RE52611 IFU Es Cortisol ELISA V2009 09 Sym2

Instrucciones de Uso

Cortisol ELISA

Ensayo inmunolgico para la determinacin quantitativa in vitro de Cortisol libre en saliva humana y de Cortisol total

en suero humano diludo.

RE52611

96

2-8C

I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0)40-53 28 91-0 [email protected] D-22335 Hamburg, Germany Fax: +49 (0)40-53 28 91-11 www.IBL-International.com

Cortisol ELISA (RE52611) ESPAOL

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1. USO PROPUESTO Ensayo inmunolgico para la determinacin quantitativa in vitro de Cortisol libre en saliva humana y de Cortisol total en suero humano diludo como elemento de ayuda el monitoreo del Sndrome de Cushing y la Enfermedad de Addision.

2. IMPLICACIONES CLNICAS El cortisol (hidrocortisona, compuesto F) es el glucocorticoide ms importante en humanos y se produce en la zona fasciculata de la corteza adrenal. El 90 % del cortisol circulante est unido a la globulina fijadora de corticoide (CBG, Transcortina), aproximadamente el 7 % est unido a albmina slo del 1 3 % est libre. Esta ltima parte es la nica que representa la forma activa del cortisol. El cortisol aislado (libre) se libera en la saliva y se excreta va rin como una pequea parte de los metabolitos del cortisol. El nivel de cortisol libre en sangre regula fundamentalmente su secrecin en la corteza adrenal con un mecanismo de retroalimentacin negativa va CRH (hormona liberadora de corticotropina) en la regin hipotalmica y la ACTH en la glndula pituitaria, pero tambin se afecta por numerosos factores y sobre todo por el stress. En humanos existe una fluctuacin fisiolgica del cortisol que alcanza el valor ms elevado por las maanas y el ms bajo durante la medianoche. Esta fluctuacin del nivel de cortisol en plasma se refleja en la saliva normalmente con un pico a los 90 minutos despus de despertarse. La medicin del cortisol se indica en enfermedades con produccin anormal de glucocorticoides, por ejemplo el Sndrome de Cushing y la Enfermedad de Addison. Debido a la fluctuacin diurna de los valores de cortisol es necesario tomar varias muestras para establecer el perfil personal o durante las pruebas dinmicas como la supresin de dexametasona o el ensayo de estimulacin de ACTH. La coleccin de muestra de saliva es un mtodo fcil que no produce el stress de pinchazos repetides en la vena. La medicin del cortisol en saliva se recomienda en pacientes con niveles anormales de CBG como las mujeres embarazadas, personas con hipotiroidismo, sndrome nefrtico o adipositas marcadas y durante la aplicacin de diferentes medicamentos, incluidos los anticonceptivos orales.

3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El enzimo inmunoensayo sobre fase slida (ELISA) est basado en el principio de la competencia. Una cantidad desconocida de antgeno presente en la muestra y una cantidad fija de antgeno marcado enzimticamente compiten por los sitios de unin de los anticuerpos que recubren los pozos. Tras la reaccin del sustrato los pozos se lavan para detener la reaccin de competencia. Despus de la reaccin del sustrato la intensidad del color desarrollado es inversamente proporcional a la cantidad de antgeno de la muestra. Los resultados de las muestras se pueden determinar directamente usando la curva estndar.

4. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Slo para uso en diagnstico in-vitro. Slo para uso profesional. 2. Antes de comenzar el ensayo lea las instrucciones completa y cuidadosamente. Use la versin vlida

del prospecto que se ofrece con el juego de reactivos. Asegrese de entenderlo todo. 3. En caso de dao severo del estuche del juego de reactivos, contacte por favor a IBL o a su

suministrador en forma escrita antes de transcurrida una semana de la recepcin. No utilice los componentes daados en los ensayos pero gurdelos en forma segura para la reclamacin.

4. Tome en cuenta el nmero de lote y la fecha de caducidad. No mezcle reactivos de diferentes lotes. No use reactivos vencidos.

5. Cumpla con las buenas prcticas de laboratorio y las pautas de seguridad. Use bata de laboratorio, guantes de ltex desechables y gafas de proteccin cuando sea necesario.

