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ABANICO VETERINARIO ISSN 2448-6132 abanicoacademico.mx/revistasabanico/index.php/abanico-veterinario 1 Abanico Veterinario. Enero-Diciembre 2021; 11:1-12. http://dx.doi.org/10.21929/abavet2021.9 Artículo Original. Recibido: 21/02/2020. Aceptado: 20/01/2021. Publicado: 10/02/2021. Clave:2020-50. Modificación de la fermentación ruminal in vitro para mitigación de metano mediante la adición de aceites esenciales de plantas y compuestos terpenoides Modification of ruminal fermentation in vitro for methane mitigation by adding essential oils from plants and terpenoid compounds Lucía Delgadillo-Ruiz 1 * ID , Rómulo Bañuelos-Valenzuela 2 ** ID , Perla Gallegos- Flores 1 ID , Francisco Echavarría-Cháirez 3 ID , Carlos Meza-López 2 ID , Norma Gaytán- Saldaña 1 ID 1 Unidad Académica de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Zacatecas. Avenida preparatoria s/n colonia Hidráulica, CP. 98068, Zacatecas, Zacatecas, México. 2 Unidad Académica de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Autónoma de Zacatecas. 3 Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Campo experimental Zacatecas, México. *Autor responsable: Lucía Delgadillo-Ruiz. **Autor de correspondencia: Rómulo Bañuelos-Valenzuela. Carretera Panamericana Fresnillo-Zacatecas s/n, Centro, CP. 98500 Víctor Rosales, Zacatecas, México. [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected], [email protected] RESUMEN Los aceites esenciales de plantas son compuestos aromáticos volátiles, principalmente terpenoides, fenilpropanoides; monoterpenos, sesquiterpernos y alcoholes, estos presentan una amplia gama de actividad antimicrobiana y antioxidante, por lo que la adición de aceites esenciales de clavo, eucalipto, menta, romero, orégano y canela pueden modificar la fermentación ruminal al disminuir la población de bacterias productoras de metano y así tener una reducción de la producción de este gas. El objetivo fue evaluar diferentes aceites esenciales y compuestos terpenoides para mejorar la fermentación ruminal y la producción de ácidos grasos volátiles, atenuando la generación de metano. Se determinó la composición química (terpenoides) de los aceites, así como ácidos grasos volátiles (AGVs) por cromatografía de gases. Para la digestibilidad in vitro, se empleó la técnica de producción de gas in vitro y se utilizó líquido ruminal. El metano se infirió a partir de la concentración de AGVs. Se encontró que todos los aceites esenciales presentaron cada uno de los terpenoides en diferentes concentraciones, reportando la mayor concentración de carvacrol en el aceite esencial de clavo (303 mg mL -1 ) y en orégano (1.20 mg mL -1 ); el terpineno se presentó en mayor cantidad en el aceite esencial de menta (4.83 mg mL -1 ); para el aceite de menta y romero, linalol fue más elevado y para el limoneno la mayor concentración fue en el aceite de eucalipto (449 mg mL -1 ) y romero (12.42 mg mL -1 ). Para la producción de gas en las digestibilidades el aceite esencial de eucalipto a dosis de 0.3 presentó 176 mL g -1 MS. Para digestibilidad in vitro el aceite de romero en dosis alta (0.6 mL), presentó la mejor fermentación ruminal ya que tuvo mejor mitigación de metano (716.83 mM/L) sin afectar de manera negativa la concentración de AGVs (acetato, 1892.2; propiónico, 526.14; butírico, 24.99 mM/L), así como los terpenoides timol, linalol y limoneno en dosis alta. Se concluye que la mejor fermentación ruminal in vitro con mitigación de metano se observó con el aceite de romero y para los compuestos terpenoides fueron timol, linalol y limoneno en la dosis alta. Palabras clave: Plantas, Compuestos terpenoides, Ácidos grasos volátiles y Metano. ABSTRACT Essential oils from plants are volatile aromatic compounds, mainly terpenoids, phenylpropanoids; monoterpenes, sesquiterpenes, and alcohols, these present a wide range of antimicrobial and antioxidant activity, so the addition of essential oils of clove, eucalyptus, mint, rosemary, oregano, and cinnamon can

Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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Page 1: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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Abanico Veterinario Enero-Diciembre 2021 111-12 httpdxdoiorg1021929abavet20219 Artiacuteculo Original Recibido 21022020 Aceptado 20012021 Publicado 10022021 Clave2020-50

Modificacioacuten de la fermentacioacuten ruminal in vitro para mitigacioacuten de metano

mediante la adicioacuten de aceites esenciales de plantas y compuestos terpenoides

Modification of ruminal fermentation in vitro for methane mitigation by adding essential

oils from plants and terpenoid compounds

Luciacutea Delgadillo-Ruiz1ID Roacutemulo Bantildeuelos-Valenzuela2 ID Perla Gallegos-

Flores1 ID Francisco Echavarriacutea-Chaacuteirez3 ID Carlos Meza-Loacutepez2 ID Norma Gaytaacuten-

Saldantildea1 ID

1Unidad Acadeacutemica de Ciencias Bioloacutegicas Universidad Autoacutenoma de Zacatecas Avenida preparatoria sn

colonia Hidraacuteulica CP 98068 Zacatecas Zacatecas Meacutexico 2Unidad Acadeacutemica de Medicina Veterinaria

y Zootecnia Universidad Autoacutenoma de Zacatecas 3Instituto Nacional de Investigaciones Forestales

Agriacutecolas y Pecuarias Campo experimental Zacatecas Meacutexico Autor responsable Luciacutea Delgadillo-Ruiz

Autor de correspondencia Roacutemulo Bantildeuelos-Valenzuela Carretera Panamericana Fresnillo-Zacatecas

sn Centro CP 98500 Viacutector Rosales Zacatecas Meacutexico luciadelgadillouazedumx

apozolerohotmailcom perla_gf17hotmailcom fechava1yahoocom carmezlopyahoocommx

gaytanangelica1gmailcom RESUMEN

Los aceites esenciales de plantas son compuestos aromaacuteticos volaacutetiles principalmente terpenoides

fenilpropanoides monoterpenos sesquiterpernos y alcoholes estos presentan una amplia gama de

actividad antimicrobiana y antioxidante por lo que la adicioacuten de aceites esenciales de clavo eucalipto

menta romero oreacutegano y canela pueden modificar la fermentacioacuten ruminal al disminuir la poblacioacuten de

bacterias productoras de metano y asiacute tener una reduccioacuten de la produccioacuten de este gas El objetivo fue

evaluar diferentes aceites esenciales y compuestos terpenoides para mejorar la fermentacioacuten ruminal y la

produccioacuten de aacutecidos grasos volaacutetiles atenuando la generacioacuten de metano Se determinoacute la composicioacuten

quiacutemica (terpenoides) de los aceites asiacute como aacutecidos grasos volaacutetiles (AGVs) por cromatografiacutea de gases

Para la digestibilidad in vitro se empleoacute la teacutecnica de produccioacuten de gas in vitro y se utilizoacute liacutequido ruminal

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGVs Se encontroacute que todos los aceites esenciales

presentaron cada uno de los terpenoides en diferentes concentraciones reportando la mayor concentracioacuten

de carvacrol en el aceite esencial de clavo (303 mg mL-1) y en oreacutegano (120 mg mL-1) el terpineno se

presentoacute en mayor cantidad en el aceite esencial de menta (483 mg mL-1) para el aceite de menta y

romero linalol fue maacutes elevado y para el limoneno la mayor concentracioacuten fue en el aceite de eucalipto

(449 mg mL-1) y romero (1242 mg mL-1) Para la produccioacuten de gas en las digestibilidades el aceite esencial

de eucalipto a dosis de 03 presentoacute 176 mL g-1 MS Para digestibilidad in vitro el aceite de romero en dosis

alta (06 mL) presentoacute la mejor fermentacioacuten ruminal ya que tuvo mejor mitigacioacuten de metano (71683

mML) sin afectar de manera negativa la concentracioacuten de AGVs (acetato 18922 propioacutenico 52614

butiacuterico 2499 mML) asiacute como los terpenoides timol linalol y limoneno en dosis alta Se concluye que la

mejor fermentacioacuten ruminal in vitro con mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero y para los

compuestos terpenoides fueron timol linalol y limoneno en la dosis alta

Palabras clave Plantas Compuestos terpenoides Aacutecidos grasos volaacutetiles y Metano

