LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIAANALISA KUANTITATIF TERHADAP
KARBOHIDRATdisusun untuk memenuhi tugas mandiri mata kuliah
praktikum biokimia
Oleh :Nama: Muhammad Dzaky Alfawwaz
NIM/Kelas: 1147020044/Biologi 3-B
Kelompok: 6
Dosen: Rita Kharismawati Hidayat S. Si
Tanggal Praktikum: Senin, 5 Oktober 2015
Tanggal Pengumpulan: Senin, 19 Oktober 2015
JURUSAN BIOLOGIFAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGIUNIVERSITAS ISLAM
MEGERI SUNAN GUNUNG DJATI BANDUNG2015BAB IHASIL PENGAMATANA. Hasil
PengamatanPerlakuanHasil
I. Perlakuan Awal Sampel1. 2 gr jagung digerus dan disaring.2.
Filtrate diencerkan hingga mencapai volume 50 ml.3. 10 ml filtrate
disiapkan dalam labu Erlenmeyer.4. Ditambahkan 20 ml aquades, 4 ml
HCl 25%, dan batu didih.5. Dipanaskan dalam penangas air selama
46,5 menit dengan suhu 74,8oC.6. Didnginkan selama beberapa menit.
Dan dinetralkan dengan NaOH7. Ditambahkan 10 ml larutan Luff
school.
1. Didapatkan filtrate jagung berwarna kuning keruh 2 gr.2.
Filtrate jagung berwarna kuning kelabu sebesar 50 ml.3. 10 ml
filtrate jagung kuning kelabu di dalam Erlenmeyer4. Didapatkan
filtrate berubah warna menjadi kelabu dan homogen.5. Filtrate
berubah warna menjadi kelabu pekat, homogen,dan ada 2 fasa, yaitu
fasa atas dengan tak berwarna dan fasa bawah dengan warna kelabu
pekat.6. Filtrate berwarna kelabu pekat dan pH netral.7. Filtrate
berubah warna kembali menjadi biru tosca pekat.
II. Perlakuan Awal Blangko1. 10 ml aquades disiapkan dalam labu
Erlenmeyer2. Ditambahkan 20 ml aquades, 4 ml HCl 25%, dan batu
didih.3. Dipanaskan dalam penangas air selama 46,5 menit dengan
suhu 74,8oC.4. Didnginkan selama beberapa menit dan dinetralkan
dengan NaOH.5. Ditambahkan 10 ml larutan Luff school.
1. 10 ml aquades tak berwarna di dalam Erlenmeyer2. Didapatkan
larutan tak warna menjadi dan homogen.3. Larutan tetap tak berwarna
menjadi homogen, dan ada 2 fasa, yaitu fasa atas dan fasa bawah tak
berwarna dengan ada cincin ditengah-tengahnya.4. Larutan tak
berwarna menjadi dan homogen dan pH netral.5. Larutan berubah warna
kembali menjadi biru putih kental.
III. Titrasi Sampel1. Filtrate ditambahkan dengan 1 gr KI dan 6
ml H2SO4 6 N 2. Dititrasi pertama kali dengan Na2S2O3 0,8 ml.3.
Ditetesi dengan 5 tetes amilum.4. Dititrasi kembali dengan Na2S2O3
12,9 ml.
1. Filtrate berubah warna menjadi coklat tua, pekat dan
berbuih.2. Filtrate berubah warna menjadi biru tosca muda dan ada
tanda titik akhir perubahan warna ungu di larutan cepat menghilang.
3. Filtrate tetap berwarna biru tosca muda.4. Filtrate tetap
berwarna biru tosca muda.
IV. Titrasi Blangko1. Blangko ditambahkan dengan 1 gr KI dan 6
ml H2SO4 6 N 2. Dititrasi pertama kali dengan Na2S2O3 14,3 ml.3.
Ditetesi dengan 5 tetes amilum.4. Dititrasi kembali dengan Na2S2O3
10,9 ml.
1. Blangko berubah warna menjadi coklat tua, pekat dan
berbuih.2. Blangko tetap berwarna biru putih kental 3. Blangko
berubah warna menjadi biru tosca muda dan lebih jernih.4. Blangko
tetap berwarna biru tosca muda dan lebih jernih.
