Embed Size (px)
Citation preview
Metamorfosa (Journal of Biological Sciences)
ISSN: 2302-5697
Penanggung Jawab
Koordinator Program Studi Magister Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana
EDITORIAL TEAM
Chief Editor : Dr. I Ketut Ginantra, S.Pd., M.Si.
Deputy Chief Editor : Dr. Iriani Setyawati, S.Si., M.Si.
Co Editor
1. Dr. Bayu Aji, M.Sc (Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia)
2. Dr. I Wayan Suana, S.Si., M.Si. (Universitas Mataram)
3. Luh Arpiwi, S.Si., M.Sc., Ph.D. (Universitas Udayana)
4. Dr. Drs. Ida Bagus Gede Darmayasa, M.Si. (Universitas Udayana)
5. Ni Wayan Sudatri, M.Si. (Universitas Udayana)
Staff Editor
1. Ida Bagus Ngurah Surya Darma, S.Tp
2. Ni Luh Putu Ariwathi, S.Pt., M.Si.
3. Pasek Agus Ariawan S.Kom.
Alamat Redaksi
Sekretariat Prodi Magister Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Udayana
Jalan PB. Sudirman, Denpasar, Bali
Telp. (0361) 2166767
Email: [email protected]
Website: http://ojs.unud.ac.id/index.php/metamorfosa
Metamorfosa
(Journal of Biological Sciences)
ISSN: 2302-5697
Vol. 5, No. 1, Maret 2018
DAFTAR ISI STUDI HISTOPATOLOGI INSANG IKAN NILA (Oreochromis niloticus, Linn.)
DITINJAU DARI KADAR AMMONIA (NH3) DI DANAU BATUR, BALI ............................ 1-7
THE STUDY OF HISTOPATOLOGY GILL TILAPIA (Oreochromis niloticus, Linn.)
IN TERMS OF LEVELS OF AMMONIA (NH3) IN BATUR LAKE, BALI
Desak Wira Triana Wandari, I Wayan Restu, Endang Wulandari Suryaningtyas
UJI AKTIVITAS EKSTRAK BIJI KAPUK RANDU (Ceiba pentandra Gaertn.)
TERHADAP PERILAKU KAWIN TIKUS (Rattus norvegicus) JANTAN ............................. 8-15
THE ACTIVITY TEST OF KAPOK SEED (Ceiba pentandra Gaertn.) EXTRACT
ON MALE RATS (Rattus norvegicus) MATING BEHAVIOR
Dessy Sukma Wirastuti, Ngurah Intan Wiratmini, Sang Ketut Sudirga
POLA AKTIVITAS TAPIR (Tapirus indicus Desmarest 1819) DI HUTAN KALAWEIT
SUPAYANG, KABUPATEN SOLOK, PROVINSI SUMATERA BARAT .......................... 16-21
ACTIVITY PATTERN OF MALAYAN TAPIRS (Tapirus indicus Desmarest 1819) IN
SUPAYANG KALAWEIT FOREST, SOLOK REGENCY, WEST SUMATRA PROVINCE
Erik Marlius, Wilson Novarino, Rizaldi, Asferi Ardiyanto
AGAS SCIARID (DIPTERA: SCIARIDAE): SUATU KAJIAN PUSTAKA ....................... 22-27
SCIARIDE GNAT (DIPTERA: SCIARIDAE): A LITERATURE REVIEW
I Gede Ketut Susrama
PENGARUH EKSTRAK KELENJAR HIPOFISA AYAM BROILER DALAM
MEMPERCEPAT RESPON OVULASI IKAN KOI Cyprinus carpio L. .............................. 28-35
THE EFFECT OF BROILER CHICKEN PITUITARY EXTRACT IN SPEEDING UP
THE OVULATION RESPONSE OF KOI FISH
Hidayah Mardhatillah, Efrizal, Resti Rahayu
PENGARUH KARAKTERISTIK PASIR PANTAI TERHADAP PERSENTASE
KEBERHASILAN PENETASAN TELUR PENYU LEKANG (Lepidochelys olivacea)
DALAM UPAYA KONSERVASI PENYU DI BALI ........................................................... 36-43
CHARACTERISTIC INFLUENCE OF SAND BEACH ABOUT PERCENTAGE
HATCHING SUCCESS OLIVE RIDLEY SEA TURTLE EGG ON CONSERVATION
EFFORT SEA TURTLE IN BALI
I Nyoman Yoga Parawangsa, I Wayan Arthana, Rani Ekawaty
PERBANYAKAN IN VITRO TANAMAN KENTANG (Solanum tuberosum [L.]
