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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CAMPECHE
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS
PROGRAMA EDUCATIVO: BIÓLOGO
MANUAL DE PRÁCTICAS: HONGOS
TERCER SEMESTRE
PERIODO ESCOLAR: SEPTIEMBRE - FEBRERO
HRS/SEM/MES: 5 HORAS
COMPILADOR:
OLIVIA DEL ROCÍO COMPEÁN GARCÍA
San Francisco de Campeche, Camp., México-2008
Facultad de Ciencias Químico Biológicas Programa Educativo - Biólogo
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PRACTICAS DE HONGOS OLIVIA DEL R. COMPEÁN GARCIA
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CONTENIDO
PRESENTACION
1
UNIDAD 1 INTRODUCCION A LA MICOLOGIA
Práctica No. 1 Los diferentes grupos vegetales 2
Práctica No. 2 Morfología de los hongos 7
UNIDAD 2 DIVISION MYXOMMYCOTA
Práctica No. 3 Aislamiento de Myxomycetes 10
UNIDAD 3 DIVISION EUMYCOTA, SUBDIVISION PHYCOMYOTINA
Práctica No. 4 Subdivisión Phycomycetes 12
UNIDAD 4 DIVISION EUMYCOTA, SUBDIVISION
DEUTEROMYCOTINA Y ASCOMYCOTINA
Práctica No. 5 Deuteromycotina Sembrado, cultivo y aislamiento 14
Práctica No. 6 Deuteromycotina Sembrado, cultivo y aislamiento
(2° parte)
16
Práctica No.7 Ascomycetes 20
UNIDAD 5 SUBDIVISION BASIDIOMYCOTINA Y DIVISION
LICHENES
Práctica No. 8 Elaboración de una clave 21
Práctica No.9 Práctica de campo. Macromycetes y Liquenes 24
BIBLIOGRAFÍA GENERAL 32
ANEXOS
Anexo I Forma de reporte de práctica 33
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PRACTICAS DE HONGOS OLIVIA DEL R. COMPEÁN GARCIA
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PRESENTACIÓN
Este manual de practicas esta diseñado para que el alumno refuerce el
conocimiento adquirido en las sesiones teóricas; ayudándole a comprender las
características Morfológicas, Fisiológicas, Taxonómicas, los Patrones de Distribución
y la Importancia Ecológica del Reino Fungi. Así como también el manejo de estos
organismos; desde las técnicas de colecta, cultivo, aislamiento y conservación
básicas que ayuden a la identificación de este importante grupo taxonómico.
Este documento esta integrado por una práctica de campo; diseñada para
que el alumno aprenda la metodología de colecta, preservación, conservación para
herbario y conozca en su medio natural los hongos (macromicetos) propios de la
selva tropical. Ocho prácticas de laboratorio planeadas para que el alumno
distinga, la morfología de los micro y macromicetes, así como también se familiarice
con el manejo de las claves para la identificación taxonómica de ambos. Así mismo,
en cada práctica el alumno deberá desarrollar la introducción de cada práctica con
los conocimientos adquiridos en las sesiones teóricas y la investigación documental
realizada, así como que resuelva un cuestionario con conceptos analizados en el
laboratorio y lo observado en cada práctica.
En esencia este manual servirá de guía para que el alumno tenga a su
disposición la información básica e introductoria para cubrir los objetivos del curso,
persiguiendo se fortalezcan las capacidades de investigación, indagación y
creatividad, proponiendo las alternativas mas viables conforme a la infraestructura de
los laboratorios de la facultad.
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PRÁCTICA NO.1
LOS DIFERENTES GRUPOS VEGETALES
Objetivo: Reconocer por medio de técnicas de tinción y observaciones
microscópica y macroscópicas los principales grupos vegetales clorofílicos y su
clasificación en procariontes, eucariontes, talofitas y cormofitas.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Cianofita
Ficofita
Musgo
Helecho
Fanerógamas
-Equipo:
Microscopio compuesto
Microscopio estereoscópico
Pinza y aguja de disección
Porta y cubre objetos
Mechero
Baño maría
Charola de disección
Caja de petri
Tubos de ensaye
Pinzas para tubo de ensaye
Goteros
-Reactivos:
Agua destilada
Lugol
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Eritrosina
Café Bismarck
Carmin
Azul de Cresil
Azul de Metileno
Formol
HCL
Solución Ringer
Liquido de Schiff
Técnica:
1. Técnica de Feulgen para tinción nuclear:
-Lave el material biológico con agua corriente
-Hidrolice con HCL N a 60° C durante 15-20 minutos (en estufa o baño
maría).
-Lave con agua corriente.
