Laboratorní p říru čka - zuusti.czVotava, M.: Léka řská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232 . 12 Nabídkový list laborato ř bakteriologie

1

Laboratorní příručka

IP-2/A-01 Pracovišt ě

Oddělení léka řské mikrobiologie Centra imunologie a mikrobiologie

Na kabát ě 229

400 11 Ústí nad Labem

Vedoucí CIM: RNDr.Vlastimil Král, CSc. Tel: 477751800 Vedoucí OLM: MUDr.Miriam Králová Tel: 477751831

2

Mikrobiologická Mykobakteriologická

Mykologická Parazitologická

vyšet ření

provádí:

Laborato ř léka řské mikrobiologie tel.477751830 Laborato ř diagnostiky TBC tel.477751836

3

OOBBSSAAHH 11.. ÚÚvvoodd 22.. PPoouužžiittéé zzkkrraattkkyy 33.. PPřřííjjeemm vvzzoorrkkůů 44.. DDoossttuuppnnoosstt sslluužžeebb 55.. ZZvvllááššttnníí ppoožžaaddaavvkkyy (( ssttaattiimm,, úússttnníí,, ooppaakkoovvaannáá vvyyššeettřřeenníí)) 66.. VVyyřřiizzoovváánníí ssttíížžnnoossttíí NNaabbííddkkoovvýý lliisstt llaabboorraattoořřee bbaakktteerriioollooggiiee 77.. TTeecchhnniikkaa aa nnáálleežžiittoossttii vvyyššeettřřeenníí pprriimmáárrnníícchh bbiioollooggiicckkýýcchh vvzzoorrkkůů nnaa kkuullttiivvaaccii aa cciittlliivvoosstt 77..11 HHCCDD,, DDCCDD,, lliiqquuoorr 77..22 SSppuuttuumm 77..33 DDuuttiinnyy oorrggáánnůů 77..44 LLiiqquuoorr llaatteexxoovvoouu aagglluuttiinnaaccíí 77..55 SSttěěrryy zz kkůůžžee,, ssppoojjiivvkkoovvýý vvaakk,, zzvvuukkoovvoodd 77..66 SSttoolliiccee 77..77 SSttoolliiccee nnaa pprrůůkkaazz vviirroovvýýcchh aannttiiggeennůů 77..88 MMoočč aa mmoočč nnaa SSGGAA 77..99 MMoočč nnaa pprrůůkkaazz aannttiiggeennuu SSttrreepp..ppnn.. aa LLeeggiioonneellllaa ppnn.. 0011 77..1100 SSttěěrr zz GGUUTT 77..1111 SSttěěrr nnaa pprrůůkkaazz mmyykkooppllaassmmaatt 88 OOddbboorrnnáá lliitteerraattuurraa kk ooddbběěrrůůmm nnaa KK++CC NNaabbííddkkoovvýý lliisstt llaabboorraattoořřee pprrůůkkaazzuu mmyykkoobbaakktteerriiíí vv pprriimmáárrnníícchh bbiioollooggiicckkýýcchh vvzzoorrccíícchh 99 TTeecchhnniikkaa aa nnáálleežžiittoossttii ooddbběěrruu nnaa BBKK 99..11 SSppuuttuumm nnaa BBKK

4

99..22 AAssppiirráátt zz bbrroonncchhuu,, BBAALL,, 99..33 LLyymmffaattiicckkáá uuzzlliinnaa 99..44 MMoozzkkoommííššnníí mmookk 99..55 MMeennssttrruuaaččnníí kkrreevv 99..66 SSttoolliiccee 99..77 MMoočč 99..88 LLaarryynnggeeáállnníí vvýýttěěrr 99..99 SSttěěrr zz ppííššttěěllee,, zz rráánnyy 1100 PPoozznnáámmkkyy kk vvyyššeettřřeenníímm nnaa BBKK,, ddooppllňňkkoovváá vvyyššeettřřeenníí 1111.. OOddbboorrnnáá lliitteerraattuurraa kk vvyyššeettřřeenníímm nnaa BBKK NNaabbííddkkoovvýý lliisstt llaabboorraattoořřee mmyykkoollooggiiee 1122.. TTeecchhnniikkaa ooddbběěrruu pprriimmáárrnníícchh bbiioollooggiicckkýýcchh vvzzoorrkkůů nnaa mmyykkoollooggiicckkéé vvyyššeettřřeenníí 1122..11 HHCCDD 1122..22 DDCCDD 1122..33 KKoožžnníí ppoovvrrcchh aass ddeettrriittuu kkoožžnníícchh aaddnneexxaa 1122..44 OOkkoo,, uucchhoo 1122..55 TTkkááňň,, bbiiooppssiiee 1122..66 TTeekkuuttýý hhnniiss,, eexxssuuddááttyy 1122..77 SSeekkrreett zz UUGGTT ♂♂ aa žžeennyy 1122..88 MMoočč 1133.. OOddbboorrnnáá lliitteerraattuurraa kk mmyykkoollooggiicckkýýmm vvyyššeettřřeenníímm NNaabbííddkkaa úússeekkuu ppaarraazziittoollooggiiee 1144 TTeecchhnniikkaa aa nnáálleežžiittoossttii kk ooddbběěrruu nnaa ppaarraazziittoollooggiicckkáá vvyyššeettřřeenníí 1144..11 SSttoolliiccee nnaa pprrůůkkaazz ssttřřeevvnníícchh ppaarraazziittůů 1144..22 SSttoolliiccee nnaa ppřřííttoommnnoosstt mměěňňaavveekk 1144..33 PPrrůůkkaazz vvaajjííččeekk eekkttooppaarraazziittůů

5

1144..44 PPrrůůkkaazz vvýývvoojjoovvýýcchh ssttááddiiíí kkrreevvnníícchh ppaarraazziittůů –– ttlluussttáá kkaappkkaa 1144..55 MMOOPP –– mmiikkrroosskkooppiicckkýý oobbrraazz ppooššeevvnníí 1144..66 KKuullttiivvaaccee bbiiččííkkoovvccůů 1155.. OOddbboorrnnáá lliitteerraattuurraa kk vvyyššeettřřeenníí nnaa ppaarraazziittyy Literatura: Přecechtěl, F.: Lékařská mikrobiologie praktikum. SPN 1976 Jabor,A, Bébrová, E.: Laboratorní příručka OHS Kladno 1999 Miller, J.,M.: Specimen management in Clinical Mikrobiology. ASM Press USA 1999

1. Úvod Vážení klienti, kolegyně a kolegové,

předkládáme Vám nabídku mikrobiologických (M), mykologických (My), parazitologických (P) vyšetření a služeb oddělení léka řské mikrobiologie (OLM) Centra imunologie a mikrobiologie Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem.

