PROFESORES PARTICIPANTES.

Incluir exclusivamente a los profesores del registrados en el protocolo del proyecto y que efectivamente participaron en el desarrollo del mismo, durante el periodo que se reporta.

NOMBRE DEL PRINCIPALES ACTIVIDADES PERIODO PARTICIPANTE REALIZADAS de a

DRA. ADELA ASTUDILLO VÁZQUEZ DIRECCIÓN DEL PROYECTO Y RESPONSABLE DE LA EXPLORACIÓN ETNOBOTÁNICA DE Vitex mollis Kunth

01 febrero 2005

28 febrero 2006

c M en C HORTENCIA NOEMÍ DÁVALOS VALLE

RESPONSABLE DE LA EXPERIMENTACIÓN FARMACOLÓGICA DE Vitex mollis Kunth

01 febrero 2005

28 febrero 2006

C M en C DANIEL VILLEGAS ESTRADA RESPONSABLE DE LOS ASPECTOS ESTADÍSTICOS

01 febrero 2005

28 febrero 2006

I. DESARROLLO TÉCNICO DE LA INVESTIGACIÓN.

En anexo al presente se debe proporcionar la información que se indica a continuación:

II. EJERCICIO DE PRESUPUESTO TOTAL.

En anexo al presente, proporcione la información que se indica a continuación:

1. Resumen.- Versión abreviada y precisa del proyecto que se reporta como concluido. 2. Introducción.- Debe establecer claramente el propósito del trabajo, incluyendo las hipótesis propuestas, los

problemas abordados, un bosquejo del trabajo y su importancia en un contexto mas amplio de investigación. Debe ser explícito y comprensible para quienes no son especialistas en el tema.

3. Métodos y materiales.- Hacer una descripción del diseño de experimentos o del procedimiento teórico-

metodológico utilizados en la investigación, estableciendo claramente las premisas, supuestos del diseño, justificar la selección del método. Los métodos deben identificarse y describirse con suficiente detalle para que sea posible: a) obtener los mismos resultados por otro investigador experimentado, b) para evaluar la confiabilidad y validez de los métodos usados y de los resultados reportados. Describirlos en un orden lógico donde se pueda identificar fácilmente como se relacionan con el diseño experimental en su caso. Describir y justificar en forma completa los materiales utilizados en la investigación, incluyendo la preparación que se les haya dado, así como su origen.

4. Resultados.- Redactar en forma detallada meta por meta hasta llegar a sus conclusiones. Los resultados de los

proyectos se deberán presentar en un orden apropiado para proporcionar evidencia a favor o en contra de la hipótesis, o para dar respuesta al problema que se estableció en el objetivo del proyecto.

5. Impacto.- Indicar de manera clara y precisa el impacto del proyecto en el Sector Productivo de Bienes y Servicios,

su beneficio social o educativo

VII. SUBPRODUCTOS OBTENIDOS.

Describa los subproductos derivados del proyecto de investigación, anexando en cada caso la documentación comprobatoria correspondiente, como: fotografías; copias de oficios y de constancias de participación; copias de artículos y conferencias; copias de carátulas e índices de libros, manuales publicados, etc. La descripción debe incluir nombre o título, autores, evento, lugar y fecha. En la columna de la izquierda se presenta una lista de claves correspondientes a cada tipo de subproducto.

2

CLAVE DEL SUBPRODUCTO DESCRIPCIÓN ANEXO No.

2.1.2 ESTUDIANTES PIFI N. S.: Bustamante Franco Sergio (julio-diciembre 2005) Aquino Vega Mayda Yanik (julio-diciembre 2005)

2.3 SERVICIO SOCIAL DE: Cruz Cruz Copytzy Mancilla Ayala Adriana Pérez Santiago Marco Antonio Corona Mejía Marlene Nateras Molina Ana Claudia Romero Salazar Marco Antonio Muñoz Servín Ana Laura Colchero Amateco Fanny Azucena

2.4.1 TESIS PROFESIONAL PARA QFI DE MARÍA DE JESÚS RAMÍREZ DIMAS

3.2.1 * Ponencia en las Terceras Jornadas de Biomedicina y Biotecnología Molecular. ENCB-IPN. Abril 2005. * Ponencia en la X Reunión Nacional de Estudiantes de Farmacia y XIV Congreso de Educación Química Farmacéutica Biológica. Guanajuato, Gto. Septiembre de 2005.

3.2.2 * Cuatro ponencias en el XIV Congreso Italo-Latinoamericano de Etnomedicina. México, D. F., septiembre de 2005. * Dos ponencias en el III Internacional XXX Congreso Nacional de Ciencias Farmacéuticas. Veracruz, Ver., (originalmente Cancún, Quintana Roo), noviembre-diciembre 2005. * Dos ponencias en el 49th Annual Meeting of the Western Pharmacology Society and XXIX Congreso Nacional de Farmacología. Vallarta, Jal. Enero-Febrero 2006.

