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UNIVERSIDAD NACIONAL MICAELA BASTIDAS DE APURÍMAC
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y
ZOOTECNIA
PROYECTO DE TESIS
“DISENTERÍA POR CONSUMO DE AGUA CONTAMINADA CON
COLIFORMES TOTALES Y TERMOTOLERANTES EN EL DISTRITO DE
TAMBURCO”
PRESENTADO POR:
MIGUEL ARROYO RODRÍGUEZ
ASESOR:
DR. NILTON CÉSAR GÓMEZ URVIOLA
ABANCAY, PERÚ
2015
1
INDICE
I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA........................................................................3
1.1. DESCRIPCIÓN Y FORMULACIÓN DEL PROBLEMA.......................................................31.1.1. Descripción del problema.................................................................................31.1.2. Formulación del problema................................................................................5
1.2. JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIÓN............................................51.3. OBJETIVOS................................................................................................................6
1.3.1. Objetivo general................................................................................................61.3.2. Objetivos específicos........................................................................................6
II. MARCO REFERENCIAL...............................................................................................7
2.1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN....................................................................72.2.MARCOTEÓRICO...........................................................................................................12
2.2.1. El agua.............................................................................................................122.2.2. Parámetros bacteriológicos.............................................................................132.2.3. Enterobacterias................................................................................................142.2.4. Coliformes.......................................................................................................15
2.2.5.diarrea aguda……………………………………………………………………19 2.3.Marcoconceptual…………………………………………………….....………………34 3.2.Variables…………………………………………………………………..…….…...39
3.2.1. Operacionalización de variables………………………………………………….39
IV. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN………………………….............40
4.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIÓN...........................................................................414.1.1. Tipo de investigación......................................................................................414.1.2. Nivel de la investigación.................................................................................41
4.2. POBLACIÓN.............................................................................................................424.2.1. Características y delimitación.........................................................................434.2.2. Ubicación espacio – temporal.........................................................................44
4.3. MUESTRA Y TÉCNICA DE MUESTREO......................................................................454.4. DESCRIPCIÓN DE LA EXPERIMENTACIÓN................................................................464.5. TÉCNICA E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS.......................................47
V. ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO......................................................................48
5.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.............................................................................495.2. RECURSOS INSTITUCIONALES, HUMANOS Y FINANCIEROS......................................49
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.........................................................................50VII. ANEXOS......................................................................................................................54
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I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1. Descripción y formulación del problema
1.1.1. Descripción del problema
Según Organización mundial de salud (OMS), el 80 % de enfermedades infecciosas
microbiológicas gastrointestinales y una tercera parte de defunciones causadas por estas se
deben al uso y consumo de agua insalubre, también reconoce este organismo internacional
que solo un 45 % de la población mundial consume agua tratada y desinfectada para ser
considerada “segura”.
Las enfermedades Diarreicas, son una de las principales afecciones producidas por
el consumo de agua contaminada, y en el mundo, una de las poblaciones más afectadas es
el área rural esta que tiene un alto índice de pobreza, analfabetismo y falta de servicios de
tratamiento del agua potable, afectando el desarrollo normal y efectivo de las personas que
habitan en estas zonas, esto prevalece en numerosos países, en los que el tratamiento de
las aguas residuales es inadecuado (Gadma, 2012).
El principal riesgo para la salud en torno a la calidad del agua es la contaminación
bacteriológica,ausencia de drenaje, la dotación de líquido de baja calidad y el mal
manejo de basuras y excretas. Como resultado, en el país se presenta una alta tasa de
defunción de niños menores de 5 años de edad a causa de infecciones gastrointestinales,
infantes que habitan en zonas donde el acceso al agua tiene los más altos costos y
con condiciones sanitarias precarias. Lo anterior es consistente con la evaluación de
la OMS según la cual 90% de las infecciones intestinales agudas se deben a la ingesta
de agua de mala calidad y al inadecuado saneamiento básico, (Salvador y Guzman,
2009).
En la actualidad 5.5 millones de personas se enferman de infecciones intestinales
cada año en el país. La gran mayoría de estos padecimientos se debe a infecciones
con bacterias fecales como la Escherichia coli, Campylobacter jejuni, Yersinia
enterocolitica y Clostridium difficile (Conagua, 2010).
Según datos de la FAO, hasta el año 2007 aproximadamente 1.100 millones de seres
humanos en el mundo no tenían acceso al agua potable de calidad y en cantidad adecuada
para sus necesidades diarias y más de 2.600 millones de personas no contaban con
3
instalaciones de saneamiento adecuadas. Además cada día mueren aproximadamente
30.000 personas por enfermedades asociadas al agua. En los países en vías de desarrollo el
80% de todas las enfermedades tienen este origen y una cuarta parte de los niños que
nacen en estos países mueren antes de cumplir 5 años, la gran mayoría por enfermedades
de transmisión hídrica (OMS, 1998; UNESCO, 2008).
En el grupo de bacterias termotolerantes está incluida Escherichia coli, considerada como
un organismo indicador de contaminación fecal. Se ha demostrado que esta bacteria
siempre está presente en un número elevado en las heces de humanos y animales de sangre
caliente y comprende casi el 95% de los coliformes en heces (Castro, 1996).
Actualmente, los coliformes totales se emplean para evaluar la calidad higiénica del
agua y el grupo de bacterias coliformes termotolerantes, para evaluar la calidad sanitaria
del agua, calidad que está relacionada con la transmisión de patógenos (Allen, 1996).
Asimismo en el distrito de Tamburco actualmente es deficiente abastecimiento de agua
para consumo humano de 14 captaciones subterráneas la misma cuenta con red de
distribución de tubería, con un débil control y administración de Junta de administración de
servicios de agua (JASS), en un 60%, 30 %, por municipio y un 10 % por EMUSAP.
Asimismo inadecuado control de calidad, vigilancia, monitoreo y seguimiento de centros de
salud (DIGESA), área técnica municipal, y Dirección regional de vivienda saneamiento y
construcción, por otro lado insuficiente capacitación técnica de los usuarios de agua potable.
Sin embargo, el Decreto Supremo Nº 031-2010-SA tampoco establece ninguna
disposición que permita asegurar un trabajo integrado de las entidades involucradas en la
gestión del recurso para garantizar la calidad del agua.
En la población de tamburco, se comprobó que 75% de puntos muestreados no presentan
cloro residual libre (DESA, 2011).Esta situación, deja en Manifiesto un claro problema,
por tanto es necesario saber, ¿Existe presencia de coliformes totales y termotolerantes
en el agua de consumo humano y esto ocasiona disenterías en el distrito de
Tamburco?
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I.2 Justificación e importancia de la investigación
El interés de este problema radica en que la población está inmersa a sufrir enfermedades
diarreicas agudas debido al mal tratamiento del agua de consumo humano, asimismo el
efecto de la presencia de coliformes termo tolerantes y totales en agua de consumo
humano, en la morbilidad de la población del distrito de tamburco, la magnitud del
problema de contaminación del agua, conflictos socioeconómicos, y políticas de sanidad y
saneamiento, son unos de los problema a tratar. Cada vez, la calidad del agua es más baja,
lo que puede contribuir a trasmitir gran cantidad de enfermedades diarreicas agudas (EDA)
(Balcells, 1999).
Estas constituyen uno de los principales problemas de salud en la población infantil porque
representan la primera causa de muerte en niños de 1 a 5 años de edad, en quienes
ocasionan 3,2 millones de defunciones anuales en el mundo (Allen, 1996). En un estudio
realizado por la organización Panamericana de la Salud en 1984, se determinó que
aproximadamente 75% de los sistemas de aguas locales y municipales en América Latina
estaban mal desinfectados o carecían de sistemas de desinfección. Cabe destacar que el
monitoreo de la calidad del agua potable, pone al alcance de las autoridades sanitarias
información sistemática.
El proyecto busca el mejoramiento de la calidad de vida de los pobladores de Distrito de
Tamburco, y también mejorar la calidad del agua que se consume diariamente en la
población. Generalizando todas las características del presente proyecto de investigación,
la finalidad del mismo tiene como objetivos fundamentales evitar que los habitantes de
distrito de Tamburco sigan consumiendo agua contaminada, identificar factores de riesgo
como son la presencia de conexiones de agua en mal estado, falta de tratamiento del agua
por ausencia de una Planta potabilizadora, presencia de desechos infecciosos cerca de las
vertientes o forma de manejo inadecuado del agua y si existe la presencia enfermedades
diarreicas agudas relacionadas a este problema en los hogares ha investigarse, para lo cual
existe la buena predisposición del investigador y de la población mencionada.
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1.2. OBJETIVOS
1.3.1. Objetivo general
Determinar la prevalencia de disenterías debido a la contaminación del agua por
coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurímac, 2016.
1.3.1. Objetivos específicos
Determinar el número de casos de disenterías ocasionadas por contaminación del agua
con coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay,
Apurímac, 2016.
Cuantificar los coliformes totales y termotolerantes presentes en el agua de consumo
humano en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurímac, 2016.
Determinar el cloro residual en el agua potable en cada sistema de abastecimiento en el
distrito de Tamburco, Apurímac, 2016.
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II. MARCO REFERENCIAL
2.1 Antecedentes de la investigación
Vilca (1997), en los estudios realizados en agua de consumo humano en el
distrito de Carmen Alto. San Juan Bautista, Santiago de Pischa y Acosvinchos,
del total de 56 muestras procesadas se encontraron microorganismos indicadores
de contaminación fecal en un 37.5% (periodo secano), y 45.8% en (periodo
lluvioso), los cuales mostraron valores superiores a los recomendados por la
OMS. Mientras que en los distritos de Vinchos.Soccos,Ocros,Quinua y Chiara del
total de muestras analizadas se reportaron microorganismos indicadores de
contaminación fecal en un 55% en (periodo secano), y 67.5% (periodo lluvioso), los
cuales mostraron valores superiores a los recomendados por la OMS; en los
distritos de Acocro, Tambillo y San José de Ticcllas se encontraron la mayor carga
microbiana en un 75% en (periodo secano), y 85.7% en (periodo lluvioso) donde
mostraron valores superiores a los recomendados por la OMS.
Bastidas y Maria (2009), en consecuencia los principales problemas de la calidad
microbiológica del agua que inciden en las tres zonas de estudio se origina
por inadecuada abastecimiento de agua, disposición de excretas, disposición de
basuras; sobre todo en las fuentes naturales como las manantiales demostrando
de esta manera el descuido por parte de las autoridades, Municipalidades,
Ministerio de Salud y por ende por la misma población, y para superar estos
problemas se sugieren un adecuado funcionamiento de las plantas de
potabilización, proteger las fuentes de agua y educación sanitaria a la población
(Botero, 2005). En un estudio realizado en la ciudad de Huanta, en la red de
agua potable se encontró un promedio de 61 UFC/ml. de microorganismos
mesófilos heterotróficos viables y prácticamente ausencia total tanto de
coliformes totales y coliformes termotolerantes. En cambio, en la red de
piletas públicas y en la red de distribución del asentamiento humano Accoscca,
el promedio encontrado para microorganismos mesófilos heterótrofos viables fue
de 49 x 102 y 22 x 103 UFC/100 ml, respectivamente; el promedio para
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coliformes totales fue de 16 x 102 y 70 x 102 UFC/100 ml, respectivamente; y el
promedio para coliformes termotolerantes fue del 1xl02 y 27 x 102 UFC/100 ml,
respectivamente. La cantidad de microorganismos en los tres sistemas de
distribución de agua se eleva entre los meses de agosto a noviembre,
disminuyendo en temporadas de lluvia; la disminución podría deberse a un
proceso de dilución de las fuentes con agua perclorada. El agua de la red
de piletas públicas y de la red de distribución del asentamiento humano
Accoscca, en algunas circunstancias, es utilizada por toda la comunidad de
Huanta, por lo que se deduce que la mayoría de la población está expuesta
al riesgo de contraer enfermedades de transmisión hídrica, pues se trata de
aguas no aptas para consumo humano (Botero, 2004).
Allen (1996), se observa que el 92,4% del total de muestras tomadas en el Valle de
Mariquina, presenta coliformes totales en límites superiores a 1.8 bact/100 ml.
Además el 59,2% del total de muestras evidenció presencia de coliformes fecales sobre
1.8 bact/100 ml y el 58,6% presencia de E. coli. También se puede observar que tanto la
Comuna de Mariquina como la de Máfil presentan similares porcentajes de muestras
positivas a CT. Al analizar los CF y presencia de E. coli, Mariquina presentó una mayor
cantidad de muestras positivas en ambos parámetros, en comparación con Máfil.
Cruz (2006), menciona que el 100 % de las muestras de agua analizadas
presentaron valores para número de Bacterias Mesófilas Heterótrofas Viables,
superiores a lo permisible (500 UFC/ml), en un rango de 698,000 a 13,000
UFC/ml.;para número de Coliformes Totales, superiores a lo permisible (0 UFC/100
ml), en un rango de 545,000 UFC a 10,000 UFC/100ml.; para número de
Coliformes Fecales, superiores a lo permisible (0UFC/100 ml), en un
rango de 553,000 a 10,000 UFC/100 ml y valores para Enterococos,
superiores a lo permisible (0 UFC/100 ml), en un rango de 680,000 a 10,000
UFC/100ml. Por lo que se concluye que no existe ningún sistema de
purificación del agua de consumo humano en el Distrito de Pichari.