Spektrem vyšetření a snahou o rozvoj oboru, které jsou založeny na aktuálních potřebách klinických oborů splňujeme požadavky na moderní laboratorní diagnostiku přenosných onemocnění. Laboratoře OLM se pravidelně účastní systémů externího hodnocení kvality na úrovni ČR.

Kvalitní a včasný diagnostický postup však není jediným cílem týmu OLM CIM ZÚ Ústí nad Labem. Nedílnou součástí naší práce je účast na interpretaci výsledků pro vlastní klinickou diagnózu a konzultace. OLM spolupracuje s ostatními odděleními CIM ZÚ.

Poskytujeme informace týkající se:

6

• správného odb ěru biologického materiálu • výběru vhodných transportních souprav • konzultace nových metod moderní bakteriologické diagnostiky • sledujeme výskyt rezistence k antimikrobiálním a antimykobakteriálním látkám • účastníme se akreditovaných programů dalšího vzdělávání v IPVZ Praha a NCO NZO Brno • úzce spolupracujeme s orgány ochrany veřejného zdraví (KHS) a pomáháme spoluvytvářet podklady pro

práci epidemiolog ů KHS Ústeckého kraje

Cílem našeho přístupu je snaha o kvalitní vyšetření biologického materiálu, snížení nákladů na vyšetření a úsilí o minimální zatížení vyšetřovaného člověka.

Předkládaná nabídka vyšetření je periodicky aktualizována. Za veškeré připomínky a podněty týkající se naší práce předem děkujeme. Zveme rovněž na www.zuusti.cz.

V Ústí nad Labem, srpen 2010 ing.Pavel Kutil

ředitel pověřený řízením ZÚ se sídlem v Ústí nad Labem Kontakty: MUDr.Miriam Králová tel.: 477751831 MUDr.Dagmar Šrejberová tel.: 477751841 Mgr. Romana Chrudimská tel.: 477751808 Lenka Bednaříková tel.: 477751830

7

2. Použité zkratky AP CEM

Akreditační pracoviště Centra epidemiologie a mikrobiologie

AT antituberkulotikum ATB antibiotikum BAL bronchoalveolární laváž BK bacil Kochův = průkaz Mycobacterium tuberculosis CIM Centrum imunologie a mikrobiologie DCD dolní cesty dýchací DDD dezinfekce, dezinsekce, deratizace DG diagnóza GBS streptokoky ze skupiny B HCD horní cesty dýchací CHT chemoterapeutikum KHS Krajská hygienická stanice LIS laboratorní informační systém LV laryngeální výtěr M mikrobiologie MAC komplex M.avium-intracellulare MOP mikrobiální obraz poševní MOTT Mykobakteria jiná než tuberkulózní = podmíněně patogenní OLM ěle Oddělení lékařské mikrobiologie OPP Oddělení přípravných provozů NRL národní referenční laboratoř OOVZ Orgán ochrany veřejného zdraví

8

P parazitologie PCR polymerázová řetězcová reakce SOP standardní operační postup STD sexuálně přenosná infekce SZÚ Státní zdravotní ústav ZP zdravotní pojišťovna ZÚ Zdravotní ústav Svoz primárních biologických vzorků pro OLM CIM je zajišťován vlastní svozovou službou, jejíž provoz je povolen OOVZ, a která dodržuje pravidla Evropské dohody o mezinárodní silniční přepravě nebezpečných věcí (ADR). Optimální trasa svozu je zajišťována pracovníky svozové služby. Je aktuálně upravována na základě požadavků zákazníků, kteří dostávají vizitky s kontaktem na oba řidiče svozu. Klienti mohou telefonicky přímo u řidičů objednat přepravu urgentního vzorku. Na pokyn indukujícího lékaře si nemocní zajišťují transport vzorků do laboratoře sami.

3. Příjem vzork ů Příjem vzorků ze svozu a individuálně doručených vzorků probíhá v budově Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem v přízemí vpravo v místnosti označené jako „Centrální příjem biologického materiálu“ nebo ve 2. patře vpravo přímo na OLM.

Za správné provedení odběru, řádné vyplnění žádanky a zabezpečení materiálu pro transport odpovídá odesílatel vzorku. Za zabezpečení materiálu během transportu odpovídá přepravce.

Důvody pro odmítnutí biologického materiálu nebo požadavku o vyšetření v laboratoři: • žádanka s biologickým materiálem, na které chybí nebo jsou nečitelné základní údaje pro podklady k účtování

se ZP (číslo pojištěnce, příjmení a jméno, kód zdravotní pojišťovny, ICZ odesílajícího lékaře nebo pracoviště, základní diagnóza) a tyto údaje není možné ihned doplnit na základě dotazu u klienta či

9

odesílajícího lékaře nebo obsahuje požadavky na vyšetření, které laboratoře OLM CIM ZÚ Ústí nad Labem neprovádějí

• žádanka nebo odběrová nádobka jsou viditelně kontaminovány odebraným biologickým materiálem (nedokonale uzavřená nádobka, materiál vylitý)

• biologický materiál, který nelze věrohodně identifikovat • biologický materiál doručen bez žádanky • odběrová souprava s biologickým materiálem, kde zjevně došlo k nedodržení časového faktoru k doručení,

vzorek neodpovídá objemem požadovanému vyšetření, vzorek bez zajištění odpovídajících podmínek transportu apod.

