v

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah

menganugerahkan kemudahan dan kelancaran sehingga skripsi ini dapat

diselesaikan. Shalawat serta salam semoga senantiasa tercurahkan kepada

Rasulullah SAW beserta keluarga dan sahabatnya hingga akhir zaman. Penuh rasa

syukur, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Pengaruh Pemberian

Kombinasi Fraksi Kurkuminoid Rimpang Curcuma xanthorrhiza Roxb.

dengan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Andrographis

paniculata (Burm.f.) Nees Terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Wistar

Jantan Resisten Insulin sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana

pada Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

Penelitian dan penyusunan skripsi ini dapat diselesaikan oleh penulis dengan

izin Allah SWT dan bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin

mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :

1. Prof. Dr. Marchaban, DESS., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi UGM

atas segala fasilitas dan kemudahan yang telah diberikan selama penulis

melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini.

2. Prof. Dr. Suwidjiyo Pramono, DEA., Apt., selaku dosen pembimbing

utama yang telah memberikan bimbingan, motivasi, bantuan, serta

mendanai penelitian ini.

3. Dr. Agung Endro Nugroho, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing

pendamping yang telah membimbing dan mengarahkan selama

penyusunan skripsi ini.

4. Prof. Dr. Sugeng Riyanto, M.Si., Apt., yang telah memberikan saran

berharga sehingga skripsi ini menjadi lebih berisi.

5. Dr.rer.nat. Nanang Fakhrudin, M.Si., Apt., yang telah memberikan saran

berharga sehingga skripsi ini menjadi lebih berisi.

6. PT. Phapros Semarang yang telah memberikan bantuan bahan penelitian.

7. Pimpinan dan segenap staf Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi

UGM serta LPPT UGM Unit Pengembangan Hewan Percobaan atas

segala kerja sama dan fasilitas selama penelitian.

8. Seluruh staf dan karyawan Perpustakaan Fakultas Farmasi Universitas

Gadjah Mada yang telah memberikan bantuan pencarian literatur selama

penyusunan skripsi.

9. Ibu, Bapak, atas segala doa, dukungan, dan cinta kasih serta adik-adikku

yang telah memberikan semangat.

10. Pak Mohamad Andrie, yang telah memberikan saran dan bantuan literatur

untuk perbaikan skripsi ini.

11. Gina, Yayan, Rasun, Sweta, Zakki, Firman, Nia, Hana, dan Christine atas

kerja samanya selama penelitian.

12. Teman-teman golongan IV: Rasun, Cumcum, Dewi, Ami, Ihsan, Mahda,

Dhika, Putri, Irvan, Zakki, dan Ai Eva.

13. Keluarga Muslim Alumni Padmanaba, atas ukhuwah dan pelajaran hidup

selama 4 tahun yang sangat berharga ini.

vi

14. Saudara-saudara satu lingkaran, tempat saya menimba ilmu, merasakan

ukhuwah, dan berbagi suka duka dari SMP sampai sekarang.

15. Teman-teman KKN Sub Unit Tegalsari, Kendalsari, Klaten atas

pengalaman yang menyenangkan selama KKN.

16. Teman-teman di KMMF UGM dan PIOGAMA yang telah memberi warna

pada kehidupan saya di kampus.

17. Teman-teman seperjuangan skripsi: Amrina, Siti, Astri, atas motivasi dan

bantuannya dalam menyelesaikan skripsi ini.

18. Teman-teman seangkatan Fakultas Farmasi UGM 2008 atas segala

kebersamaan dan kekompakannya.

19. Berbagai pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu, penulis

mengucapkan terima kasih untuk semua bantuan, dukungan, dan doa.

Akhir kata, penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak

kekurangan karena keterbatasan pengetahuan dan pengalaman. Untuk itu penulis

mengharapkan kritik dan saran yang membangun. Semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Yogyakarta, Agustus 2012

Penulis

(

N

o

r

m

a

l

i

t

a

E

k

a

vii

DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL ........................................................................................ i

HALAMAN JUDUL ............................................................................................ ii

HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii

HALAMAN PERNYATAAN ............................................................................. iv

KATA PENGANTAR ......................................................................................... v

DAFTAR ISI ........................................................................................................ vii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... x

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xi

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xii

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiii

INTISARI ............................................................................................................. xiv

BAB I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah ........................................................................... 1

B. Rumusan Masalah .................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ..................................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ................................................................................... 4