UNAN (2012), de las 63 muestras de 14 comunidades, de análisis de las aguas de pozos se
encontró que el 91.3% de las muestras analizadas no son aptas para consumo humano
según las normas CAPRE para los parámetros microbiológicos. Basándose en los
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estándares del laboratorio de microbiología de agua de la UNAN-León (análisis
completo), resultaron que el 97% no son aptas para el consumo humano. Las comunidades
que presentaron un mayor un número de UFC de Coliformes totales y fecales fueron:
Pintora 1, Monte Redondo 1, 2, y 3. Es decir son las fuentes de agua que presentan
mayor nivel de contaminación microbiológica. El tipo de suelo que se ha encontrado en el
sector noreste, arenoso o franco arenoso, es altamente permeable por lo que podría ser un
factor de riesgo para la contaminación de los acuíferos de todas aquellas sustancias
solubles en agua.
UNAN (2012), la contaminación que presentan las muestras de agua de consumo de este
estudio es debida fundamentalmente a una contaminación cruzada, es decir, no se puede
establecer la calidad del agua del acuífero sino la calidad del agua que consume la
población directamente ya que la principal fuente de contaminación que se ha asociado a
los resultados obtenidos es la introducción de materia fecal cercano a los pozos, a través de
los mecates y baldes sucios que se utilizan para la extracción del agua .
Torres (2010), refiere que los resultados muestran que el agua en estudio no es apta para
consumo humano debido a que en los distintos puntos y meses de muestreo se encontró
presencia de coliformes totales en un 100% y E. coli en un 86.6%, lo cual señala que estos
indicadores se encuentran en una proporción mayor a lo establecido según la
normatividad.. Algunos de los microorganismos identificados son Citrobacter sp,
Enterobacter sp, Klebsiella sp, Escherichia coli y otros como Hafnia sp., Arizona sp. y
Serratia sp, que igualmente causan enfermedades.
Garcia (2011), se aplicó una encuesta para conocer características socio demográfico,
conocimientos y prácticas. El grupo etario, con edades comprendidas entre 20 a 39 años
el 60% y de 40 a más el 40% de hombres; de 20 a 39 años el 70 % y de 40 a más el 30%
de mujeres. Conocimientos y prácticas el 45% no conoce sobre el concepto del agua
segura. Enfermedades causadas por la insalubridad, diarrea el 42%, cólera el 31% y el
dengue el 52%. Purificación del agua el 30% si trata el agua y el 70% no practica
ningún método de purificación.
Gonzales (2010), muestra el número más probable de coliformes totales y fecales del agua
en los tanques de los edificios sector 5 de la Urb. El Perú. Se observó en el primer muestreo
la presencia de coliformes totales en el agua de los tanques I, III, IV,V (≥16 NMP/ml ),
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cifra que excede el valor de referencia OMS . De igual manera se observó la presencia de
coliformes fecales fuera de lo establecido en todas las muestras, en todas las muestra con
ausencia de Escherichia coli en las mismas.
Mora (2002), los resultados indican que cinco brotes (22.7%) se clasifican en la categoría
1, es decir, el agua tuvo un 100% de responsabilidad en la transmisión del agente
etiológico; ya que este se aisló tanto en las heces de los pacientes como en el agua para
consumo de las poblaciones respectivas. Dos brotes se ubicaron en la categoría 11 (9.1 %);
en este caso, aunque se aislaron los mismos géneros bacterianos en las heces y el agua,
diferían en la especie o en alguna otra característica. En diez brotes no se logró aislar el
agente patógeno en el agua de consumo (45.0%); sin embargo, las poblaciones afectadas
utilizaban agua de calidad no potable, por eso se sitúan en la categoría III. En la categoría
IV se clasificó solo un brote (4.5%), ya que no se pudo comprobar la presencia del agente
patógeno en el agua de consumo y esta no presentaba contaminación fecal (catalogada
como potable), pero se aislaron bacterias patógenas oportunistas en las fuentes de
abastecimiento.
Chiluiza (2015), Determinación de coliformes fecales en el agua de consumo humano y su
relación con enfermedades diarreicas agudas en los hogares de la parroquia de pasa del
cantón ambato en el período diciembre 2014. Encontró resultados en la investigación se
realizó la recolección de datos, mediante encuestas a 100 hogares de la Parroquia Pasa,
distribuidos proporcionalmente a las 10 comunidades, en la cual se investigó a 111
habitantes, analizando la forma de captación y uso de del agua que llega a sus hogares,
además se indago si presentaron episodios de enfermedad diarreica aguda, en el lapso de 6
meses de estudio, de igual forma se tomó muestras de agua de cada uno de los hogares
investigados en total de 87, así como de muestras de heces a los casos de EDA positivos
en un total de 50, los cuales se establecieron como muestras de análisis.
Torres (,2004),Impacto en la Incidencia de las Enfermedades Diarreicas Agudas de una
intervención sanitaria en el tratamiento del agua de consumo humano en el caserío de
Monte encontrándose: el abastecimiento de agua es a través de la red pública, que el
almacenamiento de agua en el interior del domicilio es bueno en 59% de la viviendas de
Monte Castillo, el 60% de población de Monte Castillo tiene conocimiento sobre agua
segura, que el suministro suficiente de cloro residual libre la presencia de coliformes
10
fecales es cero, que la ejecución del proyecto en su conjunto se logró reducir la tasa de
incidencia de las enfermedades diarreas agudas en la población menor de 5 años.
Franklin (2014), Para la investigación se tomó 30 muestras de agua de casas al azar
utilizando la tabla de números al azar, se analizó el agua utilizando el método de filtración
por membrana, teniendo como resultado que el agua de la parroquia contiene altos índices
de coliformes y no cumple con la norma técnica. Se aplicaron encuestas a los estudiantes de
la escuela Nicolás Martínez, para determinar que las enfermedades diarreicas agudas son
producidas por el consumo del agua o por otros factores, teniendo como resultado que el
90% de los estudiantes presentan diarreas por la ingesta del agua y un 10% por otros
factores.
Los desechos humanos se evacuan en letrinas abiertas, canales y corrientes de agua, o se
esparcen en las tierras de labranza. Según las estimaciones, todos los años se registran
4.000 millones de casos de enfermedades diarreicas, que causan 3 a 4 millones de
defunciones, sobre todo entre los niños (OPS- OMS, 2000).
11
2.2. MARCO TEÓRICO
2.2.1. El agua
Es un elemento natural indispensable para el desarrollo de la vida y de todas las
actividades del ser humano.
En nuestro planeta cubre el 75% de la superficie, pero toda esta cantidad de agua no se
encuentra en condiciones aptas para el consumo humano. El97.5% es agua salada, el
2.5% es agua dulce que se encuentra en lagos, ríos arroyos, vertientes, embalses, esta
mínima proporción es la que podemos utilizar con más facilidad (Van Pelt ,2010).
Agua potable
Se llama agua potable al agua dulce que tras ser sometida a un proceso de potabilización se
convierte en agua apta para el consumo humano, pudiendo consumirla sin ningún tipo de
restricciones, debiendo pasar primero por un control de calidad y aprobando las rigurosas
normas establecidas a nivel nacional e internacional (Emapa, 2011).
Desinfección. Para asegurar aún más la potabilidad del agua, se le agrega cloro que
elimina el exceso de bacterias y lo que es muy importante,su desarrollo en el recorrido
hasta las viviendas.
Calidad del Agua
El Concepto de Calidad del Agua, encierra un conjunto de características físicas, químicas
y biológicas que hacen que el agua sea apropiada para el consumo humano y se relaciona
con los procesos de abastecimiento, disponibilidad y sistemas de purificación aplicados
(Emapa, 2011).
Parámetros que determinan la calidad del agua
Existen gran cantidad de parámetros que son de utilidad para medir el grado de
contaminación y calidad del agua, y son categorizados dentro de los siguientes grupos:
características físicas, químicas, biológicas y radiológicas.
•Cloro residual
El cloro es el agente más utilizado en el mundo como desinfectante en el agua de
consumo humano, debido principalmente a:
• Su carácter fuertemente oxidante responsable de la destrucción de los agentes
patógenos (en especial bacterias) y numerosos causantes de malos olores
12
• Su más que comprobada inocuidad a las concentraciones utilizadas.
• La facilidad de controlar y comprobar unos niveles adecuados.
La cloración del agua para suministro y residual sirve principalmente para destruir o
desactivar los microorganismos causantes de enfermedades. Una segunda ventaja
principalmente en el tratamiento de agua de bebida, reside en la mejora general de su
calidad, como consecuencia de la reacción del cloro con el amoniaco, hierro,
manganeso, sulfuros y algunas sustancias orgánicas (Emapa, 2012).
Por ello empezar la determinación de cloro inmediatamente después de tomar la muestra,
evitando el exceso de luz o agitación ev ita el registro de datos falsos (Emapa, 2012).
La Organización Mundial de la Salud (OMS) señala que no se ha observado ningún efecto
adverso en humanos expuestos a concentraciones de cloro libre en agua potable.
No obstante, establece un valor guía máximo de cloro libre de 5 mg por litro, y afirma
explícitamente que se trata de un valor conservador.
2.2.2. Parámetros bacteriológicos
La bacteria Escherichia Coli y el grupo coliforme en su conjunto, son los organismos más
comunes utilizados como indicadores de la contaminación fecal. Las bacterias Coliformes
son microorganismos de forma cilíndrica, capaces de fermentar la glucosa y la lactosa.
Otros organismos utilizados como indicadores de contaminación fecal son los
estreptococos fecales y los Clostridium (Emapa, 2011).
Estos últimos son anaerobios, formadores de esporas; estas son formas resistentes de
las bacterias capaces de sobrevivir largo tiempo. El análisis del agua se realiza con el
método de los tubos múltiples, o filtración por membrana y se expresa en términos de el
“número más probable” (índice NMP) en 100 ml de agua. Las aguas con un NMP inferior
a 1, son potables (norma INEN, 2011).
Según las Guías de la Calidad del Agua de Consumo elaboradas por la OMS
(Organización Mundial de la Salud) en el año 2004 y los actuales parámetros establecidos
a nivel nacional, se considera que estos indicadores microbiológicos, anteriormente
mencionados, no deben encontrarse en el agua de consumo humano.
Guías para el muestreo del agua
Según la OMS y las Guías para la calidad de agua potable, se muestran en el siguiente
cuadro los números de muestras mínimos recomendados para la verificación de la
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calidad microbiológica del agua de consumo.
Contaminación del agua
El crecimiento de la población a nivel mundial y el aumento del uso del agua para
diferentes actividades, ha incrementado los niveles de contaminación. Esta contaminación
está relacionada con los vertidos de origen doméstico e industrial a los cuerpos de agua
(Cyted, 2012).
Según la OMS (2010), el agua está contaminada cuando su composición se haya
alterado de modo que no reúna las condiciones necesarias para ser utilizada
beneficiosamente en el consumo del hombre y de los animales.
La contaminación del agua, es la presencia de cualquier agente físico, químico o biológico,
como también de agentes productores de enfermedades como bacterias, virus, hongos,
quistes de parásitos, amebas. El principal riesgo de contaminación del agua en la red de
distribución es debido a la contaminación por heces por infiltraciones. Normalmente el
aumento de las bacterias se debe a la ausencia de desinfectante residual en los valores de
concentración adecuados. Las tuberías tienen sedimentos en el fondo que provocarán y
favorecerán el crecimiento de microorganismos.
La contaminación bacteriana se refiere a la presencia de Unidades Formadoras de Colonias
(UFC), de bacterias indicadoras de contaminación de origen fecal. Estos organismos
formados en el agua pueden producir enfermedades en el cuerpo humano. Entre ellos se
incluyen bacterias como el coliforme fecal (Van pelt ,2010).
2.2.3. Enterobacterias
Las enterobacterias son un vasto grupo heterogéneo de bacilos Gram negativos cuyo
hábitat natural es el intestino de humanos y animales (Murray, 2006).
Esta familia incluye muchos géneros como Escherichia, Shiguella, Salmonella,
Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus y otros.
Las enterobacterias son microorganismos aerobios, fermentan una amplia variedad de
carbohidratos, poseen una estructura antigénica compleja y producen varias toxinas y
otros factores de virulencia.
Son el grupo más común de bacilos Gram negativos cultivado en el laboratorio clínico y
se encuentra entre las bacterias patógenas más comunes.
La taxonomía de las entero bacteriáceas es compleja, las entero bacteriáceas clínicamente
14
significativas comprenden 20 a 25 especies. Dentro de este grupo se encuentran los
denominados Coliformes (Murray, 2006).
La familia enterobacteriaceae son bacilos Gram negativos dotados de movilidad por
flagelos perítricos carentes de motilidad; crecen sobre peptona o medios con extractos
de carne sin adición de cloruro de sodio (Na Cl) ni otros suplementos; crecen bien en
agar Mac Conkey, en condiciones aerobias y anaerobias (son anaerobios facultativos),
fermentan la glucosa en vez de oxidarla y con frecuencia producen gas; son catalasa
positivos; oxidasa negativos y reducen el nitrato a nitrito (Murray, 2006).
Estructura antigénica
Las enterobacterias poseen una compleja estructura antigénica. Se han clasificado más de
150 diferentes antígenos somáticos O (lipopolisacáridos) termoestables, más de 100
antígenos K (capsulares) termolábiles, y más de 50 antígenos H (flagelares) (Murray,
2006).Los antígenos O son la parte más externa de la pared lipopolisacarida de la célula y
constan de unidades repetidas de polisacaridos. Algunos polisacáridos O contienen
azúcares únicos(Murray, 2006).