3.5 Artículo científico en elaboración

3.7 Seminario: AVANCES EN EL ESTUDIO DE Vitex mollis KUNTH. En el Lab. FQ Aplicada (Plantas Medicinales), ENCB-IPN. 16 de diciembre de 2005

4. * Tercer lugar con el trabajo: Sondeo etnobotánico en Milpa Alta D. F., y prueba sobre actividad antidiarreica en ratón, de Chenopodium murale HBK. X Reunión Nacional de Estudiantes de Farmacia y XIV Congreso de Educación Química Farmacéutica Biológica. Guanajuato, Gto., septiembre de 2005. * VER INFORME TÉCNICO

1. SUBPRODUCTOS

TÉCNICOS: 1.1 PROTOTIPOS 1.2 PATENTES 1.3 CERTIFICADOS DE

INVENCIÓN 1.4 HARDWARE 1.5 SOFTWARE 2.FORMACIÓN DE

RECURSOS HUMANOS:

2.1 EST. PIFI

2.1.1 N.M.S. 2.1.2 N.S. 2.1.3 N.P.

2.2 PRACTICAS

PROFESIONALES 2.3 SERVICIO SOCIAL 2.4 TESIS

2.4.1 N.S. 2.4.2 N.P.

3. DIFUSIÓN DE LA

INVESTIGACIÓN 3.1 CURSOS

3.1.1 NACIONAL 3.1.2INTERNACIONAL

3.2 CONFERENCIAS

3.2.1 NACIONAL 3.2.2

INTERNACIONAL 3.3 ARTÍCULOS DE

DIVULGACIÓN 3.4 PROGRAMAS DE

TV-RADIO. 3.5 ARTÍCULOS

CIENTÍFICOS PUBLICADOS

3.5.1 NACIONAL 3.5.2INTERNACIONAL

3.6 LIBROS 3.7 SEMINARIOS 4. OTROS (Precisar)

3

IV. DESARROLLO TÉCNICO DE LA INVESTIGACIÓN

1. Resumen

Argueta (1994), indica que Vitex mollis Kunth, en Nayarit es empleada como antidiarreico, entre

otros usos, sin embargo, no se encontraron estudios que corroboraran esa información

etnobotánica.

Los objetivos fueron: 1) Realizar una breve exploración etnobotánica de Vitex mollis Kunth, en

Teloloapan y Montegrande, localidades del Estado de Guerrero; y 2) Determinar el efecto de los

extractos acuoso y etanólico de Vitex mollis Kunth, sobre la motilidad gastrointestinal, en ratón.

La metodología para la exploración etnobotánica incluyó dos etapas: a) La consulta a fuentes

etnobotánicas históricas y actuales y b) Trabajo de campo en Teloloapan y Montegrande, en el

Estado de Guerrero. La experimentación farmacológica se inició con la colecta de la planta;

después se obtuvieron los extractos acuoso (por el método soxhlet) y etanólico (por maceración), y

se realizaron las pruebas del efecto de ambos extractos sobre la motilidad gastrointestinal, en

ratón, empleando el modelo de carbón activado como marcador.

Los resultados etnobotánicos mostraron que Vitex mollis se conoce en la región de estudio como

“Nanche de perro” preferentemente, también como ”Coyotomate” y “Atato”; se emplea en té, para

contrarrestar padecimientos gastrointestinales (diarrea, dolor estomacal) y respiratorios (tos y

resfriado), principalmente.

Los resultados farmacológicos indicaron que los extractos acuoso y etanólico de Vitex mollis

retardan el avance del contenido gastrointestinal en ratón.

Se concluye que Vitex mollis Kunth es una planta medicinal de uso vigente en la región de estudio,

y los resultados farmacológicos contribuyen a explicar su empleo como antidiarreico.

2. Introducción

Vitex mollis pertenece a la familia de las verbenáceas y recibe los nombres comunes de “Nanche

de perro”, “Coyotomate”, “Huilote” y otros (Argueta, 1994; Soto y Souza, 1995; Martínez, 1996). Es

un árbol de hasta 10 m de altura, de tronco derecho con ramas ascendentes, con hojas de

4

aproximadamente 12 cm de largo, compuestas por tres hojuelas oblongadas, largamente

pecioladas, largo pedúnculo y vellosas; corola blanco rosada, fruto globoso de 1 cm de diámetro,

color negro azuloso, produce una mancha indeleble, las flores crecen en racimos y son de color

azul-blanco o lila-blanco con un mechón (Pennington y Sarukhan, 1998). Esta especie es de

origen desconocido y habita en clima cálido y semicálido, crece a las orillas de los arroyos y

riachuelos asociados con bosques tropicales, caducifolios, terreno perturbado y bosque de encino.

En México se encuentra localizado en Baja California, Chihuahua, Morelos, Oaxaca, Sinaloa,

Colima, Durango, Jalisco, Guerrero, Michoacán y Sonora (Argueta, 1994).

Aguilar et al. (1994) mencionan a Vitex mollis para “limpiar el estómago” y en baños postparto.

También popularmente se recomienda como antidisentérico, antiinflamatorio, catártico,

antidiarreico, expectorante, regulador del dolor en la menstruación y otros usos (Argueta, 1994).

No se detectó ninguna publicación ni trabajo farmacológico en desarrollo que compruebe que esta

especie vegetal es útil como antidiarreico.

En el medio rural mexicano el empleo de plantas medicinales es generalizado ante la precaria

cobertura de los servicios sociales de salud y la imposibilidad de acudir a la medicina privada. Las

plantas medicinales son una alternativa para conservar o restablecer la salud, por ello es de gran

importancia la recuperación de información sobre el empleo de estos recursos naturales, con el fin

de comprobar su efectividad como agentes terapéuticos. En el Estado de Guerrero, en particular

en las poblaciones de Teloloapan (Municipio de Teloloapan) y Montegrande (Municipio de Coyuca

de Catalán), en información preliminar algunos habitantes señalaron que la empleaban en

transtornos diarreicos; sin embargo no se detectaron estudios etnobotánicos en esos lugares; y en

general, tampoco se encontraron investigaciones farmacológicas que demostraran ese efecto.

