Upload
vonhan
View
219
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
VŠCHT seminář - Praha, listopad 2015
LABORATORNÍ METODY A TESTYV GASTROENTEROLOGII
MUDr.Petr Kocna CSc.http://www.lf1.cuni.cz/~kocna/pkweb1.htm
2
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
3
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
DIAGNOSTICKÝ PROCES
METODYLABORATORNÍ ZOBRAZOVACÍ
METODY
MORFOLOGIE
FUNKČNÍ ODEZVA
REÁLNÝ STAV
01020304050607080
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 2000
1020304050607080
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
4
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
FUNKČNÍ ODEZVA
VÝCHOZÍ STAV
STIMULACE
ČASOVĚ ZÁVISLÁ ODPOVĚĎ
5
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
6
MALABSORBCE
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA MALABSORBCE
7
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCESTAV, KDY JEDNA, NEBO VÍCE ZÁKLADNÍCH ŽIVIN NENÍ TRÁVENA A VSTŘEBÁVÁNA, NEBO NEDOSTATEČNĚ
MALABSORPČNÍ SYNDROM (MS) ZAHRNUJE:PORUCHU INTRALUMINÁLNÍHO TRÁVENÍ, DIGESCEPORUCHU VSTŘEBÁVÁNÍ ŽIVIN, ABSORPCEABNORMÁLNÍ SEKRECE TRÁVICÍCH ŠŤAVZÁVAŽNÉ NARUŠENÍ MOTILITY TRÁVICÍ TRUBICENEDOSTATEČNÝ PŘÍJEM POTRAVY
PRIMÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROMPORUCHA NA ÚROVNI ENTEROCYTUCÉLIAKIE, TROPICKÁ SPRUE, WHIPPLOVA CH.....
SEKUNDÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROMONEMOCNĚNÍ PANKREATU, ŽLUČNÍKU, JATEROBSTRUKČNÍ CHOROBY STŘEVA, INFEKCE....
MALABSORPCE, MALDIGESCE, MALASIMILACE
8
CROSBYKAPSLE
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ŽALUDEČNÍ SONDATYP LEVIN
ŽALUDEČNÍ, DUODENÁLNÍ, STŘEVNÍ SONDA
9
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
RTG KONTROLA ZAVEDENÍ SONDY
10
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
KLKY MIKROKLKYENTEROCYTY
DUODENUM - JEJUNUM - ILEUM, DÉLKA 3 - 4 METRYPOVRCH 5 x ZVĚTŠUJÍ KLKY (0,5 - 1 mm, 20 - 40 klků / mm2)
MIKROKLKY - KARTÁČOVÝ LEM - ZVĚTŠUJE POVRCH 30x 100 m2
TENKÉ STŘEVO - FUNKCE ENTEROCYTU
11
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
ANALÝZA STOLICE UMOŽŇUJE DIAGNOSTICKÝ PROCES ONEMOCNĚNÍ ZAŽÍVACÍHO ÚSTROJÍ, JATER A PANKREATU. UJASNĚNÍ PŘÍČÍN VEDOUCÍCH K SYMPTOMŮM OVLIVŇUJÍCÍ ZAŽÍVACÍ TRAKT VČETNĚ PRŮJMU, NAUSEY, ZVRACENÍ, EDÉMU, BOLESTÍ, KŘEČÍ, HOREČKY, ZTRÁTY CHUTI APOD.
DETEKCE NĚKTERÝCH ENZYMŮ VE STOLICI K URČENÍ MÍRY PANKREATICKÉ FUNKCE.