6. Los reactivos de este juego que contienen materiales peligrosos pueden causar irritacin ocular y cutnea. Vea MATERIAL SUMINISTRADO y las etiquetas para los detalles. Las Hojas de Datos de Seguridad de los materiales para este producto estn disponibles en la pgina de internet de IBL o mediante solicitud directa a IBL.

7. Los reactivos qumicos y los reactivos preparados o usados deben ser tratados como desechos peligrosos de acuerdo con las regulaciones nacionales sobre bioseguridad y pautas de seguridad.

8. Algunos reactivos contienen azida de sodio (NaN3) como preservativo. En caso de contacto con los ojos o la piel, lvese inmediatamente con agua. La NaN3 puede reaccionar con el plomo o el cobre de las caeras formando azidas metlicas explosivas. Cuando elimine los reactivos y para evitar acumulaciones, lave con gran cantidad de agua.


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9. Todos los reactivos de este juego que contienen suero o plasma humano han sido ensayados y encontrados negativos para anti-HIV I/II, HBsAg and anti-HCV. Sin embargo, la presencia de estos u otros agentes infecciosos no puede ser excluda en forma absoluta, por lo que estos reactivos deben ser tratados como potencialmente biopeligrosos a los efectos de su manipulacin y eliminacin.

5. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El juego de reactivos es enviado a temperatura ambiente y debe ser almacenado a 2-8C. Mantenindose alejado del calor o de la luz solar directa. El almacenamiento y estabilidad de muestras y reactivos preparados se detalla en los captulos correspondientes. La placa de microtitulacin es estable hasta la fecha de caducidad del juego de reactivos an cuando la bolsa haya sido abierta, siempre que se vuelva a cerrar hermticamente y se almacene a 2-8C.

6. TOMA Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS Saliva El paciente no debe comer, beber, mascar goma o lavarse los dientes 30 min antes de la toma de muestra. De lo contrario se debe enjuagar la boca con agua fra 5 min antes de la toma de muestra. No colecte muestra en cuando se presenten enfermedades orales, inflamaciones o lesiones (contaminacin con sangre). La saliva puede ser colectada en un dispositivo adecuado. Se debe recoger un mnimo de 0.5 mL de lquido. La produccin de saliva puede ser estimulada mascando un pedazo de film de parafina. Se recomienda congelar las muestras a 20C antes del ensayo de laboratorio. Despus de descongelar, mezcle y centrifuge 2000 3000 x g para remover el material particulado.

Observe que las muestras de saliva estn visualmente bien (sin color rojizo que indique contaminacin sangunea).

Almacenamiento: 37C 18-25C 2-8C -20C (Alcuotas) Estabilidad: 1 sem. > 2 sem. > 4 sem. 6 mes

Suero, Plasma (EDTA) Se deben observar las precauciones usuales para la venipuntura. Es importante preservar la integridad qumica de la muestra de sangre desde el momento de su toma hasta el ensayo. No emplee muestras fuertemente hemolizadas, lipmicas o ictricas. Las muestras que presenten turbidez deben centrifugarse antes de ensayar para eliminar cualquier material particulado. Almacenamiento: 2-8C -20C (Alcuotas) Estabilidad: 48 h 6 mes

Mantngase alejado del calor o de la luz solar directa. Evite congelar y descongelar repetidamente.


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7. MATERIALES SUMINISTRADOS Cantidad Smbolo Componente 1 x 12x8 MTP Placa de Microtitulacin Tiras separables. revestido con anticuerpos anti-cortisol (conejo).

1 x 10 mL ENZCONJ Conjugado Enzimtico Coloreado en amarillo. Listo para usar. Contenido: Cortisol (purificado por cromatografa), conjugado con HRP, estabilizador.

1 x 2.5 mL 6 x 0.5 mL CAL A-G

Estndar A-G 0; 0.03; 0.06; 0.20; 0.60; 1.50; 4.00 g/dL 0; 0.3; 0.6; 2.0; 6.0; 15; 40 ng/mL 0; 0.83; 1.7; 5.5; 17; 41; 110 nmol/L Listo para usar. Contenido: Cortisol, Solucin buffer, 0.1 % BSA, 0.1 % ProClin.

