Upload
drd4
View
60
Download
0
Tags:
Embed Size (px)
Citation preview
JOURNAL READING
Moxifloxacin and Cholesterol Combined
Treatment of Pneumococcal Keratitis
diajukan oleh
Irfani Kurniawan
01.208.5683
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG
SEMARANG
2012
Pengobatan Kombinasi Moksifloksasin dan Kolesterol Pada
Keratitis Pneumokokus
Melissa E. Sanders, Nathan A. Tullos, Sidney D. Taylor, Erin W. Norcross, Lauren B. Raja,
Yesaya Tolo, dan Mary E. MARQUART
Departemen Mikrobiologi, University of Mississippi Medical Center, Jackson, Mississippi,
Amerika Serikat
ABSTRAK
Tujuan: Membandingkan efektivitas pengobatan keratitis pneumokokus menggunakan
kolesterol, moksifloksasin, atau campuran dari keduanya (moksifloksasin / kolesterol).
Bahan dan Metode: Kelinci Putih New Zealand diinjeksi intrastromal dengan 106
colonyforming unit (CFU) strain keratitis klinis dari Streptococcus pneumoniae. Mata
diperiksa sebelum dan sesudah pengobatan topikal tetes setiap 2 jam dari jam ke 25 sampai
47 jam pasca-infeksi (PI). Kornea diambil untuk menghitung jumlah CFU bakteri, dan
aktivitas myeloperoxidase (MPO) diukur setelah 48 jam PI. Mata diekstraksi untuk melihat
gambaran histologi. Ditentukan Minimal inhibitory concentrations (MICs)nya untuk masing-
masing senyawa.
Hasil: Mata yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki nilai Slit lamp
examination ( SLE ) yang signifikan dengan rata – rata lebih rendah daripada mata yang
diobati dengan phosfat-buffered saline (PBS), moksifloksasin saja, atau kolesterol saja (P ≤
0,02). Log10 CFU ditemukan secara signifikan lebih rendah pada kornea dengan
moksifloksasin / kolesterol dan moksifloksasin saja dibandingkan dengan kornea mata yang
diobati dengan PBS atau kolesterol saja (P <0,01). Pada 48 jam PI, secara signifikan aktivitas
MPO secara kuantitatif terlihat lebih rendah pada mata yang diobati dengan moksifloksasin /
kolesterol dibandingkan dengan mata yang diobati dengan kolesterol atau moksifloksasin saja
(P ≤ 0,046). Mata yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki lebih sedikit sel-
sel imun dan kerusakan pada korneanya daripada mata dari semua kelompok perlakuan
lainnya. MIC untuk pengobatan dengan menggunakan moksifloksasin saja adalah 0,125 mg /
mL dan pengobatan dengan kolesterol saja tidak mampu menghambat pertumbuhan di salah
satu konsentrasi yang diujikan. MIC untuk moksifloksasin yang dikombinasikan dengan
kolesterol 1% adalah 0,0625 mg / mL.
Kesimpulan: Pengobatan dengan kombinasi moksifloksasin dan kolesterol secara signifikan
menurunkan keparahan infeksi yang disebabkan oleh keratitis pneumokokus dibandingkan
dengan pengobatan dengan moksifloksasin saja, kolesterol saja, atau PBS. Kemampuan
pengobatan campuran ini dalam membunuh bakteri di kornea tidak seperti pengobatan
dengan PBS atau kolesterol saja. Menggunakan kolesterol dengan moksifloksasin sebagai
pengobatan untuk keratitis bakteri dapat membantu menurunkan keparahan klinis dari
infeksi.
