REVIEWChromogranin J: kerentanan baru gen untuk pentinghipertensiBhavani S. SahuParshuram J. Sonawane Nitish R. MahapatraDiterima: 31 Agustus 2009 / Revisi: 6 November 2009 / Diterima: 6 November 2009 / Diterbitkan online: 27 November 2009? Birkha pengguna Verlag, Basel / Swiss 2009Abstrak Chromogranin A (CHGA) adalah ubiquitouslydinyatakan dalam sel sekresi dari endokrin, neuroendokrin,dan jaringan saraf. Meskipun protein ini telah lamatelah dikenal sebagai penanda untuk tumor neuroendokrin, perannyadi negara-negara penyakit kardiovaskular termasuk hipertensi esensial(EH) baru-baru ini telah diakui. Ia bertindak sebagaiprohormon sehingga menimbulkan peptida bioaktif seperti vasostatin-Aku (manusia CHGA1-76) dan catestatin (manusiaCHGA352-372) yang menunjukkan beberapa regulasi kardiovaskularfungsi. CHGA selesai-dinyatakan tetapi catestatin adalahberkurang pada EH. Selain itu, varian genetik pada promotor,catestatin, dan 30-diterjemahkan daerah manusiaMengubah aktivitas gen CHGA otonom dan tekanan darah.Konsisten dengan temuan ini ablasi, target inigen penyebab hipertensi arteri parah dan ventrikelhipertrofi pada tikus. Transgenik ekspresi manusiaCHGA gen atau administrasi eksogen dari catestatinmengembalikan tekanan darah pada tikus. Dengan demikian, akumulasibukti menetapkan CHGA sebagai kerentanan barugen untuk EH.Kata Kunci Chromogranin A? Catestatin? Vasostatin?Kardiovaskular? Tekanan darah? Anti-hipertensi?Genetika? HipertensiPengenalanHipertensi esensial (EH) merupakan masalah kesehatan masyarakat utamakarena prevalensi tinggi (30-45% *) di perkotaan masalahpopulasi [1-3]. Ini adalah gangguan, asimtotik kronis yangmemberikan kontribusi untuk komplikasi kesehatan yang serius termasukinfark miokard, gagal jantung kongestif, stroke, endstagepenyakit ginjal (ESRD), dan kerusakan retina. EH adalahdianggap sebagai sifat''''genetik kompleks disebabkan oleh beberapakerentanan gen dan gaya hidup tidak sehat yang melibatkangen-gen serta interaksi gen-lingkungan yangmenentukan onset dan keparahan penyakit [2, 4, 5].Berbagai pendekatan seperti calon-gen pendekatan,genome scan,''antara fenotipe''pendekatan, dan perbandingan genomik pada model hewandigunakan untuk mengidentifikasi gen yang mendasari patogenesisEH. Gen-gen kerentanan utama untuk EH diketahui sejauhmilik beberapa jalur molekuler / sistem termasuksistem renin-angiotensin-aldosteron yang mempengaruhivolume vaskular dan nada homeostasis vaskuler, simpatiksistem saraf yang memodulasi denyut jantung, jantungkontraksi, dan tonus vaskular, dan kallikrein-kininsistem yang mempengaruhi penanganan garam dan nada vaskular ginjal, sebagaiserta faktor yang terlibat dalam fungsi endotel dan vasoactivityseperti endotelin dan oksida nitrat [2, 5-8].Namun, hanya pemahaman parsial yang mendasarimekanisme telah dicapai. Memang, belum jelasberapa banyak gen yang terlibat dalam patogenesis EHdan bagaimana mereka berinteraksi antara mereka sendiri dan gen lainnya.Oleh karena itu, mencari dasar genetik dari EH sedang berlangsungdalam rangka untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi semua gen kerentanandan molekuler varian yang memodulasi tekanan darah [9 -11].Chromogranin A (CHGA; berat molekul 48 kDa), sebuahdipelajari dengan baik anggota keluarga granin protein, adalahB. S. Sahu? P. J. Sonawane? N. R. Mahapatra (&)Kardiovaskular Genetika Laboratorium,Departemen Bioteknologi,Indian Institute of Technology Madras,Chennai 600036, Indiae-mail: nmahapatra@iitm.ac.inSel. Mol. Hidup Sci. (2010) 67:861-874DOI 10.1007/s00018-009-0208-y Seluler dan Molekular Biologico-disimpan dan co-dirilis dengan katekolamin dari sekretorivesikel di medula adrenal dan postganglionikakson simpatis [12-18]. Ia mengikat dengan kalsium dan katekolamin[19, 20], berinteraksi dengan beberapa proteinjalur sekresi diatur [21], dan memainkan peran penting dalamdengan biogenesis dari sekresi katekolamin