• biologický materiál v nesterilní odběrové soupravě D:06

4. Dostupnost služeb laborato ří OLM CIM – provozní doba

pondělí až pátek 7:00 – 15:30 Oddělení lékařské mikrobiologie CIM sobota 7:00 – 09:00 Laboratoř bakteriologie OLM jindy: statimy aj. urgentní stavy dle epidemiologické situace v regionu na služ.telefon: 477751830 Příjem vzorků k laboratornímu vyšetření je prováděn do ukončení uvedené pracovní doby. Provoz OLM CIM je zajištěn také ve svátečních dnech obdobně jako o sobotách od 07:00 – 09:00, popř. na uvedeném služebním telefonu.

10

5. Zvláštní požadavky na vyšet ření (statimové vzorky, ústní požadavky, dodate čná a opakovaná vyšet ření)

5.1 Statimové vzorky Indikace akutních vyšetření je omezena pro případy hospitalizovaných nemocných v těžkém stavu, když by výsledek akutního vyšetření mohl bezprostředně ovlivnit péči o nemocného.

Netýká se bakteriologických vyšetření, u nichž je materiál vždy zpracováván ihned po doručení do laboratoře. Kultivační nálezy podléhající hlášení, nálezy u vybraných diagnóz jsou telefonicky sdělovány odesílateli jako předběžný výsledek.

Biologický materiál na akutní vyšetření musí být dodán s příslušnou dokumentací a označením „urgentní“ nebo „statim“ neprodleně po odběru do laboratoře, kde odborný pracovník provede vyšetření. Výsledky urgentních vyšetření se sdělují telefonicky a vydávají se v podobě výsledkového listu ihned po kontrole a podepsání odpovědným pracovníkem.

5.2 Ústní (nap ř. telefonické) požadavky na vyšet ření, dodate čná vyšet ření Ze vzorků dodaných do laboratoře lze dodatečně, např. na základě telefonické konzultace a po následném objednání indukujícím lékařem, provádět další požadovaná vyšetření jen při dodržení následujících pravidel:

Dodatečná vyšetření požadovaná akutně budou provedena neprodleně po telefonickém doobjednání. Jméno žadatele se zapíše do záznamového listu telefonického hlášení nebo do příslušné žádanky o předchozí vyšetření. Pracovník, přijímající takový požadavek, stvrzuje písemně podpisem doobjednání vyšetření.

Dodatečná vyšetření nepožadovaná akutně se provedou až po doručení dodatečné žádanky do laboratoře.

11

Možnost dodatečného vyšetření závisí na množství uchovaného vzorku a specificitě požadovaného vyšetření. O stanovení citlivosti na ATB je možno požádat v průběhu kultivace vzorku.

5.3 Opakovaná vyšet ření Pokud při transportu nebo manipulaci se vzorkem dojde ke znehodnocení vzorku, odpovědní pracovníci laboratoře informují indukujícího lékaře, případně telefonicky dohodnou nový odběr biologického vzorku. Pokud se vyskytnou v preanalytické fázi vyšetřením vzorku nějaké důvody, které by mohly limitovat výsledek, indukující lékař o tom obdrží informaci telefonicky popř. písemně ve formě komentáře k výsledku vyšetření. D:11

6. Vyřizování stížností Pokud se vyskytnou výhrady k odborné činnosti laboratoří CIM OLM ZÚ nebo vzniknou-li neshody, zda laboratoř pracuje v souladu s uváděnou politikou jakosti, může oprávněný klient podat písemnou stížnost (do14 dnů od obdržení výsledku): příjemcem je vždy vedoucí CIM OLM

je proveden písemný záznam o stížnosti a nápravná doporučená opatření stěžovatel je do 30 dnů písemně informován vedoucím centra o vyřízení stížnosti spolu s návrhy na řešení.

E:03 Literatura: Přecechtěl, F.: Lékařská mikrobiologie praktikum. SPN 1976 Jabor,A, Bébrová, E.: Laboratorní příručka OHS Kladno 1999 Miller, J.,M.: Specimen management in Clinical Mikrobiology. ASM Press USA 1999 Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8th Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Votava, M.: Lékařská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232

12

Nabídkový list laborato ř bakteriologie – Mikroskopická a kultiva ční vyšet ření Typ

vzorku Doporu čená odb ěrová souprava

Teplota úschovy do transportu

Max. doba transportu do lab.

Předběžný výsledek/ doba odezvy

Poznámka Provádí se

výtěr z horních cest dýchacích (krk, nos, tonzily)

tampon v Amiesově transportním médiu

pokojová T 24 hod. 24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod.

podezření na záškrt, černý kašel konzultovat telefonicky

po – so

sputum, BAL sterilní nádobka se širokým hrdlem

2-8 °C 2 hod.

24 hod.

24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod.

po – so

likvor sterilní zkumavka

Pokojová T co nejrychleji (2 hod.)

mikroskopie za 2 hod., kultivace za 24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod.

denně

likvor na průkaz bakteriálních antigenů latexovou aglutinací

sterilní zkumavka – 2 ml

Pokojová T co nejrychleji (2 hod.)

výsledek v den přijetí do laboratoře

cílené vyšetření dle klinického stavu (rozhoduje odebrané množství)

po – so

13







hnisy punktáty aspiráty plodová voda, stěry z oka, ucha, ran, kůže výtěry sekční materiál aj. na aerobní vyšetření

tekutý materiál, sterilní stříkačka, sterilní zkumavka stěr–tampon v Amiesově event.Stuartově transportním médiu

2-8 °C pokojová T

co nejrychleji (2 hod.)

mikroskopie v den přijetí do laboratoře, aerobní kultivace za 24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod. 72 hodin

nutno zabránit přístupu vzduchu (jednorázová stříkačka s chráněným konusem)

denně

stolice – aerobní vyšetření a průkaz Campylobacter jejuni


pokojová T 24 hod. 48 hod./ v závislosti na nálezu 72 hod., pozitivní nález sdělen ihned telefonicky

podezření na choleru konzultovat telefonicky, návraty z ciziny vyznačte na žádance

po – so

Stolice Průkaz adenovirů a rotavirů

Suchý vatový tampon Příp.odběrová souprava na parazitologii

Pokojová T Chladnicová T

Ihned 48 hod.

