PD Dr. J. Huss-Marp ImmunoDiagnostics

Thermo Fisher Scientific

Molekulare Allergiediagnostik mittels ImmunoCAP® ISAC

1) Molekulare Allergiediagnostik & ImmunoCAP® ISAC

2) Fallbeispiele

3) Interpretation & Indikationen

4) Zusammenfassung

Gliederung

Grundlage der Molekularen Allergiediagnostik

Apfel (Mallus domesticus)

Mal d 1 Mal d 2 Mal d 3 Mal d 4

Tausende Substanzen Einzelne Allergene

Grundlage der Molekularen Allergiediagnostik

Klinischer Nutzen Molekularer Allergiediagnostik

• Identifiziert Allergene, nicht Allergenträger • Risikoabschätzung für schwere Reaktionen • Kreuzreaktivität vs. Spezies-spezifischer

Sensibilisierung • Hilft bei Auswahl der richtigen Therapie

Molekulare Grundlage der Allergie

Majorallergen Mal d 1 (Apfel) Majorallergen Birke (Betula verrucosa) Bet v 1

PR-10-Proteine: Kristallographische Struktur

Cor a 1 Cor a 8 Cor a 9

Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3 Ara h 8 Ara h 9

Bos d 4 Bos d 5 Bos d 8

Gal d 1 Gal d 2 Gal d 3

Pen a 1 Pen a 2 Pen a 3

Bet v 1 Bet v 2 Bet v 4 Bet v 6

Phl p 1 Phl p 2 Phl p 4 Phl p 5 Phl p 6

Phl p 7 Phl p 11 Phl p 12

Fel d 1 Fel d 2 Fel d 3 Fel d 4

Ves v 1 Ves v 2 Ves v 5

Der p 1 Der p 2 Der p 10 Der f 1 Der f 2

Cor a 1 Cor a 8 Cor a 9

Ara h 1 Ara h 2 Ara h 3 Ara h 8 Ara h 9

Bos d 4 Bos d 5 Bos d 8

Gal d 1 Gal d 2 Gal d 3 Pen a 1

Pen a 2 Pen a 3

Bet v 1 Bet v 2 Bet v 4 Bet v 6

Phl p 1 Phl p 2 Phl p 4 Phl p 5 Phl p 6

Phl p 7 Phl p 11 Phl p 12

Fel d 1 Fel d 2 Fel d 3 Fel d 4

Ves v 1 Ves v 2 Ves v 5

Der p 1 Der p 2 Der p 10 Der f 1 Der f 2

Api m 1 Api m 2 Api m 3

Einteilung in Proteinfamilien

LTP

Speicher- proteine

PR 10- Proteine

Profiline

CCDs

Einteilung in Proteinfamilien

!

!

ISAC

ImmunoCAP® ISAC - Praktische Durchführung

Seit Oktober 2011 ist neue verbesserte Version des

ImmunoCAP® ISAC

verfügbar

Allergenkomponenten Panel 51 Allergenquellen

20 neue Allergenkomponenten

4 Allergenkomponenten getauscht

“Alte” Version 103

Neue ISAC® Komponenten + 20

“Alte” Komponenten entfernt - 11

Gesamt 112

Von 103 zu 112:

20 neue ImmunoCAP® ISAC Komponenten

Walnuss (f256) nJug r 1, nJug r 2, nJug r 3

Buchweizen (f11) nFag e 2

Weißer Gänsefuß (w10) rChe a 1

Spitzwegerich (w9) rPla l 1

Blomia tropicalis (d201) rBlo t 5

Lepidoglyphus destructor (d71) rLep d 2

Wespe (i3) rVes v 5

Feldwespe (i4/ i77) rPol d 5

Aus 7 alten Allergenquellen: Aus 8 neuen Allergenquellen:

Erdnuss (f13) nAra h 6, rAra h9

Weizen (f4) rTri a14

Shrimp (f24) nPen m2, nPen m4

Olivenbaum (t9) nOle e 7, nOle e 9

Platane (t11) rPla a 3

Hund (e5) rCan f 5

Pferd (e3) rEqu c 1

Dau c 1 PR10 (Karrotte) abgedeckt durch andere PR 10-Proteine und kaum alleine positiv

Ole e 2 profilin (Olivenbaum) abgedeckt durch andere Profiline, nie allein positiv

Cyp c 1 parvalbumin (Karpfen) abgedeckt durch Gad c 1 vom Dorsch

Pen a 1 Pen i 1 (Shrimp) abgedeckt durch Pen m 1

Eur m 2 (Hausstaubmilbe) abgedeckt durch Der p 2 und Der f 2

Asp f 2, Asp f 4 (Aspergillus) niedrige Prävelenz

Bla g 4 (Schabe) niedrige Prävalenz, kaum die alleinig positive Schabenkomponente