yang chromaffinvesikel [22-25]. Selain itu, CHGA juga bertindak sebagai prohormonsehingga menimbulkan beberapa peptida aktif biologis olehpembelahan proteolitik seperti vasostatin-I (humanCHGA1-76,vasodilator), chromacin (manusia CHGA176-197, sebuahanti-mikroba agen), pancreastatin (manusia CHGA250-301,hormon dsyglycemic), dan catestatin (manusiaCHGA352-372, suatu inhibitor poten pelepasan katekolamindari sel dan neuron adrenergik chromaffin, dan antimikrobaagen) [26-31]. Khususnya, plasma CHGA tingkat yangmeningkat pada pasien gagal jantung kronis dan terkait dengankeparahan klinis dan prognosis [32]. Baru-baru ini, beredarCHGA tingkat telah terbukti untuk menjadi independenIndikator prognosis pada pasien dengan miokard yang rumitinfark [33] serta dalam sindrom koroner akut [34].Dalam pandangan ini fungsi intraseluler dan ekstraselulerserta hubungan dengan negara-negara penyakit jantung,kita berhipotesis bahwa CHGA adalah gen kerentanan untukhipertensi. Memang ablasi, sistemik Chga genmenyebabkan peningkatan tekanan darah pada tikus, dan hipertensidalam tikus diselamatkan oleh ekspresi transgenikyang ortolog manusia atau oleh administrasi eksogen daricatestatin [25]. Selain itu, varian DNA pada manusia, dipromotor daerah, di wilayah catestatin peptida, dan30-belum diterjemahkan wilayah (UTR) mengubah aktivitas otonom dantekanan darah [35-37]. Ini dan data eksperimen lainnyadari seluler, molekuler, studi fisiologis, dan klinismenyediakan tautan fenotipik antara CHGA dan EH yangdibahas dalam review ini.Gen struktur dan jaringan-spesifik ekspresi CHGAManusia CHGA gen (MIM 118910, nomor AksesiNM_001275) mencakup 12.194 bp di lokus 14q32.12 danterdiri dari 8 ekson sehingga menimbulkan 2043-nukleotidatranskrip, dimana 1.374 nukleotida yang diproses untukpenerjemahan menjadi protein residu 457 (memiliki 18residu peptida sinyal), sementara 260 dan 409 bp tetap sebagai50 - dan 30 - UTRs, masing-masing (Gambar 1; [38, 39]). Paratikus chomogranin Sebuah gen (jumlah AksesiNM_007693) terletak di kromosom 12 memiliki sejenisorganisasi genom dan diterjemahkan ke residu 463polipeptida juga memiliki residu sinyal peptida 18[40]. Meskipun manusia dan tikus berbeda dalam CHGAurutan primer maupun panjang, keduanya memiliki tinggiisi dari asam residu asam amino (terlibat untukketerlibatan protein ini dalam memilah dan kemasanhormon dan neuropeptida menjadi butiran sekretori[12]) dan tingkat tinggi konservasi di N-dan Cterminaldomain (disarankan menjadi penting untuk prohormon-seperti properti protein [41]).CHGA adalah ubiquitously disajikan dalam sel sekresi dariendokrin, neuroendokrin, dan jaringan saraf [12]. Dalammanusia normal, medula adrenal dilaporkan menjadijaringan utama sumber CHGA sementara lainnya neuroendokrinjaringan hanya dimiliki 0,04-25% dari immunoreactivity yangGambar. 1 Skema organisasi gen CHGA manusia danprotein produk. Top Panel gen CHGA manusia mencakup12.194 bp dalam kromosom 14 (dari posisi basis 92459198 untuk92471391) terdiri dari 8 ekson yang dipisahkan oleh tujuh intron (UCSCGenome Browser refGene NM_001275). UTR diterjemahkan wilayah,Ex ekson, intron Int. Panel bawah produk protein diterjemahkanterdiri dari 457 asam amino, di mana 18 residu pertama berfungsi sebagaisinyal peptida (SP). Protein dewasa mengalami proteolitikpembelahan untuk menghasilkan peptida bioaktif beberapa. Lokalisasi darivasoaktif peptida vasostatin-I (1-76 asam amino; VST) danrilis katekolamin hambat peptida catestatin (amino 352-372asam; CST) ditandai. Skema ini tidak digambarkan menurut skala862 B. Sahu S. et al.ditemukan di medula adrenal, urutan peringkat konsentrasi(Lg / g berat basah) sedang adrenal medulla [hipofisis [pankreas [lambung [kecil usus (jejunoileum) [otak (frontal korteks) [paratiroid [tiroid [42]. Sebuahserupa spesifik jaringan pola ekspresi CHGA adalahdiamati dalam model''tikus''manusiawi mengekspresikanmanusia CHGA