20 minut od doručení biol. materiálu

po – so

14

Nabídkový list laborato ř bakteriologie – Mikroskopická a kultiva ční vyšet ření Typ vzorku Doporu čená

odb ěrová souprava





stolice – anaerobní vyšetření

tampon v Amiesově transportním médiu, stolice v odběrové nádobce s lopatičkou (na parazity), min. 5 g

pokojová T ihned do 24 h.4°C

Do 24 hod -20°C.

v závislosti na nálezu 48-96 hod.

cílené vyšetření dle klinického stavu

po – so

kultivace výtěru z genitourinárního traktu (vagina, vulva, cervix, mužská a ženská uretra)

tampon v Amiesově transportním médiu, podložní sklo se zábrusem

pokojová T 3 h.– 24 hod.

24 /dle nálezu 72 hod GO 24-72 hod. ihned telefonicky

včetně N.gonorrhoeae, anaerobů, sklo na požádání dodáme

po – so

výtěr z orofaryngu nebo rekta na kultivaci N. gonorrhoeae


pokojová T 3 h.– 24 hod.

24 / 72 hod., GO ihned telefonicky

po – so

15




Max. doba transportu

do lab.



moč – kvantitativní vyšetření

sterilní nádobka se širokým hrdlem, sterilní zkumavka

2-8 °C co nejrychleji (2 hod.)

24 hod., v závislosti na nálezu 48-72 hod.

pro kvantitativní vyšetření moče nejsou vhodné komerční odběrové soupravy (Uricult aj.)

po – so

moč novorozenců na průkaz antigenu Streptococcus agalactiae


2-8 °C co nejrychleji (2 hod.)

výsledek 24-48 hod.

žádost o vyšetření vyznačte na žádance

po – so

Moč: průkaz přítomnosti antigenu Legiolella pneum. Streptococcus pneumoniae


2-8°C co nejrychleji

výsledek v den přijetí do laboratoře

žádost o vyšetření vyznačte na žádance

po – pá

jiné tělní tekutiny dialyzační roztoky

aerobní kultivace anaerobní kultivace aerobní kultivace po podání ATB anaerobní

pokojová T co nejrychleji (max. 24 hod.)

aerobní kultivace v závislosti na nálezu za 24 –72 hod. anaerobní – 5 dní

denně

16

Užívané zkratky výkon ů a postup ů:

OS: odběrová souprava TS: transportní souprava PT: pokojová teplota = + 20°C – + 25°C CHT: chladnicová teplota = obvykle +4°C - +8°C

7.Technika a náležitosti odb ěru biologických materiál ů pro vyšet ření na kultivaci a citlivost

Biologické materiály ke kultivačnímu průkazu mikroorganismů na kultivaci a citlivost (= K+C) se odbírají :

• do sterilních odběrových souprav • v dostatečném množství • z místa předpokládaného výskytu biologického původce • obvykle před zahájením antibiotické terapie • v případě kontrolního bakteriologického vyšetření se druh terapie a její délka vyznačí v příslušné

kolonce na průvodním listu k požadovanému vyšetření • odebrané vzorky se označí identifikačními štítky • vyplní se průvodní list = žádanka o vyšetření • zajistí se rychlý transport do laboratoře

17

Typ vyšet ření:

7.1 Stěr z horních cest dýchacích = nos, krk

Nemocný je odebírající osobou poučen o smyslu odběru, jeho technice a délce laboratorního vyšetření. Vzorek: stěr, výtěr OS/TS: sterilní vatový tampón na špejli/ Amiesovo transportní médium Odběr: setřít tampónem postižené místo a tento zasunout do plastového sáčku popř. do PVC pouzdra s transportním médiem Transport: teplota / čas = PT/max. 24 hodin

7.2 Sputum, bronchoalveolární laváž

Nemocný je odebírající osobou poučen o smyslu odběru, jeho technice a délce laboratorního vyšetření. Vzorek: ranní sputum před provedením osobní hygieny , aspirát biol. materiálu při bronchoskopii OS/TS: sterilní sputovka z plastu, sterilní zkumavka Odběr: sám nemocný po instrukci nebo instrumentálně při výkonu lékařem Transport: ChT/ihned popř. max. do 24 hodin

7.3 Biologické materiály z dutin orgán ů – exsudáty, sekrety, tekuté hnisy, mozkomíšní mok (kultiva čně)

18

Lékař odebere biologický materiál do sterilní nádoby z plastu nebo do sterilní zkumavky a vyplní ji celou biologickým materiálem příp. do injekční stříkačky a nasadí na jehlu kónus jehly popř.sterilní gumovou zátku

• Pozn: laboratoř na vyžádání odběrovou soupravu dodá přes svozovou službu. Na průvodním listě vyznačí, zda požaduje i kultivaci na průkaz anaerobních mikroorganismů. Vzorek: tekutý biologický materiál OS/TS: sterilní zkumavka, jednorázová stříkačka s konusem Odběr: lékař specialista sterilním instrumentariem Transport: PT/ ihned popř. max. do 24 hod.

7.4 Mozkomíšní mok (p římý pr ůkaz bakteriálních antigen ů) latexovou aglutinací

Pro vlastní odběr mozkomíšního moku platí stejné podmínky jako pro kultivaci moku. Vzorek: tekutý biologický materiál OS/TS: sterilní zkumavka, jednorázová stříkačka s konusem Odběr: lékař specialista sterilním instrumentariem Transport : PT/ ihned popř. max. do 2 hod. po odběru

7.5 Stěry – z kůže, spojivkového vaku, ze zevního zvukovodu,

Vzorek: stěr z místa výskytu původce zánětu, afektu OS/TS: sterilní vatový tampón na špejli/ Amiesovo transportní médium Odběr: setřít tampónem postižené místo a tento zasunout do PVC pouzdra s transportním médiem

19

Transport: PT/ do 24 hod.