-Coloque el material en liquido de Schiff durante 2 hrs o más.
-Pase el material a la solución Ricanger durante 3 minutos.
-Lave con abundante agua corriente.
-Coloque el material en el portaobjetos.
-Coloque 2-3 gotas de un colorante de contraste.
-Coloque el cubreobjetos.
-Quite el exceso de líquido con un lienzo, limpie el portaobjetos.
2. Diferencie entre talo y cormo.
-Con las cianofitas, observe al microscopio la estructura general.
-En las ficofitas observe la constitución, arreglo de las células y la
estructura de reproducción.
-En el musgo obsérvelo en el estereoscopio y señale el rizoide, caulidio y
filidios, la seta y la cápsula.
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-En el helecho observe la raíz, tallo y hojas. En el corte transversal del tallo,
señale la epidermis, corteza, tejidos conductores y médula.
-En la fanerógama observe la raíz, tallo, hojas, flor, fruto y semilla.
3. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas, indicando el nombre
de cada una de las estructuras observadas.
6. Reportar de la manera acostumbrada.
Cuestionario:
1.- ¿Cuál es la función de la técnica de Feulgen?
2.- ¿Qué papel juega el reactivo Schiff en la técnica?
3.- ¿Para que se agrega el colorante de contraste?
4.- ¿Qué grupo estudiado presentó un núcleo procariótico?
5.- ¿Qué grupos presentaron núcleo eucariótico?
6.- ¿Qué grupos presentan talo?
7.- ¿Qué grupos presentan cormo?
8.- ¿Histológicamente como diferenció entre una talófita y una cormofita?
9.- ¿Cómo se presentan las estructuras reproductoras en las talófitas y en las
cormofitas?
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PRÁCTICA NO.2
MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS
Fundamentación:
Objetivo: Que el alumno conozca y se familiarice con las principales
características morfológicas de los hongos.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Cultivo de hongo
Levadura(Saccharomyces cerevisiae)
Setas
-Equipo:
Microscopio compuesto
Microscopio estereoscópico
Pinza y aguja de disección
Porta y cubre objetos
Mechero
Triangulo de vidrio
Caja de petri
Pipeta pauster
Asa de sembrado
Aguja de disección
Bisturí
Pizeta
Papel secante
-Reactivos:
Agua destilada
Azul de algodón solución acuosa al 0.5%
Verde de malaquita solución acuosa al 7.6%
Safranina solución acuosa al 0.25%
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Floxina solución acuosa al 0.5%
Solción acuosa de hidróxido de potasio al 2-3%
Técnica:
1. Elaborar preparación de micelios, teñir con azul de algodón.
2. Elaborar un frotis de levadura, tiñendo con verde de malaquita y safranina.
3. Hacer un corte delgado del cuerpo fructífero, en caso de que este seco
colocarlo en la solución acuosa de KOH añadiendo unas gotas de floxina para
teñir los tejido, si este no se encuentra deshidratado, teñir directamente.
4. Reconocer y diferenciar las variantes que presentan los talos:
-Estructuras ramificadas y filamentosas.
-Estructura miceliar y levaduriforme.
5. Reconocer y diferenciar:
-Estructuras de reproducción o propágulos, de tipo sexual (esporas), de tipo
asexual (conidios), pileo, lamelas, estípite.
-Pared, núcleos, septos.
-Tipo de tejido fúngico
-Estructuras de resistencia.
-Tipos de hifas:
Septadas, cenocíticas (aseptadas); en espiral, nodosas;
pectinadas; en candelabro fávico; en raqueta; unicelulares
(levaduriformes); seudohifas; vesiculosas.
6. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas.
7. Reportar de la manera acostumbrada.
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BIBLIOGRAFÍA
-Deacon J.W., 1988. Introducción Micología Moderna. Limusa Noriega, México.
350 p.
-Guzmán G., 1990. Identificación de los Hongos de México. Limusa. México. 424
p.
-López M. R., 1995 Micología Médica. Editorial Trillas. México.
-Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micología básica aplicada.
Fondo de Cultura Económica. México. 550 p.
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PRÁCTICA NO. 3
AISLAMIENTO DE MYXOMYCETES
Objetivo: Diferenciar las principales características morfológicas vegetativas y
reproductivas de algunos Myxomycetes.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Diferentes sustratos como corteza de árboles vivos o troncos en
descomposición.
Hojuelas de avena esterilizadas.
-Equipo:
Estereoscopio
Cámara húmeda forrada con papel filtro o toallas de papel.
-Reactivos:
Caja de petri con medio harina de maíz agar .