gen bukan ortolog tikus [25].Konsisten dengan temuan ini, tikus transgenik mengekspresikantikus chga promotor-wartawan luciferase kunang-kunang juga ditampilkanneuroendokrin-jaringan tertentu ekspresitransgen [43]. Baru-baru ini, CHGA telah terdeteksi ditikus bulbospinal neuron di medula ventrolateral rostral,inti kardiovaskular kunci dari batang otak [44].CHGA juga dinyatakan dalam berbagai jenis sel jantung.Sebagai contoh, studi mengungkapkan imunohistokimiakehadiran CHGA dalam butiran yang keluar dari nonadrenergicmyoendocrine sel atrium jantung tikus. Khususnya,CHGA co-lokal dengan peptida natriuretik atrium dibutiran ini myoendocrine dan muncul untuk menjalaniproteolitik pengolahan untuk tingkat yang lebih besar daripada dimedula adrenal [45]. Selain itu, imunohistokimiapenelitian di bagian serial dari atrium dan ventrikeldaerah jantung tikus menunjukkan lokalisasi CHGAbersama dengan subunit calcium channel alpha 1E diSerat Purkinje dari kedua atrium dan ventrikel [46]. Konsistendengan temuan ini, yang diturunkan CHGA vasostatincontainingpeptida yang diidentifikasi pada ekstrak jantung tikus,menunjukkan peran mereka dalam fisiologi jantung oleh / otokrinmekanisme parakrin [47]. Baru-baru ini,meyakinkan bukti produksi dan pelepasan CHGAdalam ventrikel manusia miokardium disediakan olehPieroni et al. [48]. Mereka mengukur [0,5 lg dari CHGA / gventrikel kiri jaringan miokard pada pasien dengan dilatasikardiomiopati hipertrofik dan dengan ELISA menggunakan empatberbeda monoklonal antibodi. Hal ini juga menunjukkan bahwaCHGA co-lokal dengan peptida otak nartiuretic(BNP) di kardiomiosit ventrikel dan bahwa adakuat korelasi antara CHGA dan BNP beredartingkat. Walaupun protein CHGA tidak terdeteksi dalammiokard yang normal jaringan dengan imunohistokimia danELISA, kehadiran mRNA CHGA di miokardium yang normaldikonfirmasi dengan RT-PCR [48]. Miokardkelebihan produksi CHGA dapat berkontribusi untuk peraturanremodeling jantung pada pasien dengan infark miokard,cardiomyopathies, dan gagal jantung. Hal ini jugaPerlu dicatat bahwa CHGA dan fragmen proteolitik nya,termasuk vasostatin-I dan catestatin, telah terdeteksidalam neutrofil polimorfonuklear (PMN) [30, 49] bahwadiketahui menumpuk di situs peradangan. Secara konsisten,over-ekspresi CHGA dan positifkorelasi dengan penanda peradangan procalcitonindan C-reactive protein dalam serum baru-baru ini telah dilaporkanpada pasien dengan respons inflamasi sistemiksindrom [50]. Observasi ini menunjukkan peran yang mungkinuntuk CHGA dan / atau yang peptida-derivatif dalam inflamasitanggapan dan modulasi lokal fungsi jantung.Beredar CHGA level meningkat pada hipertensidan penyakit jantung negaraKarena CHGA adalah ubiquitously didistribusikan dalam padat-coresekresi butiran dari sistem endokrin dan sarafdan co-disekresikan dengan katekolamin dan neuropeptidake dalam sirkulasi, mungkin berfungsi sebagai indikator berharga darisympathoadrenal kegiatan di bawah kedua fisiologis dankondisi patologis [12]. Memang, konsentrasi plasma CHGAberkorelasi dengan tingkat pelepasan katekolamin [51],menunjukkan bahwa pengukuran tingkat CHGA dapat menghasilkanwawasan ke dalam patogenesis EH. Pada manusia normal,plasma CHGA jenjang telah dilaporkan berkisar dari 0,5sampai 5 nM dalam literatur (baru-baru terakhir dalam [41]). Sepertiberbagai konsentrasi mungkin karena berbagai perbedaanantara studi yang berbeda, termasukspesifisitas antibodi yang digunakan untuk radioimmunoassays.Menariknya, bahkan saat pengumpulan (pagi,sore, atau malam) dari sampel darah juga menyebabkan signifikanperbedaan (sampai dengan 40% peningkatan dari pagi sampaimalam) pada populasi Italia individu sehatmencerminkan ritme sirkadian dalam plasma CHGA [41, 52].Meskipun studi ini [52] tidak mendeteksi perbedaan dalamplasma CHGA tingkat antara dua kelompok, fenotipikhubungan antara CHGA dan EH telah berulang kalidiamati dalam penelitian