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8/3/2019 manualdevirusvirusfitopatgenos-100823110237-phpapp02

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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE SINALOAESCUELA SUPERIOR DE AGRICULTURA DEL VALLE DEL FUERTE

DEPARTAMENTO DE PROTECCIN VEGETAL RAMA DE FITOPATOLOGA

NOTAS DEL CURSO DE:

VIRUS (VIRUS FITOPATGENOS)

PROTECCIN VEGETAL 7mo. SEMESTRE

ING. MENA ADRIANO JORGE DANIELProfesor

JUAN JOS ROS, SINALOA. AGOSTO DE 2010


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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE SINALOAESCUELA SUPERIOR DE AGRICULTURA DEL VALLE DEL FUERTE

NOMBRE DE LA CARRERA Licenciatura en Ingeniera AgronmicaNOMBRE DE LA ASIGNATURA : Virus (Virus Fitopatgenos)SEMESTRE: Sptimo

FASE DE FORMACIN: AcentuacinLNEA CURRICULAR: Produccin AgrcolaAREA: Proteccin VegetalHORASTERICAS: 3

HORASPRCTICAS: 2 CRDITOS: 8

FUNDAMENTACIN CURRICULAR

La asignatura de Virus se encuentra incluida en el VII semestre de la Licenciatura enIngeniera Agronmica en el rea de Proteccin Vegetal y se encuentra vinculada demanera directa a las asignaturas de Fitopatologa General, Fitopatologa Agrcola,Hongos, Bacterias, Nematodos, Manejo de Enfermedades, Fungicidas yEnfermedades de hortalizas. Es de gran importancia ya que se considera que el 15% de las enfermedades ocurridas en campo son causadas por estos patgenos yadems por el auge y el impacto que estas enfermedades tienen actualmente en elmbito agrcola; es por eso que un alumno egresado de esta Fase de Acentuacinnecesita conocer la importancia de estos agentes como causantes deenfermedades.

PROPSITO(S) GENERAL(ES) DEL CURSO

Que los alumnos conozcan las caractersticas ms importantes de estos patgenosde plantas, sus formas de ataque y el dao que causan, las formas de transmisinen campo, las tcnicas de identificacin usadas y el impacto como agentescausantes de enfermedades, para que sean capaces de manejar de manera correctalas tcnicas de diagnstico ms empleadas en su identificacin y aprenda el manejocorrecto de los principios de control que se usan para estos agentes fitopatolgicos.

ACTIVIDADES DE ENSEANZA

1) Exposicin oral y escrita por parte del profesor2) Exposicin oral y visual por parte del profesor y los alumnos3) Conferencias sobre enfermedades virales4) Seminarios sobre temas relacionados con virus de plantas6) Prcticas de laboratorio y campo

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ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

1) Lectura de textos2) Trabajo en equipo3) Consultas bibliogrficas y sitios de Internet

4) Debate por equipos de los temas impartidos5) Reportes de trabajos de prcticas de campo y laboratorio

CRITERIOS DE EVALUACIN DE LOS APRENDIZAJES ESCOLARES

Asistencia (80 % de asistencia obligatoria para aprobar curso y tenerderecho a examen ordinarios y extraordinarios)

Participacin en clases0.5 Cumplimiento de tareas escolares.0.5 Elaboracin de trabajos escritos ....0.5

Asistencia y reporte de las prcticas de laboratorio y campo1.5 Exmenes terico-prcticos sobre las diversas unidades del programa.6.0 Presentacin oral y visual sobre un tema especfico..1.0

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CONTENIDO TEMTICO

UNIDAD I. INTRODUCCIN E IMPORTANCIA EN EL ESTUDIO DE LOS VIRUS

DE PLANTAS

1.1. Concepto de virus

1.2. Importancia de los virus

1.3. Sntomas causados por virus en plantas

1.3.1. Importancia de la sintomatologa causada por virus

1.3.2. Latencia, Enmascaramiento, Planta portadora, Periodo de incubacin

1.3.3. Clasificacin de sntomas por su localizacin

1.3.3.1. Sntomas externos

1.3.3.1.1. Sntomas locales

1.3.3.1.2. Sntomas sistmicos

1.3.3.2. Sntomas internos

1.3.3.2.1. Histolgicos

1.3.3.2.2. Citolgicos

1.3.4. Factores que intervienen en la variacin de sntomas

1.4. Factores causantes de sntomas semejantes a los inducidos por virus

UNIDAD II. FORMA, COMPOSICIN QUMICA Y TAXONOMA DE LOS VIRUS

QUE AFECTAN PLANTAS

2.1. Principales formas de virus de plantas

2.2. Tamao de los virus

2.3. Estructura qumica de los virus de plantas

2.4. Composicin y funciones del cido nucleico viral

2.5. Composicin y funciones de la protena viral

2.6. Replicacin de virus

2.7. Translocacin de los virus de plantas

2.8. Nomenclatura

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2.9. Posicin taxonmica de los virus que afectan plantas

2.9.1. Grupos de importancia de virus fitopatgenos

UNIDAD III. FORMAS DE TRANSMISIN E IDENTIFICACIN DE LOS VIRUS

DE PLANTAS

3.1. Concepto de transmisin de virus

3.2. Tipos de transmisin de virus

3.2.1. Transmisin por propagacin vegetativa

3.2.2. Transmisin mecnica

3.2.2.1. Tcnica de Frotis

3.2.2.1.1. Factores que intervienen en una transmisin por frotis3.2.2.2. Tcnica de injerto

3.2.2.3. Tcnica de inyeccin

3.2.3. Transmisin por semilla

3.2.3.1. Importancia de la transmisin por semilla de virus en plantas

3.2.3.2. Mecanismos de entrada de los virus en la semilla

3.2.3.3. Tcnicas de deteccin de los virus en semillas

3.2.4. Transmisin por polen

3.2.5. Transmisin de virus a travs de Biotransmisores

3.2.5.1. Transmisin por insectos

3.2.5.1.1. Clasificacin de virus de acuerdo a la transmisin por insectos

3.2.5.1.1.1. Virus no persistentes

3.2.5.1.1.2. Virus persistentes

3.2.5.1.1.2.1. Persistentes circulativos

3.2.5.1.1.2.2. Persistentes propagativos

3.2.5.1.1.2.3. Persistentes transovricos

3.2.5.2. Transmisin de virus por hongos

3.2.5.3. Transmisin de virus por nematodos

3.2.5.4. Transmisin de virus por caros

3.2.5.5. Transmisin de virus por plantas parsitas

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3.3.5.6. Transmisin de virus por vertebrados

3.3. Identificacin de virus

3.3.1. Pruebas de eliminacin de virus

3.3.2. Rango de hospedantes

3.3.3. Propiedades de infectividad de los virus

3.3.3.1. Punto de inactivacin trmica (PIT)

3.3.3.2. Punto final de dilucin (PFD)

3.3.3.4. Longevidad in Vitro

3.3.4. Tipo de partcula viral

3.3.5. Formas de transmisin

3.3.6. Pruebas serolgicas

3.3.6.1. Doble difusin en agar3.3.6.2. Prueba de Elisa

UNIDAD IV. DESCRIPCIN DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDADES

CAUSADAS POR VIRUS EN PLANTAS CULTIVADAS

4.1. Descripcin de los principales virus que afectan hortalizas

4.1.1. Virus que afectan tomate

4.1.2. Virus que afectan chile

4.1.3. Virus de cucurbitceas

4.2. Descripcin de los principales virus que afectan cultivos bsicos

4.2.1. Virus que afectan frijol

4.2.2. Virus que atacan maz y trigo

4.3. Descripcin de los virus que afectan frutales

4.3.1. Virus de ctricos

4.3.2. Virus que afectan papaya

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UNIDAD I. INTRODUCCIN E IMPORTANCIA EN EL ESTUDIO DE LOS VIRUS

DE PLANTAS

1.1. CONCEPTO DE VIRUS

La palabra "virus" fue descrita por primera vez en el diccionario Phillips en 1720

como "veneno o toxina". Durante mucho tiempo este trmino fue utilizado en el

lenguaje mdico, para designar enfermedades infecciosas cuyas causas eran

desconocidas. Despus de las investigaciones llevadas a cabo por Pasteur en 1864

sobre la especificidad microbiana se pens por analoga, que cada enfermedad

deba de tener su agente causante ya fuera un hongo, una bacteria u otro

microorganismo. Para explicar este hecho en algunas enfermedades de las plantas,

producidas por agentes no visibles al microscopio comn, se cre el concepto de"ULTRAMICROBIOS", para referirse a organismos ms pequeos a los que en

aquella poca se conocan y tenan la capacidad de causar infeccin.

Los virus son agentes infecciosos causantes de enfermedades de diversos

organismos vivos. La palabra virus es de origen latino y significa pus o veneno.

Los virus son partculas compuestas por cido nucleico (AN) y protena, de

tamao submicroscpico, son parsitos obligados que solo se multiplican en el

interior de las clulas del hospedante. Los virus no son clulas ni estn

constituidos por ellas, pero se propagan al obligar a la clula vegetal a que los

multiplique utilizando su propia energa y maquinaria biosinttica. A consecuencia

de lo anterior el metabolismo de las clulas vegetales se altera a tal grado que las

plantas se enferman. Los virus no matan a las plantas directamente mediante

toxinas ni enzimas. En cambio desvan el metabolismo y se generan substancias

extraas y se alteran diversas funciones vitales que inducen el desarrollo de

sntomas, que pueden variar desde simples cambios de color hasta necrosis

severa o muerte sbita de la planta. En otros el efecto es casi imperceptible como

en el caso de los hospedantes asintomticos.

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1.2. IMPORTANCIA DE LOS VIRUS

Los virus son importantes porque:

1. Causan enfermedades en el hombre (sida, cncer, poliomielitis, rabia, gripe

y hepatitis viral, etc.), animales domsticos y silvestres.

2. Afectan a otros microorganismos (bacterifagos, micovirus) por lo que

contribuyen al equilibrio microbiano de la naturaleza.

3. Causan enfermedades de plantas. Se han caracterizado ms de 1000 virus,

de los cuales ms de 500 son patgenos de plantas. Al alterar el

funcionamiento normal de la planta llegan a provocar prdidas hasta de

100%. Los daos no son nicamente en la cantidad sino en la calidad de la

produccin; por ejemplo frutos deformes y manchados pierden valor

comercial.

Prcticamente cualquier planta puede ser atacada por virus y es comn encontrar

a mas de dos virus afectando al mismo tiempo a la misma planta. Algunos como el

Virus del Mosaico del Tabaco tiene un rango de hospedantes muy amplio; puede

atacar ms de 300 especies de plantas herbceas y leosas distribuidas en 50

gneros.