La importancia de esta exploración etnobotánica radica en que permitió detectar los usos, forma

de preparación, dosificación, forma de administración, a partir de la población que emplea

directamente la especie vegetal en estudio. Esto cobra relevancia en tanto, la forma de

5

transmisión de estos conocimientos ha sido la oral de generación en generación y en nuestra

época ese conocimiento está diluyéndose y perdiéndose.

Concretando, dos aspectos esenciales, de inicio en el estudio de una especie vegetal son a)

detectar sus referentes etnobotánicos vigentes, determinar si es una especie vegetal en uso actual

y b) determinar sus posibles efectos farmacológicos. En este primer proyecto sobre Vitex mollis

Kunth se realizó una exploración etnobotánica y se determinó el efecto de sus extractos acuoso y

etanólico sobre la motilidad gastrointestinal de ratón.

Las hipótesis de trabajo fueron:

Acudiendo al grupo de la población donde Vitex mollis sea empleada, será posible

establecer los usos, dosificación, forma de administración, etc., de esta especie vegetal.

Si Vitex mollis es utilizada para transtornos diarreicos, entonces es posible que sus

extractos totales disminuyan el avance del contenido gastrointestinal en ratón.

El trabajo de campo de la exploración etnobotánica se realizó a través de una encuesta a una

muestra poblacional de acuerdo a la metodología de Harris (1979), Hernández-Xolocotzi (1979) y

Heinrich (2000), en las poblaciones de Teloloapan y Montegrande del Estado de Guerrero. Se

solicitó información sobre el empleo actual, parte(s) usada(s) de la especie vegetal, formas de uso,

vías de administración, etc.

La metodología en el laboratorio inició con la colecta de la planta, secado y preparación de

muestras para extracción, obtención de extractos acuoso (soxhlet) y etanólico (maceración) en

cantidades suficientes para la experimentación farmacológica de ambos extractos, en ratón; y a

través del modelo que emplea como marcador carbón activado en ratón (Tanira et al, 1996), se

determinó el grado de avance del contenido gastrointestinal; se empleó como fármaco control

positivo loperamida a la dosis de 5mg/kg (Williamson et al, 1996).

Los resultados generados permiten fundamentar el empleo popular de la especie vegetal en

estudio y contribuyen a ubicarla como fuente potencial de principios activos y/o de moléculas

6

tipo a sintetizar para su posterior estudio de inhibición sobre sistemas enzimáticos del tracto

gastrointestinal.

Bibliografía citada: Aguilar A, Camacho J, Chino S, Jácquez P, López M. 1994. Herbario medicinal del Instituto Mexicano del Seguro

Social. Instituto Mexicano del Seguro Social. México.

Argueta VA (Coordinador). 1994. Atlas de las plantas de la medicina tradicional mexicana. Instituto Nacional

Indigenista. México. México. p 178.

Harris M. 1979. El desarrollo de la teoría antropológica. Siglo XXI. México.

Heinrich M. 2000. Ethnobotany and its role in drug development, Phytotherapy Research 14:479-488.

Hernández-Xolocotzi E. 1979. El concepto de etnobotánica. En: Barrera A. (editor). La etnobotánica: tres puntos

de vista y una perspectiva. Instituto de Investigaciones sobre Recursos Bióticos A. C. Xalapa, Ver. México.

Martínez M. 1996. Las plantas medicinales de México. 7ª. Reimpresión. Ed. Botas. México.

Pennington TD, Sarukhan J. 1998. Árboles tropicales de México. 2ª. Ed. UNAM-FES. México.

Soto JC, Souza M. 1995. Plantas medicinales de la Cuenca del Río Balsas. Cuaderno 25. Instituto de Biología.

UNAM. México.

Tanira BH, Bashir K, Wasfi IA, Chandranath I. 1996. Evaluation of relaxant activity of some United Arab Emirates

plants on intestinal smooth muscle. J. Pharmacology 48:545-550.

Williamson E, Okpako D, Evans F. 1996. Selection, preparation and pharmacological evaluation of plant material.

John Wiley & Sons Ltd. Buffins Lanc. Chichester. England. Pp15-25, 26-47.

3. Métodos y materiales

Exploración etnobotánica

Se revisaron fuentes históricas como facsímiles de códices, tratados de medicina tradicional y

libros de herbolaria medicinal. También consulta de fuentes etnobotánicas actuales como revistas

especializadas y bancos de información computarizada.

Identificación taxonómica de Vitex mollis Kunth. La identificación taxonómica de la especie vegetal estudiada fue realizada por el cand. a Dr.

Alfredo Patiño Siciliano, del Departamento de Botánica, de la Escuela Nacional de Ciencias

Biológicas del IPN. Trabajo de campo Una vez identificada taxonómicamente Vitex mollis Kunth, se aplicaron cuestionarios en las

poblaciones de Teloloapan y Montegrande, en el Estado de Guerrero., tomando en consideración

los planteamientos de Harris (1979).

7

Se solicitó información con respecto al lugar donde crece el árbol, qué parte es utilizada, su forma

de preparación y de administración.

Experimentación farmacológica La colecta de material vegetal, se realizó en Teloloapan, Gro. Una vez seco, se trituró en un

molino manual y se empaquetó en cartuchos de papel filtro.