Técnica:
1. Colocar pedazos delgados de corteza o de tronco en la cámara húmeda
forrada con el papel filtro o toallas de papel; los pedazos de papel son
remojados durante una noche y al día siguiente se escurre el agua sobrante y
se incuba a temperatura de laboratorio.
2. Examinar en estereoscopio después de cuatro o cinco días, localizar los
plasmodios y transferir a la caja de petri que contiene el medio harina de maíz
agar a mitad de concentración normal.
3. Después de que el plasmodio alcance un tamaño suficientemente grande
como para ser visto sin ayuda del estereoscopio, transferirlo a otra placa de
medio de harina de maíz agar para obtener un cultivo puro donde será
alimentado por hojuelas de avena esterilizadas.
4. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas.
5. Reportar de la manera acostumbrada.
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Cuestionario
1. ¿Qué tipo de plasmodio observo?
2. ¿Qué ocurre con el plasmodio cuando hay formación de esporangios?
3. ¿Qué producen las esporas de un myxomycete?
BIBLIOGRAFÍA
-Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micología básica aplicada.
Fondo de Cultura Económica. México. 550 pag.
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PRÁCTICA NO.4
SUBDIVISIÓN PHYCOMYCETES
Objetivo: Al finalizar la práctica el alumno conocerá las principales
características morfológicas, de aislamiento y sustratos sobre los que se
desarrollan algunos miembros de esta subdivisión.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Diferentes sustratos como semillas de cañamo, granos de polen, papel celofán,
pelo humano desengrasado con éter, piel de víbora, exoesqueleto de camarón
o moscas muertas.
Detritus vegetal obtenido de un lago o charco y del suelo.
-Equipo:
Cajas de petri
Pinzas de disección
Bisturí
-Reactivos:
Agua destilada estéril
Técnica:
1. Para el aislamiento de ficomicetes acuáticos colocar una pequeña cantidad
de detritos vegetal, o aproximadamente dos cucharaditas de suelo, en la
caja de petri y añadir agua destilada estéril hasta una profundidad de 5 mm.
No añadir demasiado detritus o suelo, ya que esto hará que el suelo se
descomponga e impida realizar los aislamientos. El aislamiento puede
comenzarse con agua de charco o de lago, esta se vacía en las cajas de
petri sin necesidad de agregar detritos.
2. Añadir una pequeña cantidad de carnada a la superficie; utilizar vario trozos
de carnada en cada caja de petri, no mezclar diferentes tipos de carnada,
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para no dificultar las observaciones. Los granos de polen en pequeña
cantidad pueden ser espolvoreados sobre la superficie del agua. El
exoesqueleto de camarón, celofán y piel de víbora deberán ser esterilizados
sumergiéndolos rápidamente en agua hirviendo y cortados en cuadros
pequeños para caber debajo del cubreobjetos cuando se realice la
observación al microscopio. Las semillas de cañamo deben ser sumergidas
brevemente en agua hirviendo para ablandar la testa y esterilizarlas
superficialmente, después cortadas a la mitad antes de ser colocadas en el
agua como carnada.
3. Dejar las cajas de 3 a 4 días. Antes de ser examinadas con el microscopio.
4. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas indicando el nombre
de las estructuras identificadas, así como el de los organismos aislados.
5. Reportar de la manera acostumbrada.
Cuestionario
1. ¿De qué manera podría obtener un cultivo monoespecífico de los hongos
encontrados?
2. ¿Por qué podemos empezar el aislamiento utilizando agua de charco o lago
sin utilizar detritos, a diferencia de cuando lo hacemos con agua destilada?
4. ¿Cuál es la finalidad de esterilizar las carnadas antes de ponerla en la caja
de petri?
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PRÁCTICA NO.5 DEUTEROMYCOTINA
Sembrado, cultivo y aislamiento
Objetivo: El alumno se familiarice con las técnicas de cultivo más comunes
para el estudio de algunos hongos microscópicos.
Recursos Materiales:
-Biológicos:
Mohos provenientes de distintos medios amiláceos
Suelo
-Equipo y Reactivos:
Microscopio compuesto
Microscopio estereoscópico
Estufa
Tres tubos con 10ml de papa dextrosa agar
Medio de agar rosa de bengala espectromicina
Seis cajas de Petri esterilizadas
Gradilla para tubos
Pinzas estériles
Mechero de gas
Asa para siembra
Lápiz de cera
Cinta adhesiva
Cubre bocas
Técnica:
Para hongos que crecen en medios amiláceos
1. Vaciar los tubos con 3ml de medio de cultivo en tres cajas de Petri
esterilizadas. Esto se hace junto a la flama del mechero y levantando la
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tapa de la caja solamente lo necesario para verter el medio de cultivo. Dejar
enfriar el medio en las cajas hasta que solidifique.