lain [53-56]. Khususnya, dua studi diCalifornia Selatan menunjukkan peningkatan signifikan populasi(* 4,1 * 2,7 vs nM [54] dan * 2,1 * 1,3 vs nM [56])konsentrasi plasma CHGA di EH dibandingkan dengannormotensif kontrol. Para releasable sympathoadrenaltoko vesikuler dari CHGA juga telah diamatimeningkat pada EH [56]. Selain itu, penelitian pada subyek kembarditampilkan signifikan heritabilitas dalam konsentrasi plasma CHGA[37, 56]. Konsisten dengan temuan ini dalammanusia, ekspresi gen ini diamati secara signifikanlebih tinggi pada kelenjar adrenal model tikus dan mousehipertensi genetik [57-59], mendukung fenotipikhubungan antara CHGA tinggi dan EH. Namun,mengingat bahwa jumlah orang yang diselidiki dalamlaporan masih kecil, studi lebih lanjut pada populasi besardiperlukan untuk menetapkan hubungan antara plasmaCHGA tingkat dan EH.CHGA konsentrasi serum menunjukkan peningkatansubstansial (sampai 10-20 nM tergantung pada tingkat keparahanpenyakit) pada gagal jantung kronis dalam studi yang terdiri dari160 Italia subyek [32]. Para CHGA tingkat di sirkulasijuga dilaporkan meningkat pada rumitinfark miokard pada pasien 217 termasuk dalamChromogranin Sebuah mengatur tekanan darah 863OPTIMAAL Trial (Optimal di Myocardial Infarction denganAntagonis Angiotensin II yang losartan) percobaan [33] dan dalamSindrom koroner akut dalam populasi Swedia1.268 pasien [34]. Studi ini mendokumentasikan bahwaberedar tingkat CHGA dapat berfungsi sebagai independenIndikator prognosis pada pasien dengan miokard yang rumitinfark [33] serta merupakan prediktor independen darimortalitas jangka panjang dan rawat inap gagal jantung disindrom koroner akut [34]. Plasma CHGA tingkatjuga diamati secara signifikan lebih tinggi (* 3.0 vs1,3 nM) pada pasien dengan kardiomiopati dilatasi dankardiomiopati hipertrofik dari kontrol di Italiapopulasi [48]. Yang beredar meningkat CHGA tingkat dipasien ini dianggap signifikan disumbangkan olehkardiomiosit rilis, dengan asumsi konstan CHGA darisel miokard [48] dan mempertimbangkan paruh plasmadari CHGA menjadi 18,4 min [60].Dengan demikian, peningkatan konsentrasi CHGA dalam sirkulasiterkait dengan EH, infark miokard, dankardiomiopati, mencerminkan peran penting dari protein inisebagai biomarker untuk menyatakan penyakit kardiovaskular.Sistemik penghapusan chga dalam hasil tikus dalam perubahanfisiologi otonom / kardiovaskularUntuk mempelajari peran fisiologis CHGA pada umumnya dankhusus apakah itu memainkan peran dalam regulasi darahtekanan, model tikus KO dihasilkan oleh sistemikpenghapusan chga gen menggunakan loxP-Cre rekombinasistrategi [25]. KO homozigot (chga-/ -) tikus yang ditampilkanhipertensi berat [sampai dengan 44 mmHg lebih tinggi *tekanan darah sistolik (SBP) dan sampai 26 mmHg *tinggi tekanan darah diastolik (DBP)] dibandingkan denganwild type (chga /??) tikus. Heterozigot KO(Chga / -?) Tikus hipertensi juga ditampilkan dengan darahtekanan nilai lebih dekat dengan orang-orang untuk chga-/ - tikus, menunjukkanbahwa kedua salinan gen sangat penting untuk menjagayang normal tekanan darah. Dari catatan, tekanan darah tinggidi chga-/ - tikus diselamatkan ke normal dengan humanisasi''''tikus-tikus ini pada lokus CHGA (oleh generasichga-/-CHGA /?? tikus yang mengandung dua salinan dari manusiaCHGA gen), menunjukkan bahwa gen manusia mungkinidentik dengan fungsi ortolog murine, setidaknya dengansehubungan dengan pemeliharaan tekanan darah [25].Mengingat SBP dan DBP ditinggikan di chga-/ - tikus,ventrikel kiri (LV) morfologi dalam tikusdipelajari oleh ekokardiografi transtorakal. Signifikanpeningkatan ketebalan dinding LV (baik septum dan gratisdinding), massa ventrikel kiri serta LV diameter (ronggaukuran) pada kedua sistol diastol akhir dan akhirnya terdeteksi dichga-/ - tikus [25]. Meskipun mekanisme yang mendasariseperti perubahan fisiologi jantung pada KO initikus belum dipelajari, meningkat secara