Obtención del extracto acuoso Se procedió a realizar la extracción en equipo soxhlet, empleando agua destilada como líquido

extractor. Una vez obtenido el extracto, se eliminó el disolvente bajo presión reducida, utilizando

un rotaevaporador. Finalmente, el extracto se mantuvo en aireación continua hasta sequedad. De

esta manera se procedió hasta obtener la cantidad necesaria de extracto para la realización de las

pruebas sobre motilidad gastrointestinal.

Obtención de extracto etanólico Este extracto se obtuvo por el método de maceración, que consiste en sumergir el material

vegetal, seco y molido, en etanol a temperatura ambiente; se espera a que se establezca el

equilibrio, agitando de vez en cuando. Posteriormente se retira el etanol con las sustancias

extraídas, y se adiciona a la muestra disolvente nuevo para la siguiente extracción, nuevamente se

espera hasta establecimiento del equilibrio. Este proceso se repitió hasta observar que el líquido

sobrenadante fuera casi incoloro. Se eliminó el disolvente empleando un evaporador rotatorio y

finalmente bajo corriente de aireación continua. Se reunió la cantidad suficiente para la

experimentación farmacológica.

Experimentación sobre motilidad gastrointestinal, con el extracto acuoso Se emplearon ratones albinos, hembras (18-20g de peso), se mantuvieron en ayuno durante 24

horas proporcionándoles solamente agua.

Posteriormente, se formaron cinco grupos con 10 ratones cada uno y se les administró por vía

oral, el siguiente tratamiento.

Grupo testigo negativo: Solución salina isotónica

Grupo testigo positivo: loperamida (5 mg/kg pc)

Grupos de prueba: extracto acuoso de Vitex mollis Kunth a las dosis de 3, 30 y 300 mg/kg.

8

Después de 30 min, a todos los grupos se les administró, por vía oral, una suspensión de carbón

activado al 10% y acacia al 5%.

Después de 30 min, los animales se sacrificaron por dislocación cervical, se procedió a la

disección de la cavidad abdominal y se extrajo la porción de los intestinos; se midió el largo total

del intestino (LTI) y la distancia del avance del carbón activado administrado (ACA). Se calculó el

porcentaje de avance del marcador (%AM):

Estos resultados se analizaron estadísticamente mediante una prueba ANOVA seguida por la

prueba de Dunnett.

Experimentación sobre motilidad gastrointestinal, con el extracto etanólico.

Se siguió un procedimiento similar al señalado para el extracto acuoso, pero el vehículo fue

solución salina isotónica más Tween 80 (0.5%).

4. Resultados

Meta 1. Obtener el extracto acuoso de parte aérea de Vitex mollis Kunth, por el método soxhlet, en cantidades suficientes para el desarrollo de la experimentación farmacológica. Se obtuvo el extracto acuoso de parte aérea de Vitex mollis Kunth, por el método soxhlet.

La obtención de este extracto se realizó durante todo el desarrollo del proyecto con la frecuencia

necesaria hasta obtener las cantidades suficientes para la realización de la experimentación

farmacológica.

Meta 2. Obtener el extracto etanólico de parte aérea de Vitex mollis Kunth, por maceración, en cantidades suficientes para el desarrollo de la experimentación farmacológica.

Se obtuvo el extracto etanólico de Vitex mollis Kunth, por el método de maceración.

La obtención de este extracto también se realizó durante todo el desarrollo del proyecto con la

frecuencia necesaria hasta obtener las cantidades suficientes para la realización de la

experimentación farmacológica.

9

Meta 3. Realización de una exploración etnobotánica sobre Vitex mollis Kunth en Teloloapan y Montegrande en el Estado de Guerrero, México.

Revisión de fuentes etnobotánicas Dentro de las obras históricas más significativas que se revisaron, figuran los facsímiles del Códice

Florentino y del Códice De la Cruz-Badiano (Libellus de Medicinalibus Indorum Herbis), la Historia

General de las Cosas de la Nueva España (Fray Bernardino de Sahagún) y la obra de Francisco

Hernández. En estos trabajos no se detectó información sobre Vitex mollis Kunth.

En fuentes cercanas a la actualidad se encontró información sobre aspectos botánicos relativos a

la especie vegetal estudiada y los referentes como especie medicinal que se señalaron en la parte

introductoria de este trabajo.

En la revisión de la literatura científica contemporánea no se detectó información relativa a las

áreas que se desarrollaron en este trabajo.

Trabajo de campo El trabajo de campo, fue realizado en las poblaciones de Teloloapan (Municipio de Teloloapan) y

Montegrande, (Municipio de Coyuca de Catalán) Estado de Guerrero. Teloloapan es una ciudad

con alrededor de 50,000 habitantes, y Montegrande tiene 500 habitantes, aproximadamente. Se

aplicaron 155 y 63 cuestionarios respectivamente, entre usuarios, curanderos, informantes

(personas que conocen la planta pero no la utilizan), vendedores (“hierberos”) y personas que no

conocen la planta.

La sistematización de la información obtenida en el trabajo de campo permitió elaborar las gráficas

y cuadros que se presentan.

La Gráfica 1 muestra los porcentajes de las diferentes categorías ocupacionales de las personas

entrevistadas en Teloloapan, se observa claramente que Vitex mollis es empleada por la gran

mayoría (88%), un 8% son informantes, 3% corresponde a personas que no conocen el árbol y un

vendedor 1% aproximadamente.

La Gráfica 2 muestra los tipos de padecimientos para los cuales se emplea Vitex mollis en

Teloloapan, de un total de 251 menciones de padecimientos, el 43% corresponde diarrea, 33%

para dolor estomacal, 4% empacho, 3% cólicos, 3% indigestión, 3% disentería, 3% piquete de

10

alacrán, 2% en resfriado y 6% tos. De esta misma gráfica se observa que la mayor frecuencia en

uso medicinal corresponde a los padecimientos gastrointestinales, en particular a la diarrea.