A consecuencia de las enfermedades virales (o virosis) se derivan tambin una

serie de gastos adicionales para lograr el control: aplicaciones de insecticidas

contra vectores, cubiertas de agribn, trampas amarillas, etc.

1.3. SNTOMAS CAUSADOS POR VIRUS EN PLANTAS

Un amplio rango de anormalidades son causadas por virus y casi nunca las

caractersticas de la planta puede ser cambiada por la infeccin del virus, ya que la

mayora de los efectos notables son cambios de color o desarrollos anormales. La

mayora de los virus que atacan plantas infectan a sus hospedantes sistmicamente,

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esto es, se dispersan desde el sitio de la infeccin a otras partes de las plantas. Sin

embargo, no todos los tejidos o clulas son invadidos y los tejidos meristemticos de

races y retoos, por ejemplo, parecen escapar a las infecciones.

Las relaciones sobre la multiplicacin de los virus y sus consecuentes sntomas

(efectos visibles del patgeno sobre su hospedante), an es poco entendido, y es

conveniente sealar que depende en gran medida de algunos factores como: medio

ambiente, relacin virus-hospedante, condiciones fisiolgicas de las plantas, edad de

los tejidos del hospedante y el tiempo de infeccin de estos.

Los sntomas causados por virus en plantas eran de las nicas herramientas con

que se contaba en aos anteriores para la identificacin de estos patgenos yactualmente juegan un papel de gran importancia debido a:

a) Con los sntomas se pueden reconocer plantas virosas en el campo y eliminarlas.

b) Se puede determinar en algunos casos la naturaleza virosa de la enfermedad.

c) Sirven en Virologa para expresar la nomenclatura de estos patgenos.

d) Se puede valorar por medio de los sntomas el grado fitopatolgico de una

enfermedad en una planta y un cultivo.

1.3.1. IMPORTANCIA DE LA SINTOMATOLOGA CAUSADA POR VIRUS

Sin negar la importancia de los sntomas para identificar enfermedades virales, el

diagnstico de estas en base a los sntomas, es con frecuencia de baja precisin.

Los sntomas son tiles para el diagnstico preliminar y solo en el caso de

enfermedades muy conocidas se puede afirmar con total certeza que el agente

causal de tal o cual enfermedad es determinado virus. Lo anterior se debe a que:

- Sntomas similares pueden ser producidos por diferentes virus.

- El mismo virus puede producir un amplio rango de sntomas, dependiendo

de la variante del propio virus, del ambiente y genotipo del hospedante.

- Otros patgenos o factores abiticos tambin producen sntomas similares.

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- La falta de sntomas no necesariamente significa que la planta no est

infectada. Puede suceder simplemente que la infeccin est latente.

1.3.2. LATENCIA, ENMASCARAMIENTO, PLANTA PORTADORA, PERIODO

DE INCUBACIN

Las infecciones causadas por algunos virus en plantas no se manifiestan como

sntomas por lo que a estos virus se les conoce como VIRUS LATENTES y la planta

que tiene al virus se le conoce con el nombre de PORTADORA; por ejemplo, Datura

stramonium (Toloache) con el Virus del Enchinamiento del Tomate. Otras plantas

manifiestan los sntomas del dao por virus pero estos desaparecen temporalmente

conocindose a este fenmeno como ENMASCARAMIENTO. Se define como

PERODO DE INCUBACIN, al tiempo que ocurre desde la inoculacin de un virushasta la aparicin de los primeros sntomas y este es muy variable; en frutales es

largo (meses) y en herbceas las lesiones locales se presentan de 2-5 das y la

infeccin sistmica de 2-3 semanas.

1.3.3. CLASIFICACIN DE SNTOMAS POR SU LOCALIZACIN

Los sntomas causados por virus fitopatgenos se pueden clasificar en: EXTERNOS

e INTERNOS.

1.3.3.1. SNTOMAS EXTERNOS

Son aquellos efectos visibles del dao causado por un patgeno sobre su

hospedante. Este tipo de sntomas son los ms importantes en la descripcin de los

virus en plantas y se clasifican en PRIMARIOS y SECUNDARIOS (por su secuencia

de infeccin) y en LOCALES y SISTEMICOS (de acuerdo al proceso infectivo).

1) Primarios.- Son las manifestaciones iniciales que presenta una planta y resultan

frecuentemente mediante inoculaciones mecnicas artificiales o en infecciones

naturales (transmisin de virus por medio de la semilla).

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2) Secundarios.- Ocurren posteriormente, y, se presentan en partes no inoculadas

de las plantas. Por ejemplo, el Virus Jaspeado del Tabaco en chile, primeramente

presenta marchitez (sntoma primario), las plantas se defolian y despus al brotar las

yemas, stas presentan sntomas de mosaico (sntoma secundario).

1.3.3.1.1. SNTOMAS LOCALES

Llamados tambin reacciones de hipersensibilidad, son aquellos que se manifiestan

en el lugar de la inoculacin. Carecen de importancia a nivel de campo (no se

presentan) pero son muy importantes a nivel experimental; las plantas que se usan

para obtener estos sntomas se les conoce con el nombre de PLANTAS

INDICADORAS y algunos ejemplos de estas son:

Nicotiana glutinosa (Tabaco) Virus del Mosaico del TabacoChenopodium amaranticolor(Chual) Virus del Mosaico de la SandaGomphrena globosa (Amaranto globoso) Virus Pinto del Tomate

1.3.3.1.2. SNTOMAS SISTMICOS

Son aquellos que se manifiestan lejos del punto de inoculacin; es decir, por toda la

planta y dentro de estos tenemos:

a) Mosaicos.- Son alternaciones de reas blancas, amarillas o verde-claro

entremezcladas con el verde normal de la hoja o fruto. Ejemplo: Virus del Mosaico

del Tabaco.

b) Moteados.- Son reas clorticas aisladas, muy pequeas y difusas. Ejemplo:

Virus Moteado Clortico del Clavel.

c) Clorosis.- Consiste en un amarillamiento de la planta, debido al decremento o

retraso de la clorofila. Puede existir en los mrgenes y se llamar clorosis marginal;

en el pice y entonces ser clorosis apical o entre las nervaduras y ser clorosis

intervenal o aclareamiento de nervaduras. Ejemplo: Virus del Enanismo Amarillo de

la Cebada, Virus Rayado Fino del Maz, etc.

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d) Virescencia (Autolisis).- Cambios de color que ocurren en las flores las cuales

adquieren una pigmentacin verde.

e) Variegacin.- Decoloracin irregularmente distribuida sobre las flores, las cuales

presentan reas clorticas o blancas. Ejemplo: Virus Variegado del tulipn.

f) Necrosis.- Implica muerte de clulas y tejidos, puede ocurrir en races, tallos,

hojas, flores y frutos. Ejemplo: Virus de la Marchitez Manchada del Tomate.

g) Manchas anulares.- Manchas que se presentan en forma de anillos. Ejemplo:

Virus de la Mancha Anular del Tabaco.

h) Tumores o agallas.- Sobrecrecimiento anormal de tejido debido al

agrandamiento de las clulas o a la multiplicacin excesiva de estas. Ejemplo: Virus

del Tumor y Heridas del Trbol.

i) Epinastia.- Prdida del ngulo normal de la hoja, en la cual el pice se dobla hacia

el envs. Ejemplo: Virus del Mosaico Comn del Frijol.

j) Escoba de bruja (Blastomania).- Proliferacin excesiva de brotes o yemas que

dan la apariencia de una escoba.

k) Filodia (Mal de agujetas).- Reduccin de la lmina foliar dando la apariencia de

nervadura principal. Ejemplo: Virus del la Mancha Anular de la Papaya.

l) Enanismo o achaparramiento.- Desarrollo reducido de la planta; es decir, sta no

alcanza la altura deseada. Ejemplo: Virus del Enanismo del Maz.

m) Enchinamiento.- Acortadura de la nervadura central, enrollndose las hojas

hacia el centro. Ejemplo. Virus del Enchinamiento del Tomate.

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Otros tipos de sntomas sistmicos que pueden provocar los virus en las plantas son:

islas verdes (zonas abolsadas de color verde intenso), deformacin de frutos,

leprosis o sarnas, brote hinchado, acortamiento de entrenudos, cambios de hbitos,

gomosis, raquitismo, rama ahulada, etc.

1.3.3.2. SNTOMAS INTERNOS

Son aquellos que se manifiestan en el interior de las plantas y pueden ser

HISTOLOGICOS Y CITOLOGICOS.

1.3.3.2.1. HISTOLGICOS

Este tipo de sntomas se manifiestan en los tejidos de las plantas. Ejemplo: el VirusTristeza de los Ctricos cuando ataca ctricos existe acumulacin de almidn entre el

patrn e injerto y para detectar la enfermedad se tiene que usar una solucin de

lugol o Ioduro de potasio. En el Virus del Enrollamiento de la Hoja de Papa hay

acumulacin de celulosa en el tejido vascular y para detectarlo se tie con resorcinol

o azul de algodn en los tubrculos.

1.3.3.2.2. CITOLGICOS

Son los sntomas que se manifiestan en las clulas de las plantas y se les conoce

con el nombre de cuerpos X o inclusiones virales; estas inclusiones fueron descritas

por Ivanowski en 1903 en clulas de plantas de tabaco infectadas con el Virus del

Mosaico del Tabaco.

Estos cuerpos o cristales se forman como producto del metabolismo anormal que

realizan las clulas infectadas y se forman por partculas de virus, substancias

producidas por estos patgenos (protenas), por organelos celulares anormales o

bien por una combinacin de todo lo anterior; su distribucin es abundante en la

epidermis de las hojas, pero tambin en tallos, races, flores y frutos. En las clulas

se localizan en el citoplasma, ncleo y nuclolo. Aunque hasta la fecha su funcin es

poco conocida se cree que forman parte de la replicacin; estas inclusiones son de

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gran importancia ya que nos ayudan a diagnosticar el origen de la enfermedad y en

la identificacin del virus.

Las inclusiones virales las podemos clasificar en AMORFAS, CRISTALINAS Y

PARACRISTALINAS. Dentro de la amorfas podemos encontrar: granulosas,

fibrosas, vacuoladas, bandeadas, laminadas y densas; dentro de las cristalinas

tenemos: hexagonales, cuadradas, rectangulares, piramidales y romboides.

1) Granulosas.- Son de formas redondas u ovaladas con la apariencia de pequeos

grnulos y de tamao variable. Ejemplo. Virus Jaspeado del Tabaco en chile.

2) Fibrosas.- Formadas por estructuras alargadas en forma de fibra. Ejemplo: Virusdel Mosaico de la Sanda.