cv. Granola) DENGAN PENAMBAHAN META-TOPOLIN PADA MEDIA
MODIFIKASI MS (Murashige & Skoog) .................................................................................. 44-50
IN VITRO PROPAGATION OF POTATO (Solanum tuberosum [L.] cv. Granola) BY
ADDITION OF META-TOPOLIN ON MODIFIED MS (Murashige & Skoog) MEDIA
Tia Setiawati, Auliya Zahra, Rully Budiono, Mohamad Nurzaman
KARAKTERISTIK BUAH, BIJI DAN KANDUNGAN MINYAK DARI TANAMAN
NON PANGAN DI PULAU SERANGAN BALI ....................................................................... 51-56
FRUITS, SEEDS TRAITS AND OIL CONTENT OF NON FOOD PLANTS FROM
SERANGAN ISLAND, BALI
Ramdhoani, Ni Luh Arpiwi, A. A. Ketut Darmadi
AKTIVITAS HARIAN ELANG BRONTOK (Nisaetus cirrhatus) DI PUSAT
KONSERVASI ELANG KAMOJANG...................................................................................... 57-63
DAILY ACTIVITY OF CHANGEABLE HAWK-EAGLE (Nisaetus cirrhatus)
IN KAMOJANG EAGLE CONSERVATION CENTER
Nabila Ghitha Safanah, Ruhyat Partasasmita, Zaini Rakhman
PEMANFAATAN TUMBUHAN PEKARANGAN SEBAGAI BAHAN OBAT
ALTERNATIF DI DESA JIMBARAN, KECAMATAN KUTA SELATAN,
KABUPATEN BADUNG, BALI .......................................................................................... 64-70
UTILIZATION OF YARD PLANTS AS ALTERNATIVE MEDICINE IN
JIMBARAN VILLAGE, SOUTH KUTA, BADUNG, BALI
Irawati, Eniek Kriswiyanti, A.A. Ketut Darmadi
KANDUNGAN MINYAK, HUBUNGAN KEKERABATAN DAN POTENSI
BIODIESEL DARI KEPUH (Serculia foetida L.) DI KABUPATEN BADUNG,
KOTA DENPASAR DAN ROTE (NTT) .................................................................................... 71-77
OIL CONTENT, KINSHIP RELATIONSHIPS AND BIODIESEL POTENCY OF
Sterculia foetida L. IN BADUNG REGENCY, DENPASAR AND ROTE (NTT)
Midel Delfi Wehelmina Ndolu, Ni Luh Arpiwi, Ni Luh Suriani
TINGKAT KESUBURAN PERAIRAN BERDASARKAN KELIMPAHAN
FITOPLANKTON DI DANAU BATUR, KINTAMANI, BALI ........................................... 79-84
AQUATIC PRODUCTIVITY BASED ON THE ABUNDANCE OF
PHYTOPLANKTON IN BATUR LAKE, KINTAMANI, BALI
I Gusti Ayu Novie Sidaningrat, I Wayan Arthana, Endang Wulandari Suryaningtyas
STUDI PENDAHULUAN KADAR TIMBAL DAN KADMIUM DALAM AIR DAN
IKAN NILA (Oreochromis niloticus, Linn.) SEBAGAI KAJIAN KUALITAS AIR DI
BENDUNGAN TELAGA TUNJUNG, BALI ............................................................................ 85-93
A PRELIMINARY STUDY OF LEAD AND CADMIUM CONTENT IN WATER
AND TILAPIA (Oreochromis niloticus, Linn.) FOR WATER QUALITY ASSESSMENT
OF TELAGA TUNJUNG DAM , BALI
Made Octiya Arimardewi, I Wayan Restu, Suprabadevi Ayumayasari Saraswati
IDENTIFIKASI DAN PREVALENSI ENDOPARASIT PADA KAMBING DIKOTA
PADANG, SUMATERA BARAT ............................................................................................... 94-98
IDENTIFICATION AND PREVALENCE OF ENDOPARASITE IN GOAT IN
PADANG, WEST SUMATERA
Marta Yufa, Mairawita, Henny Herwina
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI Streptomyces spp. PENGHASIL ENZIM
KITINASE DARI LUMPUR SELOKAN ........................................................................... 99-104
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF Streptomyces spp. PRODUCING
CHITINASE ENZYME FROM SEWAGE MUD
Putu Ayu Parwati, Retno Kawuri, Ni Luh Watiniasih
TEKNIK PERANCANGAN PRIMER UNTUK SEKUEN GEN MDR-1
VARIAN 1199 PADA SAMPEL BUFFY COAT PASIEN ANAK DENGAN LLA ............ 105-111
MDR-1 GENE 1199 VARIANT PRIMER DESIGN TECHNIQUES IN PEDIATRIC
PATIENT BUFFY COAT SAMPLES WITH LLA