DETEKCE OKULTNÍHO KRVÁCENÍ PRO SCREENING KOLOREKTÁLNÍCH TUMORŮ
DETEKCE PŘÍTOMNOSTI PARASITŮ, NAPŘ. LAMBLIE
DETEKCE A IDENTIFIKACE NĚKTERÝCH TYPŮ BAKTERIÍ
DETEKCE NENATRÁVENÝCH ZBYTKŮ POTRAVY PŘI MALABSORPČNÍM SYNDROMU
VYŠETŘENÍ STOLICE
12
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
13
NATIVNÍ PREPARÁTZBYTKY POTRAVYVLÁKNA CELULÓZY
BARVENÍ FRIEDIGER’S REAGENS- SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ- TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ- ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE
SVALOVÁ VLÁKNA
ŠKROBOVÁ ZRNKA
TUKOVÉ KAPÉNKY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Gastroenterologie für die PraxisMünchen, 1975
MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE
14
BIOCHEMICKÁ VYŠETŘENÍ VZORKU STOLICE
Helicobacter pylori Ag
Elastáza - 1
Chymotrypsin
Hemoglobin
Lactoferin
Anti Gliadin scIgA
Lipázaβ-Defensin 2
Lysozyme
Albumin
Amyláza
Myeloperoxidáza
PCR / DNA
Calprotectin
PMN Elastáza
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin
Anti tTG IgA
α1-antitrypsin
Zonulin
Haptoglobin
Transferin
15
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU
16
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CALPROTECIN VE STOLICI - RAPID TESTY
CerTest - CALPROTECTIN + LACTOFERRIN
CalDetectCalProCalFast
17
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
KOMBINOVANÉ RAPID-TESTY NA STOLICI
Hemoglobin
Calprotectin
Lactoferin
E-coli toxin
Transferin
18
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ODBĚROVÝ SYSTÉM PRO NĚKOLIK TESTŮ
IDK ExtractSingle Tube Analytics
5EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin7β-Defensin 25Lysozyme9Albumin9α1-antitrypsin7s-IgA3anti-transglutaminase7anti-Gliadin7Haptoglobin5Hemoglobin7Pancreatic elastase9Lactoferrin9Calprotectin
Stabilita 2-8 CAnalyt
19
Kroma iT Linear
AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY NA STOLICI
NS-Plus Alfresa Pharma
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NS-Prime Alfresa Pharma
20
SBĚR STOLICE - 72 hod.
REFERENČNÍ METODAEXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU
S-CCK TEST
FAT 72 hod.
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI
21
JEDNODUCHÁ OBSLUHABATERIOVÝ TYP
REAL-TIME KINETICKÝ SWROZSAH MĚŘENÍ 0 - 500 ppm
CITLIVOST 1 ppm
LAKTÓZOVÁ INTOLERANCEMALABSORPCE LAKTÓZY
MALABSORPCE SACHARÓZYMALABSORPCE FRUKTÓZYBAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ
MOTILITA GIT, TRANSIT TIME
PARAMETRY
APLIKACE
Kód VZP: 15140 249 bodů
klinický kód, GE, odb. 105
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
H2 MICRO - ANALYZÁTOR
22
APLIKACE H2 - DECHOVÝCH TESTŮ
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
0
10
20
30
40
50
10 40 70 100 130 160 190 220 250 2800
10
20
30
40
50
10 40 70 100 130 160 190 220 250 280
H2-ppm
cut-off
TEST S LAKTULÓZOUOCTT
OROCAECAL TRANSIT TIME
TEST S FRUKTÓZOUFRUKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TEST S LAKTULÓZOUBAKTERIÁLNÍ
PŘERŮSTÁNÍ TS
23
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
-10-505
101520
-15 0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180-10
-505
101520
-15 0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180
KONCENTRACE H2 (ppm) PO PODÁNÍ 25g LAKTÓZYH2 - DECHOVÝ TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE
H2 (ppm)
ČAS (min)
Hodnocení dechových testů po podání různých monosacharidů a disacharidůBc. Jana Bartoňová, Praha 2004
