Embed Size (px)
DESCRIPTION
R-Biopharm AG ვიტამინების ანალიზი. ზოგადი მიმოხილვა ვიტამინები წარმოადგენს ორგანულ ნაერთებს , რომლებიც აუცილებელნი არიან ზოგიერთი ბიოქიმიური ფუნქციებისთვის. მათ ადამიანის ორგანიზმი ასინთეზირებს ძალიან მცირე რაოდენობით და ამიტომაც აუცილებლად მიღებულ უნდა იქნას საკვებთან ერთად. - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
1
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
R-Biopharm AG ვიტამინების ანალიზი
2011
2
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
ზოგადი მიმოხილვა• , ვიტამინები წარმოადგენს ორგანულ ნაერთებს
რომლებიც აუცილებელნი არიან ზოგიერთი ბიოქიმიური. ფუნქციებისთვის მათ ადამიანის ორგანიზმი ასინთეზირებს
ძალიან მცირე რაოდენობით და ამიტომაც აუცილებლად .მიღებულ უნდა იქნას საკვებთან ერთად
• :ნორმირებული ნომენკლატურა არ არსებობს ვიტამინი B1 - თიამინი ვიტამინი B2 - რიბოფლავინი ვიტამინი B3 - (ნიაცინი P) ვიტამინი B5 - პანტოტეინის მჟავა ვიტამინი B6 - პირიდოქსინი ვიტამინი B7 - (ბიოტინი H) ვიტამინი B9 - ფოლიუმ მჟავა ვიტამინი B12 - ციანოკობალამინი
2011
3
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
• ( : ბევრი ვიტამინი არასტაბილურია მგრძნობიარეა, )სინათლის სითბოსა და დაჟანგვის მიმართ
• ვიტამინების კონცენტრაცია მცირეა არათანაბარი განაწილება კონცენტრაციების სხვასხვა დიაპაზონი (g/100g, mg/100g)• არასტაბილურია შენახვისას და იშლება• ცხიმშიხსნადი და წყალშიხსნადი ვიტამინები• კომპლექსური მატრიცა მოითხოვს სინჯის
მომზადების განსხვავებულ პროცედურებს
2011
სირთულეები ვიტამინების ანალიზისას
4
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
:ვიტამინების სტაბილურობა და ლაბილურობა
2011
ვიტამინი
pH7 pH>7 pH<7 O2 სინათლე
სითბო
ბიოტინი S S S S S SB12 S S S S L L
ფოლიუმმჟავა
L S L L L S
ნიაცინი S S S S S S. პანტოტ
მჟავაS L L S S L
პირიდოქსინი
S S S S L S
რიბოფლავინი
S L S S L S
თიამინი L L S L S L
5
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
ეტალონური მეთოდები
2011
ტრადიციული მიკრობიოლოგია ითვლება ეტალონურ , , მეთოდად ფოლიუმმჟავის ბიოტინის ვიტამინ B12- , ის .ნიაცინისა და პანტოტეინის მჟავისათვის
AOAC- 1960 - ის მეთოდები გამოჩნდა წ ს და მოქმედებს. დღემდე AOAC No.960.46 - მოიცავს შემდეგი
: , ვიტამინების ანალიზს ციანოკობალამინი, , , ფოლიუმმჟავა ნიაცინი პანტოტეინის მჟავა.რიბოფლავინი
ევროპული სტანდარტი EN 14131:2003 - კვების - პროდუქტები ფოლატების მიკრობიოლოგიური
ანალიზი
EN 14166:2002: - კვების პროდუქტები ვიტამინ B6- ის მიკრობიოლოგიური ანალიზი
6
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
ტრადიციული მიკრობიოლოგიური მეთოდი შრომატევადია
2011
• ბულიონური კულტურის ინოკულაცია• ზრდა და შტამების შენახვა• ა რა ხარ დარწმუნებული მიკროორგანიზმების ზრდაში• შტამებისა და არეების კონტროლი• სპონტანური მუტაციების პრობლემები• პრობლემები დაკავშირებული სუფთა კულტურასთან• ც ალკეულ სინჯარებში ანალიზი და გაზომვა ( )მიკროტიტრული პლანშეტის გარეშე
- დღეს დღეისობით ბევრი ლაბორატორია ვერ აძლევს თავს უფლებას გამოიყენოს ხანგრძლივი და
შრომატევადი მეთოდიკები
7
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
VitaFast- ის მიკრობიოლოგიური ტესტები• VitaFast Folium Acid• VitaFast Vitamin B12• VitaFast Vitamin B7• VitaFast Vitamin B3• VitaFast Pantothenic acid• VitaFast Vitamin B1• VitaFast Vitamin B2• VitaFast Vitamin B6• VitaFast Inozitol
• VitaFast Methionin• VitaFast L-Lysin• VitaFast L-Cystin
• VitaFast Spiked Standards
