaiza, S. Campos & A. Zavaleta. 1985. Contenido proteico y actividades enzimticas pre-sentes en el veneno de la araa casera Loxoceles laeta (II parte). Diagnostico. 15(1): 5-9.10. Herrera E., A. Yarlequ, C. Campos & A. Zavaleta. 1986. Efecto de la radiacin gamma sobre la actividad biolgica y pro-piedades enzimticas de los venenos de las serpientes La-chesis muta y Bothrops atrox. Informe Nuclear. 3(1): 1-14.11. Yarlequ A., V. Heredia, E. Arvaiza & A. Zavaleta.1986. Estudios electroforticosy Accinprocoagulantedelvenenode Loxoceles laeta. Diagnostico. 17(2): 39-45.12. Gomez De La Torre G., A. Zavaleta, R. Castro De La Mata, M. Arana & A. Yarlequ. 1986. El conejo: Un modelo expe-rimentaldeLoxocelismocutneoyviscerohemoltico. Diagnostico. 18(3): 65-73. 13. Barboni E., D.M. Kemeni, S. Campos & C.A. Vernon. 1987. The purifcation of acid phosphatase from Honey Bee venom (Apis mellifera). Toxicon. 25(10): 1097-1103.14. EscobarE.,O.Malaga&A.Yarlequ.1987.Purifcaciny propiedades de una exonucleasa del veneno de la serpiente Lachesis muta. Boletn de la Sociedad Qumica Del Per. LIII(1): 1-14.15. ParedesR., A.Zavaleta,M.Mendoza,M.Salas, A. Yuen, A. Yarlequ & E. Rosas. 1987. Loxocelismo experimental: Efectos sobre el sistema de coagulacin sangunea. Diag-nostico. 20(2):50-53.16. Yarlequ A. 1987. Enzima similar a trombina del veneno de la serpiente peruana Lachesis muta: Aislamiento, Caracteri-zacin,Bioqumicay AccinBiolgica. TesisDoctoral. FacultaddeCienciasBiolgicas.UniversidadNacional Mayor de San Marcos.17. Arbaiza E., C. Giusti, A. Yarlequ, N. Martinez, A.B. Dudelina, A.V. Kisher & E.V. Grishin 1988. Fraccionamiento y ca-racterizacin parcial del veneno de la Hormiga Paraponera clavata Isula. Boletn de la Sociedad Qumica del Per. LIV(4): 229-243.145 HomenajeRev. peru. biol. 18(2): 143 - 146 (August 2011)18. Campos S., E. Escobar, F. Lazo, A. Yarlequ, N.A. Marsh, P.M. Peyser, B.C. Whaler, L.J. Creighton, P.J. Gaffney. 1988. Partialseparationofathrombin-likeenzymefromthe venom of the Peruvian bushmaster snake, Lachesis muta muta.In:HemostasisandAnimalVenoms.PirkleH, Markland FS, Jr, (eds). Marcel Dekker, New York. 10715. 19. Heredia V., E. Arbaiza, J. Venegas, A. Yarlequ & A. Zavaleta. 1989.Aportesalestudiodelasaccionesproteolticas procoagulantes y caracterizaciones electroforticas de las protenas de 2 extractos txicos de veneno de Loxoceles laeta. Bol. Chil. Parasitol. 44: 8-16.20. 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Contenidoproteicoyalgunaspropiedadesenzimticas entresvenenosdeserpientesmantenidasencautiverio. Boletn de la Sociedad Qumica del Per. LXI(3):151-163.25. PantigosoC.,E.Escobar,O.Malaga&A.Yarlequ.1996. Aislamientoyalgunaspropiedadesdelaatroxinauna proteinasa del venenos de la serpiente peruana Bothrops atrox Jergn. Acta Cientifca Venezolana. 47: 67-73.26. Lazo F., E. Rodriguez & A. Yarlequ. 1998. Evaluacin com-parativade2mtodosparadeterminarlaactividadde Fosfolipasa A en venenos de serpientes. Revista Peruana de Biologa. 5(2): 98-102. 27. Paredes C., I. Garate & A. Yarlequ. 1999. Actividad in vitro de los venenos de la serpiente Lachesis muta y Bothrops atrox sobre la viabilidad y desarrollo embrionario de los huevos de Ascaris suum. Revista Peruana de Biologa 6(1): 85-93. 28. Solis Ch., Escobar E., Yarlequ A. & Gutierrez S. 1999. Purif-cacin y caracterizacin de la L-aminocido oxidasa del veneno de la serpiente Bothrops brazili Jergn Shushupe. 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Purifcacin de anticuerpos policlonalescontraelvenenodelaserpienteperuana Bothrops atrox (Jergn) por cromatografa de afnidad. Revista de la Sociedad Qumica del Per. 72(3):140-149.48. Garate I., A. Naupay, B. Suyo, H. Colquichagua, E. Rodriguez & A. Yarlequ. 2007. Identifcacin de Porocephalus stilessi (Pentastomida) en la serpiente peruana Lachesis muta. Rev. Inv. Vet. Peru. 18(2): 89-93.146HomenajeRev. peru. biol. 18(2): 143 - 146 (Agosto 2011)49. HurtadoL.,L.Lerma,E.Rodrguez&A.Yarlequ.2007 Aislamientoyalgunaspropiedadesbioqumicasdeuna Hialuronato glicanohidrolasadelvenenodelaserpiente Lachesis muta Shushupe. Revista de la Sociedad Qumica del Per. 73(4):226-234.50. Lazo F., O. Malaga, A. Yarlequ, & R. Severino. 2007. Algunas propiedadesbioqumicasdeunaL-aminocidooxidasa aislada del veneno de la serpiente Bothrops atrox.Revista de la Sociedad Qumica del Per. 73(3):131-141.51. Lazo F., O. Malaga, A. Yarlequ, R. Severino & S. 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Revista de la Sociedad Qumica del Per. 76(3): 261-270.147 EditorialRev. peru. biol. 18(2): 147 - 148 (August 2011)Rev. peru. biol. 18(2): 147 - 148 (Agosto 2011) Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSMBuscando la calidad en un artculo cientfcoEDITORIALLeonardo RomeroEditor Jefe, Instituto de Investigacin de Ciencias Biolgicas Antonio Raimondi, Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Apartado 11-0058, Lima 11, Per. Email: lromeroc@unmsm.edu.peISSN 1561-0837La calidad de los artculos de una revista cientfca ha sido el tema, directamente o indirectamente de una gran cantidad de ensayos, revi-siones, anlisis, meta anlisis, teoras y otros discursos. Sin embargo en la prctica sigue siendo un problema, no porque se desconozca cmo lograrlosino,porlafuertepresindelosinvestigadoresporutilizar lapublicacincientfcacomounajustifcacinasuactividad.Esta situacin seguira vigente y en algunos casos fortalecida en un escenario donde las instituciones tienen una fuerte preferencia por un voluminoso currculo frente a substanciales seminal papers.Buscando al responsable de la calidadPodramos empezar por preguntarnos que es calidad, cmo identi-fcarla, qu elementos debe tener un artculo de calidad, etc. Por otro lado, quin evala la calidad de un artculo? Si la calidad de un bien o servicio est defnida por la satisfaccin de los clientes (del mercado) entonces podramos pensar que sera muy fcil decidir, o mejor dicho que ellos (los clientes) decidan qu artculos son de calidad. Sin embar-go, el artculo cientfco sigue otro proceso, que va desde la exigencia del cumplimiento de normas y estndares durante la investigacin, la aplicacin de paradigmas de la ciencia cuando es redactado, hasta la re-visin por pares (peer review) cuando llega a manos del comit editorial. Muchas veces se menciona al factor de impacto como una medida de la calidad del artculo, lo cual obviamente variar segn la temtica (por ejemplo el tema de reproduccin de nudibranquios frente a tra-tamiento del cncer), los comportamientos y estilos de escribir de las comunidades cientfcas1. La responsabilidad de la creacin de un artculo de calidad es so-lamente del investigador (autor o autores de la obra), sin embargo el editor es el que aprecia y valora la condicin de calidad. Esta actividad puede convertirse en un dolor de cabeza si es que no se cuentan con claros elementos (o por lo menos elementos materiales) para defnir las caractersticas del producto a producir.El ms ac de las recetas de cocina Existen muchas publicaciones, libros y artculos que proporcionan una serie de pautas para escribir y ser exitosos en publicar; algunos in-dican incluso como seleccionar la revista; detallan una serie de tips que supuestamente permitirn al autor publicar su trabajo. En algunos casos, sugieren que la calidad del artculo, si llegase a ser publicado, podra ser medido con los famosos ndices de impacto2, lo cual es simplemente una alienacin o en todo caso una superfcialidad. Robert Day3 recalca que el artculo cientfco es escrito y publicado