ABSTRACT

Essential oils from plants are volatile aromatic compounds mainly terpenoids phenylpropanoids

monoterpenes sesquiterpenes and alcohols these present a wide range of antimicrobial and antioxidant

activity so the addition of essential oils of clove eucalyptus mint rosemary oregano and cinnamon can

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modify ruminal fermentation by reducing the population of bacteria producing methane and thus have a

reduction in the production of this gas The objective of this work was to evaluate different essential oils and

terpenoid compounds to improve ruminal fermentation and the production of volatile fatty acids attenuating

the generation of methane The chemical composition (terpenoids) of the oils as well as volatile fatty acids

(VFAs) were determined by gas chromatography For in vitro digestibility the in vitro gas production

technique was used and the ruminal liquid was used Methane was inferred from the concentration of VFAs

It was found that all the essential oils presented each one of the terpenoids in different concentrations

reporting the highest concentration of carvacrol in the essential oil of clove (303 mg mL-1) and oregano

(120 mg mL-1) terpinene was presented in greater quantity in the essential oil of peppermint (483 mg mL-

1) for peppermint and rosemary oil linalool was higher and for limonene the highest concentration was in

eucalyptus oil (449 mg mL-1) and rosemary (1242 mg mL-1) For gas production in digestibility eucalyptus

essential oil at a dose of 03 presented 176 mL g-1 DM For in vitro digestibility rosemary oil in high dose

(06 mL) presented the best ruminal fermentation since it had better methane mitigation (71683 mML)

without negatively affecting the concentration of VFAs (acetate 18922 propionic 52614 butyric 2499

mML) as well as the terpenoids thymol linalool and limonene in high doses It is concluded that the best

in vitro ruminal fermentation with methane mitigation was observed with rosemary oil and the terpenoid

compounds were thymol linalool and limonene in the high dose

Keywords Plants Terpenoid compounds Volatile fatty acids and Methane

INTRODUCCIOacuteN

Las plantas aromaacuteticas o arbustivas se han utilizado ampliamente de manera empiacuterica

en medicina tradicional para tratar diferentes padecimientos de salud (Cruz et al 2017

Yuan et al 2016) sin embargo los efectos de eacutestas han generado intereacutes en los

sistemas de produccioacuten de ganado ya que con la implementacioacuten de aditivos de plantas

se puede modificar de manera efectiva la fermentacioacuten del rumen al inhibir la

desaminacioacuten y metanogeacutenesis que resulta en una reduccioacuten de metano (CH4) enteacuterico

NH3-N y acetato y por lo tanto se produciraacute mayor concentracioacuten de propionato y butirato

asiacute como disminucioacuten de CH4 enteacuterico el cual es un importante gas de efecto invernadero

(Kurniawati et al 2020 Wang et al 2016 Kim et al 2015)

Los aceites esenciales de plantas (AEP) son compuestos aromaacuteticos volaacutetiles

constituidos por una mezcla de metabolitos secundarios (MS) principalmente

compuestos terpeacutenicos fenilpropanoides monoterpenos sesquiterpernos y alcoholes

aldehiacutedos eacuteteres esteres cetonas y fenoles que son principalmente responsables del

aroma (Bakkali et al 2008) Los AEP presentan una amplia gama de actividad

antimicrobiana y antioxidante (Gallegos-Flores et al 2019) por lo que han generado

intereacutes como alternativa de origen natural al uso de compuestos quiacutemicos para modificar

la fermentacioacuten ruminal ya que la implementacioacuten de aditivos sinteacuteticos se ha visto

limitada por la aparicioacuten de residuos en los productos de consumo humano o por la

resistencia que han generado ciertos microorganismos por el uso no terapeacuteutico de

antibioacuteticos (ionoacuteforos) en los rumiantes (Brown et al 2017 Esteacutevez y Cutuli 2011)

Algunos de los principales compuestos de AEP maacutes comunes incluyen timol y carvacrol

(tomillo y oreacutegano) eugenol (clavo) pineno (enebro) limoneno (eneldo) 18-cineole

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(eucalipto) cinamaldehiacutedo (canela) capsaicina (pimientos picantes) terpinene (aacuterbol de

teacute) alicina (ajo) y anethol (aniacutes) (Kurniawati et al 2020)

Existen plantas aromaacuteticas que se han utilizado como especias comestibles y a partir de

las cuales sus aceites esenciales son ricos en compuestos terpenoides con una fuerte

actividad antimicrobiana los cuales pueden afectar el desarrollo y crecimiento de las

bacterias ruminales e inhibir la metanogeacutenesis entre los aceites se encuentran canela

(Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium aromaticum) eupcalipto (Eucalyptus spp)

menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

(Condo et al 2018 Firmino et al 2018 Dhakad et al 2017)Dada la preocupacioacuten sobre

la produccioacuten de gases efecto invernadero que contribuyen al calentamiento global

principalmente metano emitido por rumiantes es necesario investigar el empleo de

aceites esenciales ya que al tener efecto antibacteriano se deduce que influyen en la

microbiota del rumen y por lo tanto modifican la fermentacioacuten y disminuyen la

concentracioacuten de metano

El objetivo de la presente investigacioacuten fue evaluar diferentes aceites esenciales y

compuestos terpenoides para incrementar la fermentacioacuten ruminal y la produccioacuten de

aacutecidos grasos volaacutetiles atenuando la generacioacuten de metano

MATERIAL Y MEacuteTODOS

Material bioloacutegico

Se utilizaron plantas de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

Obtencioacuten de los aceites esenciales de plantas

Las muestras de aceite esencial se obtuvieron a partir de la muestra seca por

hidrodestilacioacuten durante 2 h utilizando un sistema Clevenger modificado Durante el

proceso de ebullicioacuten el material seco absorbe el agua y el aceite esencial difunde a

traveacutes de las paredes celulares por medio de oacutesmosis luego es vaporizado y arrastrado

por la corriente del evaporador (Teixeira et al 2013)

Composicioacuten quiacutemica determinada por cromatografiacutea de gases

Se determinoacute mediante un cromatoacutegrafo de gases (CG Agilent Tecnologies serie 6890N)

empleando la columna polar DB_WAXetr Las condiciones de trabajo fueron temperatura

despueacutes de la inyeccioacuten 250 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL

min-1 Las condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos

minutos con un aumento de 10 degC hasta llegar a 250 degC utilizando un detector de flama

ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC con un flujo de H2 de 40 mL min-1 y un flujo

de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute una curva de calibracioacuten Los estaacutendares

utilizados fueron grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol limoneno linalol y

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terpineno con un porcentaje de pureza de 98 995 98 97 y 85 respectivamente Cada

una de las determinaciones se realizoacute por triplicado Bantildeuelos et al (2018)

Preparacioacuten de compuestos terpenoides

Los compuestos terpenoides utilizados para la digestibilidad in vitro fueron los

empleados como estaacutendares en CG grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol

limoneno linalol y terpineno preparados con etanol al 50

Determinacioacuten de la produccioacuten de gas in vitro

La alimentacioacuten de los ovinos para la produccioacuten de gas in vitro se utilizoacute fluido ruminal

de dos ovinos de pelo canulados y alimentados con una dieta que conteniacutea 83 de heno

(50 de alfalfa y 50 de paja de trigo) y 17 de concentrado (63 maiacutez molido 25

de harinolina 55 de carbonato de calcio 55 de fosfato mono-caacutelcico 05 de pre

mezcla de vitaminas A D y E y 05 de microminerales) El alimento se proporcionoacute

diariamente a las 0800 y 1600 horas con acceso libre al agua Se alimentoacute a los ovinos

por 30 diacuteas antes de la extraccioacuten del fluido ruminal como tiempo de adaptacioacuten a la

racioacuten

Produccioacuten de gas in vitro

Los aceites fueron adicionados de manera individual en cada una de las jarras de

digestibilidad en diferente volumen (Ugbogu et al 2019) como testigo se utilizoacute el

sustrato de alfalfa sin la adicioacuten de aditivos La produccioacuten de gas in vitro se determinoacute

empleando el meacutetodo propuesto por Theodorou et al (1994) para lo cual se utilizaron

unidades de fermentacioacuten (UF) de 120 mL para cada muestra En el registro de gas

producido se utilizoacute un medidor de presioacuten marca Sper Scientific La presioacuten de gas fue

acumulativa y determinada en unidades de presioacuten (Psi) el tiempo de medicioacuten fue a las