E. Tinjauan Pustaka ...................................................................................... 4

1. Temulawak ......................................................................................... 4

a. Sistematika .................................................................................... 4

b. Morfologi ...................................................................................... 5

c. Kandungan kimia .......................................................................... 6

d. Efek farmakologi ........................................................................... 6

2. Sambiloto ........................................................................................... 7

a. Sistematika .................................................................................... 7

b. Morfologi ...................................................................................... 8

c. Kandungan kimia .......................................................................... 9

d. Efek farmakologi ........................................................................... 9

3. Ekstraksi .............................................................................................. 10

4. Ekstrak ................................................................................................ 11

5. Kromatografi lapis tipis ...................................................................... 12

6. Diabetes melitus ................................................................................. 13

a. Definisi .......................................................................................... 13

b. Klasifikasi ..................................................................................... 14

c. Diagnosis ....................................................................................... 16

d. Patogenesis diabetes melitus tipe 2 resisten insulin ...................... 17

e. Metabolisme lemak pada diabetes ................................................ 19

7. Kolesterol ........................................................................................... 20

8. Hiperlipidemia..................................................................................... 22

9. Obat-obat antilipidemik ...................................................................... 24

10. Induksi fruktosa ................................................................................... 25

11. Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan pereaksi GOD-PAP 27

12. Pengukuran kadar kolesterol total darah menggunakan pereaksi

CHOD-PAP ......................................................................................... 28

viii

F. Landasan Teori ......................................................................................... 29

G. Hipotesis .................................................................................................... 31

BAB II. METODOLOGI PENELITIAN

A. Bahan dan Alat Penelitian ......................................................................... 32

1. Bahan penelitian ................................................................................. 32

2. Alat penelitian .................................................................................... 33

B. Jalannya Penelitian .................................................................................... 34

1. Identifikasi tanaman ............................................................................ 34

2. Pembuatan fraksi tak larut heksan ekstrak etanolik herba sambiloto . 34

3. Analisis kualitatif ............................................................................... 35

a. Penetapan kandungan andrografolid dalam fraksi tak larut

heksan ekstrak etanolik herba sambiloto ....................................... 35

b. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid

rimpang temulawak ....................................................................... 36

4. Analisis kuantitatif ............................................................................. 36

a. Penetapan kadar andrografolid dalam fraksi tak larut heksan

ekstrak etanolik herba sambiloto ................................................... 36

b. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid

rimpang temulawak ....................................................................... 36

5. Penetapan dosis sediaan uji ................................................................. 37

6. Induksi resisten insulin ........................................................................ 37

a. Pengelompokan hewan uji ............................................................. 37

b. Pembuatan pakan tinggi lemak dan larutan fruktosa ..................... 38

c. Penetapan kadar glukosa darah preprandial dan kolesterol total

darah .............................................................................................. 38

1) Preparasi serum ...................................................................... 38

2) Penetapan kadar glukosa darah preprandial .......................... 39

3) Penetapan kadar kolesterol total darah ................................... 39

7. Uji aktivitas FKRT, FTLHEEHS, dan kombinasinya terhadap kadar

kolesterol total darah ........................................................................... 40

a. Pengelompokan hewan uji ............................................................. 40

b. Pemberian sediaan uji .................................................................... 40

c. Penetapan kadar glukosa preprandial darah dan kolesterol total

darah .............................................................................................. 41

C. Analisis Data ............................................................................................ 41

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Identifikasi Tanaman ................................................................................. 43

B. Pembuatan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto 40

C. Analisis Kualitatif ..................................................................................... 45

1. Penetapan kandungan andrografolid dalam fraksi tak larut heksan

ekstrak etanolik herba sambiloto .......................................................... 45

2. Penetapan kandungan kurkumin dalam fraksi kurkuminoid rimpang

temulawak ............................................................................................. 47

D. Analisis Kuantitatif ................................................................................... 49

1. Penetapan kadar andrografolid dalam fraksi tak larut heksan ekstrak

etanolik herba sambiloto ..................................................................... 49

ix

2. Penetapan kadar kurkumin dalam fraksi kurkuminoid rimpang

temulawak ........................................................................................... 50

E. Uji Farmakologi ........................................................................................ 51

1. Induksi resisten insulin ........................................................................ 51

a. Penetapan kadar glukosa darah preprandial ................................. 52

b. Penetapan kadar kolesterol total darah .......................................... 53