dentrodeunescenarioqueexigeunaformalidadestablecidaporla comunidad cientfca y la sociedad, una formalidad defnida por tres siglos de tradiciones cambiantes en la prctica editorial y la tica cient-fca; adems de ser infuenciada por los medios en los que se publicar.El pensamiento de la investigacin cientfca en la actualidad exige quelasinvestigaciones,yenconsecuenciaunartculocientfcosea especifcoenelproblemaainvestigar(unobjetoreconocibleporla comunidad cientfca),debe ser objetivo (basado en datos, pruebas o acercamientos validables), ser novedoso (no haberse publicado antes), debensertiles(enelsentidodeproporcionarconocimientopara fortalecer otros logros, no en el sentido de utilidad prctica, material o monetaria), debe ser reproducible (es decir otros investigadores deben tener todos los elementos para repetir el experimento o las observacio-nesnosotrosnosreferimosatrazabilidad),debecumplircontener una hiptesis que puede ser sometida a una prueba para comprobar si es falso o verdadero (falsabilidad)4.Lo que el pensamiento cientfco esconde es el elemento creativo, como solucionar un problema bajo los parmetros indicados. La hi-ptesis, el diseo, casi como escribir un poema con versos de mtrica estricta, no es imposible, lograrlo implicara estar muy cerca de la calidad requerida para un artculo.La sombra de los erroreshorrorLos errores siempre asoman tras nosotros cuando queremos hacer unaintrospeccinantenuestroespejodeproduccincientfca,ah estn,algunoslosarrastramosdesdelapocaescolar,nosoncons-cientes, solamente aforan. Los peores son causados por ignorancia y dejadez.Garcia-BerthouyAlcaraz5analizandoartculosdeNaturey el BMJ (British Medical Journal) encontraron incongruencias y errores estadsticos que se fltraron a travs de la redaccin del trabajo, el an-lisis, la revisin de los editores y del peer review. Aqu, cabe resaltar que este tipo de errores puede trascender y causar malas interpretaciones posteriormente, y podran estar revelando la presencia de otros errores y calamidades que subyacen en clculos ms primarios, en las obser-vaciones ms elementales. Pregntense ustedes Qu siente un editor cuando descubre un error as? ...(horror).En nuestra rea del conocimiento (la biologa), Alejandro Bortolus6 analiz la problemtica de la mala taxonoma. El 62,5% de los artculos de importantes revistas de ecologa que incluyen listados de especies no proporcionaban indicios de haber sido revisados por un especialistas; y menos del 2,5% enunciaron que tuvieron vouchers depositados en algn museo o centro de referencia. En algunos casos la mala taxonoma no causa modifcaciones en las conclusiones de los trabajos. Pero en otros casos, las malas identifcaciones tienen consecuencias en el manejo am-biental y en la conservacin de especies. Las especies sibilinas, hacen de la mala taxonoma un problema cientfco, social y econmico, afectando comnmente estudios de biogeografa, fsiologa y ecologa. Por este motivo el cuidado y la minuciosidad en los aspectos taxonmicos, su trazabilidad y el depsito en un museo o centro de referencia adquieren relevante importancia para la calidad de los artculos. Aceptando la realidad, limpiando de abrojosPor otro lado el peer review, una parte del proceso editorial en toda revista cientfca, es reconocido como un elemento del sistema de la ciencia, generalmente se sealan sus aportes positivos sobre la calidad de la publicacin, en la medida que contribuyen a mejorar la comuni-cacin y eliminar los defectos7; pero tambin son criticados como poco efcientes y causante de malos comportamientos y fraudes8; de todas maneras el peer review tiene un impacto sobre la calidad del artculo9. Para mejorar la calidad de los artculos tambin se ha probado el xito de un entrenamiento del los peer review10, lo cual podria ser tomado en cuenta para acelerar los procesos de edicin.Enunacomunidadcientfcaesperamosuntrabajoenconjunto. El editor y el peer review son elementos que junto con el autor pro-Callan las cuerdas.La msica sabalo que yo siento.Jorge Luis Borges. 1981. Diecisiete haiku.148EditorialRev. peru. biol. 18(2): 147 - 148 (Agosto 2011)porcionan la calidad esperada al artculo. Si pudiramos cuantifcar la calidad, los artculos con ms calidad deberian de ser aquellos donde las comunidades cientfcas se sienten plenamente identifcadas con su misin de producir y aportar a la sociedad y no ocurra eso donde hay un ensamblaje de investigadores que tienen por objetivo agregarse ms puntos al currculo vitae.La calidad de los insumos: una harina sin gorgojosEn la actualidad existe una demanda social por los denominados productos naturales. Para un sector de la sociedad es una forma de vida, no solamente por desear tener una vida sana y un cuerpo prstino sino por el comercio de una serie de productos que se atribuyen propiedades sobre la salud y el funcionamiento del organismo. Tambin es cierto que gran parte de la poblacin mundial no tiene recursos para acceder a productos farmacuticos y que la medicina no tradicional cubre este gran vaco11. Los ensayos para probar el efecto de un extracto o las propiedades deunaplantadebenserestandarizadosyseguirguasoprotocolos defnidos,estosconsiderandesdeeltrivialhechodeproduciragua destilada, cuidado de animales, protocolos para realizar los ensayos y procedimientos para informar los resultados. Diferentes instituciones ofrecen guas y lineamientos para el trabajo con animales de experi-mentacin12, 13, 14,15. Estas instituciones se dedican a evaluar e informar sobre el uso cientfco, tecnolgico y tico de los animales y los recursos biolgicos, brindar alternativas para las pruebas de investigacin, edu-cacin y ensayos de productos farmacuticos. Sin embargo, tambin se ha analizado sobre la existencia de un gran porcentaje de estudios con procedimientos y diseos experimentales inadecuados16 que producen reportes(artculos)demalacalidad.Enalgunoscasoslasguasde procedimientos responden a normas o exigencias legales. Enresumenbuenasprcticasenloscuidadosdelosanimalesde experimentacin, buenas prcticas en los reportes y anlisis estadsticos, permitirn mejorar la calidad de la informacin y del artculo cientf-co17, y esto no se aplica solamente a trabajos de carcter farmacolgico18. Antelapreguntaporqunoquierencitarmiartculo?Podramos revisar el artculo en busca del cumplimiento de todas esas guas que hemos mencionado.Morirse por publicar y publicar para vivir La expresin publicar o morir que acicateaba al investigador para que no deje sus descubrimientos en el cuaderno de apuntes, puede trans-formarse en publicar para vivir que mas bien describe a un investigador que se obliga a publicar, tanto como la fgura de un burcrata que se obliga a marcar la tarjeta al entrar al trabajolo que sigue despus de eso es esperar algn benefcio, si se trata del investigador, o la hora de la salida en el caso del burcrata. La calidad que buscaremos en el artculo la encontraremos en los cimientosdelainvestigacin,lahiptesis,eldiseo,lametodologa ylainformacin,lacalidadsubyaceentodoelprocedimientoyno solamente en la redaccin. La redaccin es un aspecto que solamente nos da indicios de cierta habilidad en la comunicacin y no necesaria-mente la que espera la comunidad cientfca y la sociedad en general. Muchosdeloselementosmencionadosarribanoseincluyenen las pautas para presentacin de trabajos en revistas cientfcas, pero la comunidad a la que se dirige espera encontrarlos. Todos los elementos mencionados son parte de la comunicacin cientfca, de su estructu-ra,obviarlospuedeproducirdudas,incomprensinoconfusin;un artculo de buena calidad debe evitar esas situaciones, debemos cuidar el mensaje, los elementos que contribuyen a especifcarlo, son un meta mensaje, que est diseado para seguir construyendo la ciencia.1 Szklo, Moyses. 