Makala fitokim qu

8/9/2019 Makala fitokim qu

1/12


2/12

-A- I

PENDAH.L.AN

Proantosianidin (PA) merupakan metabolit alami pada tumbuhan. Proantosianidin

(PA) dikenal sebagai tanin terkondensasi dan kelas flavanol, yang termasuk ke dalam

kelompok yang lebih besar dari senyawa polifenol. PA merupakan polimer flavonoid yang

terdiri dari subunit monomer flavan-3-ol ((+) atehin dan (-) epiatehin). !anin merupakan

struktur terhidrolasi yang dapat membentuk kompleks tak larut dengan karbohidrat dan

protein. "enyawa proantosianidin (PA) memiliki struktur kimia yang mirip, perbedaannya

hanyalah pada inin polifenolnya. "truktur kimia dari proantosanidin terdiri dari unit

monomer terkait terutama melalui ikatan interflavan #$f#% atau #$f#& tersebut (PA tipe ')

yang melalui ikatan tunggal unit #-$ dan dapat berisi f#* ikatan eter tambahan (PA tipe

'). PA tipe A telah diindikasikan sebagai senyawa bioaktif, berpotensi memainkan peran

yang signifikan dalam manfaat kesehatan yang berhubungan dengan produk variasi

komposisi PA tipe A termasuk monomer yang terlibat (misalnya atehin atau epiatehin),

dan lokasi ikatan interflavanoid non-eter (#-$ pada unit atas baik #-& atau #-% pada unit yang

lebih rendah).

Proantosianidin (PA) merupakan struktur diphenylpropane dari #&-#3-#&. PA

sebagian besar ditemukan sebagai turunan glikosida, senyawa kelas ini terdiri dari tiga unit

monomer dari atehin, epiatehin, dan epigalloatehin. PA memiliki variasi dalam ukuran

dari bentuk monomer untuk membentuk oligomer, antara lain monomer, dimer, dan trimer.

'erbagai bentuk senyawa ini memungkinkan untuk sebagian besar dari mereka dapat larut

dalam air, meskipun tanin terkondensasi yang lebih besar telah ditemukan untuk menadi

tidak larut.

PA ditemukan dalam berbagai tanaman dan bahan konsumsi seperti buah-buahan,

sayuran, bii-biian sereal, beberapa minuman termasuk teh, anggur, kakao, bir dan sider serta

di beberapa rempah-rempah, seperti kayu manis, rempah-rempah dan pala. PA adalah

kelompok yang paling melimpah kedua fenolat alam, senyawa ini merupakan prekursor

utama dari pigmen biru violet dan merah pada tanaman. PA tidak hanya melalui reaksi

substitusi elektrofilik aromatik fenolik yang biasa, tetapi uga memiliki kemampuan untuk

berinteraksi dengan dan mengendapkan protein dan memiliki kemampuan yang bertanggung

awab terhadap at astrigen.

'erdasarkan struktur fenolik dari PA menyebabkan senyawa ini memiliki potensi

antioksidan yang berbeda. Proantosianidin dapat dilihat sebagai rantai dasar polimer flavanol

seperti atehin. atekin dan proantosianidin merupakan antioksidan yang kuat dan terkait


3/12

dengan banyak efek biologis yang berguna dari produk tanaman lainnya misalnya pada buah

anggur. PA adalah polifenol utama dalam anggur merah maupun bii anggur yang memiliki

aktivitas antioksidan kuat. PA memberikan beberapa manfaat kesehatan, seperti

penghambatan sel, oksidasi /0/, agregasi platelet dan infeksi saluran kemih serta memiliki

sifat anti-inflamasi. Proantosianidin uga mempunyai aktivitas sebagai antibakteri, antivirus,

antikarsinogenik, anti-inflamasi, anti-alergi, dan vasodilatasi. 1raksi flavonoid (flavonol,

antosianin, flavan-3-ol, dan proantosianidin) yang ditemukan dari ekstrak ranberrymampu

menghambat pertumbuhan sel melalui 2 dan 2*45 arrest serta mampu menginduksi

apoptosis pada sel kanker payudara 50A-5'-$36. "edangkan proantosianidin pada bii

anggur memiliki aktivitas penghambatan pertumbuhan sel kanker melalui down e7pression

regulation 'l-8/ (inhibitor kematian) sehingga dapat menginduksi apoptosis.