2 x 0.5 mL CONTROL 1+2 Control 1+2 Listo para usar. Contenido: Cortisol, alto y bajo, Solucin buffer, 0.1 % BSA, 0.1 % ProClin. Por concentracin exactas vea las etiquetas.

1 x 12 mL TMB SUBS Solucin de sustrato TMB Listo para usar. Contenido: TMB, Solucin buffer, estabilizador. 1 x 12 mL TMB STOP Solucin de paro TMP Listo para usar. 1 M H2SO4. 1 x 50 mL WASHBUF CONC Solucin Buffer de Lavado Concentrado (10x) Contenido: Solucin buffer fosfatada, Tween, estabilizador.

3 x FOIL Folio adhesivo

8. MATERIALES REQUIRIDOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Micropipetas (Multipette Eppendorf o dispositivos similares, < 3% CV). Volmenes: 5; 20; 50; 100;

1000 L 2. Un mtodo de muestreo apropiado debe ser utilizado (puede ser ordenado en IBL bajo el nmero de

referencia REF RE69991) 3. Estndar cero adicional para la dilucin de suero (puede ser ordenado en IBL en forma separada bajo el

nmero REF KECO611) Sueros de Control (p.e. Controles de Lyphochek Immunoassay Plus, Biorad, Alemania)

4. Agitador orbital (400-600 rpm) 5. Vortex 6. Micropipeta multicanal de 8 canales con reservorio de reactivo 7. Frasco lavador, sistema automatizado o semi-automatizado de lavado de placas de microtitracin 8. Fotmetro para placas de microtitulacin capaz de leer absorbancias a 450 nm (longitud de onda de

referencia 600-650 nm) 9. Agua bidestilada o desionizada 10. Toallas de papel, puntas para las micropipetas y cronmetro

9. INDICACIONES PARA EL PROCEDIMIENTO 1. Cualquier manipulacin inadecuada de las muestras o modificacin del procedimiento de ensayo puede

alterar los resultados. Los volmenes a pipetear, los tiempos de incubacin, las temperaturas y etapas de pretratamientos tienen que ser efectuados estrictamente siguiendo las instrucciones. Use slo pipetas u otros dispositivos calibrados.

2. Una vez comenzado el ensayo, se deben completar todas las etapas sin interrupcin. Asegrese de que los reactivos, materiales y dispositivos necesarios estn listos en el momento adecuado. Permita que todos los reactivos y muestras alcancen la temperatura ambiente (18-25 C) y agite suavemente por rotacin cada vial de reactivo lquido o muestra antes del uso. Evite la formacin de espuma.

3. Evite la contaminacin de los reactivos, pipetas pocillos y/o tubos. Emplee una punta desechable nueva para cada reactivo, estndar o muestra. No intercambie las tapas. Tape siempre los viales que no estn en uso. No reutilice los pocillos, tubos o reactivos.

4. Se recomienda ensayar las muestras por duplicado para poder identificar errores potenciales de pipeteo.

5. Use un esquema de pipeteo apropiado segn las dimensiones de la placa.


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6. El tiempo de incubacin afecta los resultados. Todos los pocillos deben ser manipulados en el mismo orden y secuencia de tiempo. Para el pipeteo de soluciones en los pocillos se recomienda una pipeta de 8 canales

7. El lavado de la placa de microtitulacin es un paso importante. Los pocillos insuficientemente lavados conllevan a resultados errneos. Se recomienda emplear una pipeta multicanal o un sistema automtico de lavado. No deje secar los pocillos entre incubaciones. Cuide de no daar el recubrimiento de las placas durante el enjuague y/o la aspiracin. Enjuague y agregue los reactivos cuidadosamente. Al enjuagar cercirese que todos los pocillos estn completamente llenos con la Solucin buffer de lavado y que no haya residuos en ellos.

8. La humedad afecta los pocillos y tubos recubiertos. No abra la bolsa hasta que alcance la temperatura ambiente. Los pocillos o tubos que no se empleen deben guardarse inmediatamente en la bolsa resellada con desecante.

10. INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIN DEL ENSAYO 10.1. Preparacin de componentes liofilizados o concentrados

Diluya/ disuelva Componente Diluyente Relacin Notas

Almacenamiento Estabilidad

10 mL Solucin Buffer de Lavado

agregue 100 mL agua bidest. 1:10

Mezcle vigorosamente. 2-8C 4 sem.

10.2. Dilucin de Muestras Muestra para ser diludo con Relacin Notas Saliva no - - - Suero generalmente Estndar A 1:50 p.e. 5 L + 245 L

Muestras cuya concentracin es mayor a la del mayor estndar deben ser diluidas hasta 1:32 con el estndar A y re-ensayadas.

11. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 1. Pipetee 50 L de cada Estndar, Control y Muestra en los respectivos pozos de la placa de

microtitulacin. 2. Pipetee 100 L de Conjugado de Enzima preparado fresco en cada pozo. 3. Incube 2 h a TA (18-25C) en un agitador orbital (400 - 600 rpm). 4. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solucin de incubacin. Lave la placa 4 x con 250 L de

Tampn de Lavado diluido. Remueva el exceso de solucin golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel.

5. Pipetee 100 L de TMB Solucin de Sustrato preparada fresca en cada pozo. 6. Incube 30 min a TA (18-25C) en un agitador orbital (400-600 rpm). 7. Detenga la reaccin de sustrato con la adicin de 100 L de TMB Solucin de Parada en cada

pozo. Agite brevemente. El color cambia de azul a amarillo. 8. Mida la densidad ptica con un fotmetro 405 nm (Longitud de onda de referencia: 600-650 nm)

antes de 15 min despus de pipeteada la Solucin de Parada.

12. CONTROL DE CALIDAD Los resultados del ensayo slo son vlidos si ste se ha llevado a cabo siguiendo las instrucciones. Adems, el usuario debe seguir estrictamente las regulaciones de GLP (Good Laboratory Practice) u otras regulaciones o leyes aplicables. Los valores de los controles del ensayo deben encontrarse dentro de los rangos de aceptacin indicados en las etiquetas de los viales. Si este criterio no se cumple, el ensayo no es vlido y debe repetirse. Cada laboratorio debe emplear muestras conocidas como controles adicionales. Se recomienda participar en los programas de aseguramiento de la calidad adecuados. En caso de detectarse alguna desviacin, se debe verificar lo siguiente: Fecha de vencimiento de los reactivos, condiciones de almacenamiento, pipetas, dispositivos, condiciones de incubacin y mtodo de lavado.


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0.0000.2500.5000.7501.0001.2501.5001.750

0.01 0.10 1.0 10.0(g/dL)

(OD)

13. CLCULO DE RESULTADOS El OD de los estndares (eje-y, lineal) se plotean contra su concentracin (eje-x, logartmico) ya sea en papel semi-logartmico o empleando un mtodo automtico. Se logra un buen ajuste con cubic spline, 4 Parameter Logistics or Logit-Log. Para el clculo de la curva estndar, use las mediciones obtenidas de los estndares (es aconsejable no emplear valores duplicados). La concentracin de las muestras se puede leer directamente de la curva estndar. Debido a la dilucin de la muestras, los valores obtenidos deben ser multiplicados por 50. Las muestras que presenten una seal mayor a la del estndar mayor tienen que ser diluidas segn se describe en INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIN DEL ENSAYO y analizadas nuevamente. En caso de muestras diludas los valores debern multiplicarse por el factor de dilucin correspondiente. En las muestras de saliva con valores marcadamente elevados deben revisarse la posibilidad de contaminacin sangunea. Conversin: Cortisol (ng/mL) x 2.76 = nmol/L Cortisol (g/dL) x 27.6 = nmol/L

Campo de medicn: Saliva: 0.015 4 g/dL Cortisol Suero: 0.75 200 g/dL Cortisol

Curva de Calibracin Tpica (Ejemplo. No usar para el clculo!)

