i

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Pangkalan Bun, Kalimantan Tengah pada 02 September

1995, merupakan anak kedua dari Bapak Sugianto Zaman dan Ibu Suyatni. Penulis

menyelesaikan pendidikan di Sekolah Dasar Katholik Santa Maria Pangkalan Bun

(2001 – 2007), Sekolah Menengah Pertama Negeri 1 Arut Selatan (2007 – 2010), dan

Sekolah Menengah Atas Negeri 1 Pangakalan Bun (2010 – 2013).

Pada tahun 2013 penulis diterima sebagai mahasiswa di Fakultas Kedokteran

Hewan Universitas Udayana melalui jalur SBMPTN. Selanjutnya penulis melakukan

penelitian di Laboratorium Bioteknologi Balai Besar Veteriner (BBVET) Denpasar

dengan judul “Profil Pita Protein Plasma Anjing Kintamani Yang Dideteksi

Dengan Metode SDS-PAGE” sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.

ii

ABSTRAK

Anjing kintamani bali merupakan plasma nutfah asli Indonesia. Anjing kintamani

telah diperjualbelikan hingga keluar negeri dengan harga mahal, sehingga dalam

perdagangannya diperlukan strategi untuk menentukan kualitas anjing tersebut. salah

satu metode yang akurat untuk menentukan status kesehatan anjing adalah dengan

SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis). Melalui

uji tersebut dapat ditentukan jumlah pita protein, berat molekul dan juga fraksi protein

dalam plasma darah anjing kintamani. jumlah pita protein plasma anjing kintamani

betina umur > 1 tahun dan < 1 tahun berturut-turut antara 6 – 10 pita dan 6 – 9 pita,

jumlah pita protein plasma anjing kintamani jantan umur > 1 tahun dan < 1 tahun

berturut-turut antara 7 – 10 pita dan 4 – 10 pita. Berat molekul pita protein plasma

anjing kintamani betina berumur >1 tahun dan < 1 tahun berturut-turut 84,266 kDa;

66,478 kDa; 57,2633 kDa; 38,58 kDa; 29,69 kDa; 20,858 kDa; 18,64 kDa; 12,82 kDa;

9,61 kDa dan 9,034 kDa dan 107,318 kDa; 76,49 kDa; 59,822 kDa; 47,324 kDa; 0;

24,9433 kDa; 20,956 kDa; 13,384 kDa; 10,0975 kDa; dan 9,468 kDa. Berat molekul

pita protein plasma anjing kintamani jantan > 1 tahun dan < 1 tahun berturut-turut

69,142 kDa; 50,502 kDa; 41,105 kDa; 32,868 kDa; 26,81 kDa; 19,804 kDa; 17,806

kDa; 13,06 kDa; 9,9375 kDa; dan 9,63 kDa dan 82,4333 kDa; 56,378 kDa; 49,65 kDa;

35,885 kDa; 22,12 kDa; 21,6967 kDa; 18,43 kDa; 12,4533 kDa; 9,66 kDa; dan 9,3

kDa. Protein plasma anjing kintamani betina umur > 1 tahun dan < 1 tahun, dan anjing

kintamani jantan umur < 1 tahun terdiri dari 4 fraksi yaitu globulin β, albumin,

prealbumin dan Low Molecular Weight (LMW) Protein , sedangkan protein plasma

anjing kintamani jantan umur > 1 tahun terdiri dari 3 fraksi protein yaitu albumin,

prealbumin dan LMW protein.

Kata Kunci : Pita Protein, Anjing Kintamani Bali, Plasma Darah

iii

ABSTRACT

Kintamani bali dog is original germplasm of Indonesia. Kintamani dogs have

been trafficked to abroad with high prices, so in the trade required a strategy to

determine the quality of the dog. One of the most accurate methods to determine the

dog's health status is with SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel

Electrophoresis). Through these tests can be determined the number of protein bands,

molecular weight and also the protein fraction in the blood plasma dog kintamani. The

number of female protein bands of female dogs aged > 1 year and < 1 year in a row

between 6 - 10 bands and 6 - 9 bands, the number of plasma protein bands of kintamani

dogs of male > 1 year and < 1 year in a row between 7 – 10 bands and 4 - 10 bands.