3) Vacuoladas.- De forma redonda, con lmites bien definidos por una membrana y

con reas claras por dentro. Ejemplo: Virus del Mosaico de la Calabaza.

4) Laminadas.- Inclusiones con forma de lmina.

5) Densas.- Cuerpos densos redondos, de tamao variable. Ejemplo: Virus del

Mosaico del Pepino.

6) Paracristalinas.- Inclusiones cristalinas en forma de aguja. Ejemplo: Virus del

Mosaico del Tabaco.

1.3.4. FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA VARIACIN DE SNTOMAS

La manifestacin de los sntomas en las plantas se ve influenciada por algunos

factores dentro de los que destacan:

a) Ambiente.- Dentro de las condiciones ambientales el factor ms importante es la

temperatura ya que influye directamente en la variacin de la sintomatologa de los

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virus, por ejemplo, el Virus del Mosaico del Tabaco cuando es inoculado a plantas de

Nicotina glutinosa y la temperatura es de 18-20 C da lesiones locales muy

pequeas; si la temperatura alcanza los 25 C las lesiones son ms grandes y si se

inocula y se somete a temperaturas de 35 C se presenta un sntoma sistmico.

Otros factores ambientales que influyen son la luz (cuando el VMT se inocula y se

mantiene al hospedante en obscuridad continua no manifiesta sntomas), el mismo

virus cuando es inoculado a pepino y existe excesos de nitrgeno el virus se torna

muy agresivo.

b) Virus.- En este caso depende del tipo de virus, la virulencia y la capacidad de dar

origen a nuevas razas fisiolgicas.

c) Edad de la planta.- En forma general se puede mencionar que las plantas entre

ms jvenes son mayormente susceptibles al ataque de los virus.

d) Hospedante.- Este factor est muy relacionado con la susceptibilidad y/o

resistencia del hospedante al patgeno; es decir entre ms susceptible mayor grado

de virulencia.

1.4. FACTORES CAUSANTES DE SNTOMAS SEMEJANTES A LOS

INDUCIDOS POR VIRUS

Anormalidades genticas

Deficiencias nutrimentales

Dao por herbicidas

Dao por insectos o caros

Dao por pesticidas Otros fitopatgenos

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Los sntomas causados por estos ltimos agentes no son de naturaleza infecciosa;

es decir, que no se transmiten mediante injerto. Adems, al paso de los das la

recuperacin puede ser comn.

Agentes infecciosos tambin pueden causar sntomas similares a los ya descritos:

por ejemplo el tizn tardo llega a ser confundido con el Virus de la Marchites

Manchada, por productores y tcnicos inexpertos.

El uso de los sntomas para la diagnosis de campo es una gua valiosa pero

imprecisa, sobre todo para los tcnicos no familiarizados con las enfermedades

comunes en un cultivo en una regin determinada. An el especialista debe ser

humilde antes de poder afirmar que un virus particular est involucrado endeterminada enfermedad.

Lo anterior no significa que cada vez que detectemos sntomas presuntamente

virales, se tendr que acudir a un experto. Dependiendo de la experiencia del

investigador y de los antecedentes del problema, los diagnsticos de campo

pueden ser relativamente precisos. El patrn de dispersin de la enfermedad

puede dar indicios del virus o grupo de virus que se trate. Por ejemplo en el caso

de Geminivirus en tomate, los sntomas ms notables son de enchinamiento y

reduccin en el crecimiento; su presencia en la regin est relacionada con las

poblaciones de Mosca Blanca y generalmente al inicio de las epidemias se aprecia

un gradiente en dnde las plantas de las orillas son las primeras en ser infectadas,

especialmente si hay maleza cercana en los drenes. En base a lo anterior en

sentido estricto, solo se puede afirmar que tenemos problemas de virosis, cuyos

sntomas coinciden con los descritos para Geminivirus, pero en ningn momento

podemos decir con precisin de que Geminivirus se trata; tampoco podemos

negar que posiblemente haya plantas infectadas por otros virus.

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El apoyo del laboratorio puede ser indispensable para determinar con certeza a los

patgenos involucrados, sobre todo cuando se presentan sntomas que antes no

se haban observado en el cultivo en la regin.

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UNIDAD II. FORMA, COMPOSICIN QUMICA Y TAXONOMA DE LOS VIRUS

QUE AFECTAN PLANTAS

2.1. PRINCIPALES FORMAS DE VIRUS DE PLANTAS

Con los descubrimientos de Takahashy y Rawlins (1932), cuando por el fenmeno

de refringencia mencionaron que las partculas del Virus del Mosaico del Tabaco

(VMT) medan alrededor de 10:1 (largo y ancho) y con la primera microfotografa

tomada al microscopio electrnico por Kausche, Pfankuch y Ruska (1939) en donde

mostraron que este virus presentaba forma de varilla rgida; se iniciaron las

investigaciones para determinar la forma, tamao y composicin qumica de los virus

de plantas. Actualmente se tienen determinadas varias formas de virus fitopatgenos

dentro de las cuales tenemos:

a) Varillas rgidas, como el Virus del Mosaico del Tabaco y el Virus Cascabeleo

(Rattle) del Tabaco.

b) Varilla (filiforme) flexible, como el Virus X de la Papa, Virus de la Tristeza de los

Ctricos, Virus de la Mancha Anular de la Papaya, Virus del Mosaico de la Sanda y

Virus Jaspeado del Tabaco.

c) Baciliforme, como el Virus del Mosaico de la Alfalfa.

d) Baliforme, como el Virus del Mosaico del Maz.

e) Polidricos, como el Virus del Mosaico de la Calabaza, Mosaico del Pepino, etc.

f) Gemelos (Geminivirus), como el Virus del Mosaico Dorado del Frijol, Virus del

Mosaico Estriado del Maz y Virus del Chino Amarillo del Tomate.

2.2. TAMAO DE LOS VIRUS

Las dimensiones de los virus que afectan plantas son muy variables y su tamao se

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mide en nanmetros o milimicras.

+ Un nanmetro (=1 milimicra) = 0.000 000 001 m; o 0.000 001 mm; o 0.001 micras

El tamao de los virus isomtricos vara de 17-70 nanmetros (nm) de dimetro;

los baciliformes alcanzan 300 nm de longitud x 95 nm de ancho; los de varilla

rgida miden 114-215 nm de largos por23 nm de ancho; las dimensiones de los

virus de varilla flexible alcanzan hasta 2000 nm de longitud por 10 nm de ancho.

As, por ejemplo, el grupo del Virus del Mosaico del Tabaco (varilla rgida-

Tobamovirus) mide 18 por 300-315 milimicras de longitud; el grupo del Virus Rattle

del Tabaco (varilla rgida- Tobravirus) alcanza una longitud de 20-22 por 130-180milimicras. El grupo del Virus X de la Papa (Potexvirus) que es una varilla flexible,

mide de 13 por 480-580 nm., mientras que el Virus Tristeza de los Ctricos (Flexible-

Closterovirus) alcanza hasta 2000 nm., de longitud, siendo el virus ms grande de

los que atacan plantas. Los virus que poseen forma bacilar (Mosaico de la Alfalfa) y

bala (Marchitez Manchada del Tomate) miden alrededor de 66-227 nm., de longitud

y los polidricos miden de 18-90 nm , siendo el ms pequeo el virus satlite de la

necrosis del tabaco que mide 18 nm de largo (Smith ,1977; Lozoya, 1987 y Gibs y

Harrison, 1976).

2.3. ESTRUCTURA QUMICA DE LOS VIRUS DE PLANTAS

Con los descubrimientos de Stanley (1935), cuando aisl las partculas del Virus del

Mosaico del Tabaco y mencion que los virus estaban constituidos de protena y el

de Bawden y Pirie (1936), cuando describieron la naturaleza nucleoproteica de los

virus se lleg a la conclusin que los virus de plantas bsicamente estaban

constituidos de cido nucleico (ARN o ADN) ms una cubierta de protena. Las

partculas de los virus que atacan plantas contienen diferentes cantidades de AN,

variando de 15-45 % en virus isomtricos, de 5 a 42 % en virus helicoidales (varilla,

bala y baciliforme) y los virus que contienen lpidos en su constitucin su porciento

vara de 1 -20 %.

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La siguiente tabla nos muestra algunos ejemplos del contenido de AN y protena de

algunos virus de plantas:

VIRUS % DE AN

(Acido Nucleico)

% DE PROTENA

Virus Mosaico del Tabaco 5 95Virus X de la Papa 6 94Virus Mosaico de la Alfalfa 20 80Virus Mosaico de la Calabaza 35 65Virus Mancha Anular del Tabaco 22 58Viroides 100 0

Las partculas de la mayora de los virus que atacan plantas contienen una cadena

simple (sencilla) de ARN, pero el Virus del Tumor y Heridas del Trbol y el Virus del

Enanismo del Arroz contienen doble cadena de ARN; el Virus del Mosaico de laColiflor posee doble cadena pero de ADN y el Virus del Mosaico Estriado del Maz

contiene una cadena simple de ADN en su composicin.

Otros virus adems de poseer protena contienen lpidos como es el caso del Virus

de la Marchitez Manchada del Tomate, Virus del Mosaico del Maz y el Virus del

Enanismo Amarillo de la Papa.

2.4. COMPOSICIN Y FUNCIONES DEL CIDO NUCLEICO VIRAL

El AN viral est formado por la unin de nucletidos; cada nucletido del AN viral

est formado por dos purinas (adenina y guanina) y tres pirimidinas (citosina, uracilo

y timina), los cuales para poder unirse requieren de un glcido (azcar) y un puente

de fosfato. Cada nucletido del ARN viral est conformado por adenina, guanina,

citosina y uracilo y el del ADN por adenina, guanina, citosina y timina; por lo tanto,

las diferencias bsicas entre los dos cidos es que el ARN tiene la base de uracilo

(ribosa) y el ADN tiene la base de timina (desoxiribosa) y el ARN tiene un oxidriloms que el ADN.

Como ya se mencion, el cido nucleico es el resultado de la unin lineal de una

gran cantidad de nucletidos y la secuencia de stos determina la estructura del

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citrn y cada citrn se le llama codons y est compuesto por tres nucletidos; de tal

forma que una cadena de ARN (como el caso del VMT) posee 6500 nucletidos

distribuidas de la siguiente manera: 1900 molculas de adenina, 1680 de guanina,

1180 de citosina y 1740 de uracilo para un total de 6500 nucletidos.