7.6 Stolice – aerobní a mikroaerofilní kultivace ( Campylobacter spp.)

Vzorek: stolice OS/TS: sterilní odběrový tampon/ Amiesovo transportní medium Odběr: komerční sterilní tampon na plastové tyčince; odebírající zavede tampon do rekta max. 2 cm hluboko a odebraný vzorek zasune do transportního media v PVC pouzdře Transport: PT/ChT / do 24 hod.

• Pozn: kultivace prokáže bakteriální původce průjmů, případnou serotypizaci poddruhů EPEC apod. • Při návratu z exotických destinací prosíme o sdělení na průvodním listě – místo, trvání a charakter obtíží kvůli

možnosti průkazu zde neobvyklých původců

7.7 Stolice – p římý pr ůkaz antigenu adenovir ů a rotavir ů

Vzorek: stolice velikosti hrášku OS/TS: sterilní odběrový tampon/ odběrovka z plastu na parazitologii Odběr: komerční sterilní tampon na plastové tyčince; odebírající zavede tampon do rekta max. 2 cm hluboko a lopatičkou odebraný vzorek zasune do transportního PVC pouzdra Transport: PT/ChT / ihned popř. v ChT do 48 hod.

7.8 Moč – kultivace + cílený pr ůkaz Streptococcus agalactiae ( GBS)

20

Vzorek: 1) ranní střední proud moči 2) cévkovaná moč

OS/TS: sterilní širokohrdlá odběrová nádoba z plastu; sterilní zkumavka Odběr: ad 1) po předchozím omytí zevního ústí uretry proudem pitné vody a za použití mýdla vymočit do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml ad) 2) aseptické zavedení sterilní cévky; odstříknutí první porce do odpadu a odběr středního proudu do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml Transport: ChT/ do 2 hod. od odběru

• Pozn.: způsob odběru určí lékař dle diagnózy nemocného

7.9 Moč – cílený pr ůkaz solubilního antigenu Streptococcus pneumoniae a Legionella pneumophilla O1

Vzorek: 1) ranní střední proud moči

2) cévkovaná moč OS/TS: sterilní širokohrdlá odběrová nádoba z plastu; sterilní zkumavka Odběr: ad 1) po předchozím omytí zevního ústí uretry proudem pitné vody a za použití mýdla vymočit do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml ad) 2) aseptické zavedení sterilní cévky; odstříknutí první porce do odpadu a odběr středního proudu do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml Transport: ChT/ do 2 hod. od odběru

• Pozn.: způsob odběru určí lékař dle diagnózy nemocného

21

7.10 Stěry z genitoureterálního traktu ♂+♀na K+C

Vzorek : výtěr sterilním vatovým tampónem z místa předpokládané infekce OS/TS: sterilní odběrový tampon/ Amiesovo transportní medium Odběr: provádí lékař – specialista po lehkém stlačení vyšetřované oblasti GUT. Setře vytékající sekret sterilním tampónem (1-2 ks) Transport: PT/ ihned – max. 24 hod.

• Pozn.: jeden tampón pro standardní kultivační vyšetření • jeden tampón pro mikroskopické vyšetření sekretu • u mužů ranní odběr sekretu před vymočením min. 3 hodiny • u obou pohlaví z rekta po zasunutí tampónu do oblasti max. 3 cm

7.11 Stěry z genitoureterálního traktu ♂+♀ pro stanovení p řitomnosti Mykoplazmat

Vzorek : výtěr = seškrab z uretry (♂) nebo cervixu (♀) provede ošetřující lékař OS/TS: brush tampón/ transportní médium R 1 Odběr: seškrab sliznice s detritem buněk a vytřepání biologického materiálu do média R1 Transport: PT/ do 5 hod. ChT/ 48 hod. • Pozn.: odběrové brush tampóny a médium R1 dodá na požádání OLM CIM ZÚ

22

8. Odborná literatura k odb ěrům biologických materiál ů K+C Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Gerg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X Str. 15-47 Duben, J. a kol.: Vyšetření při bakteriálních onemocněních, Avicenum Praha, 1986, 08-078-86 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8th Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Votava, M.: Lékařská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232

23

Nabídkový list laborato ř mykobakteriologie - Mikroskopická a kultiva ční vyšet ření Typ vzorku

Doporu čená odb ěrová souprava


Max. doba transportu do laborat.



Aspirát Punktát Hnis

sterilní nádobka se širokým hrdlem

2-8°C 2 hod. - 48 hod.

Mikroskopie 24h Kultivace až 9 týdnů

Kultivaci v Bactec vyznačte

po - pá

Sputum BAL

sterilní nádobka se širokým hrdlem

2-8°C 2 hod. - 48 hod.

Mikroskopie 24h Kultivace až 9 týdnů


po – pá

Likvor sterilní zkumavka Pokojová teplota ihned Mikroskopie 24h Kultivace až 9 týdnů


po - pá

Tkáň Sterilní nádobka 2-8°C Do 48 hod. Mikroskopie 24h Kultivace až 9 týdnů


po - pá

Moč Sterilní nádobka 2-8°C

Do 48 hod. Mikroskopie se neprovádí Kultivace až 9 týdnů

Vzorek 30 ml

po - pá

24

Laryngeální výtěr Stěr z píštěle

3 sondy na drátě= 1 vyš.=dodá ZÚ na vyžádání

2-8°C

Do 48 hod. Mikroskopie se neprování Kultivace až 9 t.


po - pá

Stolice Odběrovka pro parazitol.vyš.

2-8°C

Do 48 hod. Mikroskopie se neprování Kultivace až 9 t.

