Medios de Cultivo (TIPOS DE CULTIVOS Y ESPECIFICACIONES)

8/10/2019 Medios de Cultivo (TIPOS DE CULTIVOS Y ESPECIFICACIONES)

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MEDIOS RICOS Y ENRIQUECIDOS:NO TIENEN AGENTES INHIBIDORES

MEDIO COMPONENTESPRINCIPALES

CARACTERSTICAS USOS VISUALIZACIN DELAS COLONIAS

MEDIOS SLIDOSAgar nutritivo Caldo nutritivo + Agar.

Diferentes versiones con

distintos componentes(peptona, triptona-soja,infusin de cerebro ycorazn, agar Brucella, agarColumbia, etc.)

No es diferencial Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general, crecen

una gran mayora, excepto algunosmuy exigentes

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Agar TSA Digestin enzimtica de sojay casena.

No es diferencial, si nose le aade sangre

Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general. Se usacomo base para agar sangre. Crecen

una gran mayora, e incluso algunosexigentes, comoBrucella,Corynebactrium, Listeria

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Agar Columbia Peptona, triptena, extractode levadura y extracto decorazn, almidn

No es diferencial, si nose le aade sangre

Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general. Se usacomo base para agar sangre. Crecenuna gran mayora, e incluso algunos

exigentes al aadir sangre.

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BHI Infusin de tejidos animales,peptonas, glucosa y tampn

No es diferencial Medio rico que permite elcrecimiento de una gran mayora delos microorganismos, menos losmuy exigentes. Se puede usar como

base para Agar sangre.

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Agar sangre Agar base (BHI, Columbia,

TSA, Brucella) + 5% sangrede oveja desfibrinada

Diferencial, permite ver

distintos tipos dehemlisis

Aislamiento de la gran mayora de

microorganismos, incluidos algunosmuy exigentes. No permite elcrecimiento deNeisseriay

Haemophilus.

Distingue tres tipos de

hemlisis:-hemlisis o hemlisis total-hemlisis o hemlisis

parcial-hemlisis o no hemlisis

Agar sangre con disco

de bacitracina

dem. a agar sangre + disco

de bacitracina de muy bajaconcentracin (0,04U)

Diferencial, hemlisis Identificacin de Streptococcus

pyogenesy Streptococcusagalactiae

S. pyogenes: Colonias beta-

hemolticas sensibles abacitracina (halo deinhibicin), S. agalactiae,colonias beta-hemolticas nosensibles

Agar sangre con estraestafiloccica

Agar sangre con una estracon S.aureus. La beta-hemlisis producida por S.

aureuslibera factor V yfactor X, permitiendo elcrecimiento deHaemophilus

Identificacin deHaemophiluscomo colonias satlites en la estrade Staphylococcus aureus.

Colonias puntiformessatelitales deHaemophilus

Agar sangre paraanaerobios

Agar base (p.e.., Columbia)+ 5% sangre de oveja +extracto de levadura +hemina + vitamina K

Diferencial, hemlisis Medio enriquecido, permite elcrecimiento de una gran mayora deanaerobios

Hemolisis

Agar chocolate Agar sangre, con la sangrelisada (por calentamiento a80C). Los eritrocitos lisadosliberan la hemoglobina yotros nutrientes como factorX (hemina) y factor V(NAD)

Ya no es diferencial Medio rico que permite elcrecimiento de una gran mayora delos microorganismos, incluidos losmuy exigentes comoNeisseriay

Haemophilus

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Agar CLED Cistina, lactosa, deficiente

en electrolitos. La cistinamejora la recuperacin de lasenterobacterias. La lactosa yel indicador (azul de

bromotimol) permitendistinguir las bacteriasfermentadoras de lactosa deno fermentadoras de lactosa.La deficiencia en electrolitoslimita el movimiento de

Proteus.

Medio rico y diferencial,

permite distinguirfermentadoras y nofermentadoras de lactosa

Para urocultivo Fermentadoras de lactosa se ven

amarillas (baja el pH y vira elindicador a amarillo). Las nofermentadoras se ven incoloras,

blancas o incluso azuladas (si subenel pH por utilizacin de las

peptonas).

Medio de Kligler(Tubo en pico deflauta)

Lactosa:glucosa 10:1Rojo fenol como indicadorTiosulfato sdicoFe para detectar la formacin

de sulfuro

Medio rico y diferencial,permite ver 4caractersticas de lasenterobacterias:

fermentacin de laglucosa, fermentacin dela lactosa, produccin desulfuro y formacin degases.