Aunque cada género de enterobacterias se asocia con grupos específicos O, un solo
microrganismo puede ser portador de varios antígenos O. Los antígenos K son antígenos O
externos sobre algunas, pero no todas, las enterobacterias.
Algunos son polisacáridos, incluso los antígenos K de la E. coli; otros son proteínas. Los
antígenos K pueden interferir con la aglutinación por antisuero O, y a veces se asocian con
la virulencia (Murray, 2006).Los antígenos H se localizan sobre los flagelos y se
desnaturalizan o retiran mediante calor o alcohol.
En las variedades de bacterias dotadas de motilidad se les puede conservar mediante
tratamiento con formalina. Estos antígenos H son una función de la secuencia de
aminoácidos en la proteína flagelar (flagelina).
La mayor parte de las bacterias gram negativas poseen lipopolisacáridos complejos en su
pared celular. Estas sustancias, endotoxinas, muestran varios efectos fisiopatológicos.
Muchas bacterias entéricas gram negativas también producen exotoxinas de importancia
clínica.
Bacilos entéricos
Los coliformes son bacterias que tiene forma de bastoncillos, que no forman
15
esporas, y son Gram negativos aerobias y anaerobias facultativas, su característica
principal es que fermenta la lactosa con formación de gases al cabo de 48 horas a una
temperatura de 35º a 37ºC, donde los coliformes Fecales se diferencian de estas por ser
termo tolerantes y resistentes a temperaturas de 44º a 46º (Murray, 2006).
Morfología y características de los coliformes. Son pequeños, tiene forma de
bastoncillos (0,5 um por 3 um), no forman esporas, pueden ser móviles y formar cadenas
(Murray, 2006).
2.2.5. Coliformes
Cuadro Nª 01. Clasificación taxonómica de las bacterias coliformes
Bacterias coliformes
Clasificación científica
Reino: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gamma Proteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Géneros
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter
Coliformes totales
Estas bacterias se define como el grupo de organismos Coliformes que pueden
fermentar la lactosa entre 44 y 45 °C, comprende especies del género Escherichia y en
menos grado, especies de los géneros Proteus, Klebsiela, Enterobacter y Citrobacter.
Lo Coliformes fecales son microorganismos con una estructura parecida a la de una
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bacteria común que se llama Escherichia coli y se transmiten por medio de los
excrementos. La Escherichia es una bacteria que se encuentra normalmente en la flora
intestinal del hombre y en el de otros animales de sangre caliente. Hay diversas cepas de
Escherichia; algunos no causan daño en condiciones normales y otros pueden incluso
ocasionar la muerte (OMS, 1996).
La prueba más relevante utilizada para la identificación del grupo Coliformes, es la
hidrólisis de la lactosa. El rompimiento de este disacárido es catalizado por la enzima B –
D - Galactosidasa. Ambos monosacáridos (la galactosa después es transformada en
glucosa por reacciones bioquímicas) posteriormente son metabolizados a través del ciclo
glicolítico y ciclo del citrato. Los productos metabólicos de estos ciclos son ácidos y/o
CO2. Para la determinación de la B - Galactosidasa se utilizan medios cromógenos
tales como chromocult (Manafi, 1998).
Coliformes Fecales
Los coliformes fecales también denominados coliformes termotolerantes, llamados así
porque soportan temperaturas hasta de 45°C, comprenden un grupo muy reducido de
microorganismos los cuales son indicadores de calidad, ya que son de origen fecal (Hayes,
1993).En su mayoría están representados por el microrganismo E. coli pero se pueden
encontrar, entre otros menos frecuentes, Citrobacter freundii y Klebsiella pneumoniae
estos últimos hacen parte de los coliformes termotolerantes, pero su origen se asocia
normalmente con la vegetación y solo ocasionalmente aparecen en el intestino (Hayes,
1993).
Los coliformes fecales integran el grupo de los coliformes totales, pero se diferencian de
los demás microorganismos que hacen parte de este grupo, en que son indol positivo, su
rango de temperatura óptima de crecimiento es muy amplio (hasta 45°C) y son mejores
indicadores de higiene en alimentos y en aguas, la presencia de estos indica presencia de
contaminación fecal de origen humano o animal, ya que las heces contienen dichos
microorganismos, presentes en la flora intestinal y de ellos entre un 90% y un 100% son E.
coli mientras que en aguas residuales y muestras de agua contaminadas este porcentaje
disminuye hasta un 59% (Gomez, 1999).
Distribución de los Coliformes
Las cepas de Coliformes Totales y Coliformes Fecales se encuentran en el suelo,
17
alimentos, agua, polvo y principalmente en el tracto intestinal del hombre y animales de
sangre caliente.
Estos organismos se transmiten por contacto con el agua y alimentos contaminados y falta
de higiene.
Las enfermedades infecciosas son siempre el producto de tres eslabones imprescindibles
de una cadena interrelacionada con el agente infeccioso, llamados factores
epidemiológicos primarios. Reservorio, fuente de infección, mecanismo de transmisión y
huésped susceptible, que constituye la cadena epidemiológica de transmisión.
Potenciando e incluso facilitando la infección de estos se hallan los factores
epidemiológicos secundarios, que condicionan la interrelación de los seres vivos entre sí y
su medio ambiente (OPS, 1987).
• Factores Biológicos o Endógenos
• Factores ligados al entorno
• Estacionales, medio laboral, socioeconómico (vivienda, saneamiento,
hacinamiento) demográficos (habitad, estructura social o familiar).
Escherichia coli
Originalmente llamada Bacterium comune, fue aislada por primera vez en 1985 a partir
de heces de niños; son bacilos estrechos de 1,1 a 1,5 μm de diámetro y de 2 a 6 μm de longitud,
se encuentran solos o en parejas, Gram negativos, móviles por flagelos perítricos o
inmóviles, anoxigénicos facultativos, poseen metabolismo respiratorio y fermentativo
(Murray ,2006).
Perteneciente a la familia Enterobariaceae, son coliformes capaces de producir indol a
partir de triptófano, en 21 +/- 3 horas a 44 +/- 0.5°C. También poseen la enzima B -
Galactosidasa, que reacciona positivamente en el ensayo del rojo de metilo y pueden
descarboxilar el ácido L – glutámico, pero no son capaces de utilizar citrato como única
fuente de carbono o de crecer en un caldo con cianuro de potasio (Murray, 2006).
E. coli es la única especie dentro de las Enterobacterias que presenta la enzima B – D
Glucoronidasa, que degrada el sustrato 4 – metilumberiferil – β – D - glucorónico (MUG),
formando 4 - metilumbeliferona, este producto tiene la propiedad de emitir fluorescencia
azul/verde cuando se ilumina con luz ultravioleta (Murray ,2006).
E. coli presenta características bioquímicas importantes que permiten la diferenciación con
18
otros coliformes, como ser positivo para la prueba de indol.
El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptófano.
La multitud de cepas capaces de producir enfermedad se encuentra reflejada en la
diversidad antigénica de esta especie. Se ha descrito un gran número de antígenos O, H y
K, los cuales se utilizan para clasificar a las cepas con fines epidemiológicos. Algunos
sero grupos antigénicos específicos se asocian a mayor virulencia (Murray ,2006)
Patogenia e inmunidad
Además de los factores generales que comparten todos los miembros de la familia
Enterobacteriaceae, las cepas de Escherichia responsables de enfermedades como las IAU
y las gastroenteritis poseen unos factores de virulencia especializados. Estas dos categorías
generales son las adhesinas y las exotoxinas.
Adhesinas
E. coli es capaz de permanecer en el aparato urinario o en el aparato digestivo
como consecuencia de su capacidad de adherencia a las células en estas localizaciones
para evitar ser eliminado por el efecto de arrastre de la orina que se expulsa con la micción
o por la motilidad intestinal. Las cepas de E. coli poseen numerosas adhesinas muy
especializadas.
Estas incluyen factores antígenos del factor de colonización (CFA/I, CFA/II,
CFA/lll), fimbrias de adherencia y agregación (AAF/I, AAF/III), pili que forman haces
(Bfp), intimina, pili P (que también se une a los antígenos del grupo sanguíneo P), proteína
Ipa (antígeno del plásmido de invasión) y fimbrias Dr (que se unen a los antígenos del
grupo sanguíneo (Murray ,2006).
Exotoxinas
E. coli produce también un espectro variado de exotoxinas.
Estas incluyen las toxinas Shiga (Stx-1, Stx-2), las toxinas termoestables (STa, STb) y las
toxinas termolábiles (LT-I y LT-II). Por otra parte, las hemolisinas (HlyA) se consideran
importantes en la patogenia de la enfermedad producida por E. coli uropatógeno
(Murray ,2006).
Las cepas de E. coli que provocan gastroenteritis se subdividen en los cinco principales
grupos siguientes: E. coli enteropatógena (ECEP), E. coli enterotoxígena (ECET), E. coli
enterohemorrágica (ECEH), E. coli enteroinvasiva (ECEI) y E. coli enteroagregativa
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(ECEA) (Murray ,2006).
La multitud de cepas capaces de producir enfermedad se encuentra reflejada en la
diversidad antigénica de esta especie. Se ha descrito un gran número de antígenos O, H y
K, los cuales se utilizan para clasificar a las cepas con fines epidemiológicos. Algunos
sero grupos antigénicos específicos se asocian a mayor virulencia.
E. coli enteropatógena (ECEP)
Las cepas enteropatógenas de E. coli fueron las primeras en asociarse a la enfermedad
diarreica y continúan siendo la principal causa de diarrea infantil en los países pobres.
La enfermedad es rara en niños mayores y en adultos, tal vez debido al desarrollo de
inmunidad protectora. Aunque se han asociado algunos sero grupos específicos O a brotes
de diarrea por ECEP en las guarderías, no se recomienda estudiar el serotipo de una cepa
E. coli aislada en una infección esporádica o endémica, salvo en caso de estudios
epidemiológicos (Murray ,2006).
La infección se caracteriza por la adhesión bacteriana a las células epiteliales del
intestino delgado con la destrucción posterior de las microvellosidades.
Las cepas ECEP forman micro colonias en la superficie de las células epiteliales en
las que las bacterias se unen a las células del organismo anfitrión a través de unas
estructuras en forma de copa. Inicialmente se establece una unión laxa medida por los pili
que forman haces, seguida de una secreción activa de proteínas por el sistema de secreción
bacteriano de tipo III hacia la célula epitelial anfitriona.
Una proteína, el receptor de la intimina translocada (Tir), se inserta en la membrana
epitelial (este proceso está mediado por otras dos proteínas secretadas) y actúa como
receptor de una adhesina bacteriana de la membrana externa, la intimina. La diarrea acuosa
típica de esta entidad se debe a la absorción inadecuada derivada de la destrucción de las
microvellosidades (Murray ,2006).
E. coli enterotoxígena (ECET)
La enfermedad producida por E. coli enterotoxígena se observa con mayor frecuencia en
los países en vías de desarrollo (se ha estimado que se registran unos 650 millones de
casos al año), aunque se calcula que casi 80.000 casos se producen anualmente en
viajeros procedentes de EE.UU. Las infecciones afectan a niños pequeños de los países en
vías de desarrollo o a los que viajan a estas zonas. El inoculo para esta enfermedad ha de
20
ser grande, por lo que las infecciones se adquieren fundamentalmente a través del consumo
de alimentos o de agua contaminada con restos fecales. No se produce transmisión de una
persona a otra. ECET sintetiza dos clases de enterotoxinas: toxinas termolábiles (LT-1,
LT- II) y toxinas termoestables (STa y STb) (Murray ,2006).
Mientras que la LT-II no se asocia a enfermedad en el ser humano, LT-I es funcional y
estructuralmente semejante a la toxina del cólera y se asocia a enfermedad en el ser
humano.
La diarrea secretora producida por ECET se manifiesta tras un período de incubación de 1
a 2 días, y se prolonga a lo largo de un período medio comprendido entre 3 y 4 días.
Los síntomas, espasmos abdominales, náuseas, vómitos (raro) y diarrea acuosa son
semejantes a los del cólera, pero más leves (Murray ,2006).
No se observan cambios histológicos ni inflamación de la mucosa intestinal. La
enfermedad causada por la toxina termolábil no se distingue de la provocada por la
toxina termoestable.
La síntesis de toxinas no se asocia a ningún sero grupo en particular, por lo que es preciso
emplear una combinación de cultivos con inmuno ensayos para la detección de las toxinas
termolábiles y termoestables.
E. coli enterohemorrágica (ECEH)
Las cepas de E. coli enterohemorrágica son las cepas que causan con mayor frecuencia
enfermedad en los países desarrollados.
Se estima que estas bacterias producen 73.000 infecciones y 60 muertes al año en EE.UU.
La ingestión de un inoculo que contenga menos de 100 bacterias puede producir la
enfermedad. La gravedad de la enfermedad producida por ECEH varía desde una
diarrea leve y no complicada hasta una colitis hemorrágica con dolor abdominal grave,
diarrea sanguinolenta, sin fiebre o con febrícula. Se han aislado más de 50 sero grupos de
ECEH; sin embargo, se cree que la mayoría de los causantes de enfermedad en el ser
humano en EE.UU. pertenecen al serotipo 0157:H7 (Murray ,2006).
