Upload
others
View
21
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
i
MULTIPLIKASI KALUS BEBERAPA VARIETAS APEL PADA MEDIA DENGAN KOMPOSISI ZAT PENGATUR TUMBUH
YANG BERBEDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S1
Jurusan Agronomi
Diajukan Oleh :
RETNO INDAH MAWARNI
Nim. 201210200311078
JURUSAN AGRONOMI
PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI
FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
MALANG
2016
ii
ii
SKRIPSI
MULTIPLIKASI KALUS BEBERAPA VARIETAS APEL PADA MEDIA DENGAN KOMPOSISI ZAT PENGATUR TUMBUH YANG BERBEDA
Dipersiapkan dan disusun oleh
RETNO INDAH MAWARNI (201210200311078)
Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji
Pada tanggal 05 Agustus 2016
Susunan Dewan Penguji
Skripsi ini telah diterima sebagai salah satu persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Pertanian
Jurusan Budidaya Pertanian Fakultas Pertanian-Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang
Malang, 2016
iii
iii
HALAMAN PENGESAHAN
NAMA : RETNO INDAH MAWARNI
NIM : 201210200311078
PROGRAM STUDI : AGROTEKNOLOGI
JURUSAN : AGRONOMI
JUDUL PENELITIAN : Multiplikasi Kalus Beberapa Varietas Apel
Pada Media dengan Komposisi Zat Pengatur
Tumbuh Yang Berbeda.
Skripsi Ini Telah Diterima Sebagai Persyaratan Untuk Memperoleh Gelar Sarjana
Pertanian Pada Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian-Peternakan
Universitas Muhammadiyah Malang
Mengesahkan,
iv
iv
LEMBAR PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan dibawah ini: NAMA : RETNO INDAH MAWARNI
NIM : 201210200311078
JURUSAN : AGRONOMI
FAKULTAS : PERTANIAN PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
Menyatakan bahwa karya ilmiah yang berjudul “Multiplikasi Kalus
Beberapa Varietas Apel Pada Media dengan Komposisi Zat Pengatur
Tumbuh Yang Berbeda” adalah bagian dari penelitian (PUPT) dengan judul
Perakitan Kultivar Baru Tanaman Apel (Malus x domestica (Borkh)) Unggulan
Jawa Timur Melalui Kultur In vitro bukan karya orang lain, baik sebagian maupun
keseluruhan kecuali dalam bentuk kutipan yang diacu dalam naskah ini dan telah
disebut sumbernya.
Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan bila
pernyataan ini tidak benar, maka saya bersedia mendapatkan sanksi akademik.
Malang, 17 September 2016
ii
ii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, berkat Rahmat dan Karunia-Nya, penulis dapat menyelesaikan laporan penelitian skripsi dengan judul “Multiplikasi Kalus Beberapa Varietas Apel Pada Media Dengan Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Yang Berbeda”. Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk mendapat gelar Sarjana Pertanian di Jurusan Agronomi Fakultas Pertanian-Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
Selama proses penelitian dan penulisan laporan, penulis banyak mendapatkan bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, baik berupa moril maupun materil.
Untuk itu penulis menyampaikan terimakasih sebesar-besarnya kepada semua pihak, terutama :
1. Dr. Ir. Ali Ikhwan, M.P, selaku Ketua Jurusan Agronomi Universitas Muhammadiyah Malang (UMM).
2. Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si, selaku pembimbing utama yang telah memberikan fasilitas penelitian di laboratorium kultur in vitro MAI, bimbingan dan motivasi sehingga penelitian skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
3. Ir. Sufianto, M.M selaku pembimbing II yang banyak memeberikan bimbingan sehingga dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini.