El AN viral tiene como funcin especfica el de dar arreglo a las subunidades de la

protena del virus y la ms importante, que es causar infeccin en la planta. Los

experimentos de Gierer y Schramm (1956), y de Conrad y Williams (1957)

demostraron que el AN del Virus del Mosaico del Tabaco es suficiente para causar

infeccin en plantas, por lo que se ha concluido que es el cido el que contiene la

informacin gentica del virus. La evidencia de que el AN viral es el encargado de la

infeccin en plantas se basa en las siguientes evidencias:

A) Al Hidrolizar la enzima ribonucleasa y desoxiribonucleasa se pierde la infectividad;

B) El antisuero que reacciona con la protena no destruye su infectividad y C) Al

inocular por separado el AN viral y la protena; solo se observaron sntomas donde

se inocul el cido.

En algunos virus el AN viral est seccionado o divido en partes por lo que ha estos

virus se les conoce como virus multiparticulados; por ejemplo, el Virus del Mosaico

de la Alfalfa tiene divido su AN en cuatro partculas y para poder causar infeccin

requiere que estn presentes las cuatro partculas; a cada una de las partculas

virales que estn seccionadas se les conoce con el nombre de Virin. Otro virus que

tiene seccionado su AN es el Virus del Mosaico del Chcharo de Vaca y la que

codifica la infeccin es la partcula del medio; el Virus Cascabeleo del Tabaco est

dividido en dos partculas y si slo se inocula una se codifica la informacin para la

reproduccin de sntomas y no para la formacin de protena por lo que se deben de

inocular ambas.

2.5. COMPOSICIN Y FUNCIONES DE LA PROTENA VIRAL

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La estructura de los virus es la protena y es la que forma el cuerpo del virus. La

protena viral est formada por subunidades de protena llamadas capsmeros, los

cuales al unirse y arreglarse conforman lo que se conoce con el nombre de cpside

o protena viral; tan pronto como un AN viroso se produce, induce a las clulas del

husped a producir las molculas de protena que debern formar la cubierta

proteica de dicho virus. La sntesis de protena en las clulas depende de la

presencia de aminocidos, la cooperacin de los ribosomas y de los ARN de

transferencia y los ARN mensajeros. El ARN mensajero que se produce refleja parte

de la clave que determina la clase de protena que deber producirse por

codificacin y la secuencia en la cual los aminocidos debern de arreglarse y la

protena formada es para uso exclusivo del virus que form dicha cubierta.

La protena viral est compuesta de alrededor de 20 aminocidos diferentes,

conteniendo en mayores proporciones la serina y trionina; el tipo y arreglo de estos

aminocidos es regido por el AN viral. Algunos virus de plantas tienen composicin

compleja, ya que adems de poseer aminocidos la protena contiene algunas

substancias polippticas, por ejemplo, el Virus del Enanismo Amarillo de la Papa

contiene cuatro diferentes tipos de polipptidos y los virus que contienen lpidos se

les ha encontrado glucsidos. Las funciones de la protena viral son bsicamente el

dar forma al virus, proteger al AN de factores externos y juega un papel muy

importante en la transmisin de virus por pulgones.

2.6. REPLICACIN DE VIRUS

La infeccin de una planta por un virus esta en relacin directa con la sntesis del

mismo, puesto que la infeccin no ocurrir a menos de que el virus se multiplique en

el tejido del husped susceptible. Los virus y viroides estn constituidos de

molculas reguladoras; es decir, el cido nucleico viral ordena a la planta que realice

funciones para su beneficio, y dentro de las funciones bsicas ordenadas esta la

patogenicidad y la replicacin de ste.

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El proceso de replicacin de los virus es un tanto complejo pero en forma general lo

podemos dividir en las siguientes etapas: a) Adsorcin y penetracin; b) Liberacin

del AN; c) Replicacin del AN; d) Sntesis temprana de protena; e) Sntesis tarda de

protena y f) Ensamblaje.

Las partculas virales no tienen capacidad de penetrar a las clulas autnomamente

(por s solas) o por aberturas naturales como lo hacen los hongos y las bacterias.

Los virus que afectan a los vegetales entran a las clulas a travs de heridas hechas

mecnicamente, por vectores o por la fecundacin de un vulo por el grano del polen

infectado. Una vez dentro el siguiente contacto del virus es con el citoplasma de la

clula en donde existen ciertos sitios de infeccin que son saturados con partculas

virales; se da una asociacin electrosttica entre el virus y el citoplasma y de estamanera queda inmerso en dicho citoplasma. Puesto que la parte activa del virus, que

es el cido nucleico est cubierto de protena, deber liberarse de la vaina proteica

para establecer la infeccin. La liberacin del AN tiene lugar durante las primeras

horas siguientes a la inoculacin, ocurriendo los pasos siguientes en forma

ordenada, y probablemente esto se concluya ms bien por la clula husped que por

el virus, puesto que ningn virus de planta contiene o produce por si mismo alguna

enzima. Los fragmentos de la cubierta proteica degradada permanecen en la clula y

son utilizados en los procesos sintticos de la misma. Una vez que el AN se libera de

la protena, este acta como ARN mensajero y se asocia con los ribosomas

celulares (esta fase se conoce como fase de eclipse o polisoma) para sintetizar una

protena funcional conocida con el nombre de enzima replicasa la cual tiene un peso

aproximado de 130,000 a 165,000 daltons; la enzima replicasa se asocia con el virus

y forman los moldes de AN los cuales son negativos debido a que sus bases de

adenina, guanina, citosina y uracilo estn cambiadas y son ledas como una imagen

del virus vista a un espejo, la cual a medida que se va formando, se conecta

temporalmente a la cadena virosa progenitora, a los ribosomas y a la enzima

replicasa para convertirse en AN positivos y por tanto infectivos. La enzima replicasa

tambin tiene como funcin formar protena de encapsulamiento o protena

temprana. Una vez que los ARN son infectivos pueden tomar dos caminos: a) volver

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a entrar a los ribosomas celulares (aparentemente estos ARN son de bajo peso

molecular) y formar otra vez moldes y seguir el mismo proceso anterior y formar otra

vez protena (la cual se llamar sntesis tarda de protena) o b) darse el ensamblaje

con la protena formada tempranamente, estos es, el ARN organiza las subunidades

de protena alrededor de l y al unirse forman la partcula completa.

El los sitios de la clula en los cuales el ARN del virus y de la protena se sintetizan

y los sitios en los cuales estos componentes se unen para producir los viriones

todava no se ha determinado con absoluta certeza pero los estudios efectuados con

el VMT sugieren que el ARN viroso, despus que est libre de su cubierta proteica

se mueve a los ncleos o posiblemente a los nuclolos, en donde se duplica. El

primer virin intacto aparece en las clulas de las plantas 10 horas despus de lainoculacin. Las partculas virosas pueden existir solas o en grupos formando las

inclusiones virales.

2.7. TRANSLOCACIN DE LOS VIRUS DE PLANTAS

Despus de la introduccin de un virus en la clula, el virus aparentemente se

mueve, antes y despus de desprenderse de su cubierta proteica, hacia los sitios de

sntesis y ensamblaje de sus componentes. El movimiento probablemente es pasivo

y depende de la corriente protoplasmtica de la clula, pero otros mecanismos

tambin pueden estar implicados.

Para que un virus realice la infeccin en una planta el virus deber moverse de una

clula a otra, y multiplicarse en la mayora de ellas o al menos en las clulas en las

que se mueve. Se cree que los virus en sus movimientos de clula a clula, siguen

un camino a travs de las conexiones plasmodesmatales de las clulas adyacentes

y se cree tambin que el retculo endoplsmico puede conectar una clula a otra. Sin

embargo, es posible que los virus no se muevan a travs de la clula del parnquima

a menos que los virus infecten las clulas y se multipliquen en ellas, esto ocasiona

una invasin continua y directa de clula a clula.

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Se considera que el radio de dispersin de los virus de clula a clula vara de

acuerdo con la clase y edad de las clulas de las plantas infectadas y es mayor en

las clulas alargadas y jvenes que en las viejas y redondas. Otras formas de

movimiento de los virus en plantas ocurren a travs de los tejidos vasculares (floema

y xilema).

El transporte de los virus por el floema ocurre aparentemente, a travs de los tubos

cribosos, pudindose mover hasta 15 cm en solo seis minutos. En forma general se

puede indicar que los virus que ocasionan sntomas de lesiones locales o de

hipersensibilidad su movimiento lo realizan a travs de las conexiones

plasmodesmales que existen entre clula y clula y los virus que provocan sntomas

sistmicos lo realizan por medio de los tejidos vasculares.

2.8. NOMENCLATURA

A travs del tiempo se han seguido varios sistemas de nomenclatura de virus

incluyendo el uso de sistemas binomiales, el cual se encuentra solamente en la

literatura antigua. Actualmente el nombre particular de cada virus se adopta en

base a los sntomas los ms caractersticos de la enfermedad (a juicio del

descubridor del patgeno), en hospedante en el que se observ por vez primera al

virus. As por ejemplo, el Virus Mosaico del Pepino lleva este nombre porque fue

descubierto en pepino y uno de los sntomas principales es el mosaico.

En virologa es comn el uso de siglas para designar de manera abreviada a los

virus, lo cual resulta prctico. As se utiliza VMP para el Virus Mosaico del Pepino,

VMT para el Virus Mosaico del Tabaco o VMAT para el Virus Mancha Anular del

Tabaco. Es necesario aclarar que estas abreviaturas se usan de manera uniforme

por la mayora de los investigadores, con el fin de facilitar la comunicacin oral o

escrita.

Es pertinente sealar que en el idioma ingls tambin se usan abreviaturas,

aunque estas no sean las mismas que en espaol; en lugar del VMP se usa CMV

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(Cucumber Mosaic Virus) y en lugar del VMT la abreviatura es TMV (Tobaco

Mosaic Virus). En esta poca de globalizacin es muy comn el uso de las siglas

en ingls para referirse a los virus y algunos investigadores latinos hasta se

olvidaron de las siglas en espaol, para referirse a tal o cual virus; por ejemplo

todo mundo habla de TSWV (Tomato Spotted Wilt Virus), en lugar de VMMT para

referirse al Virus de la Marchitez Manchada del Tomate. Este fenmeno no es

deseable desde el punto de vista idiomtico o nacionalista, pero que a veces

facilita la comunicacin.

Resulta evidente que el sistema de nomenclatura en uso resulta inapropiado, ya

que los sntomas pueden variar incluso en el mismo hospedante y con el mismo

virus. Los sntomas tambin pueden ser diferentes de acuerdo a la variante delvirus y por el efecto del ambiente. Sin embargo el uso del sistema binomial, tan til

en hongos y bacterias, no es aceptado por los virlogos, entre otras razones

porque no se acepta que los virus son seres vivos, en sentido estricto.