3 6 9 12 24 y 48 h para cada volumen de los diferentes aceites realizando tres

repeticiones

Determinacioacuten de aacutecidos grasos volaacutetiles en liacutequido ruminal

Los AGVs (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) se cuantificaron por cromatografiacutea de gases

Las condiciones de trabajo fueron temperatura de entrada despueacutes de la inyeccioacuten de la

muestra es de 50 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL min-1 Las

condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos minutos con

un aumento de 10 degC por minuto hasta llegar a 250 degC manteniendo esta temperatura

constante por 5 minutos para luego descender a 50 degC manteniendo por dos minutos

con un flujo de He de 16 mL min-1 a una presioacuten de 1213 psi y una velocidad promedio

de 25 cm s-1 Se utilizoacute un detector de flama ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC

con un flujo de H2 de 40 mL min-1y un flujo de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute

una curva de calibracioacuten Los estaacutendares utilizados fueron grado reactivo marca Sigma

Aldrich aceacutetico propioacutenico y butiacuterico con un porcentaje de pureza de 995 98 y 99

respectivamente Cada una de las determinaciones se realizoacute por triplicado

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Determinacioacuten de metano

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGV mediante la aplicacioacuten de

modelos matemaacuteticos no lineales establecido por Moss et al (2000) donde se sentildeala

que la produccioacuten de CH4 se puede calcular de forma estequiomeacutetrica empleando la

siguiente ecuacioacuten

[119914119919120786] = 120782 120786120787 119914120784(119938119940119942119957119938119957119952) minus 120782 120784120789120787 119914120785(119953119955119952119953119946119952119951119938119957119952) + 120782 120786 119914120786 (119939119958119957119946119955119938119957119952)

Anaacutelisis estadiacutestico

El anaacutelisis estadiacutestico para la produccioacuten de gas aacutecidos grasos volaacutetiles y metano se

realizoacute mediante un anaacutelisis de varianza utilizando un disentildeo completamente al azar y la

prueba de medias de Tukey utilizando el paquete estadiacutestico SPSSreg para evaluar las

diferencias estadiacutesticas (plt005) (Cytel Software 2010) La fuente de variacioacuten

considerada fueron los aceites esenciales y compuestos terpenoides para aacutecidos grasos

volaacutetiles se consideraron como variables aacutecido aceacutetico propioacutenico y butiacuterico

RESULTADOS Y DISCUSIOacuteN

Para los aceites esenciales de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus) se observoacute que la mayor concentracioacuten de

carvacrol y timol estaacute presente en los aceites de clavo (carvacrol 303 mg mL-1) y oreacutegano

(carvacrol 1652 mg mL-1 timol 0247 mg mL-1) (Cuadro 1) se ha reportado que estos

dos compuestos tienen efecto antibacteriano contra bacterias gram negativas y positivas

para los cuales se conoce que el mecanismo de accioacuten es incrustarse en la membrana

de la ceacutelula bacteriana provocando la desintegracioacuten de esta estructura seguido de una

lisis celular (Rodriacuteguez-Garciacutea et al 2015 Friedman 2014 Beacutejaoui et al 2013 Garciacutea-

Garciacutea et al 2011) por lo que este efecto antibacteriano puede influir en la poblacioacuten de

la microbiota ruminal y por lo tanto modificar la fermentacioacuten ruminal

Cuadro 1 Compuestos terpenoides presentes en aceites esenciales analizados por cromatografiacutea

de gases

ACEITE Carvacrol

mg mL-1

Timol

mg mL-1

Linalol

mg mL-1

Terpineno

mg mL-1

Limoneno

mg mL-1

Aceite esencial de canela 00375 00108 0047 01431 25167

Aceite esencial de clavo 303 00068 00383 02753 15496

Aceite esencial de eucalipto 007 00142 04621 08725 499

Aceite esencial de menta 00169 0025 39401 48388 956

Aceite esencial de oreacutegano 1652 02474 00878 0 01449

Aceite esencial de romero 00524 00753 8865 03725 12425

Nile et al (2017) reportan que los aceites esenciales son ricos en terpenos (carvacrol

citral linalol y geraniol) y compuestos fenoacutelicos coincidiendo en el presente trabajo ya

que se encontraron ambos compuestos Albado et al (2001) reportoacute la presencia de

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compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

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9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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2

modify ruminal fermentation by reducing the population of bacteria producing methane and thus have a

reduction in the production of this gas The objective of this work was to evaluate different essential oils and

terpenoid compounds to improve ruminal fermentation and the production of volatile fatty acids attenuating

the generation of methane The chemical composition (terpenoids) of the oils as well as volatile fatty acids

(VFAs) were determined by gas chromatography For in vitro digestibility the in vitro gas production

technique was used and the ruminal liquid was used Methane was inferred from the concentration of VFAs

It was found that all the essential oils presented each one of the terpenoids in different concentrations

reporting the highest concentration of carvacrol in the essential oil of clove (303 mg mL-1) and oregano

(120 mg mL-1) terpinene was presented in greater quantity in the essential oil of peppermint (483 mg mL-

1) for peppermint and rosemary oil linalool was higher and for limonene the highest concentration was in

eucalyptus oil (449 mg mL-1) and rosemary (1242 mg mL-1) For gas production in digestibility eucalyptus

essential oil at a dose of 03 presented 176 mL g-1 DM For in vitro digestibility rosemary oil in high dose

(06 mL) presented the best ruminal fermentation since it had better methane mitigation (71683 mML)

without negatively affecting the concentration of VFAs (acetate 18922 propionic 52614 butyric 2499

mML) as well as the terpenoids thymol linalool and limonene in high doses It is concluded that the best

in vitro ruminal fermentation with methane mitigation was observed with rosemary oil and the terpenoid

compounds were thymol linalool and limonene in the high dose

Keywords Plants Terpenoid compounds Volatile fatty acids and Methane

INTRODUCCIOacuteN

Las plantas aromaacuteticas o arbustivas se han utilizado ampliamente de manera empiacuterica

en medicina tradicional para tratar diferentes padecimientos de salud (Cruz et al 2017

Yuan et al 2016) sin embargo los efectos de eacutestas han generado intereacutes en los

sistemas de produccioacuten de ganado ya que con la implementacioacuten de aditivos de plantas

se puede modificar de manera efectiva la fermentacioacuten del rumen al inhibir la

desaminacioacuten y metanogeacutenesis que resulta en una reduccioacuten de metano (CH4) enteacuterico

NH3-N y acetato y por lo tanto se produciraacute mayor concentracioacuten de propionato y butirato

asiacute como disminucioacuten de CH4 enteacuterico el cual es un importante gas de efecto invernadero

(Kurniawati et al 2020 Wang et al 2016 Kim et al 2015)

Los aceites esenciales de plantas (AEP) son compuestos aromaacuteticos volaacutetiles

constituidos por una mezcla de metabolitos secundarios (MS) principalmente

compuestos terpeacutenicos fenilpropanoides monoterpenos sesquiterpernos y alcoholes

aldehiacutedos eacuteteres esteres cetonas y fenoles que son principalmente responsables del

aroma (Bakkali et al 2008) Los AEP presentan una amplia gama de actividad

antimicrobiana y antioxidante (Gallegos-Flores et al 2019) por lo que han generado

intereacutes como alternativa de origen natural al uso de compuestos quiacutemicos para modificar

la fermentacioacuten ruminal ya que la implementacioacuten de aditivos sinteacuteticos se ha visto

limitada por la aparicioacuten de residuos en los productos de consumo humano o por la

resistencia que han generado ciertos microorganismos por el uso no terapeacuteutico de

antibioacuteticos (ionoacuteforos) en los rumiantes (Brown et al 2017 Esteacutevez y Cutuli 2011)

Algunos de los principales compuestos de AEP maacutes comunes incluyen timol y carvacrol

(tomillo y oreacutegano) eugenol (clavo) pineno (enebro) limoneno (eneldo) 18-cineole

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(eucalipto) cinamaldehiacutedo (canela) capsaicina (pimientos picantes) terpinene (aacuterbol de

teacute) alicina (ajo) y anethol (aniacutes) (Kurniawati et al 2020)