2006. Quality of scientifc articles. Revista de Sade Pblica 40: 30-35. doi:10.1590/S0034-89102006000400005.2 Buela Casal G. 2004. Assessing the quality of articles and scientifc jo-urnals: proposal for weighted impact factor and a quality index. 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Ynez C.4, Nurby Rios1, Flor Mora1, Luis Rojas2, Tulia Diaz3, Judith Velasco3, Nahile Rios4 y Pablo Melendez1Chemical composition and antibacterial activity of the essential oil of Ambrosia peruviana Willd. from Venezuelan plains1 Departamento de Farmacognosia yMedicamentosOrgnicos.Fa-cultaddeFarmaciayBioanlisis. Universidad de los Andes, Mrida.2Institutodeinvestigaciones-Secci nProductosNatural es. Facultad de Farmacia y Bioanlisis. Universidad de los Andes, Mrida.3 Departamento de Microbiologa y Parasitologa. Facultad de Farma-cia y Bioanlisis. Universidad de los Andes, Mrida.4DepartamentodeToxicologay Farmacologa. Facultad de Farma-cia y Bioanlisis. Universidad de los Andes, Mrida.Apartadopostal5101.Merida, Venezuela.Telfono01158-274-2403444. Fax: 01158-274-2403543.Email Carlos Ynez:toxicoula1964@hotmail.comPresentado:13/12/2010Aceptado:21/03/2010 Publicado online:25/08/2011ResumenEn Venezuela actualmente se estn explorando nuevas fuentes de agentes antibacterianos de origen natural, debido al aumento de la resistencia bacteriana, entre ellos los aceites esenciales derivados de plantas. Por tal razn en el presente estudio se determin la composicin qumica del aceite esencial obtenido de las hojas de Ambrosia peruviana Willd recolectada en Guasdualito, Estado Apure, Venezuela. Los compuestos voltiles se aislaron por hidrodestilacin en una trampa de Clevenger y posteriormente se realiz el anlisis cualitativo-cuantitativo a travs de cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (GC/MS), en un equipo HP GC-MS System, modelo 5973, encontrando como compuestos mayoritarios al gamma-curcumeno (23,99%), seguido de ar-curcumeno (14,08%), acetato de bornilo (10,35%), camfor (5,03%) y epxido de oximene (4,79%). La actividad antibacteriana del aceite esencial realizada por el mtodo de difusin en agar con discos frente a Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella Typhi y Pseudomonas aeruginosa, mostr actividad contra S. aureus, E. faecalis, E. coli, y S. Typhi, con valores de CIM de 350500 g/ mL. Esta investigacin es el primer reporte de actividad antibacteriana de A. peruviana.Palabras claves: Ambrosia peruviana, aceite esencial, actividad antibacteriana.AbstractIn Venezuela, are currently exploring new sources of natural antibacterial agents, due to increased bacterial resistance, including essential oils derived from plants. For this reason in the present study we determined the chemical composition of essential oil obtained from leaves collected on Ambrosia peruviana Willd Guasdualito, ApureState,Venezuela. ThevolatilecompoundswereisolatedbyhydrodistillationinaClevengertrapand then subjected to qualitative analysis and quantitative by gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS) on an HP GC-MS System, model 5973, fnding as the major compound gamma-curcumeno (23.99%) followed bycurcumeno-ar(14.08%),bornylacetate(10.35%),camphor(5.03%)andepoxideoximene(4.79%).The antibacterial activity of essential oil by the agar diffusion method with discs against Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhi and Pseudomonas aeruginosa showed activity against S. aureus, E. faecalis, E. coli and S. Typhi, with MIC values of 350-500 micrograms/ mL. This research represents the frst report of antibacterial activity of A. peruviana.Keywords: Ambrosia peruviana, essential oil, antibacterial activity.Introduccin En la fora de Venezuela, la familia Asteraceae (Compositae) es la segunda familia con mayor riqueza de especies en la divisin Magnoliophyta; se reconocen 204 gneros y 784 especies nativas o naturalizadas, especialmente en las regiones Andino-Cordillera Costera y Alta Guayana; crecen en sitios con temperaturas bajas, por esta razn son pocas las especies en la regin Costera y de los Llanos (Lasser 1964, Hokecheo et al. 2008). El gnero Ambrosia ha sido estudiada como antioxidante por los favonoides y glicsidos que contienen (Zoran et al. 2008), y que son utilizados en el tratamiento de infecciones por Schisto-soma mansoni (Abadome et al. 1994), antiepilptico (Buznego et al. 1998, Buznego & Prez 2004), y como antiinfamatorio por la capacidad del compuesto cumain de inhibir la produccin de xido ntrico, importante mediador en los procesos infamatorios (Lastra et al. 2004).Ambrosia peruviana Willd. (Asteraceae) es una hierba de 4 8 cm de largo distribuida desde Mxico hasta la parte tropical deAmricadelsur;conocidavulgarmenteconelnombrede altamisa, artemisa, altamiz, alcanfor (Cuba), Ambrosia silvestre, Maki (Bolivia). En Venezuela se encuentra en los estados Sucre, DistritoFederal,Apure,Bolvar,Falcn,Mrida,Miranda, Tchira, Trujillo y Delta Amacuro (Badillo 2001, Lasser 1964). Ambrosiaperuvianaseempleacomohipotensor,anties-pasmdico, depurativo, diafortico y en trastornos menstruales (Hernndezetal.2002,Lans2007,Zapataetal.2010).En Venezuela A. peruviana es utilizada para dolor del cuerpo, febre, dolor de cabeza, hipotensin, ulceras, manchas de la piel, varices, cicatrices, trastornos menstruales (Gil et al. 2006).Aunque el gnero Ambrosia ha sido ampliamente estudiado ftoqumicamente,sonescasoslostrabajosrelacionadoscon lacomposicinqumicadesusaceitesesenciales.Chalchatet al.(2004)identifcaron51compuestosenelaceiteesencial obtenidodeAmbrosiaartemisiifoliarecolectadaenBelgrado (Repblica de Serbia) sus principales componentes fueron: D-germacrene (24,1%), limoneno (16,83%), alfa-pineno (8,0%) y mircineno (7,4%), y observaron importante actividad bacte-ricida y fungicida. La composicin qumica del aceite esencial deAmbrosiatrifdadeChinarepresentaacetatodebornilo (15,5%),borneol(8,5%),xidodecariofleno(8,3%),alfa-pineno (8,0%) atribuyendo a estos la actividad antibacteriana (Wang et al. 2006). Elpresentetrabajotienecomoobjetivoidentificarlos componentesdelaceiteesencialdeA.peruvianarecolectada enVenezuelayestudiarsuactividadantibacteriana,poresta razn esta investigacin resulta un gran aporte a la qumica de productos naturales.150Ynez et al. Rev. peru. biol. 18(2): 149 - 151 (Agosto 2011)Material y mtodosMaterial vegetal.- Hojas de A. peruviana fueron recolectadas en mayo 2010 en Guasdualito (071449N 70431W, 125 m de altitud), Estado Apure, Venezuela. Una muestra fue de-positado (voucher nmero NR011) en el Herbario MERF de la Facultad de Farmacia y Bioanlisis, Universidad de los Andes, Mrida, Venezuela. Obtencin del aceite esencial.- Hojas frescas (1305 g) de A. peruviana se trituraron y sometieron a destilacin por arrastre convapordeagua(6horas),empleandounatrampadetipo Clevenger (Rojas et al. 1999). Un mililitro del aceite esencial color amarillo (0,09% rendimiento) fue obtenido. El aceite se conserv a -4 C hasta su uso para ensayos biolgicos. Anlisis de composicin qumica.