http://portal.lf1.cuni.cz/formular/upload/internet/soubor_269.pdf 24
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ANAEROBNÍ HYDROLÝZA A PRODUKCE
VODÍKU A METANU STŘEVNÍ MIKROFLÓROU
Pimentel M.,Gunsalus RP.,Rao SSC.,Zhang H.: Methanogens in Human Health and Disease. Am J Gastroenterol Suppl (2012) 1:28–33
H2 /CH4 BAKTERIÁLNÍ PRODUKCE
25
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
M. Di Stefano, G.R. CorazzaRole of hydrogen and methane breath testing in gastrointestinal diseases
Digestive and Liver Disease Supplements 2009/3, 40–43
Satish S.C. Rao - Ability of the Normal Human Small Intestine to Absorb Fructose: Evaluation by Breath Testing
Clinical Gastroenterology and Hepatology 2007/5, 959-963
KOMBINACE STANOVENÍ VODÍKU a METANU
ELIMINACE FAL.NEGATIVITYMODULÁRNÍ KONCEPCESENZORY: H2 /CH4 /CO2
- VLIV ANTIBIOTIK- NÍZKÁ PRODUKCE VODÍKU
H2 /CH4 /CO2 - LACTOTEST 202
26
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
KALIBRACE TŘÍ SENSORŮHYDROGEN
METANOXID UHLIČITÝ
REKALKULACEKONCENTRACE H2
PODLE CO2
H2 /CH4 /CO2 - LACTOTEST 202
27
ANALYZÁTORY DECHOVÝCH TESTŮ 13C/12C
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
FLIP, Humedics
IR force 600, Richen
HeliFAN, Fischer - FAN
BreathID, Exalenz
28
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Zkušenosti laboratořeÚKBLD 1.LF UK a VFN
2001 - 2012IR analytické systémy
Isomax 4000HeliFAN plus
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
29
Standardem PDB je primární referenční materiál pro měření přirozených změn obsahu izotopu uhlíku 13C, stanoveného v uhličitanu vápenatém ze schránek křídových belemnitů rodu Belemnitella americana z geologické formace Pee Dee v Jižní Karolíně (USA)
PDB Pee Dee Belemnitae
Mezinárodní standard 13C = 1.11237 %
13C DECHOVÉ TESTY - PDB STANDARD
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
30
13C DECHOVÉ TESTY - PDB STANDARD
PDB - Pee Dee Belemnitella americana
1,050
1,060
1,070
1,080
1,090
1,100
1,110
1,120
- 50
- 40
- 30
- 20
- 10
0
+ 10
PeeDee Belemnite
Fosilní zdroje
Uhličitany
C3 rostliny
C4 rostlinyAtmosférický CO2
Jap. - Dech CO2EU - Dech CO2
US - Dech CO2
13C abundances of nutrients and the effect of variations in 13C isotopic abundances of test meals formulated for 13CO2 breath tests.
Schoeller DA. et al.: Am J Clin Nutr. 1980; 33(11): 2375 - 2385
% 13C ‰ δ 13CPDB
31
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
VÝSKYT IZOTOPU 13C V PŘÍRODĚ
13C - mixed triglycerid
NABÍDKA SUBSTRÁTŮ PRO DECHOVÉ TESTY
32
13C - laktóza
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
13C - glukóza
13C - bikarbonát
13C - oktanoát
13C - triolein
13C - fenylalanin
13C - kofein
13C - aminopyrin
13C - glykocholát
13C - xylóza 13C - škrob
13C - galaktóza
13C - palmitát
13C - urea13C - methacetin13C - acetát
PRINCIP 13C- MTG DECHOVÉHO TESTU
33
13C-substrát
perorální podání
enzymatickáhydrolytickáfunkce GIT
13C
absorpce
13C
eliminace
stanovenípoměru 13C/12C
kumulativní výdej CO2
cPDR
13CO2
produkce CO2
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
13C-enriched lactose, derived from milk of cows fed with silo corn (d= -10.885) for 5 weeks.Because it is known that it takes 14 days for cows milk to be in equilibrium with a diet,
milk of seven cows was collected during the last 3 weeks of this 5-week period and pooled.Lactose was obtained by crystallization techniques.