2.9. POSICIN TAXONMICA DE LOS VIRUS QUE AFECTAN PLANTAS

La mayora de los virus que afectan plantas fueron primeramente reconocidos por

los daos que estos causaban en ellas, y usualmente fueron nombradas usando el

nombre de la enfermedad y del hospedante que afectaban. Por ejemplo, un virus

que causaba mosaico y se le encontraba afectando plantas de tabaco se le deno-

minaba Virus Mosaico del Tabaco. En 1939 se reportaron los primeros acuerdos del

Comit para la Nomenclatura de virus designado por la Sociedad Norteamericana de

Fitopatologa, donde se seleccionaron cinco caractersticas importantes de los virus

para su clasificacin: 1) Sntomas; 2) alteraciones citolgicas y morfolgicas; 3)

transmisin por insectos; 4) relaciones serolgicas y 5) propiedades fsicas y

qumicas de los virus. Considerando que se desconoca la naturaleza del agente

causal, se propusieron tres alternativas de nomenclatura: a) Si el virus era un

organismo se le hara un binomio, por ejemplo, el Virus Mosaico del Tabaco se

llamara Paracrystalis altathermus; b) si resultaban ser compuestos qumicos se

debera agregar el sufijo "vir". As nuestro ejemplo sera, P. altathermovir y c) no

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tomar en cuenta la naturaleza del agente y en este caso se llamara al VMT

Nicotiana virus altahermus. Como es costumbre, tan pronto como se public esta

propuesta surgieron crticos, adeptos y modificadores.

Tambin en 1939 Holmes propone la creacin de reino Vira, con dos divisiones,

Phytophagi y Zoophagi, para virus de plantas y animales respectivamente, utilizando

el sistema binomial de nomenclatura. En 1940, Fawcett sugiere un sistema que

combina a los anteriores, iniciando una dcada de propuestas de diversos autores

que no fueron del todo aceptadas.

En 1950 se inicia una nueva era en la taxonoma de virus al crearse un subcomit

ex-profeso durante el Congreso Internacional de Microbiologa. Este grupo admiteque en virus no se puede usar la misma nomenclatura cientfica tradicionalmente

empleada para bacterias u otros microorganismos. Recomienda basarse en

aspectos morfolgicos, fsicos y qumicos de las partculas, y en composicin

antignica, en vez de amplitud de hospedantes y sntomas. A partir de entonces

surgen propuestas que incluyen la naturaleza del cido nucleico, la forma y tamao

del nucleocpsido, nmero de capsmeros, etc., con Gibbs et al., en 1966 nace el

criptograma, que tambin se ha perfeccionado con aportaciones posteriores.

La criptograma que es usada actualmente para nombrar virus y que es aceptada por

el Comit Internacional de Nomenclatura de virus es la siguiente (VMT):

R/1:2/5:E/E:S/0

En el criptograma anterior el significado de cada componente es:

R/1= La R significa que el virus est compuesto por ARM; el nmero 1 indica que

la cadena del ARN es de una sola banda.

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2/5= El 2 representa el peso molecular del cido nucleico, expresado en millones.

El 5 representa la proporcin (%) de ARN que posee la partcula.

E/E= Se representa aqu la forma de la partcula que recubre al ARN.

E= Virus alargados con lados paralelos pero no redondeados (varilla rgida y

varilla flexible).

S= Virus esfricos (polidricos).

U= Virus alargados con lados redondeados (baliforme y baciliforme).

X= Virus de naturaleza compleja

S/O= Describe el tipo de hospedante (en este caso plantas de semilla oangiosperma). El 0 (cero) indica el tipo de vector que en este caso no existe).

S/0= Clase de hospedante / tipo de vector

1) HOSPEDANTE

A= Parsito de algas

B= Parsito de bacterias

F= Parsito de hongos

I= Parsito de invertebrados

P= Parsito de Pteridofitas

S= Parsito de plantas

M= Micoplasmas

V= Vertebrados

2) VECTOR

Ac= caros y araas

Al= Aleyrodidae (moscas blancas)

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Ap= Aphididae (pulgones)

Au= Auchenorrhyncha (chicharritas)

Cc= Coccidae (escamas)

Cl= Coleptera (escarabajos)

Di= Dptera (moscas y mosquitos)

Fu= Hongos

Gy= Gymnocerata (tingidae)

Ne= Nematodos

Ps= Psyllidae

Si= Siphonaptera

Th= Trips

0= Sin vectorVe= Vector ninguno de los mencionados

2.9.1. GRUPOS DE IMPORTANCIA DE VIRUS FITOPATGENOS

A continuacin se mencionan 10 de los 28 grupos de virus aceptados actualmente

con algunas de sus caractersticas ms sobresalientes:

1) Tobravirus = R/1:2.3/5 + 0.6-1.3/5:E/E:S/Ne

El miembro tipo de este grupo es el Virus Rattle del Tabaco o Cascabeleo del

Tabaco y los miembros se caracterizan por poseer forma de varilla rgida con una

longitud de 180-210 nm y 45-115 nm de ancho, son transmitidos por nematodos de

la familia Trichodoridae; su punto de inactivacin trmica (PIT) es de 70 - 80 C, su

punto final de dilucin (PFD) de 10-6 y la longevidad in vitro de seis semanas.

Muchas razas de este grupo de virus se transmiten muy fcilmente mecnicamente

y tienen un amplio rango de hospedantes. Tiene un solo miembro que es el Virus del

Obscurecimiento Temprano del Chcharo.

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2) Tobamovirus = R/1:2/5:E/E:S/O

El miembro tipo del grupo es el Virus Mosaico del Tabaco, poseen forma de varilla

rgida y la partcula mide alrededor de 300 nm de longitud, se transmite muy fcil

mecnicamente pero no por insectos, el PIT es de 90 C, su PFD es mayor a 10 -6 y

la longevidad in vitro es por varios aos. Otros virus de este grupo son: el Virus

Mosaico del Tomate y Virus de la Mancha Anular del Odontoglussum.

3) Potexvirus = R/1: 3.5/5:E/E:S/Ap

Este grupo incluye al Virus X de la Papa como su miembro tipo y las caractersticas

ms sobresalientes es que sus partculas son de forma de varilla flexible y miden de480- 580 nm de longitud, se transmiten mecnicamente, normalmente no se

transmiten por vectores; sin embargo, para PVX se reportan chapulines y al hongo

Synchytrium endobioticum, ocasionan generalmente sntomas de mosaico y su PIT

flucta entre 60-80 C, su PFD es de 10-5 a 10-6 y la longevidad in vitro es de meses.

Algunos miembros de este grupo son: Virus Mosaico de la Papaya y Virus Mosaico

de la Yuca.

4) Potyvirus = R/1:3.5/5:E/E:S/Ap

El nombre de este grupo se deriva de su miembro tipo, Virus Y de la Papa (PYV), el

cual ataca a papa y a otras solanceas. Estos virus tienen partculas flexibles que

miden entre 720-800 nm de longitud; pueden ser transmitidos experimentalmente por

medio de savia (mecnica), y en el campo sus principales vectores son los fidos,

los cuales lo transmiten de manera no persistente; el PIT es de 50-60 C, su PFD

est entre 10-2 - 10-3 y la longevidad in vitro es de 48-72 horas. Algunos miembros de

este grupo son el Virus Mosaico Comn del Frijol, Mosaico Amarillo del Frijol, Virus

Mancha Anular de la Papaya, Mosaico de la Soya, Virus Mosaico de la Sanda,

Mosaico de la Caa de Azcar, etc.

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5) Cucumovirus = R/1:1.3/19+1.1/19 + 0.8/19 S/S:S/Ap

El Virus Mosaico del Pepino (CMV) es el miembro tipo de este grupo; aunque los

virus que pertenecen a este grupo tienen caractersticas en comn, pueden diferir

con respecto a la especificidad del hospedante y a la reaccin serolgica. Estos virus

poseen partculas polidricas que miden alrededor de 30 nm de longitud; el PIT es

de 60-70 C, el PFD es de 10-4 y fuera del hospedante dura alrededor de 3-6 das;

se transmiten muy fcilmente mecnicamente y los sntomas generalmente causan

mosaicos y algunas veces necrosis. Otros virus importantes de este grupo son el

Mosaico Amarillo del Pepino, Aspermy del Tomate y Virus del Enanismo del

Cacahuate.

6) Nepovirus = R/1:2.4/43+1.4-2.1/30+2.8/46:S/S:S/C,Ne

En este grupo se encuentran los virus cuyos vectores son principalmente nematodos

de los gneros Xiphinema y Longidorus, sus partculas son polidricas y miden 30

nm de dimetro. Son transmitidos mecnicamente, por semilla y polen, y los

sntomas principales son manchas anulares, moteados y necrosis; su PIT es de 55-

70

C, el PFD de 10-4 y la longevidad in vitro es de una a tres semanas. El miembrotipo de este grupo es el Virus Mancha Anular del Tabaco y tambin se encuentra el

Virus Mancha Anular del Tomate, el Enrollamiento de la Hoja de Papa, Hoja de

Abanico de la Vid, etc.

7) Sobemovirus = R/1:1.4/21:S/S:S/Ve,Cl

El miembro tipo de este grupo es el Virus Mosaico Sureo del Frijol (SBMV) y los

miembros se caracterizan por poseer forma polidrica con partculas que varan de

28-30 nm de dimetro, se transmiten por jugos de savia, semilla y en el campo

generalmente son diseminados por colepteros; su PIT es de 90-95 C, su PFD es

de 10-5 y fuera del hospedante dura entre 20 y 165 das; se relaciona con el Virus

Estriado Temporal de la Alfalfa.

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8) Necrovirus = R/1:1.5/19:S/S:S/Fu

El miembro tipo de este grupo es el Virus de la Necrosis del Tabaco, el cual

normalmente causa necrosis en las races de sus hospedantes; las partculas son

polidricas de 26 nm de dimetro, su PIT es de 65-95 C, se desconoce su punto

final de dilucin y la longevidad in vitro es de ms de 30 das, en campo es

diseminado por las zoosporas de Olpidium brassicae.

9) Tospovirus= R/1:7.4/2:S/S:S/Th

El nico miembro de este grupo es el Virus Marchitez Manchada del Tomate y se

caracteriza porque sus partculas son isomtricas de 70-90 nm de dimetro; su PIT

es de 40-46 C, su PFD es de 10-2-3 y la longevidad in vitro es muy corta (2-5 horas).

Se transmite mecnicamente y por Trips y causa mosaico y necrosis en sus

hospedantes atacados.

10) Grupo del Mosaico de la Alfalfa = R/1:1.1/16+0.8/16:U/U:S/Ap

El miembro nico de este grupo es el Virus Mosaico de la Alfalfa el cual posee cuatropartculas baciliformes que miden de 18-58 nm de dimetro, se transmite muy

fcilmente mecnicamente, por pulgones y los sntomas que normalmente causa a

sus hospedantes son mosaicos y manchas anulares. Su PIT es de 60-70 C, su PFD

es de 10-5 y la longevidad in vitro es de 2-4 das; se le encuentra muy relacionado

con el grupo de los CUCUMOVIRUS.