Perhitugan kuantitatif gula reduksi :A = x N = x 0,1 = 3,6 ml =
3,6 mgB = mg glukosa + ( x 0,4) = 3,6 + (2,5 x 0,4) = 3,6 + 1 = 4,6
mgC = x 100% = x 100% = 0,0115 x 100% = 1.15%
BAB IIPEMBAHASANPada praktikum kali ini praktikan membahas
mengenai analisa kuantitatif karbohidrat. Analisa kuantitatif yaitu
analisa yang dilakukan untuk untuk mengetahui kadar suatu senyawa
dalam sampel, dapat berupa satuan mol, ataupun persentase dalam
gram. Analisa kuantitatif dilakukan dengan menggunakan pereaksi
yaitu Reagen Luff Schoorl. Penentuan kadar karbohidrat secara
kuantitatif dilakukan dengan metode Luff-Schoorl dengan prinsip
dasarnya adalah hidrolisis karbohidrat dalam sampel jagung menjadi
monosakarida yang dapat mereduksi CuO menjadi Cu. Sampel yang
digunakan adalah jagung, karena jagung mengandung karbohidrat dalam
bentuk polisakarida berupa karbohidrat kompleks. Pengukuran
karbohidrat yang merupakan gula pereduksi dengan metode Luff
Schoorl ini didasarkan pada reaksi sebagai berikut :R-CHO + 2Cu2+
R-COOH + Cu2O2Cu2+ + 4I- Cu 2I2 + I22S2O32- + I2 S4O62- + 2I-
Langkah awalnya berupa perlakuan awal sampel. Sampel berupa
jagung digerus kemudian disaring agar didaptkan filtratnya. Sampel
kemudian diencerkan dengan aquades sampai volume 50 ml dengan
tujuan agar tidak terlalu pekat. Filtrate kemudian ditambah dengan
dengan 4 ml HCL 25% yang berwarna kuning bening dan batu didih.
Dihasilkan larutan campuran berwarna kelabu. penambahan HCL ini
bertujuan untuk menghidrolisis karbohidrat kompleks, polimer
karbohidrat sulit bereaksi sehingga dengan penambahan asam polimer
akan terpecah menjadi monomer-monomer yang akan lebih bereaksi
dengan senyawa lain. Hidrolisis sampel dapat memisahkan filtrate
dengan karbohidrat. Sedangkan maksud penambahan batu didih adalah
untuk mencegah terjadinya letupan (bumping) pada saat pemanasan.
Kemudian filtrate dipanaskan didalam penangas air selama 46,5 menit
dengan suhu 74,8oC. Pemanasan ini dilakukan sampai pada larutan
terbentuk dua fasa, yaitu fasa atas dan fasa bawah atau endapan.
Proses pemanasan bertujuan untuk menghomogenkan filtrate. Proses
pemanasan diusahakan larut mendidih, hal ini dimaksudkan agar
proses reduksi berjalan sempurna dan Cu tereduksi. Kemudian
filtrate didinginkan, setelah dingin filtrat dinetralkan dengan
menambahkan larutan NaOH yang tidak berwarna sampai filtrate ber-pH
netral. Diuji dengan menggunakan pH indikator dan didapatkan pH
filtrate netral berkisar 7. Dalam uji pH harus diperhatikan dengan
baik karena pH yang terlalu rendah atau asam akan menyebabkan hasil
titrasi akan menjadi lebih tinggi dari sebenarnya, karena terjadi
oksidasi ion iodide menjadi I2. Sedangkan apabila pH yang lebih
tinggi atau basa akan menyebabkan terjadinya resiko kesalahan,
yaitu terjadinya reaksi I2 yang terbentuk dengan air. Filtrate yang
ber pH netral kemudian ditambahkan 10 ml luff schoorl yang berwarna
biru, sehingga larutan berubah warna menjadi biru tosca pekat.