La Gráfica 3 muestra que el 93.7% de la población entrevistada en Montegrande es de usuarios y

el 6.3% son informantes, en una muestra de 63 personas.

La Gráfica 4 presenta los padecimientos en los que se emplea Vitex mollis en Montegrande. Para

la tos 56.4%, 7.3% diarrea, 1.8% dolor de cuerpo, 0.9% “latido”, 0.9% para bajar la fiebre

“calentura”, 2.7% para el escalofrío, 6.4% para el dolor de estómago, 2.7% para el resfriado, 1.8%

para asma, 2.7% dolor de cabeza, 11.8% como colorante natural para tamales, 0.9% posparto, en

las 110 menciones de padecimientos. De esta gráfica se observa que la mayor frecuencia de uso

medicinal corresponde a enfermedades de vías respiratorias.

En la población de Teloloapan, la mayoría de los entrevistados se encontró en el intervalo de 41 a

50 años; seguidos por las personas de 21 a 30 años. En Montegrande, la mayor parte de

información fue proporcionada por personas cuya edad va desde los 21 hasta los 60 años, es

decir, no hubo un intervalo de edad que se detectara claramente.

También, se presenta un resumen de otros aspectos de la información etnobotánica recopilada

sobre Vitex mollis Kunth, se indican los diferentes nombres que recibe este árbol destacando el de

“Nanche de perro”, tanto en Teloloapan como en Montegrande. Se consignan los lugares de

crecimiento, la parte usada, las cantidades empleadas en las terapias, la vía de administración, y

la duración del tratamiento.

USUARIO 88%

INFORMANTE 8%

NO LO CONOCEN 3% "HIERBERO"

1%

Gráfica 1. CATEGORÍAS OCUPACIONALES DE LA MUESTRA DE POBLADORES ENTREVISTADOS SOBRE Vitex mollis KUNTH, EN TELOLOAPAN, GRO. n = 155

DIARREA 43%

DOLOR ESTOMACAL 33%

TOS 6%

EMPACHO 4%

COLICOS 3%

INDIGESTIÓN 3%PIQUETE DE

ALACRÁN 3%

DISENTERÍA 3%RESFRIADO 2%

Gráfica 2. EMPLEO DE Vitex mollis KUNTH, EN TELOLOAPAN, GRO. n = 251

12

USUARIOS 93.7%

INFORMANTES 6.3%

Gráfica 3. CATEGORÍAS OCUPACIONALES DE LA MUESTRA DE POBLADORES ENTREVISTADOS SOBRE Vitex mollis KUNTH, EN MONTEGRANDE, GRO. n = 63

13

TOS 56.4%

TEÑIR TAMALES 11.8%

DIARREA 7.3%

DOLOR ESTOMACAL

6.4%

FRUTO COMESTIBLE

3.6%

ESCALOFRIO 2.7%

DOLOR DE CABEZA 2.7%

ASMA 1.8%

DOLOR CORPORAL

1.8%

POSPARTO 0.9%

"CALENTURA" 0.9%

"LATIDO" 0.9%

RESFRIADO 2.7%

Gráfica 4. EMPLEO DE Vitex mollis KUNTH, EN MONTEGRANDE, GRO. n= 110

14

INFORMACIÓN ETNOBOTÁNICA DE Vitex mollis EN TELOLOAPAN Y MONTEGRANDE, GRO. (TRABAJO DE CAMPO)

TELOLOAPAN

(frecuencia en %)

MONTEGRANDE (frecuencia en %)

NOMBRE COMÚN

“Nanche de perro” “Coyotomate” “Atato” “Valamo” “Agualamo”

96.75 3.25

0 0 0

n = 154

77.2 3.8 16.4 1.3 1.3

n = 79

LUGAR DE CRECIMIENTO

Campo Caminos Canales Jardines Orillas de ríos Zonas áridas

52.23 25.37 2.23

12.31 3.35 4.47

n = 268

35.5 28.5 4.65 15.7 8.72 6.98

n = 172 PARTE USADA Hojas

Fruto Corteza Hojas, Fruto, Corteza

88.96 0.64 7.69 0.64

n = 154

70.1 20.7 4.6 4.6

n = 87 SE UTILIZA Fresco

Fresco y seco Seco

82.85 17.15

0 n = 140

70.2 28 1.8

n = 57 FORMA DE USO

Té Baño Jarabe Cocimiento Masticada

93.33 4.66 0.66 0.66 0.66

n = 150

94 0 6 0 0

n = 66 FORMA DE ADMINISTRACIÓN

Oral Local

95.34 4.66

n = 150

100

n = 66 CANTIDAD EMPLEADA (1 litro de agua)

< de 4 hojas 5 a 10 hojas > de 11 hojas

27.88 65.38 6.73

n = 104

100

n = 44

FRECUENCIA DE USO

1 a 3 días 4 a 7 días más de 7 días hasta desaparición de síntomas

52.99 7.69 0.85

38.46 n = 117

29.2 41.7 29.2

n = 24

16

Meta 4. Determinación del efecto de los extractos acuoso y etanólico de Vitex mollis Kunth sobre la motilidad gastrointestinal en ratón.