4/12

-A- II

PEM-AHASAN

Pada suatu analisis aktivitas ataupun identifikasi kandungan proantosianidin (PA),

tahap pertama yang dilakukan adalah proses ekstraksi bagian tanaman kemudian dilakukan

tahap isolasi. 9solasi merupakan suatu ara untuk mengambil satu senyawa aktif yang

terdapat di dalam tanaman untuk mengetahui senyawa yang berkhasiat dalam tumbuhan.

9solasi senyawa biasanya dilakukan dalam tiga tahap yaitu tahap ekstraksi, pemisahan dan

pemurnian serta identifikasi.

:kstraksimerupakan proses pemisahan suatu komponen dari suatu ampuran

berdasarkan proses distribusi terhadap dua maam pelarut yang tidak saling berampur.

:kstraksi merupakan suatu ara untuk mengambil atau menarik komponen kimia yang

terkandung dalam sampel menggunakan pelarut yang sesuai. Pemisahan dan pemurnian

senyawa tanin dapat dilakukan dengan teknik kromatografi seperti romatografi /apis !ipis

(/!) dan romatografi olom. 9dentifikasi suatu senyawa hasil isolasi sebaiknya dimulai

dari penentuan senyawa dengan menggunakan ui fitokimia yaitu pereaksi pendeteksi

senyawa tanin, dan dilanutkan dengan mengukur spektra-spektra yang khas dari suatu

senyawa, misalnya dengan menggunakan spektrofotometer ultraviolet-tampak dan

inframerah.

9solasi proantosiandin (PA), dilakukan pada 3 tanaman yang berbeda yaitu sebagai

berikut analisis PA pada batang tanaman Ephedra sinicayang memiliki aktivitas antibakteri;

analisis PA pada akar tanaman pakis tangkur (Polypodium feei 5:!!) dan buah grape

pomae (Vitis vinifera L.) dengan aktivitas nya sebagai antioksidan. 'erikut merupakan tahap

ekstraksi dan isolasi dari ketiga tanaman tersebut

. 2rape Pomae

Persiapan sampel dan ekstraksi polifenol mentah

'agian dari kulit, batang dan bii digiling menadi serbuk(> (?etsh 2mb@#o2, @aan, Berman) sesaat sebelum melakukan

ekstraksi pelarut, satu bagian dari bii yang dipipihkan oleh double roller (diameter rol &mm;

lubang pengeluaran C mm) digabungkan ke motor asinkron (/eroy "omer-, AngoulDme,

Pranis) sebelum ekstraksi pelarut.

:kstraksi polifenol mentah dari setiap buah anggur padat. :kstraksi pertama dilakukan

pada rasio g anggur padat per > m/ metanolair (%>*>, v4v), diikuti oleh aseton air

(6*6, v4v), pada rasio yang sama. "etiap ekstraksi pelarut dilakukan dengan pengadukan
http://dedy21.com/2009/03/11/kelarutan/http://dedy21.com/2009/03/11/kelarutan/


5/12

selama 3 am dalam atmosfir nitrogen, pada suhu kamar, kemudian ditempatkan pada suhu *>

E # dalam waktu semalam. "upernatan digabungkan dan disimpan pada suhu *> E#. "ebelum

ketahap fraksinasi atau analisis, ekstrak diuapkan kondisi vakum pada E# untuk

menghilangkan pelarut organik, diikuti oleh ekstraksi dengan heksana (tiga kali dengan

volume yang sama) untuk menghilangkan senyawa lipid, dan diuapkan lagi untuk

menghilangkan residu dan kemudian disaring. "istem penguapan yang digunakan terdiri dari

rotavapor ?-*>>, water bath '-$F> dan pompa vakum G-6>> bentuk 'uhi (1lawil, "wiss),

dan sirkulasi hiller 1rigiterm dari BP "eleta ('arelona, "panyol).