Cuadro. Algunos ejemplos de virus importantes en Mxico.

Grupo VirusLuteovirus Enrollamiento de la Hoja de la PapaNepovirus Mancha Anular del TabacoSobemovirus Mosaico Sureo del FrijolMosaico de la alfalfa Mosaico de la AlfalfaCucumovirus Mosaico del PepinoTobamovirus Mosaico del Tabaco, Mosaico del TomatePotexvirus X de la papa

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Potyvirus Y de la papa, Mosaico Comn del Frijol, Mancha Anular de

la Papaya, Mosaico de la Sanda, Jaspeado del TabacoClosterovirus Tristeza de los CtricosTospovirus Marchitez Manchada del TomateGeminivirus Chino del Tomate, Mosaico Dorado del Frjol, Enrollamiento

de la Hoja de la Calabaza.

UNIDAD III. FORMAS DE TRANSMISIN E IDENTIFICACIN DE LOS VIRUS

DE PLANTAS

3.1. CONCEPTO DE TRANSMISIN DE VIRUS

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La propiedad de transmitirse de una planta enferma a una sana es una caracterstica

fundamental de los virus al igual que otros agentes biolgicos que causan

enfermedades. Los virus a diferencia de hongos y bacterias no tienen la capacidad

de diseminarse por el viento o agua porque fuera de las clulas se inactivan con

rapidez, adems, no pueden penetrar a la planta por sus propios medios y requieren

que se les deposite directamente dentro de una clula.

Dada su condicin como parsitos obligados los virus no se pueden desarrollar en

materia orgnica muerta; requieren del albergue en tejido vivo, ya sea en estado

de reposo o de multiplicacin activa. El Virus Mosaico del Tabaco (VMT)

constituye una de las pocas excepciones, ya que puede sobrevivir en restos de

tejidos infectados que quedan en el campo despus de la cosecha, de tal maneraque estos materiales sirven como fuente de inculo primario en el siguiente ciclo.

Los virus requieren pasar constantemente de un hospedante infectado a otro

sano, para poder sobrevivir en cualquier regin.

Los virus no penetran a las plantas de manera directa, ni salen de estas por sus

propios medios. La dispersin no es activa; es pasiva y se da mediante los

siguientes mecanismos:

3.2. TIPOS DE TRANSMISIN DE VIRUS

Las formas en que los virus son transmitidos de plantas enfermas a plantas sanas

son a) Propagacin vegetativa; b) mecnicamente; c) semilla; d) polen y e)

biotransmisores.

3.2.1. TRANSMISIN POR PROPAGACIN VEGETATIVA

Siempre que las plantas se propaguen vegetativamente mediante injerto, esquejes,

tubrculos, bulbos o rizomas, cualquier tipo de virus que se encuentre en la planta

madre, a partir de la cual dichos rganos de propagacin se obtienen casi siempre

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sern transmitidos a la progenie. Tomando en cuenta que casi todas las frutas y la

mayora de los rboles de ornato, y los cultivos como papa se propagan mediante

estos medios, este tipo de transmisin adquiere importancia significativa.

3.2.2. TRANSMISIN MECNICA

Todos los virus pueden ser transmitidos a algunas plantas mediante inoculacin

mecnica, pero no todas pueden infectar y establecer infeccin. En teora las part-

culas virales pueden ser introducidas a clulas vivas por este mtodo, pero para que

el virus llegue a ser funcional depende de una gran variedad de condiciones como: el

grado de susceptibilidad de la clula receptora, funcionamiento del genoma viral

dentro de la clula, condiciones necesarias para la maduracin del virus, factores

ambientales, etc. La TRANSMISIN MECNICA es definida como el proceso por elcual las partculas de virus son manualmente introducidas a una planta por heridas

mecnicas, para facilitar la iniciacin de la infeccin en clulas potencialmente

infectables.

La transmisin mecnica puede ocurrir de manera natural (campo) y de forma

artificial (laboratorio); en campo, dicha transmisin puede efectuarse entre plantas

bastantes prximas al rosarse con el viento, cuando las plantas son daadas por el

hombre en las labores de cultivo, por medio de fumadores (como el caso del VMT),

etc.

La transmisin mecnica artificial es de gran importancia a nivel experimental y se

puede realizar de diferentes formas: frotis; injerto e inyecciones.

3.2.2.1. TCNICA DE FROTIS

Es la tcnica ms usada artificialmente ya que presenta varias ventajas entre las que

destacan de que es muy rpida y segura, facilita el estudio de los virus en ausencia

de vectores, facilita el estudio de los virus "in vitro", se pueden separar virus

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mediante inoculaciones mecnicas por frotis y nos da pauta para realizar estudios

sobre el nmero de lesiones locales que se obtienen con inoculaciones mecnicas

(Holmes, 1929; demostr que el nmero de lesiones locales era proporcional a la

concentracin del inculo en ciertas especies de tabaco inoculadas con VMT). La

tcnica de transmisin por este medio es muy simple y la metodologa bsica es la

siguiente:

a) Tomar aproximadamente dos centmetros cuadrados (preferentemente hojas),

con los sntomas bien marcados.

b) Macerar en un mortero el tejido de la planta enferma y agregar solucin buffer con

un PH de 7.0 a 8.5.

c) Adicionar carborundum de 400 o 600 mallas por pulgada cuadrada sobre las hojasque se van a inocular.

d) Con un cotonete impregnado con savia infectiva se talla suavemente donde se

aplic el carborundum y lavar con agua corriente para eliminar el exceso de este

material.

e) Colocar la planta inoculada en un lugar fresco y fuera del alcance de los insectos

vectores para evitar traslape de resultados.

Otros detalles de la transmisin mecnica.

1) Preferible inocular hojas cotiledonales

2) En plantas grandes inocular las hojas medias a jvenes

3) Gramneas deben inocularse por el envs de las hojas

4) Cucurbitceas inocularse preferentemente en hojas cotiledonales.

5) Macerar e inocular preferentemente a bajas temperaturas

6) Lavar la hoja inoculada inmediatamente despus de la inoculacin.

7) Las lesiones locales tienen menor concentracin que la superficie verde.

8) Inocular de preferencia por la maana o por la tarde.

3.2.2.1.1. FACTORES QUE INTERVIENEN EN UNA TRANSMISIN POR

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FROTIS

La eficiencia de la transmisin por frotis depende de varios factores como: FUENTE

DE INOCULO, PREPARACIN DEL INOCULO, APLICACION DEL INOCULO,

CONSTITUYENTES DEL INOCULO Y FACTORES AMBIENTALES.

FUENTE DE INCULO.- El inculo puede ser obtenido de varias partes de la planta

infectada, pero si las hojas muestran sntomas se deben de probar primero, ya que

los tejidos leosos usualmente son ms pobres en partculas virales que las hojas.

En hojas lo ms conveniente es usar la tiernas donde los sntomas estn ms

acentuados, en hojas viejas, la concentracin de virus es menor.

PREPARACIN DEL INCULO.- Los tejidos infectados pueden contenernumerosas partculas de virus infecciosos, pero la infectividad depender de varias

condiciones y tcnicas que pueden ser empleadas en la fase de la preparacin del

inculo, que es por tanto, un factor muy importante que puede influenciar la

efectividad del inculo. El inculo es preparado por extracto de virus de tejido

enfermo, por unos momentos el virus est expuesto al medio ambiente el cual puede

reducir su infectividad. Varias sustancias tales como metabolitos de la hospedera y

escombros celulares son liberados simultneamente con el virus; algunos de estos

componentes celulares producen substancias inhibitorias por lo que es necesario

agregar un solvente apropiado como antiinhibidor. Generalmente, al momento de la

preparacin del inculo se utiliza una solucin de fosfatos monobsicos y dibsico de

potasio (solucin buffer) con PH 7.0-8.5 ya que esta solucin ayuda a mantener la

configuracin del virus y aumenta la eficiencia de la infeccin ya que diluyen

inhibidores.

APLICACIN DEL INCULO.- En este caso es muy recomendable que la planta

que se va a inocular sea previamente herida con abrasivos, pudindose usarse

carborundum de 400 600 mallas por pulgada cuadrada, celite, arena, carbn

molido, caoln, etc., es importante evitar los excesos de abrasivo ya que causan

daos muy fuertes a las plantas que pudieran confundirse a los causados por virus,

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tambin es necesario tallar muy suavemente la parte inoculada pudindose hacer

con los dedos, cotonetes (mas usado), manta de cielo, esptulas de vidrio, etc., y

posteriormente lavarse con agua corriente para eliminar los excesos de abrasivo.

CONSTITUYENTES DEL INCULO.- Como se mencion anteriormente, varios

componentes (INHIBIDORES) que resultan al momento de la maceracin, afectan la

infectividad de los virus. Los inhibidores son de distinta naturaleza pudiendo

encontrar a los taninos (los cuales actan sobre la protena y provocan precipitacin

de virus) y polifenoles oxidativos (oxidasas). Para contrarrestar el efecto de estos

componentes se usan los ANTIINHIBIDORES (sustancias que contrarrestan el

efecto de los inhibidores), pudiendo usar nicotina y cafena (para taninos) y para los

polifenoles usar cianamida, cido saliclico, hidroxilamina, cido tioglicolico y cidoascrbico.

FACTORES AMBIENTALES.- Los factores ambientales juegan un papel muy

importante en la transmisin mecnica por frotis en virologa; la luz, temperatura,

nutricin y humedad son los factores ms importantes:

a) Luz.- Se ha observado que cuando la planta que es inoculada se le somete a

perodos de oscuridad continua, tres das antes se favorece la infeccin; tambin

cuando se inocula y despus se expone a altas luminosidades se aumenta la

eficiencia de la transmisin.

b) Temperatura.- Se ha determinado que cuando se inocula a altas temperaturas

(>36 C), existe una marcada tendencia a no presentarse la infeccin; esto mismo

sucede cuando las temperaturas son menores de 12 C. La ptima para inocular es

de 18-25 C.

c) Nutricin.- Se ha comprobado que es mejor inocular plantas con una nutricin

ptima o en ocasiones con ligeros excesos de nitrgeno.

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d) Humedad.- La infeccin aumenta con los excesos de agua.

3.2.2.2. TCNICA DE INJERTO

Este mtodo fue usado desde el siglo XVIII para la obtencin de plantas de tulipn

que producan flores variegadas. Desde el siglo XX, el injerto se convirti en una

tcnica muy til para el estudio de los virus y fue la base para determinar la

naturaleza infecciosa de varias enfermedades.