Existen plantas aromaacuteticas que se han utilizado como especias comestibles y a partir de

las cuales sus aceites esenciales son ricos en compuestos terpenoides con una fuerte

actividad antimicrobiana los cuales pueden afectar el desarrollo y crecimiento de las

bacterias ruminales e inhibir la metanogeacutenesis entre los aceites se encuentran canela

(Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium aromaticum) eupcalipto (Eucalyptus spp)

menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

(Condo et al 2018 Firmino et al 2018 Dhakad et al 2017)Dada la preocupacioacuten sobre

la produccioacuten de gases efecto invernadero que contribuyen al calentamiento global

principalmente metano emitido por rumiantes es necesario investigar el empleo de

aceites esenciales ya que al tener efecto antibacteriano se deduce que influyen en la

microbiota del rumen y por lo tanto modifican la fermentacioacuten y disminuyen la

concentracioacuten de metano

El objetivo de la presente investigacioacuten fue evaluar diferentes aceites esenciales y

compuestos terpenoides para incrementar la fermentacioacuten ruminal y la produccioacuten de

aacutecidos grasos volaacutetiles atenuando la generacioacuten de metano

MATERIAL Y MEacuteTODOS

Material bioloacutegico

Se utilizaron plantas de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

Obtencioacuten de los aceites esenciales de plantas

Las muestras de aceite esencial se obtuvieron a partir de la muestra seca por

hidrodestilacioacuten durante 2 h utilizando un sistema Clevenger modificado Durante el

proceso de ebullicioacuten el material seco absorbe el agua y el aceite esencial difunde a

traveacutes de las paredes celulares por medio de oacutesmosis luego es vaporizado y arrastrado

por la corriente del evaporador (Teixeira et al 2013)

Composicioacuten quiacutemica determinada por cromatografiacutea de gases

Se determinoacute mediante un cromatoacutegrafo de gases (CG Agilent Tecnologies serie 6890N)

empleando la columna polar DB_WAXetr Las condiciones de trabajo fueron temperatura

despueacutes de la inyeccioacuten 250 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL

min-1 Las condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos

minutos con un aumento de 10 degC hasta llegar a 250 degC utilizando un detector de flama

ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC con un flujo de H2 de 40 mL min-1 y un flujo

de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute una curva de calibracioacuten Los estaacutendares

utilizados fueron grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol limoneno linalol y

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terpineno con un porcentaje de pureza de 98 995 98 97 y 85 respectivamente Cada

una de las determinaciones se realizoacute por triplicado Bantildeuelos et al (2018)

Preparacioacuten de compuestos terpenoides

Los compuestos terpenoides utilizados para la digestibilidad in vitro fueron los

empleados como estaacutendares en CG grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol

limoneno linalol y terpineno preparados con etanol al 50

Determinacioacuten de la produccioacuten de gas in vitro

La alimentacioacuten de los ovinos para la produccioacuten de gas in vitro se utilizoacute fluido ruminal

de dos ovinos de pelo canulados y alimentados con una dieta que conteniacutea 83 de heno

(50 de alfalfa y 50 de paja de trigo) y 17 de concentrado (63 maiacutez molido 25

de harinolina 55 de carbonato de calcio 55 de fosfato mono-caacutelcico 05 de pre

mezcla de vitaminas A D y E y 05 de microminerales) El alimento se proporcionoacute

diariamente a las 0800 y 1600 horas con acceso libre al agua Se alimentoacute a los ovinos

por 30 diacuteas antes de la extraccioacuten del fluido ruminal como tiempo de adaptacioacuten a la

racioacuten

Produccioacuten de gas in vitro

Los aceites fueron adicionados de manera individual en cada una de las jarras de

digestibilidad en diferente volumen (Ugbogu et al 2019) como testigo se utilizoacute el

sustrato de alfalfa sin la adicioacuten de aditivos La produccioacuten de gas in vitro se determinoacute

empleando el meacutetodo propuesto por Theodorou et al (1994) para lo cual se utilizaron

unidades de fermentacioacuten (UF) de 120 mL para cada muestra En el registro de gas

producido se utilizoacute un medidor de presioacuten marca Sper Scientific La presioacuten de gas fue

acumulativa y determinada en unidades de presioacuten (Psi) el tiempo de medicioacuten fue a las

3 6 9 12 24 y 48 h para cada volumen de los diferentes aceites realizando tres

repeticiones

Determinacioacuten de aacutecidos grasos volaacutetiles en liacutequido ruminal

Los AGVs (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) se cuantificaron por cromatografiacutea de gases

Las condiciones de trabajo fueron temperatura de entrada despueacutes de la inyeccioacuten de la

muestra es de 50 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL min-1 Las

condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos minutos con

un aumento de 10 degC por minuto hasta llegar a 250 degC manteniendo esta temperatura

constante por 5 minutos para luego descender a 50 degC manteniendo por dos minutos

con un flujo de He de 16 mL min-1 a una presioacuten de 1213 psi y una velocidad promedio

de 25 cm s-1 Se utilizoacute un detector de flama ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC

con un flujo de H2 de 40 mL min-1y un flujo de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute

una curva de calibracioacuten Los estaacutendares utilizados fueron grado reactivo marca Sigma

Aldrich aceacutetico propioacutenico y butiacuterico con un porcentaje de pureza de 995 98 y 99

respectivamente Cada una de las determinaciones se realizoacute por triplicado

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Determinacioacuten de metano

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGV mediante la aplicacioacuten de

modelos matemaacuteticos no lineales establecido por Moss et al (2000) donde se sentildeala

que la produccioacuten de CH4 se puede calcular de forma estequiomeacutetrica empleando la

siguiente ecuacioacuten

[119914119919120786] = 120782 120786120787 119914120784(119938119940119942119957119938119957119952) minus 120782 120784120789120787 119914120785(119953119955119952119953119946119952119951119938119957119952) + 120782 120786 119914120786 (119939119958119957119946119955119938119957119952)

Anaacutelisis estadiacutestico

El anaacutelisis estadiacutestico para la produccioacuten de gas aacutecidos grasos volaacutetiles y metano se

realizoacute mediante un anaacutelisis de varianza utilizando un disentildeo completamente al azar y la

prueba de medias de Tukey utilizando el paquete estadiacutestico SPSSreg para evaluar las

diferencias estadiacutesticas (plt005) (Cytel Software 2010) La fuente de variacioacuten

considerada fueron los aceites esenciales y compuestos terpenoides para aacutecidos grasos

volaacutetiles se consideraron como variables aacutecido aceacutetico propioacutenico y butiacuterico

RESULTADOS Y DISCUSIOacuteN

Para los aceites esenciales de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus) se observoacute que la mayor concentracioacuten de

carvacrol y timol estaacute presente en los aceites de clavo (carvacrol 303 mg mL-1) y oreacutegano

(carvacrol 1652 mg mL-1 timol 0247 mg mL-1) (Cuadro 1) se ha reportado que estos

dos compuestos tienen efecto antibacteriano contra bacterias gram negativas y positivas

para los cuales se conoce que el mecanismo de accioacuten es incrustarse en la membrana

de la ceacutelula bacteriana provocando la desintegracioacuten de esta estructura seguido de una

lisis celular (Rodriacuteguez-Garciacutea et al 2015 Friedman 2014 Beacutejaoui et al 2013 Garciacutea-

Garciacutea et al 2011) por lo que este efecto antibacteriano puede influir en la poblacioacuten de

la microbiota ruminal y por lo tanto modificar la fermentacioacuten ruminal

Cuadro 1 Compuestos terpenoides presentes en aceites esenciales analizados por cromatografiacutea

de gases

ACEITE Carvacrol

mg mL-1

Timol

mg mL-1

Linalol

mg mL-1

Terpineno

mg mL-1

Limoneno

mg mL-1

Aceite esencial de canela 00375 00108 0047 01431 25167

Aceite esencial de clavo 303 00068 00383 02753 15496

Aceite esencial de eucalipto 007 00142 04621 08725 499

Aceite esencial de menta 00169 0025 39401 48388 956

Aceite esencial de oreacutegano 1652 02474 00878 0 01449

Aceite esencial de romero 00524 00753 8865 03725 12425

Nile et al (2017) reportan que los aceites esenciales son ricos en terpenos (carvacrol

citral linalol y geraniol) y compuestos fenoacutelicos coincidiendo en el presente trabajo ya

que se encontraron ambos compuestos Albado et al (2001) reportoacute la presencia de

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compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