- Los componentes vo-ltiles del aceite esencial fueron analizados por cromatografa de gases utilizando un cromatgrafo Perkin-Elmer. La identifcacin de cada uno de los compuestos se realiz por GC-MS con un equipoHewlettPackardModelo5973,equipadoconuna columna HP-5MS de 30 m de largo x 0,25 mm de dimetro x 0,25 m de grosor de la pelcula. Temperatura de inyector 230 C, temperatura del cudruplo 150 C, gas transportador Helio a una velocidad lineal de 34 m/s; energa de ionizacin 70 eV; rangodescande40-50amu;3,9scan/s.Volumendeinyec-cin 1 L de una solucin diluida al 2% en ter dietlico. La identifcacin de los compuestos fue basada en la base de datos WileyMSDataLibraryyNIST05,losndicesdeKovatsse compararon con valores disponibles en la literatura (6a edicin) (Adams 2007).Actividad antibacteriana.- La actividad antibacteriana fue evaluada de acuerdo al mtodo de difusin en agar con discos descrita por Salazar et al. (2007), utilizando las cepas de refer-enciaStaphylococcusaureusATCC25923,Enterococcusfecalis ATCC29212,EscherichiacoliATCC25922,Klebsiellapneu-moniae ATCC 23357, Salmonella Typhi CDC57 y Pseudomona aeruginosa ATCC 27853 proporcionadas por el Departamento de Microbiologa y Parasitologa de la Facultad de Farmacia y Bioanlisis de la Universidad de los Andes.Enlosorganismosquemostraronzonadeinhibicinse determinadolaconcentracininhibitoriamnima(CIM), preparando diluciones del aceite con dimetilsulfxido a concen-traciones de 10 a 600 g/mL, fueron empleados los antibiticos dereferencia:Eritromicina(150g), Vancomicina(30g), Ampicilina-Sulbactam (10 g 10 g), Aztreonam (30 g), Ciprofoxacina (30 g) y Ceftazidima (30 g). Los ensayos se realizaron por duplicado. Resultados y discusinComposicin qumica del aceiteFueronidentifcados22compuestos(84,5%)enelaceite esencial obtenido de A. peruviana (Tabla 1); los principales com-ponentes encontrados fueron el gamma-curcumeno (23,99%), ar-curcumeno (14,08%), acetato de bornilo (10,35%), camfor (5,03%) y epxido de oximeno (4,79%).Actividad antibacterianaLa actividad antibacteriana del aceite esencial realizada por elmtododedifusinenagarcondiscosfrenteabacterias gram positivas y negativas, mostr actividad contra S. aureus, E. faecalis, E. coli, y S. typhi, con valores de CIM de 350500 g/mL (Tabla 2). Los resultados obtenidos en las bacterias gram positivas coincidieron con los registrados por Wang et al. (2006) y Chalchat et al. (2004), sin embargo estos autores reportaron actividadantibacterianaenK.pneumoneaeyP.aeruginosano observadas en nuestra investigacin. Elmtododedifusinenagaresunodelosmtodosfre-cuentemente empleados para ensayar la actividad antibacteriana de aceites esenciales, sin embargo se han observado divergencias relacionadas con la actividad individual de los componentes del aceite, por ejemplo el 1,8-cineol obtenido del aceite de las hojas de T no muestra halos de inhibicin pero si valores de MIC bajos (Kalemba et al. 2003).ConclusinDe acuerdo con los resultados obtenidos en este trabajo se concluye que los compuestos qumicos que conforman el aceite esencial de Ambrosia peruviana de los Llanos venezolanos, dif-eren de otros aceites esenciales obtenidos del gnero Ambrosia. Sin embargo, los componentes acetato de bornilo, camfor, y bor-neol se encuentran en A. trfda, A. artemisiifolia y A. peruviana. Los compuestos ms importantes del aceite esencial obtenido de Ambrosia peruviana Willd. fueron gamma-curcumeno (23,99%), ar-curcumeno (14,08%), acetato de bornilo (10,35%), camfor (5,03%) y cis-epxido-oximeno (4,79%), los que podran ser responsables de la actividad antibacteriana.Literatura citadaAbadome F., G. Geerts, V. Kumar. 1994. Evaluation of the activity of Ambrosia maritima L. against Schistosoma mansoni infec-tion in mice. Journal of Ethnopharmacology. 44:195-198.Adams R. 2007. Identifcation of essential oil components by gas chromatograpy/massspectroscopy,4thEdition.Illinois USA: Allured Publishing Corporation, Carol Stream, Ill, p. 804.Pico N Compuestosarea (%) Ikb1 sabineno 0,3 9762 beta-pineno 2,0 9793 cis-epoxi-oximeno 4,8 9964 silvestreno 2,9 10315 cineol-1,8 0,4 10356 fenchona 0,6 10927 linalol 1,1 11018 camfor 5,0 11529 cis-derbenol 1,8 116910 borneol 3,6 117311 tepinen-4-ol 0,4 118512 Acetato de bornilo 10,4 127713 beta-cariofleno 1,4 142914bergamoteno-alfa-cis1,3 144615 trans-beta-farneseno 1,5 146816 curcumeno-gamma 24,0 149317 curcumeno-ar 14,1 149618 nerolidol-Z 2,7 152119 cadineno-delta 0,6 153520 carotol 1,6 160021 junenol 3,3 161222 cubenol 0,69 1627Tabla1.ComposicinqumicadelaceiteesencialdeAmbrosia peruviana (%)*.a Lista de Compuestos en orden de elucin con dos columnas: AT-5 (apolar) b ndice de Kovats calculados en relacin a n-alcanos (C8-C24)151 Composicin y actividad antibacteriana del aceite esencial de AmbrosiA peruviAnARev. peru. biol. 18(2): 149 - 151 (August 2011)BadilloV.&I.Lapp.2001.Lista ActualizadadeCompuestasen Venezuela. Ernstia. 11:147-215.Buznego M., M. Llanio, M. Fernndez, N. Alonso, M. Acevedo, H. Prez. 1998. Perfl neurolgico de la Ambrosia paniculata (Willd) O.E Schulz (Artemisa). Rev Cubana Plant Med. 3:45-46.Buznego M., H. Prez. 2004. Acute effect of an extract of Ambrosia paniculata(Willd.)O.E.Schultz(mugwort)inseveral modelsofexperimentalepilepsy.Epilepsy&Behavior. 5:847-851.Chalchat C., A. Maksimovi, D. Petrovi, S. Gorunovi, S. orevi, M. Mraovi. 2004. Chemical composition and antimicro-bialactivityof AmbrosiaartemisiifoliaL.essentialoil. Journal of Essential Oil Research. 16:270-273.Gil R., J. Carmona, M. Rodrguez. 2006. Estudio etnobotnico de especies toxicas, ornamentales y medicinales de uso popu-lar presentes en el jardn de plantas medicinales. Boletn antropolgico. 24:463-481.Hernndez J., H. Valero, R. Gil. 2002. 23 especies vegetales medici-nales de uso frecuente en la poblacin de Tabay. Revista de la Facultad de Farmacia. 44:51-57.Hokecheo O., P. Berry, O. Huber. 2008. Nuevo Catalogo de la Flora Vascular de Venezuela. Fundacin Instituto Botnico de Venezuela Dr. Tobias Lasser. Caracas. Venezuela.KalembaD.&A.Kunicka.2003.Antibacterialandantifungal properties of essential oils. Current Medicinal Chemistry. 10:813-829.LansC.2007.EthnomedicinesusedinTrinidadandTobagofor reproductiveproblems.JournalofEthnobiologyand Ethnomedicine. 3:1-13Lasser T. 1964. Flora de Venezuela Vol X. Parte Primera. Instituto BotnicoDireccindeRecursosNaturalesRenovables. MinisteriodeAgriculturayCra.Caracas,Venezuela. 244:475-478.Lastra A., T.Ramrez,L.Salazar,M.Martnez,F. Trujillo.2004. Theambrosanolidecumaininhibitsmacrophagenitric oxidesynthesis:somestructuralconsiderations.Journal Ethnofarmacology. 95:221-227.Rojas L. 1994. Trabajo Especial de Grado ULA. Facultad de Farma-cia. Postgrado en Qumica de Medicamentos.SalazarE.,B.Nieves,M.Ruiz,M. Araque,E.Velazco,J.Vila. 2007.MolecularEpidemiologyandCharacterizationof Resistance Mechanisms to various Antimicrobial Agents inAcinetobacterbaumanni.MedicalScienceMonitor. 13:89-94.Wang P., C. Hua, C. Xian. 2006. Chemical composition and anti-bacterial activity of the essential oil from Ambrosia trifda L. Molecules, 11:549-555.ZapataB.,C.Durn,E.Stashenko,L.Betancur, A.Mesa.2010. Actividad antimictica y citotxica de aceites esenciales de plantas de la familia Asteraceae. Revista Iberoamericana de Micologa. 27:101-103.Zoran M. 2008. In vitro antioxidant activity of ragweed (Ambrosia artemisiifolia L., Asteraceae) herb. Industrial Crops and Products. 28:356-336.Zona de inhibicin Antibiticos de referenciaCIMMicrorganismos Aceite esencial E VA SAM AZT CIP CAZ (g/ mL)Staphylococcus aureus ATCC (25923) 8* 30* 400Enterococcus faecalis ATCC (29212) 11* 22* 500Escherichia coli ATCC (25922) 7* 25* 500Klebsiella pneumoniae ATCC (23357) NA 33* NPSalmonella typhi CDC 57 8* 45* 350Pseudomonas aeruginosa ATCC (27853) NA 31* NPTabla 2. Actividad antibacteriana del aceite esencial de Ambrosia peruviana contra cepas de Referencia Internacional.