9solasi dan purifikasi total sampel polifenol

"etiap ekstrak air dimuat pada /i#hroprep?P-% (*>> H*6mmid; *6-$>mm ukuran

partikel; 5erk, 0armstadt, Berman) kolom yang dikondisikan pada p@ ,> dengan dapar

fosfat dan kemudian dilakukan kromatografi. "etelah diui dengan larutan buffer fosfat (p@

,>) untuk menghilangkan asam fenolik, kolom dielusi dengan metanol untuk menentukan

reovery dari fraksi polifenol total setelah penguapan pada suhu E# sampai kering,

dilarutkan dalam air, disaring dan kemudian di liofilisasi. "erbuk yang diperoleh disimpan

pada *>E# sampai digunakan.

*. 'atang :phedra "inia (:phedraeae)

0ilakukan pengeringan batang :phedra sinia dan bubuk herba batang :phedra sinia

(36 kg) yang berurutan, diekstraksi selama * am setiap kali di bawah refluks dikontrol

dengan :t@-@* (F66 v 4v, 3H*%>/) dan :t@-@* (, v4v, 3H*%>/). /arutan ekstrak

gabungan terkonsentrasi di bawah mengurangi tekanan untuk mendapatkan ekstrak kasar

(6.%%> g), dan kemudian ekstrak kasar dihentikan di @* dan dip artisi seara berturut-turut

dengan petroleum eter (&>-F> E#), :tA, dan-'u@.

'agian n-'u@ yang larut (3>> g) menadi sasaran kromatografi kolom 8A0-*

(#.#.) dan dielusi dengan gradien @*-5e@ (>-> , v4v) untuk menghasilkan tuuh

fraksi (1r. -1r.). 1r.*(6.> g) dipisahkan pada kolom !oyopearl @I-$># dan dielusi

dengan gradien @*-5e@ ( >-> , v4v) untuk memberikan lima subfraksi 1r.*A-1r.*:.

"enyawa 6 (.* g) dan6 (.6 g) diperoleh dari 1r.*'($*.> g) dan 1r.*# (66.* g) berdasarkan

kromatografi ulang pada kolom !oyopearl @I-$># dan dielusi dengan 5e@. 1r.*0 (66.

mg), 1r.*: (&*.F mg) dan 1r.*1 (3. mg) sub-eluat dikromatografi ulang dengan ara yang

sama untuk menghasilkan senyawa (6. mg), % (3.3 mg) danF (3.* mg). 1r.3 (**.3 g)

diterapkan pada kolom !oyopearl @I-$># dan dielusi dengan gradien @*-5e@ ( >->

, v4v) untuk memberikan tuuh subfraksi 1r.3A-1r.32. 1r.30 (6.3 mg) dikromatografi ulang

pada kolom !oyopearl @I-$># dan dielusi dengan 5e@ untuk menghasilkan senyawa *>


6/12

(*. mg). "enyawa (6.> mg) diperoleh dari 1r.32 (&*.F mg) sub-eluat. 1r.$ (*>.* g)

diterapkan pada kolom !oyopearl @I-$># dan dikromatografi dengan ara yang sama.