2. Destapar el frasco que contienen los cultivos de hongos. Se esteriliza el asa
para siembra y se deja enfriar; se toma con el asa un poco de micelio por
cultivar, sobre todo hifas con esporangios. Se siembra en la caja de petri.
Para aislamiento de hongos de suelo
1. Colocar una pizca de suelo con las pinzas estériles en el centro de una caja
de petri, triturando todo agregando de suelo presente. Si el suelo es muy
húmedo tratar previamente con calor a 60-70 °C durante una hora.
2. Añadir de 8 a 10 ml del medio de agar rosa de bengala espectromicina
fundido y enfriado a una temperatura aproximada de 45 °C, para evitar
matar los organismos que están en el, dispersando las partículas de suelo
por todo el medio.
La caja sembrada se invierte y se unen la tapa y la base con cinta adhesiva
para evitar que entre aire y contamine el medio, incubar a temperatura de
laboratorio. Se observa diariamente y se hacen las anotaciones pertinentes.
Revisar las cajas de petri con los cultivos de hongos y anotar lo observado
(número de colonias, aspecto, color, dimensiones y demás caracteres útiles
para su identificación).
BIBLIOGRAFÍA
-Gaviño Gonzalo. et al. 1979. Técnicas biológicas selectas de laboratorio y
campo. Limusa. México. 251 pp.
-López M. R., 1995 Micología Médica. Editorial Trillas. México.
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PRÁCTICA NO.6
DEUTEROMYCOTINA
Sembrado, cultivo y aislamiento (2° parte)
Objetivo: El alumno se familiarice con las técnicas de cultivo más comunes
para el estudio de algunos hongos microscópicos.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Cultivo de hongos en caja de Petri
-Equipo y Reactivos:
Seis tubos con papa dextrosa agar inclinado esterilizados
Azul de algodón lacofenol
Gelatina glicerinada
Baño María a 45°C-50°C
Cubre y porta objetos
Asa bacteriológica
Mechero
Pinzas de disección
Vernier
Ligas
Cubre bocas
Técnica:
1. Escoger de cada caja dos micelios con caracteres lo más diverso posible.
Hacer una preparación fresca de cada uno, colocando una gota de agua en
un portaobjetos. Se esteriliza el asa en la flama del mechero, se deja enfriar
y se coloca cerca de la flama la caja de Petri, se abre solo lo necesario para
introducir el asa, tomar un poco del micelio de uno de los hongos; el cual
se coloca un la gota de agua del portaobjetos. Observar al microscopio con
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menor y mayor aumento. Anotar todos los caracteres perceptibles,
identificar consultando una micología.
2. Una vez escogidos los dos micelios diferentes, sembrar en los tubos con
agar inclinado, cada uno en tres tubos distintos. Para hacer esto, se coloca
cerca de la flama la caja de Petri con el micelio, se esteriliza con la flama el
asa y se deja enfriar. Se levanta un poco la tapa de la caja y se toma un
poco de micelio o esporas. Después, sin que el asa toque algún objeto, se
acerca uno de los tubos con medio de cultivo y se destapa para
introducirle el asa con la muestra de hongo. Se desliza en línea recta por la
mitad del medio de cultivo, cuidando de no romperlo. Se tapa el tubo con el
algodón previamente flameado. El algodón se flamea sosteniéndolo con
pinzas de disección.)
3. Terminada la siembra, etiquetar cada uno de los tubos anotando: número
de caja de donde se tomó el micelio, fecha, nombre o iniciales de quien
realizo la siembra.
4. Tapar cada uno de los tubos con dos papeles estaño o aluminio de
aproximadamente seis centímetros, ajustados con una liga, dándole una o
dos vueltas para cerrar herméticamente. Colocar en posición vertical en la
gradilla y dejar incubar a temperatura ambiente durante diez o quince días.
Al cabo de este período se habrán desarrollado nuevos micelios que se
examinarán al microscopio estereoscópico y con los cuales se harán
preparaciones fijas.
5. Cuando aparezcan los micelios, se procede a resembrarlos en tubos con
medio inclinado o bien a hacer observaciones directas de preparaciones
en el microscopio.
6. Reportar de la manera acostumbrada.
Preparaciones frescas:
1. Escoger cuatro micelios que muestren características diferentes y que
provengan de cajas o tubos diferentes.
2. Colocar una gota de agua en un portaobjetos.
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3. Esterilizar el asa con la flama y deje enfriar. Destape un tubo de cultivo de
los que se prepararon previamente, introducir el asa hasta el micelio para
tomar una muestra, colocarla en la gota de agua del portaobjetos. Adicionar
un portaobjetos.