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9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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Page 3: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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(eucalipto) cinamaldehiacutedo (canela) capsaicina (pimientos picantes) terpinene (aacuterbol de

teacute) alicina (ajo) y anethol (aniacutes) (Kurniawati et al 2020)

Existen plantas aromaacuteticas que se han utilizado como especias comestibles y a partir de

las cuales sus aceites esenciales son ricos en compuestos terpenoides con una fuerte

actividad antimicrobiana los cuales pueden afectar el desarrollo y crecimiento de las

bacterias ruminales e inhibir la metanogeacutenesis entre los aceites se encuentran canela

(Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium aromaticum) eupcalipto (Eucalyptus spp)

menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

(Condo et al 2018 Firmino et al 2018 Dhakad et al 2017)Dada la preocupacioacuten sobre

la produccioacuten de gases efecto invernadero que contribuyen al calentamiento global

principalmente metano emitido por rumiantes es necesario investigar el empleo de

aceites esenciales ya que al tener efecto antibacteriano se deduce que influyen en la

microbiota del rumen y por lo tanto modifican la fermentacioacuten y disminuyen la

concentracioacuten de metano

El objetivo de la presente investigacioacuten fue evaluar diferentes aceites esenciales y

compuestos terpenoides para incrementar la fermentacioacuten ruminal y la produccioacuten de

aacutecidos grasos volaacutetiles atenuando la generacioacuten de metano

MATERIAL Y MEacuteTODOS

Material bioloacutegico

Se utilizaron plantas de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus)

Obtencioacuten de los aceites esenciales de plantas

Las muestras de aceite esencial se obtuvieron a partir de la muestra seca por

hidrodestilacioacuten durante 2 h utilizando un sistema Clevenger modificado Durante el

proceso de ebullicioacuten el material seco absorbe el agua y el aceite esencial difunde a

traveacutes de las paredes celulares por medio de oacutesmosis luego es vaporizado y arrastrado

por la corriente del evaporador (Teixeira et al 2013)

Composicioacuten quiacutemica determinada por cromatografiacutea de gases

Se determinoacute mediante un cromatoacutegrafo de gases (CG Agilent Tecnologies serie 6890N)

empleando la columna polar DB_WAXetr Las condiciones de trabajo fueron temperatura

despueacutes de la inyeccioacuten 250 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL

min-1 Las condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos

minutos con un aumento de 10 degC hasta llegar a 250 degC utilizando un detector de flama

ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC con un flujo de H2 de 40 mL min-1 y un flujo

de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute una curva de calibracioacuten Los estaacutendares

utilizados fueron grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol limoneno linalol y

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terpineno con un porcentaje de pureza de 98 995 98 97 y 85 respectivamente Cada

una de las determinaciones se realizoacute por triplicado Bantildeuelos et al (2018)

Preparacioacuten de compuestos terpenoides

Los compuestos terpenoides utilizados para la digestibilidad in vitro fueron los

empleados como estaacutendares en CG grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol

limoneno linalol y terpineno preparados con etanol al 50

Determinacioacuten de la produccioacuten de gas in vitro

La alimentacioacuten de los ovinos para la produccioacuten de gas in vitro se utilizoacute fluido ruminal

de dos ovinos de pelo canulados y alimentados con una dieta que conteniacutea 83 de heno

(50 de alfalfa y 50 de paja de trigo) y 17 de concentrado (63 maiacutez molido 25

de harinolina 55 de carbonato de calcio 55 de fosfato mono-caacutelcico 05 de pre

mezcla de vitaminas A D y E y 05 de microminerales) El alimento se proporcionoacute

diariamente a las 0800 y 1600 horas con acceso libre al agua Se alimentoacute a los ovinos

por 30 diacuteas antes de la extraccioacuten del fluido ruminal como tiempo de adaptacioacuten a la

racioacuten

Produccioacuten de gas in vitro

Los aceites fueron adicionados de manera individual en cada una de las jarras de

digestibilidad en diferente volumen (Ugbogu et al 2019) como testigo se utilizoacute el

sustrato de alfalfa sin la adicioacuten de aditivos La produccioacuten de gas in vitro se determinoacute

empleando el meacutetodo propuesto por Theodorou et al (1994) para lo cual se utilizaron

unidades de fermentacioacuten (UF) de 120 mL para cada muestra En el registro de gas

producido se utilizoacute un medidor de presioacuten marca Sper Scientific La presioacuten de gas fue

acumulativa y determinada en unidades de presioacuten (Psi) el tiempo de medicioacuten fue a las

3 6 9 12 24 y 48 h para cada volumen de los diferentes aceites realizando tres

repeticiones

Determinacioacuten de aacutecidos grasos volaacutetiles en liacutequido ruminal

Los AGVs (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) se cuantificaron por cromatografiacutea de gases

Las condiciones de trabajo fueron temperatura de entrada despueacutes de la inyeccioacuten de la

muestra es de 50 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL min-1 Las

condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos minutos con

un aumento de 10 degC por minuto hasta llegar a 250 degC manteniendo esta temperatura

constante por 5 minutos para luego descender a 50 degC manteniendo por dos minutos

con un flujo de He de 16 mL min-1 a una presioacuten de 1213 psi y una velocidad promedio

de 25 cm s-1 Se utilizoacute un detector de flama ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC

con un flujo de H2 de 40 mL min-1y un flujo de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute

una curva de calibracioacuten Los estaacutendares utilizados fueron grado reactivo marca Sigma

Aldrich aceacutetico propioacutenico y butiacuterico con un porcentaje de pureza de 995 98 y 99

respectivamente Cada una de las determinaciones se realizoacute por triplicado

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5

Determinacioacuten de metano

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGV mediante la aplicacioacuten de

modelos matemaacuteticos no lineales establecido por Moss et al (2000) donde se sentildeala

que la produccioacuten de CH4 se puede calcular de forma estequiomeacutetrica empleando la

siguiente ecuacioacuten

[119914119919120786] = 120782 120786120787 119914120784(119938119940119942119957119938119957119952) minus 120782 120784120789120787 119914120785(119953119955119952119953119946119952119951119938119957119952) + 120782 120786 119914120786 (119939119958119957119946119955119938119957119952)

Anaacutelisis estadiacutestico

El anaacutelisis estadiacutestico para la produccioacuten de gas aacutecidos grasos volaacutetiles y metano se

realizoacute mediante un anaacutelisis de varianza utilizando un disentildeo completamente al azar y la

prueba de medias de Tukey utilizando el paquete estadiacutestico SPSSreg para evaluar las

diferencias estadiacutesticas (plt005) (Cytel Software 2010) La fuente de variacioacuten

considerada fueron los aceites esenciales y compuestos terpenoides para aacutecidos grasos

volaacutetiles se consideraron como variables aacutecido aceacutetico propioacutenico y butiacuterico

RESULTADOS Y DISCUSIOacuteN

Para los aceites esenciales de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus) se observoacute que la mayor concentracioacuten de

carvacrol y timol estaacute presente en los aceites de clavo (carvacrol 303 mg mL-1) y oreacutegano

(carvacrol 1652 mg mL-1 timol 0247 mg mL-1) (Cuadro 1) se ha reportado que estos

dos compuestos tienen efecto antibacteriano contra bacterias gram negativas y positivas

para los cuales se conoce que el mecanismo de accioacuten es incrustarse en la membrana

de la ceacutelula bacteriana provocando la desintegracioacuten de esta estructura seguido de una

lisis celular (Rodriacuteguez-Garciacutea et al 2015 Friedman 2014 Beacutejaoui et al 2013 Garciacutea-

Garciacutea et al 2011) por lo que este efecto antibacteriano puede influir en la poblacioacuten de

la microbiota ruminal y por lo tanto modificar la fermentacioacuten ruminal

Cuadro 1 Compuestos terpenoides presentes en aceites esenciales analizados por cromatografiacutea

de gases

ACEITE Carvacrol

mg mL-1

Timol

mg mL-1

Linalol

mg mL-1

Terpineno

mg mL-1

Limoneno

mg mL-1

Aceite esencial de canela 00375 00108 0047 01431 25167

Aceite esencial de clavo 303 00068 00383 02753 15496

Aceite esencial de eucalipto 007 00142 04621 08725 499

Aceite esencial de menta 00169 0025 39401 48388 956

Aceite esencial de oreacutegano 1652 02474 00878 0 01449

Aceite esencial de romero 00524 00753 8865 03725 12425

Nile et al (2017) reportan que los aceites esenciales son ricos en terpenos (carvacrol

citral linalol y geraniol) y compuestos fenoacutelicos coincidiendo en el presente trabajo ya

que se encontraron ambos compuestos Albado et al (2001) reportoacute la presencia de