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
PŘIROZENÉ SUBSTRÁTY 13C PRO DECHOVÉ TESTY
C4 rostliny 13C-laktóza
kukuřice
13C-škrob
mléko
34
krystalizacelaktózy
35
HeliView - IRMS ANALYZÁTORDECHOVÝCH TESTŮNA BÁZI UHLÍKU 13C
Kód VZP: 81701 501 bodů
analytika, odb. 801, IRMS
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
36
AUTOSAMPLER
VACUTAINER
NAFION
SEPARACEGC
REF.INJEKTOR
REFERENČNÍCO2
MS
VENTIL
INJEKTOR
HeHeSEPARACE VODY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ANALYZÁTOR 13CO2 - IRMS DETEKCE
37
VÝSTUPZ GC
IONIZACE PLYNU
MAGNETICKÉPOLE
SEPARACE PODLE
HMOTNOSTI
TRIPLEFARADAY
COLLECTOR
DETEKCE44 - 12C16O245 - 13C16O246 - 12C16O18O
I R M S ISOTOPE - RATIO
MASS SPECTROMETRY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ANALYZÁTOR 13CO2 - IRMS DETEKCE
ABSORBČNÍ MAXIMA ISOTOPŮ: 4348,5 nm - 4348,2 nm
13C16O22299.795 cm-1
12C16O22299.642 cm-1
13C16O18O
38
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE
39
ZDROJ IRλ = 2 - 8 μm
12CO2
13CO2
VZOREK
REF.PLYN
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NonDispersive Isotope-selective
InfraRed Spectroscopy
ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE
40
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
OptoAkustický detektorLehrer & Luft typ
Lehrer E and Luft K F 1938German Patent No 730478
An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detectorDaniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: 281 - 286
- absorpce IR- změna tlaku- deformace membrány- akustický signál
ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE
ANALÝZA VYDECHOVANÉHO VZDUCHU
41
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NÁDECH VÝDECH
CO2 = 0,04 %
CO2 = 5,20 %
CO2 ÷ 2,5 - 3,5 %
NÁDECH - VÝDECH (BEZ ZADRŽENÍ DECHU) NÍZKÁ KONC.CO2
NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU - KRÁTKÝ VÝDECH NÍZKÁ KONC.CO2
NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU NA 10 sec - DLOUHÝ VÝDECH KONC.CO2 JE OK
42
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
43
PRŮKAZ INFEKCE HELICOBACTER PYLORI
PRŮKAZEM BAKTERIE/ANTIGENU Hp NIKOLIV DETEKCE PROTILÁTEK K Hp
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
44
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NH2-13CO-NH2 + H2O = 2 NH3 + 13CO2
Hp - UREÁZA
SUBSTRÁT: 13C-MOČOVINADÁVKA: 50 - 100 mgDOBA TESTU: 30 minut
RYCHLÝUREÁZOVÝ
TEST
DECHOVÝTEST
lokální test - biopsie
globální test - žaludku
DECHOVÝ TEST s 13C - MOČOVINOU (UREOU)
45
CLO TEST (RUT) s MOČOVINOU (UREOU)
Rychlý ureázový testzměna pH = změna zbarvení
výsledek během hodiny
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
46
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
DECHOVÝ TEST s 13C - MOČOVINOU (UREOU)
Kód VZP: 15143 1661 bodů
klinická část, GE, odb. 105
Pylobactell a InfaiUBT - Hp soupravy
jsou registrovány v ČR - SUKL
47
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Five minute endoscopic urea breath test with 25 mg of (13)C-ureain the management of Helicobacter pylori infection.
Isomoto H et al.: Eur J Gastroenterol Hepatol. 2002 Oct;14(10):1093-1100
25 mg 13C-ureaaplikace spray sondou
5 minutový test
ENDOSKOPICKÝ DECHOVÝ TEST - 13C EUBT
48
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
FILTR
INKUBAČNÍNÁDOBKA
mAb - TEST MEMBRÁNA
ODBĚROVÁNÁDOBKA
PRŮKAZ HELICOBACTER PYLORI
HpStAR TEST - DAKORAPID TEST
MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKA
Kód VZP: 91483 odb. 813, 761 bodů
HELICOBACTER PYLORI - DAKO TEST HpStAR
helicoCare negativníHp StAR negativní
helicoCare pozitivníHp StAR negativní
