SKILL LAB 7PEMERIKSAAN BASIL TAHAN ASAM (BTA) DENGAN PEWARNAAN
ZIEHL- NEELSEN
I. Persiapan alat-alat dan reagent :1. Bunsen burner2. Object
glass3. Slide holder or rack4. Inoculating loop5. Pensil untuk
penanda object glass6. Tusuk gigi7. Korek api8. Bak pasir9.
Pembakar 10. Tissue / filter papper11. Hand gloves12. Masker 13.
Carbol fuchsin (primary stain)14. Decolorizer 3% HCl + alcohol 15.
Methylene blue (counterstain)16. Minyak emersi17. Physiological
saline18. Air (dalam squirt bottle)
II. Methods: Smear Preparation:1. Bersihkan glass slide,
bersihkan dengan alkohol atau lewatkan diatas api agar glass slide
bebas lemak.2. Tulis identitas pasien dan buatlah lingkaran sebesar
ibu jari pada slide bagian bawah3. Bakar inoculating loop sampai
merah, kemudian setelah merah diamkan sampai dingin.4. Ambil sputum
dengan inoculating loop, letakkan di target circle pada object
glass. Bisa ratakan apusan sputum dengan tusuk gigi.5. Bakar lagi
inoculate loop sampai merah dan celupkan ke bak pasir.6. Biarkan
sputum mengering di object glass kemudian lewatkan diatas api 2-5
kali tetapi jangan terlalu dekat.
Ziehl-Neelsen staining procedure:7. Letakkan object glass pada
rak, siap di warnai (slide yang ada lingkaran penanda di bagian
bawah)8. Berikan carbol fuchsin di seluruh permukaan slide.9. Bakar
dari bawah (menggunakan pembakar yang besi dan ada sumbunya) sampai
mendidih.10. Matikan pembakar dan buang carbol fuchsin.11. Celupkan
object glass ke dalam alkohol 3% selama 30 detik12. Bersihkan
dengan air (aquades).13. Berikan methylene blue, diamkan selama 1
menit.14. Bersihkan dengan air (aquades).15. Keringkan object glass
dengan tissue (jangan digosok)16. Object glass siap dilihat di
mikroskop.
Method of examination:17. Naikkan kondensor, buka diafragma,
letakkan slide, teteskan minyak emersi dan gunakan pembesaran
100x.
Interpretasi:18. Hitung mycobacterium dan tulis di kotak: Jika
dalam satu lapang pandang jumlah bakteri: 10 AFB/1HPF:+3NB: Jika
1-3 AFB/HPF: Ulangi pemeriksaan dengan spesimen yang baru. Jika
hasil pengulangan tetap 1-3 AFB/HPF maka negatif Jika 4-9 AFB/HPF:
Positif Created by: Soraya Intan P
Page 1 of 4 Draft OSCE Tropical Medicine-SEROTONINE