"enyawa * (3.F mg) dan $ (*.% mg) diperoleh dari 1r. $A (*. mg) setelah re-kromatografi

dengan @P/# preparatif (6J -*J, &> menit, asetonitril-air). "enyawa3 (3.% mg) dan &

(*. mg) diisolasi dari 1r. $' (*F.% mg) dengan menggunakan kondisi yang sama seperti

untuk 1r. $A. 1r.$# (3*.F mg) menadi sasaran @P/# preparatif menggunakan asetonitril-air

sebagai fase gerak (6J -*J, &>menit) untuk menghasilkan senyawa (6.6 mg) dan $ (3.

mg). "enyawa 3 (*.3 mg) dan > (&.> mg) diperoleh dari sub-eluat 1r.$0 (3&,F mg)

menggunakan kondisi yang sama. "enyawa F ($.* mg) dan (3. mg) diperoleh dari

1r.$:(.F mg), sedangkan senyawa & (6.3 mg) dan * (*. mg) diisolasi dari 1r.$1 (*%.&

mg) fraksi. 1r.6(3>.F g) dikromatografi pada kolom !oyopearl @I-$># dengan gradien

@*-5e@ (3 *-> , v4v), dan 1r.6 ' (*&.F mg) menadi sasaran @P/# preparatif (6J-

*J, &>menit, asetonitril-air) untuk menghasilkansenyawa% (6.* mg).

3. :kstraksi dan 9solasi proantosianidin dari akar pakis tangkur

"erbuk akar pakis tangkur diekstraksi dengan 5e@ seara maserasi selama tiga kali *$

am pada suhu kamar. :kstrak dipekatkan dalam evaporator 'uhi >**, ekstrak kental

disimpan dalam awan penguap. > gram ekstrak dipartisi dalam ampuran heksan-air (3),

kemudian kloform-air (3), etil asetat-air (3) dan n-butanol-air (3) sehingga diperoleh

fraksi heksan, fraksi kloroform, fraksi etilasetat, faksi n-butanol dan fraksi air. 1raksi etil

asetat dikromatografi kolom dengan menggunakan silika gel dengan fase gerak 5e@ @*.

@asil diui seara kualitatif dengan kromatografi lapis tipis (fase gerak #@#l35e@@*

K3.6>.*6L) dengan membandingkan pada senyawa murni proantosianidin. 1raksi yang

memiliki ?f sama difraksinasi lagi hingga mendapatkan senyawa murni proantosianidin.


7/12

'erikut merupakan skema dari tahap ekstraksi dan isolasi dari ketiga tanaman

. 9solasi 2rape

Catrid Ceptember-pak 18

Elusi metanol

Elusi metanol

Elusi etil asetat

Metanol:air (80:20 v/v) danaseton:air (75:25 v/v).Elusidengan metanol danmenggunakan Sep. Pak !8


8/12


9/12

3. 9"/A"9 :P@:0?A "9M9#A

"erbuk batang :."inia (36 g)

0ielusi dengan gradien @*-

5e@ (>->, v4v)

dipisahkan pada kromatografi kolom toyopearl @I-$>o# dan dielusi dengan

gradien @*-5e@

Ekstrak Et#$$2# (!:! v/vEkstrak Et#$$2# (*5:5 v/v

%r.7%r.%r.5%r.%r.2 (!5 %r.%r.

%r.+ (202 g)%r.' (22' g) %r.5 ('0* g)

, !27 - 2*8 '2* ' * E !7 * % 28

%r. 2,%r. 2E

%r 5- (2*

% '!! 57' 2*E 2* 55! 552- +2

,


10/12

'erdasarkan proses isolasi dari ketiga tanaman tersebut dapat tidak ditemukan adanya

perbedaan pada tahap tersebut. !ahapan isolasi pada ketiga tanaman sama yaitu meliputi

tahap ekstraksi, pemisahan dan pemurnian maupun identifikasi. !etapi, perbedaan hanya

terletak pada pelarut yang digunakan baik dalam tahap ekstraksi maupun pemisahan,

penggunaan fase gerak dan fase diam. 5isalnya pada tahap ekstraksi, menggunakan pelarut

yang berbeda yaitu metanol dan etanol. Alasan penggunaan pelarut etanol pada tahap

ekstraksi adalah karena kedua pelarut tersebut (etanol dan metanol) merupakan pelarut

golongan alkohol dimana senyawa golongan tanin dapat larut dalam pelarut diatas dan kedua

pelarut tersebut merupakan pelarut organik.