El síndrome hemolítico urémico (SHU), un trastorno que se caracteriza por insuficiencia
renal aguda, trombopenia y anemia hemolítica microangiopática, es una complicación que
afecta a una proporción comprendida entre el 5% y el 10% de los niños menores de 10
años.
21
La enfermedad por ECEH es más frecuente en los meses cálidos, y su mayor
incidencia se registra en los niños menores de 5 años. La mayoría de los casos de esta
enfermedad se ha atribuido al consumo de carne de vaca o de otros productos cárnicos
poco cocinados, agua, leche no pasteurizada o zumos de frutas (p. ej., sidra elaborada a
partir de manzanas contaminadas por heces de ganado), verduras crudas y frutas
(Murray ,2006).
Inicialmente se desarrolla en los pacientes, tras un período de incubación de 3 a 4 días, una
diarrea no sanguinolenta con dolor abdominal. Se observan vómitos en la mitad de los
pacientes. Tras 2 días de evolución, la enfermedad puede progresar a diarrea
sanguinolenta con dolor abdominal grave en el 30% al 65% de los afectados
(Murray ,2006).
La resolución de los síntomas suele tener lugar entre el cuarto y el noveno día en la
mayoría de los pacientes que no reciben tratamiento; sin embargo, el SHU es una
complicación grave de esta entidad, en especial en los niños pequeños.
La muerte puede ocurrir en el 3% al 5% de los pacientes aquejados de SHU, y
pueden quedar secuelas graves (p. ej., insuficiencia renal, hipertensión, manifestaciones
del SNC) en hasta el 30% de los pacientes (Murray, 2006).
E. coli enteroinvasiva (ECEI)
Las cepas de E. coli entero invasiva son infrecuentes tanto en EE.UU. como en los países
en vías de desarrollo. Las cepas patogénicas se asocian fundamentalmente a un número
limitado de serotipos 0: 0124, 0143 y 0164. Las cepas presentan una estrecha relación con
las propiedades fenotípicas y patogénicas de Shigella. Las bacterias son capaces de invadir
y destruir el epitelio colónico para producir una enfermedad que se caracteriza
inicialmente por diarrea acuosa. Una minoría de pacientes evoluciona a la forma
disentérica de la enfermedad, la cual debuta con fiebre, espasmos abdominales y
presencia de sangre y leucocitos en las heces (Murray, 2006).
Este proceso de destrucción de las células epiteliales con infiltración inflamatoria puede
dar lugar a una ulceración colónica.
E. coli enteroagregativa (ECEA)
Las cepas de E. coli enteroagregativo se han visto implicadas en una diarrea acuosa,
persistente y con deshidratación en niños de los países en vías de desarrollo y en personas
22
que han viajado a estos países. La persistencia de estas bacterias se asocia a la presencia
de diarrea crónica y a un retraso del desarrollo de los niños afectados.
Las bacterias se caracterizan por su capacidad de aglutinarse entre sí en una organización
de «ladrillos apilados». Este proceso está mediado por unas fimbrias formadoras de haces
(fimbrias de adherencia agregativa I y II), las cuales son codificadas por un plásmido
(Murray, 2006).
Salmonella
Por una parte, los estudios de homología del ácido desoxirribonucleico (ADN) han
demostrado que este género está formado por dos especies: Salmonella entérica y Shige
bongori.
S. entérica se subdivide, a su vez, en seis subespecies, y la mayor parte de los patógenos
del ser humano se incluye en la primera subespecie, S. entérica sub entérica.
Lamentablemente, las dos especies se han subdivido en más de 2500 serotipos diferentes;
tradicionalmente se han llamado especies a los numerosos serotipos
(p.ej.,S.typhi,Salmonella typhymurium, Salmonella enteritidis) (Murray, 2006).
Patogenia e inmunidad
Después de ser ingeridas y de pasar a través del estómago, las salmonelas son capaces de
invadir y de replicarse en las células M (micropliegues) que se localizan en las placas de
Peyer de la región terminal del intestino delgado. Típicamente estas células transportan
antígenos de cuerpos extraños hasta los macrófagos subyacentes para su eliminación.
Dos sistemas separados de secreción de tipo III intervienen en la invasión inicial de la
mucosa intestinal (isla de patogenicidad 1 de Salmonella [SPI-1]) y la enfermedad
sistémica posterior (SPI-2) (Murray, 2006).
Las especies de Salmonella se protegen también de los ácidos del estómago y del pH ácido
del fagosoma mediante un gen de respuesta de tolerancia a los ácidos (ATR). La catalasa
y la superóxido dismutasa son otros factores que protegen a las bacterias frente a la
destrucción intracelular.
La mayoría de las infecciones son consecuencia de la ingestión de productos
alimentarios contaminados, y, en los niños, de una transmisión directa por vía fecal-oral.
La incidencia de la enfermedad es más elevada en niños menores de 5 años y en adultos
mayores de 60 años, que se infectan durante los meses de verano y otoño cuando los
23
alimentos contaminados se consumen en reuniones sociales al aire libre (Murray, 2006).
La gastroenteritis es la forma más frecuente de salmonelosis. Los síntomas suelen
aparecer entre las 6 y las 48 horas siguientes a la ingestión de alimentos o agua
contaminada, con una sintomatología inicial de náuseas, vómitos y diarrea no
sanguinolenta.
Son también frecuentes la fiebre, los espasmos abdominales, las mialgias y la cefalea. En
la forma aguda de la enfermedad se puede demostrar la afectación colónica.
Los síntomas pueden persistir entre 2 días y 1 semana antes de la resolución espontánea.
Shigella
Se han descrito cuatro especies con más de 45 serogrupos basados en el antigeno O: S.
dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydií y Shigella sonnei.
S. sonnei es la causa más frecuente de shigelosis en las naciones industrializadas, y S.
flexneri es la causa más común en los países en vías de desarrollo.
No obstante, los análisis de ADN han determinado que estas cuatro especies constituyen,
en realidad, bio grupos de E. coli que difieren a nivel serológico (Murray, 2006).
Patogenia e inmunidad
Shigella causa la enfermedad al invadir y replicarse en las células que tapizan la mucosa
colónica. Las proteínas de los genes estructurales intervienen en la adherencia de los
microorganismos a las células, así como en su invasión, replicación intracelular y
diseminación de una célula a otra.
Las especies de Shigella parecen incapaces de unirse a las células mucosas diferenciadas;
en lugar de ello, parece que se unen en primer lugar e invaden a las células M de las
placas de Peyer. El sistema de secreción de tipo III interviene en la secreción de cuatro
proteínas (IpaA, IpaB, IpaC, IpaD) hacia las células epiteliales y en los macrófagos.
Estas proteínas hacen que se ondulen las membranas de las células diana, lo que
permite que las bacterias sean engullidas (Murray, 2006).
Las shigelas sobreviven a la fagocitosis al inducir la muerte celular programada
(apoptosis). Este proceso comporta, igualmente, la liberación de IL-lb, lo que atrae a los
leucocitos polimorfonucleares hacia los tejidos infectados, desestabiliza la integridad de
la pared intestinal y permite que las bacterias lleguen hasta las células epiteliales más
profundas (Murray, 2006).
24
Los brotes epidémicos de la enfermedad ocurren en las guarderías, los jardines de
infancia y las prisiones. La shigelosis se transmite por vía feco- oral, principalmente por
personas con las manos contaminadas, y con menor frecuencia por el agua y los
alimentos. Debido a que un inoculo menor de 200 bacterias puede producir la
enfermedad, la shigelosis se extiende rápidamente en comunidades en las que las
condiciones sanitarias y la higiene personal son deficientes.
La shigelosis se caracteriza por la presencia de espasmos abdominales, diarrea, fiebre
y heces sanguinolentas. Los signos y síntomas clínicos de la enfermedad aparecen entre 1
y 3 días tras la ingestión de los bacilos. Las shigelas colonizan inicialmente el intestino
delgado y comienzan a multiplicarse en las primeras 12 horas.
El primer signo de infección (una profusa diarrea acuosa sin indicios histológicos de
invasión mucosa) se relaciona con la acción de una enterotoxina.
Sin embargo, la característica fundamental de la shigelosis son los espasmos
abdominales y el tenesmo, con abundante pus y sangre en las heces. Es consecuencia de la
invasión de la mucosa colónica por las bacterias. En las heces se observan numerosos
neutrófilos, hematíes y mucosidad.
La infección suele resolverse de forma espontánea, aunque se recomienda el tratamiento
antibiótico con el fin de reducir el riesgo de diseminación secundaria a los miembros de la
familia y a otros contactos.
Vibrio cholerae
El Vibrio cholerae produce una enterotoxina que está formada por una subunidad A y otra
subunidad B. El Vibrio llega a la superficie del enterocito, se adhiere a ella y produce la
toxina colérica. La subunidad A se desprende de la bacteria y se une a un receptor de
membrana GM-1, en la superficie del enterocito mientras que la subunidad B se une a la
membrana celular (Murray, 2006).
Posteriormente la subunidad A penetra en la membrana celular, se une a un receptor, en la
membrana basolateral del enterocito, y se genera el AMPc intracelular, el cual estimula el
canal de cloro en las criptas intestinales, lo que incrementa la secreción de agua y
electrólitos e inhibe el cotransporte de sodio y cloro en las células de las vellosidades.
Como resultado de estas 2 acciones en las criptas y en las vellosidades por la toxina
colérica, la secreción de líquidos en el lumen intestinal lleva a una diarrea secretora.
25
La toxina colérica (TC) puede estimular al intestino delgado por activación secundaria de
los metabolitos del ácido araquidónico, y aumentar la producción de prostaglandinas, las
cuales activan el sistema nervioso entérico. Este proceso parece estar mediado por la 5-
hidroxitriptamina (5- HT) liberada por las células cromafines y la neurotoxina liberada por
las células neuroendocrinas (Murray, 2006).
Clostridium difficile
La colitis por Clostridium difficile es una enfermedad mediada por toxinas de acción local
y en raras ocasiones puede invadir el torrente circulatorio. Produce 2 tipos diferentes de
toxinas: la toxina A es una entero toxina y el factor patogénico de mayor importancia,
mientras que la toxina B es una cito toxina con un efecto muy pequeño o nulo en ratones.
El primer paso en su patogénesis es el enlace de la toxina A un receptor específico. La
actividad de la toxina A enlazada y su respuesta biológica es muy baja al nacimiento y
aumenta durante las primeras 3 semanas de vida para alcanzar los niveles del adulto a los
30 o 40 días de edad. La baja actividad de la toxina enlazada puede explicar la falta de
respuesta de la enfermedad en niños colonizados por Clostridium difficile (Murray,
2006). Después de enlazarse con el receptor existente en el "borde en cepillo" del
enterocito, la toxina A es internalizada y después de un período de latencia de 1 a 2 horas
ocurren alteraciones en la estructura del citoplasma, con inclusión de la despolimerización
de actinas filamentosas, se abren en las células intestinales las uniones herméticas y
aumentan la permeabilidad transepitelial.
La acción principal de la toxina A en el intestino es su habilidad para producir una
respuesta inflamatoria aguda con activación de macrófagos, mastocitos ymovilización de
neutrófilos.Estos mecanismos que envuelven la respuesta inflamatoria son
complejos e involucran la liberación en varias células, de potentes mediadores de la
inflamación y citocinas incluyendo prostaglandina E2, leucotrieno B4 y C2, factor de
activación plaquetaria, interleucina- 1 y 8 (IL-1, IL-8) e histamina (Murray, 2006).
La colitis pseudomembranosa (CPM) asociada a Clostridium difficile es muy diferente
a las lesiones descritas en animales experimentales. La principal diferencia radica en la
focalización de la pseudomembrana colónica en la infección humana.
26
2.2.6. Diarrea aguda
Más de 90% de los casos de diarrea aguda se deben a agentes infecciosos; estos casos se
manifiestan a menudo por vómito, fiebre y dolores abdominales.
La proporción de 10% restante se debe a medicamentos, ingestión de sustancias tóxicas,
isquemia y otros trastornos (Harrison, 2005).
Agentes infecciosos
La mayor parte de las diarreas infecciosas se transmite por vía fecal-oral, a través de
contactos personales directos o, con mayor frecuencia, al ingerir alimentos o agua
contaminados con los microorganismos patógenos que están en las heces de humanos o de
animales.
En las personas inmuno competentes, la flora fecal saprofita, que abarca a más de 500
especies taxonómicas distintas, rara vez produce diarrea, y en realidad puede desempeñar
un papel protector, impidiendo la proliferación de agentes patógenos ingeridos. La lesión o
infección aguda aparece cuando el agente patógeno ingerido supera a las defensas
inmunitarias y no inmunitarias (ácido gástrico, enzimas digestivas, secreción de moco,
peristaltismo y flora saprofita supresora) de las mucosas digestivas del hospedador
(Harrison, 2005).
La diarrea aguda es la emisión de heces de consistencia líquida debido a inflamación y/o
disfunción del intestino producida por un microrganismo o sus toxinas, que se puede
acompañar de sangre o moco en las heces, fiebre, vómitos y/o dolor abdominal. Dura
menos de 4 semanas (Harrison, 2005).
La diarrea suele basarse en criterios cuantitativos: tres o más deposiciones por día y un
peso de las heces por encima del límite normal (200 g/dìa en el adulto sano) (Harrison,
2005).
