UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
Facultad de Ingeniera IndustrialEspecialidad Ingeniera
Agroindustrial e Industrias Alimentarias
LABORATORIO N 8 y 9
TEMA:MICOLOGA - Enterobacteria
CURSO:MICROBIOLOGA GENERAL.
PROFESOR:Microbilogo: Bermejo Benites J.. ALUMNO : LOPEZ GARCIA
RUDY JEAN CARLOS
PIURA PER2014LABORATORIO 8 INTRODUCCIN
La micologa, tambin llamada micetologa, es la ciencia que se
dedica al estudio de los hongos. Ms all que estos pertenecen a un
reino propio (Reino Fungi), la micologa es an considerado como un
ramo de la botnica (ciencia que se dedica al estudio del reino
Plantae).El conocimiento de los hongos, ha evolucionado
profundamente en gran parte debido a los desarrollos verificados a
nivel de microscopa y de bioqumica, que permitieron una ms amplia
caracterizacin estructural y funcional de los elementos de este
reino. Los hongos presentan una serie de caractersticas peculiares
que hacen con que ellos funcionen como eje de enlace de varias
cadenas trficas, presentando caractersticas tpicas de diferentes
reinos (Animal, Vegetal y Protista): son seres vivos heterotrficos
(absorben sustancias orgnicas en solucin), sin clorofila y pueden
tener un comportamiento saprobio, parsito o simbitico. Se presentan
formados por hifas, que se agrupan en un tejido no verdadero (el
micelio), excepcin hecha a las levaduras, que son unicelulares.
Siendo delimitados exteriormente por una membrana rgida conteniendo
quitina y hemicelulosa, ellos se reproducen a enorme velocidad
mediante una enorme variedad de procesos sexuales, asexuales y
parasexuales.La micologa diversifica sus estudios en diversas reas
comunes a la botnica clsica, como la taxonoma, la anatoma,
fisiologa, filognia y la ecologa. Los estudios de distribucin de
los hongos estn directamente relacionados con reas de investigacin
de la zoologa y de la botnica, ya que la distribucin de estos
organismos est frecuentemente ligada no solo a las condiciones
fsico-qumicas y ambientales del medio, mas tambin a la distribucin
de determinados animales y plantas, los cuales funcionan como
soporte alimenticio especfico para una determinada espcie (o
conjunto de especies) de hongos.
MATERIALES Y MTODOS
Materiales y reactivos. Lminas portaobjetos y cubreobjetos.
Microscopio. Solucin de Lugol. Solucin de Linder. Asa y aguja de
kolle. Placas con Agar sabouraud. Cmara Hmeda
Solucin de Solucin de Placa Petri con agar Linder Lugol
Saboraud
Aguja de kolle y cmara hmeda MecheroPROCEDIMIENTOS.
a) Preparaciones microscpicas (Montaje Hmedo). Se realiz montaje
hmedo para observarlas siguientes especies: Saccharomyces
(levadura), el moho Rhizopus y Aspergillus. Se coloco una gota de
lugol en una lmina portaobjeto y con aguja de kolle se saco el
inoculo de sacharomyces. En dos lminas portaobjetos se coloco
solucin de Linder y con aguja de kolle se colocaron inculos de
rizhopus y aspergillus respectivamente. Se llevaron a observar en
microscopio.
b) Aislamiento de Hongos del medio ambiente.Se expuso una placa
de agar sabouraud, en dos ambientes la sala de siembra y la sala de
laboratorio; durante 15 minutos, tratando as de observar
crecimiento de colonias. En la placa se indica el lugar, fecha y
hora, luego se procede a acondicionar la placa y se incuba a
temperatura ambiente durante 5 das. Luego se realiza la observacin
de colonias indicando su forma y color de la colonia. Y observar
las estructuras vegetativas y de reproduccin.
c) Microcultivo de Hongos. Se utiliz una placa Petri para
cultivo en cmara hmeda. se prosigue a cortar con aguja de kolle un
cuadro de agar sabouraud aproximadamente de 1cm2 y se coloca en una
lmina portaobjeto Se extrae cepas de hongos noculo y se siembra por
picadura en el cuadrado de agar. Se cubre con una lmina
cubreobjetos y se procede a humedecer con agua destilada el papel
filtro que contiene la placa Petri y se cierra. Se incuba las
placas a temperatura ambiente durante 3 das. Observar microscpico a
mediano y mayor aumento: Se retira suavemente el cubreobjeto y se
coloca una gota de solucin de Linder sobre un nuevo portaobjeto. El
bloque de agar se retira del portaobjeto original, colocando una
gota de solucin de Linder en el micelio que queda adherido a su
superficie; sobre el montaje se coloca un cubreobjeto. Se observa a
microscopio.
