PARAZITOLOGIE MEDICALAAN UNIVERSITAR 2014-2015LP 2*

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN:

AMIBIAZA, TRICHOMONIAZA,LAMBLIAZA, CRIPTOSPORIDIAZA.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN AMIBIAZA

Agentul etiologic: Entamoeba histolytica (Entamoeba dysenteriae).

-amiba intestinala obligatoriu patogena, hematofaga, capabila sa invadeze tesuturi intestinale si extraintestinale, cu raspandire hematogena pluriviscerala.

Morfologie: se prezint sub 3 forme:

1. Forma vegetativ hematofag -forma magna,

2. Forma vegetativ- forma minuta,

3. Forma chistic.

1.Forma vegetativ hematofag (forma magna), patogen:msoara 2040m;este foarte mobil (prin emiterea a numeroase pseudopode);histolitic (enzimele proteolitice, se nfund n grosimea peretelui colic, provocnd microabcese ce pot conflua);nu se nchisteaz; endoplasma conine hematii.

Forma vegetativ (forma minuta), nepatogen: msoar 10 15 m; mobilitate redus;citoplasma este difereniat n dou zone: ectoplasma hialin i endoplasma granular, n care se gsete nucleul i produse ingerate (bacterii);nucleul este sferic, situat excentric, are un cariozom central i cromatina periferic dispus regulat de-a lungul peretelui nucleului;triete n lumenul colonului;d natere la forma chistic, ns, se poate transforma n form histolitic.

Forma chistic, nepatogen:msoara 10-15 m diametru;este sferic, nconjurat de un perete gros i rezistent;chistul matur (infectant) are 4 nuclei;se elimin prin materiile fecale; este forma de rezisten i de diseminare n mediul extern.

Clinic: 1. amibiaza intestinala (dizenterie amibiana) 2. extraintestinala

1.Amibiaza intestinal acut (dizenterie amibian): se caracterizeaz prin scaune frecvente (5 20/zi), afecale, constituite din mucus i snge, scuipat rectal, nsoite de tenesme;

evolueaz, n mod obinuit, spre cronicizare, caracterizat prin perioade de remisie de durat variabil, atunci cnd prevaleaz forma minuta; alternnd cu perioade de acutizare, cnd prevaleaz forma histolitic.

Amibiaza extraintestinal (amibiaza visceral)

Amibiaza hepatic se manifest prin dureri n hipocondrul drept, hepatomegalie, febr (38 - 39C).

Amibiaza pleuropulmonar este secundar unei atingeri hepatice.

Diagnosticul parazitologic:-sunt necesare 4-6 probe de scaun, recoltate la interval de 7-10 zile

1.Examenul microscopicPreparat nativ cu ser fiziologic sau lugol: examinarea imediata a mucozitatilor sanguinolente sau a puroiului evidentiaza numeroase eozinofile, putine polimorfonucleare si amibe vii care au miscari lente;citoplasma contine numeroase vacuole si hematii care o diferentiaza de amibele nepatogene.

Frotiu colorat Giemsa - evidentiaza:Forma magna: se intalneste numai in dizenteria acuta;Citoplasma este diferentiata in doua zone : ectoplasma hialina colorata in albastru si endoplasma granulata, care contine vacuole si hematii in diferite stadii de digestie, colorate portocaliu;

Nucleul este rotund, situat excentric, cromatina nucleara este dispusa regulat, sub forma de granule fine, pe marginea interna a membranei nucleare.

Forma minuta: se intalneste la cronici si purtatoricitoplasma diferentiataectoplasma contine levuri si bacterii, niciodata hematii.

Preparate directe Kato-Miura sau preparate de concentrare (Bailanger): in faza cronica si la purtatori, chistul constituie elementul de diagnostic.

2.Rectosigmoidoscopia si examenul histopatologic: evidentiaza abcesul in buton de camasa- un ulcer cu margini neregulate, bine dezvoltat in profunzime si ingust spre suprafata, plin cu exudat galben-negricios.