:tanol mempunyai polaritas yang tinggi sehingga dapat mengekstraksi bahan lebih

banyak dibandingkan enis pelarut organik yang lain. :tanol mempunyai gugus karboksil

(alkohol) dan karbonil (keton) termasuk dalam pelarut polar. :tanol mempunyai titik didih

yang rendah dan enderung aman. :tanol uga tidak beraun dan berbahaya. 5etanol salah

satu senyawa hidrokarbon dari golongan alkohol (#n@*n+*) dengan gugus alkil hidroksil (-

@). ?umus umum metanol adalah #@$ atau sering ditulis #@3-@. 9a merupakan bentuk

alkohol paling sederhana. Pada Nkeadaan atmosferO ia berbentuk airan yang ringan, mudah

menguap, tidak berwarna, mudah terbakar, dan beraun dengan bau yang khas (berbau lebih

ringan daripada etanol). 5erupakan airan polar yang dapat berampur dengan air, alkohol-

alkohol lain, ester, keton, eter, dan sebagian besar pelarut organik. 5etanol sedikit larut

dalam lemak dan minyak. "eara fisika metanol mempunyai afinitas khusus terhadap

karbondioksida dan hidrogen sulfida.


11/12

-A- III

KESIMP.LAN

9solasi yang dilakukan pada ketiga tanaman tersebut tidak ditemukan adanya

perbedaan yang signoifikan pada tahap tersebut. 0imana perbedaan terletak pada pelarut

yang digunakan baik dalam tahap ekstraksi maupun pemisahan. Pelarut yang dapat digunakan

dalan proses ekstraksi adalah aseton, alkohol, gliserol, ataupun pelarut organik. Pelarut yang

digunakan merupakan pelarut yang benar-benar dapat melarutkan senya PA dalam simplisia

kering yang dianalisis.Perbedaan lain yang terdapat dalan proses isolasi adalah pada

penggunaan fase gerak dan fase diam dalam analisi menggunakan kromatografi.


12/12

DAFTAR P.STAKA

ylli, Petri., Mohyne , /iisa., Puupponen, ?iitta., Iesterlund, 'enita., /eppanen,

!iina., Ielling,. 5oilanen, B. :. dan @einonen, 5arina. *>./ingonberry (Gainium vitis-

idaea) and :uropean #ranberry (Gainium miroarpon) Proanthoyanidins 9solation,

9dentifiation, and 'ioativities.Agriculrtural and Food Chemistry J. @alaman 333Q33%$.

5uhtarid, "ubarnas, Anas dan 9ndrayati Menden. Aktivitas Antioksidan

Proantosianidin dari Akar Pakis !angkur (Polypodium feei 5:!!) "eara 9n Gitro. 1akultas

1armasi dan 59PA Rniversitas Padaaran

"S, 5. de., Bustino, G., "pranger, 5. 9., =hao, T. U., @an / dan . "un, '. ". *>3.

:7tration Tields and Anti-o7idant Ativity of Proanthoyanidins from 0ifferent Parts of

2rape Pomae :ffet of 5ehanial !reatments. Phytochem. Analysis J. Gol. *6. @alaman

3$Q$>. wileyonlinelibrary.om

Iang, @ongyu., "ong , /i7ia., 1eng, "hengbao., /iu, Tuanai., =uo ,2ang., /ai, 1uli.,

@e, 2uangyuan., #hen, 5ingie dan @uang, 0eian. *>3. #harateriation of

Proanthoyanidins in "tems of Polygonum multiflorum !hunb as "trong "tarh @ydrolase

9nhibitors. olecules J. Gol. %, @alaman **66-**&6.

=ang, 8inyu., "hang, 5ingying., 8u,1eng., /iang, Bing., Iang, 8uan., 5ikage,

5asayuki dan #ai, "haoVing. *>3. A-!ype Proanthoyanidins from the "tems of Ephedra

sinica(:phedraeae) and !heir Antimirobial Ativities. 5oleules B.@alaman 6*-6%F

Documents

Makala fitokim qu