Observar de menor a mayor aumento. En caso necesario agregar azul de
algodón, rojo neutro o cualquier otro colorante vital para destacar las
estructuras por observar.
Preparaciones semipermanentes:
Estas pueden obtenerse reemplazando el agua con azul de algodón lactofenol
y sellando los bordes del cubreobjetos con varias aplicaciones de esmalte de
uñas transparente
1. Poner una o dos gotas de azul de algodón lactofenol en una orilla del
cubreobjetos, extraer el agua desde la orilla opuesta del cubreobjetos con
un pedazo de papel toalla o secante, de manera que el azul de algodón
lactofenol reemplace al agua.
2. Sellar con esmalte de uñas.
Preparaciones permanentes:
1. Tomando las mismas precauciones anteriores par evitar la contaminación,
se toma con el asa estéril y cerca de la flama, un poco de micelio del tubo
2. Se coloca en el portaobjetos sobre una gota de agua. Se tapa el tubo y con
la aguja de disección se extiende el micelio.
3. La preparación se fija a calor pasando varias veces la superficie inferior del
portaobjetos por la flama del mechero, hasta que se caliente de tal manera
que no queme al tocarlo.
4. Poner la preparación ya fijada en un triangulo de vidrio colocado dentro de
una caja de Petri. Dejar enfriar.
5. Agregar unas gotas de azul de algodón extendiéndolas sobre el micelio,
dejar actuar el colorante durante diez minutos. Licuar la gelatina glicerinada
mientras se tiñe la preparación.
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6. Lavar la preparación con agua destilada, dejando caer esta lentamente
sobre el portaobjetos, el agua se escurre sobre un vaso de precipitado
hasta que esta salga sin colorante.
7. Secar la preparación, bordes y parte inferior del portaobjetos, con papel
secante o filtro, no secar la superficie que tiene el micelio esta se seca al
aire libre.
8. Tomar con un agitador delgado o con un gotero, un poco de gelatina
glicerinada licuada y poner una pequeña gota encima del micelio teñido.
Realizar esto con cuidado para evitar que se formen burbujas, si estas se
forman, desbaratarlas colocándoles la punta de una aguja caliente.
9. Colocar el cubreobjetos antes de que solidifique. Pasar la superficie inferior
del portaobjetos por la flama del mechero hasta que la gelatina cubra todo
el cubreobjetos. Limpie el excedente con papel filtro en caso de que este
escurra por los bordes.
10. Deje solidificar la gelatina por diez o veinte minutos. Rotule la preparación,
pegándole un membrete en el que se anota: nombre de la técnica usada,
fecha, tipo de hongo y nombre de quien realizo la preparación.
11. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas indicando el nombre
de las estructuras identificadas, así como el de los organismos aislados.
12. Reportar de la manera acostumbrada.
Las preparaciones permanentes como semipermanentes deberán mostrar la
estructuras reproductoras del hongo. Estas deberán ser entregadas junto al
reporte de prácticas, identificando los hongos a clase, orfen, familia y género.
Si es posible también deberá indicarse la especie.
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PRACTICA NO. 7
ASCOMYCETES
Objetivo: Que el alumno se familiarice con algunas características morfológicas
de los Ascomycotina.
Recursos Materiales:
-Biológico:
Diferentes ejemplares de ascomycetes:
Cultivo joven y viejo de levadura (Saccharomyces cerevisiae)
-Equipo:
Microscopio estereoscópico
Microscopio compuesto
Porta objetos
Cubre objetos
Pipeta pauster
-Reactivos:
Agua destilada
Azul de algodón
Técnica:
1. Observar las células vegetativas de las levaduras en los diferentes estados de
gemación,
2. Elaborar un frotis de levadura, tiñendo con verde de malaquita y safranina.
Identificar ascas con ascosporas.
3. Observe diferentes ascocarpos al estereoscopio, hacer cortes longitudinales,
teñir e identificar: acas, ascosporas, peridio, parálisis y ostiolo.
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PRÁCTICA NO.8
ELABORACION DE UNA CLAVE
Fundamentación:
Objetivo: Al término de la práctica el alumno podrá elaborar una clave
basándose en las características morfológicas distintivas de un conjunto de
elementos orgánicos e inorgánicos.
Recursos Materiales:
-Biológico:
-Diferentes ejemplares de hongos
-Equipo:
Diferentes ejemplares de hongos
Técnica:
1. Separe los elementos del conjunto de manera dicotómica hasta que, en
pasos sucesivos se tengan subconjuntos constituidos por dos elementos
cada uno; en algunos casos un subconjunto puede estar constituido por un
elemento.