El injerto es muy utilizado en virus que no se transmiten mecnicamente, pero hay

que tener mucho cuidado ya que por esta tcnica tambin se transmiten otros

agentes fitopatgenos. El injerto se puede realizar en plantas de diferentes especies

y de diferentes gneros; cuando se usa esta tcnica en plantas diferentes existemenor posibilidad de que el injerto prenda pero, en este caso, lo nico que se

persigue en virus es poner en contacto los tejidos vasculares de la planta enferma

con los tejidos de la planta sana.

La metodologa usada es muy sencilla, se toma una planta que se utiliza como

patrn, a la cual se le hace un corte en el tallo tratando de que llegue a los tejidos

vasculares, se utiliza una hoja o una pequea rama de la planta enferma y con una

navaja de rasurar se le quita la epidermis con el fin de dejar los haces vasculares

descubiertos, posteriormente se introduce en el cuerpo del patrn, teniendo cuidado

que los haces vasculares se pongan en contacto, para la transmisin del virus, luego

se sella con Parafilm o polietileno y la planta se coloca en un lugar fresco, para

esperar la aparicin de sntomas.

Las condiciones que se deben de tomar en cuenta para el xito del injerto son las

siguientes:

1.- El corte debe de ser lo ms uniforme posible para que se establezca la unin

entre el patrn y el injerto.

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2.-Tratar de que la superficie de contacto entre patrn e injerto sea lo ms grande

posible.

3.- Evitar la deshidratacin de los tejidos una vez que se haya realizado el injerto;

esto se puede lograr colocando la planta en una cmara hmeda y si no se tiene,

colocar una bolsa de polietileno hmeda.

3.2.2.3. TCNICA DE INYECCIN

Esta tcnica fue una de las que se utilizaron por primera vez para la transmisin de

virus en plantas; en la actualidad solo se utiliza para transmitir algunos virus que no

se transmiten por frotis como por ejemplo, el Virus Curly Top de la Remolacha.

3.2.3. TRANSMISIN POR SEMILLA

Cuando un virus infecta a una planta, invaden todos los tejidos y llegan hasta la

semilla. La evidencia ms concluyente de que los virus se transmitan por medio de

la semilla fue la presentada por Reddick y Stewart en 1919, cuando demostraron que

las semillas de frjol infectadas con el Virus Mosaico Comn del Frjol producan

plantas infectadas desde un 10-90 %. Doolittle y Gilbert (1919), tambin demostraron

que el Virus Mosaico del Pepino se transmita por este medio en pepinillo. En la

actualidad alrededor del 20 % de los virus de plantas conocidos se transmiten a

travs de la semilla. La transmisin de virus por este medio ocurre cuando: el

hospedante es infectado sistmicamente en la floracin, cuando el virus es capaz de

invadir el polen y el vulo, cuando es capaz de sobrevivir en la gameta, cuando

sobrevive a la deshidratacin de la semilla y al almacenamiento y cuando no es

inactivado durante el desarrollo de la semilla.

3.2.3.1. IMPORTANCIA DE LA TRANSMISIN POR SEMILLA DE VIRUS EN

PLANTAS

La transmisin por semilla constituye uno de los factores ms importantes en el

desarrollo epidmico de algunos virus. Las semillas infectadas dan origen a

plntulas que representan una fuente de inculo inicial temprana, que adems se

halla uniformemente distribuido. Las plntulas infectadas constituyen reservorios a

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partir de los cuales ocurre la dispersin secundaria del virus, lo cual sucede por

transmisin mecnica o mediante vectores.

La gran mayora de los virus que se transmiten por semilla, persisten en el embrin;

el porcentaje de transmisin depende de la raza del virus, el hospedante, las

condiciones ambientales, entre otros factores, y su "longevidad" depende del

hospedante, inculo, condiciones de almacenamiento y el perodo de almacenaje.

A continuacin se mencionan algunos virus de gran importancia que se transmiten

por este medio, sus hospedantes y en algunos casos su perodo de viabilidad.

VIRUS CULTIVOS VIABILIDADVirus Mosaico Comn del

Frijol

Chcharo 3-3.8 aos

Virus Mosaico de la Alfalfa Alfalfa, Chile 3 aosVirus Mosaico Sureo del

Frijol

Frijol, Chcharo 6 meses

Virus Mosaico del Pepino Pepino, Crtamo, Meln,

Sandia, Calabaza, Tomate

0.5-2.2 aos

Virus Mosaico del Meln Meln, Calabaza, Sandia 3-5 aosVirus Mosaico de la Soya Soya 2 aosVirus Mosaico de la

Calabaza

Sandia 3-5 aos

Virus Mosaico del Tabaco Chile 3-9 aosVirus Mancha Anular del

Tabaco

Garbanzo, Meln, Soya,

Tabaco

0.7-5.5 aos

Virus Mosaico Amarillo del

Frijol

Frijol, Haba X

Virus Mosaico del Maz Maz XVirus X de la Papa Papa XVirus Y de la Papa Papa XVirus Marchitez Manchada

del Tomate

Tomate X

Virus Mosaico de la Sandia Calabaza XVirus Mosaico del Trigo Trigo, Maz X

3.2.3.2. MECANISMOS DE ENTRADA DE LOS VIRUS EN LA SEMILLA

Los virus asociados con las semillas son acarreados de dos formas: como una

infeccin o como una infestacin. La infeccin implica que el virus es llevado

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internamente, inmerso en los tejidos de la semilla y cuando el virus es llevado

pasivamente se le conoce como infestacin o contaminacin. El Virus Mosaico

Comn del Frjol, Virus Mosaico de la Soya, Mancha Anular del Tabaco, etc., son

ejemplo de algunos virus que van internamente; el Virus Mosaico del Tabaco en

tomate y la Marchitez Manchada del Tomate se encuentran en la cubierta de la

semilla.

3.2.3.3. TCNICAS DE DETECCIN DE LOS VIRUS EN SEMILLAS

La deteccin de virus en semillas es ms difcil que detectar hongos, bacterias y

nematodos. Los virus son parsitos obligados y por tanto requieren de pruebas

especiales para su deteccin; estas varan desde una observacin visual simple,

hasta pruebas muy sofisticadas como el uso de serologa y microscopa electrnica.Las pruebas ms usadas se describen a continuacin:

A) Observacin de semillas secas.

Las observaciones visuales de la semilla revelan anormalidades tales como

decoloracin, arrugamientos, reduccin en tamao, manchado, necrosis, etc. por

ejemplo, el Virus Mosaico de la Soya provoca un moteado en la semilla de soya, el

Mosaico del Tabaco causa necrosis y deformacin en semilla de tomate el Virus

Mosaico de la Calabaza reduce el tamao en un alto porcentaje cuando infecta

meln y calabaza.

B) Pruebas biolgicas.

Es uno de los mtodos ms usados por el agricultor ya que es econmico, fcil y

muy seguro. Existen dos pruebas biolgicas:

1) Prueba de crecimiento.

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La prueba de crecimiento es usada para determinar el porcentaje de transmisin por

semilla. Se plantan 100 semillas en suelo, vermiculita u otro medio de crecimiento y

una vez germinado son examinadas regularmente siguiendo muy de cerca los

sntomas de los virus; en algunos casos como el V.M.C.F. la transmisin por semilla

puede ser detectada una vez que las hojas primarias hayan aparecido. Sin embargo,

los sntomas se observan ms claramente en el primero o segundo trifolio.

2) Deteccin usando plantas indicadoras.

Los virus pueden ser detectados en la semilla haciendo extracciones de diferentes

partes de la semilla y posteriormente inoculando en plantas indicadoras. El Virus

Mosaico Comn del Frjol es detectado al inocular la savia del embrin y cotiledonesen plantas de frjol "Monroe" en donde reacciona con sntomas locales;

Chenopodium amaranticolores usado para detectar virus como por ejemplo, el Virus

Mosaico del Pepino, Virus Mosaico de la Sanda, entre otros.

C) Pruebas bioqumicas.

Dentro de las pruebas bioqumicas el uso de a) Serologa, b) Tinciones de tejidos y

c) Microscopio electrnico son las pruebas ms confiables para detectar virus en la

semilla.

a) Serologa.

Los mtodos serolgicos son usados para caracterizar y determinar las relaciones

entre los virus. Estas pruebas estn basadas en la relacin entre un antisuero (virus

purificado) y un antgeno (virus a identificar). Dentro de las pruebas serolgicas ms

usadas para la deteccin de virus en la semilla se pueden mencionar las

microprecipitacin serolgica, doble difusin en agar, aglutinacin serolgica,

aglutinacin de cloroplastos y E.L.I.S.A., entre otros.

b) Tcnica de tincin.

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Un gran nmero de colorantes tales como la acridina, giemsa, azul de triponina,

entre otros, pueden detectar infecciones virales en los tejidos de las plantas. El uso

de acridina (colorante fluorescente) sirve para diagnosticar la presencia del Virus del

Chcharo de Vaca en semillas de chcharo; es muy simple y consiste en poner las

semillas de chcharo en agua durante dos das, agregarle el colorante y si existe la

presencia del virus se observar un agregado de un color rojo fluorescente en las

semillas infectadas.

c) Microscopa electrnica.

Consiste en hacer preparaciones de las posibles semillas infectadas y observarlas almicroscopio electrnico.

3.2.4. TRANSMISIN POR POLEN

Cuando una planta est infectada, el virus tiene la capacidad de llegar a infectar el

polen y cuando este es acarreado por el viento o por insectos el virus se transmite de

una planta enferma a una sana por este medio. La transmisin por medio del polen

est muy relacionada con la transmisin de virus por semilla, por ejemplo, el Virus

Mosaico Comn del Frijol tiene un mayor porcentaje de transmisin por semilla y por

polen ya que la planta es autgama. La gran mayora de los virus que se transmiten

por medio de la semilla tambin se transmiten por polen, por ejemplo, Virus Mosaico

Comn del Frijol, Virus Mosaico de la Calabaza, Virus Mosaico de la Lechuga, etc.

3.2.5. TRANSMISIN DE VIRUS A TRAVS DE BIOTRANSMISORES

Se aplica este trmino a cualquier agente vivo (excluyendo semilla y polen) capaz

de portar o transmitir un virus fitopatgeno de una planta enferma a una planta

sana. En sentido estricto la palabra vector no es sinnimo de biotransmisor,

aunque en el lenguaje comn se usan de manera indistinta. Siendo ms comn el

primer trmino. El ser vector implica que el virus es ingerido y se halla en contacto

ntimo con el transmisor. Un ejemplo til de vector es el del mosco Anopheles, que

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transmite al protozoario causante del paludismo; el microorganismo ingerido se

multiplica y sufre transformaciones en el interior del cuerpo del insecto, antes de

poder ser transmitido. En muchos casos de biotransmisores de virus, el patgeno

si se multiplica en el insecto pero hay abundantes excepciones en las que no

sucede as.