2. Pengaruh pemberian FKRT, FTLHEEHS, dan kombinasinya

terhadap kadar kolesterol total darah .................................................. 55

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN ........................................................................................ 59

B. SARAN .................................................................................................... 59

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 60

LAMPIRAN ......................................................................................................... 65

x

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Rimpang Temulawak ....................................................................... 5

Gambar 2. Struktur Kurkuminoid pada Spesies Curcuma ................................ 6

Gambar 3. Herba Sambiloto .............................................................................. 8

Gambar 4. Struktur Kimia Andrografolid ......................................................... 9

Gambar 5. Struktur Kimia Kolesterol ................................................................ 20

Gambar 6. Sintesis Kolesterol di Dalam Tubuh ................................................ 21

Gambar 7. Transpor Kolesterol di Dalam Tubuh .............................................. 22

Gambar 8. Metabolisme Fruktosa di Hati .......................................................... 26

Gambar 9. Pembentukan Senyawa Kuinoimin pada Reaksi Glukosa dengan

Reagen GOD-PAP ........................................................................... 27

Gambar 10. Pembentukan Senyawa Kuinoimin pada Reaksi Kolesterol dengan

Reagen CHOD-PAP ........................................................................ 28

Gambar 11. Kromatogram Ekstrak Herba Sambiloto .......................................... 46

Gambar 12. Kromatogram Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak dan

Standar Kurkumin ............................................................................ 48

Gambar 13. Kadar Glukosa Darah Preprandial Setelah 35 Hari Pemberian

Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa ..................................................... 52

Gambar 14. Kadar Kolesterol Total Darah Setelah 35 Hari Pemberian Diet

Tinggi Lemak dan Fruktosa ............................................................. 53

Gambar 15. Histogram Hati Hewan Uji .............................................................. 54

Gambar 16. Kadar Kolesterol Total Darah Rata-rata Hari Ke-0, 35, 60, dan 75 56

xi

DAFTAR TABEL

Tabel I. Kategorisasi Kadar Glukosa Darah ................................................... 17

Tabel II. Komposisi Larutan Uji Kadar Glukosa Darah .................................. 39

Tabel III. Data hRf dan Warna Bercak Standar Andrografolid dan Ekstrak

Herba Sambiloto yang Diperoleh dari KLT ....................................... 47

Tabel IV. Data hRf dan Warna Bercak Standar Kurkumin dan Fraksi

Kurkuminoid Rimpang Temulawak yang Diperoleh dari KLT ......... 49

Tabel V. Kadar Andrografolid dalam Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto ....... 50

Tabel VI. Kadar Andrografolid dalam Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak

Etanolik Herba Sambiloto .................................................................. 50

Tabel VII. Kadar Kurkumin dalam Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak . 51

Tabel VIII. Persentase Perubahan Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-60 dan

75 ........................................................................................................ 57

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi Tanaman ....................................... 65

Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Ekstrak Etanolik dan Fraksi Tak Larut

Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto ................................... 66

Lampiran 3. Densitogram Standar Andrografolid, Ekstrak Etanolik Herba

Sambiloto, dan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba

Sambiloto ........................................................................................ 67

Lampiran 4. Densitogram Standar Kurkumin dan Fraksi Kurkuminoid

Rimpang Temulawak ...................................................................... 69

Lampiran 5. Perhitungan Kadar Andrografolid Ekstrak Etanolik Herba

Sambiloto dan Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba

Sambiloto ....................................................................................... 71

Lampiran 6. Perhitungan Kadar Kurkumin Fraksi Kurkuminoid Rimpang

Temulawak .................................................................................... 72

Lampiran 7. Pembuatan Pakan Tinggi Lemak ................................................... 73

Lampiran 8. Pembuatan Larutan Fruktosa .......................................................... 75

Lampiran 9. Perhitungan Volume Pemberian dan Penyiapan Sediaan Uji ........ 72

Lampiran 10. Hasil Analisis Statistik Kadar Glukosa Darah Preprandial Hari

Ke-0 (Baseline) Semua Kelompok ................................................. 77

Lampiran 11. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari Ke-0

(Baseline) Semua Kelompok .......................................................... 78

Lampiran 12. Hasil Analisis Statistik Kadar Glukosa Darah Preprandial Hari

ke-0 dan Hari ke-35 Kelompok Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa . 79

Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-0

dan Hari ke-35 Kelompok Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa ......... 80