Putu Desy Yustinadewi, Putu Sanna Yustiantara, Inna Narayani
STUDI JAMUR POLYPORUS LIAR YANG BISA DIKONSUMSI (CENDAWAN
ELANG) DI KECAMATAN KAYU ARO BARAT, KABUPATEN KERINCI, JAMBI... 112-116
STUDY OF WILD EDIBLE POLYPORUS (CENDAWAN ELANG) FROM WEST
KAYU ARO SUBDISTRICT, KERINCI REGENCY, JAMBI
Dalli Yulio Saputra, Nurmiati, Periadnadi
KARAKTERISTIK SARANG TEMPUA Ploceus philippinus (Linnaeus, 1766) DI AREA
PERSAWAHAN GURUN AUR, KECAMATAN BANUHAMPU, KABUPATEN AGAM,
SUMATERA BARAT .............................................................................................................. 117-122
NEST CHARACTERISTICS OF BAYA WEAVER Ploceus philippinus (Linnaeus, 1766)
AROUND RICEFIELD IN GURUN AUR, BANUHAMPU, AGAM REGENCY, WEST
SUMATERA
Merry, Wilson Novarino, Rizaldi
DIVERSITY OF LICHEN CRUSTOSE OF Plumeria spp. IN BALI ISLAND
INDONESIA ............................................................................................................................ 123-129 Junita Hardini, Rina Sri Kasiamdari, Santosa, Purnomo
VARIASI MORFOLOGI ULAR CANTIK MANIS, Tropidolaemus wagleri Wagler,
1830 (SERPENTES: VIPERIDAE) DI SUMATERA BARAT, INDONESIA .................. 130-137
MORPHOLOGICAL VARIATION OF TEMPLE PIT-VIPER Tropidolaemus Wagleri
Wagler, 1830 (SERPENTES: VIPERIDAE) IN WEST SUMATRA, INDONESIA
Hadi kurniawan, Djong Hon Tjong, Wilson Novarino
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018)
J U R N A L M E T A M O R F O S A Journal of Biological Sciences
ISSN: 2302-5697 http://ojs.unud.ac.id/index.php/metamorfosa
99
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI Streptomyces spp. PENGHASIL ENZIM KITINASE
DARI LUMPUR SELOKAN
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF Streptomyces spp. PRODUCING CHITINASE
ENZYME FROM SEWAGE MUD
Putu Ayu Parwati*, Retno Kawuri, Ni Luh Watiniasih
Program Studi Magister Ilmu Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana
*Email: [email protected]
INTISARI
Streptomyces merupakan bakteri dari kelompok Actinomycetes. Genus ini diketahui dapat
memproduksi berbagai senyawa aktif diantaranya antibiotik, antiviral, dan enzim. Enzim yang dapat
ditemukan pada bakteri dan jamur yaitu salah satunya enzim kitinase. Enzim kitinase yang diproduksi
oleh bakteri lebih baik dibandingkan kitinase dari sumber lain karena dengan waktu yang relatif singkat
dapat melakukan proses perkembangbiakan. Bakteri kitinolitik merupakan agen pengendalian hayati
terhadap jamur patogen maupun serangga hama yang sangat potensial karena aktivitas kitinase yang
dimiliki. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi, mengetahui karakteristik Streptomyces spp. dari
lumpur selokan dan uji aktivitas enzim kitinase. Aktivitas enzim kitinase diketahui melalui zona bening
yang terbentuk pada media uji. Hasil penelitian diperoleh lima spesies Streptomyces spp. dari sampel
lumpur selokan yang diisolasi dengan karakteristik yang berbeda-beda. Hasil penelitian juga
menunjukkan bahwa dari lima spesies Streptomyces spp., dua spesies yaitu Streptomyces sp.3 dan
Streptomyces sp.5 mampu memproduksi enzim kitinase, sementara tiga spesies Streptomyces lainnya
tidak memproduksi enzim kitinase. Streptomyces sp.3 memproduksi enzim kitinase dengan
terbentuknya zona bening sebesar 1,85±0,07 cm dan pada Streptomyces sp.5 terbentuk zona bening
sebesar 0,65 ±0,14 cm . Berdasarkan data tersebut Streptomyces sp.3 dan Streptomyces sp.5 memiliki
potensi sebagai bakteri kitinolitik yang memiliki manfaat sebagai agen pengendalian hayati.