Patología
La diarrea es una consecuencia de la disfunción en el transporte de agua y electrólitos a
nivel del intestino. Como resultado de esta alteración se produce un aumento de la
frecuencia, cantidad y volumen de las heces, así como un cambio en su consistencia por el
incremento de agua y electrólitos contenidos en ellas (Nelson, 2004).
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Los mecanismos patogénicos que ocasionan diarrea están en dependencia de los agentes
causales que la producen.
Invasividad. Invasión de la mucosa seguida de multiplicación celular intraepitelial y
penetración de la bacteria en la lámina propia. La capacidad de una bacteria para
invadir y multiplicarse en una célula, causando su destrucción, está determinada por la
composición del lipopolisacárido de la pared celular de dicha bacteria en combinación con
la producción y liberación de enzimas específicas. La invasividad está regulada por
una combinación de plásmidos específicos y genes cromosomales que varían de un
enteropatógeno a otro (Nelson, 2004).
Producción de citotoxinas. Éstas producen daño celular directo por inhibición de la
síntesis de proteína.
Producción de enterotoxinas. Da lugar a trastornos del balance de agua y sodio y
mantienen la morfología celular sin alteraciones.
Adherencia. A la superficie de la mucosa. Esto da por resultado el aplanamiento de la
microvellosidad y la destrucción de la función celular normal. En la adherencia celular
intervienen factores como: pelos o vellos, glicoproteínas u otras proteínas que permiten la
colonización bacteriana del intestino.
La presencia de uno o varios de estos factores que se unen a receptores específicos en la
superficie del enterocito, tiene gran importancia en la adhesión, que constituye la primera
fase de la infección (Nelson, 2004).
Clasificación clínica de la diarrea
•Diarrea aguda.- Se manifiesta por la pérdida diaria de tres o más evacuaciones
intestinales líquidas o semilíquidas sin sangre visible, que pueden acompañarse de
vómitos, fiebre baja, disminución del apetito e irritabilidad; el cuadro se inicia agudamente
y tarda menos de catorce días, aunque la mayoría se resuelve en menos de siete (Nelson,
2004).
•Diarrea persistente.- Este tipo de enfermedad diarreica se inicia como un episodio
agudo de diarrea líquida, pero persiste por más de 14 o más días. En estos casos
ocurre frecuentemente pérdida marcada de peso. El volumen de la pérdida fecal puede ser
grande, pudiendo causar deshidratación (Nelson, 2004).
•Diarrea crónica.- Diarrea de tipo recurrente o de larga duración, es de causa no
28
infecciosa, tal como sensibilidad al gluten o desórdenes metabólicos hereditarios. Puede
considerarse cuando el proceso diarreico dura más de 21 días (Nelson, 2004).
•Disentería.- Diarrea con presencia de sangre, moco y/o pus en heces,
independientemente de su duración. Entre los efectos que produce incluye anorexia,
pérdida de peso rápida y daño a la mucosa intestinal causado por agentes invasores
(Nelson, 2004).
Clasificación funcional de la diarrea
En función de las alteraciones fisiológicas que provocan en el organismo, las diarreas se
clasifican en cuatro grupos:
•Diarrea osmótica.- Se presentan cuando existen solutos en la luz intestinal, las
cuales tienen actividad osmótica e inducen el movimiento de líquidos y electrólitos del
enterocito hacia la luz intestinal, superando la capacidad de absorción de la mucosa.
En proporción, se pierde una cantidad mayor de agua que de sodio, lo que incrementa las
concentraciones de este ion en la sangre, aunque el colon intenta conservar agua y sodio
no retiene potasio, que se pierde en las heces (Nelson, 2004).
El efecto final es un agotamiento de agua y potasio. Las evacuaciones son ácidas y las
causas más comunes son la deficiencia de enzimas disacaridasas como lactasa y
sacarasa, la ingestión de laxantes polivalentes, la desnutrición tipo Kwashiorkor, el esprue
tropical y la gastroenteritis, entre otras.
•Diarrea secretora.- Se presentan como consecuencia de un aumento importante del
movimiento de agua y electrólitos hacia la luz intestinal. Este efecto se produce por el
incremento en la secreción, por la disminución en la absorción o por la combinación de
ambas situaciones. La afluencia de líquido a la luz intestinal supera la capacidad de
absorción del colon, lo que ocasiona la diarrea (Nelson, 2004).
Las heces son isotónicas en relación con el plasma; sin embargo, a pesar de existir Una
composición iónica similar, se fuerza al máximo la absorción de sodio y cloro, lo que
condiciona la pérdida de potasio y bicarbonato hacia la luz intestinal.
Debido a que las diarreas secretoras no son provocadas por factores dietéticos,
habitualmente no mejoran con el ayuno. Una excepción es la diarrea secretora
secundaria a una mala absorción de ácidos grasos, en la que el efecto de la microbiota
bacteriana sobre éstos produce ácido 10- hidroxi-esteárico, que es un potente secretagogo.
29
Diarrea secundaria a alteraciones de motilidad.- Se producen tanto por una
disminución anormal de la motilidad intestinal que condicionan sobre crecimiento
bacteriano, como por un aumento en la peristalsis, que reduce el tiempo de contacto
entre el contenido intestinal y la mucosa (Nelson, 2004).
Las principales causas de este tipo de diarreas son el abuso de laxantes, la enfermedad
diverticular del colon, el síndrome del intestino irritable y la neuropatía diabética.
•Diarrea por alteraciones morfológicas de la mucosa.- Se deben a lesiones
anatómicas de las estructuras encargadas del proceso de absorción. Esto impide el ingreso
de los nutrientes o bien la salida de productos de escasa absorción, como sangre, moco,
pus o proteínas completas, hacia la luz del intestino (Nelson, 2004).
Entre las principales causas de este tipo de diarreas se encuentran la gastroenteritis
infecciosa persistente, la enfermedad de Whipple, el síndrome de inmunodeficiencia
adquirida y la enfermedad inflamatoria intestinal.
Diarrea infecciosa aguda
La diarrea infecciosa aguda es aquella que tiene una duración menor de 14 días.
Actualmente se clasifica de manera práctica en diarrea acuosa y diarrea con sangre
(Nelson, 2004).
La diarrea acuosa a su vez puede ser secretora u osmótica y la diarrea con sangre puede
ser invasiva o no invasiva.
•Diarrea secretora
Se define como un cuadro diarreico, aquél que es el resultado del movimiento neto de agua
y electrólitos desde la mucosa intestinal hasta el lumen, y cuyo volumen excede los 10
mL/kg/día y cuya osmolaridad es similar al plasma (Nelson, 2004).
La diarrea secretora es una diarrea acuosa abundante que produce deshidratación con
trastornos del equilibrio hidroelectrolítico y ácido básico y es producida principalmente
por el Vibrio cholerae y la Echerichia coli enterotoxigénica (ECET), aunque otras
bacterias como la Shigella spp, la Yersinia enterocolítica y las Aeromonas también pueden
producirla (Nelson, 2004).
Diarrea osmótica
La diarrea osmótica es aquélla que se produce por un incremento de carbohidratos en el
lumen intestinal, como consecuencia de lesiones en forma de parches en las vellosidades
30
intestinales y por la invasión de los enterocitos de la vellosidad y la posterior aglutinación
de las vellosidades afectadas (Nelson, 2004).
La necrosis de la porción superior (ápex) de las vellosidades da lugar a que en un período
de 12 a 40 horas, los enterocitos de las criptas, que son enterocitos secretores, cubran
totalmente la vellosidad y den lugar a áreas donde hay secreción de líquidos y la
absorción está disminuida o ausente. En la medida que las lesiones se hacen más
extensas tendrá lugar una menor absorción y se aumentará la secreción. Este
mecanismo de producción de diarrea osmótica es el que provocan los agentes
virales, principalmente los rotavirus (Nelson, 2004).
Otro mecanismo de producción de diarrea osmótica es el que ocurre por la adhesión de
algunos protozoos al "borde en cepillo" del enterocito que bloquean la entrada de agua,
electrólitos y micronutrientes lo que produce un exceso de carbohidratos a nivel del
lumen intestinal, que son atacados por las bacterias con producción de ácido láctico, lo
cual da lugar a una diarrea ácida que se traduce clínicamente por un marcado eritema
perianal. Los parásitos que con mayor frecuencia presentan este tipo de diarrea con
acentuada mal absorción a los carbohidratos son la Giardia lamblia,Cryptosporidium
parvum, Ciclospora cayetanensis y los Microsporidios,aunque los pacientes
inmunosuprimidos presentan un componente de hipersecreción.
También puede producirse una diarrea osmótica cuando se ingiere una sustancia
osmóticamente activa de pobre absorción, esto puede suceder cuando se administran
purgantes como el sulfato de magnesio. Si la sustancia es ingerida con una solución
isotónica, el agua y los solutos pasan por el intestino sin adsorberse, y esto da lugar a
la diarrea osmótica. Este tipo de diarrea se puede observar en los pacientes con mal
absorción a los disacáridos (lactosa) y en lactantes alimentados con el seno materno
(exceso de lactosa) o cuando se administran grandes cantidades de leche animal o leches
muy concentradas.
Diarrea con sangre
La diarrea con sangre se presenta con una elevada frecuencia en niños menores de 5 años.
Constituye un problema de salud en los países subdesarrollados y puede expresarse con
manifestaciones clínicas severas que pueden llevar al paciente a la muerte y, en otras
ocasiones, su cuadro clínico es más benigno por tener sus agentes causales una vida auto
31
limitada (Nelson, 2004).
Diarrea con sangre invasiva
La diarrea con sangre invasiva tiene como prototipo a la Shigella, aunque también puede
ser producida por otros agentes bacterianos entero patógenos como son: Escherichia coli
enteroinvasiva, Salmonella, Campylobacter jejuni, Yersinia enterocolítica y Vibrio
parahaemolyticus (Nelson, 2004).
Diarrea con sangre no invasiva
La diarrea con sangre no invasiva tiene como prototipo a la Escherichia coli entero
hemorrágica (ECEH). Los primeros estudios de este tipo de Escherichia coli se realizaron
en 1983, cuando se asociaron cepas de Escherichia coli del serotipo O157H7 raramente
encontradas con anterioridad (Nelson, 2004).
Con un brote de una nueva enfermedad, la colitis hemorrágica, caracterizada por diarrea
con abundante sangre y sin fiebre.
Estudios realizados posteriormente pusieron de manifiesto que dichas cepas pueden
producir también un síndrome hemolítico urémico y llevar a una insuficiencia renal aguda.
Las cepas de serotipo O157H7 elaboran 2 potentes cito toxinas que destruyen las células
Vero, por lo que reciben el nombre de vero toxinas (VT-1 y VT-2) (Nelson, 2004).
Estas toxinas están relacionadas, biológica y estructuralmente, con la toxina Shiga
sintetizada por la Shigella disenteriae tipo l (Sdl) por lo que se propuso la
denominación de toxinas similares a la toxina Shiga (SLT-1 y SLT-2) (Nelson, 2004).
El aspecto clínico más relevante de la ECEH es su habilidad para causar el síndrome
hemolítico urémico, caracterizado por anemia microangiopática, trombocitopenia e
insuficiencia renal.
Manifestaciones Clínicas
Se puede asociar a otros síntomas y signos como nauseas, vómitos, dolor abdominal en
forma de retortijón, fiebre, deposiciones sanguinolentas, tenesmo y/o urgencia
defecatoria, claro está que esto puede variar de acuerdo al tipo de germen causante
(Rodríguez, 2010).
Cuadro Nº 03 Características clínicas de la infección debida a determinados
patógenos seleccionados que producen diarrea.
32
2.3. Marco conceptual
3.3.1. El agua
El agua es esencial para la vida, constituye el principal componente del protoplasma celular
y representa2/3 del peso total del hombre y hasta 9/10 del peso de algunos vegetales. Del
latín aqua, el agua es una sustancia cuyas moléculas están compuestas por un átomo de
oxígeno y dos átomos de hidrógeno. Se trata de un líquido inodoro (sin olor), insípido (sin
sabor) e incoloro (sin color), aunque también puede hallarse en estado sólido (cuando se
conoce como hielo) o en estado gaseoso (Beltrán, 2008).
3.3.2. Agua potable
Se denomina agua potable al agua "bebible" en el sentido que puede ser consumida por
personas y animales sin riesgo de contraer enfermedades satisface las condiciones y
requisitos físicos, químicos, organolépticos y microbiológicos. El término se aplica al
agua que ha sido tratada para su consumo humano según unas normas de calidad
promulgadas por las autoridades locales e internacionales (OPS-OMS, 2010).
3.3.3. Cloración del agua
33
Es un proceso de higienización que se llevó a cabo por primera vez en los sistemas de
abastecimiento de agua potable. Surge como alternativa eficiente para eliminar las
enfermedades infecciosas transmitidas por el agua; aunque pueda resultar extraño y a la
vez sorprendente, la cloración ha sido responsable en gran parte del 50% de aumento de
expectativa de vida en los países desarrollados durante el siglo XX. (Prada, 1990).
3.3.4. Contaminación del agua
La contaminación de las aguas puede proceder de fuentes naturales o de actividades
humanas. En la actualidad la más importante, sin duda es la provocada por el hombre,
debido a que es un fenómeno ambiental, se inicia desde los primeros intentos de
industrialización, para transformarse en un problema generalizado, a partir de la
revolución industrial, iniciada a comienzos del siglo XIX.
Es la alteración en la composición química, propiedades físicas y bacteriológicas, de tal
manera que resulta menos apta para los propósitos en los cuales es empleada como
consumo humano, riego para la producción agropecuaria, la industria, generación de
energía, etc.