En cada caso de separación anote las características que usó para hacer
dicha separación. En este caso procure que las características que usadas
sean mutuamente excluyentes. Por ejemplo:
Con rosca – Sin rosca
Con punta – Sin punta
Procure no usar características diferentes para separar en grupos, por
ejemplo:
Con agujero - Con rosca
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2. Al separar los grupos, escoja la característica más simple que sirva para hacerlo
en cada paso.
3. Enumere las operaciones de dos en dos yendo de lo general ( las
características comunes al conjunto formado) a lo particular (la característica
distintiva del último elemento) ejemplo:
1 a. Alargado, con rosca y punta………………………………………..2
1 b. Redondo, sin rosca y sin punta…………………………………….8
2 a. Con cabeza, rosca en todo el cuerpo……………………………...3
2. b. Sin cabeza, rosca en lamitad anterior del cuerpo………………..5
Y así construya su clave.
Material Biológico.
Clasifique el material proporcionado, organicelo en jerarquías taxonómicas (taxas)
y dé el nombre adecuado, siguiendo las reglas de la clasificación biológica:
Reino: Nombre arbitrario
División: Nombre terminado en “mycota”
Subdivisión: Nombre terminado en “mycotina”
Clase: Nombre terminado en “mycetes”
Orden: Nombre terminado en “mycetidae”
Familia: Nombre terminado en “ales”
Género: Un solo nombre latinizado
Especie: Un solo nombre latinizado
Cada categoría o jerarquia taxonómica debe agrupar a los elementos de acuerdo
con un criterio. Este puede ser naturaleza, función, organización, morfología,
origen, etc.. Haga las divisiones sucesivas de acuerdo con las jerarquias; en este
caso, las divisiones no necesariamente va a hacerse de manera dicotómica.
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CUESTIONARIO
1. ¿Qué es una clave?
2. ¿Qué tipode taxonomía se aplica al usar una clave?
3. ¿Qué tipo de clave se utiliza en la actualidad?
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PRACTICA No.9
PRÁCTICA DE CAMPO
(MACROMYCETES y LIQUENES)
Fundamentación:
Objetivos:
1. Aprender la metodología para la colecta, fijación, preservación y
determinación de hongos.
2. Conocer en su medio la flora micológica de selva del estado de Campeche.
3. Fomentar y aumentar la capacidad de observación, investigación, síntesis y
crítica que debe cumplir todo profesionista de la biología
4. Constituir con este tipo de estudios un banco de datos básico que pueda
utilizarse como antecedente para investigaciones más detelladas y diversas.
RECURSOS MATERIALES:
-Equipo:
Una libreta de campo y lápiz semi duro
Una cesta plana y extendida
Guantes de látex
Cuchillo o navaja de campo bien afilada
Bolsas de papel estraza de diferentes tamaños
Papel blanco
Lupa
Rejilla con fuente de calor para secar los hongos
Vernier
Regla de madera
Cámara fotográfica (35 mm)
Caja de plástico (plexiglás)
Termómetro
Frasco de vidrio o plástico de 200 ml
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Papel encerado (hojas de 30 x 30 cm)
Brújula
Pala de jardinería
Desuhumidificador
3 goteros
Bolsas de plástico de 15 x 10 cm aprox.
-Reactivos:
HCL al 10% 50ml
NaOH al 10% 50ml
H2O2 al 50ml al 3% que es la presentación comercial.
Agua destilada 500ml en una pizeta
Papel pH
Perlas de Naftalina
Técnica:
Colecta
1.-La colecta del material micológico se hará excavando con el cuchillo o
navaja, de tal manera que se pueda sacar totalmente con todo y sus partes
subterráneas, o al menos con la base completa. Se colectarán solo ejemplares
en buen estado. Se recomienda no dañar ni destruir ejemplares "no
recolectables”.
2.-Colectar dos o tres ejemplares de la misma especie, disponiendo de
ejemplares de todas las edades, el material colectado inmediatamente,
colóquese sobre una hoja de papel encerado ya cortada, hágase un paquete y
deposítese en la canasta.