Estndar Cortisol (g/dL)

ODMedio OD/ODmax (%)

A 0.00 1.699 100 B 0.03 1.401 82 C 0.06 1.278 75 D 0.20 0.905 53 E 0.60 0.524 31 F 1.50 0.304 18 G 4.00 0.155 9

Standards and Controls are calibrated by use of an isotope dilution-GCMS as reference method (Siekmann et al., J Clin Chem Clin Biochem 1982;20:883-892). 14. VALORES ESPERADOS Los resultados por si solos no deben ser la nica razn para un tratamiento teraputico, sino que deben correlacionarse con observaciones clnicas y ensayos de diagnstico. Los sujetos aparentemente sanos presentan los siguientes valores:

g/dL nmol/L

n maana tarde maana tarde

Saliva 340 0.20 1.41 0.04 0.41 5.52 28.92 1.10 11.32 Suero 125 5 25 2 12 138 - 690 55.2 331.2

Cortisol (Saliva) Intervalo (/; > 6 a; n = 110; 5% - 95% percentil) Intervalo de tiempo despus de

despertarse. (h) Mediana (nmol/L) Intervalo (nmol/L)

Mediana (g/dL)

Intervalo (g/dL)

0 1.5 18.9 5.1 - 40.2 0.685 0.185 1.457 1.5 3.0 11.8 3.6 - 28.4 0.428 0.130 1.029 3.0 6.0 6.7 2.1 - 15.7 0.243 0.076 0.569 6.0 9.0 5.5 1.8 - 12.1 0.199 0.065 0.438 9.0 15.0 3.3 0.9 - 9.2 0.120 0.033 0.333

(Westermann J, Demir A, Herbst V. Determination of Cortisol in Saliva and Serum by a Luminescence-Enhanced Enzyme Immunoassay. Clin Lab 2004;50:11-24) Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de valores normales.


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15. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Rangos de valores normales para nios no han sido todavia evaluados con este ensayo. La toma de la muestra tiene un efecto importante en los resultados. Vea TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO para mayores detalles. Para reactividad cruzada, vea PRUEBAS FUNCIONALES. Nota: Muestras que contengan timerosal, azida de sodio y sangre no deben ser usadas en el ensayo. Los siguientes componentes sanguneos no tienen un efecto significativo (+/- 20% del esperardo) en los resultados del ensayo en las concentraciones indicadas a continuacin.

Saliva

Conc. Cortisol (g/dL) sangre 0.25 % 0.16; 0.26; 1.09 NaN3 0.25 % 0.18; 0.21; 0.33

Suero Conc. Cortisol (g/dL)

Hemoglobina 1.0 mg/mL 20.4; 15.8 Bilirrubina 1.0 mg/mL 20.4; 15.8 Triglicridos 50 mg/mL 20.4; 15.8

16. PRUEBAS FUNCIONALES Sustancia Reactividad Cruzada (%) Prednisolona 30 11-desoxi-Cortisol 7.0 Corticosterona 1.4 Cortisona 4.2 Prednisona 2.5 17-OH-Progesterona 0.4 desoxi-Corticosterona 0.9

Especificidad Analtica (Reactividad Cruzada)

6-Metil-17-OH-Progesterona 0.04

Reactividad cruzada de otras substancias testeadas < 0.01 %

Sensibilidad Analtica (Lmite de Deteccin)

0.005 g/dL Seal media (Estndar-Cero) - 2DS Sensibilidad funcional 0.030 g/dL Medio Conc. < 20 % CV

Saliva (n = 20) Suero (n = 20) Precisin Conc. (g/dL)

DS (g/dL)

CV (%)

Conc. (g/dL)

DS (g/dL)

CV (%)

0.27 0.019 7.3 1.8 0.174 9.9 1.48 0.063 4.2 11.5 0.766 6.7 Intra-Ensayo 2.34 0.073 3.1 26.2 1.554 5.9 0.54 0.047 8.8 1.5 0.305 20 1.29 0.120 9.3 11.6 2.006 18 Inter-Ensayo 2.35 0.151 6.4 20.3 2.712 13


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Saliva Suero Dilucin Med.