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compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

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9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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Page 4: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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4

terpineno con un porcentaje de pureza de 98 995 98 97 y 85 respectivamente Cada

una de las determinaciones se realizoacute por triplicado Bantildeuelos et al (2018)

Preparacioacuten de compuestos terpenoides

Los compuestos terpenoides utilizados para la digestibilidad in vitro fueron los

empleados como estaacutendares en CG grado reactivo marca Sigma Aldrich carvacrol timol

limoneno linalol y terpineno preparados con etanol al 50

Determinacioacuten de la produccioacuten de gas in vitro

La alimentacioacuten de los ovinos para la produccioacuten de gas in vitro se utilizoacute fluido ruminal

de dos ovinos de pelo canulados y alimentados con una dieta que conteniacutea 83 de heno

(50 de alfalfa y 50 de paja de trigo) y 17 de concentrado (63 maiacutez molido 25

de harinolina 55 de carbonato de calcio 55 de fosfato mono-caacutelcico 05 de pre

mezcla de vitaminas A D y E y 05 de microminerales) El alimento se proporcionoacute

diariamente a las 0800 y 1600 horas con acceso libre al agua Se alimentoacute a los ovinos

por 30 diacuteas antes de la extraccioacuten del fluido ruminal como tiempo de adaptacioacuten a la

racioacuten

Produccioacuten de gas in vitro

Los aceites fueron adicionados de manera individual en cada una de las jarras de

digestibilidad en diferente volumen (Ugbogu et al 2019) como testigo se utilizoacute el

sustrato de alfalfa sin la adicioacuten de aditivos La produccioacuten de gas in vitro se determinoacute

empleando el meacutetodo propuesto por Theodorou et al (1994) para lo cual se utilizaron

unidades de fermentacioacuten (UF) de 120 mL para cada muestra En el registro de gas

producido se utilizoacute un medidor de presioacuten marca Sper Scientific La presioacuten de gas fue

acumulativa y determinada en unidades de presioacuten (Psi) el tiempo de medicioacuten fue a las

3 6 9 12 24 y 48 h para cada volumen de los diferentes aceites realizando tres

repeticiones

Determinacioacuten de aacutecidos grasos volaacutetiles en liacutequido ruminal

Los AGVs (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) se cuantificaron por cromatografiacutea de gases

Las condiciones de trabajo fueron temperatura de entrada despueacutes de la inyeccioacuten de la

muestra es de 50 degC a una presioacuten de 1213 psi con un flujo de He 365 mL min-1 Las

condiciones para la columna fueron temperatura inicial 50 degC de cero a dos minutos con

un aumento de 10 degC por minuto hasta llegar a 250 degC manteniendo esta temperatura

constante por 5 minutos para luego descender a 50 degC manteniendo por dos minutos

con un flujo de He de 16 mL min-1 a una presioacuten de 1213 psi y una velocidad promedio

de 25 cm s-1 Se utilizoacute un detector de flama ionizante (FID) a una temperatura de 210 degC

con un flujo de H2 de 40 mL min-1y un flujo de aire de 450 mL min-1 previamente se realizoacute

una curva de calibracioacuten Los estaacutendares utilizados fueron grado reactivo marca Sigma

Aldrich aceacutetico propioacutenico y butiacuterico con un porcentaje de pureza de 995 98 y 99

respectivamente Cada una de las determinaciones se realizoacute por triplicado

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Determinacioacuten de metano

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGV mediante la aplicacioacuten de

modelos matemaacuteticos no lineales establecido por Moss et al (2000) donde se sentildeala

que la produccioacuten de CH4 se puede calcular de forma estequiomeacutetrica empleando la

siguiente ecuacioacuten

[119914119919120786] = 120782 120786120787 119914120784(119938119940119942119957119938119957119952) minus 120782 120784120789120787 119914120785(119953119955119952119953119946119952119951119938119957119952) + 120782 120786 119914120786 (119939119958119957119946119955119938119957119952)

Anaacutelisis estadiacutestico

El anaacutelisis estadiacutestico para la produccioacuten de gas aacutecidos grasos volaacutetiles y metano se

realizoacute mediante un anaacutelisis de varianza utilizando un disentildeo completamente al azar y la

prueba de medias de Tukey utilizando el paquete estadiacutestico SPSSreg para evaluar las

diferencias estadiacutesticas (plt005) (Cytel Software 2010) La fuente de variacioacuten

considerada fueron los aceites esenciales y compuestos terpenoides para aacutecidos grasos

volaacutetiles se consideraron como variables aacutecido aceacutetico propioacutenico y butiacuterico

RESULTADOS Y DISCUSIOacuteN

Para los aceites esenciales de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus) se observoacute que la mayor concentracioacuten de

carvacrol y timol estaacute presente en los aceites de clavo (carvacrol 303 mg mL-1) y oreacutegano

(carvacrol 1652 mg mL-1 timol 0247 mg mL-1) (Cuadro 1) se ha reportado que estos

dos compuestos tienen efecto antibacteriano contra bacterias gram negativas y positivas

para los cuales se conoce que el mecanismo de accioacuten es incrustarse en la membrana

de la ceacutelula bacteriana provocando la desintegracioacuten de esta estructura seguido de una

lisis celular (Rodriacuteguez-Garciacutea et al 2015 Friedman 2014 Beacutejaoui et al 2013 Garciacutea-

Garciacutea et al 2011) por lo que este efecto antibacteriano puede influir en la poblacioacuten de

la microbiota ruminal y por lo tanto modificar la fermentacioacuten ruminal

Cuadro 1 Compuestos terpenoides presentes en aceites esenciales analizados por cromatografiacutea

de gases

ACEITE Carvacrol

mg mL-1

Timol

mg mL-1

Linalol

mg mL-1

Terpineno

mg mL-1

Limoneno

mg mL-1

Aceite esencial de canela 00375 00108 0047 01431 25167

Aceite esencial de clavo 303 00068 00383 02753 15496

Aceite esencial de eucalipto 007 00142 04621 08725 499

Aceite esencial de menta 00169 0025 39401 48388 956

Aceite esencial de oreacutegano 1652 02474 00878 0 01449

Aceite esencial de romero 00524 00753 8865 03725 12425

Nile et al (2017) reportan que los aceites esenciales son ricos en terpenos (carvacrol

citral linalol y geraniol) y compuestos fenoacutelicos coincidiendo en el presente trabajo ya

que se encontraron ambos compuestos Albado et al (2001) reportoacute la presencia de

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6

compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

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9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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Page 5: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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5

Determinacioacuten de metano

El metano se infirioacute a partir de la concentracioacuten de AGV mediante la aplicacioacuten de

modelos matemaacuteticos no lineales establecido por Moss et al (2000) donde se sentildeala

que la produccioacuten de CH4 se puede calcular de forma estequiomeacutetrica empleando la

siguiente ecuacioacuten

[119914119919120786] = 120782 120786120787 119914120784(119938119940119942119957119938119957119952) minus 120782 120784120789120787 119914120785(119953119955119952119953119946119952119951119938119957119952) + 120782 120786 119914120786 (119939119958119957119946119955119938119957119952)

Anaacutelisis estadiacutestico

El anaacutelisis estadiacutestico para la produccioacuten de gas aacutecidos grasos volaacutetiles y metano se

realizoacute mediante un anaacutelisis de varianza utilizando un disentildeo completamente al azar y la

prueba de medias de Tukey utilizando el paquete estadiacutestico SPSSreg para evaluar las

diferencias estadiacutesticas (plt005) (Cytel Software 2010) La fuente de variacioacuten

considerada fueron los aceites esenciales y compuestos terpenoides para aacutecidos grasos

volaacutetiles se consideraron como variables aacutecido aceacutetico propioacutenico y butiacuterico

RESULTADOS Y DISCUSIOacuteN

Para los aceites esenciales de canela (Cinnamomum zeylanicum) clavo (Syzygium

aromaticum) eucalipto (Eucalyptus spp) menta (Mentha spicata) oreacutegano (Origanum

vulgare) y romero (Salvia rosmarinus) se observoacute que la mayor concentracioacuten de

carvacrol y timol estaacute presente en los aceites de clavo (carvacrol 303 mg mL-1) y oreacutegano