3.-En la libreta se anotarán, número de colecta, el nombre de la localidad lo
más exacto posible (Estado, municipio, Km. al N, S, E, O, etc). Se anotará
también fecha, tipo de terreno y características de suelo, tipo de
vegetación del lugar (árboles, hierbas que crecen al rededor, etc) en caso de
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no conocer el nombre de las plantas, se tomará una muestra de esta, y se
herborizará, para su posterior identificación. Pero sobre todo deberán anotarse
y estudiarse las características inmediatas perecederas del hongo,
anotarse y estudiarse las características tales como: Forma del cuerpo
fructífero; color de cada una de las partes de dicho cuerpo, incluyendo la
interna y las partes subterráneas; color de las esporas en masa (por medio
de una esporada), presencia o ausencia de cualquier estructura o
característica del cuerpo fructífero, llamativa a la vista; por ejemplo: escamas,
verrugas, pelos, espinas, poros (generalmente debajo del sombrero, es muy
importante el contar cuántos hay en un mm), grietas, estrías, viscosidad,
carnosidad, etc.; cambios de color de cualquiera de las partes, ya sea al
maltratarse o cortarse (para ello se corta el hongo con una navaja y se observa
si cambia o no de color); presencio o no de jugo lechoso o látex al cortarse el
hongo; color del látex y si cambia de color al exponerse al aire. Olor del hongo
(principalmente de la “carne”) Sabor de la “carne”, para ello se masticará
suavemente un pequeño fragmento del cuerpo fructífero, se saborea y se
escupe. No existe ningún peligro en probar hongos venenosos, si se
escupe inmediatamente y se enjuaga la boca con agua.
El anillo y la copa que presentan el pie de algunos hongos son estructuras
valiosa para la identificación, pero son muy delicadas y poco durables en el
cuerpo fructífero del hogo que se maltrata por lo que deberán ser estudiadas
en el momento de la recoloección (ver anexo).
4.- Una fracción de la muestra se utilizará para el análisis o la determinación
específica, y la otra para realizar un herbario de hongos que permitirá contar
con material micológico de esa localidad.
Preparación de una esporada
1- Se retira la piel de la seta.
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2. -Se corta el pie del hongo si es que tiene y se coloca el sombrero con las
laminillas hacia abajo, sobre una hoja de papel blanco.
3. -Al cabo de unas horas (8 hrs.) Se levanta el sombrero y se encontraran
sobre el papel depositadas una gran masa de esporas a manera de polvo fino.
Este dato es muy importante para la identificación de muchos hongos. Se
doblará el papel, se sellará y etiquetará, para análisis microscópico posterior.
Secado para herbario
1- Los especimenes grandes y carnosos deben abrirse longitudinalmente y
extenderse o “desdoblarse” sobre la reja o malla de alambre, debajo de la cual
deberá existir una fuente de calor. Cúbrase todo el dispositivo con papel
periódico, para proporcionar un ambiente cálido y libre de humedad, dejando
hendiduras entre los periódicos para permitir el paso del aire a través de la
maya de alambre, y desalojo de la humedad que desprendida por los hongos.
La temperatura más recomendable es entere los 35°C y 37°C.
2. - Ya secos los hongos se depositan en bolsas de papel, que contenga una
etiqueta que indique los datos contenidos en la libreta de campo, así como un
poco de insecticida. Las bolsas se depositan en una caja hermética de plástico
con un poco de deshumidificador dentro de la caja. Retirar el deshumidificador
durante el traslado del material.
3. - Los hongos de tipo leñoso son fáciles de conservar simplemente
limpiándolos, secándolo, y guardándolos convenientemente, con sus datos
respectivos, ya que este tipo de hongo no sufre cambios notables como los
carnosos. , que en el secado pierden su aspecto original.
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Líquenes.
Serán colectados, siempre que sea posible, con una pequeña porción del
sustrato donde se encuentran adheridos. Colóquelos dentro de bolsitas
individuales de plástico y ponga en cada una de ellas los datos
correspondientes. En la libreta de campo además registre los datos del hábitat.
Para conservarlos se limpiarán y secarán, para guardarlos en cajas herméticas
con un poco de naftalina.
Determinación sencilla de algunos rasgos edáficos.
1. -Con la pala extraer una muestra de suelo (que quepa en la palma de la
mano) debajo de la capa de raíces, de cada ambiente visitado.
2. - Humedecer con agua formando una especie de rodillo de 2 cm de ancho
por 8 de largo.
Realice las pruebas que se señalan a continuación:
Textura:
a) Huella
Si en el rodillo quedan grabadas las huellas de los dedos, es indicador de que
el suelo tiene alto contenido de arcilla que revela una relativa abundancia de
nutrientes y una dificultad en el drenaje y en la aeración de los suelos; si se
trata de fondos de cuencas, podría esperarse anegamiento. Si no se graban
las huellas, entonces es posible que se trate de suelos no arcillosos, más
pobres en nutrientes, con mejor drenaje y aireación.
b) Doblado
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Intente doblar el rodillo: si se logra (como plastilina), es que el contenido de
arcilla es alto; Si no, lo contrario es cierto.