3.Imunodiagnostic: este indicat in amibiaza extraintestinala;

detectarea serologica a anticorpilor si/sau a antigenelor specifice E.histolytica cu teste immune:ELISA, Latex-aglutinare, PCR.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN TRICHOMONIAZA

Agentul etiologic: Trichomonas vaginalis- flagelat cavitar al aparatului uro-genital

Morfologie:Trofozoitul:ovalar, masoara 15 lungime, 7 lime; extremitatea anterioar lit, cea posterioar efilat;n regiunea anterioar prezint:un nucleu cu 5 cromozomi;un complex chinetostomal din care pleac:3 5 flageli4 prsesc anterior celula1 recurent parial fixat pe membrana ondulant1 axostil cu rol n susinerestrbate longitudinal celula, exteriorizndu-se prin extremitatea posterioarparalel cu membrana ondulant exist o formaiune intracitoplasmatic numit costa

parazitul mai conine lizozomi, aparat Golgi, organite cu rol n metabolismnu prezint forma chistic

Clinic: trichomoniaza uro-genitala

La femeie: (simptomele sunt exacerbate pre si post-menstrual)

prurit si arsura vulvo-vaginala;

secretie vaginala abundenta (leucoree) alb-verzuie, spumoasa si fetida (peste alterat);

disurie, dispareunie.

La barbat:

frecvent, asimptomatic (purtator);

uretrita- secretie uretrala- picatura matinala, alb-verzuie, spumoasa, fetida;

arsura si prurit la nivelul meatului uretral;

disurie, polakiurie.

Recoltarea si produsul patologic:

la femeie: se recolteaza secretia vaginala din fundul de sac posterior sau lateral (se recomanda ca recoltarea sa se efectueze in primele 4-5 zile postmenstrual, cand parazitii se gasesc in faza de maxima multiplicare);

secretia vaginala se poate recolta cu ajutorul unei spatule sau a unui tampon de vata, fixat la capatul unei baghete, care apoi se introduce intr-un tub, continand solutie de glucoza 5% in ser fiziologic.

la barbat: se recolteaza secretia uretrala, obtinuta prin masajul prostatei sau urina.

Diagnosticul parazitologic:1.Examenul microscopic: se poate efectua in preparat nativ sau frotiu.

Preparat nativ - parazitul i pstreaz mobilitatea cteva ore dac este pstrat la 20 0 C

se pot observa parazitii vii, rotunzi sau ovalari, cu miscari active.

Frotiu colorat Giemsa: se evidentiaza trofozoitul.

- trofozoitul poate fi sferic, oval sau neregulat;

- citoplasma albastra, are un aspect vacuolar cu fine granulatii de culoare rosie;

- nucleul este mare, rosu-violet, situat anterior;

- axostilul (elementul care permite diferentierea de celulele epiteliale) si flagelii se coloreaza in rosu carmin.

2. Cultivarea pe medii nutrititive (Diamond, Lash, Lffler) mai ales la persoane asimptomatice.

3. Imunodiagnostic: prin identificarea antigenelor specifice in secretii vaginale/uretrale/urina mai ales n infeciile asimptomatice ale brbatului -reacia de aglutinare, RIF, ELISA.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN LAMBLIAZA (GIARDIOZA)

Agentul etiologic: Giardia intestinalis (Giardia lamblia, Lamblia intestinalis)

-flagelat cavitar al intestinului subtire

Morfologie: parazitul exista sub doua forme: trofozoit si chist.Trofozoitul:msoar 15 m lungime i 10m lime;corpul: piriformfa dorsal bombat, rugoas, cu numeroase depresiuni;fa ventral, plat.faa ventral prezint:2 nuclei anteriori;4 perechi de flageli cu originea n 8 blefaroplati: flagelii anteriori, posteriori i caudali prsesc parazitul prin regiunea anterioar, posterioar, caudalflagelii ventrali sunt situai pe faa ventral a parazituluicorpi parabazali semilunari;dublu axostil median.