La contaminación del agua afecta a las precipitaciones, a las aguas superficiales, a las
subterráneas y como consecuencia degrada los ecosistemas naturales (Coronel y Jimenez,
2006).
3.3.5 Salud
En la Constitución de la Organización Mundial de la Salud, la salud se define como “un
estado de completo bienestar físico, mental y social y no meramente la ausencia de
enfermedad o incapacidad “OMS, (1948).
3.3.6. Agua segura y suficiente
El agua es esencial para la vida, ya que necesitamos beber entre uno y dos litros por día.
Después de cuatro días sin agua una persona morirá. Además, el agua es esencial para las
plantas, los animales y la agricultura; a lo largo de la historia humana las personas se han
agrupado en las márgenes de los lagos y los ríos para conseguir agua para sus hogares y las
labores agrícolas.
3.3.7. Fuente de agua potable.- Se le considera de este modo al lugar de donde se
obtiene el agua de consumo humano (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.8 Riesgo biológico
34
Se define el Riesgo Biológico como la posible exposición a microorganismos que puedan
dar lugar a enfermedades.
3.3.9 Análisis microbiológico
El conjunto de operaciones encaminadas a determinar los microorganismos presentes
en una muestra (Book, 2011).
3.3.10 Morbilidad
Se trata de la cantidad de personas que se enferman en una población determinada en un
tiempo determinado (Book, 2011).
3.3.11. Calidad
Significa que el agua debe estar libre de elementos que la contamine a fin de
e vitar que se convierta en un vehículo de transmisión de enfermedades (D.S Nº 31-
2010-S.A).
3.3.12. Coliformes
La denominación genérica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas que
tienen ciertas características bioquímicas en común e importancia relevante como
indicadores de contaminación del agua y los alimentos. Coliforme significa con forma de
coli, refiriéndose a la bacteria, la Escherichia coli, descubierta por el bacteriólogo alemán
Theodor Von Escherich en 1860.Los coliformes son una familia de bacterias que se
encuentran comúnmente en las plantas, el suelo y los animales, incluyendo a los humanos
(D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.12.1. Coliformes totales: bacterias que forman parte del grupo coliformes y son
definidas como bacilos Gram negativos, no esporulados que fermentan la lactosa con
producción de ácido y gas a 35 ± 0.5 °C dentro de las 48 ± 3 horas (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.1.2. Coliformes fecales: bacterias que forman parte del total del grupo coliformes y
son definidas como bacilos Gram negativos, no esporulados que fermentan la lactosa con
producción de ácido y gas a 44.5 ± 0.2 °C dentro de las 24 ± 2 horas. La mayor especie en
el grupo de coliformes fecales es la Escherichia coli y en menor grado las especies de
Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.1.3 Número más probable (NMP): cálculo de la densidad probable de bacterias
coliformes basadas en la combinación de resultados positivos y negativos obtenidos en
35
cada dilución. La precisión de cada prueba depende del número de tubos utilizados. Tres
diluciones son necesarias para la obtención del código del NMP (D.S Nº 31-2010-SA).
Las tablas de NMP se basan en la hipótesis de una distribución de Poisson (dispersión
aleatoria). La densidad bacteriana se obtiene a través de tablas en los que se presenta el
límite de confianza de 95% para cada valor determinado y se expresa como NMP de
coliformes/100 mL.
3.3.13 Calidad del agua
La calidad del agua es el conjunto de características físicas, químicas y bacteriológicas
que presenta el agua, tal y como se encuentra en la naturaleza (Teixeira 1996). Se
considera contaminada cuando está alterada en composición o condición, lo que incluye
cambios en cualquiera de sus propiedades físicas, químicas y/o biológicas (Conama,
2005).
3.3.14. Monitoreo.- Seguimiento y verificación de parámetros físicos, químicos,
microbiológicos u otros señalados en el presente Reglamento, y de factores de
riesgo en los sistemas de abastecimiento del agua; Calidad del agua. Determinación
de la calidad del agua suministrada por el proveedor, de acuerdo a los requisitos
físicos, químicos,microbiológicos y parasitológicos del agua para consumo humano
establecidos en el presente Reglamento; y desarrollo de Indicadores.- Procesamiento y
análisis de los resultados de los monitoreos de la calidad del agua, del sistema de
abastecimiento y del impacto en la morbilidad de las enfermedades de origen o
vinculación al consumo del agua (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.15. Control de calidad
El control de calidad del agua para consumo humano es ejercido por el proveedor en
el sistema de abastecimiento de agua potable. En este sentido, el proveedor a través
de sus procedimientos garantiza el cumplimiento de las disposiciones y requisitos
sanitarios del presente reglamento, y a través de prácticas de autocontrol, identifica
fallas y adopta las medidas correctivas necesarias para asegurar la inocuidad del
agua que provee (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.16. Sistema de abastecimiento de agua
Para efectos de la aplicación del presente reglamento, se define como sistema de
abastecimiento de agua para consumo humano, al conjunto de componentes
36
hidráulicos e instalaciones físicas que son accionadas por procesos operativos,
administrativos y equipos necesarios desde la captación hasta el suministro del
agua mediante conexión domiciliaria, para un abastecimiento convencional cuyos
componentes cumplan las normas de diseño del Ministerio de Vivienda Construcción
y Saneamiento; así como aquellas modalidades que no se ajustan a esta
definición, como el abastecimiento mediante camiones cisterna u otras
alternativas, se entenderán como servicios en condiciones especiales (D.S Nº 31-
2010-SA).
3.3.17. Agua apta para el consumo humano
Es toda agua inocua para la salud que cumple los requisitos de calidad establecidos
en el presente Reglamento (D.S Nº 31-2010-SA).
3.3.18. Microbiológicos
Bacterias heterotróficas; Virus; Huevos y larvas de helmintos, quistes y ooquistes de
protozoarios patógenos; y Organismos de vida libre, como algas, protozoarios,
copépedos, rotíferos y nemátodos en todos sus estadios evolutivos (D.S Nº 31-2010-
SA).
3.3.19. Sistema de tratamiento de agua
El Ministerio de Salud a través de la DIGESA emitirá la norma sanitaria que
regula las condiciones que debe presentar un sistema de tratamiento de agua para
consumo humano en concordancia con las normas técnicas de diseño del MVCS,
tanto para el ámbito urbano como para el ámbito rural (D.S Nº 31-2010-SA).
37
II. HIPOTESIS Y VARIABLES
3.1. Formulación de hipótesis
3.1.1. Hipótesis general
Existe una moderada prevalencia de disenterías debido a la contaminación del agua por
coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurímac, 2016.
3.1.2. Hipótesis específicas
• Los casos de disenterías son ocasionados por contaminación del agua con
coliformes totales y termotolerantes en el distrito de Tamburco, Abancay, Apurímac, 2016.
• Existe una cantidad de coliformes totales y termotolerantes en el agua de consumo
humano no permitida por la Dirección General de Salud Ambiental de Apurímac, en el
distrito de Tamburco, Abancay, Apurímac, 2016.
• El nivel de cloro residual supera el límite máximo permisible establecido en el
Perú.
38
3.2. Definición operacional de variables.
Tabla 2. Operacionalización de variables
Variables IndicadoresIndependientesPresencia de coliformes termotolerantes Coliformes /100 mlPresencia de coliformes totales Coliformes /100 mlCloro residual en agua potable mg/l
DependienteCasos de disenterías Casos detectados positivos
Muy baja (menos al 10%).Baja (entre 10% y 20%).Mediana (entre 21% y 35 %).Alta (entre 36% y 40%).Muy alta (mayor al 40%).
VI. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACION
4.1. Tipo y nivel de investigación
4.1.1. Tipo : Observacional, transversal, prospectivo y analítico.
Por el tipo de la investigación, el presente estudio reúne las condiciones metodológicas de
una investigación: Observacional, no habrá intervención del investigador solo observara de forma
constante los valores de coliformes totales y termotolerantes; Prospectivo, los datos con los que se
trabajaran serán planeados y obtenidos a través de registros de análisis de control de resultados de
muestreo; trasversal porque se va hacer en una sola ocaciones ; Analítico, debido al estudio de más
de dos variables de análisis entre coliformes fecales y termotolerantes con relación a casos de
disenterias.
4.1.2. Nivel de investigación:
39
De acuerdo a la naturaleza de estudio, la investigación reúne las características de un
estudio relacional, porque relaciona variables en función del tiempo.
4.2. Población
La población de Tamburco (7275 Hab.) Beneficiarios de agua de consumo humano lo cual
se relacionaran el tipo y nivel de contaminación coliformes termo tolerantes y totales de
agua consumo humano (INEI, 2007). Se trabajara con muestreo de agua de captación,
reservorio y pileta domiciliaria y captación del paciente con disentería para posteriormente
muestrear agua realizando una encuesta en domicilio.
4.2.1. Características y delimitación
La investigación está delimitada al estudio y observación de bacterias coliformes fecales y
totales en agua de consumo humano. y las relaciones de estas variables con la disenterías
por agua contaminadas, el ámbito de estudio donde se realizara la investigación es el
Distrito de Tamburco de la provincia de Abancay del cual se ha considerado conveniente
incluir a 14 captaciones que están a la administración de JAASS, Municipios y Emusap.
4.2.2. Ubicación espacio – temporal
El estudio se realizara en comunidades del distrito de Tamburco, provincia de Abancay,
departamento de Apurímac, se extiende entre las cadenas central y occidental de los andes
centrales, que limita con los departamentos de Arequipa, Cusco y Ayacucho, cuya capital y
centro de estudio es la ciudad de Abancay.
El distrito de tamburco se encuentra.
Ubicación Geografía: El Distrito de Tamburco está Ubicado en la Provincia de Abancay,
Región Apurímac ubicado a 3 km al norte de la ciudad de Abancay tiene una superficie de
54.6 km cuadrados.
Altitud: Su altura se encuentra en los pisos ecológicos correspondientes a las regiones
quechua, suni y Puna a 2581 m.s.n.m. a 4800 m.s.n.m. Está ubicado en los: Latitud Sur
13°37’05” y Latitud oeste 72°52'18".
Longitud: 72.871.
40
Temperatura: 14°C.
Condición: nublado.
Humedad: 62%.
Viento: 15 km/h N.
Límites: El Distrito de Tamburco limita con:
Nor Oeste
Nor Este
Este
Sur
Sur Oeste
: Huanipaca.
: San Pedro Cachora.
: Curahuasi.
: Abancay.
: Abancay.
División geográfica: EL distrito de Tamburco está conformado por 16 sectores que son:
Ccanabamba, San jorge Chillihua, Ccorhuani, Kerapata, Mosoccpampa, Soccoshuaycco,
Bancapata, Antabamba Alta y Baja, Sahunay, Maucacalle, San Antonio, Colcaqui, Nueva
Rioja, Miraflores, Víctor Acosta Segunda Etapa, Víctor Acosta y Juan Pablo II Primera
Etapa, Nueva Granja y Tamburco Alto y Bajo.
4.3. Muestra y técnica de muestreo
La muestra a trabajar será de agua de consumo humano de 80 piletas domiciliarias,
reservorio, captación Distrito de Tamburco.
En la presente investigación se ha considerado trabajar con la muestra no probabilística
de tipo intencional o por conveniencia seleccionando a través método numero más
probable NMP. La muestra puede ser del tipo simple, compuesta o integrada.
41
El diseño del presente estudio es no experimental de tipo descriptivo.
Tipos de muestras
Muestra puntual
Compuesta por una única porción de agua.
Permite conocer características de pH,
Cl residual, Tº ,Coliformes
Muestra Compuesta
Preparada a partir de la mezcla de muestras
Individuales.
Define la calidad promedio del cuerpo de agua en un determinado lapso de tiempo.
No aplicable a parámetros inestables.
4.4 Descripción de la experimentación
Inmediatamente captado al paciente en centro de salud Tamburco con disenterias se
procede realizar muestreo en pileta domiciliaria previo vigilancia de cloro residual
seguidamente una encuesta al unidad de muestreo sobre efectos nocivos de agua
contaminada, posteriormente se rotula muestra de agua y lleva al laboratorio referencial de
la DIGESA para análisis correspondiente de coliformes fecales y totales y luego procesar
la información. El tratamiento experimental que se realizara con este trabajo descriptivo
será el análisis gradual de las imprevistas y la interpretación de bacterias de coliformes
fecales y su efecto en morbilidad de la población. Para ello se diseñara un plan
programático para la recolección de la información y muestra.
Procedimiento
Prueba presuntiva: consiste en colocar volúmenes determinados de muestra de agua en
una serie de tubos conteniendo caldo lauril triptosa ó sulfato que luego son incubados a 35
± 0.5°C durante 24 – 48 horas.
Prueba confirmativa: para la determinación de coliformes totales, consiste en inocular los
tubos positivos de la prueba presuntiva en el caldo lactosado verde brillante bilis,
incubarlos a 35 ± 0.5 ºC por 48 horas, para coliformes fecales en caldo EC y para
Escherichia coli en caldo EC con MUG, ambos tubos se incuban a 44.5 ± 0.2 ºC por un
tiempo de 24 horas.
42
La formación de gas en los tubos de Durham así como la presencia de fermentación y
turbiedad en los tubos, se considera reacción positiva. Los resultados se expresan en
términos de Número Más Probable (NMP) de microorganismos.