La forma de administración usual de Vitex mollis es como infusión acuosa, por ello se empleó

agua como líquido extractor. Sin embargo, el etanol es el disolvente de elección para iniciar los

estudios fitoquímicos, porque dada su polaridad sus extractos son bastante completos. Por estas

razones se trabajó tanto con extractos acuosos como con etanólicos en la experimentación

farmacológica.

Los resultados experimentales sobre la motilidad gastrointestinal en ratón, del extracto acuoso de

Vitex mollis Kunth, utilizando carbón activado como marcador, se muestran en la gráfica 5, en

donde se representa el porcentaje de avance del marcador de los diferentes grupos de trabajo y

se señala también su respectivo error estándar. Los resultados se analizaron estadísticamente por

una ANOVA, y las pruebas t de Student y de Dunnett, y se presentan en el cuadro

correspondiente.

De la misma manera se trataron los resultados obtenidos con el extracto etanólico, los cuales se

muestran en la gráfica 6 y el cuadro respectivo.

Gráfica 5. EFECTO DEL EXTRACTO ACUOSO DE Vitex mollis Kunth SOBRE LA MOTILIDAD

GASTROINTESTINAL EN RATÓN.

AVAN

CE

DEL

MAR

CAD

OR

(%)

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Sol.

salin

ais

otón

ica

Extr

acto

3 m

g/kg

Extr

acto

30

mg/

kg

Extr

acto

300

mg/

kg

Lope

ram

ida

5 m

g/kg

17

18

ANÁLISIS ESTADÍSTICO DEL EFECTO DE EXTRACTO ACUOSO DE Vitex mollis Kunth, SOBRE LA MOTILIDAD

GASTROINTESTINAL EN RATÓN

GRUPOS COMPARADOS

DIFERENCIA ESTADÍSTICAa

Control vs Loperamida*

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 3 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 30 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 300 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Loperamida* vs Extracto 3 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Loperamida* vs Extracto 30 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Loperamida* vs Extracto 300 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Control: Solución salina isotónica * 5 mg/kg de solución salina isotónica a Prueba t de Student, prueba ANOVA seguida por la prueba de Dunnett. b Nivel de significancia p = 0.05

Gráfica 6. EFECTO DEL EXTRACTO ETANOLICO DE Vitex mollis Kunth SOBRE LA MOTILIDAD

GASTROINTESTINAL EN RATÓN.

AVAN

CE

DEL

MAR

CAD

OR

(%)

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Sol.

salin

a +

Twee

n 80

(0.5

%)

Extr

acto

3 m

g/kg

Extr

acto

30

mg/

kg

Extr

acto

300

mg/

kg

Lope

ram

ida

5 m

g/kg

19

20

ANÁLISIS ESTADÍSTICO DEL EFECTO DE EXTRACTO ETANOLICO DE Vitex mollis., SOBRE LA MOTILIDAD GASTROINTESTINAL EN RATÓN

GRUPOS COMPARADOS

DIFERENCIA ESTADÍSTICAa

Control vs Loperamida*

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 3 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 30 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Control vs Extracto 300 mg/kg

SIGNIFICATIVAb

Loperamida* vs Extracto 3 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Loperamida* vs Extracto 30 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Loperamida* vs Extracto 300 mg/kg

NO SIGNIFICATIVA

Control: Solución salina isotónica + Tween 80 (0.5%) * 5 mg/kg en solución salina isotónica + Tween 80 (0.5%) a Prueba t de Student, prueba ANOVA seguida por la prueba de Dunnett. b Nivel de significancia p= 0.05

21

Meta 5. Análisis de resultados y elaboración del informe del proyecto.

a) Aspectos etnobotánicos México es un país con profundas raíces en el conocimiento de su flora medicinal. En este trabajo

fueron diversas las obras que corroboraron esta afirmación, por ejemplo, los Códices De la Cruz-

Badiano y el Florentino, y los aportes de Maximino Martínez.

Sin embargo, en ninguna de las fuentes históricas de información etnobotánica revisadas, se

encontró registro de Vitex mollis Kunth como especie medicinal. Fue hasta la época

contemporánea donde se localizó alguna información que la señala con acción sobre diversos

padecimientos, específicamente Argueta (1994) la cita como antidiarreico (en el Estado de

Nayarit), sin embargo no se detectó ningún trabajo experimental que validara ese efecto y

tampoco otras fuente etnobotánicas que señalaran esa acción.

Ante la ausencia de mayor información etnobotánica y siendo la vía oral el mecanismo ancestral

generalizado de transmisión del conocimiento sobre la flora medicinal mexicana, se decidió

abordar estos aspectos de recuperación de información realizando trabajo de campo al respecto.

Se seleccionaron dos poblaciones del Estado de Guerrero, Teloloapan y Montegrande, pues

algunos lugareños indicaron en forma preliminar, que la empleaban como antidiarreico, y también

porque se observó la abundancia del árbol estudiado, en esas localidades.

La metodología que se siguió para el trabajo de campo se apoyó en los planteamientos de

Hernández-Xolocotzi (1979), investigador mexicano de reconocida trayectoria en etnobotánica, y

de Harris (1979), antropólogo social autor del concepto de “informante privilegiado”, y de Heinrich

(2000) reconocido investigador actual en etnobotánica.

Se señala que para la recuperación de información es necesario acudir a la población que conoce

y consume la especie vegetal a estudiar, Harris (1979) marca que el grupo que debe entrevistarse

es sólo aquel que posee la información deseada (“informantes privilegiados”).