Identificacin presuntiva degneros de enterobacterias

Pico rojo/fondo amarillo: fermentanglucosa y no produce sulfuro(Providencia, Shigella, Serratia,algunas especies de Citrobacter)

Pico rojo/ fondo rojo y precipitadonegro: fermenta glucosa y producesulfuro (Salmonella, Proteus)Pico amarillo/fondo amarillo:fermenta glucosa y lactosa y no

produce sulfuro (E. coli, Klebsiella,Enterobacter). Puede haberformacin de gases (se levanta elagar).Pico amarillo, fondo amarillo y

precipitado negro: fermenta glucosay lactosa y produce sulfuro(Citrobater freundii).


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Meller-Hinton Peptona, almidn, pH 7,3 Transparente para

observar bien los halosde inhibicin, no tienePABA (interaccin conantibiticos), grosor 4mm.

Realizacin de las pruebas de

sensibilidad a antibitios (Bauer-Kirby, dilucin en agar y test depsilon)

Se siembra en csped, tres

veces con un hisopo

CALDOS

Caldo nutritivo Extracto de carne con NaCl.Se puede suplementar conextracto de levadura,

peptonas, glucosa, etc.

-- Para microorganismos no exigentes ----

Caldo tioglicolato Caldo suplementado concasena, extracto de levaduray de carne y tiglicolato. Para

anaerobios, aadir ademshemina y vitamina K.

Caldo ms utilizado enmicrobiologa clnica.Bajo potencial redox.

Favorece el crecimiento de aerobios,microaerfilos, y anaerobios (capade parafina lquida), incluso

microorganismos exigentes. Bajopotencial redox, favorece larecuperacin de anaerobios.

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Caldo con carnepicada

Trozos de carne como fuentede protenas

Bajo potencial redox Favorece la recuperacin deanaerobios, mejor cuando se aadeuna capa de parafina lquida.


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CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO(agentes inhibidores a baja concentracin, retrasan el crecimiento de la microbiota contaminante y

permiten el enriquecimiento de un microorganismo que se quiere recuperar.

MEDIO COMPONENTES PRINCIPALES CARACTERSTICAS USOSCaldo gram negativos GN Agentes inhibidores a baja

concentracin: citrato y desoxicolato(sal biliar) inhiben las gram positivasy retrasan el crecimiento de lascoliformes

Enriquecimiento de Salmonellay Shigellaen muestras de heces e hisopados rectales

Caldo selenito F Agente inhibidor: selenito de sodio.Inhibe los enterococos y retrasa elcrecimiento de las coniformes. Se

puede aadir cisterna que favorece elcrecimiento de Salmonella.

Enriquecimiento de Salmonella.

Caldo tetrationato Inhibidores: sales biliares y

tetrationato sdico (se genera en lareaccin de tiosulfato con yodo),inhiben las bacterias gram positivas ylas coniformes que no tienen laenzima tetrationato reductasa

Enriquecimiento deSalmonella

Caldo peptonacomplementada

Caldo con peptona pH 8,4 Enriquecimiento de especies de Vibrio,antes de subcultivar en medios msselectivos

Caldo tioglicolato Campy Caldo similar al tioglicolatosuplementado con un poco de agar(semislido) y antibiticos

Enriquecimiento de especies deCampylobacter antes de subcultivar enmedios ms selectivos

Caldo Todd-Hewitt consangre y antibiticos

Como inhibidores lleva cidonalidxico y gentamicina o colistina

Enriquecimiento de Streptococcusagalactiaede muestras genitales.


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MEDIOS SELECTIVOS

MEDIO COMPONENTESPRINCIPALES

CARACTERSTICAS USOS VISUALIZACIN DE LASCOLONIAS

Agar de MacConkey Inhibidores: cristalvioleta y sales biliares.Lactosa como agentediferencial. Rojo neutrocomo indicador.

Selectivo y diferencial Aislamiento debacterias gramnegativas(enterobacterias). Elcolorante cristalvioleta inhiben lasgram positivas. Lassales biliares inhibenlas gram positivas yalgunas gramnegativas (no las

enterobacterias).