Komposisi larutan Luff schoorl terdiri dari larutan CuSO4+5H2O,
larutan asam sitrat dan larutan Na2S2O3+IOH2O. Penambahan larutan
Luff schoorl ini bertujuan sebagai reagen dalam menganalisa
kandungan karbohidrat yang terdapat pada sampel. Langkah kedua
adalah perlakuan awal blangko. Pembuatan larutan blanko pada
dasarnya sama dengan perlakuan awal sample jagung, tapi tidak
berisi analit dan memakai aquades sebagai sampelnya. Tujuannya
untuk mengkomparasi filtrate dan sebagai larutan pembanding dalam
analisa. Pembuatan blanko dilakukan dengan cara penambahan total 30
ml aquades dengan 6 ml H2SO4. Penambahan ini akan menimbulkan
reaksi antara kuprioksida menjadi CuSO4 dengan H2SO4 dan CuSO4
tersebut bereaksi dengan KI.Langkah ketiga adalah titrasi sampel.
Filtrate ditambahkan 1 gram KI dan 6 ml H2SO4. Pada penambahan KI
pada filtrat tidak terjadi perubahan warna, namun pada saat
filtrate ditambahkan H2SO4 secara perlahan pada larutan terbentuk
buih-buih berwarna putih dan terdapat sedikit asap, kemudian
filtrate berubah warna menjadi coklat pudar. Warna coklat yang pada
filtrate disebabkan penambahan kalium iodide dan asam sulfat pada
campuran filtrate, penambahan campuran ini akan menimbulkan reaksi
antara kuprioksida menjadi tembaga sulfat dengan asam sulfat dan
tembaga sulfat tersebut bereaksi dengan kalium iodide. Reaksi
tersebut ditandai dengan timbulnya buih dan warna larutan menjadi
coklat.Filtrate campuran kemudian dititrasi pertama kali dengan
cepat dengan menggunakan larutan Na2S2O3 0,8 ml. Titrasi harus
dilakukan dengan cepat untuk menghindari penguapan kalium iodide.
Seharusnya filtrate campuran dititrasi sampai berubah warna menjadi
kuning pudar, tetapi didapatkan warna biru tosca muda. Hal ini
tidak sesuai karena filtrate campuran berubah pH menjadi tak netral
sebelum dititrasi. Saat titrasi terdapat indicator titik akhir
dengan adanya warna keungu-unguan yang nampak di dalam filtrate
campuran dan cepat menghilang. Kemudian filtrate campuran
ditambahkan 5 tetes amilum, pada saat penambahan amilum tidak
terjadi perubahan warna. Amilum digunakan sebagai indicator.
Penambahan indicator ini dilakukan setelah campuran mendekati titik
akhir, hal ini dikarenakan apabila dilakukan di awal titrasi maka
amilum dapat membungkus iod dan menyebabkan warna titik akhit tak
terlihat tajam. Kemudian larutan campuran dititrasi kembali dengan
Na2S2O3 12,9 ml sampai yang seharusnya mencapai titik akhir yang
ditandai dengan berubahnya warna larutan menjadi putih, namun
didpatakan warna biru tosca muda. Namun setelah itu dilakukan
perhitungan kadar gula reduksi menggunakan rumus yang telah
ditetapkan, maka didapatkan bahwa dari 2 gr filtrate jagung
didapatkan 1,15% karbohidrat didalamnya.Langkah keempat adalah
titrasi blangko. Larutan blangko ditambahkan 1 gram KI dan 6 ml
H2SO4. Pada penambahan KI pada larutan blangko tidak terjadi
perubahan warna, namun pada saat larutan blangko ditambahkan H2SO4
secara perlahan pada larutan terbentuk buih-buih berwarna putih dan
terdapat sedikit asap, kemudian larutan blangko berubah warna
menjadi coklat pudar. Warna coklat yang pada larutan blangko
disebabkan penambahan kalium iodide dan asam sulfat pada larutan
blangko, penambahan campuran ini akan menimbulkan reaksi antara
kuprioksida menjadi tembaga sulfat dengan asam sulfat dan tembaga
sulfat tersebut bereaksi dengan kalium iodide. Reaksi tersebut
ditandai dengan timbulnya buih dan warna larutan menjadi
coklat.Larutan blangko kemudian dititrasi pertama kali dengan cepat
dengan menggunakan larutan Na2S2O3 14,3 ml. Seharusnya larutan
blangko dititrasi sampai berubah warna menjadi kuning pudar, tetapi
didapatkan warna biru tosca muda dengan lebih jernih. Hal ini tidak
sesuai karena larutan blangko berubah pH menjadi tak netral sebelum
dititrasi. Saat titrasi tidak terdapat indikator titik akhir.