Este tipo de transmisin incluye a los insectos, caros, nematodos, hongos, plantas

parsitas y vertebrados, y constituye la forma ms importante de diseminacin de los

virus en campo.

3.2.5.1. TRANSMISIN POR INSECTOS

Constituye el grupo de biotransmisores ms importante de virus. La primeraevidencia que se tiene de la transmisin por este medio fue la publicada por Takata

en Japn (1895) y Takami (1901), donde se menciona a las chicharritas Inzuma

dorsalis y Nephotettix cinctipes asociadas con el Virus Enanismo del Arroz. Ms

tarde Doolittle (1916) demostr que el pulgn Aphis gossypii transmita al Virus

Mosaico del Pepino; Botjes (1920) encontr que Myzus persicae poda transmitir al

Virus del Enrollamiento de la Hoja de Papa. Actualmente se reconoce que ms de

400 especies de insectos transmite virus, y de todas estas especies Myzus persicae,

es el ms importante ya que transmite alrededor de 85 virus diferentes. Las especies

de insectos reportadas como transmisores de virus se encuentran principalmente en

los rdenes Homptera (pulgones, moscas blancas, chicharritas, escamas, psilidos,

etc.); Thysanptera (trips); Coleptera (escarabajos); Orthptera (chapulines);

Dermptera (tijeretas); Lepidptera (palomillas y mariposas); Dptera (mosquitos) y

Hemptera (tingidos).

En general, durante la transmisin por insectos se pueden distinguir tres fases:

- Perodo de adquisicin. Es el tiempo mnimo que requiere el insecto para

adquirir el virus.

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- Perodo de latencia. Tiempo transcurrido desde que el insecto adquiere el

virus hasta que es capaz de transmitirlo.

- Perodo de inoculacin. Tiempo mnimo requerido por el insecto para

poder trasmitir el virus adquirido, una vez que empieza a alimentarse de

una planta sana.

Hay otro trmino importante denominado perodo de retencin, que se refiere al

tiempo durante el cual el insecto permanece infectivo.

3.2.5.1.1. CLASIFICACIN DE VIRUS DE ACUERDO A LA TRANSMISIN POR

INSECTOS

En base al fenmeno de transmisin de los virus por insectos estos se hanclasificado en: virus no persistentes y virus persistentes.

3.2.5.1.1.1. VIRUS NO PERSISTENTES

Llamados tambin virus de estilete o virus no circulativos, constituye el grupo ms

grande y de mayor importancia en campo. Este grupo de virus se caracteriza por que

el insecto que los transmite (generalmente pulgones), tiene un perodo de

adquisicin (tiempo que tarda el insecto en adquirir a un virus) y un perodo de

transmisin (tiempo que tarda el vector en transmitir a un virus) sumamente cortos

(de 10-60 segundos). El insecto retiene al virus durante un perodo muy corto que

puede ser de minutos u horas; esto depende del insecto ya que si este se alimenta

ms rpido, ms pronto se deshace de los virus. El virus no penetra al tracto

digestivo del insecto por lo que al darse el proceso de muda en este se elimina al

virus; si el vector es sometido a un perodo de ayuno se aumenta la eficiencia de la

transmisin. La mayora de estos virus presentan las siguientes caractersticas en

comn:

1) Su punto de inactivacin trmica anda entre 50-65 C.

2) Generalmente son filamentosos (varilla rgida o flexible).

3) La longevidad "in vitro" es solamente de unos cuantos das.

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4) Generalmente presentan sntomas de mosaico y manchas anulares.

5) La gran mayora se transmite por pulgones

6) Se transmiten muy fcilmente mecnicamente

7) Generalmente estn confinados a las clulas epidermales

3.2.5.1.1.2. VIRUS PERSISTENTES

Tambin llamados virus circulativos; y se caracterizan porque el insecto que los

transmite (pulgones, mosca blanca, chicharritas, etc.) tienen perodos de adquisicin

y transmisin largos (horas, das y hasta semanas) y adems poseen un perodo de

incubacin (tiempo que tarda el virus en recorrer el tracto digestivo del insecto) que

tambin es de horas, semanas y hasta das. En este caso el virus si penetra al tracto

digestivo del insecto por lo que al darse el proceso de muda en este, no se pierde lainfectividad.

Los virus persistentes presentan las siguientes caractersticas:

1) Generalmente poseen forma polidrica

2) Los sntomas ms comunes son: amarillamientos, enchinamientos,

enrrollamientos, etc.

3) Su longevidad "in vitro" en algunos casos puede durar toda la vida del insecto.

4) Al mudar el insecto no se pierde la infectividad

5) Estn confinados a los tejidos vasculares de la planta.

6) Generalmente no se transmiten por medios mecnicos.

7) En la naturaleza sus principales vectores son mosca blanca, chicharritas,

nematodos, etc.

Los virus persistentes se pueden clasificar en: circulativos, propagativos y

transovricos.

3.2.5.1.1.2.1. PERSISTENTES CIRCULATIVOS

Son aquellos virus que penetran al tracto digestivo del insecto vector, pero no se

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multiplican de este. Este tipo de virus generalmente son transmitidos por mosca

blanca.

3.2.5.1.1.2.2. PERSISTENTES PROPAGATIVOS

Son aquellos virus que penetran al tracto digestivo del insecto y se multiplican de

este. Este tipo de virus se multiplican en la hemolinfa, tubos de Malpighi, cerebro,

etc., y generalmente son transmitidos por chicharritas.

3.2.5.1.1.2.3. PERSISTENTES TRANSOVRICOS

Son aquellos virus que penetran al tracto digestivo del insecto, se multiplican de este

y adems la infectividad se pasa la progenie. Estos virus solo se transmiten por

chicharritas y el virus aparentemente se multiplica en los rganos reproductores de lahembra; el Virus Enanismo del Arroz es un ejemplo tpico de estos virus.

VIRUS TRANSMITIDOS POR FIDOS

Los fidos, llamados comnmente pulgones, constituyen el grupo ms importante

como vector de virus que transmiten alrededor del 60 % de todos los virus que se

transmiten por insectos y porque adems transmiten virus principalmente del tipo no

persistente pero tambin transmiten virus circulativos y propagativo. El ciclo de vida

de los pulgones es muy variado y en lugares donde el invierno no es muy fro, se

reproducen partenogenticamente y en las partes donde si hace fro existe

reproduccin sexual, es decir, los machos fertilizan a las hembras, las cuales ponen

huevecillos y de esta forma invernan. Los fidos generalmente tienen un hospedante

perenne que es el hospedante primario y un hospedante secundario que es una

planta herbcea; las formas ms importantes como transmisores de virus son las

aladas aunque las formas pteras son muy importantes en laboratorio; los pulgones

empiezan el vuelo en las maanas muy temprano y dejan de volar unas cuantas

horas antes de que acabe la luz, estos insectos son atrados por los colores

brillantes, principalmente amarillo. Cuando un fido se coloca en una planta,

primeramente realiza inserciones de su estilete de corta duracin cuya trayectoria es

hacia el interior de las clulas epidrmicas: Si la planta es de su agrado,

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posteriormente, para alimentarse, realiza inserciones en la bsqueda de los haces

vasculares a travs de los espacios intercelulares. El piquete de probado de corta

duracin es el responsable de la adquisicin e inoculacin de virus no persistentes.

El piquete de alimentacin se encarga de la transmisin de virus persistentes.

Los fidos transmiten virus que pueden ser transmitidos manualmente muy

fcilmente y cuyos sntomas son generalmente los mosaicos, encontrndose dentro

de estos a los Potyvirus, Cucumovirus, Carlavirus, Grupo del Virus Mosaico de la

Alfalfa, etc., los cuales los transmite de manera no persistente y de manera

persistente transmite a los de los grupo Luteovirus, Grupo del Virus Mosaico,

Enanismo del Chcharo y a la familia Rhabdoviridae.

VIRUS TRANSMITIDOS POR CHICHARRITAS

De los hompteros del suborden Auchenorrhincha, las chicharritas (Cicadellidae)

transmiten aproximadamente 40 virus distintos y la mayora de ellos son virus

persistentes circulativos propagativos por lo que su perodo de adquisicin es

sumamente grande (alrededor de 24 horas), el perodo de incubacin es de una a

dos semanas y el perodo de persistencia es casi toda la vida. Tambin transmiten

virus transovricos y los sntomas principales son amarillamientos, enrrollamientos y

enchinamientos.

Para comprobar que el virus se multiplica dentro del insecto vector, con una

microjeringa se extrajo hemolinfa de una chicharrita del genero Ogallia constricta y

se inyect a otra y la infectividad se pas hasta en ocho generaciones; se comprob

que el virus se multiplicaba en las clulas del epitelio, intestino, tubos de malpighi,

ovarios, hemolinfa, etc. Los virus anteriormente mencionados que son transmitidos

por chicharritas estn incluidos dentro de las familias Rhabdoviridae y Reoviridae, y

los grupos: Geminivirus, Grupo del Virus Rayado Fino del Maz y Enanismo Clortico

del Maz, principalmente.

VIRUS TRANSMITIDOS POR MOSCA BLANCA

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Las moscas blancas son un grupo importante en la transmisin de virus ya que se

les ha encontrado transmitiendo alrededor de 10 distintos Geminivirus; por lo menos

cinco virus en forma de varilla distribuidos en los grupos Closterovirus, Carlavirus y

Potyvirus, y otras enfermedades de tipo viral cuya partcula no ha sido observada. En

todos los casos, la forma de transmisin es persistente circulativa. Para que la

mosca blanca adquiera al virus requiere de un perodo de alimentacin de cuando

menos 5 minutos, el cual va a depender del virus que se trate, su concentracin en el

tejido vegetal, el biotipo, etc. El perodo de alimentacin mnimo para inocularlo en

una planta sana es de 5 a 60 minutos y el perodo de incubacin es de 8-12 horas.

El principal vector es Bemisia tabaciy transmiten virus cuyos sntomas principales

son: aclareamiento de nervaduras, amarillamientos, enchinamientos, entre otros.

Algunos virus transmitidos son el Virus Mosaico Dorado del Frijol, VirusEnchinamiento del Tomate, Virus Mosaico Amarillo de Chile, etc.

VIRUS TRANSMITIDOS POR ESCAMAS

Las escamas tambin tienen la capacidad de transmitir virus; aun a pesar de que

carecen de movimiento, pero las hormigas las trasladan de un lado a otro. El virus

ms importante transmiti

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