*mm de los halos de inhibicin (discos 6 mm de dimetro) promedio de dos ensayos consecutivos; NA: no activo; NP: no probado; E: Eritromicina (150 g), VA: Vancomicina (30 g), SAM: Ampicilina-Sulbactam (10g/10g), AZT: Aztreonam 30 g, CIP: Ciprofoxacina 30 g, CAZ: Ceftazidima 30 g. CIM. Concentracin Inhibitoria mnima, rango de concentracin 10600 g/mL.152Ynez et al. Rev. peru. biol. 18(2): 149 - 151 (Agosto 2011)153 Activity of mAchAerium floribundum against acne-inducing bacteriaRev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (August 2011)Rev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (Agosto 2011) Facultad de Ciencias Biolgicas UNMSMISSN 1561-0837Activity of ethanolic extracts leaves of Machaerium foribundum against acne-inducing bacteria, and their cytoprotective and antioxidant effects on fbroblastLorena Daz1*, Soumi De Montijo2, Ana L. Medina3, Pablo Melndez1, Vian Lauren-ce4 and Gilberte Marti- Mestres4Actividad del extracto etanlico de las hojas de Machaerium foribundum contra bacterias que inducen el acn y su efecto citoprotector y antioxidante sobre fbroblastos1DepartmentofPharmacognosy and Organic Medications2 Department of Parasitology and Microbiology3 Department of Food SciencesFacultaddeFarmaciayBioan-lisis,UniversidaddeLosAndes, Mrida ZP-5101-A, Venezuela. Tel: +58(0)274-2403484. *MailLorenaDaz:loredive@yahoo.com4IBMM,UMR5247,Facultadde Farmacia,UniversidadMontpe-llier 1, 14491, 34093, Montpellier, Francia.Presentado:26/01/2011Aceptado:27/05/2011 Publicado online:25/08/2011AbstractPropionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus have been recognized as the bacteria that are involved in the infammatory process of acne, while oxidants and antioxidants are involved in the repair of cutaneous tissue affected. In this study an evaluation was made of the antibacterial effect by the agar diffusion and broth dilution method, the cytoprotective and antioxidant effect on 3T3 dermic fbroblast cells, treated with hydrogen peroxide and the scavenging capacity of free radicals was determined by the 2, 2-diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH) method as well as the Reducing Power of the ethanolic extracts of the leaves of the Machaerium foribundum. Minimal bactericidal concentrations (MBC) were obtained against Propioni-bacterium acnes and Staphylococcus aureus of 5 mg/mL and 2 mg/mL, respectively. A cytoprotective effect of 111% was observed over the cellular viability of the fbroblasts at 10 g/mL and an antioxidant effect of 92% over the viability of the fbroblasts treated with hydrogen peroxide at 25 g/mL. A stimulation of 24% growth of fbroblasts at 50 g/mL was evidenced. On the other hand a 93% scavenging activity of the DPPH free radical was shown for 100 g/mL with a CI50 of 34 g/mL. The reducing power was evidenced to be dependent on the concentration. The results obtained indicated that the ethanolic extract of Machaerium foribundum shows a good antibacterial activity against bacteria that induce acne and a high potential for scavenging of free radicals at relatively low concentrations. Keywords: Machaerium foribundum; Acn; Antibacterial; Antioxidant; Fibroblasts. ResumenPropionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus aureus han sido reconocidas como las bacterias involucradas en el proceso infamatorio del acn, mientras que oxidantes y antioxidantes han sido implicados en la reparacin del tejido cutneo afectado. El presente estudio evalu el efecto antibacteriano por el mtodo de difusin en agar y dilucin en caldo; el efecto citoprotector y antioxidante sobre clulas de fbroblastos drmicos 3T3, tratadas con perxido de hidrogeno; se determin la capacidad secuestrante de radicales libres por el mtodo del 2,2-difenil-2-picrihidracil (DPPH) y el poder reductor de los extractos etanlicos de las hojas de Machaerium foribundum. El extracto mostro una CMB de 5mg/mL y 2mg/mL para P. acnes y S. aureus, respectivamente. Se observ un efecto citoprotector sobre la viabilidad celular de los fbroblastos de 111% a 10 g/mL y antioxidante mostrado sobre la viabilidad de los fbroblastos tratados con perxido de hidrogeno de 92% a 25 g/mL. Se evidencio estimulacin del crecimiento de fbroblastos de 24% a 50 g/mL. Por otra parte se mostr actividad secuestrante del radical libre DPPH de 93% a 100 g/mL, con una CI50 34 g/mL. El poder reductor evidencio ser dependiente de la concentracin. Los resultados indicaron que el extracto etanlico de Machaerium foribundum presenta una buena actividad antibacteriana contra las bacterias que inducen el acn y un alto potencial secuestrante de radicales libres a concentraciones relativamente bajas.Palabras claves: Machaerium foribundum; Acn; Antibacteriano; Antioxidante; Fibroblastos.IntroductionMachaerium species consist of lianas, bushes and trees found from sea level up to 500 900 m, and rarely above 1,700 m, it is distributed from Mexico to Argentina (Lozano et al. 2006), and 39 taxa are reported for Venezuela (Melndez 2009). In the traditional medicine of Peru, Machaerium species have been used forthetreatmentofdiarrheaandsexualimpotency(Rengifo 2001). Te procyanidin obtained from the ethanol extract of ligneous stems and bark of M. foribundum showed antibacte-rialactivityagainstPseudomonasmaltophiliaandEnterobacter cloacae (Waage et al. 1984). No other activity has been reported for this species. Acne vulgaris is a common illness that afects the areas of the body that have big sebaceous glands such as the face, back and trunk(Leydon1997).Tenormalbacterialforaoftheskin includes Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis, S. aureus and Pityrosporum ovale, which proliferate during puberty and often are involved in the development of acne (Hamnerius 1996). Propionibacterium acnes has been described as an infam-matory anaerobic organism that is implicated in the develop-ment of infammatory acne, while S. epidermidis and S. aureus are aerobic organisms that usually are involved with superfcial infectionsofthesebaceousunit(Burkhartetal.1999).For manyyearsantibioticshavebeenusedforthetreatmentof acne. However, resistance to antibiotics has increased and in a multifactorialmanner,whichincludesthebacteria-antibiotic relationship, the type of antibacterial, and the characteristics of the host, among others. To overcome the problem of resistance toantibiotics,medicinalplantshavebeenstudied extensively as alternative treatments. Te cutaneous aging process, whether physiological or as a consequence of other exogenous factors, is always related at the molecular level with the appearance of non-controlled oxida-tive activities. Tus, cellular catabolism takes place through the oxidative process of the Krebs cycle. Tis process is responsible for the generation of H2O2 in the interior of cutaneous cells. Likewise, the oxidative reactions that are not of enzymatic origin 154Daz et al. Rev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (Agosto 2011)require the presence of oxygen. Te most frequent reaction is linked to the energetic contribution of UV photons, which are captured by chromophore molecules present in the cutaneous tissueandareconducivetothetransferofanelectrontothe oxygen molecule and the formation of very reactive oxygen spe-cies (ROS) (Parra et al. 1995a). Te cells of mammals have an elaborate defense mechanism for detoxifcation of free radicals, suchastheenzymesdismutasesuperoxide(SOD),catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPX). Besides