Chistul:

oval, 9-15 ;

perete dublu;

2 sau 4 nuclei la extremiti;

resturi de flageli n form de litera S, dispui n axul chistului.

Clinic: lambliaza (giardioza)

asimptomatica- la adulti sau purtatori;

diareea este simptomul dominant: 5-10 scaune/zi, mai ales matinale i postprandiale, pstoase sau lichide, clare sau de culoare galben, uneori spumoase sau grsoase;

dureri abdominale, greturi, anorexie, scadere ponderala;

alergodermii (urticarie, eczeme).

Diagnosticul parazitologic:

n primele 3 sptmni nu apar parazii n scaun;

examinarea se repet de 4 ori la fiecare 7 zile.

1.Examenul microscopic:Preparat nativ n ser fiziologic sau lugol:se evidentiaza chistul in scaunul format/steatoreic (la cronici si la purtatori);

se evidentiaza trofozoitul in scaunul diareic (in formele subacute) sau in lichidul duodenal (tubaj duodenal sau enterotest).

(Enterotestul= o capsula gelatinoasa, enterosolubila, care contine un fir de nailon; ajunsa in intestin gelatina se dizolva, iar parazitii se fixeaza de firul de nailon. Dupa 2 ore, firul se extrage si mucusul impreuna cu parazitii se depun pe o lama de sticla, care se examineaza microscopic.)

2.Imunodiagnostic: detectarea Ag n materii fecale (indica o infectie activa)

ELISA, imunoelectroforeza, contraimunoelectroforeza, imunoperoxidaza.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN CRIPTOSPORIDIAZA

Agentul etiologic: Cryptosporidium

-parazit oportunist, a carui patogenitate este conditionata de starea sistemului imun al gazdei;

- habiteaza intracellular in celulele epiteliale ale tractusului digestiv, si mai rar, pulmonar.

Morfologie: are doua forme evolutive- trofozoit si oochist

Trofozoitul:masoara intre 2-5 in diametru;este forma vegetativa;se localizeaza in marginea in perie a celulei epiteliale intestinale, intracellular.

Oochistul:

4-5 in diametru;

este sferic-ovoid;

este inconjurat de un perete gros;

contine 4 sporozoiti in forma de corn si o masa de reziduri granulare.

Clinic: criptosporidioza

La imunocompeteni: boal diareic autolimitat de scurt durat (1-2 sptmni), cu vindecare spontan;

3-10 scaune/zi, apoase, nesanguinolente i nepurulente, coninnd uneori mucus; dureri abdominale, greuri, nsoite uneori de febr.

La imunodeficieni:

boal diareic persistent asociat cu malabsorbie;

scaunele diareice sunt apoase, nesanguinolente, holeriforme, 10-20/zi, antrennd pierderi hidroelectrolitice importante, ntre 1-25 l/zi. Evoluia este spre agravare progresiv, cronic i moarte.

Diagnosticul parazitologic:

-practicarea a minimum doua examene coprologice la interval de 7 zile (excretia oochistilor poate fi discontinua)

-excretia de oochisti este mai intensa in primele 4-5 zile ale bolii, apoi descreste treptat in saptamana a doua si se opreste dupa 1-2 saptamani de la incetarea diareei;

-rareori oochisturile se pot intalni in scaunele formate.

1.Examenul microscopic: Frotiu din materii fecale coloratie Ziehl Neelsen modificata:oochistul apare ca o formatiune rotunda, cu dimensiuni de 4-6, colorata in rosu, pe fondul verde al detritusurilor celulare, levurilor, germenilorprezinta un perete celular gros, in interior are elemente granulare colorate in brun inchis, dispuse la periferiecentral prezinta o zona necolorata

Frotiu din materii fecale coloratie Giemsa- oochisturile apar bleu-pal, cu elemente granulare interne rosii pe fond violet inchis

2.Examenul histologic al biopsiei duodeno-jejunale: permite evidentierea parazitului in diferite stadii evolutive (schizonti, gametociti).

3. Imunodiagnostic: detectarea coproantigenului gp900 specific pentru oochist (teste ELISA)