Kata Kunci: Kolesterol, Keratitis, Moksifloksasin, Streptococcus pneumoniae
PENDAHULUAN
Bakteri coccus Gram-positif bertanggung jawab untuk sekitar 67% dari kasus keratitis
bakteri pada pemakaian lensa kontak.1 Streptococcus pneumoniae merupakan salah satu
bakteri grampositive yang biasa diisolasi dari kornea pada infeksi keratitis bakteri.2-6
Pengobatan dari keratitis bakteri adalah penting untuk hasil penglihatan. Monoterapi dengan
fluoroquinolone, seperti moksifloksasin, umumnya digunakan untuk mengobati bakteri
keratitis.7 Bakteri gram positif dan gram-negatif keduanya telah terbukti secara konsisten
memiliki resistensi yang lebih rendah untuk moksifloksasin daripada kebanyakan obat
lainnya.8
Pneumolysin, sebuah hemolisin diproduksi oleh S. pneumoniae, merupakan faktor
virulensi utama di antara infeksi okular dan non-okular infeksi. Johnson et al.9 mengamati
bahwa mutan pneumolysin-deficient dari S. Pneumoniae menyebabkan infeksi keratitis yang
kurang parah daripada strain induk. Racun ini termasuk golongan kolesterol-dependent
cytolysins (CDC) yang membentuk pori-pori di membran sel inang.10 Telah lama diketahui
bahwa pengobatan dari pneumolysin dengan kolesterol eksogen menghambat aktivitas racun
ini.11 Sebuah studi sebelumnya dilaporkan bahwa pengobatan menggunakan kolesterol pada
keratitis yang disebabkan oleh WU2, tipe 3 strain S. pneumoniae awalnya diperoleh dari
bagian dari manusia yang di isolasi pada tikus,12 mengakibatkan keparahan infeksi yang lebih
rendah dibandingkan dengan pengobatan dengan fosfat-buffered saline (PBS) .13 Pengobatan
dengan kolesterol menurun jumlah bakteri in vivo (Infeksi kornea) dan in vitro (uji Minimal
inhibitory concentrations [MIC]). Laporan sebelumnya tentang kemampuan kolesterol
eksogen untuk menghambat pneumolysin terutama dilakukan secara in vitro, seperti di
monosit14 dan limfosit manusia, sel neuroblastoma 15, 16,17 fibroblast, dan astrocytes.17 Satu
studi in vivo dari catatan meneliti kemampuan berbagai CDC yang dimurnikan untuk
membunuh tikus.18 Para penulis menunjukkan bahwa pneumolysin dan CDC yang lainnya
diuji mampu membunuh tikus dan kematian itu berbanding lurus dengan aktivitas hemolitik
setiap toksin. Penambahan kolesterol eksogen ke salah satu CDC (listeriolysin O) sepenuhnya
merubah kemampuan racun untuk membunuh tikus. Meskipun pneumolysin tidak secara
khusus diuji dalam percobaan penghambatan, hasil menunjukkan bahwa sejenis
penghambatan oleh kolesterol akan diamati untuk setiap CDCs.18 Sampai saat ini, belum ada
penelitian yang melaporkan khasiat kombinasi antibiotik / kolesterol dalam pengobatan
keratitis pneumokokus disebabkan oleh strain okular klinis. Oleh karena itu, percobaan yang
dijelaskan di sini bertujuan untuk menentukan apakah campuran moksifloksasin dan
kolesterol (moksifloksasin / kolesterol) akan lebih efektif dalam pengobatan keratitis
pneumokokus dibandingkan dengan pengobatan menggunakan kolesterol atau moksifloksasin
saja.
METODE
Pertumbuhan Bakteri
S. pneumoniae K1263, strain keratitis klinis jenis 35f, yang disediakan oleh Regis Kowalski
(Charles T. Campbell Eye Mikrobiologi Lab, Pittsburgh, Pennsylvania, USA). Koloni bakteri
diisolasi pada agar-agar darah domba 5% dan diinkubasi selama satu malam di 37 ° C dan
5% CO2. Todd Hewitt broth yang mengandung 0,5% ekstrak ragi (THY) diinokulasi dengan
satu koloni dan diinkubasi pada 37 ° C dalam CO2 5% selama satu malam. Selama satu
malam kultur diinokulasikan ke THY segar pada 1:100 pengenceran. Bakteri yang
berkembang menjadi optical density (OD) pada A600 yang berhubungan dengan sekitar 108
unit pembentuk koloni (CFU) per ml. Akurasi CFU bakteri diverifikasi oleh jumlah koloni
dari pengenceran.
Infeksi
Kelinci putih new zealand (Harlan Sprague Dawley, Inc, Oxford, Michigan, USA) yang
digunakan dalam studi ini dan dipelihara oleh Association for Research in Vision and
Ophthalmology Statement untuk Penggunaan Hewan di Ophthalmic and Vision Research.
Setiap kelinci dibius melalui injeksi intramuskular campuran hidroklorida ketamin (100 mg /
ml, Butler Company, Columbus, Ohio, USA) dan xylazine (100 mg / ml, Butler Company).