Lampiran 14. Hasil Analisis Statistik Berat Badan Tikus .................................... 81

Lampiran 15. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-60 . 82

Lampiran 16. Hasil Analisis Statistik Kadar Kolesterol Total Darah Hari ke-75 . 84

Lampiran 17. Hasil Analisis Statistik Persentase Perubahan Kadar Kolesterol

Total Darah (PPKK) ....................................................................... 86

Lampiran 18. Kadar Glukosa Darah Preprandial (mg/dL) .................................. 88

Lampiran 19. Kadar Kolesterol Total Darah (mg/dL) .......................................... 89

Lampiran 20. Persentase Perubahan Kadar Kolesterol Total Darah (%) .............. 91

Lampiran 21. Data Berat Badan Hewan Uji ......................................................... 93

Lampiran 22. Surat Keterangan Selesai Penelitian Skripsi di Bagian Biologi

Farmasi Fakultas Farmasi UGM ..................................................... 95

Lampiran 23. Surat Keterangan Selesai Penelitian Skripsi di LPPT UGM Unit

Pengembangan Hewan Percobaan .................................................. 96

xiii

DAFTAR SINGKATAN

µL : mikroliter

ACC : Acetyl CoA Carboxylase

ANOVA : Analysis of Variance

dl : desiliter

FAS : Fatty Acid Synthase

FKT : Fraksi Kurkuminoid Rimpang Temulawak

FTLHEEHS : Fraksi Tak Larut Heksan Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto

g : gram

GLUT-2 : Glucose Transporter-2

HDL : High Density Lipoprotein

HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA

ILDL : Intermediate Low Density Lipoprotein

kg BB : kilogram berat badan

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

LDL : Low Density Lipoprotein

mg : miligram

mL : milliliter

PAI-1 : Plasminogen Activator Inhibitor type 1

PPAR-α : Peroxisome Proliferator-Activated Receptor- α

SCD : Stearoyl CoA Desaturase

SPSS : Statistical Product and Service Solution

SRE : Sterol Responsive Elements

SREBP : Sterol Regulatory Element Binding Protein

TLC : Thin Layer Chromatography

UV : ultraviolet v/v :

volume/volume

VAT : Visceral Adipose Tissue

VLDL : Very Low Density Lipoprotein

WHO : World Health Organization

xiv

INTISARI

Hiperkolesterolemia merupakan kondisi yang sering terjadi pada penderita

diabetes melitus tipe 2 resisten insulin. Hiperkolesterolemia dapat meningkatkan

risiko terjadinya penyakit kardiovaskular yang memerlukan pengobatan jangka

panjang sehingga dibutuhkan terapi dengan efek samping yang relatif kecil.

Penelitian menggunakan bahan alam terus dilakukan untuk mencari terapi yang

efektif dengan efek samping relatif kecil. Oleh karena itu dilakukan penelitian

menggunakan kombinasi fraksi kurkuminoid rimpang temulawak (FKRT) dan

fraksi tak larut heksan ekstrak etanolik herba sambiloto (FTLHEEHS).

Induksi resisten insulin dilakukan dengan memberikan diet tinggi lemak dan

fruktosa 180 mg/100 g BB per oral satu kali sehari. Hewan uji dibagi dalam 5

kelompok masing-masing sebanyak 7 ekor tikus, yaitu kontrol normal air suling,

FKRT 45 mg/200 g BB, FTLHEEHS 58,55 mg/200 g BB, kombinasi FKRT 45

mg/200 g BB dengan FTLHEEHS 58,55 mg/200 g BB, dan kontrol positif

metformin 9 mg/200 g BB. Sediaan uji diberikan selama 40 hari dengan tetap

memberikan diet tinggi lemak dan fruktosa. Kadar kolesterol total darah diukur

pada hari ke-0, 35, 60, dan 75.

Analisis perubahan kadar kolesterol total darah dilakukan dengan

membandingkan selisih perubahan kadar kolesterol total darah sebelum dan

sesudah pemberian sediaan uji. Hasil uji ANOVA satu jalan tidak menunjukkan

adanya perbedaan bermakna antara kombinasi dengan bentuk tunggalnya. Hal ini

menunjukkan bahwa kombinasi FKRT dengan FTLHEEHS tidak menunjukkan

potensi penurunan kadar kolesterol total darah yang lebih efektif dibanding bentuk

tunggalnya.

Kata kunci: kurkuminoid, sambiloto, kolesterol total, resisten insulin