En Montegrande, Gro., la encuesta prácticamente se aplicó a toda la población actual de ese

lugar, ya que existe ahí un alto porcentaje de personas que emigran temporalmente en busca de

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trabajo, principalmente a las regiones del norte de la República Mexicana o a Estados Unidos de

Norte América. De hecho, durante la realización del trabajo de campo se observó que

Montegrande se caracteriza por una población principalmente de mujeres, ancianos y niños.

En cuanto a la edad de los entrevistados en Montegrande, se observó alta dispersión en los

intervalos de la misma, el mayor porcentaje (15.9%) corresponde a personas de 51 a 60 años, y la

suma de los porcentajes de las personas entre 21 y 50 años, es de 41.1%; también participaron

personas de 61 a 70 años (11.1%). Las personas de toda la muestra (63) reconocieron sin ningún

problema a la especie vegetal estudiada. Estos indicadores muestran que la información sobre

Vitex mollis no se circunscribe a un grupo determinado de personas sino que está completamente

distribuida en la población.

En Teloloapan, el mayor porcentaje (20.08%) de personas entrevistadas, se ubicó en el intervalo

de 41 a 50 años, siguiendo con las de 21 a 30 años de edad (18.12%) y las de 15 a 20 años

(14.09%). Es significativo que en esta población el 32.21% de participantes correspondiera a

personas jóvenes (15 a 30 años).

Las respuestas a la pregunta sobre dónde crece Vitex mollis fueron coincidentes en ambas

poblaciones. Se detectó que crece prácticamente en todas las zonas, sin embargo, las personas

señalan que lo hace principalmente en el campo, en los caminos y en los jardines. Este profuso

crecimiento, el hecho de que se trata de un árbol, y el señalamiento de que lo encuentran con

follaje durante todo el año, aún cuando se especifique por parte de la mayoría de los entrevistados

(57.54%) en Teloloapan y (87%) en Montegrande, que su mejor época de crecimiento es “en

tiempo de aguas” (junio a septiembre), señalan que es un recurso natural que siempre se

encuentra al alcance de la población.

Se indicó con toda claridad que el nombre común preferente para Vitex mollis es “Nanche de

perro”, tanto en Teloloapan como en Montegrande, en esta última población también se conoce

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con alguna frecuencia (16.4%) bajo el nombre de “Atato”. Otros nombres comunes detectados con

muy escasa frecuencia son los de “Coyotomate” (en ambas poblaciones), y los de “Valamo” y

“Agualamo” (en Montegrande).

En cuanto a los usos de Vitex mollis por los lugareños de Teloloapan y Montegrande, los resultados

indican que mientras en Teloloapan se usa principalmente en padecimientos gastrointestinales, en

particular en diarreas, y es poco frecuente su uso para la tos, en Montegrande se usa en

padecimientos de las vías respiratorias, principalmente para la tos, asma, resfriado, y con menor

frecuencia en padecimientos gastrointestinales entre los cuales figuran las diarreas.

En Montegrande se detectó su empleo para teñir los “tamales nejos” un platillo típico del Estado de

Guerrero, este uso puede deberse a la presencia de pigmentos en gran cantidad, como lo sugiere

el color negro violáceo de sus frutos, a su vez este empleo podría indicar una baja toxicidad en esta

especie vegetal ya que lo consumen en alimentos. Esto último se confirmó cuando algunos

habitantes (3.6%) declararon que se comen el fruto como golosina en forma natural o en conserva.

En los aspectos medicinales, Vitex mollis se emplea preferentemente fresca, si bien alrededor de

30% de los entrevistados la emplea seca o fresca, esto indica que los compuestos activos

permanecen en la planta al perder la humedad.

Las partes del árbol que se emplean con mayor frecuencia en ambas poblaciones son las hojas. En

Teloloapan se usa con cierta frecuencia la corteza (7.69%); y en Montegrande el fruto (22.35%).

Es significativo que en la exploración etnobotánica realizada en Montegrande, se encontró cierta

asociación entre el uso para la tos y el consumo del fruto con este fin.

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Esto es, la exploración etnobotánica señaló que Vitex mollis se emplea principalmente en diarreas

en Teloloapan y para la tos en Montegrande, estos usos sugieren que el árbol pudiera contener

compuestos activos inhibidores de la musculatura lisa, ello permitió suponer que los extractos

totales de Vitex mollis Kunth pudieran presentar efecto sobre la motilidad gastrointestinal, lo que se

confirmó con los resultados obtenidos en las pruebas farmacológicas realizadas.

b) Prueba farmacológica

Los padecimientos gastrointestinales continúan ocupando lugares prioritarios en los aspectos de

morbilidad y mortalidad en México, en particular merecen atención especial las enfermedades

diarreicas. Un cuadro diarreico se caracteriza por presencia excesiva de fluidos en el interior del

intestino, incremento en la motilidad intestinal, pérdida en abundancia de electrolitos y sales, lo

que puede llevar a cuadros de deshidratación desde ligeros hasta mortales. Las causas de las

diarreas son múltiples, entre ellas figuran: disfunciones metabólicas, procesos infecciosos, estrés,

nerviosismo, inflamaciones del tracto gastrointestinal, etc., pero sea cual fuera la causa, tienen en

común el aumento en los movimientos peristálticos del intestino.

Entre los fármacos más empleados actualmente en México para contrarrestar una diarrea, figura la

loperamida, por ello se seleccionó como fármaco control en este trabajo. Su estructura química

muestra que es una piperidina opioide, sintética, se absorbe en forma incompleta y de manera

lenta por administración oral; el mecanismo de acción de este fármaco es que actúa sobre

receptores µ en las neuronas entéricas, incrementando las contracciones gastrointestinales pero

interrumpiendo el movimiento peristáltico, esto da como consecuencia un retardo en el avance del

contenido intestinal lo que propicia la absorción de líquidos con la consiguiente desaparición de la

diarrea.