helicoCare pozitivníHp StAR pozitivní
49
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Jeřábek, J.: Stanovení antigenu Helicobacter pylori ve stolici rapid testem.Diplomová práce 1.LF UK Praha 2007
POROVNÁNÍ Hp RAPID TESTŮ
HCl
50
HELICOBACTER PYLORI INFEKCE
HCl
GASTRIN ↑ GASTRIN ↑
ATROFIEKARCINOM
DUODENÁLNÍVŘED
BEZONEMOCNĚNÍ
KMENY BAKTERIE - GENETICKÁ DISPOZICE - VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ - DIETA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
H.Pylori + hostitel
51
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
negativní Hp,normální PGI/PGII
normální G-17b
PODEZŘENÍ NA GASTRITÍDU, HP INFEKCI, CA ŽALUDKU
pozitivní Hp,normální PGI/PGII
normální G-17b
Hp +/-,nízké PGI/PGIIzvýšené G-17b
pozitivní Hp,nízké PGI/PGII
nízké G-17b
Normálnížaludečnísliznice
Rizko žaludečníhonebo duodenálního
vředu
Rizko karcinomužaludku
detekce HpPGI/PGII, G-17b
Hp gastritída Atrofická gastritída
Eradikace Hp infekce + gastroskopie 52
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
53
SEKRETIN
CCK-PZ
TVORBA ŽLUČE
PANKREATICKÁŠŤÁVA
HCO3-, VODAENZYMY
SPECIFICKÁ STIMULACE HORMONYSEKRETINCHOLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN
0.7 l/den
2.0 l/den
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE
54
ERCPPAPILA MINOR
D.WIRSUNGID.SANTORINI
ERCP KLASIFIKACEPANKREATITID
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CHRONICKÁ PANKREATITÍDAZOBRAZOVACÍ METODY
ERCPŠŇŮRA PEREL
55
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and itscorrelation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis
Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI 10.1007/s11547-011-0774-6
MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE
FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE
ŽÁDNÁ STIMULACE
ELASTÁZAVE STOLICI
NEPŘÍMÁSTIMULACE STIMULAČNÍ
POKRM SUBSTRÁT
SEKREČNÍ KAPACITAGRADING CHP
DIGESTIVNÍ FUNKCETRÁVENÍ (TUKŮ)
56
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
250mg13C-MTG
KUKUŘIČNÝCHLÉB
20g RAMA
PANKREATICKÁLIPÁZA
SUBSTITUČNÍTERAPIE
PERORÁLNÍ PODÁNÍ
SUBSTITUČNÍLIPÁZA
ANALÝZA13C-MARKERU
TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU
57
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
VOLBA SUBSTRÁTU
13C - DECHOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU
13C - TRIOLEIN13C - HIOLEIN13C - MIXED
TRIGLYCERIDE13C - CHOLESTERYL
OCTANOATE13C - TRIPALMITIN13C - TRIOCTANOIN13C - STARCH13C - BzTyrAla
STEATORHEA > 11 - 14 g/denINTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZASPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE
VÝDEJ LIPÁZY < 90 kU/hodPANKREAT. CHOLESTEROL ESTERÁZA
STEATORHEA > 11 g/denMALABSORPCE TUKŮTKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30%SEKRECE AMYLÁZY < 10%KORELACE s PABA testem
58
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3
O
CH - O - 13C - (CH2)6 - CH3
O
CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3
O
PANKREATICKÁ LIPÁZA
1,3 DI - STEAROYL
2 - (13C) - OCTANOYL
JATERNÍ β - OXIDACE
13CO2 V DECHU
METABOLICKÉ PROCESY 13C-MTG
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 9500,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 95059
CUT-OFF FELA: 200 μg/g
FELA μg/g
CUT-OFF MTG: 30 %
PATOLOGICKÝ
100 μg/gcPDR MTG (%)
NORMÁLNÍ
13C-MTG - DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI
226 DECHOVÝCH TESTŮ 13C-MTG155 CHP - 71 KONTROL (NON-CHP)
SHODA MTG & FELA - 80.2 % (181/226)
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CHP-ACHP-BCHP-CCHP-DNON-CHP
60
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
CO JE CÉLIAKIE ?