Kemudian larutan blangko ditambahkan 5 tetes amilum, pada saat
penambahan amilum tidak terjadi perubahan warna. Kemudian larutan
campuran dititrasi kembali dengan Na2S2O3 10,9 ml sampai yang
seharusnya mencapai titik akhir yang ditandai dengan berubahnya
warna larutan menjadi putih, namun didpatakan warna biru tosca muda
dengan lebih jernih.Hal diatas sesuai dengan yang dinyataan
Abdurrahmat (2010), bahwa pada praktikum kali ini dilakukan
penetapan karbohidrat melalui penetapan kadar gula reduksi dengan
metode Luff-Schoorl ditentukan bukan kuprooksidanya yang mengendap
tetapi dengan menentukan kuprooksida dalam larutan sebelum
direaksikan dengan gula reduksi sesudah reaksi dengan sample gula
reduksi yang dititrasi dengan Na-Thiosulfat. Selisihnya merupaka
kadar gula reduksi. Reaksi yang terjadi selama penentuan
karbohidrat dengan cara Luff-Schoorl adalah mula-mula kuprooksida
yang ada dalam reagen akan membebaskan Iod dari garam KI. Banyaknya
iod dapat diketahui dengan titrasi menggunakan Na-Thiosulfat. Untuk
mengetahui bahwa titrasi sudah cukup maka diperlukan indikator
amilum. Apabila larutan berubah warna dari biru menjadi putih
berarti titrasi sudah selesai. Selisih banyaknya titrasi blanko dan
sample dan setelah disesuaikan dengan tabel yang menggambarkan
hubungan banyaknya Na-Thiosulfat dengan banyaknya gula reduksi.
Persamaan reaksi yang terjadi selama proses praktikum
berlangsung adalah sebagai berikut.R-COH + 2CuO Cu2O (s) + R-COOH
(aq)H2SO4 (aq) + CuO CuSO4 (aq) + H2O (l)CuSO4 (aq) + 2KI (aq) CuI2
(aq) + K2SO4 (aq)2CuI2 Cu2I2 + I2I2 + Na2S2O3 Na2S4O6 + NaII2 +
amilum Biru
BAB IIIKESIMPULANDari hasil pengamatan yang telah dilakukan
dapat disimpulkan bahwa:1. Analisis kuantitaif karbohidrat dapat
dilakukan secara metode kimiawi dengancara Luff Schoorl dengan
menghidrolisis sample menjadi monosakarida yang dapat mereduksi
oksida pada luff yaitu Cu2+ menjadi Cu+.2. Selisih dari banyaknya
jumlah titrasi blanko dan jumlah titrasi sample sebelum dan setelah
titrasi disesuaikan menggunakan tabel yang menggambarkan hubungan
banyaknya Na2S2O3 dengan banyaknya gula reduksi.3. Kandungan
karbohidrat pada filtrate jagung 2 gr adalah sebanyak 1,15% dari
beratnya.
DAFTAR PUSTAKAAbdurahmat,S, Asep. 2010. Bahan Ajar dan Penuntun
Biokimia. Gorontalo: Universitas negeri Gorontalo.Hawab, H. M.
2003. Pengantar Biokimia. Malang: Bayumedia PublishingKusharto C M,
Suhardjo. 1992. Prinsip-Prinsip Ilmu Gizi. Yogyakarta : Penerbit
Kanisius. Ngili, Yohanis. 2009. Biokimia Struktur dan Fungsi
Biomolekul. Yogyakarta :Graham Ilmu..Purba, Michael. 2007. Kimia
Jilid 3. Erlangga. Jakarta.
LAMPIRAN
Gambar 1. Filtrat dan larutan blangko setelah ditambahkan 1 gr
KI dan 6 ml H2SO4 6N
Gambar 2. Filtrat sebelum titrasi sampel
Gambar 3. Filtrat sesudah titrasi sampel
Gambar 4. Larutan blangko sebelum titrasi blangko
Gambar 5. Larutan blangko setelah titrasi blangko