substansialafterload akibat hipertensi parah pada tikus dapat menyebabkandengan hipertrofi LV dan perkembangan ke rongga LVpelebaran.Asosiasi alami genetik manusiavarian CHGA dengan variasi tekanan darahRe-sequencing gen CHGA telah menyebabkan penemuanbeberapa variasi promotor, 50-UTR, daerah pengkode,30-UTR, serta daerah berdekatan dengan intronic ekson[61]. Beberapa dari mereka telah ditemukan varian untuk mengubah darahtekanan dan aktivitas otonom dalam populasi manusia(Tercantum dalam Tabel 1 dan dijelaskan di bawah).Varian Gly364Ser dari catestatin manusia terjadi di* Frekuensi alel 3% menyebabkan perubahan mendalam dalam jantungaktivitas dalam dua populasi California Selatan [62]. Operatordari alel 364Ser ditampilkan baroreseptor meningkatsensitivitas, meningkatkan aktivitas parasimpatis jantung, danpenurunan aktivitas simpatis jantung. Konsisten denganditingkatkan sensitivitas baroreseptor, respon pressor adalahsecara signifikan kurang dalam Gly heterozigot / Ser bila dibandingkandengan Gly / Gly homozigot berikut stres dingin [62]. ParaGly364Ser varian juga dikaitkan dengan signifikanperubahan dalam tekanan darah beristirahat. Sebagai contoh, Gly / Glyhomozigot ditampilkan * 5-6 mmHg dan DBP lebih tinggi* SBP 13 mmHg lebih tinggi daripada Gly / Ser heterozigot [62].Menariknya, tekanan ini lebih rendah efek darah (dan karenanyamengurangi risiko mengembangkan hipertensi) untuk 364Sergenotipe adalah terbatas pada laki-laki [62]. Pengamatan inidapat dijelaskan oleh aksi peptida ini di tingkat pusatnikotinat-sinapsis kolinergik dalam inti tractus yangsolitarius di batang otak, meskipun molekul yang tepatMekanisme yang mendasari perubahan tersebut dalam kardiovaskularfungsi yang terkait dengan varian Gly364Ser biasadari catestatin masih harus dijelaskan.Baru-baru ini, dua studi di Southern California populasijuga dilakukan untuk mengeksplorasi hubungan dari setiapvariasi umum genetik pada lokus CHGA dengan peraturantekanan darah.Satu kasus-kontrol studi difokuskan pada promotor CHGAvarian dalam 919 subyek: hipertensi 204 dan 715 normotensives[36]. Diamati bahwa varian G-462ABP diperkirakan beristirahat / basal dalam populasi dengan Galel menampilkan SBP dan DBP lebih tinggi [36]. Menariknya,G / genotipe A (heterozigositas) dikaitkan denganSBP dan DBP lebih tinggi dari G / G dan A / A genotipe [36],heterosis menunjukkan molekul [63]. Dari catatan, dalam kohortdidominasi normotensif kembar pasangan, yang paling umumpromotor haplotype TTGTC (ditetapkan sebagai''A''haplotypeyang berisi alel G-462, ditunjukkan dalam huruf tebal; alelfrekuensi * 57%) yang ditampilkan lebih tinggi pasca-dingin DBP stres864 B. Sahu S. et al.dibandingkan dengan yang lain CGATA haplotype umum (yang ditunjuksebagai haplotype''B''; alel frekuensi * 23%),menyarankan haplotype promotor A sebagai faktor risikogenotipe untuk EH [36].Bagaimana mungkin varian ini promotor CHGA berperandalam kontrol BP? Laporan sebelumnya didokumentasikan bahwa baikhipertensi dan masih-normotensif subyek dengan keluargariwayat hipertensi (maka risiko genetik) mungkin menampilkandiubah fungsi otonom dan ekspresi CHGA [54, 64].Memang, CHGA haplotype A (mengandung G-462alel)-luciferase wartawan plasmid menunjukkan ekspresi yang lebih tinggidari gen reporter dari haplotype B-luciferaseplasmid dalam sel PC12 adrenal chromaffin reporter danAtT20 corticotrophe hipofisis sel [36]. Konsisten denganpengamatan ini, promotor CHGA bantalan G-462alel ditampilkan kegiatan * 25% lebih tinggi dari-462Aalel pada latar belakang haplotype A [36], jelasmenunjukkan perubahan ekspresi gen oleh umumTabel 1 CHGA SNP dan haplotype terkait dengan variasi pada tekanan darahSNP atau haplotype(Lokasi, domain)Studi populasi (s) Associated fenotipe (s) ReferensiT / C (pada -1.014 bp promotor) Kembar (kebanyakan normotensif)keturunan EropaAlel C diperkirakan lebih rendah postcoldstres DBP risiko (lebih