Preparaciones microscpicas: Montaje Hmedo
LEVADURA (Saccharomyces): Se llev a observar en microscopio a
400X observando la imagen de la derecha.
El HONGO (Aspergillus) se llevo a observar en el microscopio a
40X y se observo la imagen de la derecha, observando el conidiforo
y la cabeza aspergillada.
El MOHO Rhizopus se observo a 40X observando hifas celulolticas
(no septadas), y su esporangi
Micro cultivo de hongos
En este caso se observo poco crecimiento del hongo, y no se pudo
observar su estructura debido a que la muestra se humedeci con el
exceso de agua.Se observ notable crecimiento del hongo en la
cubreobjeto y se procede a realizar el montaje hmedo para observar
su estructura.
DISCUSIONES
Las diferentes especies que se utilizaron en laboratorio tenan
cada una de ellas sus caractersticas en los medios de cultivo. De
acuerdo a nuestros resultados, se observo las caractersticas de
cada especie al ser observadas en el microscopio tanto su
desarrollo y su estructura reproductora. En el caso de la
Saccharomyces se observo pequeas clulas transparentes, y en el caso
de los mohos Aspergillus se observ su conidiforo y la cabeza
asperguillada (contiene las conidias) y en el caso de Rhizopus se
observ su esporangio y sus hifas cenolticas.
En la prueba de aislamiento de hongos del medio ambiente,
observamos despus de la exposicin de dos placas con agar Saboraud
en dos diferentes ambientes durante 15 minutos observamos, en la
placa expuesta en el aula de laboratorio se observ que hub mayor
crecimiento de colonias debido a que en el ambiente tiene ms
contacto al aire libre, en cambio la otra placa que fue expuesta en
el saln de siembra se observ crecimiento de muy pocas colonias de
hongos ya que en este caso el saln est inmerso en un ambiente
cerrado para poder realizar las siembras, lo que hizo que se
presente poca presencia de colonias.
En el microcultivo de hongos, se utilizaron las especies de
Rhizopus y Aspergillus y se observ que en el caso de la siembra de
la mesa 1 en el agar Saboraud al humedecer el papel filtro hubo un
exceso al aadir el agua destilada, que despus de la incubacin la
muestra en el agar se humedeci y no se pudo ver en el microscopio y
en el caso del Rhizopus se observ un notable crecimiento del moho
en el agar sabouraud y se realiz el procedimiento del montaje hmedo
con solucin linder para observar su estructura.
CONCLUSIONES
En los montajes hmedos preparados para la observacin de hongos,
en este caso se observo levadura como Sacharomyces y mohos como
aspergillus y rizhopus, observando sus estructuras en el
microscopio.
En el aislamiento de hongos del medio ambiente, los resultados
obtenidos nos afirma lo dicho en laboratorio que al dejar agar
sauboraud en la saln de siembra se obsevar menor crecimiento de
hongos que el agar sauboraud expuesto en el saln de
laboratorio.
Al realizar la prueba de microcultivo de hongos, se observo el
crecimiento de hongos en el agar sauboraud, observando en el
microscopio las estructuras deseadas.
BIBLIOGRAFIA
http://hongosylevadurasencerdas.blogspot.com/2011/04/levaduras-microscopio.html
- 2011
Pelczar, M.J., B.A. Capella, 1990. Microbiologa. Editorial
McGraw Hill. Mxico, D.F.
http://biologia.laguia2000.com/botanica/micologia - Pablo
morales 2010
Micologa | La gua de Biologa
http://biologia.laguia2000.com/botanica/micologia#ixzz2CW2AkfMx
LABORATORIO 9
INTRODUCCION
Los miembros dela familiaEnterobacteriaceae son bacilo gram
negativos, inmviles o mviles con flagelos. Peritricos se
desarrollan enmediosartificiales y todas las especies forman cido o
cido ygasa partir deglucosa. Su composicin antignica es un mosaico
que interrelaciona serolgicamente varios gneros y aun familias,
muchas de estasbacteriasson parsitos de animalesy otros
patgenos.Para enjuiciar lacalidadde las aguas se recorre a parmetro
fsico qumico y biolgico. Los parmetros bacteriolgicos tienen mayor
importancia para dictmenes higinicos ; es preciso hallar el nmero
de grmenes saprfilos o de coli y de bacterias procedentes del
intestino humano comoindicadoresde lacontaminacin.Conviene destacar
la importancia que tienen las cifras de coli y coliformes,
pertenecientes a las enterobacterias que fermentan lactosa
conproduccinde gas y cido. Para determinar el nmero de estas
bacterias se suele emplear medio selectivo de endo.