(carvacrol 1652 mg mL-1 timol 0247 mg mL-1) (Cuadro 1) se ha reportado que estos

dos compuestos tienen efecto antibacteriano contra bacterias gram negativas y positivas

para los cuales se conoce que el mecanismo de accioacuten es incrustarse en la membrana

de la ceacutelula bacteriana provocando la desintegracioacuten de esta estructura seguido de una

lisis celular (Rodriacuteguez-Garciacutea et al 2015 Friedman 2014 Beacutejaoui et al 2013 Garciacutea-

Garciacutea et al 2011) por lo que este efecto antibacteriano puede influir en la poblacioacuten de

la microbiota ruminal y por lo tanto modificar la fermentacioacuten ruminal

Cuadro 1 Compuestos terpenoides presentes en aceites esenciales analizados por cromatografiacutea

de gases

ACEITE Carvacrol

mg mL-1

Timol

mg mL-1

Linalol

mg mL-1

Terpineno

mg mL-1

Limoneno

mg mL-1

Aceite esencial de canela 00375 00108 0047 01431 25167

Aceite esencial de clavo 303 00068 00383 02753 15496

Aceite esencial de eucalipto 007 00142 04621 08725 499

Aceite esencial de menta 00169 0025 39401 48388 956

Aceite esencial de oreacutegano 1652 02474 00878 0 01449

Aceite esencial de romero 00524 00753 8865 03725 12425

Nile et al (2017) reportan que los aceites esenciales son ricos en terpenos (carvacrol

citral linalol y geraniol) y compuestos fenoacutelicos coincidiendo en el presente trabajo ya

que se encontraron ambos compuestos Albado et al (2001) reportoacute la presencia de

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compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

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9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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Page 6: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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6

compuestos terpenoides fenoles y compuestos relacionados metaboacutelicamente con el

carvacrol en aceites esencial de oreacutegano por lo que esta investigacioacuten coincide con el

presente estudio ya que se identificaron los terpenoides en el aceite de oreacutegano

(carvacrol timol y linalol) aunque en diferentes concentraciones Bantildeuelos et al (2018)

menciona que los terpenoides constituyeron 112 del aceite con -pineno (13)

limoneno (3) y 18-cineole (29) como los monoterpenos principales en el aceite

esencial de oreacutegano y R graveolens La presencia de limoneno en la presente

investigacioacuten coincidioacute con esos resultados

Los compuestos identificados son importantes por su actividad farmacoloacutegica por

ejemplo el limoneno es antibacteriano antifuacutengico antiseacuteptico y antiviral el timol es

antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antioxidante antirreumaacutetico y antiseacuteptico el

carvacrol es antibacteriano antifuacutengico antiinflamatorio antiseacuteptico antiespasmoacutedico y

expectorante (Sorentino y Landmesser 2005)

En la teacutecnica de digestibilidad in vitro la mayor obtencioacuten de gas en la teacutecnica de

digestibilidad in vitro (cuadro 2) se observoacute en el aceite esencial de eucalipto en sus tres

dosis (01=15759plusmn362 mL g-1 MS 03=17686plusmn110 mL g-1 MS y 06=17530plusmn362 mL

g-1 MS) Wang et al (2016) reportaron que al usar extractos de plantas medicinales no

siempre existe una tendencia de aumentar la concentracioacuten de gas ruminal (mL g-1 MS)

ya que algunos de ellos pueden tener el efecto contrario

En los compuestos terpenoides se observa una baja produccioacuten de gas para la dosis de

06 mL registrando 4824plusmn341 2977plusmn487 2863plusmn050 2898plusmn309 y 2980plusmn312 mL g-

1 MSplusmnDE (timol carvacrol linalol limoneno y terpineno respectivamente) Chouhan et al

(2017) y Gallegos-Flores et al (2019) reportan que los metabolitos secundarios

(terpenoides) de plantas son reconocidos como agentes antimicrobianos que actuacutean

contra las bacterias protozoos y hongos por lo que este efecto se ve reflejado en la poca

produccioacuten de gas debido a que inhibe el crecimiento de las bacterias metanogeacutenicas

ruminales y por lo tanto los aacutecidos aceacutetico propioacutenico y butiacuterico son los que se generan

en mayor cantidad durante la fermentacioacuten de los sustratos en el rumen

La concentracioacuten de gas (total) AGVacutes y CH4 se presenta en el (cuadro 3) la produccioacuten

de aacutecido propioacutenico se inhibioacute completamente en los aceites esenciales de eucalipto y

oreacutegano (dosis 01) mientras que en los compuestos terpenoides la produccioacuten de gas

se inhibioacute en timol dosis 03 carvacrol 06 linalol 03 limoneno 01 y 03 y terpineno 01

a excepcioacuten de aceite esencial de romero (dosis 01) Todas las dosis disminuyeron la

produccioacuten de aacutecido propioacutenico en comparacioacuten con el testigo de alfalfa La produccioacuten

de aacutecido butiacuterico se inhibioacute en el aceite esencial de clavo y canela en dosis de 01 y 03

mientras que la mayor produccioacuten de butiacuterico se presentoacute en limoneno a la dosis de 01

(68493plusmn009 mMLplusmnDE) pero se inhibe la produccioacuten de aceacutetico y propioacutenico

Sejian et al (2015) sentildealan que del 40 al 60 del total de los gases de efecto invernadero

(GEI) de la ganaderiacutea provienen de la fermentacioacuten enteacuterica el manejo del estieacutercol y las

diferentes actividades relacionadas con la obtencioacuten de alimentos para los animales Por

lo que los compuestos terpenoides presentan disminucioacuten de metano tal es el caso del

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7

limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

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8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

ABANICO VETERINARIO ISSN 2448-6132 abanicoacademicomxrevistasabanicoindexphpabanico-veterinario

9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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7

limoneno en su dosis 01 presentando alta produccioacuten de aacutecido butiacuterico pero inhibicioacuten

de aceacutetico y propioacutenico

Cuadro 2 Produccioacuten de gas con las diferentes dosis de los aceites y terpenoides

Produccioacuten de gas total en mL g-1 MSplusmnDE

Muestra

Dosis

(mL) 3 h 6 h 9 h 12 h 24 h 48 h

Aceite esencial de romero

01 1167plusmn014 2852plusmn046 5113plusmn144 7538plusmn229 10857plusmn016 14494plusmn144

03 1187plusmn185 2787plusmn356 4909plusmn615 7213plusmn932 10880plusmn1017 14698plusmn555

06 926plusmn004 2284plusmn601 4039plusmn1597 5895plusmn2824 9441plusmn1017 13913plusmn373

Aceite esencial de clavo

01 639plusmn512 1142plusmn590 1791plusmn107 2264plusmn135 2822plusmn1049 3576plusmn615

03 915plusmn196 1539plusmn281 1942plusmn107 2072plusmn135 2158plusmn469 2248plusmn939

06 931plusmn011 1434plusmn075 1781plusmn114 1901plusmn121 1977plusmn128 2072plusmn124

Aceite esencial de eucalipto

01 1363plusmn231 3390plusmn423 6106plusmn626 8838plusmn761 12218plusmn1049 15759plusmn362

03 1690plusmn096 3989plusmn228 6992plusmn398 9914plusmn445 13702plusmn309 17686plusmn110

06 1554plusmn569 3667plusmn786 6428plusmn539 9285plusmn445 13264plusmn1300 17530plusmn362

Aceite esencial de menta

01 850plusmn345 1801plusmn219 2726plusmn059 3350plusmn372 4597plusmn1179 6529plusmn449

03 926plusmn053 1464plusmn238 2093plusmn448 2329plusmn722 2485plusmn494 2626plusmn760

06 749plusmn124 1142plusmn228 1424plusmn473 1539plusmn558 1620plusmn612 1680plusmn669

Aceite esencial de oreacutegano

01 1338plusmn071 2110plusmn082 2643plusmn092 2824plusmn084 2930plusmn078 3066plusmn082

03 1439plusmn164 2226plusmn240 2774plusmn260 2943plusmn238 3041plusmn215 3182plusmn196

06 1207plusmn228 1886plusmn379 2407plusmn441 2606plusmn452 2736plusmn448 2905plusmn468