En un primer acercamiento al estudio de Vitex mollis se realizó un sondeo sobre su efecto sobre el

tracto gastrointestinal en ratón.

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Se eligió al ratón como animal de experimentación por su bajo costo comparativamente con otras

especies como rata o cobayo, por la mayor facilidad en su manejo, además de sus características

metabólicas que lo hacen adecuado para el tipo de pruebas realizadas.

Se estudió el efecto de dos tipos de extractos totales. Se eligió el extracto acuoso obtenido por

Soxhlet, porque presenta similitud con la forma normal de consumo de Vitex mollis, que es en té

(cocción acuosa), y nos permite obtener compuestos similares a los que la población ingiere. Y se

seleccionó el extracto etanólico porque el etanol es uno de los disolventes de elección en los

estudios fitoquímicos, ya que extrae una amplia gama de compuestos de mediana polaridad, por lo

tanto es un extracto muy completo.

En la prueba farmacológica correspondiente al extracto acuoso, se evidenció un comportamiento

diferente entre los animales del grupo control y los tratados con loperamida, y se encontró

comportamiento similar entre los grupos a los que se administró el extracto y los del grupo control

positivo (loperamida); esto se confirmó a través del tratamiento estadístico realizado. Estos

resultados indican que el extracto acuoso de Vitex mollis disminuyó el avance del marcador en el

tracto gastrointestinal; si bien, este efecto no fue dosis dependiente.

Con el extracto etanólico se obtuvieron resultados similares, en lo general. Es decir, a pesar de

tratarse de extractos de composición diferente, ambos contienen compuestos activos que

disminuyen la motilidad intestinal. Estas observaciones dan lugar a la exploración en un área de

enorme interés para continuar el estudio de Vitex mollis, es decir, el rastreo de los principios activos

que actúan disminuyendo la motilidad intestinal.

En todo caso, los resultados farmacológicos muestran que Vitex mollis contiene sustancias que

retardan el avance del contenido gastrointestinal, lo que propiciaría una mayor absorción de

electrolitos y fluidos intestinales, y por lo tanto puede ser útil en el tratamiento de cuadros

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diarreicos, como lo señala el conocimiento empírico popular que se detectó en el trabajo de campo

realizado.

Los resultados obtenidos ubican a Vitex mollis como potencialmente útil en diarreas de origen

nervioso, por estrés, por disfunciones metabólicas y otras causas, pues la reducción de la motilidad

intestinal es uno de los mecanismos por los que actúan muchos agentes antidiarreicos.

CONCLUSIONES GENERALES

Vitex mollis Kunth es una especie vegetal de uso vigente en Teloloapan y Montegrande,

Guerrero.

En Teloloapan principalmente es usada para diarrea y dolor de estómago.

En Montegrande se emplea principalmente para la tos.

En ambas poblaciones se usan principalmente las hojas, frescas, y se preparan en té

(administración oral).

Tanto el extracto etanólico como el acuoso de Vitex mollis Kunth mostraron efecto

inhibitorio de la motilidad gastrointestinal, en ratón.

Por lo anterior Vitex mollis Kunth es una especie medicinal potencialmente útil en el

tratamiento de enfermedades diarreicas como lo señala el conocimiento popular.

Se alcanzaron los objetivos propuestos para este trabajo y las hipótesis planteadas fueron

correctas.

5. Impacto

Para la elucidación del mecanismo de acción de un fármaco determinado, es indispensable la

realización de estudios de posibles efectos del compuesto sobre sistemas enzimáticos.

En la búsqueda de fuentes potenciales de compuestos con actividad farmacológica es importante

considerar los recursos vegetales con que se cuenta en México. De particular interés es el estudio

de las especies vegetales cuya información etnobotánica las señala con efecto sobre

padecimientos gastrointestinales, porque éstos continúan afectando a grandes grupos de la

población del país como lo muestran las cifras estadísticas. En un estudio biodirigido las primeras

evidencias de actividad farmacológica suelen obtenerse a partir de extractos totales de la especie

vegetal a explorar, por lo tanto, este primer proyecto sobre Vitex mollis Kunth estableció las bases

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para que, en proyectos posteriores, se proceda al aislamiento del (los) principio(s) activo(s) y la

exploración sobre su mecanismo de acción enfatizando en el rastreo de efectos inhibitorios sobre

sistemas enzimáticos.

También, este estudio valida el conocimiento empírico popular sobre Vitex mollis Kunth y

contribuye a explicar bajo el rigor de la experimentación de laboratorio su uso por parte de la

población mexicana.

En general:

Este proyecto contribuyó a establecer las bases para el posterior estudio de inhibición de Vitex mollis Kunth sobre sistemas enzimáticos del tracto gastrointestinal.

Se determinó que tanto el extracto etanólico como el acuoso de Vitex mollis Kunth presentan

efecto inhibitorio sobre la motilidad gastrointestinal, en ratón. Se contribuyó a la formación de recursos humanos a través del desarrollo de servicios sociales

y de la Tesis Profesional para Químico Farmacéutico Industrial de María de Jesús Ramírez Dimas (ENCB-IPN).

Se presentaron trabajos en diferentes foros académicos que van desde seminario

departamental hasta congresos internacionales.