Kata kunci : Streptomyces sp., Enzim kitinase
ABSTRACT
Streptomyces is a bacterium of the Actinomycetes group. This genus is known to produce various
active compounds including antibiotics, antivirals, and enzymes. Enzymes that can be found in bacteria
and fungi is one of them chitinase enzyme. The production of chitinase enzyme from bacteria is better
than chitinase from other sources because of its proliferation occurs in a relatively short time. Chitinase
activity of chitinolitic bacteria is potentially to be used as a biological control agent against pathogenic
fungi and insect pests. This study aims to isolate, characterized and identify the chitin enzyme activity
of Streptomyces spp. collected from sewage slurry. The activity of chitinase enzymes is known through
the clear zone formed on the medium. Five Streptomyces species were isolated from the sewage slurry
collected 3 different places. Out of 5 species, two species, Streptomyces sp.3 and Streptomyces sp.5,
were able to produce chitinase enzyme, while three others were not. The species of Streptomyces sp.3
producing chitinase enzyme was performed a clear zone in chitin media with average of 1.85±0.07 cm
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018) ISSN: 2302-5697
100
and Streptomyces sp.5 was 0.65±0.14 cm. Therefore, Streptomyces sp.3 and Streptomyces sp.5 are a potential source of bacteria producing chitinase enzyme for a biological control agent.
Keywords: Streptomyces sp., chitinase enzyme
PENDAHULUAN
Indonesia sangat kaya dengan plasma
nutfah termasuk mikroorganisme yang hidup
didalamnya sehingga mampu menyediakan
isolat-isolat mikroba yang memiliki nilai
ekonomis yang tinggi. Penelitian isolat-isolat
mikroba secara umum bertujuan mencari
mikroba penghasil isolat yang dapat bermanfaat
bagi manusia misalnya antibiotik, enzim, dan
senyawa antitumor atau substansi bioaktif
lainnya (Natsir dkk, 1999). Dibandingkan
dengan tanaman dan hewan, mikroba
merupakan sumber enzim yang paling banyak.
Hal tersebut dikarenakan keuntungan dari
mikroba yang memiliki pertumbuhan cepat,
tumbuh pada substrat yang murah dan hasilnya
lebih mudah ditingkatkan melalui pengaturan
kondisi pertumbuhan (Suryadi dkk, 2013).
Kitinase adalah enzim yang mampu
menghidrolisi polimer kitin menjadi oligomer
kitin. Kitin merupakan polimer linier
karbohidrat yang tersusun dari monomer N-
asetil-glukosami dengan ikatan 1,4-β-glikosidik.
Bakteri yang mengandung kitin sebagai sumber
karbon dan nitrogen umumnya mengandung
enzim kitinase ekstraseluler (Itoi et al, 2007).
Enzim kitinase saat ini banyak dieksplorasi
karena kebutuhan enzim kitinase dalam bidang
kesehatan dan pertanian sangat dibutuhkan.
Sowmya et al. (2012) menyatakan genus
Actinomycetes yang menghasilkan enzim
kitinase adalah Streptomyces. Genus
Streptomyces ditetapkan sebagai salah satu
mikroorganisme terbaik untuk mempelajari
produksi serta aspek biokimia kitinase melalui
berbagai kondisi dan lingkungan karena hampir
semua anggota Genus Streptomyces
menghasilkan kitinase (Soeka, 2015).