Bacteria Coliforme: Incluyen E. Coli y otras bacterias que se
asemejan morfolgica y fisiolgicamente. Estos M.O. con frecuencia
difieren entre si en caractersticas pequeas. Las bacterias
coliforme suelen encontrarse en el aparto intestinal delhombrey
animal. E. Coli, rara vez se encuentra fuera del intestino. Las
bacterias coliformes son bacilos cortos, gram negativos que
fermentan la lactosa y forman cido y gas.Son
anaerobiosfacultativos, se multiplican a mayor rapidez
atemperaturaentre 30 y 37 C, crecen a gran abundancia en medios
corrientes, como caldo y agar.La colonia de E. Coli en agar E.M.B
(eosina y azul de metileno) tienen 2 a 4 mm de dimetro, un centro
grande decoloroscuro e incluso negro, y tienen brillo verde metlico
cuando se observan conluzrefleja.
OBJETIVO.Determinar el nivel de contaminacin por coliformes a
travs de la tcnica del nmero ms probable de una muestra de
agua.
MATERIALES Y METODOS
MATERIAL
Pipeta de 10ml y de 1ml Asa de siembra. Caldo lactosado,
volmenes de 10ml en tubos de 150 x 15mm conteniendo campanas de
Durham. Muestra de agua potable. Muestra de agua de pozo.
PROCEDIMIENTO
Prueba del nmero ms probable (NMP) para recuento de coliformes
totales
La tcnica se basa en la determinacin del nmero de coliformes
mediante siembra de distintos volmenes del agua a analizar en
series de tubos con caldo lactosado y resiembra en medios de
cultivo selectivos incubando a temperaturas adecuadas.El
procedimiento comprende las pruebas: 1. presuntiva, de confirmacin
de coliformes totales y 2. de confirmacin de coliformes fecales.
Esta prueba se utiliza en muestras con baja densidad de
microorganismos.
Prueba presuntiva para coliformes totales
En una gradilla se colocan 9 tubos (tres series de tres tubos)
concaldo verde bilis brillante simple, con su respectiva campana de
Durhan. Los tubos se marcan con las iniciales del grupo, el agua
tratada o no tratada y la dilucin correspondiente (100, 10-1,
10-2).
En la primera serie de tubos se distribuyediezml de medio de
cultivoen cada uno de los tubos y se siembra con una pipeta
estril10 ml de la muestra de aguaagitada, marcar 100En la segunda
serie se siembraen 10 ml de medio de cultivo,1ml de la muestrade
agua, marcar 10-1
En la tercera se siembraen 10 ml de medio de cultivo,0,1 ml de
la muestrade agua, marcar 10-2
Se coloca en cada tubo una campana Durham para recoger el gas
producido y al medio de cultivo se le habr aadido un indicador
cido-base. Homogeneizar los tubos sembrados. Incubar a 37C durante
48 h.
RESULTADOS
Prueba presuntiva para coliformes totales
Lectura e interpretacin
Se consideran tubos positivos aquellos en los que se observa
enturbiamiento, acidez detectada por el indicador colocado en el
medio que vira a color amarillo y por la aparicin de gas en la
campana de Durhan, independientemente de su cantidad.Los Coliformes
son enterobacterias lactosa positiva, es decir, son capaces de
fermentar la lactosa con produccin de cido y gas en un perodo de 48
horas y con una temperatura de incubacin comprendida entre 30-37C.
La ausencia del gas al cabo de 48 h se considera como prueba
negativa.Se cuentan los tubos positivos y se consulta la tabla del
NMP. Los resultados se presentan como ufc/100ml de muestra
(NMP)
DISCUSIONES
Para detectar la presencia de estos microorganismos como
Echerichia Coli, se debe aplicar pruebas bioqumicas
correspondientes (serie colorimtrica, etc) para agua potable no
debe contener ningn agente patgeno. Por lo general el agua de pozo
presenta mas agentes patgenos que el agua potable ya que esta es
tratada para eliminar cualquier tipo de microorganismos. En la
prueba presuntiva no se puede determinar que tipo de coliformes son
,si fecales o totales.
CONCLUSIONES
El numero mas probable de nmeros fecales en la prueba
confirmativa es de 7 NMP/g. Las coliformes fecales y la E. coli son
bacterias ms peligrosas que proceden de los excrementos de los
animales y los seres humanos, por lo general, a travs de sistemas
spticos mal mantenidos o construidos, de grietas en los tuberas de
aguas negras o de excrementos de animales en la proximidad de una
fuente de agua.
BIBLIOGRAFIA
Biologa de los microorganismos, Thomas Brock, Segunda edicin,
Ediciones Omega S.A., Barcelona, Espaa, 1978.
MANUAL PRCTICO DE MICROBIOLOGA - Tomo I: Microbiologa Ambiental
IManacorda A. M., Cuadros D. P y lvarez A. S.
Ministerio de la proteccin social.2007 Decreto 1573 .por medio
del cual se establece el sistema de la proteccin y control de la
calidad del agua para consumo humano.