Kultivaci v Bactec vyznačte Vzorek vel. fazole

po - pá

9. Technika a náležitosti k odb ěru biologických materiál ů pro vyšet ření na mykobakteria (=BK) K odběrům biologických materiálů se používají doporu čené sterilní odb ěrové komer ční soupravy. Případně OLM CIM ZÚ dodá speciální odběrovou soupravu na telefonické vyžádání (= LV) 47 7751836. Transport vzorků k vyšetření zabezpečuje svozová služba ZÚ Ústí nad Labem tel:724 325 038; 602 215 986, a to dle pokynu a po schválení OOVZ. Induktor (= odesilatel) odebraného materiálu zajistí dokumentaci vzorku na průvodním listě k vyšetření. Doporučené odběrové soupravy jsou uvedeny v tabulce nabídky na mykobakteriologická vyšetření..

9.1 Sputum na BK

Se odebírá po instrukci a pod dohledem zdravotnického pracovníka, a to v množství min. 2 ml až max. 5 ml do plastikového sterilního kontejneru se zevně vyznačeným graduováním odebraného množství. Odběrové kontejnery dodá na vyžádání laboratoř dg. TBC OLM CIM ZÚ.

25

9.2 Aspirát, BAL, tekutý hnis, punktáty, výpotky, ž alude ční šťávy, tkán ě

Uvedené biologické materiály odebírá lékař při instrumentálních popř. sekčních výkonech. Nepoužívají se žádné fixační ani transportní tekutiny vyjma sterilního fyziologického roztoku při odběru aspirátu z bronchu případně odběru tkáně. Odebrané biologické materiály se ihned transportují do laboratoře. V případě nutnosti je lze do transportu uchovat v chladničce max. 48 hodin a kontaktuje se svozová služba ZÚ.

9.3 Lymfatické uzliny

Odebírá odborný lékař při instrumentálním výkonu, a to po dezinfekci odběrového místa 70% aethanolem. Jiný použitý dezinfekční roztok se vyznačí do průvodního listru k požadovanému vyšetření.

9.4 Mozkomíšní mok

Odebírá odborný lékař do sterilní Wassermannovy zkumavky nebo do sterilního kontejneru z plastu, a to minimálně v množství 1 ml. Odebraný materiál se ihned transportuje k vyšetření do laboratoře. V případě nutnosti jej lze do transportu uchovat při pokojové T max. 48 hodin a kontaktuje se svozová služba ZÚ.

9.5 Menstrua ční krev

Odebírá se menstruační krev na sterilní menstruační tampón ze stlačené gázy, a to při pravidelné menstruaci třikrát po sobě. Tampón se zavede do pochvy na noc po omytí zevních genitálií. Ráno odebírající zdravotník vyjme ženě tampón a umístí do sterilního PVC kontejneru na objem až 100 ml. Vhodnější je odběr živé tkáně při curretage.

26

9.6 Stolice

Odebírá se do sterilní odběrové soupravy s lopatičkou určenou pro parazitologická vyšetření, a to cca v množství velikosti lískového ořechu.

9.7 Moč

Odebírá si pacient sám po instrukci personálem. První ranní moč – střední proud – v množství minimálně 30 ml. Odběrový sterilní kontejner dodá OLM CIM ZÚ.

9.8 Laryngální výt ěr = LV

Odebírá se výjimečně u nespolupracujících pacientů: děti, klienti psychiatrických léčeben apod. Jeden odběr tj. jedno vyšetření = 3 LV vatové sondy z chrómmolybdenového drátu. Před vlastním odběrem se zvlhčí ve sterilním fyziologickém roztoku event. ve sterilní destilované vodě. Drát se ohýbá o stěnu odběrové soupravy tak, aby jej bylo možno zavést za kořen jazyka nad epiglottis. Poté pacient vydatně zakašle. Pacient je předem instruován o postupu odběru. Odebírající personál dodržuje zásady bezpečnosti a ochrany zdraví při rizikové práci tj. chrání se respirátorem a osobními ochrannými prostředky jako jsou pryžové rukavice, empír, štít. U LV se neprování přímá mikroskopie biologického materiálu.

9.9 Stěry z píšt ělí a hnisavých nehojících se ran a ložisek

K jednomu vyšetření se použijí 3 sterilní vatové sondy z chrómmolybdenového drátu. Zásadně neužívat detoxikované tampóny na špejli s aktivním uhlím. Nepoužívat odběrové tampóny s transportním médiem dle Amiese či Stuarta!

27

10. Poznámky k požadovaným vyšet řením na BK Speciality jako požadavky o rychlé kultivační tj. metabolické metody popř. o molekulárně genetické metody (= PCR) vyznačí induktor výkonu sám na průvodní list k vyšetření. V případě chybění přesného požadavku na typ vyšetření je lékařem laboratoře TBC osobně určeno, jak bude biologický materiál zpracován. Rychlou metabolickou kultivační metodou se obvykle zpracovávají vzácné biologické materiály ( např. mozkomíšní mok a punktáty) a všechny primární biologické vzorky s diagnózami A: 15 až A:19; A:31 a Z: 03.0. Molekulárně genetické metody průkazu původce TBC provádí Oddělení molekulární biologie CIM – vedoucí: ing. I.Stiborová Tel.: 47 7751804 Test buněčné imunity Quantiferon® TB Gold provádí Oddělení buněčné imunity CIM ZÚ – RNDr. J..Pohořská; Tel.: 47 7751806

11. Odborná literatura k odb ěrům biologických materiál ů na BK Aziz, M.A. et al.: Guidelines for Surveillance of Drug Resistence in Tuberculosis. WHO /TB/2003.320, Geneva 2003 Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Georg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X, Str. 15-47 Kent, P.T. et al.: Public Health Mycobacteriology. A Guide for the Level III Laboratory. CDC Atlanta USA 1985 Kolektiv autorů pod vedením SZÚ NRL pro mykobakteria: Doporučené standardní metody v mikrobiologii mykobakteriálních infekcí, TRIOS Praha 1993 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8th Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Narvaiz de Kantor, I. Et al.: Laboratory Services in Tuberculosis Kontrol Part I – III. WHO/TB/98.258, Geneva 1998 Pio,A., Chaulet, P.: Tuberculosis Handbook. WHO / TB/98.253, Geneva 1998