4. Orangtua dan keluarga yang telah memberikan dukungan yang tak terhingga.
5. Teman-teman agronomi angkatan 2012 yang telah membantu selama proses penelitian.
Penulis menyadari bahwa tiada yang sempurna di dunia ini, oleh karena itu kritik serta saran atas kekurangan dari skripsi ini akan diterima dengan senang hati. Semoga dengan tersusunnya skripsi ini dapat memberikan manfaat dan masukan bagi kita semua.
Malang, Juli 2016
Penulis
iii
iii
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 09 Oktober 1993 di Kota
Jombang Jawa Timur, sebagai putri kedua dari dua bersaudara.
Ayahanda bernama Sutomo dan ibunda Sri Rahayu.
Penulis menyelesaikan pendidikan Sekolah Dasar di SD Negeri Keras 2,
Kecamatan Diwek pada tahun 2006, kemudian Sekolah Menengah Pertama Negeri
2 Jombang pada tahun 2009 dan Sekolah Menengah Atas Negeri Jogoroto Jombang
tahun 2012.
Penulis melanjutkan pendidikan di Program Studi Agroteknologi, Jurusan
Agronomi Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang
tahun 2012.
iii
iii
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR.............................................................................. ii
DAFTAR ISI............................................................................................ iii
DAFTAR TABEL.................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR............................................................................... vi
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................... vii
ABSTRAK............................................................................................... viii
I. PENDAHULUAN............................................................................... 1
1.1 Latar Belakang............................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah........................................................................ 3
1.3 Tujuan Penelitian......................................................................... 4
1.4 Hipotesis....................................................................................... 4
II. TINJAUAN PUSTAKA...................................................................... 5
2.1 Tanaman Apel.............................................................................. 5
2.2 Perbanyakan Tanaman Apel........................................................ 6
2.3 Kultur Jaringan............................................................................. 6
2.4 Kultur Kalus................................................................................. 8
2.5 Zat Pengatur Tumbuh.................................................................. 9
III. BAHAN DAN METODE................................................................. 17
3.1 Tempat dan Waktu Pelaksanaan.................................................. 17
3.2 Alat dan Bahan............................................................................. 17
3.2.1 Alat.......................................................................................... 17
3.2.2 Bahan....................................................................................... 17
3.3 Rancangan Penelitian................................................................... 17
3.4 Pelaksanaan Penelitian................................................................. 18
3.4.1 Sterilisasi Alat......................................................................... 18
3.4.2 Sterilisasi Ruang Tanam.......................................................... 18
3.4.3 Pembuatan Larutan Stok......................................................... 19
3.4.4 Pembuatan Media Murashige & Skoog (MS)......................... 19
3.4.5 Sterilisasi Eksplan Buah Apel................................................. 20
iv
iv
3.4.6 Inokulasi eksplan..................................................................... 20
3.4.7 Subkultur Kalus Kotiledon...................................................... 21
3.4.8 Tahap I (Penumbuhan Kalus).................................................. 21
3.4.9 Tahap II (Tahap Perlakuan)..................................................... 21
3.5 Variabel Pengamatan................................................................... 22
3.5.1 Pengamatan Tahap I................................................................ 22
3.5.2 Pengamatan Tahap II.............................................................. 24
3.6 Analisis dan Penyajian Data........................................................ 25
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................ 26
4.1 Hasil............................................................................................ 26
4.1.1 Tahap I.................................................................................... 28
4.1.2 Tahap II................................................................................... 30
4.2 Pembahasan................................................................................. 41
4.2.1 Tahap I.................................................................................... 41
4.2.2 Tahap II................................................................................... 44
V. KESIMPULAN DAN SARAN........................................................ 47
5.1 Kesimpulan.................................................................................. 47
5.2 Saran............................................................................................ 47
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................. 48