rendahmengembangkan hipertensi)[36]T / G (di -988 bp promotor) Kembar (kebanyakan normotensif)keturunan EropaAlel G dikaitkan denganrendah stres pasca-dingin DBP(Risiko lebih rendah menderitahipertensi)[36]G / A (di -462 bp promotor) Kembar (kebanyakan normotensif)keturunan EropaHipertensi dibandingkan normotensif(* 90% Eropa dan * 10%Ancestries Meksiko)Alel Sebuah diperkirakan lebih rendah postcoldstres DBP risiko (lebih rendahmengembangkan hipertensi)G / A genotipe (heterozigot)diperkirakan lebih tinggi SBP dan DBPlebih dari G / G dan A / A genotipe[36]C / T (di? 11.825 bp sehubungan dengansitus topi, yakni pada 87 bp 30? -UTR)Kembar (kebanyakan normotensif)keturunan EropaHipertensi dibandingkan hipotensiorang-orang keturunan EropaAlel C dikaitkan dengan tinggiSBP setelah dingin-stres (lebih tinggibesarnya pada pria daripada wanita)C / C genotipe diprediksi lebih tinggibasal SBP dan DBP dari C / T atauT / T genotipe, terutama dipria[37]G / A (pada 9559 bp ekson 7?;Variasi asam aminoGly364Ser)Hipertensi dibandingkan normotensifdan hipotensi orangEropa keturunanGly / Ser heterozigot ditampilkanrendah stres pasca-dingin BP dariGly / Gly homozigot;Signifikan lebih rendah beristirahat BPnilai dalam Gly / Ser heterozigotlaki-laki daripada Gly / Gly homozigot(Ser sebagai pelindung alel pada pria)[62]Haplotype CGATA (yang terlibatSNP T-1014C, T-988G, G-462A, T-415C dan C-89A dipromotor)Kembar (kebanyakan normotensif) dariEropa keturunanTekanan darah menumpulkan respon terhadapdingin stres risiko (lebih rendahmengembangkan hipertensi)[36]Haplotype GGCC (SNP yang terlibat-462 G di promotor, 246Glu / G[Di? 8.540 bp] di Ekson 6,Arg381 / C [pada 9610 bp?] Diekson 7,? 87C dalam 30-UTR)Hipertensi dibandingkan hipotensiorang-orang keturunan EropaDosis-ketergantungan (berdasarkan pada copynomor) diprediksi lebih tinggi DBPpada pria[37]Haplotype ATC (SNP yang terlibatG-462A, T-415C dan C-89A dipromotor)Hipertensi-ESRD pasienversus kontrol Afrikaketurunan* Resiko 2,6 kali lipat lebih tinggi darihipertensi[97]Haplotype TC (SNP yang terlibatC? 87T di 30-UTR danG12602C dalam 30-end)Hipertensi-ESRD pasienversus kontrol Afrikaketurunan* Resiko 2,7 kali lipat lebih tinggi darihipertensi[97]Posisi dasar yang nomor (?/-) sehubungan dengan tutup (inisiasi transkripsi) situsBP tekanan darah, tekanan darah diastolik DBP, SBP sistolik tekanan darah, akhir stadium penyakit ginjal ESRDChromogranin Sebuah mengatur tekanan darah 865polimorfisme promotor. Seperti kontrol transkripsiCHGA oleh varian promotor mungkin merupakan titik kontrol awaldalam pengembangan risiko kardiovaskular dalam pandanganperan penting CHGA dalam pembentukan katekolaminvesikel penyimpanan serta dalam regulasi pemancarrilis ke sirkulasi [22, 24, 25].Individu lain studi diselidiki dengan ekstrimtekanan darah: 189 dan 175 pria dan wanita hipertensidibandingkan 281 dan 383 laki-laki dan perempuan hipotensi [37]. Inisubyek dipilih berdasarkan DBP mereka: inklusikriteria menjadi nilai-nilai DBP dari C96 dan B61 mm untuk priawhileC92 andB59 mmfor perempuan, sehingga tinggi dan darah rendahkelompok penekan berbeda oleh lebih dari 33 mmHg DBP. Itumenemukan bahwa varian genetik umum di UTR CHGA(C 87T?) Sangat terkait dengan EH, terutama dilaki-laki. Subyek dengan C / C genotipe ditampilkan sampai ke * 12 dan* 9 mmHg lebih tinggi SBP dan DBP, masing-masing, dari yangdengan T / T genotipe. Yang paling umum GGCC haplotype(Terdiri dari promotor G-462A, coding exon6 Glu [-G] 246Asp, coding exon7 Arg [C] 381Trp dan 30-UTR? C 87T SNP; terjadi pada frekuensi * 55%) pada populasi inidosis-ketergantungan (dari 0 1 copy?? 2 salinan)DBP diprediksi lebih tinggi pada laki-laki [37], sehingga menunjukkan kemajuanelevasi DBP oleh alel 87C dalam konteks?GGCC haplotype. Terutama, alel? 87C juga dikaitkandengan konsentrasi plasma secara signifikan lebih tinggiCHGA [37], pengamatan yang konsisten dengan