Kemampuan yang dimiliki bakteri kitinolitik
yaitu memproduksi enzim kitinase dan sebagai
sumber karbon serta nitrogen dimanfaatkan
enzim kitinase untuk asimilasi kitin (Wu et al,
2001). Secara intra maupun ekstraseluler
dengan acak dari dalam (endokitinase) atau dari
ujung nonreduksi (eksokitinase) molekul kitin,
kitinase yang termasuk kelompok enzim
hydrolase dapat mendegradasi kitin secara
langsung menjadi produk bermolekul kecil
(Wang and Chang, 1997). Kitin didegradasi
menjadi oligosakarida kitin (diasetilkitobiosa
dan N-asetilglukosamin) oleh enzim kitinase,
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi
dan mengetahui karakteristik bakteri
Streptomyces spp. yang ditemukan pada lumpur
selokan serta kemampuannya memproduksi
enzim kitinase.
BAHAN DAN METODE
Isolasi bakteri Streptomyces spp.
dilakukan menggunakan sampel dari lumpur
selokan yang terdapat di kawasan Tabanan,
Denpasar dan Badung. Isolasi Streptomyces sp.
dilakukan dengan metode pengenceran (serial
dilution method) yaitu dengan menimbang 10
gram lumpur selokan kemudian dihomogenkan
pada 90 mL air steril. Sampel yang telah
homogen dilakukan pengenceran berseri hingga
10-3 dan ditanam secara pour plate pada media
Yeast Extract Malt Agar (ISP4/International
Standar Project 4). Pengamatan secara
makroskopis dan mikroskopis dilakukan pada
koloni yang tumbuh pada media. Pengamatan
makroskopis berupa warna koloni, bentuk
koloni dan ada tidaknya pertumbuhan hifa
aerial. Pengamatan mikroskopis berupa
pengamatan terhadap struktur hifa dan konidia,
uji pewarnaan tahan asam dan uji pewarnaan
Gram. Buku kunci determinasi Guide to the
Classification and Identification of the
Actinomyces and Their Antibiotics dari
Lechevalier and Waksman (1973) dan Bergey’s
Manual of Determinative Bacteriology dari Holt
et al. (1994) digunakan untuk identifikasi
penentuan genus Streptomyces.
Uji aktivitas enzim kitinase dilakukan
dengan menggunakan media kitin agar. Masing-
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018) ISSN: 2302-5697
91
masing isolat Streptomyces sp. yang berusia 5 hari diambil koloninya dengan menggunakan
cork borer (diameter koloni yang diambil 5
mm) sebanyak 2 buah lalu diletakkan pada
permukaan media kitin sebagai media uji.
Kemudian media uji tersebut diinkubasi pada
suhu 370C selama 18-24 jam. Zona bening yang
terbentuk pada sekitar koloni menunjukkan
adanya aktivitas enzim kitinase. Zona bening
yang semakin besar menunjukkan aktivitas
enzim kitinase yang dimiliki Streptomyces sp.
tersebut semakin besar (Rostinawati, 2008).
Pengukuran zona hambat terbentuk pada cawan
Petri diukur sebanyak 2 kali yaitu pengukuran
berdasarkan garis tengah diagonal dan hasilnya
dirata- ratakan.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Isolasi Bakteri Streptomyces
Hasil isolasi diperoleh 5 isolat yang
memiliki perbedaan karakteristik makroskopis
dan termasuk Gram positif, katalase positif serta
bakteri tidak tahan asam. Streptomyces sp.1
memiliki koloni berbentuk bulat dengan
pinggiran tidak merata. Koloni melekat erat
pada media dengan permukaan seperti kapas.
Hifa aerial berwarna abu keemasan dan secara
mikroskopis hifa tidak berseptat dengan
diameter 0,12-0,24 µm. Konidia berbentuk
bulat, tersusun berantai dengan diameter 0,08-
0,10 µm (Gambar 1).
Gambar 1. Bakteri Streptomyces sp.1. (A)
Koloni pada media YEMA, (B) gambar
mikroskopis, (a) konidia dan (b) hifa
Streptomyces sp.2 memiliki koloni
berbentuk bulat melekat erat pada media dengan
miselia vegetatif berwarna merah pada media
YEMA. Pertumbuhan hifa aerial berwarna putih
dan secara mikroskopis memiliki diameter 0,18-
0,21 µm. Konidia berbentuk bulat, tersusun berantai dengan diameter 0,07-0,21 µm.