Tri a 18, Tri a gliadin (Weizen) niedrige Prävalenz

11 Komponenten wurden entfernt:

Bienengift (i1): rApi m 1 (CCD frei) statt nApi m 1

CCD-Marker: MUXF3 statt nAna c 2, bessere Performance

nAct d 8: rAct d 8

nPru p 3: rPru p 3

\

4 Komponenten wurden ausgetauscht:

Allergenkomponenten Panel

Performance ImmunoCAP®ISAC Präzision

Linearität

Nachweisgrenze

Spezifität

Probenmaterial (Serum, Plasma)

Interferenz bei hohem tIgE, hämolytischen und lipämischen Seren

Vergleichbarkeit ISU - kUA/l

Stabilität

Veränderungen ImmunoCAP® ISAC Assay

Mehr Probenvolumen notwendig (20µl → 30µl)

gleiche Waschlösung wie bei Phadia® 250

Kürzer Kürzere Waschschritte Kürzere Inkubation Assayzeit ca. 3,7 Stunden (vorher 5,5 Stunden)

Verlängerte Haltbarkeit (6 Monate nach Öffnung bei 2 - 8°C, wenn Folienbeutel wiederverschlossen und mit beigelegtem Trockenbeutel versehen wird.)

1) Molekulare Allergiediagnostik & ImmunoCAP® ISAC

2) Fallbeispiele

3) Interpretation & Indikationen

4) Zusammenfassung

Gliederung

Nahrungsmittelallergie

21-jährige spanische Patientin: Ganzjährige Rhinoconjunctivitis allergica. Anaphylaxie nach Verzehr von verschiedenen Nahrungsmitteln.

Lipid-Transfer-Proteine: Pfirsich Pru p 3 Haselnuss Cor a 8

21-jährige spanische Patientin: Ganzjährige Rhinoconjunctivitis allergica. Anaphylaxie nach Verzehr von verschiedenen Nahrungsmitteln.

Follow-up eines polysensibilisierten Patienten mit atopischem Ekzem über 18 Jahre mittels ImmunoCAP® ISAC

Borres M, 2011

Follow-up eines polysensibilisierten Patienten mit atopischem Ekzem über 18 Jahre mittels ImmunoCAP® ISAC

Borres M, 2011

1) Molekulare Allergiediagnostik & ImmunoCAP® ISAC

2) Fallbeispiele

3) Interpretation & Indikationen

4) Zusammenfassung

Gliederung

Interpretationshilfen für ImmunoCAP® ISAC

• Literatur (Artikelserie MA Allergo J; Sastre J Allergy 2010; etc. … > 40 ImmunoCAP® ISAC Publikationen)

• ImmunoCAP® ISAC Xmap

• ImmunoCAP® ISAC Xplain

Presenter

Presentation Notes

Gute Übersicht über Allergenkomponenten. Anwendung erklären.

ImmunoCAP® ISAC Xplain

• Alle ImmunoCAP® ISAC Allergene

• Informationen zur Spezies-spezifität und Kreuzreaktivität

• Informationen zu typischerweise assoziierten Symptomen

• Angaben zu Verdauungs- und Hitzestabilität

Ca. 100 Kommentare koordiniert von ca. 350 Regeln

Ziele von ImmunoCAP® ISAC Xplain

• Reduktion des Interpretationsaufwand

• Zeitersparnis

• Qualitätskontrolle

Indikationen

• komplizierte Patienten mit unklarer Befundlage

• Patienten mit Polysensibilisierung (Aufklärung von Kreuzreaktivitäten)

• V.a. IgE-vermittelte Allergie ohne anamnestischen Anhaltspunkt

• Anaphylaxieabklärung

• Pädiatrische Patienten (Kapillarblut!)

• expliziter Patientenwunsch

Indikationen

1. Molekulare Allergiediagnostik = Verfeinerte Diagnostik auf Allergenebene

2. Liefert Informationen zu Sensibilisierungsprofilen, Risikoabschätzung &

Kreuzreaktivitäten

3. Klinischer Nutzen von ImmunoCAP® ISAC bei Screening komplizierter,

polysensibilisierter Patienten, bei Kindern und bei Anaphylaxieabklärung 4. Xplain und Xmap sind als Interpretationshilfen verfügbar

Zusammenfassung

Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!

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de-info.webinar@phadia.com