Aceite esencial de canela

01 1411plusmn322 2447plusmn841 3171plusmn272 3458plusmn3790 3591plusmn368 3788plusmn966

03 1418plusmn005 2201plusmn174 2787plusmn272 2983plusmn336 3073plusmn366 3239plusmn388

06 1529plusmn078 2422plusmn156 3031plusmn173 3244plusmn185 3370plusmn210 3566plusmn231

Timol

01 195plusmn037 503plusmn053 1004plusmn120 3374plusmn408 4126plusmn449 4799plusmn492

03 234plusmn004 537plusmn006 989plusmn046 3184plusmn253 3917plusmn313 4583plusmn355

06 214plusmn014 479plusmn070 928plusmn116 3182plusmn322 4019plusmn391 4824plusmn341

Carvacrol

01 217plusmn004 501plusmn012 968plusmn043 1497plusmn046 2228plusmn015 2847plusmn038

03 252plusmn001 538plusmn004 970plusmn025 1486plusmn038 2173plusmn039 2906plusmn085

06 203plusmn008 472plusmn051 907plusmn048 1390plusmn121 2167plusmn274 2977plusmn487

Linalol

01 206plusmn004 561plusmn004 1080plusmn004 1631plusmn004 2279plusmn011 3037plusmn190

03 209plusmn029 547plusmn033 1031plusmn045 1654plusmn189 2365plusmn307 3198plusmn186

06 204plusmn003 527plusmn014 988plusmn033 1505plusmn046 2164plusmn033 2863plusmn050

Limoneno

01 197plusmn004 535plusmn003 1031plusmn005 1563plusmn006 2197plusmn143 2918plusmn009

03 216plusmn002 559plusmn001 1048plusmn000 1586plusmn006 2236plusmn001 3068plusmn200

06 195plusmn002 460plusmn003 870plusmn027 1350plusmn063 2010plusmn082 2898plusmn309

Terpineno

01 202plusmn006 539plusmn018 1019plusmn031 1537plusmn051 2141plusmn007 2871plusmn230

03 204plusmn012 522plusmn011 973plusmn004 1460plusmn003 2104plusmn031 2892plusmn167

06 224plusmn019 490plusmn028 887plusmn043 1348plusmn069 2064plusmn087 2980plusmn312

Alfalfa 0 219plusmn004 496plusmn041 886plusmn096 1353plusmn092 2212plusmn113 3230plusmn541

SM materia seca DE Desviacioacuten estaacutendar

ABANICO VETERINARIO ISSN 2448-6132 abanicoacademicomxrevistasabanicoindexphpabanico-veterinario

8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

03 17686plusmn110a 22918plusmn002a 67656plusmn016a 3797plusmn019b 86046plusmn006bc

06 17530plusmn362a 25142plusmn001a 76487plusmn043a 4661plusmn019b 93972plusmn006bc

Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

03 2626plusmn760c 8686plusmn1201ab 5100plusmn2569a 1063plusmn4419ab 41942plusmn3355b

06 1680plusmn669d 23492plusmn436b 5284plusmn019b 2146plusmn019b 9977plusmn274a

Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

03 4583plusmn355bc 187453plusmn024a 000plusmn000c 55146plusmn011a 106412plusmn021c

06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

03 2906plusmn085c 182695plusmn005a 72429plusmn015a 3587plusmn019b 63730plusmn008b

06 2977plusmn487c 143698plusmn001a 000plusmn000c 43803plusmn013a 82185plusmn008bc

Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

03 3198plusmn186c 189133plusmn004a 000plusmn000c 58239plusmn011a 108405plusmn009c

06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

DE Desviacioacuten estaacutendar valores de medias con letras distintas en la misma columna difieren estadiacutesticamente (plt005)

ABANICO VETERINARIO ISSN 2448-6132 abanicoacademicomxrevistasabanicoindexphpabanico-veterinario

9

CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

LITERATURA CITADA

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Page 8: Modificación de la fermentación ruminal in vitro para

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8

Cuadro 3 Produccioacuten de gas total (mL g-1 MS) aacutecidos grasos volaacutetiles (mML) y metano in vitro en

los diferentes aceites esenciales y terpenoides empleados

Muestra Dosis

(mL)

Produccioacuten total

de Gas (mL g-1

MS) plusmn DE

Aacutecidos Grasos Volaacutetiles (mML) plusmn DE

Metano mML Aacutecido

aceacutetico

Aacutecido

Propioacutenico

Aacutecido

butiacuterico

Aceite esencial de

romero

01 14494plusmn144a 23805plusmn002a 78220plusmn015a 4362plusmn019b 87357plusmn006bc

03 14698plusmn555a 21543plusmn003a 66461plusmn016a 3288plusmn019b 79985plusmn007bc

06 13913plusmn373a 18922plusmn004a 52614plusmn016a 2499plusmn019b 71683plusmn007bc

Aceite esencial de

clavo

01 3576plusmn615c 43587plusmn013b 3915plusmn019b 000plusmn000c 18537plusmn001a

03 2248plusmn939c 3126plusmn013b 4046plusmn019b 000plusmn000c 12954plusmn001a

06 2072plusmn124cd 32225plusmn013b 4085plusmn019b 1516plusmn019bc 13985plusmn012a

Aceite esencial de

eucalipto

01 15759plusmn362a 23432plusmn002a 000plusmn000c 61794plusmn010a 130162plusmn007c

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Aceite esencial de

menta

01 6529plusmn449b 2449plusmn1177b 5176plusmn2588a 1839plusmn382bc 10332plusmn3326a

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Aceite esencial de

oreacutegano

01 3066plusmn082c 1217plusmn014b 000plusmn000c 1032plusmn019bc 5889plusmn020a

03 3182plusmn196c 1170plusmn015b 2172plusmn019b 1795plusmn019bc 5388plusmn013a

06 2905plusmn468c 1056plusmn015b 2585plusmn019b 1756plusmn019bc 4748plusmn013a

Aceite esencial de

canela

01 3788plusmn966bc 4732plusmn012b 10835plusmn019ab 000plusmn000c 18315plusmn001a

03 3239plusmn388c 24948plusmn014b 4747plusmn019b 000plusmn000c 9921plusmn001a

06 3566plusmn231c 32343plusmn013b 7203plusmn019b 3963plusmn019b 14159plusmn012a

Timol

01 4799plusmn492bc 188420plusmn004a 72035plusmn015a 3987plusmn019b 66574plusmn008b

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06 4824plusmn341bc 182496plusmn005a 69655plusmn015a 3459plusmn019b 64352plusmn008b

Carvacrol

01 2847plusmn038c 193354plusmn023a 000plusmn000c 60355plusmn010a 111151plusmn020c

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Linalol

01 3037plusmn190c 186850plusmn005a 73191plusmn015a 3856plusmn019b 65498plusmn008b

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06 2863plusmn050c 190858plusmn004a 71300plusmn015a 3315plusmn019b 67605plusmn008b

Limoneno

01 2918plusmn009c 199096plusmn002a 000plusmn000c 60349plusmn010a 113733plusmn007c

03 3068plusmn200c 190962plusmn004a 000plusmn000c 56793plusmn011a 108650plusmn009c

06 2898plusmn309c 175533plusmn005a 62503plusmn034a 3526plusmn019b 63212plusmn027b

Terpineno

01 2871plusmn230c 000plusmn000c 000plusmn000a 68493plusmn009a 27397plusmn005ab

03 2892plusmn167c 199091plusmn004a 76228plusmn015ordf 4087plusmn019b 70263plusmn007bc

06 2980plusmn312c 188646plusmn027a 000plusmn000c 58348plusmn010a 108230plusmn023c

Alfalfa 0 3230plusmn541c 167352plusmn006a 77533plusmn015a 4350plusmn019b 55727plusmn008b

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CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

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fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

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CONCLUSIONES

La mitigacioacuten de metano se observoacute con el aceite de romero en su dosis maacutexima en la

fermentacioacuten ruminal in vitro ya que presenta incremento de las concentraciones de

AGVacutes (aceacutetico propioacutenico y butiacuterico) Los compuestos terpenoides con mejor

fermentacioacuten ruminal in vitro fueron timol linalol y limoneno en la dosis maacutexima Se

sugiere profundizar en el uso de aceites esenciales de plantas porque pudieran ser una

alternativa en la buacutesqueda de productos orgaacutenicos con mayor sustentabilidad

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