LAMPIRAN............................................................................................ 54
v
v
DAFTAR TABEL
No. Teks Halaman
1. Data Impor Buah Apel di Indonesia Tahun 2008-2012............... 1
2. Eksplan Muncul Kalus................................................................. 28
3. Persentase Tekstur Kalus dan Eksplan Berkalus Pada Varietas
Yang Berbeda.............................................................................. 29
4. Persentase Lebar Kalus Pada Varietas Apel Berbeda................. 30
5. Persentase Tekstur Kalus Faktor Varietas Pada Pemberian Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Yang Berbeda....................... 32
6. Rerata Berat Akhir Kalus Beberapa Varietas Apel Pada Pemberian Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Yang Berbeda..... 34
7. Rerata Pertambahan Berat Kalus Pada Beberapa Varietas Apel dan Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Berbeda.......................... 35
8. Rerata Panjang Kalus Umur 14 HSI sampai 28 HSI Beberapa Varietas Apel Pada Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Berbeda........................................................................ 36
9. Rerata Lebar Kalus Umur 14 HSI sampai 28 HSI Beberapa Varietas Apel Pada Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Berbeda........................................................................ 37
10. Rerata Persentase Warna Kalus Beberapa Varietas Apel Pada Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Berbeda...................................................................................... 39
11. Rerata Muncul Akar dan persentase muncul akar Beberapa Varietas Apel Pada Pemberian Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Berbeda....................................................................... 40
vi
vi
DAFTAR GAMBAR
No. Teks Halaman
1. Jenis-jenis Apel Lokal.............................................................. 5
2. Struktur Molekul 2,4-D............................................................ 11
3. Struktur Molekul Naphatelene Acetid Acid........................................................................................... 12
4. Struktur Molekul BAP.............................................................. 13
5. Kategori Lebar Kalus yang disubkultur................................................................................ 24
6. Persentase Kontaminasi jamur dan bakteri............................... 26
7. Macam Warna Kalus Apel........................................................ 27
8. Persentase Warna Kalus............................................................ 28
9. Persentase kontaminasi jamur dan bakteri pada Kombinasi Perlakuan................................................................ 31
10. Tekstur Kalus............................................................................ 32
11. Perkembangan Kalus Apel........................................................ 32
12. Rerata Berat Awal Kalus Faktor Varietas...................................................................................... 33
13. Rerata Berat Awal Kalus Faktor Komposisi Zat Pengatur Tumbuh...................................................................................... 34
14. Perubahan Warna Kalus............................................................. 38
15. Morfologi Kalus Apel................................................................ 41
vii
vii
DAFTAR LAMPIRAN
No. Teks Halaman
1. Komposisi Dasar Media MS.................................................. 54 2. Cara Membuat Larutan Stok.................................................. 55 3. Dokumentasi Varietas Apel................................................... 56 4. Analisa Ragam Muncul Kalus............................................... 58 5. Analisa Ragam Tekstur Remah (Tahap I)............................. 58 6. Analisa Ragam Tekstur Kompak (Tahap I)........................... 58 7. Analisa Ragam Persentase eksplan berkalus......................... 58 8. Analisa Ragam Lebar Kalus 1............................................... 59 9. Analisa Ragam Lebar Kalus 2............................................... 59 10. Analisa Ragam Lebar Kalus 3............................................... 59 11. Analisa Ragam Lebar Kalus 4............................................... 59 12. Analisa Ragam Tekstur Kompak (Tahap II).......................... 60 13. Analisa Ragam Tekstur Remah (Tahap II)............................ 60 14. Analisa Ragam Berat Awal Kalus......................................... 60 15. Analisa Ragam Berat Akhir Kalus........................................ 61 16. Analisa Ragam Pertambahan Berat Kalus............................. 61 17. Analisa Ragam Data Panjang Kalus...................................... 62 18. Analisa Ragam Data Lebar Kalus.......................................... 62 19. Dokumentasi Perbandingan................................................... 63 20. Dokumentasi Proses Penyiapan Alat dan Bahan................... 64 21. Dokumentasi Proses Inokulasi.............................................. 66 22. Dokumentasi Kontaminasi Jamur......................................... 68
48
48
DAFTAR PUSTAKA
Abdallah H. A. L., M. M. Khalafalla and A. Gaffar E. Said. 2012. Establishment of an Efficient Callus Induction and Plant Regeneration System in Some Wheat (Triticum aestivum L.) cultivars grown in Sundan. African Journal of Biotechnology Vol. 11(16), pp. 3793-3799.