these, there areseveralantioxidantmoleculesthatplayanimportantrole in the antioxidant defense system. Tese molecules can be syn-thesized either in vivo, for example glutathione, bilirubin and melatonin, or can be obtained from the diet, such as vitamins (-tocopherol, -carotene and ascorbic acid) and micronutri-ents, such as zinc and selenium (Si Eun et al. 2003).Theimbalancebetweentheproductionoffreeradicals (ROS)andthequantityofantioxidantsavailablegivesplace to oxidative stress. Tis can cause damage to cells and tissues during infections, as well as several degenerative disorders, such as cardiovascular, cell aging and neurodegenerative conditions, likeAlzheimersdisease,mutationsandcancer,(Ames1998). Currently,agreatvarietyofplantextractsareusedfortheir antioxidant potential, for their stimulation of growth, and their cytoprotective efect on fbroblasts (Si Eun et al. 2003, Annan & PHoughton 2008, Phan et al. 2001). In this study, the activity of ethanol extracts of the leaves of M. foribundum against acne-inducing bacteria was determined, as well as their cytoprotective and antioxidant activity against 3T3 dermic fbroblast cells. Tis work was conducted with the aim of fnding an alternative treat-ment for acne vulgaris and the regeneration of cutaneous tissue.Material and methodsChemicalsModifed Eagles Medium (DMEM) with 4.5 g/L of glucose, BioWhitaker, provided by Lonza and supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 1.2% of a mixture of penicillin and streptomycin (P/S), and 1.2% of L-glutamine (Glu). Neutral red colorant (3-amino-7-dimethylamino-2-methylfuroside hy-drochloride), 2,2-diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH), potassium ferrocyanide (K3Fe(CN)6), ferric chloride (Cl3Fe), ascorbic acid, hydrogenperoxide(H2O2)andcatalaseofbovineliverwere provided by Sigma-Aldrich (France).MicroorganismsPropionibacterium acnes (CVCM 1453), Staphylococcus aureus (CVCM 764), and S. epidermidis (CVCM 352) were provided by the Venezuelan Collection of Microbiology Culture, Venezuela. Collection and extraction of the plantMachaerium foribundum Benth. was collected in the Caparo Forrest Reserve in the state of Barinas, Venezuela. A sample of the plant identifed with the number 562 (collection P. Melendez and R. Nuez) was deposited in the Herbarium of the Faculty ofPharmacyandBioanalysis(MERF)oftheUniversidadde Los Andes, in Mrida, Venezuela.Te plant material was oven dried at 40 C for 72 h and then powdered. A sample (100 g) was extracted with 500 mL ethanol at room temperature in the dark for 8 days, fltered through a WhatmanN1flter paper,andthefltratedried in arotary evaporator at 45 C. Te dry extract was stored at 7 C. Antibacterial activityA 1.5 x 108 UFC/mL bacterial inoculum was prepared from eachofthestrainsaccordingtothe0.5McFarlandpattern (NCCLS 2003).Difusion method in agar.- Tis trial was performed by the method of Hayes and Markovic (2002), with some modifca-tions. A solution of the ethanolic extract was prepared at a con-centration of 100 mg/mL in ethanol. Previously sterilized plates were prepared by the addition of 15 mL of Muller Hinton agar (agar base), which was allowed to solidify. Using sterile forceps, stainless steel cylinders of 7 mm diameter were placed over the agar. Later, 5 mL of the same agar, previously inoculated with 100 l of the standardized bacterial inoculum (1,5 x 108 UFC/mL), was added; this was allowed to solidify and the rings were withdrawn,thusleavingtheagarwithholes.Intheresulting reservoir, 20 L of ethanolic extract was added, as well as negative (ethanol) and positive controls (ampicillin at 10 g/mL). After 30 minutes, the plates were incubated under either anaerobic or aerobic conditions, according to the bacteria tested. Te results weredeterminedbymeasurementinmillimeterstheinhibi-tionzonesandcomparisonofthesewiththeinhibitionzone produced by ampicillin; all results are an average of three trials.Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC).- Tis trial was carried out accordingtothemethodofKumaretal.(2007),withsome modifcationstheinoculumwasstandardizedbythemethod described above (Hayes and Markovic 2002). Te extracts were tested at diferent concentrations (5, 2.5, 2, 1.5 and 1.25 mg/mL). Since the strains withstand 5% ethanol at the maximum, stock solutions were prepared at 100, 50, 40, 30, and 25 mg/mL. Four series of six sterilized tubes (two series per bacterial species) were dosed with 1.9 mL of glucose-yeast broth for the Staphylococcusandthesamemediumsupplementedwith1% glucose for the Proponibacterium, 100 L of extract, one for each concentration, and they were inoculated with 15 L of the bacte-rial suspension standardized (1.5 x 108 UFC/mL), including the controls (bacterial growth, solvent, and sterility of the extract). Te tubes were incubated for 24 hours at 37 C in aerobic con-ditions for Staphylococcus aureus, and for 48 hours at 37C for Propionibacterium acnes in anaerobic conditions, with gas pack envelopes. Measurement for percentage transmittance was taken at 625 nm before and after incubation in order to determine the MIC, with this being the lowest concentration of the extract that inhibits the visible growth of the microorganism. In this case, in which the extracts are colored, it is the lowest concentration at which no change in the percentage transmittance reading is verifed. Once the time had elapsed, 15 mL of glucose-yeast agar was inoculated with 5 L of each culture obtained in the prior phase and added to the Petri dishes. Tese were incubated under the same conditions as above. Te UFC/mL count of each plate was made, with the MBC being the lowest concentration of the extract that completely inhibits bacterial growth. Cytoprotector ActivityCellularproliferationof3T3fbroblasts.-3T3dermic fbroblastcellswereobtainedfromtheMedicationsToxicol-ogyLaboratoryoftheFacultyofPharmacyMontpellier1in France. Cells in confuent growth were trypsinized, centrifuged and resuspended in Modifed Eagles Medium (DMEM) with 155 Activity of mAchAerium floribundum against acne-inducing bacteriaRev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (August 2011)4.5 g/L of glucose, supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 1.2% of a mixture of penicillin and streptomycin (P/S), and1.2%L-glutamine(Glu).Tecellswerecountedina CASSY.1 Brand hemocytometer and the cell concentration was standardized at 1x105 cells/mL in the same medium. Te cells were dosed to a density of 1 x 104 cells/mL per well in plates of 96 wells. Te plates were maintained at 37 C for 24 hours in an incubator with 5% CO2, then the cells were lavaged with 0.0095M(PO4)Dulbeccosphosphatebufersaline(DPBS) without calcium and magnesium. Later, the extracts prepared in the DMEM culture medium were added at concentrations of 16.6, 31.25, 62.5, 125 and 250 g/mL, with DMEM medium in 0.5% ethanol, as positive control, being placed in the frst column (NICEATM 2003). After 24 hours of incubation, cel-lular viability was measured by the neutral red test. NeutralRedTest.-After24hoursofincubationofthe aforementionedculture,themediumwasdiscardedandthe cells lavaged two times with 150 L of DPBS. Ten, 150 L of a 1.25% solution of neutral red in DMEM culture medium wasadded.Tecellswereincubatedfor3hoursat37Cin 5% CO2 before the neutral red solution was discarded and the cells lavaged two times with DPBS bufer. Later, 150 L of a developingsolutionpreparedwithwater:ethanol:aceticacid (49%:50%:1%) was added and the absorbance measured at 540 nm using an Elisa Bio-Rad reader (NIEHS 2003).Stimulation of growth of 3T3 fbroblast cells.