Molecular weight of plasma bands of female dog kintamani aged > 1 year and < 1 year

consecutive 84.266 kDa; 66,478 kDa; 57.2633 kDa; 38.58 kDa; 29.69 kDa; 20,858

kDa; 18.64 kDa; 12.82 kDa; 9.61 kDa and 9,034 kDa and 107.318 kDa; 76.49 kDa;

59,822 kDa; 47,324 kDa; 0; 24,9433 kDa; 20,956 kDa; 13,384 kDa; 10,0975 kDa; And

9,468 kDa. Molecular weight of plasma protein band of male kintamani > 1 year and

< 1 year in a row 69,142 kDa; 50,502 kDa; 41,105 kDa; 32.868 kDa; 26.81 kDa; 19,804

kDa; 17,806 kDa; 13.06 kDa; 9.9375 kDa; And 9.63 kDa and 82.4333 kDa; 56,378

kDa; 49.65 kDa; 35.885 kDa; 22.12 kDa; 21.6967 kDa; 18.43 kDa; 12,4533 kDa; 9.66

kDa; And 9.3 kDa. Female kintamani dog plasma proteins > 1 year and < 1 year, and

male kintamani dog < 1 year old consist of 4 fractions of β globulin, albumin,

prealbumin and Low Molecular Weight (LMW) Protein, while plasma protein male

kintamani dog > 1 year consists of 3 protein fractions of albumin, prealbumin and

LMW protein.

Keyword: Protein Band, Balinese Kintamani Dog, Blood Plasm

iv

UCAPAN TERIMA KASIH

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat

rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini.

Penulisan skripsi dengan judul “Profil Pita Protein Plasma Anjing Kintamani Yang

Dideteksi Dengan Metode Sds-Page” diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan

Universitas Udayana. Dalam penyusunan dan penulisan skripsi ini tidak terlepas dari

bantuan, bimbingan, serta dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis

dengan tulus hati mengucapkan terimakasih kepada:

1. Bapak Dr. drh. Nyoman Adi Suratma, MP, selaku Dekan Fakultas Kedokteran

Hewan Universitas Udayana.

2. Ibu Dr. drh. I. G. Ayu Agung Suartini, M.Si., selaku pembimbing I atas

bimbingan, nasehat dan motivasi yang telah diberikan selama penelitian dan

penulisan skripsi ini hingga selesai.

3. Bapak Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si, selaku pembimbing II yang telah

meluangkan waktunya untuk membimbing penulis dan memberikan arahan serta

nasehat selama penelitian hingga terselesainya penulisan skripsi ini.

4. Bapak Prof. Dr. drh Iwan Harjono Utama,M.S, Bapak Dr. drh I Nengah Wandia,

M.Si, dan Ibu Dr. drh. Luh Gde Sri Surya Heryani, M.Biomed selaku penguji

yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan bimbingan, kritik, saran

serta nasehat yang sangat berguna dalam penyusunan skripsi ini.

5. Bapak Dr. drh Wayan Bebas, M.Kes selaku Pembimbing Akademik yang telah

memberikan arahan dan bimbingan selama penulis menempuh kuliah di Fakultas

Kedokteran Hewan Universitas Udayana.

6. Semua dosen dan staf akademik Fakultas Kedokteran Hewan Universitas

Udayana yang telah membantu dan membimbing penulis selama menempuh

kuliah di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.

v

7. Orang tua penulis bapak Sugianto Zaman dan ibu Suyatni atas doa restu,

bimbingan, motivasi, kasih sayang, serta dukungan moral maupun materil.

8. Keluarga penulis Yulia Puspita Sari, Mayang Sarumpun Mangurai dan keluarga

besar lainnya atas doa restu, kasih sayang, motivasi serta dukungan moral dan

material.