Ainurrasjid. 2012. Model Spasio-Temporal Prakiraan Iklim Untuk Produksi Apel. Universitas Brawijaya. Malang.
AL Hussaini, Z.A., SH. A. Yousif and S.A. AL Ajeely. 2015. Effect of Different Medium on Callus Induction and Regeneration in Potato Cultivars. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences (2015) 4(5): 856-865.
Ashari, S. 1995. Hortikultura Aspek Budidaya. Universitas Indonesia Press. Jakarta.
Astutik. S. 2007. Pengaruh Varietas Kedelai (Glycine max) terhadap Pertumbuhan Kalus Dan Kandungan Senyawa Isoflavon (Daidzein dan Genistein). Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang. Jurusan Biologi Lingkungan Fakultas dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Islam Malang.
Balitjestro. 2015. Apel Manalagi. http://www.balitjestro. litbang. pertanian. go.id/apel-manalagi-balitjestro. Diakses 22 Juli 2016.
Baskaran P, Jayabalan N. 2008. Effect of growth regulators on rapid micropropagation and psoralen production in Psoralea corylifolial. Acta Physiol Plant 30:345-351.
Bewley, J.D dan M. Black. 1985. Seed Physiology of Development and
germination. Plenum Press. New York.367p
Dian, Y.T. 2004. Uji Konsentrasi Hormon 2,4-D Pada Pertumbuhan Kalus Dari Eksplan Kotiledon Dan Hipokotil Kedelai (Glycine max). Skripsi Tidak Diterbitkan. Malang. Jurusan Biologi Lingkungan Fakultas dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Islam Malang.
Dinas Pertanian. 2008. Produksi Apel Kota Batu. Batu, Malang.
Direktorat Jendral Hortikultura. 2010. Perkembangan PDB Komoditas Hortikultura Indonesia. http:// hortikultura.deptan.go.id. Diakses 2 Desember 2015.
Direktur Jendral BPH. 2004. Laporan Tahunan Departemen Pertanian. Departemen Pertanian. Jakarta.
49
49
Evans, D.E., J.O.D. Coleman, and A. Kearns. 2003. Plant Cell Culture. Bio Scientific Publishers, New York.
Gamborg, O.L. 1991. Kalus dan kultur sel. Dalam L. R. Wetter dan Constabel
(Eds.) ; Metode Kultur Jaringan Tanaman. Terjemahan. ITB. Bandung. Hal. 1-13.
Gardner, F.P.; R.B. Pearce; dan R.L.Mitchell. 1991. Fisiologi Tanaman Budidaya.
Terjemahan H. Susilo. UI Press. Jakarta. George, E.F., M.A. Hall and G.J. De Klerk 2008. Plant propagation by tissue
culture. 3rd Edition, Vol. 1: The back ground.Springer. George, E.F., dan P.D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture.
Exegetics Limited. England. Gopitha, K., A. L Bhavani and J. Senthilmanickam. 2010. Effect of the different
auxins and cytokinins in callus induction, shoot, root regeneration in sugarcane. International Journal of Pharma and Bio Sciences. Vol. 1/Issue-3/Jul-Sep.2010.
Gunawan, L. W. 1995. Teknik Kultur Jaringan. Bogor. Laboratorium Kultur
Jaringan Tanaman: PAU IPB. Hagio, T. 2002. Adventitious shoot regeneration from immature embryos of
sorghum. Plant Cell Tissue and Organ Culture 68 : 65 – 72. Hartman, H. T., D. E. Kester, dan F. T. Davies Jr. 1990. Plant propagation
principles and practices. Englewood Clifts. New Jersey:Prentice-Hall International, Inc.
Hendaryono D. S. dan Wijayanti . 2004. Pedoman Kultur Jaringan.
Penebar Swadaya: Jakarta. Hennayake, C.K., K. Dissanayake., N. Matsuda., T. Takasaki dan T. Nakanishi.
2003. An Efficient and Reproducible in vitro Plant Regeneration from Leaf Disc in Pear Cultivar (Pyrus spp.). Plant Biotechnology 20 (4):283-289.
Jajoo A. 2010. In vitro Propagation of Citrus limonia Osbeck through Nucellar
Embryo Culture. Journal of Biological Sciences 2(1):6-8. Juanda, D., dan Bambang, C. 2000. Budidaya dan Analisis Usaha Tani Manggis.
Kanisius. Yogyakarta.
50
50
Kaparakis, G. dan P.G. Alderson. 2003. Differential callus type formation by auxins and cytokinin in in vitro cultures of pepper (Capsicum annuum L.). Plant Biosytems An International Journal Dealing with all Aspects of Plant Biology 137 : 275 – 280.
Khawate RN dan Singh SK. 2005. In vitro Adventitive Embryony in Citrus: A
Technique for Citrus Germplasm Exchange. Current Science 88(8): 1309-1311.
Kobayashi, T., Higashi, K., Saitou, T & Kamada, H. 1999. Physiological properties
of inhibitory conditioning factor, inhibitory to somatic embryogenesis, in high-density cell cultures of carrot. Plant Sci., no. 144, pp.69-75.
Koltunow AM, Hidaka T, Robinson SP. 1996. Polyembryony in Citrus,
Accumulation of Seed Storage Proteins in Seeds and in Embryos Cultured In vitro. Plant Physiology 11:599-609.
Kumer Sen, M., S. Nasrin., S. Rahman dan A. H. Mostofa Jamal. 2014. In vitro
callus induction and plantlet regeneration of Achyranthes aspera L. a high value medical plant. Asian Pasific Journal of Tro[pical Biomedicine 2014 Jan; 4(1) : 40-46.
Ladyman, A.R. dan B. Girard. 1992. Nonhormonal Factor that Improve the
Multiplication and Development of Somatic Embryos of Cucumber (Cucumis sativus L.). Acta Horticulturae 300.
Mattjik, N. A. 2005. Peran kultur Jaringan Dalam Perbaikan Tanaman. FP. IPB.
Bogor. Meagher, M.G and J. Green. 2002. Somatic embryogenesis and plant regeneration
from immature embryos of saw palmetto, an important landscape and medicinal plant. Plant Cell Tissue and Organ Culture 66 : 253-256.
Miryam, A., I. Suliansyah dan A. Djamaran. 2008. Multiplikasi Jeruk Kacang
(Citrus nobilis L.) Pada Beberapa Konsentrasi NAA dan BAP Pada Media WPM Secara In vitro. Jerami Volume I No. 2, Mei-Agustus 2008. ISSn 1979-0228.
Nasircilar, A.G., K. Turgut., and K. Fiskin. 2006. Callus Induction and Plant
Regeneration from Mature Embryos of Different Wheat Genotypes. Pak. J. Bot., 38(2): 637-645,2006.
Noggle, G. R., dan G. J. Fritz. 1983. Introductory Plant Physiology: Second
Edition. Prentince-Hall, Inc. New Jersey.
51
51
Peterson, G., R. Smith. 1991. Effect of abscicic acid and callus size on regeneration of American and international rice varieties. Plant Cell Rep 10: 35-38.
Pierik, R.L.M. 1987. In Vitro Culture of higher Plants. Martinus Nijhoff Publisher.
London. 344 p. Rahardja, P. C. 1994. Kultur Jaringan Teknik Perbanyakan Tanaman Secara
Modern. Penebar Swadaya, Jakarta. Rahardja, P. C., dan Wahyu, W. 2003. Aneka Cara Memperbanyak Tanaman.