28

Nabídkový list mykologie - Mikroskopická a kultiva ční vyšet ření

Typ vzorku Odběrová

souprava Teplota uchování vzorku

Doba od odb ěru do transportu

Trvání vyšet ření


Orofaryngeální oblast=krk+nos+mandle

Sterilní odběrový vatový tampón v transport.médiu Amies

Pokojová T Ihned až 24 hodin

48 hod. až 2 týdny

Uvádějte přesnou Dg.

po - pá

Sputum, BAL, aspirát z bronchu

Sterilní širokohrdlá sputovka

2-8°C Ihned až 24 hodin

Mikroskopie 24 h. Kultivace až 2 týdny

po - pá

Vyšetření pohlavních orgánů

Sterilní vatový tampón v transp.médiu Amies

2-8°C ihned Mikroskopie ihned; kultivace 48 h. až 2 tý

po - pá

Likvor Sterilní zkumavka Pokojová T Ihned jinak max. 24 h. v chladu

Mikroskopie ihned; kultivace 48 h. až 2 tý

po - pá

Moč Sterilní nádobka, zkumavka

2-8°C ihned 48 h. až 2 tý po - pá

29

12. Technika a náležitosti odb ěru biologických materiál ů pro mykologická vyšet ření

12.1 Horní cesty dýchací

• Odběry na mykologická vyšetření odebírá ošetřující odborný lékař • Na sterilní vatový tampón • Nalačno • Pacient předem neprovádí hygienu dutiny ústní • Stírají se viditelné mléčné povlaky či pablány v dutině ústní • Výtěr z nosohltanu se provede sterilním tampónem na drátě • Diagnóza a předchozí léčba ATB popř. steroidy aj. se zaznamenají do průvodního listu

12.2 Dolní cesty dýchací

• Sputum se odebírá do sterilního širokohrdlého kontejneru z plastu • Při první ranní expektoraci • Materiál uchovat do transportu v chladničce • Při instrumentálních výkonech se odebírá BAL

30

12.3 Stěry z kožního povrchu a detritus kožních adnex

• Odběr sterilním vatovým tampónem do transportního Amiesova média • Sterilním skalpelem seškrábnout ložisko s povrchu do sterilní Petriho misky či do sterilní Wassermannovy

zkumavky-dodá OLM • Sterilními nůžkami nebo skalpelem odstřihnout či seškrábnout postižená adnexa tj. vousy, vlasy,

ochlupení, a to nejlépe i s vlasovým folikulem • U akutních procesů sejmout krusty do sterilní zkumavky • Obsah puchýřků nabodnout sterilní jehlou a poté setřít sterilním vatovým tampónem • U onychomykóz odstřihnout vnitřní část nehtového lůžka • Před odběrem dezinfikovat plochu 70% alkoholem

12.4 Stěry z oka, ucha

• Provádí odborný lékař – specialista sterilním vatovým tampónem • Krouživým pohybem po ložisku • Lze provést současně stěr druhým sterilním tampónem na podložní sklíčko k mikroskopickému vyšetření • Lze provést seškrab sterilním skalpelem

12.5 Tkáň, biopsie

• Odběr se provede do sterilní zkumavky se sterilním fyziologickým roztokem

31

12.6 Tekutý hnis, punktát, aspirát, exudát,

• Tekutý materiál se odebere sterilní stříkačkou a opatří kónusem • Obsah lze vstříknout do sterilní zkumavky • Neužívá se žádná fixační tekutina

12.7 Sekret z urogenitálního ústrojí ženy a muže

• Provádí lékař specialista za použití sterilního vyšetřovacího instrumentaria • U dětí a těhotných se zavede vatový tampón za ústí močové trubice a sekret se nechá nasáknout

vyšetřovanou tekutinou • U cervixu se odstraní hlenová zátka; poté se vatový tampón zanoří do cervikálního kanálu a rotačním

pohybem se provede odběr sekretu • U mužů odebíráme ejakulát po vícedenní sexuální abstinenci • Prostatický exprimát se nabere až po zevní masáži prostaty do sterilní zkumavky

12.8 Moč

• Pacienta poučíme předem o náležitostech odběru • Odebíráme do sterilní širokohrdlé nádoby • Odebírá se střední proud moči • Zabráníme kontaminaci ze zevního genitálu • Muži i ženy si před odběrem omyjí zevní genitál mýdlovou vodou • U novorozenců se očistí zevní genitál a nalepí se plastikový adhezivní sáček • V indikovaných případech provede lékař specialista suprapubickou punkci močového měchýře • Přednost se dává cévkované moči

32

13. Odborná literatura k mykologickým vyšet řením Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Georg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X Frágner, P.: Parazitické houby u člověka, Nakl.čs.akademie věd 1958 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8th Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Otčenášek,M. et al.: Vyšetřovací metody při mykotických onemocněních. Avicenum Praha 1990. ISBN 80-201-0059-8

33

Nabídka úseku parazitologie – Mikroskopická a kultiva ční vyšet ření Typ vzorku Odběrová





Stolice na průkaz střevních parazitů

Odběrovka pro paraz.vyšetření

2-8°C ihned Do 48 hod.