(g/dL) Rec. (%)

Dilucin Med. (g/dL)

Rec. (%)

- 0.67 100 1:50 59.2 100 1:2 0.29 85 1:100 30.8 104 1:4 0.16 93 1:200 16.1 109 1:8 0.09 104 1:400 8.6 116 1:16 0.04 93 1:800 4.3 116 1:32 0.02 115 1:1600 1.7 91

- 0.33 100 1:50 59.3 100 1:2 0.17 104 1:100 29.4 99 1:4 0.08 99 1:200 16.4 111 1:8 0.04 98 1:400 7.5 101 1:16 0.02 107 1:800 4.3 117 1:32 0.01 117 1:50 1.7 94

- 1.65 100 1:100 70.9 100 1:2 0.83 100 1:200 35.7 101 1:4 0.41 102 1:400 18.5 104 1:8 0.21 113 1:800 10.2 115 1:16 0.10 107 1:1600 5.0 113

Linearidad

1:32 0.05 109 1:3200 2.2 99 Saliva Suero

Conc. (g/dL)

Agregado (g/dL)

Med. (g/dL)

Rec. (%)

Conc. (g/dL)

Agregado (g/dL)

Med. (g/dL)

Rec. (%)

- 0.13 100 - 10.9 100 0.02 0.16 106 1.5 11.8 95 0.06 0.17 87 3.1 13.8 99 0.20 0.28 86 10.2 19.4 92 0.60 0.61 83 30.6 38.4 92

Saliva 1 (0.13)

1.50 1.37 83

Suero 1 (10.9)

76.5 79.9 91 - 0.16 100 - 14.0 100

0.02 0.17 97 1.3 14.3 94 0.06 0.20 92 2.6 14.9 90 0.20 0.30 84 8.7 20.5 90 0.60 0.66 87 26.0 33.8 85 1.50 1.53 92 65.0 77.3 98

Saliva 2 (0.16)

Suero 2 (14.0)

173.4 191.2 102 - 0.15 100 - 19.5 100

0.02 0.16 91 1.5 21.4 102 0.06 0.22 102 3.1 23.9 106 0.20 0.33 94 10.2 28.6 96 0.60 0.74 98 30.6 49.9 100

Recuperacin

Saliva 3 (0.15)

1.50 1.54 88

Suero 3 (19.5)

76.5 93.0 97 Saliva IBL-ELISA = 1.09 x IBL-Luminiscencia IA + 0.01 r = 0.996; n = 82

IBL-ELISA = 1.06 x IBL-Luminiscencia IA - 1.44 r = 0.987; n = 60 Comparacin de Mtodos Suero IBL-ELISA = 0.84 x GCMS + 0.36 r = 0.918; n = 33


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17. REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO 1 Determination of Cortisol in Saliva and Serum by a Luminescence-Enhanced Emzyme Immunoassay

(IBL Jrgen Westermann, Anke Demir, Victor Herbst). Clin.Lab.50 11 - 24 (2004) 2 Kirschbaum C. et al. Impact of Gender. Menstrual Cycle Phase and Oral Contraceptives on the Activity

of the Hypothalamus-Pituitary-Adrenal Axis. Psychosomatic Medicine 61 154 162 (1999) 3 Raff H.. J. L. Raff and J. W. FindLing. Late-Night Salivary Cortisol as a Screening Test for Cushings

Syndrome. J Clin Endocrinol Metab 83 2681 2686 (1998) 4 Morineau G. et al. Radioimmunoassay of cortisone in serum. urine and saliva to assess the status of the

cortisol-cortisone shuttle. Clin Chem 43 1397 1407 (1997) 5 Tunn S. et al. Simultaneous measurement of cortisol in serum and saliva after different forms of cortisol

administration. Clin Chem 38 1491 1494 (1992) 6 Shimada M. et al. Determination of salivary cortisol by ELISA and its application to the assessment of

the circadian rhythm in children. Hom Res 44 213 217 (1995) 7 Thomopoulos P. et al. Long distance follow up of a patient with intermittent Cushings disease by use of

salivary cortisol measurements. In: Kirschbaum C. et al. (ed.) Assessment of hormones and drugs in saliva in biobehavioral research. 1st Edition. Hofgrebe & Huber. Seattle (1992) pp 89 92

8 Kahn J. P. et al. Applications of salivary cortisol determinations to psychiatric and stress research: stress responses in students during academic examinations. In: Kirschbaum C. et al. (ed.) Assessment of hormones and drugs in saliva in biobehavioral research. 1st Edition. Hofgrebe & Huber. Seattle (1992) pp 111 127

9 Laudet M. H. et al. Salivary Cortisol Measurement: A Practical Approach to Assess Pituitary-Adrenal Function. J Clin Endocrinol Metab 66 343 348 (1988)

10 Umeda T. et al. Use of Saliva for Monitoring Unbound Free Cortisol Levels in Serum. Clin Chem Acta 110 245 253 (1981)

11 Peters J. R. et al. Salivary Cortisol Assays for Assessing Pituitary-Adrenal Reserve. Clin Endocrinol 17 583 592 (1982)

12 Buchanan et al. Circadian regulation of cortisol after hippocampal damage in humans; BIOL PSYCHIATRY 2004; 56:651-656

13 Hellhammer et.al Effects of soy lecithin phosphatidic acid and phosphatidylserine complex (PAS) on the endocrine and psychological responses to mental stress; Stress 2004 Vol. 00 (0), pp. 1-8

14 Gaab et al. Psychological determinations of the cortisol stress response: the role of anticipatory cognitive appraisal; Psychoneuroendocrinology 2005 30, 599-610

15 Fries et al. Attenuation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis responsivity of the Trier social stress test by the benzodiazepine alprazolam; Psychoneuroendocrinology 2006 31, 1278-1288

16 Miller ete al. clinical depression and regulation of the inflammatory response during acute stress; Psychosomatic Medicine 2005 67:679-687

17 Kuhlmann et al. Effects of oral cortisol treatment in healthy young women on memory retrieval of negative and neutral words; Neurobiology of learning and memory 2005 83 158-162

18 Li et al. Life-time socio-economic position and cortisol patterns in mid-life; Psychoneuroendocrinology 2007 32, 824-833

19 Wolf et al. No morning cortisol response in patients with severe global amnesia; Psychoneuroendocrinology 2005 30, 101-105

20 Wessa et al. Altered cortisol awakening response in posttraumatic stres disorder; Psychoneuroendocrinology 2006 31, 209-215

21 Rohleder et al. Sex-specific adaption of endrocrine and inflammatory responses to repeated nauseogenic body rotation; Psychoneuroendocrinology 2006 31, 226-236

22 Rohleder et al. Stress on the dance floor: The cortisol stress response to social-evaluative threat in competitive ballroom dancers; PSPB Vol. 33 No. 1, January 2007 69-84

Symbols / Symbole / Symbles / Smbolos / Smbolos /

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LIABILITY: Complaints will be accepted in each mode written or vocal. Preferred is that the complaint is accompanied with the test performance and results. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. Regardless, in the event of any claim, the manufacturers liability is not to exceed the value of the test kit. Any damage caused to the kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer

Symbols Version 3.5 / 2011-07-01

REF Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N. Cat.: / N.Cat.: / -.: LOT Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.: / Lotto n.: / -:

Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser : / Usado por: / Usar at: / Da utilizzare entro: / :

No. of Tests: / Kitgre: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N. de Testes: / Quantit dei tests: / :

CONC Concentrate / Konzentrat / Concentr / Concentrar / Concentrado / Concentrato / LYO Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilis / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato /

IVD In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Mdical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Mdico para Diagnstico In Vitro. / Equipamento Mdico de Diagnstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / In-Vitro .

Evaluation kit. / Nur fr Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour valuation. / Juego de Reactivos para Evaluaci. / Kit de avaliao. / Kit di evaluazione. / .

Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instrues antes de usar. / Leggere le istruzioni prima delluso. / .

Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schtzen. / Garder labri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Mantngase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / .

Store at: / Lagern bei: / Stocker : / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / :

Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / :

Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaucin! / Cuidado! / Attenzione! / ! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED.

Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbles des composants du kit.

Smbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para smbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS.

Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. .

RE52611_IFU_es_Cortisol_ELISA_V2009_09Symbole Version 3.5_2008-10-01

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RE52611 IFU Es Cortisol ELISA V2009 09 Sym2