- Tis trial used the method of Annan and Houghton (2008), with some modifcations. Fibroblast cells in confuent growth were trypsin-ized, centrifuged and resuspended in Modifed Eagles Medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), 1% glutamine, 53 units of penicillin and 53 mg/mL of strepto-mycin. Te cells were counted in a CASSY 1 Brand hemocytom-eter and the concentration was standardized to a concentration of 1x105 cells/mL in the same medium. Using a multichannel micropipette the cells were dosed to a density of 1 x 104 cells/mL per well in plates of 96 wells. Te plates were maintained at 37 C for 24 hours in an incubator with 5% CO2 before the cells were washed with 0.0095M (PO4) Dulbeccos phosphate bufer saline (DPBS) without either calcium or magnesium. Later, 100 L of the extracts prepared were added at concentrations of 25, 50, 100, and 250 g/mL in DMEM, supplemented with 0,5% fetal bovine serum (FBS), 1% glutamine, 53 units of penicillin and 53 mg/mL of streptomycin (6 mL of a mixture of penicillin, streptomycin (P/S) and 6 mL of glutamine). DMEM medium, 10% FBS, and DMEM medium with 0.5% FBS were used as positivecontrol.Teplatesweremaintainedat37Cfor72 hours in an incubator with 5% CO2 and the test was developed with neutral red. Antioxidant ActivityDPPH free radical scavenging activity.- Ethanolic extracts (200 L) at concentrations of 25, 50, 100, 200, 250, and 500 g/mL were added to 2.8 mL of a solution of DPPH at 6 x 10-2 mM prepared in methanol. Ascorbic acid was used as a positive control at a concentration of 176 g/mL. Te reaction mixtures were incubated in darkness for 30 minutes. Later, the absorbance was measured at 517 nm with a UV Kontron spectrophotometer. Te inhibition percentage (%IP) of the DPPH free radical was calculated:%IP = [Abs DPPH Abs sample/ Abs DPPH] x 100Te concentration required to obtain 50% of the maximum capacitytocapturefreeradicals(CI50)wascalculatedbythe following equation:CI50 = C1 C C = [(C1 C2) x PI1 50]/ (PI1 PI2)PI1 and PI2: inhibition percentage immediately higher and lower than 50% of inhibition respectively. C1 C2: concentrations at which IP1 and IP2 are produced respectively (Murillo et al. 2007, Goupy et al. 1999).Assessment by reduction of metal ion.- One milliliters of extract, prepared at concentrations of 20, 50, 100, 125, 250, and 500 g/mL, was mixed with 2 mL of phosphate bufer (0.2 M at 6.6 pH) and 2 mL of potassium ferricyanide [K3Fe(CN)6, 10g/L (1%)]. Te mixture was incubated for 30 minutes at 50 C before 2 mL of 10% trichloroacetic acid was added and the mixture centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes. Finally, 2 mL of the supernatant solution was mixed with 2 mL distilled water and 0.5 mL ferric chloride (0.1%), and the absorbance measured at 700 nm in a Genesis brand spectrophotometer. Te increase in absorbance of the mixture indicated an increase in the reduc-ing power. Ascorbic acid was used as reference at 5, 15 and 30 g/mL concentrations (Ali et al. 2003, Palanisamy et al. 2008). Antioxidantcapacityincultured3T3dermicfbroblast cells.- Annan and Houghtons (2008) method was used, with some modifcations. Te culture of 3T3 fbroblast cells was made as indicated in the cytotoxicity test. From the cellular suspension of 1x105 cells/mL, 100 l (1x104 cells) was dosed in each well of a plate with 96 wells. Te plates were kept at 37 C for 48 hours in an incubator with 5% of CO2, until the formation of a confuent monolayer of cells. Ten, the cells were washed with 150 L of DPBS phosphate bufer. Later, 100 L of a mixture of the extracts at concentrations of 25, 50 , 100 and 250 l/mL, and hydrogen peroxide (1x10-3 M) prepared in a DMEM culture medium, were added. Te plates were kept at 37 C for 3 h, in an incubator with 5% CO2 before the medium was discarded andthecellswashedwith150LofDPBSbufersolution. Catalase, at 250 Units/mL, was used as positive control. Cellular viability was determined by the neutral red test (NIEHS 2003).Statistical analysisData were expressed as the mean standard deviation (SD) ofsixreplicationsfortheassaysonfbroblastcellsandthree replicationsfortheothertests.One-wayanalysisofvariance (ANOVA)wasused,precededbyCochran'stests(tocheck variances homogeneity), and followed by the NewmanKeuls multiple comparison test; signifcance was established at p 5 mg/mL, the MBC was not determined for this latter one. Nonetheless the extract showed good antibacterial properties against S. epidermidis through the agar difusion method in which an inhibition zone of 16 mm was obtained compared with 15 mm for ampicillin at 10 g/mL. Te control, 5% ethanol, did not inhibit bacterial growth comparedwiththatofeachbacterialstrainwithout200L ethanol; while the ampicillin positive control inhibited bacterial growth at 10 g/mL. It should be noted that, according to Fa-bry et al (1998), for a crude extract of a plant to be considered potentially useful therapeutically, it must have an MIC value < 8 mg/mL. Te ethanolic extract M. foribundum leaves showed lower MIC and MBC values.Cytoprotector ActivityEfectoncellviabilityof3T3dermicfbroblasts.-Te cytoprotective activity of the ethanolic extract of M. foribundum (Fig. 1) on the growth of dermic fbroblasts (3T3) was not dose dependent and a cellular viability percentage greater than 100% 6.9%at10,25and50g/mLwasobserved.Tecellular viability began to decrease at 250 g/mL, for which a viability percentage of 94% 7% was obtained. Te ethanolic extract of M. foribundum showed good cytoprotecive activity over the growth of 3T3 dermic fbroblasts up to 100 g/mL. Stimulation of growth.- Te proliferation and stimulation of growth of fbroblasts is important in tissue repair since the f-broblasts are involved in the migration, proliferation, contraction and production of collagen (Woodley et al. 1985, Mimura et al. 2004). Te ability to stimulate the growth of fbroblasts is now considered to be a model to evaluate the in vitro activity over the healing process of wounds (Mensah et al. 2001, Houghton et al. 2005). In Figure 2, the efect of the ethanolic extract of M. foribundum on the stimulation of growth of 3T3 fbroblasts is shown. At 50 and 100 g/mL, a signifcant increase (P < 0.05) on cellular growth of 24 % 5,1% and 9% 2,6% was obser-vedcomparedwiththecontrol,inwhichthecellsgrewwith minimumgrowthfactorsandwithouttheextract.Statistical analysisindicatesthat25and100g/mLarehomogeneous groups (P < 0.05). At 250 g/mL, toxicity of the extract on the cells was observed, even though such toxicity was not seen in the prior assay (Efect on cell viability) in which cellular growth was verifed with the maximum growth factors.Bacterial strainsInhibition Zone (mm) extractInhibition Zone (mm) Amp (10 g/mL)MIC (mg/mL) MBC (mg/mL)Staphylococcus aureus CVCM 764 15 202 2Propionibacterium acnes CVCM 1453 18262 5Staphylococcus epidermidis CVCM 352 1615> 5 NDTable 1. Antibacterial activity of the ethanolic extract of Machaerium foribundum expressed as inhibition zone (mm), minimum inhibitory con-centration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). CVCM: Initials for Venezuelan Collection of Microbiology Cultures. Amp: Ampicillin. The results are expressed as the average of 3 independent trials (n= 3).Concentration (mg/mL)Staphylococcus aureus CVCM 764Propionibacterium acnes CVCM 14535 100 1002.5 100 99.922 100 99.921.5 65.6 99.821.25 67.8 99.68Table 2. Antibacterial activity of the ethanolic extract of Machaerium foribundum expressed as bacterial reduction percentage.CVCM: Initials for Venezuelan Collection of Microbiology Cultures. The Bacterial Reduction Percentage was calculated from the MBC assay.85909510010511011510 25 50 100 250Viability %Concentrationsethanolicextract(g/mL)Figure1.Cytoprotectiveeffectover3T3fbroblastscellsofthe ethanolic extract of Machaerium foribundum, expressed as viability percentage of the dermic fbroblasts. The results are expressed as the average of 4 readings SD.0204060801001200.5% SBF25 g/mL50 g/mL 100 g/mL 250 g/mLViability %Figure 2. Stimulation of growth of 3T3 fbroblasts by the ethanol extract of Machaerium foribundum, expressed as viability percentage of the dermic fbroblasts. FBS: fetal bovine serum. Negative control 0,5% FBS; positive control (10% FBS). The results are expressed as the average of 6 readings SD. *Statistically signifcant difference from the control 0.5% SBF value for each group (P < 0.05).157 Activity of mAchAerium floribundum against acne-inducing bacteriaRev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (August 2011)Antioxidant Activity.DPPH free radical scavenging activity.- Using the DPPH test, the ethanolic extract of M. foribundum revealed a signifcant antioxidant activity (P < 0,05) with a CI50 of 34 g/mL. In Figure 3, an activity dependent on concentration is evidenced up to 100 g/mL, with an inhibition percentage of 93% 0,1%, compa-red with 97% 0,1% obtained for ascorbic acid, the positive control, at a concentration of 176 g/mL. On this basis it can be said that the ethanolic extract of M. foribundum leaves has great potential for the prevention and treatment of the damage induced by the imbalance of the ROS at the organic level.Antioxidant assessment by reduction of metal ion.- Te antioxidant activity of the plant extract was complemented by measuring its capacity to reduce Fe+3 to Fe+2, monitored by the formation of a colored complex (Fenton type reaction). Figure 4 illustrates the reducing power of the ethanol extract at 25, 50, 100, 120, 250 and 500 g/mL compared with ascorbic acid, a positive control, at concentrations of 5, 15 and 30 g/mL. It was evidenced that the reducing power of the extract and of the control were dependent on the concentration, taking note of an absorbance of 0.79 nm 0.05 for M. foribundum at 500 g/mL. Tese results show that the extracts have a high potential antioxidant capacity at relatively low concentrations.Antioxidantcapacityincultured3T3dermicfbroblast cells.- It is well known that hydrogen peroxide causes oxidative damage to cells. In Figure 5, it is shown that the ethanol extract of M. foribundum at 50 g/mL revealed a viability of 93% 4.9% of the fbroblasts compared with the same percentage for 250 units/mL of catalase, used as a positive control, and of 43% 5.5% for 1x10-3 M hydrogen peroxide. A signifcant percen-tage of 50% protection was verifed (P < 0.05) over the cellular viability of the dermic fbroblasts for the ethanol extract of M. foribundum likewise, concentrations of 25, 50, and 100 g/mL and catalase (93 % 4.2) are identifed as homogenous groups, Te most likely mechanism of the antioxidant efect is the direct interactionoftheextractswiththehydrogenperoxide,more so than either the alteration or interaction of the extract with the membrane that can limit the damage induced by hydrogen peroxide (Annan et al.2008).ConclusionsTe regeneration of cutaneous tissue is characterized by re-epithelization and granulation of the tissue and remodeling of theextracellulararray(Priyaetal.2002).Tefbroblastcells play a very important role in these processes since they synthe-sizediverseproteicfbers(reticular,elasticandcollagen)and the diferent macromolecules that are part of the fundamental substance (Parra et al. 1985b).Oxidantsandantioxidantsareinvolvedintherepairof cutaneous tissue. Oxidants contribute to tissue damage in the eventsfollowinglesionsoftheskin,impairingtheprocessof tissue regeneration. Antioxidants, on the contrary, prevent tis-sue damage and stimulate tissue recovery (Parra et al. 1995a). Research on the application of antioxidants of plant extracts for healing wounds has been widely published (Tran et al. 1997, Fronza et al. 2009).Teantioxidantpropertiesoftheethanolextractsofthe leaves of M. foribundum have been demonstrated scientifcally inthisresearch.Itshouldbenotedthatitisthefrstreport withregardtotheefectofethanolextractsoftheleavesof this plant on cellular proliferation and antioxidant activity in dermic fbroblasts. Fractionation and purifcation studies are in progress to determine the active compounds and identify their chemical structures.Tis research showed that the ethanol extract of the leaves of M. foribundum has good activity against bacteria that induce * 37* 73* 93 * 939702040608010012025 50 100 250 176Inhibition % Concentration (g/mL)Ethanolic extract of Machaerium floribundumAscorbic acidFigure 3. Free radical scavenging activity, expressed as DPPH per-centage of inhibition. The results are expressed as the average of 3 readings SD, *Statistically signifcant difference from the control ascorbic acid value for each group (P < 0.05).00.20.40.60.8120 50 100 125 250 500Absorbance Concentration ( g/mL)Machaerium floribundumFigure 4. Ferric reducing antioxidant power. Macha: ethanolic extract of Machaerium foribundum. The results are expressed as the average of 3 readings SD.Figure 5. Viability percentage of 3T3 dermic fbroblasts. Simultane-ous addition of the extract of Machaerium foribundum and 1x10-3 M hydrogen peroxide. Positive control: catalase 250 Units/mL. Negative control: 1 x 10-3M. hydrogen peroxide. The results are expressed as theaverageof6readingsSD.*Statisticallysignifcantdifference from the catalase value for each group (P < 0.05).93* 439293 93* 84020406080100120Viability %CatalasePeroxide25 g/ml50 g/ml100 g/ml250 g/ml158Daz et al. Rev. peru. biol. 18(2): 153 - 158 (Agosto 2011)acne and, at 50 g/mL, showed evidence of a very interesting scavengingactivityoffreeradicalsandcellproliferationfor which its active components can be considered as an alternative for use in wound-healing.AcknowledgmentsWe thank the Collaboration Program between France and Venezuela(PCP)FoodandCutaneousBiosecurityandCon-sejo de Desarrollo Cientfco Humanstico, Tecnolgico y Arte (CDCH-TA), Project N FA 440-08-03-B, of the Universidad de Los Andes in Mrida, Venezuela for fnancial assistance for this research.Literature cited Ali Y., M. Ahmet & A.K. Ayse. 2003. Antioxidant and antimicrobial activities of Polygonum cognatum Meissn extracts. Journal of the Science of Food and Agriculture. 83:64-69.AmesB.1998.Micronutrientspreventcanceranddelayaging. Toxicology Letters 102:5-18.AnnanK.&P.Houghton.2008.Antibacterial,antioxidantAnd fbroblast growth stimulation of aqueous extracts of Ficus asperifoliaMiq.andGossypiumarboretumLWound- HealingplantsofGhana.JournalofEthnopharmacol-ogy.119:141-144.Burkhart C.G., C. Burkhart & P.F. Lehmann. 1999. Acne: a review ofimmunologicandmicrobiologicfactors.Journalof postgraduate Medicine. 75: 328-331.FabryW.,P.Q.Okemo&R. Ansor.1998. Antibacterial Activity ofEast Africanmedicinal.JournalofEthnopharmacol-ogy.60:7984. Fronza M., B. Heinzmann., M. Hamburger, et al. 2009. Determina-tion of wound healing effect of Calendula Extracts using the scratch assay with 3T3 fbroblasts. Journal of Ethno-pharmacology. doi:10.1016/j.jep.09.014Goupy P., M. Hugues, P. Boivin et al.1999.Antioxidant composition and activity of