c) Morder las partículas
Tome un pedacito de suelo humedecido y muérdase con cuidado. Si se siente
como piedras diminutas duras, se trata de un suelo con cierta cantidad de
arena; por otro lado, si la sensación es la de morder talco, entonces
predominan los limos. Si se siente que se disuelve, está compuesta de arcilla
primordialmente. Lo más común es que los tres tipos de partículas estén
presentes en diferentes proporciones, por lo que hay que desarrollar un poco la
habilidad para diferenciarlas.
d) Manchado
Si el suelo al manejarlo húmedo en las manos deja manchas persistentes, es
indicador de un nivel de arcilla alto.
e) Escuchar
Tomar una pizca de muestra entre los dedos índice y pulgar, estrujándose
cerca del oído para escuchar el sonido que produzcan; si se escucha un
chirrido, es de esperar que el suelo contenga una elevada proporción de arena;
si no se escucha, es que predominan limos y arcillas.
Para las siguientes pruebas se tomará una muestra que se dividirá en cuatro
porciones y se aplicará una prueba a cada una.
Acidez o alcalinidad:
a) Papel pH
A la muestra del suelo, se le agregará agua destilada, se agita y se deja
reposar por 30 min. Después se vuelve a agitar y se pone en contacto con el
papel pH, para determinarlo.
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b) HCL
Se aplicará gotas a la muestra del suelo y se observarán los efectos.
Se establecerá una escala comparativa de cual fue el suelo con mayor
efervescencia y cuál con menos. Registra los resultados en la tabla.
El más reactivo tendrá pH más alcalino y el menos más ácido. Comúnmente la
aplicación de HCL con fines de diagnóstico de suelos es usada para
determinar la presencia de carbonatos, los cuales suelen ser abundantes en
los suelos básicos.
c) Se procederá en la misma forma que el apartado anterior, esta ves
aplicando la misma cantidad de NaOH a un a submuestra de cada tipo de
suelo.
La escala comparativa mostrará que el suelo más alcalino es el que menos
reacciona, mientras que el más ácido es el que presenta mayor efervescencia.
Contenido de materia orgánica:
H2O2
A la última submuestra de suelo de cada ambiente se le aplicará agua
oxigenada, e este caso, la mayor efervescencia la mostrará el suelo que
presente mayor contenido de materia orgánica.
Orden tus observaciones conforme a la siguiente tabla:
Ambiente
Nombre
HCL
NaOH
pH
H2O2
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X = Nula Reactividad
XX = Poca reactividad
XXX = Regular
XXXX = Alta
XXXXX = Muy alta reactividad
Reportar de la manera acostumbrada y entregar de colección biológica.
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BIBLIOGRAFÍA GENERAL
-Becker Georges. 1989 2a. ed. El Gran Libro de las Setas (Hongos y setas de
Europa) Susaeta Ediciones S. A. Madrid, España. 319 pp.
-Deacon J.W., 1988. Introducción Micología Moderna. Limusa Noriega, México.
350 p.
-Gaviño Gonzalo. et al. 1979. Técnicas biológicas selectas de laboratorio y
campo. Limusa. México. 251 pp.
-Guzmán Gastón. 1990.Identificación de los hongos (Comestibles, venenosos y
alucinantes) Limusa –Noriega. México. 451 pp.
-Guzmán G., 1990. Identificación de los Hongos de México. Limusa. México.
424 p.
-Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micología básica aplicada.
Fondo de Cultura Económica. México. 550 pag.
-López M. R., 1995 Micología Médica. Editorial Trillas. México.
-Mille P. S:R:; Parra A. Pérez CH. 1993. Guía para la identificación de.
Invertebrados. Trillas. México 465 pp.
-Suárez G. Ana Isabel, Carmona V. Tomás. 1998. Ecología general. (Manual
de prácticas) Universidad Veracruzana. México. 65 pp.
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ANEXOS
ANEXO I
FORMA DE REPORTE DE PRÁCTICA.
PORTADA
Logotipo de la UAC y de la Facultad
Nombre de la Universidad
Nombre de la facultad
Nombre del programa educativo
Nombre de la asignatura
Grado en el que se imparte
Período escolar en el que se imparte
Nombre del maestro responsable de la asignatura
Nombre del alumno
Fecha de elaboración
NÚMERO DE LA PRÁCTICA
NOMBRE DE LA PRÁCTICA
INTRODUCCIÓN. Incluye justificación y objetivo
MATERIALES Y MÉTODOS UTILIZADOS. Incluye procedimientos,
materiales, equipo, reactivos de laboratorio, muestra biológica.
RESULTADOS OBTENIDOS. En éstos resultados se pueden incluir
dibujos, tablas o gráficas.
OBSERVACIONES Y ANÁLISIS DE RESULTADOS
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO RESUELTO
BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA