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“EVALUACION DE LA VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA DE LAS ENFERMEDADES INMUNOPREVENIBLES POR VACUNAS”
DIAGNOSTICO e INDICADORES DE LABORATORIO
RED DE LABORATORIORED DE LABORATORIO
ULTIMO CASO POLIO AÑO 1991ULTIMO CASO POLIO AÑO 1991DEPARTAMENTO :JUNINDEPARTAMENTO :JUNIN
PROVINCIA DE PICHANAKIPROVINCIA DE PICHANAKI
**
**
*
InDRE
INS
CDC
CAREC
INH
IEC
FIOCRUZ
MALBRAN
**
*
**
*
1 Global Specialized Lab
2 Regional Reference Lab
5 National Laboratories
2 Sub-Regional Labs*
*
*
* 1 Sub-National Lab
ISP
IPK
*NML
RED MUNDIAL DE LABORATORIOS DE POLIOMIELITIS144 LABORATORIOS EN 100
PAISES
REGION DE LAS AMERICAS
10 - ITD laboratory4 - sequencing laboratory
AISLAMIENTO VIRAL
NEGATIVO
CASO CASO DESCARTADO DESCARTADO
SEGUNDO PASE EN LINEAS CELULARES (Algunas muestras requieren un tercer pase
en células) x 5 días
POLIOVIRUS TIPO 1, 2
o 3
PRIMER PASE EN LINEAS CELULARES DIFERENTES (RD y
L20B) x 5 días
AISLAMIENTO VIRAL
POSITIVO EN CELLS L20B y
RD
RT-PCR (GRUPO Enterovirus), POLIOVIRUS, SEROTIPO 1, 2 Y 3, Y
SABIN)
AISLAMIENTO VIRAL
POSITIVO SOLO EN RD (ENP)
Envío al CDC para caracterización
genotípica (qPCR / secuencia genómica)
CONFIRMA POLIOVIRUS SALVAJE o
VDPV o SABIN- LIKE
NUEVO ALGORITMO PARA DIAGNOSTICO Celulas L20B y RD
INDICADORES DE LABORATORIO
1.- PORCENTAJE DE AISLAMIENTO VIRAL = 10% de aislamiento del total de las muestras
CALIDAD DE ENVIO DE CALIDAD DE ENVIO DE LA MUESTRALA MUESTRA
ADECUADA ADECUADA DEFINICION DE CASODEFINICION DE CASO
V A R I A B L E
2.- PORCENTAJE DE MUESTRAS ADECUADAS Mayor 80%
5
TIPO DE MUESTRAHeces
10 g de heces obtenidas en los 14 días siguientes al inicio de la parálisis*
(*) Se puede estimular la evacuación (sin usar enema) Son validas las deposiciones líquidas o diarreicas
MATERIAL DE OBTENCIÓN
Envase de plástico (polipropileno) estéril de boca ancha y con tapa hermética (tapa rosca).
En caso de fallecimiento: obtener muestra de tejido (medula espinal, sustancia gris, bulbo raquídeo protuberancia anular , cerebro, placas de Peyer y contenido de los intestinos dentro de las 24 horas de fallecido y usar hielo.
PARALISIS FLACIDA AGUDA
CONTROL DE CALIDAD PORCENTAJE DE MUESTRAS ADECUADAS
Fuente:Laboratorio de Enterovirus-FIO CRUZ
8-10gr <2g ~3 - 7gr
44muestras
13 muestras
77 muestras
SUFICIENTE INSUFICIENTE LIMITE
CLASIFICACION DEL LABORATORIO REGIONAL
32.8%
9.7%
57.5%
0
20
40
60
80
100
% M
UES
TRA
S
SUFICIENTE INSUFICIENTE LIMITE
Porcentaje Control de Calidad de muestras
LOGISTICA PARA EL ENVIO DE MUESTRAS PFALOGISTICA PARA EL ENVIO DE MUESTRAS PFA
OPSOPS
DGEDGE
INSINSLRLRLAB. LAB. LOCLOC
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
1. El equipo de investigación del caso ( epidemiología , laboratorio y establecimiento de salud ) deben procurar la obtención de la muestra en cantidad (10gr) y calidad adecuada
2. El Laboratorio de Referencia Regional debe realizar el control de calidad exhaustivo de las muestras.
3. Se debe obtener 2 muestras de heces dentro de los 14 días, en aquellos pacientes que se dificulta la obtención de esta muestra
4. El país se encuentra a la espera de la visita de evaluación de la Comisión Regional-OMS/OPS para el reinicio del diagnóstico de Poliovirus en el INS
SARAMPION – RUBEOLA
TIPO DE MUESTRA:1.SUERO¨: Del 1ro al 30 avo día de contacto con el caso cantidad: 5 cm de sangre.
centrifugar: 2500 rpmseparar 2ml de suero conservar en cadena
de fríoTiempo de envío: máximo 5 día.
2. ORINA : Del 1ro al 5to día de la rupción
Cantidad: 50 ml.Tiempo de envío dentro de las 24 horas en
cadena de frío. 1.HISOPADO NASAL Y FARINGEO :del 1 al 3er día de erupción , en medio de transporte viral.
HEPATITIS “B” TIPO DE MUESTRA : SUERO 2 ml.
Obtenida al inicio de los síntomas. Mantener en cadena de frío.
Enviar de inmediato máximo dentro de las 24 horas.Resultado es en Elisa Directa.
Diagnóstico de Laboratorio
•Cultivo
•Fluorescencia directa
•Pruebas moleculares
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
Secuencia de inserción ISI 481
Muestra
Aspirado nasofaríngeo *
Hisopado nasofaríngeo
* Mayor cantidad de positivos en el aspirado
• Tipo de muestra :
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
…continuación
…continuación
Etapa de la enfermedad
Antes de la administración de antibióticos
Tipo de muestra
Uso de hisopo adecuado
• Condiciones de una muestra adecuada :
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
15
• Hisopo con punta de alginato de calcio con varilla de aluminio, para uso pediátrico
• Hisopo con punta de dacrón con varilla de aluminio (sólo para la prueba de IFD)
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
…continuación
• Material de obtención :
…continuación
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
• Procedimiento :
Sentar al paciente, si es un niño sujetarlo adecuadamente.
Introducir el hisopo suavemente en una fosa nasal, paralelamente al paladar hasta llegar a la nasofaringe, rotar el hisopo
Retirar el hisopo rápidamente
17
• Preparación de Frotis para Prueba de IFD :
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
…continuación
Realizar un extendido sobre una lámina porta-objetos limpia, desengrasada y sin ralladuras, de tal manera que ocupe un espacio de 8 mm de diámetro.
Dejar secar a T° ambiente.
Añadir sobre el frotis 1 mL de etanol 96°, dejar durante 1´, eliminar el exceso.
Dejar secar a T° ambiente
FIEBRE AMARILLA
MUESTRA: SUERO 2ml
SEROLOGIA : a partir del 6to día de iniciado el cuadro.
CULTIVO: Del 1ro al 5to día de iniciado el cuadro.
Fallecimiento: muestra de tejidos máximo a 10 horas de fallecido Cantidad: 2 cm Para CULTIVO: conservar los tejidos sin formol en cadena de frio en hielo seco.Para PATLOGIA: Conservar los tejidos con formol a temperatura ambiente.
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
ROTAVIRUS
Muestra: solo Heces al 5to día de iniciado la diarrea
Cantidad: 5 gr. (serología)
Transportar en cadena de frío teniendo como máximo 4 días para llegar al laboratorio.
Considerar los datos completos en la ficha.
Instituto Nacional de Salud
Centro Nacional de Salud Pública
Ministerio de Salud
PERÚ
AÑO
EDAD VACUNACION INICIO DE
SINTOMAS
PERIODO PARA EL
FALLECIMIENTO
2009
1 mes BCG - HBV 1 hora 2 días
2010
4 meses
PENTAVALENTE (Difteria, Pertusis, Tétanos, Hepatitis B, Haemophilus Influenzae) – ANTIPOLIO - ROTAVIRUS
Inmediato
1 hora
2 meses
NO SE INDICA NO SE INDICA
NO SE INDICA
La rapidez de la descomposición de
los tejidos y órganos es proporcional
a: Actividad metabólica
Acción bacteriana
Temperatura ambiente.
Requisitos de la muestra
Tiempo≤ 24 horas – temperatura ambienteHasta 48 horas - refrigeración
TamañoModalidad de obtenciónTiempoRelación de volúmenes
muestra/tejido
Requisitos del envío
EnvaseIdentificación de la muestraDatos del pacienteRequisitos administrativos
(necropsias de ley)
Las muestras, serán obtenidas antes de transcurridas las 24 horas de fallecido el paciente salvo excepciones se podría considerar hasta las 72 horas manteniendo en cadena de frio. ( +2+8 0 C)
Las muestras remitidas al laboratorio serán de 1 a 1.5 cm3, preferentemente de todos los órganos. En caso de realizarse una necropsia parcial, las muestras serán de los órganos mas comprometidos (según la macroscopía) o, dependiendo del tipo de vacuna, según el tropismo de la vacuna
Las muestras serán introducidas inmediatamente de obtenidas en formol al 10% (en un volumen equivalente a 10 veces el volumen de la muestra)Los envases para remisión de las muestras, deben ser de boca ancha y estar rotulados indicando el nombre del paciente y el órgano de donde proviene la muestra.