Agromedia Pustaka. Jakarta. Rai, M.K., Akhtar N., Jaiswal V.S. 2007. Somatic embryogenesis and plant
regeneration in Psidium guajava L. cv. Banarasi local. Scientia Horticulturae. 113(1): 129-133.
Rizvi, W., A. N. Kamili., dan A. M. Shah. 2007. In Vitro Propagation of Ambri
Apple, a Highly Prized Cultivar of Kashmir Himalaya. Journal Himalayan Ecol. Sustain. Dev. Vol. 2 (2007).
Rice, R. D., Anderson, P.G., Hall J.f and Ranchod, A. 1992. Micropropagation:
Principles and Commercial Practice. Di dalam: M. Mooyong, editor. Plant biotechnology: Comprehensive biotechnology (Second Supplement). England: Pergamon Press.
Rustaee, M., S. Nazeri., M. Ghadimzadeh., dan A. Malboobi. 2007. Optimizing In Vitro Regeneration from Iranian Native Dwarf Rootstock of Apple (Malus domestica Borkh). International Journal of Agriculture & Biology 1560-8530/2007/09-5-775-778.
Ryugo, K 1988. Fruit Culture It’s Science and Art. John Wilwy and Sons Inc.
USA. Samudin S. 2009. Pengaruh Komposisi Media Terhadap Inisiasi Tanaman Apel
(Malus sylvestris Mill). J. Agroland 16 (3): 193-198, September 2009. ISSN : 0854-641X.
Shasthree, T., Ch. Chandrashekar., R. Savitha and Imran. 2012. Effect of Various
Plant Growth Regulators on Callus Induction from Different Explants Of Citrullus colocynthis L. Schrad. International Journal of Universal Pharmacy and Life Science. Accepted: 23-05-2012.
Sherkar H.D dan Chavan A.M. 2014. Effect of 2,4-D; BAP and TDZ on Callus
Induction and Shoot regeneration in Potato. Science Research Reporter, 4(1): 101-105, (April-2014) ISSN: 2249-7846.
52
52
Simatupang, S. 1996. Pengaruh Penambahan Sitokinin dan Asam Naftalen Asetat pada Media Murashige dan Skoog terhadap Perkembangan Eksplan Asparagus. Jurnal Hortikultura 6 (2): 105-108.
Soukhak, F., A. Khalighi., dan S. A. Ghaemmaghami. 2011. Study of Direct
Adventitious Shoot Regeneration in Pomegranate (Punicagranatum cv. MalasSaveh) through Cotyledonary Explants. International Journal of Agricultural Science and Research Volume 2, Number 3, Summer 2011(Serial #4)
Stafford, A. And Graham, W. 1991. Plant Cell And Tissue Culture. Departement of
Moleculer Biology and Biotecnology University of Sheffield, UK. Sudarmaji. 2003. Pengaruh Benzyl Amino Purine pada Pertumbuhan Kalus Kapas
secara In Vitro. Buletin Teknik Pertanian 8 (1): 8-10. Sundari L., L. A. M. Siregar dan D. S. Hanafiah. 2015. Respon Eksplan dalam
Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell. Arg.) dalam Medium WPM. Jurnal Online Agroteknologi. ISSN No. 2337-6597. Vol.3, No.1 : 179-187 Desember 2015.
Sugiyarto L. dan P.C. Kuswandi.2013. Eksplorasi Metode Sterilisasi dan Macam
Media Untuk Perbanyakan Durian Secara In vitro. Jurdik Biologi, FMIPA UNY.
Sukmara, E., L. A. Sukamto., dan M. Bintang. 2014. Induksi dan Karakter
Pertumbuhan Kalus Triploid dari Endosperma Avokad (Persea Americana Mill.). Departemen Biokimia. Institut Pertanian Bogor. Indonesia.
Supriyati, Y., I. Mariska dan Mujiman. 2006. Multiplikasi Tunas Belimbing Dewi
(Averrhoa carambola) melalui Kultur In Vitro. Buletin Plasma Nutfah. 12(2) : 50-55
Sutjahjo, S.H,. kadir, A. dan Mariska, I. 2007. Efektivitas Polietilena Glikol
Sebagai Bahan Penyeleksi Kalus Nila Yang Diiradiasi Sinar Gamma Untuk Toleransi Terhadap Cekaman Kekeringan. Bogor. Departemen Agronomi dan Hortikultura Fakultas Pertanian IPB. Vol 9, Nol, 2007, hal 48-57.
Sutopo. 2011. Lebih Dekat dengan Apel Indonesia.
https://kpricitrus.wordpress.com/2011/04/04/kriteria-kesesuaian-lahan-untuk-tanaman-apel-di-iklim-tropika. Diakses 23 Juli 2016
Thomy, Z. 2012. Effect of Plant Growth Regulators 2,4D and BAP on Callus
Growth of Plant Producing Gaharu (Aquilaria malaccensis Lamk). Prosiding Seminar Nasional Biologi.
53
53
Umehara, M., Ogita, S., Sasamoto, H., Chang-Ho Eun., Matsubayashi, Y., Sakagami, Y & Kamada, H. 2004. Two stimulatory effect of the peptidyl growth factor phytosulfokine during somatic embryogenesis in japanese larch (Larix leptolepis Gordon). Plant Sci., no. 169, pp. 901-7.
Von Arnold, S., I. Sabala, P. Bozhkov, J. Dyachok and L. Filonova. 2002.
Development pathways of somatic embryogenesis. Plant Cell Tissue and Organ Culture 69 : 233-249.
Warintek. 2011. Sistematika tanaman apel.
http://www.warintek.ristek.go.id/pertanian/apel.pdf. Wattimena, G. A. 1988. Zat Pengatur Tumbuh Tanaman. Pusat Antar Universitas.
Institut Pertanian Bogor. 145 hal. Wattimena, G.A. 1992. Zat pengatur tumbuh tanaman. PAU Bioteknologi. IPB.
Bogor. 247 hal. Wetter, L. R., dan F. Constable. 1991. Metode Kultur Jaringan Tanaman. ITB.
Bandung. Wetherell. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman Secara In Vitro. Semarang:IKIP
Semarang Press. Diakses 27 september 2016. Wibowo, T. 2011. Apel Princess Noble. http://madang-
dab.blogspot.co.id/2011/11/apel-princess-noble.html. Diakses 23 Juli 2016. Widyastuti, N. 2002. Inovasi Memperbanyak Bibit Tanaman. Diakses dari
www.sinarharapan.co.id/berita/0202/13/ipt02.html. Tanggal 16 Juli 2016. Widyastuti, N., Donowati, T. 2001. Peranan Beberapa Zat Pengatur Tumbuh
(ZPT) Tanaman Pada Kultur In Vitro. Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia 3(5): 55-63
Wikipedia. 2016. https://id.wikipedia.org/wiki/Asam_2,4-Diklorofenoksiasetat. Diakses 28 Januari 2016.
Winata,L.G. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. Departemen Pendidikan dan
Kebudayaan. Bogor: Dirjen Perguruan Tinggi PAK Bioteknologi IPB. Yelnititis. 2012. Pembentukan Kalus Remah Dari Eksplan Daun Ramin
(Gonystylus bancanus (Miq) Kurz.). Jurnal Pemuliaan Tanaman Hutan. Vol 6 No. 3, November 2012, 181-194.
Zia, M., R. Rehman., dan M. F. Chaudary. 2007. Hormonal Regulation for Callogenesis and Organogenesis of Artemisia absinthium L. African Journal of Biotechnologi 6 (16): 1874-1878.