Las enterobacterias fermentadoras delactosa (E. coli,Enterobacter, Klebsiella)se ven rosa/rojo/violeta. E. colipuede

presentar um halo rosa alrededor de lscolonias, debido a la precipitacin de lassales biliares a pH muy cido. Las nofermentadoras de lactosa (Salmonella,Shigella,Providencia, Proteus) se ventransparentes.

Agar EMB Inhibidores: eosina yazul de metileno.Lactosa como agentediferencial.

Selectivo y diferencial Aislamiento debacterias gramnegativas(enterobacterias). Loscolorantes inhiben lasgram positivas.

Las enterobacterias fermentadoras delactosa (Enterobacter, Klebsiella) se venrosa/rojo/violeta. E. colise ve de colorverde metlico, debido a la precipitacinde los colorantes a pH muy cido. Las nofermentadoras de lactosa (Salmonella,

Providencia, Shigella, Proteus) se ventransparentes.


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Agar SS Inhibidores: sales

biliares, citrato, y elcolorante verde

brillante: Incorporalactosa y tiosulfatocomo agentesdiferenciales. Rojoneutro como indicador.

Selectivo y diferencial Aislamiento selectivo

de SalmonellayShigellade muestrasde heces o hisopadosrectales.

Colonias deSalmonella: incoloras, no

fermentan la lactosa y con punto centralnegro (producen sulfuro).Colonias de Shigella: incoloras, sin puntocentral negro.Coliformes (E. coli, Klebsiella,

Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero rosa/rojo, por la fermentacin de lalactosa. Gram positivas no crecen.

Agar entrico Hektoen(HE)

Inhibidores: salesbiliares, citrato, y loscolorantes fucsinacida y azul de

bromotimol. Incorporalactosa y tiosulfatocomo agentes

diferenciales. Azul debromotimol comoindicador.

Selectivo y diferencial Aislamiento selectivode SalmonellayShigella de muestrasde heces o hisopadosrectales.

Colonias de Salmonella: incoloras overdes, del color del medio, no fermentanla lactosa y con punto central negro(producen sulfuro).Colonias de Shigella: incoloras o verdes,del color del medio, sin punto centralnegro. Coliformes (E. coli, Klebsiella,

Enterobacter) pequeas, muy inhibidas, yamarillas, (fermentacin de la lactosa).Gran positivos no crecen.

Agar XLD Inhibidores: salesbiliares a altaconcentracin, citrato ytiosulfato. Lactosa,sacarosa y xilosa comoagentes diferenciales.Lisina como agentediferencial. Tiosulfatoy citrato como agentesdiferenciales.Indicador: rojo fenol.

Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode especies deSalmonella y Shigella.

Colonias de Salmonellarosas o rojas (nofermentan la lactosa, pero descarboxilan lalisina, suben el pH) con punto centralnegro (por produccin de sulfuro). Lascolonias de Shigellase ven transparentes(no fermentan la lactosa) sin punto centralnegro.Coliformes (E. coli, Klebsiella,

Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero amarillas, por la fermentacin de lalactosa. Gram positivos no crecen.


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Agar desoxicolato-

citrato (ADC)

Inhibidores:

desoxicolato y citrato.Incorpora lactosa comoagente diferencial. Rojoneutro como indicador.

Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivo

de especies deSalmonella y Shigella.

Colonias de Salmonellay Shigellase ven

transparentes (no fermentan la lactosa).Coliformes (E. coli, Klebsiella,

Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero rosa/rojo, por la fermentacin de lalactosa.

Agar sulfito de bismuto Inhibidor: bismuto y elcolorante verde

brillante. Sulfatoferroso y sulfito comoagentes diferenciales.

Selectivo y Diferencial.Muy inestable, no se

puede usar al cabo de unasemana tras su

preparacin.

Aislamiento selectivode Salmonella typhi

Colonias con bordes claros y punto centralnegro.

Agar verde brillante Inhibidor: coloranteverde brillante (inhibegram positivas).

Incluye lactosa ysacarosa. Rojo fenolcomo indicador.

Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode especies deSalmonella, salvo S.

typhiy S. paratyphi.No se recomiendapara Shigella

Colonias de Salmonellarosas, blancas otransparentes, dependiendo de lafermentacin de los azcares.

Agar chocolate conIsovitalex yvancomicina

Agar sangre, con lasangre lisada (porcalentamiento a 80C).Se aade isovitalex(suplementovitamnico,aminocidos, Fe,glucosa, etc.) yvancomicina parainhibir gram positivos

Ya no es diferencial. Loseritrocitos lisados liberanla hemoglobina y otrosnutrientes como factor X(hemina) y factor V(NAD). El aadido devitaminas, aminocidos,glucosa, Fe, etc. permiteel crecimiento de

NeisseriayHaemophilus

Medio selectivomodificado para elaislamiento de

NeisseriayHaemophilus

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Agar salino manitol

(Chapman)

Inhibidor: cloruro

sdico al 7,5%. Manitolcomo agentediferencial, rojo fenolcomo indicador.

Selectivo y diferencial Aislamiento selectivo

de estafilococos ymicrococos

Los estafilococos coagulasa positivos

(Staphylococcus aureus) fermentan elmanitol y dan colonias amarillas. Losestafilococos que no fermentan el manitol(p.e., S. epidermidis) dan colonias blancaso del color del medio.

Agar Columbia CNA Agar base Columbiacon colistina y cidonalidxico

No es diferencial Aislamiento de cocosgram positivos

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Agar selectivo paraestreptococos

Inhibidores: cristalvioleta y antibiticos(trimetoprim-sulfametoxazol y

colistina). Tambinlleva sangre.

Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode S. pyogenes(garganta) y S.agalactiae

Permite ver hemlisis (beta).

Agar PEA (alcohol feniletlico)

Inhibidor: alcoholfenil-etlico (inhibegram negativas).Tambin se puedeaadir 5% sangre deoveja.

Selectivo.Si lleva sangre esdiferencial

Aislamiento selectivode cocos gram

positivos(estafilococos yestreptococos).Tambin para cocosgram positivosanaerobios si seincuba enanaerobiosis.

Si lleva sangre se observan reaccioneshemolticas. Si no, no es diferencial.


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Agar sangre lacada con

kanamicina yvancomicina (KVLB)

Sangre lacada

(congelada-descongelada). Agentesinhibidores:antibiticos(kanamicina, inhibealgunos gram negativosaerbios, yvancomicina, queinhibe gram positivosem general).

Selectivo.

No es diferencial

Aislamiento selectivo

de anaerobios,fundamentalmentegram negativos, demuestras en las quehay microbiotaaerobia y anaerobiamezcladas.

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BHI + Antibiticos dem. a BHI +cicloheximida (inhibehongos saprfitos) +cloranfenicol(antibacteriano)

Selectivo. No esdiferencial

Aislamiento selectivode hongos patgenos

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Agar sangre +antibiticos

Agar base (BHI,Columbia) + 5% sangrede oveja desfibrinada +cloranfenicol +gentamicina

Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode hongos patgenos,incluso los msexigentes. Losantibiticos inhibenlas bacterias.

Agar glucosa deSabouraud

Agentes inhibidores debacterias: antibiticos(cicloheximida ycloranfenicol), pHlevemente cido (5,6)inhibe algunas

bacterias

Selectivo. No esdiferencial

Aislamiento dehongos patgenosdermatofitos.

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Agar SABHI Agar base de

Sabouraud al que se leaade BHI, para poderaislar hongos msexigentes

Selectivo. No es

diferencial

Aislamiento ptimo

deBlastomycesdermatitidis e

Histoplasma

capsulatum

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MEDIOS ESPECFICOS

Bordet-Gengou Bordetella pertussisRegan-Lowe Bordetella pertussisAgar sangre de caballo con carbn Bordetella pertussisyB. parapertussis

Agar Campy con sangre CampylobacterAgar Skirrow Campylobacter

Agar CCF (fructosa, cicloserina, cefoxitina) Clostridium difficileCCYE Clostridium difficile

Agar cistina-telurito Corynebacterium diphtheriaePico de flauta de Loeffler Corynebacterium diphtheriae

BCYE (agar tamponado con carbn y extracto de levadura) Legionella pneumophilaAgar sangre de caballo con bacitracina Legionella pneumophila

Lowestein-Jensen Mycobacterium tuberculosis

Agar Thayer-Martin NeisseriaMartin-Lewis Neisseria

New York City Neisseria gonorrhoeae(tambin micoplasmas genitales)

Diamond Trichomonas vaginalis

Agar TCBS (tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa) Vibrio cholerae

Agar CIN (cefsulodina, irgasn, novobiocina) Yersinia

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