DESARROLLO
Medios de cultivo y reactivos
• Caldo lauril triptosa o sulfato (CLT).
• Caldo lactosado verde brillante bilis (BRILLA)
• Caldo EC
• Caldo EC – MUG
• Agua de dilución
• Tiosulfato de sodio al 3%
Equipos y Materiales.
• Adicionalmente a lo requerido en el Instructivo de preparación de medios de cultivo
y diluyentes.
• Incubadora a 35 ± 0,5 ºC.
• Baño Maria a 44,5 ± 0,2 ºC.
• Frascos de dilución, capacidad de 100 mL autoclavables.
• Pipetas serológicas de 10 mL tolerancia de ± 2.5%.
• Tubos de ensayos, resistentes al autoclavado, con dimensiones de 16 ó 18 x 150
mm (para medios de concentración simple) y 20 x 150 mm (para concentración doble).
• Tubos (campanas) Durham.
• Probetas, matraces, espátulas, vasos de precipitación, magnetos.
• Asas de siembra de níquel-cromo o platino de 3,0 a 3,5 mm de diámetro.
• Dilución de la muestra.
• El número de diluciones a realizar dependerá del tipo de muestra; si es agua
superficial o residual.
• Agitar vigorosamente aproximadamente 25 veces, para asegurar una buena
homogenización de la muestra, transferir con una pipeta estéril un volumen de 10 mL de
la muestra a un frasco con 90 ± 2 mL de agua de dilución. De esta manera se obtiene la
primera dilución (10-1).
43
• Homogenizar el frasco que contiene la dilución (10-1), con una nueva pipeta estéril
transferir 10 mL a un nuevo frasco de dilución, obteniendo así la segunda dilución (10-2).
Continuar con este proceso hasta realizar todas las diluciones del caso, dependiendo del
grado de contaminación de la muestra.
Prueba presuntiva
• Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.
• Colocar los tubos en gradillas y codificarlos anotando el número asignado a la
muestra y dilución a inocular.
• Para agua de consumo humano utilizar 10 tubos de 10 mL de CLT a doble
concentración, agitar el frasco de la muestra vigorosamente unas 25 veces, inocular 10 mL
de muestra en cada uno de los tubos y agitar suavemente antes de incubar.
• Para otros tipos de agua, utilizar serie de 5 tubos conteniendo 10 mLCLT de
concentración doble y series de 5 tubos con 10 mL de CLT de concentración simple para
cada dilución. El número de serie de tubos dependerá del número de diluciones que se
haya determinado para cada muestra.
• Agitar vigorosamente por unas 25 veces los frascos con las diluciones ctuadas y
con una pipeta estéril transferir 1 mL comenzando de la dilución más alta, en cada uno de
los tubos con CLT de concentración simple correspondiente a dicha dilución, para ello se
puede utilizar la misma pipeta.
• De la muestra original transferir 1 mL a cinco tubos con CLT de concentración
simple y 10 mL en cinco tubos con CLT de doble concentración. En los casos que se
trabaje con estos volúmenes de muestra.
• Incubar los tubos inoculados a 35 ± 0.5 °C. Después de 24 ± 2 horas examinar y
separar los tubos con CLT positivos, aquellos que presentan formación de gas en el tubo
Durham (fermentación) y turbiedad. Anotar los resultados. Todos los tubos positivos
deben pasar a la siguiente fase, la prueba confirmativa.
• Reincubar los tubos negativos por 24 horas más. Realizar la segunda lectura a las
48 horas. Nuevamente separar y anotar los resultados de los tubos positivos y pasarlos a la
prueba confirmativa y descartar los tubos negativos.
Prueba confirmativa
Coliformes totales
44
• Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.
• Agitar los tubos positivos de la prueba presuntiva antes de ser inoculados en los
tubos de caldo BRILLA.
• Con el asa de siembra estéril, transferir una o mas asadas de un cultivo positivo de
CLT a un tubo con caldo BRILLA. Repetir el procedimiento para todos los tubos
presuntivos.
• Incubar los tubos inoculados a 35 ± 0.5 °C por 24 ± 3 horas.
• Después de 24 ± 3 horas de incubación, retirar los tubos, agitarlos y observar la
producción de gas, proceder a realizar la lectura considerando positiva toda formación de
gas en los tubos Durham (Fermentación) y turbiedad en los tubos. Anotar los resultados.
Reincubar los tubos negativos por otras 24 ± 3 horas.
• A las 48 horas, retirar los tubos, agitarlos y observar la producción de gas, proceder
a realizar la lectura considerando positiva toda formación de gas en los tubos Durham
(Fermentación) y turbiedad en los tubos. Anotar los resultados.
• Con las lecturas obtenidas a las 24 y 48 horas calcular el NMP de acuerdo a la
fórmula y las porciones y combinaciones empleadas (véase anexo 2 o 3).
Coliformes fecales
Antes de inocular en los tubos estos deben estar a temperatura ambiente.
• Agitar los tubos positivos de la prueba presuntiva antes de ser inoculados en los
tubos de caldo EC.
• Con el asa de siembra estéril, transferir una o mas asadas de un cultivo positivo de
CLT a un tubo con caldo EC. Repetir el procedimiento para todos los tubos presuntivos.
• Incubar los tubos inoculados a 44.5 ± 0.2 °C en Baño María por 24 ± 2 horas.
• Luego de la incubación, retirar los tubos, observar la producción de gas y proceder
a realizar la lectura, considerando positiva toda formación de gas en los tubos Durham
(Fermentación) y turbiedad en los tubos. Anotar los resultados.
• Con las lecturas obtenidos calcular el NMP de acuerdo a las porciones y
combinaciones empleadas .
Escherichia coli
45
• Con el asa de siembra estéril, transferir una o más asadas de un cultivo positivo de
CLT a un tubo con caldo EC con MUG. Repetir el procedimiento para todos los tubos
presuntivos.
• Incubar los tubos inoculados a 44.5 ± 0.2 °C en Baño María por 24 ± 2 horas.
• Los tubos positivos (que presenten gas y turbiedad), se exponen a una lámpara de
luz UV de 365 nm, la presencia de una fluorescencia azul se considera como una reacción
positiva para E. coli. Anotar los resultados.
• Paralelo a los análisis de las muestras, analizar los controles positivos de la
cepa de E. coli (MUG positiva), un control negativo cepa termotolerante de Klebsiella
pneumoniae (MUG negativa) y un medio de cultivo sin inocular.
• Anotar los resultados obtenidos y calcular el NMP de acuerdo a la fórmula y las
porciones y combinaciones empleadas.
Determinación del Número Más probable (NMP)
El cálculo de la densidad probable de bacterias Coliformes totales, fecales y E. coli está
basado en la combinación de los resultados positivos y negativos obtenidos en cada
dilución. La densidad de coliformes se expresa como NMP de coliformes por 100 mL y se
obtiene a través de la tabla en la que se presenta el límite de confianza de 95% para cada
valor de NMP determinado.
Los valores de NMP, para una variedad de combinaciones de tubos positivos y negativos.
Los valores de NMP presentados en el anexo 2 se refieren específicamente a la
combinación de resultados positivos obtenidos cuando son inoculados una serie de 10 tubos
con volúmenes de 10 mL de muestra.
Los valores de NMP presentados en el anexo 3 se refieren específicamente a la
combinación de resultados positivos obtenidos cuando son inoculados series de 5 tubos con
volúmenes de 10 mL, 1 mL, 0,1 mL de muestra.
Cuando se inoculan más de tres series de diluciones decimales, seleccionar las tres
diluciones según los ejemplos que se detallan.
Como primer número del código seleccionar la lectura correspondiente a la dilución más
alta que de resultados positivo en los 5 tubos y la lectura de las dos diluciones subsiguientes
para completar el código.
46
Si la dilución más baja examinada tiene menos de cinco porciones con resultados
positivos, selecciónela y las siguientes dos diluciones mayores.
Cuando ocurra un resultado positivo en una dilución más alta que en las tres seleccionadas
de acuerdo con las reglas aquí dadas, cambie la selección a la dilución más baja que tenga
menos de cinco resultados positivos y las siguientes dos diluciones mayores.
Cuando todas las reglas de selección dadas aquí hayan dejado sin seleccionar cualquier
dilución mayor con resultados positivos, añada el resultado de aquellas diluciones mayores
con resultados positivos al resultado de la dilución anterior.
Composición y preparación de los medios de cultivos y reactivos.
1. Caldo lauril triptosa. Composición:
Tryptosa 20.0 g
Lactosa 5,0 g
Dipotasio hidrogeno fosfato K2HPO4 2,75 g
Potasio dihidrogeno fosfato, KH2PO4 2,75g
Cloruro de sodio 5,0 g
Lauril sulfato de sodio 0,1 g
Agua destilada 1 L
Disolver 35.6 g del medio deshidratado por litro de agua destilada (caldo simple). Ajustar
el pH a 6.8 ± 0.2 y distribuir 10 mL del medio en tubos de ensayo de 16 ó 18 x 150 mm
provisto en su interior con un tubo de fermentación invertido (Durham), tapar y
esterilizar a 121°C durante 15 minutos. Para caldo de doble concentración, (véase el
cuadro 1) disolver 71.2 g del medio deshidratado por litro de agua destilada. Ajustar el
pH a 6.8 ± 0.2 Distribuir 10 mL Del medio en tubos de ensayo de 20 x 150 mm provistos
también en su interior con tubos Durham y proceder como en el caso anterior.
Tabla 05: Concentración de caldo lauril triptosa en función al volumen de muestra
adecuado
47
Tubos con
CLT
mL
Volumen de
Muestra mL
Concentración del
Medio
CLT g/L
10
10
0.1 a 1.0
10
1 x (simple)
2 x (doble)
35.6
71.2
2. Caldo lactosado verde brillante bilis lactosa (BRILLA):
3. Composición: Peptona 10,0 g Lactosa 10,0 g Oxgall 20,0 g
Verde brillante 1 L.
Preparación:
Disolver 40 g de medio BRILLA en un litro de agua destilada. Distribuir 10 mL. En tubos de
ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos
a 121 °C.
3. Caldo EC
Composición:
Triptosa o tripticasa 20,0 g
Lactosa 5,0 g
Mezcla de sales biliares Nº 3 1,5 g
Dipotasio hidrogeno fosfato K2HPO4 2,75 g
Potasio dihidrogeno fosfato, KH2PO4 2,75g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agua destilada 1 L
Preparación:
Disolver 37 g de medio EC - MUG en un litro de agua destilada. Distribuir 10 mL. En tubos
de ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 121 °C.
48
4. Caldo EC - MUG.
Composición:
Triptosa o tripticasa 20,0 g
Lactosa 5,0 g
Mezcla de sales biliares Nº 3 1,5 g
Dipotasio hidrogeno fosfato K2HPO4 2,75 g Potasio
dihidrogeno fosfato, KH2PO4 2,75g
Cloruro de sodio 5,0 g
4-metylumberiferil-β-D-glucoronido (MUG) 0,05 g
Agua destilada 1 L
Preparación:
Disolver 37 g de medio EC - MUG en un litro de agua destilada. Distribuir 10 mL En tubos
de ensayo provisto con tubos Durham invertidos. Esterilizar en autoclave durante 15
minutos a 121 °C.
Agua de dilución
Para el agua de dilución, es necesaria la preparación de soluciones Stock A y B.
Solución Stock A: Disolver 34 g de fosfato monopotásico (KH2PO4) en 500 mL. De agua
destilada, al ajustar el pH a 7.2 ± 0.5 con hidróxido de sodio (NaOH 1N), y completar el
volumen a un litro con agua destilada. Autoclavar por 15 minutos a 121°C.
Solución Stock B: Disolver 81.1 g de cloruro de magnesio (MgCl26H2O) en un litro de agua
destilada. Autoclavar por 15 minutos a 121°C.
Agregar 1.25 mL. De la dilución Stock A y 5 mL de la solución Stock B a un litro de agua
destilada. Distribuir en frascos en cantidades que aseguren, luego de llevarlo a la
autoclave por 15 minutos a 121°C, un volumen de 90 ± 2 mL
5.Tiosulfato de sodio
Disolver 3 g de tiosulfato de sodio en 100 mL de agua destilada para obtener una
concentración del 3%. Para agua potable, agua clorada, colocar en los frascos de
muestreo 0,1 mL de esta solución (antes de su esterilización), por cada 100 mL de
capacidad del frasco.
49
5.6. Técnicas e instrumentos de recolección de datos
Las técnicas de recolección de datos que se utilizaran en la presente investigación serán
fuentes primarias de manejo personal como:
Entrevistas.- Esta técnica nos permite recolectar información de primera mano de la
morbilidad por disenterías de la población tema de investigación análisis de resultados de
muestreo de agua de consumo humano (coliformes fecales y totales).
Muestreo: Esta técnica nos permite recolectar muestra de agua en captación, reservorio y
domicilio lo cual será información de primera mano en la cual se considera datos generales y
aspectos específicos sobre el tema de investigación.
5.6.1 Etapas de la experimentación
La experimentación tendrá como estructura principal las siguientes etapas de acuerdo a la
naturaleza de la investigación en sus distintos componentes.
• Primera etapa, elaboración y validación de los instrumentos de recolección de datos.
• Segunda etapa, aplicación, organización, tabulación e interpretación de la
información recolectada.
• Tercera etapa, reporte de investigación y su correspondiente sustentación.