berlebih yangdari CHGA di EH seperti yang dilaporkan dalam studi sebelumnya [54,56, 64]. Selain itu, varian C 87T? Juga memprediksi darahtekanan respon terhadap stres dingin di pasangan kembar normotensif:alel C yang dikaitkan dengan darah basal yang lebih tinggitekanan dalam populasi ditampilkan peningkatan darah sistoliktekanan respon terhadap stres dengan * 12 mmHg [37], menunjukkansebagai alel faktor risiko untuk EH.Meskipun mekanisme rinci oleh yang ini 30-UTRSNP mengubah tekanan darah tidak diketahui, mirip dengankasus haplotype promotor''Sebuah''(dibahas di atas),ini mungkin dimediasi oleh perubahan ekspresi CHGAkarena CHGA adalah tombol pengatur sympathochromaffinkegiatan [22, 24, 25]. Memang, dalam kultur sel chromaffintransfeksi wartawan 30-UTR/luciferase CHGA, ekspresiplasmid menunjukkan aktivitas wartawan * 30% lebih tinggi padakasus alel C (yang berhubungan dengan darah tinggitekanan) dibandingkan dengan alel T [37]. Para diubahCHGA ekspresi pada gilirannya diharapkan untuk memodulasi katekolaminpenyimpanan dan pelepasan proses [24, 25].Konsisten dengan pengurangan ini, saran endogenCHGA ekspresi oleh siRNA dalam sel chromaffin disebabkan ataspenipisan 75% dari vesikel penyimpanan katekolamin [37].Dengan demikian, C-alel (terjadi pada frekuensi * 73%) dariumum 30-UTR varian C? 87T muncul sebagai faktor risikountuk hipertensi pada laki-laki (meskipun tidak pada wanita) dariKeturunan Eropa [37]. Mekanisme iniseks-tergantung efek yang terkait dengan varian genetikmasih harus dijelaskan. Namun demikian, pengaruh inivarian pada lingkungan stres menimbulkan perubahan (sebagaimana dicatatatas) di BP menunjukkan peran patogenetik awal.Kardiovaskular kegiatan peptida CHGAKonsisten dengan tekanan darah tinggi dan hipertrofi LVdari chga-/ - tikus [25], sejumlah penelitian telahmelaporkan bahwa beberapa peptida yang diturunkan CHGA memodulasi kardiovaskularproses dan mungkin memainkan peran penting dalampengaturan tekanan darah. Pada bagian ini, kami akan memberikanikhtisar up-to-date dari literatur yang relevan padadua peptida vasostatin-aku, dan catestatin (Gambar 1) yang telahrelatif baik dipelajari.Vasostatin-aku76-residu ini, N-terminal peptide (yang mengandung tigaamphipathic domain: CHGA1-16, CHGA17-38, danCHGA47-66 [35]; Gambar. 1) sangat dilestarikan divertebrata spesies, dari ikan zebra untuk mamalia, menampilkan* Homologi urutan 80% [65]. Telah dilaporkanuntuk memberi efek modulasi beberapa kardiovaskularrelevansi [66]. Studi pada segmen yang terisolasi dari manusiapembuluh darah (arteri torakalis internal dan saphenavena) menunjukkan bahwa vasostatin-aku menghambat endotelin-1(ET-1) vasokonstriksi yang diinduksi dan bahwa penghambatan iniefek adalah independen dari endotelium dan ekstraselulerkalsium [26, 67, 68]. Vasostatin-aku juga ditampilkan penghambatanefek tekanan-diaktifkan sapi koroner danresistensi arteri adrenal [69, 70]. Mekanismeefek vasodilatasi dari vasostatin-1 masih belum jelas,sebagian karena setiap reseptor permukaan sel belumdiidentifikasi, meskipun berukuran serupa vasostatin-aku mengikatprotein telah terdeteksi pada otot betis mulus aortasel [68] dan sel-sel paratiroid sapi [71]. Namun demikian,keterlibatan subunit Gai / 0 telah disarankanpertusis toksin berkurang karena efek vasodilatasi diarteri koroner [72].Fungsi lain peraturan penting kardiovaskularterkait dengan vasostatin-I adalah perlindungan integritaspenghalang endotel. Telah ditunjukkan bahwa vasostatin-akumenghambat TNF-a-diinduksi pembentukan celah endotel arteri disel asal paru dan koroner sapi,menunjukkan efeknya pada disfungsi endotel pada hambatanvena serta tempat tidur vaskular arteri [73]. Vasostatin-Saya juga sebagian menghambat trombin-dan VEGF-inducedpermeabilitas sel HUVEC [74]. Meskipun reseptoratau target molekul pada sel endotel yang mendasariefek dari vasostatin-aku tidak jelas, keterlibatanp38MAP kinase signaling cascade melalui pertusis toksin866 B. Sahu S. et al.