• Folium Acid• Vitamin B12• Biotin• Pantothenic acid
• Chicken Pancreatin (enzyme)
2011
8
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
9
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
Easi Extract იმუნოაფინური სვეტები HPLC-თვის
• EasiExtract Vitamin B12• Easi Extract Vitamin B12 (LGE)• EasiExtract Folic Acid• EasiExtract Biotin
RIDASCREEN IFA მიკროტიტრული პლანშეტი
• RIDASCREEN Fast Folic Acid• RIDASCREEN Fast Biotin• RIDASCREEN Fast Vitamin B12
Roche ფერმენტული ტესტები
• L-Ascorbic Acid
2011
10
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
ფოლიუმ მჟავას განსაზღვრის ანალიტიკური მეთოდები
RIDASCREEN IFA VitaFast Easi-Extract/HPLC
პრინციპი +ანიგენი ანტისხეული . მიკრობიოლმეთოდი
- . ფიზიკო ქიმ დაყოფა
ნივთიერაბა დამატებული .ფოლიუმ მჟ
ბუნებრივი და დამატებული
.ფოლიუმ მჟ
დამატებული .ფოლიუმ მჟ
. ტექნ მოწყობილობა Reader Reader HPLC აპარატი
დანახარჯები დაბალი დაბალი მაღალი
ნიმუშების მომზადება /ექსტრაქციაგანზავება
/ექსტრაქციაგანზავება
, ექსტრაქციაEE-IAC/განზავება
დროის დანახარჯები 30წთ 48სთ 5სთ
11
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
VITAFast მიკრობიოლოგიური მეთოდი
:შემცველობა• (96მიკროტიტრული პლანშეტი t) დამატებითი ჩარჩოთი• 3 დასაფარებელი წებოვანი ქაღალდი• . , ბიდისტ და სტერილური წყალი საანალიზო არე და
ვიტამინის სტანდარტული ნიმუში
2011
12
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
VitaFast პრინციპი
• , ანალიზი ეფუძნება იმ მიკროორგანიზმის ზრდას რომელსაც ზრდისთვის საკვებ არეში სჭირდება სპეციფიური
.ანტიბიოტიკი
• მიკროორგანიზმებით ამოფენილია მიკროტიტრული , პლანშეტის უჯრედები ინკუბაცია და ზრდა სწორედ ამ .უჯრედებში წამოებს
• ვიტამინების არსებობისას თითოეულ უჯრედში იზრდება , სიმკვრივე რაც იზომება სპექტროფოტომეტრულად
• ვიტამინის კონცენტრაცია ისაზღვრება სტანდარტული.გრაფიკიდან
13
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
ნ იმუშის ან ექსტრაქტის სტერილური ფილტრაცია , :ყოველთვის აუცილებელია მათ რიცხვშია
• ( , ხილის წვენები იმ ნიმუშების გამოკლებით რომლთა ექსტრაქცია 95წარმოებდა 0C- 30 - )ზე წთ ის განმავლობაში
• , , სინჯები რომლებიც შეიცავენ სხვადასხვა სანელებლებს ასევე თაფლი .და ჩაი
• , , ( ვიტამინური ნარევები მინარევები ტაბლეტები იმ ნიმუშების, 95გამოკლებით რომლთა ექსტრაქცია წარმოებდა 0C- 30 - ზე წთ ის
)განმავლობაში• ძლიერად შეფერილი სინჯები ვიტამინების მცირე კონცენტრაციით( )ფილტრაცია მოაცილებს შეფერვას• თუ ფილტრაცია დიდი ზომის ნაწილაკების ან სიმღვრიეს გამო
, შეუძლებელია მაშინ მიმართეთ ცენტრიფუგირებას
ანალიტიკური არის სტერილური ფილტრაცია ყოველთვის!აუცილებელია
14
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
შ ესაძლებელია საჭირო სტერილური ჭურჭლის შეკვეთა R-Biopharm-ში
2011
15
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
სინჯის მომზადება ვიტამინების დამატება
40დაამატეთ ml 1წყალი g , სინჯზე ექსტრაგირება
95აწარმოეთ 0C- 30 - ზე წთ ის, განმავლობაში სწარფად
30გააცივეთ 0C-ზე
ს ტერილური ფილტრაცია
( სტერილური ფილტრაცია არ არის საჭირო რომლთა
ექსტრაქცია წარმოებდა950C- 30 - ზე წთ ის
)განმავლობაში
2011
16
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
ანალიტიკური არის მომზადება 10დაამატეთ ml სტერილური წყალი ანალიტიკური
არის შემცველ ჭურჭელში
5 - შეათბეთ წთ ის განმავლობაში 950C-ზე, სწარფად 30გააციეთ 0C-ზე და ჩაატარეთ სტერილური
!ფილტრაცია
2011
17
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