50
V. ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO
La siguiente investigación tendrá una duración de 4 meses realizándose el análisis y
contrastación de las hipótesis, con el debido procesamiento, ya que el investigador realizara
prueba piloto desde 01 Enero del 2016 hasta 31 de abril del 2016, a esto se aumentara 02
mes más para la revisión del informe de tesis y ajustes finales.
5.1. Cronograma de actividades
2015 2016
ActividadJul-
AgoSet-Oct
Nov-
Dic
Ene-
Feb
Mar-
Abr
May-
JunJul-Ago
Elaboración del
proyectoX X
51
Aprobación del
proyectoX
Coordinaciones en
campoX
Ejecución del
proyectoX X
Análisis estadístico X
Redacción X
Presentación de
informeX
Publicación X X
5.2. Recursos institucionales, humanos y financieros
RECURSOS CANTIDAD P.
UNITARIO
TOTAL
Recursos materiales S/.
Papel Bond 80gr. 02 millares S/. 26.00 52.00
Fichas. 02 cientos S/. 8.00 16.00
Impresión ------------ S/. 0.10 300.00
Pasajes. 01 Aprox. ---------- 1000.00
Gastos diversos. 01 Aprox. ---------- 500.00
Bibliografía ------------- ------------ 500.00
Internet 20 10 200.00
Útiles de escritorio --------- --------- 100.00
Empastado 5 Unidades S/. 16.00 80.00
Fotografías. Aproximados S/. 0.60 100.00
52
Reportera digital 01 Unidad S/. 200.00 200.00
Cámara fotografía digital 01 Unidad S/. 800.00 800.00
Cámara firmadora digital 01 Unidad S/. 2,000.00 2,000.00
CDs 01 Ciento S/. 80.00 80.00
Recursos humanos
Digitador 01 --------- 100.00
encuestador 01 --------- 400.00
TOTAL S/. 8,438.00
VI. REFERENCIA BIBLIOGRAFIA
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Ambato INTE INEN 108 (2011). Norma técnica Ecuatoriana de Agua Potable
57
VI. ANEXOS
ANEXO N° 01
CADENA DE CUSTODIALABORATORIO DESA PARA MUESTRA DE AGUA SOLICITANTE: MINSA-EE.SS ( ) INTITUCIONES –ONGs( ) TERCEROS ( ) JASS ( )DEPARTAMENTO.__________ PROVINCIA.______________DISTRITO.__________MICRO RED_____________ EE.SS:___________NOMBRE DEL MUESTREADOR___________
N°COD
LAB
LOCALIDAD
DISTRITO
ORIGEN DE FUENTE
NOMBRE DEL SISTEMA
PUNTO DE MUESTREO
CL
OR
O
FECHA Y HORA DE L MUESTREO
FECHA Y HORA DE ENTREGA
TIPO DE ANALISIS
FISICO
QUIMICO
METALES
BACTERIASA.S.
T.A.S
1
SAP.
/ / Hora :
/ / Hora :
2
SAP.
/ / Hora :
/ / Hora :
3
SAP.
/ / Hora :
/ / Hora :
MUESTRA RECUIBIDA
A.- condición de recipiente Buena ( ) malo( )
OBSERVACIONES:
58
Leyenda: (AS) agua superficial (AST) agua subterránea (AR) agua rio (AL) agua de lago (ARC) agua de canal de riego (AT) aguas termales.
Entregado por recibido por V°B° Jefe Inmediato
ANEXO N° 2: Vigilancia de la calidad de agua de consumo humano pvica monitoreo de cloro residual
GOBIERNO REGIONAL APURIMAC
DIRECCIÓN REGIONAL DE SALUD APURIMACDIRECCIÓN EJECUTIVA DE SALUD AMBIENTALVIGILANCIA DE LA CALIDAD DE AGUA DE CONSUMO HUMANO PVICAMONITOREO DE CLOR RESIDUAL
MICRO RED__________________________________ PROVINCIA._______________________ LOCALIDAD__________________EE.SS:______________________________________ DISTRITO.________________________ N° DE CONEXIONES:___________
RESPONSABLE :_______________________________ POBLACIÓN USUARIA:________________ MES: __________
N° FECHA
HORA
NOMBRE DEL SISTEMA
PUNTO DE MUESTREO
NOMBRE DE USUARIO
DIRECCIÓN
prueba de cloro residual Mues
tra microb N°
continuidad hora/dias
Firma Y DNI del Usuario
˂5.00 ppm/lit
˃ 5.00 ppm/lit
1
2
3
4
5
6
59
OBSERVACIONES: llenar esta ficha en forma mensual por cada sistema de agua y remitirlo a DESA punto de muestreo: desde el reservorio hasta las conexiones domiciliarias (Pileta Domiciliaria)
FIRMA DEL RESPONSABLE Firma y sello del jefe del Establecimiento
ANEXO N° 3. Diagrama de análisis bacteriológico de agua subterránea proveniente de de piletas domiciliaria y reservorio del distrito de Tambuco.
TÉCNICA: FERMENTACIÓN EN TUBOS MÚLTIPLES (APHA, AWW.WEF. Part. 9221B. 21 th ed.
2005)
Muestra de Agua
Subterránea
10 ml 10 ml 10 ml
Caldo Brilla Doble
C
oncentrado
60
Cald
o Brilla Simple
Concent
rado
Gas (+) 24 horas
Gas (-) 24 horas
Reincubar 24Horas
Gas (+) 48 horas: Prueba positiva para Coliformes
totales
Gas (-) 48 horas: Prueba negativa
61
Prueba de temperatura elevada en CaldoBrilla e incubar a 44,5 +/- 0,2 °C
Gas (+) 24horas
Gas (-) 24horas
62
Prueba confirmativa positiva paraColiforme Termotolerante
Prueba negativa
63
ANEXO N° 4. Diagrama de análisis bacteriológico de agua subterránea proveniente de de piletas domiciliaria y reservorio del distrito de Tambuco.
PREPARACIÓN DE AGAR CUENTA COLONIAS + TTC AL 0,5 %
Agua destilada estéril
+ 0,5 g de TTC
Filtro de celulosa estéril
de 45 µm
Solución TTC al 0,5 %
estéril
Agar Cuenta Colonias PCA + TTC 0,5%
64
ANEXO N° 5 Diagrama de análisis bacteriológico de agua subterránea proveniente de piletas domiciliaria y reservorio del distrito de Tambuco.
TÉCNICA: MÉTODO DE PLACA FLUIDA (APHA, AWW, WEF Part. 9215B 21 th ed. 2005).
Agregar 90ml de H2oPeptonada
Se desecha
Agregar 10 ml demuestra
9 ml de H2oPeptonada
9 ml de H2oPeptonada
1 ml 1 ml 1 ml
Agar Cuenta colonias PCA + TTC al 0,5 % 15-20 ml
1 ml 1 ml 1 ml
10-110-2 10-3
INCUBAR A 37 °C /24 – 48 HRS
65
ANEXO N° 6. Diagrama de flujo del procedimiento
66
ANEXO N° 07: Índice de NMP al 95% de confianza para resultados de combinaciones de tubos positivos y negativos cuando se usan 10 tubos inoculados con 10 mL de muestra.
Nº de tubos positivos de 10
tubos(volumen de 10 mL c/u)
Índice de NMP/100 mLLímite de confianza al 95%
Bajo Alto
0 < 1,1 ---- 3,4
1 1,1 0,051 5,9
2 2,2 0,37 8,2
3 3,6 0,91 9,7
4 5,1 1,6 13
5 6,9 2,5 15
6 9,2 3,3 19
7 12 4,8 24
8 16 5,8 34
9 23 8,1 53
10 > 23 13 ----
ANEXO N° 08: Índice de NMP al 95% de confianza para varias combinaciones de resultados positivos cuando se usan 5 tubos por dilución (10mL, 1,0mL, 0,1 mL). Combinación de positivos
NMP / 100 mL
Límite de Confiabilidad Combinación de positivos
NMP / 100 mL
Límite de Confiabilidad
Bajo Alto Bajo Alto
0 0 0 < 1.8 6.8 4 0 3 25 9.8 706 400 0 1 1.8 0.09 6.8 4 1 0 17
0 1 0 1.8 0.09 6.9 4 1 1 21 6.8 420 1 1 3.6 0.7 10 4 1 2 26 9.8 700 2 0 3.7 0.7 10 4 1 3 31 10 700 2 1 5.5 1.8 15 4 2 0 22 6.8 500 3 0 5.6 1.8 15 4 2 1 26 9.8 701 0 0 2 0.1 10 4 2 2 32 10 701 0 1 4 0.7 10 4 2 3 38 14 1001 0 2 6 1.8 15 4 3 0 27 9.9 701 1 0 4 0.71 12 4 3 1 33 10 701 1 1 6.1 1.8 15 4 3 2 39 14 1001 1 2 8.1 3.4 22 4 4 0 34 14 1001 2 0 6.1 1.8 15 4 4 1 40 14 1001 2 1 8.2 3.4 22 4 4 2 47 15 1201 3 0 8.3 3.4 22 4 5 0 41 14 100
67
1 3 1 10 3.5 22 4 5 1 48 15 1201 4 0 10 3.5 22 5 0 0 23 6.8 702 0 0 4.5 0.79 15 5 0 1 31 10 702 0 1 6.8 1.8 15 5 0 2 43 14 1002 0 2 9.1 3.4 22 5 0 3 58 22 1502 1 0 6.8 1.8 17 5 1 0 33 10 1002 1 1 9.2 3.4 22 5 1 1 46 14 1202 1 2 12 4.1 26 5 1 2 63 22 1502 2 0 9.3 3.4 22 5 1 3 84 34 2202 2 1 12 4.1 26 5 2 0 49 15 1502 2 2 14 5.9 36 5 2 1 70 22 1702 3 0 12 4.1 26 5 2 2 94 34 2302 3 1 14 5.9 36 5 2 3 120 36 2502 4 0 15 5.9 36 5 2 4 150 58 4003 0 0 7.8 2.1 22 5 3 0 79 22 2203 0 1 11 3.5 23 5 3 1 110 34 2503 0 2 13 5.6 35 5 3 2 140 52 4003 1 0 11 3.5 26 5 3 3 170 70 4003 1 1 14 5.6 36 5 3 4 210 70 4003 1 2 17 6 36 5 4 0 130 36 4003 2 0 14 5.7 36 5 4 1 170 58 4003 2 1 17 6.8 40 5 4 2 220 70 4403 2 2 20 6.8 40 5 4 3 280 100 7103 3 0 17 6.8 40 5 4 4 350 100 7103 3 1 21 6.8 40 5 4 5 430 150 11003 3 2 24 9.8 70 5 5 0 240 70 7103 4 0 21 6.8 40 5 5 1 350 100 11003 4 1 24 9.8 70 5 5 2 540 150 17003 5 0 25 9.8 70 5 5 3 920 220 26004 0 0 13 4.1 35 5 5 4 1600 400 46004 0 1 17 5.9 36 5 5 5 >1600 7004 0 2 21 6.8 40
ANEXO N° 09Límites máximos permisibles de parámetros microbiológicos y parasitológicos
Parámetros Unidad de medida Límite máximo permisible
1. Bactérias Coliformes Totales. UFC/100 mL a 35ºC 0 (*)
68
2. E. Coli UFC/100 mL a 44,5ºC 0 (*)
3. Bactérias Coliformes
Termotolerantes o Fecales.
UFC/100 mL a 44,5ºC 0 (*)
4. Bactérias Heterotróficas UFC/mL a 35ºC 5005. Huevos y larvas de Helmintos,
quistes y ooquistes de
protozoarios patógenos.
Nº org/L 0
6. Vírus UFC / mL 07. Organismos de vida libre, como algas, protozoarios,
copépodos, rotíferos, nemátodos
Nº org/L
CENTRO DE SALUD TAMBURCO
CUESTIONARIO DIRIGIDO A LOS USUARIOS DE AGUA DE CONSUMO HUMANO DEL DISTRITO DE TAMBURCO-2016.
CUESTIONARIO # 1Datos del Paciente:
Edad: -------- Sexo: M/F
Procedencia: --------------------------
69
Fecha: ------------------------------------
1) De dónde proviene el agua que utiliza para consumo.
a) EMUSAP (Potable)
b) JASS.
c) Municipio.
d) Otro.
e) no sabe.
2) Cómo llega el agua a su casa.
a) Tubería
b) Tanquero
c) Tubería y Tanquero
d) Otro
e) Ninguno
3) El agua está disponible:
a) Permanenteb) Racionada
4) Realiza algún proceso adicional de tratamiento del agua
a) Clorada
b) Hervida
c) La filtrad) Expone al sol
e) Ninguna
5) De donde utiliza el agua para beber o cocinar
a) Directo de la Llave
b) Del lugar de almacenamiento
c) Otro
d) Ninguno
6) Alguna vez le han capacitado sobre cómo tratar el agua de manera casera:
Si / No
7) En los últimos 6 meses, cuantas veces se ha enfermado con diarrea
a) 1ª4 70
b) 4ª6
c) 6ª9
d) +10
8) Cuantos días ha durado con la diarreaa) Menos de 4 semanas
b) Más de 4 semanas
9) 9 Toma directamente el agua del grifo en distrito de tamburco.
a. siempre
b. a veces
c. nunca
10) 11. Los alimentos se lavan antes de ingerirlos.
a. siempre
b. a veces
c. nunca
11. ha tenido un proceso diarreico después de ingerir agua.
a. siempre
b. a veces
c. nunca
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