9. Teman seperjuangan dalam melakukan penelitian yaitu, Dewi Febriani, I Wayan

Syartama Hadi Nugraha, Wahid Danang Pranatha, dan Putu Alit Anggara Putra.

10. Gigih Pambudi, Tessa Saputri Marmanto, Putu Gonna Indah Arsana, I Kadek

Suarjana, Eunike Bertin Irianti, Wanda Della Oktarin Hutagaol, Febio Tomasini

Marciano Meus, Amelia Yovita Susanto dan Prasetya Eka Purnomo yang telah

memberikan semangat dan dukungan.

11. Teman-teman 13A Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana yang telah

memberikan pengalaman dan semangat selama penulis menempuh kuliah.

Dalam skripsi ini penulis menyadari masih banyak kekurangan. Oleh sebab itu, segala

saran dan kritik yang sifatnya membangun sangat penulis harapkan. Akhir kata,

semoga skripsi ini bermanfaat bagi para pembaca.

Denpasar, Juni 2017

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman

RIWAYAT HIDUP .............................................................................................. i

ABSTRAK .......................................................................................................... ii

ABSRACT ......................................................................................................... iii

UCAPAN TERIMA KASIH ............................................................................... iv

DAFTAR ISI ...................................................................................................... vi

DAFTAR TABEL ............................................................................................. vii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ viii

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... ix

BAB I PENDAHULUAN .................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang Penelitian .................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah.............................................................................. 2

1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................... 2

1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................. 2

BAB II TINJUAN PUSTAKA ............................................................................. 4

2.1 Anjing Kintamani .............................................................................. 4

2.2 Darah ................................................................................................. 6

2.3 Plasma Darah ..................................................................................... 6

2.4 Protein plasma ................................................................................... 7

2.4.1 Albumin ................................................................................... 9

2.4.2 Globulin ................................................................................. 10

2.4.3 Fibrinogen .............................................................................. 10

2.4.4 Protrombin ............................................................................. 11

2.5 Elektroforesis................................................................................... 11

2.5.1 Metode SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide

Gel Electrophoresis) ........................................................................ 12

2.6 Kerangka Konsep ............................................................................ 14

BAB III MATERI DAN METODE.................................................................... 15

3.1 Objek Penelitian .............................................................................. 15

3.2 Bahan Penelitian .............................................................................. 15

3.3 Alat Penelitian ................................................................................. 15

3.4 Rancangan Penelitian ....................................................................... 15

3.5 Variabel Penelitian .......................................................................... 16

3.6 Cara Pengumpulan Data .................................................................. 16

3.7 Prosedur Penelitian .......................................................................... 17

3.8 Analisis Data ................................................................................... 17

3.9 Lokasi dan Waktu Penelitian............................................................ 17

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 18

4.1 Hasil ................................................................................................ 18

4.2 Pembahasan ..................................................................................... 29

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.............................................................. 34

5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 34

5.2 Saran ............................................................................................... 35

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 36

vii

DAFTAR TABEL

No Teks Halaman

1. Komponen Darah Anjing ............................................................................ 6

2. Ketetapan Nilai Plasma Protein Anjing ....................................................... 9

3. Data Sampel Anjing Kintamani................................................................. 18

4. Berat Molekul Protein Plasma Anjing Kintamani Betina di Atas 1 Tahun . 22

5. Berat Molekul Protein Plasma Anjing Kintamani Betina di Bawah 1

Tahun ....................................................................................................... 23

6. Berat Molekul Protein Plasma Anjing Kintamani Jantan di Bawah 1

Tahun ....................................................................................................... 23

7. Berat Molekul Protein Plasma Anjing Kintamani Jantan di Atas 1 Tahun . 24

8. Luas Kurva Anjing Kintamani Betina ....................................................... 28

9. Luas Kurva Anjing Kintamani Jantan ....................................................... 28

10. Persentase Luas Kurva Anjing Kintamani Betina ...................................... 29

11. Persentase Luas Kurva Anjing Kintamani Jantan ...................................... 29

12. Perhitungan Elektroforesis SDS-PAGE Standar Marker Protein 1 ............. 39

13. Perhitungan Elektroforesis SDS-PAGE Standar Marker Protein 2 ............. 40

14. Perhitungan Elektroforesis SDS-PAGE Standar Marker Protein 3 ............. 41

15. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 1 ....................................... 42

16. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 2 ....................................... 42

17. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 3 ....................................... 43

18. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 4 ....................................... 43

19. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 5 ....................................... 44

20. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 6 ....................................... 44

21. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 7 ....................................... 45

22. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 8 ....................................... 45

23. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 9 ....................................... 46

24. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 10 ..................................... 46

25. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 11 ..................................... 47

26. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 12 ..................................... 47

27. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 13 ..................................... 48

28. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 14 ..................................... 48

29. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 15 ..................................... 49

30. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 16 ..................................... 49

31. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 17 ..................................... 50

32. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 18 ..................................... 50

33. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 19 ..................................... 51

34. Perhitungan Elektoforesis SDS-PAGE Sampel 20 ..................................... 51

viii

DAFTAR GAMBAR

No Teks Halaman

1. Anjing kintamani ........................................................................................ 5

2. Komposisi Darah ........................................................................................ 7

3. Pemisahan Protein dengan Elektroforesis .................................................. 12

4. Prinsip Kerja SDS-PAGE ......................................................................... 13

5. Alur Kerangka Konsep ............................................................................. 14

6. Hasil SDS-PAGE Plasma Anjing Kintamani 1 .......................................... 19

7. Hasil SDS-PAGE Plasma Anjing Kintamani 2 .......................................... 20

8. Hasil SDS-PAGE Plasma Anjing Kintamani 3 .......................................... 21

9. Hasil Image-J Sampel ke-1 hingga Sampel ke-9 ........................................ 25

10. Hasil Image-J Sampel ke-10 hingga Sampel ke-18 .................................... 26

11. Hasil Image-J Sampel ke-19 dan Sampel ke-20 ......................................... 27

12. Kurva Persamaan Regresi Logaritma Berat Molekul Marker 1 .................. 39

13. Kurva Persamaan Regresi Logaritma Berat Molekul Marker 2 .................. 40

14. Kurva Persamaan Regresi Logaritma Berat Molekul Marker 3 .................. 41

15. Persiapan Sampel Plasma Anjing Kintamani Bali ..................................... 52

16. Persiapan Alat Elektroforesis .................................................................... 52

17. Pemanasan Sampel pada Suhu 100 0C ....................................................... 52

18. Penuangan Buffer Elektroforesis ............................................................... 53

19. Penuangan Sampel ke Sumuran Gel .......................................................... 53

20. Marker 1 ................................................................................................... 54

21. Sampel 1 ................................................................................................... 54

22. Sampel 2 ................................................................................................... 55

23. Sampel 3 ................................................................................................... 55

24. Sampel 4 ................................................................................................... 56

25. Sampel 5 ................................................................................................... 56

26. Sampel 6 ................................................................................................... 57

27. Sampel 7 ................................................................................................... 57

28. Sampel 8 ................................................................................................... 58

29. Sampel 9 ................................................................................................... 58

30. Marker 2 ................................................................................................... 59

31. Sampel 10 ................................................................................................. 59

32. Sampel 11 ................................................................................................. 60

33. Sampel 12 ................................................................................................. 60

34. Sampel 13 ................................................................................................. 61

35. Sampel 14 ................................................................................................. 61

36. Sampel 15 ................................................................................................. 62

37. Sampel 16 ................................................................................................. 62

38. Sampel 17 ................................................................................................. 63

39. Sampel 18 ................................................................................................. 63

40. Maker 3 .................................................................................................... 64

41. Sampel 19 ................................................................................................. 64

42. Sampel 20 ................................................................................................. 65

ix

DAFTAR LAMPIRAN

No Teks Halaman

1. Perhitungan Elektroforesis SDS-PAGE Standar Marker Protein ................ 39

2. Perhitungan Elektroforesis SDS-PAGE Sampel 1-20 ................................ 42

3. Dokumentasi laboratorium ........................................................................ 52

4. Perhitungan Jumlah Pita............................................................................ 54

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Penelitian

Anjing kintamani bali (AKB) adalah anjing lokal yang hidup di

pegunungan Desa Sukawana, Kecamatan Kintamani, Kabupaten Bangli,

Provinsi Bali (Gunawan et al., 2012). Anjing kintamani bali merupakan

plasma nutfah provinsi Bali yang sangat penting dijaga kelestariannya.