(Gambar 2).
Gambar 2. Bakteri Streptomyces sp.2. (A)
Koloni pada media YEMA, (B) gambar
mikroskopis, (a) konidia dan (b) hifa
Streptomyces sp.3 memiliki koloni
berbentuk bulat dengan pinggiran merata.
Koloni melekat erat pada media dengan struktur
permukaan seperti kapas dengan hifa aerial
berwarna putih. Secara mikroskopis hifa tidak
berseptat dengan ukuran 0,08-0,09 µm. Konidia
tersusun lurus berantai, berbentuk oval dengan
diameter 0,07-0,08 µm (Gambar 3).
Gambar 3. Bakteri Streptomyces sp.3. (A)
Koloni pada media YEMA, (B) gambar
mikroskopis, (a) konidia dan (b) hifa
Gambar 4. Bakteri Streptomyces sp.4. (A)
Koloni pada media YEMA, (B) gambar
mikroskopis, (a) konidia dan (b) hifa
Streptomyces sp.4 memiliki koloni bulat
dengan permukaan koloni seperti beludru.
Koloni melekat erat di media dengan hifa aerial
B A
A B
A B
B A
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018) ISSN: 2302-5697
92
berwarna abu keemasan. Secara mikroskopis hifa tidak berseptat berdiameter 0,07-0,08 µm.
Konidia bulat, tersusun berantai berdiameter
0,08-0,10 µm (Gambar 4).
Streptomyces sp.5 memiliki koloni bulat
dengan permukaan seperti bertepung. Koloni
melekat erat pada media dengan hifa aerial
berwarna abu keemasan. Secara mikroskopis
hifa tidak berseptat dengan diameter 0,20-0,24
µm. Konidia berbentuk bulat, tersusun berantai
dengan diameter 0,09-0,11 µm (Gambar 5).
Gambar 5. Bakteri Streptomyces sp.5. (A)
Koloni pada media YEMA, (B) gambar
mikroskopis, (a) konidia dan (b) hifa
Karakteristik dari kelima isolat tersebut
diantaranya koloni merekat erat pada media,
membentuk hifa aerial, Gram positif, tidak
tahan asam, katalase positif, konidia dengan
ukuran rata-rata 0,07-0,21 µm dan memiliki hifa
vegetative. Keseluruhan isolat dapat tumbuh
dengan baik pada media YEMA dengan kisaran suhu pertumbuhan 28±20.
Beberapa karakteristik genus Strepto-
myces menurut Holt et al. (1994) dan
Lechevalier and Waksman (1973) diantaranya
memiliki hifa vegetatif dengan diameter 0,50-
2,00 µm. Hifa vegetatif dalam pertumbuhannya
akan membentuk hifa aerial, dimana hifa aerial
yang matang akan membentuk susunan rantai
spora.
2. Uji Enzim Kitinase
Uji aktivitas enzim kitinase dilakukan
untuk mengetahui kandungan enzim kitinase
dari isolat Streptomyces spp.
Isolat Streptomyces sp.3 (Gambar 6C)
memiliki kandungan enzim kitinase paling
besar dengan diameter zona bening sebesar
1,85±0,07 cm.
Isolat Streptomyces sp.5 (Gambar 6E)
memiliki kandungan enzim kitinase yang kecil
dengan diameter zona bening sebesar 0,65±0,14
cm. Isolat Streptomyces sp.4 (Gambar 6D)
terlihat tidak adanya zona bening yang
terbentuk, tetapi terbentuk koloni bakteri yang
tumbuh di area pengujian enzim kitinase.
Isolat Streptomyces sp.1 (Gambar 6A) dan
Streptomyces sp.2 (Gambar 6B) menunjukkan
tidak ada zona bening terbentuk tersebut.