CELOŽIVOTNÍ ONEMOCNĚNÍ, PERMANENTNÍ STŘEVNÍINTOLERANCE LEPKU OBILOVIN
GENETICKÝM FAKTOREM JE HLA-B8, HLA-DR3 a HLADQ2
SPOUŠTĚCÍM FAKTOREM JSOU GLIADINOVÉ PEPTIDY
IMUNOLOGICKÁ ODPOVĚĎ, AUTOIMUNITNÍ CHARAKTERONEMOCNĚNÍ
POŠKOZENÍ SLIZNICE TENKÉHO STŘEVA
PROJEVY MALABSORPČNÍHO SYNDROMU
ODPOVĚĎ NA BEZLEPKOVOU DIETU
61
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
62
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
tTG
DEAMIDACE
ŽALUDEČNÍ, PANKREATICKÉPEPTIDÁZY, PROLYL-ENDOPEPTIDÁZY
CD4+ T-BUŇKA
TH1-BUŇKATH2-BUŇKA
B-BUŇKA
TKÁŇOVÁTRANSGLUTAMINÁZA
M.BUNĚK
ZÁNĚTLIVÁ ODPOVĚĎ
MESENCHYMÁLNÍBUŇKY
CÉLIAKIEATROFIE KLKŮ
CÉLIAKIEHYPERPLASIE KRYPTPROTILÁTKY
IL2, γIFN, TNFIL 4,5,10
GLIADIN
33-mer PEPTID PŠENICE
podle: Mowat AT, Lancet 2003, 361: 1290
19-mer PEPTID
Zonulin
63
Definitivní diagnóza celiakie
Bezlepková dieta
HLA typizace,opakovat biopsii
Biopsie TS,histologie
C. Briani et al. / Autoimmunity Reviews 2008; 7, 644 – 650
negativní protilátkynormální IgA
pozitivníprotilátky
deficit IgA
pozitivní protilátky
histologický obraz celiakie
klinická a histologická normalizace
vysoké klinicképodezření
negativníhistologie
Předběžná diagnóza celiakie
Vysoká pravděpodobnostceliakie
Nízká pravděpodobnostceliakie
IgG atTG , IgG EmAnebo IgG AGA
IgA atTG / IgA EmAa celkové IgA
ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI PODEZŘENÍ NA CS
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
64
Definitivní diagnóza celiakie
Střevní biopsie
negativní HLA pozitivní HLA
anti TG2> 3x normy
Vyloučit IgA deficienciNízký příjem glutenu
Není riziko CS
HLA DQ2 and/or DQ8
negativní protilátky
anti TG2< 3x normy
Marsh2 or 3
EmA negativní
Marsh 0 or 1
Normální dietaFalešně pozitivní test
Potenciální CS
Tranzientně falešná pozit.anti TG2
Normální dietaDalší serologické testy
IgA EmA
EmA pozitivní
IgA atTG2 & total IgA
ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI ZVÝŠENÉM GENETICKÉM RIZIKU
European Society for Pediatric Gastroenterology,Hepatology, and Nutrition Guidelines for the Diagnosis ofCoeliac Disease. Husby S. at al. JPGN 2012; 54: 136–160
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
65
BIOPSIE TENKÉHO STŘEVA - KLASIFIKACE
Clinical practice - Coeliac disease. Kneepkens C. M., von Blomberg B. M.Eur J Pediatr. 2012; 171(7) : 1011 - 1021
Marsh 0 Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
66Old and new serological tests for celiac disease screening.
Volta U., Fabbri A., Parisi C. et al. Expert Rev. Gastroenterol. Hepatol. 2010, 4(1)
SOUČASNÝ PROTOKOLSTANOVENÍ PROTILÁTEK
(EVIDENCE - BASED)
PERSPEKTIVNÍ PROTOKOLSTANOVENÍ PROTILÁTEK(PRACOVNÍ HYPOTÉZA)
IgA atTG IgA atTG
+ IgA EmA
+ IgG atTG
+ IgA AGA
+ IgG DGP
ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA atTG
ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA atTGDETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU
DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET
DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU
DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET
+ IgA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
67
EmA IF - opičí jícenAGA-16, AGG-1, atTG-1.5
pacient D.K. 10/2004
EmA IF - opičí jícenAGA-238, AGG-220, atTG-233
CSF, pacient M.P. 02/2002
EmA IF - opičí jícenpozitivní kontrola
ANTIENDOMYSIÁLNÍ PROTILÁTKY - EmA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
68
anti-tTG, anti-DGP, EmAKombinace tří základních protilátek pro screening a diagnostiku celiakie imunofluorescenční technologií