სტანდარტების მომზადება
დაამატეთ სტერილური წყალი ( . სტანდარტის ბოთლში იხ ანალიზის)სერტიფიკატი
მოამზადეთ სტანდარტისგანზავებები
18
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
ტესტირების პროცედურა
ჯერ დაიტანეთ 150l ანალიტიკური არე უჯრედებში
ტესტირების პროცედურა
შემდეგ დაამატეთ 150l სტანდარტი ან სინჯი შესაბამის უჯრედებში
19
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
დააფარეთ პლანშეტს თავზე
44-48 ინკუბაცია მიმდინარეობს სთ( 24 ) 37ან სთ 0С- (30ზე 0С) სიბნელეში
20
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
შედეგების ინტერპრეტაცია ინკუბაციის შემდეგ
.გადმოაყირავეთ პლანშეტი შეანჯღრიეთ ის და შემდეგ
. დაუბრუნეთ საწყის პოზიციაში შემდეგ უჯრედებს მოაცილეთ
.წებოვანი საფარი
21
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
:დროითი დანახარჯები რეკომენდირებულია მუშაობა სტერილურ
.ზედაპირზე 10მომზადება წთ
60ტესტირება წთ
44-48 (24 ინკუბაცია სთ სთ პანტოტეინის.- )მჟ თვის
2 ( 610-630შეფასება წთ იზომება nm-) ზე
( ასევე შესაძლებელიაRIDASOFT Win)
22
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
VitaFast- ის უპირატესობანი
• მიკროორგანიზმების წარმოებისა და შენახვისათვის არ მოითხოვს რაიმე განსაკუთრებულ ფულად და დროით
( )დანახარჯებს არ ჭირდება სპეციალისტები• მიკროორგანიზმები ფიქსირებულია უჯრედებში და
განეკუთვნებიან კონკრეტულ ვიტამინებს• ყველა რეაქტივი მიკრობიოლოგიური ტესტირებისათვისნორმირებულია• იძლევა საშუალებას რომ ლაბორატორიამ
მიკრობიოლოგიური პროცედურების გარეშე აწარმოოს .ვიტამინების ტესტირება
• მოსახერხებელი და მარტივი მეთოდია• ეფუძნება AOAC, EN და DIN- ის ეტალონური მეთოდებისმოთხოვნებს• იძლევა ტრადიციულ მიკრობიოლოგიურ მეთოდებთან
მსაგავს მაჩვენებლებს
23
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
RIDASCREEN ვიტამინ - (ტესტი IFA)
24
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
RIDASCREEN ვიტამინ - (ტესტი IFA)
აღნიშნული იმუნოფერმენტული ტესტები წამოადგენენ , შესანიშნავ საშუალებას პროცესის საკონტროლოდ რადგან
3 - . პასუხებს ვღებულობთ სთ ში ცალკეული ტესტით .ისაზღვრება მხოლოდ კონკრეტულ ვიტამინი
აღნიშნული ტესტები არ არის განკუთვნილი კომპლექსური . -მატრიცების ტესტირებისათვის ეფუძნება ანტიგენ
. ანტისხეულის კომპლექსის წარნმოქმნის პრინციპს საბოლოო მაჩვენებლების მისაღებად საჭიროებს READER-
.ის აპარატს
RIDASCREEN FAST Folic AcidRIDASCREEN BiotinRIDASCREEN FAST Vitamin B12
25
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
კ ონკურენტული IFA მეთოდი :ბოლო საფეხური
რეაქციის შემწყვეტი ხსნარის.დამატება
რეაქცია წყდება და წარმოქმნილი ფერი
.იზომება ფოტომეტრით
26
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
RIDASCREEN Fast Folic Acid
2011
27
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
RIDASCREEN Fast Folic Acid
48 უჯრედიანი IFA ტესტი განკუთვნილია დამატებული ფოლიუმის , მჟავის ტესტირებისათვის რძის პროდუქტებში მარცვლეულსა და
.წვენებში
:დროითი დანახარჯები (10სინჯის მომზადება t) 30-60წთ
( ) 25ტესტირების პროცედურა ინკუბაცია წთ
:მგრძნობელობის ზღვარი 10რძე ppb
, 100ფქვილი მარცვლეული ppb 100წვენები ppb
:სპეციფიურობა 100%ფოლიუმმჟავა
- . 3%დიჰიდრო ფოლიუმმჟ- . 1.5%ტეტრაჰიდრო ფოლიუმმჟ
5- - . 0.1%მეთილტეტრაჰიდრო ფოლიუმმჟ
28
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
Easi Extract იმუნოაფინური სვეტები
29
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
ვიტამინ იმუნოაფინური სვეტები (IAC) - პრინციპი
სინჯის დამატება
ჩარეცხვა
ვიტამინისგამორეცხვა
შერჩევითი შეკავშირება შეუკავშირებელი ნაერთის
მოცილება
გამორეცხვა და (ანალიზი HPLC/UV ან
HPLC/fluor.)ნაერთი
. არასპეც ნაერთი
30
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
Easi Extract Vitamin B12 – HPLC Chromatogram
2011
31
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
• 5-10აწონეთ g 50სინჯი და დაამატეთ ml ნატრიუმის აცეტატის ბუფერი pH4
• 2დაამატეთ g , პეპსინი 0.5g - 2ალფა ამილაზა და ml 1%- იანი KCN- ის ხსნარი
• მოათავსეთ სინჯი წყლის აბაზანაში ( ნჯღრევის პირობებში) 370C- 30 - , ზე წთ ით შემდეგ 100გაზარდეთ ტემპერატურა 0C- .მდე და ბოლოს გააგრილეთ ხსნარი ოთახის ტემპერატურამდე
• 100მოათავსეთ სინჯი ml- იან კოლბაში და შეავსეთ ნატრიუმის აცეტატის ბუფერით.ნიშნულამდე
• გაფილტრეთ Whatman S&S 5971/2 ფილტრში და საჭიროების შემთხვევაში დააცენტრიფუგირეთ კიდეც
• 5-30დაიტანეთ ml სინჯი Easi Extract Vitamin B12- ის სვეტზე
• , , 3გააშრეთ სვეტი ადაპტორი მინის ჭურჭელი და ელუანტი ml მეთანოლში
• 60დააკონცენტრირეთ სინჯი მშრალ მდგომარეობამდე 0C- ზე და აღადგინეთ მოძრავი ფაზის0.3-1.0ml (0.025% TFA )წყალში
Easi Extract Vitamin B12 მეთოდიკისთვის სინჯთა მომზადების სქემა
32
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
დამატებული Vitamin B12- ის განსაზღვრა იმუნოაფინურ სვეტებზე
33
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
1. სინჯის ჰომოგენიზაცია
2. აწონეთ 25-2500g ოდენობის სინჯი
34
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
1. 100დაამატეთ ml . ბიდისტ წყალი
2. 15 -დისპერგირება აწარმოეთ ულტრაბგერით წთ ის განმავლობაში
35
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
1. . განაზავეთ სინჯი ბიდისტ წყლით
2. შეამოწმეთ pH
36
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
1. 5-20ml სინჯი გაატარეთ სვეტებზე
2. ჩარეცხეთ სვეტი
3. Vitamin B12 3გამოირეცხება ml მეთანოლით
37
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
1. ე ლუანტი კარგად გააშრეთ ბოლომდე
2. სინჯი აღდგება მოძრავ ფაზაში და გადაიტანება სინჯარაში შემდგომიტესტირებისთვის
3. ს ინჯი თავსდება ავტომატიზირებულ პიპეტში HPLC- ში ინექციისათვის და 361გაზომვა წარმოებს nm-ზე
38
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
FAPAS- ის პროცედურებში Vita Fast- ის სვეტებისმოანაწილეობა
FAPAS (Food Analysis Performance Assessment Scheme) - წარმოადგენს ყველაზე ფართო საერთაშორისო
ლაბორატორიათაშორის კვლევებს კვებით დიაგნოსტიკაში
• FAPAS- ის მასალაბი ტესტირებულია ერთგვაროვნებაზე• ვიტამინის კონცენტრაცია სტატისტიკურად ფასდება კვლევის შემდეგ• სინჯების მომზადებისა და მეთოდიკების შერჩევა წარმოებს
უშუალოდ ლაბორატორიების მიერ
R-biopharm მონაწილეობს FAPAS- ის მრავალ ციკლში პროდუქტების პროფესიული ტესტირების მიზნით
. დეტალური ინფორმაციისთვის იხ http://www.fapas.com
39
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
2011
დასკვნა
R-Biopharm გთავაზობთ კვებით პროდუქტებსა და ცხოველთა საკვებში წყალშიხსნადი ვიტამინების განსაზღვრის
, .ანალიტიკური მეთოდების კარგ თანამედროვე არჩევანს
, ფირმა პასუხისმგებელია ნებისმიერი პროდუქტის ხარისხზე .რაც იძლევა სანდო მაჩვენებლების მიღების საშუალებას
- მაღალი ხარისხი და ტესტირების პროცედურის სიმარტივე ეს არის შემოთავაზებული პროდუქციის საკვანძო
.თავისებურებანი
R-Biopharm- ის პროდუქციის გამოყენება ეკონომიურს ხდის .თქვენს დანახარჯებს
40
www.r-biopharm.com
RIDA® AllergyScreen
May 2005
გმადლობთ!ყურადღებისთვის
2011