Tabel 1. Zona bening isolat Streptomyces spp. pada media kitin
No. Isolat Streptomyces Diameter zona bening (cm)
1. Streptomyces sp.1 0,00 ± 0,00
2. Streptomyces sp.2 0,00 ± 0,00
3. Streptomyces sp.3 1,85 ± 0,07
4. Streptomyces sp.4 0,00 ± 0,00
5. Streptomyces sp.5 0,65 ±0,14
Keterangan: Nilai rata-rata zona bening ± standar deviasi dari dua kali ulangan
Menurut Gohel et al. (2006) secara kuali-
tatif aktivitas kitinase ditunjukkan bila di sekitar
koloni isolat yang tumbuh pada medium agar
kitin terbentuk zona bening. Aktivitas enzim
kitinase yang terbentuk keluar sel memecah
makromolekul kitin menjadi molekul lebih kecil
mengakibatkan terbentuknya zona bening
(Suryadi dkk., 2013). Jumlah monomer N-asetil
glukosamin yang dihasilkan dari proses
hidrolisis kitin dengan memutus ikatan β 1,4
homopolimer N-asetilglukosamin menentukan
besarnya zona bening yang dihasil-kan oleh
enzim kitinase. Makin besar zona bening yang
terbentuk di sekitar koloni menandakan makin
besar jumlah monomer N-asetilglukosamin
yang dihasilkan (Wijaya, 2002).
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018) ISSN: 2302-5697
102
Berdasarkan penelitian, waktu produksi
enzim kitinase dari isolat Streptomyces sp.
adalah 6 hari (Narayana and Vijayalakshmi,
2009). Waktu yang dibutuhkan untuk
memproduksi enzim kitinase adalah pada fase
eksponensial, yang berbeda-beda tergantung
pada tiap mikroba (Matsumoto et al., 2006).
Kondisi pH dan suhu produksi enzim kitinase
bervariasi. Aktivitas kitinase juga dipengaruhi
oleh faktor lain seperti suplemen nutrisi yang
ditambahkan, konsentrasi koloidal kitin,
penambahan sumber karbon, penambahan
sumber nitrogen, dan penggunaan detergen
(Bhattacharya et al., 2012)
Enzim kitinase yang berperan dalam
pengendalian jamur, nematoda dan serangga
mampu menguraikan kitin pada dinding sel
jamur, nematoda dan eksoskeleton serangga
menjadi N-asetil glukosaminida.
Mikroorganisme kitinolitik mendegradasi kitin
dengan cara melibatkan enzim kitinase.
Sebagian besar mikroorganisme ini ialah dari
kelompok bakteri, misalnya Streptomyces,
Bacillus, Aeromonas, Serratia, dan
Enterobacter. Streptomyces sp. memiliki
kemampuan untuk menghasilkan enzim kitinase
(Dewi, 2008).
Streptomyces alivaceoviridis menginduksi
sintesis kitinase dengan cara mengenal struktur
fisik kitin seperti susunan rantai. Bakteri ini
memproduksi protein seperti lektin yang
mengikat secara khusus pada kristal α-kitin dan
selama degradasi kitin sel juga dapat mengenal
derajat deasitilasi dari jumlah glukosamin dan
G1cNac relatif yang dibebaskan (Dewi, 2008).
Okasaki et al. (1995) melaporkan
Streptomyces sp. J-13-3 menghasilkan dua jenis
kitinase yaitu Chi A dan Chi B yang stabil pada
pH optimum 6 dan suhu optimum yaitu 450C.
KESIMPULAN
Isolasi yang dilakukan dari sampel lumpur
selokan diperoleh lima isolat Streptomyces spp.
dengan karakteristik yang berbeda-beda. Dari
lima spesies Streptomyces, dua spesies yaitu
Streptomyces sp.3 dan Streptomyces sp.5
mampu memproduksi enzim kitinase, sementara
tiga spesies Streptomyces lainnya tidak
memproduksi enzim kitinase. Streptomyces
sp.3 memproduksi enzim kitinase dengan
terbentuknya zona bening sebesar 1,85±0,07 cm
dan pada Streptomyces sp.5 terbentuk zona
bening sebesar 0,65 ±0,14 cm .
DAFTAR PUSTAKA
Bhattacharya S., S. Chakrabortty, and A. Das.
2012. Optimization of Process Parameters
for Chitinase Production by a Marine
Isolate of Serratia marcescens. J. Pharm.
Biol. Sci, 2(2):8-20.
Gambar 6. Hasil uji aktivitas enzim kitinase
Keterangan: (A) Streptomyces sp.1, (B) Streptomyces sp.2, (C) Streptomyces
sp.3, (D) Streptomyces sp.4, (E) Streptomyces sp.5.