AKLIDES® - CytoBead CeliAK
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
69
α-gliadin
ω γ β α
ŠKROBOVÁ - GELOVÁ ELEKTROFORÉZA
(SGE)SEPARACE JEDNOTLIVÝCH
PROTEINŮ - GLIADINŮKLASIFIKACE GLIADINŮ
NA ČTYŘI SKUPINY
α − β − γ − ω
GLIADINY - SEPARACE PROTEINŮ
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
70
SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
anti-tTG (IgA & IgG)
anti-DGP (IgA &IgG) + celkové IgA
RYCHLÉ, RAPID TESTYZ PLNÉ KRVE
POCT ANALÝZA
anti-tTG (IgA, IgG, IgM)
anti-tTG (IgA) + celkové IgA
71
SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY
Fingertip rapid point-of-care test in adult case-finding in coeliac disease. Popp A., Jinga M., Jurcut C.,
Balaban V., Bardas C., Laurila K., Vasilescu F., Ene A., Anca I., Mäki M. BMC Gastroenterology 2013, 13:115
Diagnostic accuracy of a new point-of-care screening assay for celiac disease, Benkebil F., Combescure C.,
Anghel SI., Duvanel CB., Schäppi MG.World J Gastroenterol 2013; 19(31): 5111-5117
Evaluation of a DGP point-of-care test for celiac disease in a pediatric population. Marti CO., Fellay B.,
Bürgin-Wolff A., Magnin JL., Baehler P.International Journal of Celiac Disease, 2015, 3/1
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
72
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
73
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
β-D-galactose
OCH2OH
HH
OH
H
OH
OH
H H OH
OCH2OH
HH
H
OH
OH
H
HO
OCH2OH
HH
OH
H
OH
OH
H H OH
OCH2OH
HH
H
OH
OH
H
HO1 4
α-D-glucose
LAKTÁZA
DISACHARID - LAKTÓZA JE HYDROLYZOVÁN
STŘEVNÍ DISACHARIDÁZOU
AKTIVITA ENZYMUV KARTÁČOVÉM LEMU
ENTEROCYTU
STŘEVNÍ DISACHARIDÁZA - LAKTÁZA
74
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
HISTOCHEMICKÝ PRŮKAZ AKTIVITY LAKTÁZY V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTUIMUNOHISTOCHEMICKÁ DETEKCE
MODERNÍ RAPID TESTDETEKCE AKTIVITY LAKTÁZYCHROMOGENNÍ METODOU
DIAGNOSTIKA LAKTÁZOVÉ INTOLERANCE
75
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY
HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE
CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE
TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM
01020304050607080
1960 1970 1980 1990 2000 20100
1020304050607080
1960 1970 1980 1990 2000 2010
76
INCIDENCE
MORTALITA
na 100.000
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Epidemiologie nádorů České republikyhttp://www.svod.cz/
INCIDENCE A MORTALITAKOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU V ČR
77
Proteomics of colorectal cancer: overview of discovery studies and identification ofcommonly identified cancer-associated proteins and candidate CRC serum markers.
Jimenez CR, Knol JC, Meijer GA, Fijneman RJ. - J Proteomics. 2010;73:1873-1895
5 leté přežití (%)
normální adenom progresivní lokalizovaný KRCA lymfatické KRCA jaternísliznice adenom KRCA metastázy metastázy
10 - 15 let
KRCA stádium: Dukes I-II Dukes III Dukes IV
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
78
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
TESTY OKULNÍHO KRVÁCENÍ VE STOLICI - FOBT/TOKS
2005
Schweiz Med Wochenschr. 1976 Feb 28;106(9):297The hemoccult test in the screening for colonic carcinomaDeyhle P, Nüesch HJ, Kobler E, Jenny S, Säuberli H.
J Med Screen. 2002;9(3):99-103. Basic variables at differentpositivity thresholds of a quantitative immunochemical test for faecal occult blood. Castiglione G, Grazzini G, MiccinesiG, Rubeca T, Sani C, Turco P, Zappa M.