Anjing kintamani bali sangat terkenal di luar negeri namun tidak demikian

dengan kampung asalnya, pulau Bali.

Anjing kintamani bali bukanlah anjing yang murah, bahkan penggemar

anjing kintamani bali ada yang mau membeli anjing tersebut dengan harga

jutaan rupiah, sehingga dalam perdagangannya diperlukan strategi untuk

menentukan kualitas anjing tersebut. Tentunya pembeli tersebut

menginginkan anjing yang dibelinya sehat secara klinis, tidak membawa

penyakit subklinis dan baik secara genetik. Anjing kintamani yang baik dapat

dilihat dari status kesehatan, ciri fisiknya baik warna rambut maupun struktur

tubuh. Cara ini tentu kurang tepat untuk melihat kelainan pada genetik

maupun penyakit-penyakit internal maupun yang bersifat subklinis seperti

parasit darah, kelainan pada pembekuan darah, kelainanan imunologis,

kelaianan fungsi organ dalam maupun kelainan hormonal.

Status kesehatan salah satunya dapat dilihat dari pemeriksaan darah.

Darah terdiri dari plasma, serum dan sel-sel darah (Frandson, 1992). Didalam

plasma terdapat protein plasma yang dapat dijadikan patokan menentukan

status kesehatan anjing. Salah satu metode untuk mendeteksi protein yang

beredar dalam plasma secara akurat adalah dengan metode SDS-PAGE

(Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis). Melalui

metode SDS-PAGE, dapat disimpulkan kriteria anjing kintamani yang baik

dan sehat menurut protein yang terkandung didalam plasma anjing kintamani

tersebut. Hingga saat ini, informasi mengenai profil pita protein plasma anjing

kintamani yang sehat belum pernah dilaporkan. Padahal informasi ini penting

2

artinya untuk memastikan anjing sehat secara klinis. Berdasarkan

permasalahan di atas, penelitian ini dilakukan untuk mengetahui data fisiologi

pita dan total protein plasma anjing kintamani yang sehat. Penelitian ini

sangat bermanfaat bagi praktisi dokter hewan dan pembeli anjing untuk dapat

memastikan anjing yang dibelinya sehat secara klinis dan bebas dari penyakit

subklinis.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan di atas, maka

dirumuskan masalah sebagai berikut:

1) Bagaimana profil pita protein plasma anjing kintamani yang dideteksi

dengan metode SDS-PAGE?

2) Berapa berat molekul protein masing-masing pita protein plasma anjing

kintamani?

3) Bagaimana klasifikasi protein plasma anjing kintamani yang dianalisis

berdasarkan berat molekulnya?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah sebagai berikut:

1) Mengetahui profil pita protein plasma anjing kintamani yang dideteksi

dengan metode SDS-PAGE.

2) Mengetahui berat molekul protein masing-masing pita protein plasma

anjing kintamani.

3) Mengetahui klasifikasi protein plasma anjing kintamani yang dianalisis

berdasarkan berat molekulnya.

1.4 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini diharapkan bermanfaat sebagai:

1) Sumber informasi ilmiah dan data fisiologis profil pita protein plasma

anjing kintamani yang dideteksi dengan metode SDS-PAGE sebagai

acuan untuk menentukan status kesehatan anjing kintamani.

3

2) Sumber informasi tentang berat molekul protein masing-masing pita

protein plasma anjing kintamani.

3) Sumber informasi tentang klasifikasi protein plasma anjing kintamani

yang dianalisis berdasarkan berat molekulnya.