3 odběry po sobě s odstupem 2 dnů

po - pá

Průkaz měňavek=trofozoity+cysty

Odběrovka na objem 30 ml

Pokojová T Ihned po defekaci

24 hod. 10 ml stolice po - pá

Vyšetření vajíček Enterobius a Taenia

Vydá indukující lékař nebo ZÚ

Pokojová T Nemá čas.omezení

24 hod. Odběr ráno po instrukci lékařem

po - pá

Průkaz trofozoitů Giardia intest. v žaludeční šťávě

Zkumavka se zátkou

37°C ihned Tentýž den

Min. 5 ml po - pá

34






Kultivační vyšetření na Trichomonas vaginalis

Sterilní zkumavka s Diamondovým mediem + odběrovým tampónem (vydá ZÚ)

Pokojová T V den odběru

72 hodin Odběrovou soupravu skladovat ve 4°C; p řed odběrem temperovat na 25°C

po - pá

Stolice na průkaz vývojových stádií střevních parazitů

Širokohrdlý odběrový kontejner z plastu

Chladnicová T

V den odběru

48 hodin Stolice vel. Ořechu 3 odběry po sobě á 3 dny

po - pá

Čerstvá stolice na průkaz živých měňavek

Širokohrdlý odběrový kontejner z plastu

37°C Doru čit ihned po odběru

Max. do 24 hod. a temperovat na 37°C

10 ml čerstvé stolice

po - pá

Vajíčka Enterobius vermicularis

Průsvitná lepicí folie na podložním skle

Nemá omezení

Nemá omezení

10 minut od doručení vzorku

Odběr ráno před hygienou GUT Pásku přiložit na anální řasy a nalepit zpět na sklíčko

po – pá

35






Mnohobuněční červi nebo jejich části

Širokohrdlý PVC kontejner

Chladnicová T

Doručit ihned po odběru

Max. do 24 hod.

Nepřidávat fixační činidla Části červů lze vložit do fyziol. roztoku

po - pá

Krevní roztěr Nebo tlustá kapka na malárii

odmaštěná 2 podložní skla se zábrusem na popis

pokojová T Doručit ihned po odběru

ihned po doručení a obarvení v laboratoři

roztěr nechat dobře zaschnout dopravit v transportním pouzdře

po - pá

vaginální nátěr 1x Giemsa 1x Gram k průkazu bičíkovců, kvasinek aj.mikroflóry

sterilní podložní skla

pokojová T Doručit o ochranném pouzdře v den odběru

24-48 hodin roztěr nechat dobře zaschnout dopravit v transportním pouzdře

po - pá

kultivační vyšetření na bičíkovce=Trichomonas a rod Candida

transportní Diamondovo medium s odběrovým tampónem

pokojová T v den odběru

72 hodin transp. media skladovat v CHT max. 4 týdny před odběrem předehřát na PT

po - pá

36

Pozn.: serologická, imunochemická, molekulárně genetická vyšetření provádí CIM OLI. Dotazy na tel. 47 7751800, -802, 804. Přehled metod uveden na Intranetu ZÚ v laboratorní příručce Po telefonické domluvě je možné provést i specializovaná vyšetření jako krevní roztěr a tlustá kapka na malárii aj.

14.Technika a náležitosti k odb ěru biologických materiál ů na parazitologická vyšet ření

14.1 Stolice na st řevní parazity a jejich vývojová stádia

Nejlépe čerstvou a poté zchlazenou stolici objemu 5 cm3 tj. velikosti vlašského ořechu odebereme do kontejneru z plastu s lopatičkou k parazitologickému vyšetření. Do průvodního listu zaznamenáme makroskopický vzhled tj. viditelné příměsi: parazity příp. jejich části, krev, hlen. Vzorek označíme, zchladíme a do hodiny necháme dopravit k vyšetření do laboratoře.

14.2 Stolice k pr ůkazu p řítomnosti m ěňavek a živých stádií ostatních prvok ů

Čerstvá a temperovaná (=37°C) stolice v množství 10 cm3 se odebere do kontejneru z plastu. Do průvodního listu zaznamenáme makroskopický vzhled tj. viditelné příměsi: krev, hlen. barvu. Vzorek označíme a do hodiny necháme dopravit při PT k vyšetření do laboratoře.

37

14.3 Průkaz vají ček ektoparazit ů pomocí lepící pr ůhledné pásky

Před ranní hygienou perianální oblasti přiložíme proužek lepící pásky (Isolepa) na perianální slizniční řasy a otisk přilepíme na odmaštěné čisté podložní sklíčko, které na okraji označíme. Vzorek bez časového omezení transportujeme v ochranném obalu do laboratoře k vyšetření.

14.4 Krevní rozt ěr k vyšet ření krevních parazit ů – tlustá kapka

Standardním způsobem odebíráme venózní nebo kapilární krev opakovaně na začátku vzestupu tělesné. Vždy odebereme krev na 2 roztěry současně. K vyšetření tlustou kapkou přikládáme sklíčko k prstu vyšetřovaného shora. Odebíráme až 4. a další kapky. K odběru na vyšetření tlusté kapky vytvoříme na sklíčku 3 kapky do trojúhelníku a rohem dalšího sklíčka je rozetřeme po ploše sklíčka max. 1-1,5 cm2 po povrchu. Kromě tlusté kapky provedeme hranou sklíčka na další sklíčko krevní roztěr.

14.5 Roztěr vaginálního výt ěru k barvení MOP – Gram, Giemsa

Na 2 sterilní podložní skla provedeme odběrovým vatovým tampónem homogenní tenký roztěr. Necháme zaschnout při PT. Odběry na sklech popíšeme na okraj číslem či příjmením.. Vložíme do transportního pouzdra z plastu na sklíčka. Odešleme k vyšetření do laboratoře.

14.6 Kultivace bi číkovc ů (Trichomonas) a kvasinek

Zkumavky s transportním médiem temperujeme na 25°C a sekret odebraný sterilním vatovým tampónem ze zadní klenby poševní zalomíme o okraj zkumavky do média ve zkumavce. Co nejdříve transportujeme při PT do laboratoře k vyšetření.

15. Odborná literatura k vyšet řením na parazitologii Jírovec,O. a kol.: Parazitologie pro lékaře. Avicenum 1977 Murray,P.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 th Edition.Section X. AMS Press Washington DC 2003

38

Documents

Laboratorní p říru čka - zuusti.czVotava, M.: Léka řská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232 . 12 Nabídkový list laborato ř bakteriologie