C A B
D E
JURNAL METAMORFOSA V (1): 99-104 (2018) ISSN: 2302-5697
104
Dewi, I.M. 2008. Isolasi Bakteri dan Uji Aktifitas Kitinase Thermofilik Kasar dari
Sumber Air Panas Tinggi
Raja,Simalungun, Sumatera Utara (Tesis),
Medan: Pascasarjana Universitas
Sumatera Utara.
Natsir,H., D.Tjandra, M.T. Suhartono, J.K.
Hwang, dan Y.R.Pyun. 1999. Eksplorasi
Mikroba Asidofilik Penghasil Enzim
Kitinase Asal Kawah Kamojang Jawa
Barat, Prosiding II Seminar Hasil-Hasil
Penelitian Bidang Ilmu Hayati Pusat
Antar Universitas Ilmu Hayati Bogor
Gohel V, A.Singh, M.Vimal, P.Ashwini, and
H.S.Chhatpar. 2006. Bioprospecting and
antifungal potential of chitinolytic
microorganisms. African J Biotech, 5 (2):
54-72.
Holt, J.G., N.R. Krieg, P.H.A. Sneath,
J.T.Staley, and S.T.Williams. 1994.
Bergey’s Manual of Determinative
Bacteriology. Baltimore: Williams and
Wilkins.
Itoi, S., Y. Kanomata, Y. Koyama, K.Kadokura,
S.Uchida, T.Nishio, and H. Sugito. 2007.
Identification of a Novel Endochitinase
from a Marine Bacterium Vinrio
proteolyticus strain No.442. J.
Biochemica et Biophysica Acta. 1774 :
1099-1107
Lechevalier, H.A. and S.A.Waksman. 1973.
Guide to the Classification and
Identification of the Actinomycetes and
Their Antibiotics. Baltimore: Williams
and Wilkins.
Matsumoto, Y., C.Saucedo, G.Revah, and
S.K.Shirai. 2006. Process Biochemistry.
J. Fac. Agr, 39(6):665-671.
Narayana, K., and M. Vijayalakshmi. 2009.
Chitinase Production by Streptomyces sp.
ANU 6277. J. Microbial, 40:725-733.
Okazaki, K., T.Abe, K.Saruwatari, F. Kato, K.
Maruyama and K. Tagawa. 1995. Purification and properties of
mycodextranase from Streptomyces sp. J-
13-3. Biosci Biotechnol Biochem, 56:1-5.
Rostinawati,T. 2008. Skrinning dan Identifikasi
Bakteri Penghasil Enzim Kitinase dari Air
Laut di Perairan Pantai Pondok Bali
(penelitian mandiri). Jatinangor:
Universitas Padjadjaran.
Soeka, Y.S. 2015. Karakterisasi Enzim Kitinase
dan Identifikasi Isolat Aktinomisetes
KRC 21.D berasal dari Kebun Raya
Cibodas. Pros Sem Nas Masy Biodiv
Indon, 1(5): 1156-1161
Sowmya, B., D. Gomathi, M. Kalaiselvi, G.
Ravikumar, C. Arulraj, and C. Uma.
2012. Production and purification of
chitinase by Streptomyces sp. from soil. J
Adv Sci Res, 3(3): 25-29.
Suryadi, Y., T.P. Priyatno, D.N. Susilowati.,
I.M. Samudra., N.Yudhistira., dan E.D.
Purwakusumah. 2013. Isolasi dan
Karakterisasi Kitinase asal Bacillus
cereus 11 UJ. Jurnal Biologi
Indonesia.9(1).51-62
Wang, S.L., and W.T.Chang. 1997. Purification
and Characterization of Two Bifunctional
Chitinase/Lysozimes Extracelullarly
Produce by Pseudomonas aeruginosa K-
187 in a Shrimp and Crab Shel Powder
Medium. J. Appl. Environ. Microbiol.
63:380-386.
Wijaya, S. 2002. Isolasi Kitinase dari
Scleroderma columnare dan Trichoderma
harzarium. Ilmu Dasar, 3(1): 30-35.
Wu, M.L., Y.C. Chuang, J.P. Chen, C.S. Chen,
and M.C. Chang. 2001. Identification &
Characterization of the Three Chitin-
Binding Domains within the Multidomain
Chitinase Chi92 from Aeromonas
hydrophila jp 101. J. Appl. Env.
Microbiol. 67: 5100-5106.