g-FOBT - 1.generace
i-FOBT - 2.generace
1975
1990
qi-FOBT - 3.generace
0
20
40
60
80
100
g-FOBT i-FOBT qi-FOBT0
20
40
60
80
100
g-FOBT i-FOBT qi-FOBT
79
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
SENZITIVITA TESTŮ - FOBT/TOKS
Ferkl M., Kocna P. et al. ČLČ 1992; Benešová A., Frič P. et al. ČLČ 1993Dvorak M., Kocna P. et al. Z.- Facharzt, 2003; Kohout P., Granatova J. et al. GUT 2009
Haemoccult
ImmoCare, HemeSelect, Hemolex, Actim FB, Hexagon OBTI
OC Sensor 100 ng/ml
senzitivita specificita28,7% 56,8% 83,4%
80
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Levi Z.,Rozen P.,Hazazi R.,Vilkin A.,Waked A.,Maoz E.,Birkenfeld S.,Leshno M.,Niv Y.Ann Intern Med. 2007;146:244-255
A Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Test for Colorectal Neoplasia
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER
ng Hb/ml iFOBT - OC Micro - Eikencut-off 75 ng/ml
315 - 654 ng/mlmean 485 ng/ml
140 - 263 ng/mlmean 202 ng/ml
25 - 45 ng/mlmean 35 ng/ml
697 - 1477 ng/mlmean 1087 ng/ml
81
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
HLINÍKOVÝ UZÁVĚRPRO PERFORACI
NÁSTŘIKOVOU JEHLOU
SEPTUM DEFINUJÍCÍMNOŽSTVÍ STOLICE
FILTRAČNÍVLOŽKA
KARTÁČEKPRO ODBĚR STOLICE
IDENTIFIKAČNÍČÁROVÝ KÓD VZORKU
ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ
82
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ
PERFORACEHLINÍKOVÉ FÓLIE
TRANSFER EXTRAKTUPŘES FILTR DO
VZORKOVACÍ JAMKY
NÁSTŘIK 25 μlPRO ANALÝZU
VLOŽENÍVZORKU STOLICE
ELIMINACENADBYTKU STOLICE
TRANSFER 10 mg
83
HM-Jack Kyowa
Kroma iT Linear
OC-DIANA Eiken
i-FOBT LABORATORNÍ & POCT ANALYZÁTORY
Senti FIT Sentinel
NS-Plus Alfresa Pharma
SmartPlus Eurolyser
i-Chroma Boditech
QuikRead Orion
SENTi-FIT Sentinel
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
84
KVANTITATIVNÍ ANALÝZA Hb VE STOLICI - VFN
Kocna P., Májek O., Blaha M., Zima T., Dušek L.: Characteristics of Colorectal Cancer Detected by Quantitative Faecal Haemoglobin
Test in Hospital Opportunistic Screening.Clin Chem Lab Med 2014; 52, Special Suppl, pp S416
Kvantitativní stanovení Hb ve stolicianalyzátorem Eiken OC-Sensor-microVšeobecná fakultní nemocnice Praha
15 000 analýz za 5let (2008 - 2013)Data-mining analytický nástroj I-COP
umožnil zkompletovat několik databázíOpenLIMS, laboratorní data, FIT, Hb ve
stolici s výstupemNárodního onkologického registru
prosinec 2013
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
85
810 ng/ml(180-1646)
969 ng/ml(346-1855)
LOKALIZACE TUMORU - HODNOTY FIT TESTU
Hodnoty Hb ng/ml sevýznamně neliší
podle lokalizace tumoru
Metodu FIT OC-Sensor lze spolehlivě použítpro screening KRCA v kterékoliv lokalizaci tumoru
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
627 ng/ml(309-1422)
1322 ng/ml(695-1580)
86
810 ng/ml(180-1646) 969 ng/ml
(346-1855)
LOKALIZACE TUMORU - FALEŠNÁ NEGATIVITA
627 ng/ml(309-1422)
1322 ng/ml(695-1580)
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
3/16 5/29
1/81/11
18.7%
12.5%9.1%
17.2%
Falešná negativita je 15,62%
Senzitivita pro KRCA je 84,38%
Kelley L, Swan N, Hughes DJ. - Colorectal Dis. 2013 Sep; 15(9): e512-21An analysis of the duplicate testing strategy of an Irish immunochemical FOBT
colorectal cancer screening programme
Při jednom testu a cut-off (75 ng/ml)je procento nezachycených karcinomů 17.6%
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
87
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Medline on-linenejnovější publikace
Přímý link na MZČRNárodní číselník
http://gelab.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
http://gelab.zde.cz
88
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ginet/index.htm
http://gweb.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ge_atlas/ge_frames.htm
http://geatlas.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/ukb/lectures.htm