(PTX)-sensitif mekanisme telah dihipotesiskan(Gambar 2; [41]). Namun, karena disfungsi endotel adalahterkait dengan patofisiologi kardiovaskularPenyakit negara termasuk EH [75-77], vasostatin-aku bisamemiliki peran modulator di EH berdasarkan endotel yangpenghalang-fungsi pelindung.Gambar. 2 molekul mekanisme yang masuk akal dari aksi CHGAderivedpeptida vasostatin-I dan catestatin pada berbagai tipe sel. Sebuahskema jalur sinyal utama dimana peptida inimungkin mengerahkan kegiatan kardiovaskular mereka adalah disajikan. Catestatin bertindakpada (1) sel mast untuk merangsang pelepasan histamin vasodilator dalamreseptor-independen cara melalui penghambatan heterotrimeric G-protein[41], (2) sel chromaffin / neuron untuk menghambat pelepasan exocytotic (yangmelibatkan Ca2 bebas intraseluler?-dipicu docking katekolaminpenyimpanan vesikel pada membran sitoplasma) dari katekolamin melaluinon-kompetitif pemblokiran nAChR [29], (3) endocardial endotelsel untuk mengaktifkan pelepasan NO vasorelaxant melalui Protein kinase Bsinyal untuk eNOS [95]. Vasostatin-aku bekerja pada (1) endotelsel endocardial untuk memodulasi pelepasan NO melalui PTX-sensitif Gi /0-Akt-eNOS sinyal serupa dengan catestatin [82] dan (2) endotelsel untuk menghambat disfungsi endotel melalui peraturan bawah p38MAP kinase yang melibatkan fosforilasi subunit Gia perlindungan dari Giprotein, yang menghambat tonically hilir signaling melalui HSP27 dan aparat kontraktil [41]. Endoplasma retikulum ER, GCGolgi kompleks, NM membran nuklir, membran sitoplasma CM,CHGA chormogranin A, Ach Asetilkolin, nAChR nikotinik asetilkolin reseptor, TIDAK oksida nitrat, Akt protein kinase B, eNOSendotel oksida nitrat sintase, PI-3K 3-kinase phosphoinositide,MAPK diaktifkan mitogen protein kinase, protein kejutan panas HSPChromogranin Sebuah mengatur tekanan darah 867Beberapa studi terbaru melaporkan bahwa vasostatin-akujuga exerts inotropy miokard negatif (yaitu, penghambatanmiokard kontraksi) keduanya di bawah basal dan beta-adrenergik-kondisi dirangsang [78-81]. Dalam terisolasi danjantung katak perfusi, vasostatin-aku menghambat inotropy miokarddan menetral yang inotropisme positif yang ditimbulkan olehbeta-adrenergik agonis isoproterenol [78, 80]. Demikian juga,di Langendorff-perfusi jantung tikus, tikus asliCHGA1-64 sesuai dengan manusia N-terminal peptidevasostatin-I (rCHGA1-64, yang berisi disulfidajembatan antara Cys17 dan Cys38 residu) yang diinduksi negatifinotropisme dan lusitropism (yaitu, penghambatanrelaksasi miokard) kondisi basal [82]. TikusCHGA1-64 peptida juga mengakibatkan dilatasi koroner [82],konsisten dengan vasostatin-diinduksi vasodilatasi pada manusiadada arteri, vena saphena [26], dan sapi koronerarteri [69]. Namun demikian, patut diperhatikan bahwa manusiarekombinan vasostatin-aku (kontras dengan rCHGA1-64)tidak mengubah tekanan koroner meskipun ditampilkanmirip efek pada kontraksi miokard dan relaksasiparameter di jantung tikus di bawah kondisi tidak distimulasi[83], menunjukkan berbeda spesies-spesifik sensitivitas vasomotorterhadap homolog vs vasostatin heterologpeptida. Para isoproterenoland rCHGA1-64 juga menetralET-1-akibat efek inotropik positif dan ET-1-penyempitan koroner tergantung di jantung tikus [82]. Inikonsisten dengan penghapusan isoproterenol diinduksipositif inotropisme di jantung tikus oleh manusia rekombinanvasostatin-aku [83]. Khususnya, ET-1 memainkan peran pentingfisiologis peran dalam regulasi kardiovaskular yang normalfungsi, dan generasi yang berlebihan ET-1 telahdikaitkan dengan patologi kardiovaskuler utama, termasukhipertensi dan gagal jantung [84]. Oleh karena itu, demonstrasitindakan vasodilatasi kuat darirCHGA1-64 peptida dalam ET-1 pra-terbatas coronaries [82]adalah relevansi patofisiologi penting. Bisa dibayangkanbahwa, di samping anti-adrenergik kegiatannya, rCHGA1-64