Hidroklorida Proparacaine tetes diberikan untuk masing-masing mata sebelum injeksi. Kultur
bakteri diencerkan sehingga setiap kornea terinfeksi dengan sekitar 106 CFU dalam volume
10 ml. Jarum 30-gauge yang digunakan untuk menyuntik bakteri ke dalam stroma masing-
masing mata. Penggunaan hewan dalam penelitian ini memenuhi pedoman dan telah disetujui
oleh Institutional Animal Care and Use Committee of the University of Mississippi Medical
Center.
Slit Lamp Examiation (SLE)
SLE dilakukan sebelum dan setelah pengobatan. Tujuh Parameter yang digunakan untuk
menentukan tingkat keparahan Infeksi: injeksi, chemosis, iritis, fibrin, hypopyon, Infiltrat
kornea, dan inflamasi kornea.9 Setiap parameter diberi nilai dari 0 (tidak ada patogenesis)
sampai dengan 4 (patogenesis maksimal), menghasilkan skor total dengan nilai maksimum
sebesar 28. Setiap mata dinilai oleh dua pemeriksa yang tidak mengetahui sama sekali
tentang kelompok pengobatan dan dari dua nilai tersebut diambil nilai rata-rata.
Cara Pengobatan
Pengobatan dimulai pada 25 jam pasca-infeksi (PI). Kelinci dibagi secara acak menjadi
empat kelompok perlakuan oleh peneliti yang tidak terlibat dalam pemeriksaan dan penilaian.
Kelompok perlakuan steril PBS dicampur dengan PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1
Volume: Volume, "PBS"), PBS dicampur dengan 1% larut kolesterol (Sigma-Aldrich, St
Louis, Missouri, USA) dalam PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "kolesterol"),
moksifloksasin (Vigamox ®, 5 mg / ml, Alcon, Fort Worth, Texas, USA) dicampur dengan
PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "moksifloksasin"), dan moksifloksasin dicampur
dengan 1% kolesterol larut dalam PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "Moksifloksasin
/ kolesterol"). Dua tetes diteteskan pada setiap mata setiap 2 jam untuk total 12 dosis (n = 16
mata untuk masing-masing kelompok perlakuan, Tabel 1).
Perhitungan CFU
Kelinci di eutanasia dengan overdosis intravena dari pentobarbital natrium (100 mg / kg,
Sigma-Aldrich) pada 24 jam PI (untuk kuantisasi baseline CFU per kornea) atau 48 jam PI
(setelah perlakuan dan pemeriksaan akhir). Kornea yang diambil, dihomogenkan, berurutan
diencerkan dalam PBS steril, dan ditaruh pada tiga plate agar darah. Plate diinkubasi selama
semalam pada suhu 37 ° C, dan kemudian jumlah koloni dihitung.
Myeloperoxidase (MPO) Activity Assay
Aktivitas MPO sel polimorfonuklear (PMN) di kornea yang terinfeksi ditentukan dengan
menggunakan uji kolorimetri seperti yang dijelaskan sebelumya.19 MPO murni (Sigma-
Aldrich) digunakan sebagai kontrol positif. Aktivitas MPO ini dinyatakan sebagai unit MPO.
Pengujian Minimal Inhibitory Concentration (MIC)
MICs kolesterol dalam PBS yang mengandung gliserol 20%, moksifloksasin, dan campuran
dari kolesterol 1% di dalam 20% PBS dengan moksifloksasin berurutan diencerkan terhadap
K1263 yang ditentukan menggunakan Metode macrodilution broth berdasarkan Clinical and
Laboratory Standards Institute.20 Setiap pengenceran di tempatkan dalam tiga plate,
diinkubasi, dan dihitung karena pengamatan kekeruhan sebelumnya tidak menentukan jumlah
kolesterol ketika digunakan dalam uji.13 MIC untuk setiap tes ditentukan untuk menjadi
konsentrasi yang terendah di mana tidak ada CFUs yang diamati, mempertimbangkan
pengenceran dua kali lipat akhir dari masing-masing antibiotik ketika suspensi bakteri
ditambahkan. Dua uji independen dilakukan dan menghasilkan hasil yang sama.
Histopatologi
Seluruh mata diambil pada 48 jam PI dan histopatologi dilakukan oleh Excalibur Patologi,
Inc (Moore, Oklahoma, USA) menggunakan hematoxylin dan pewarnaan eosin.
Statistika
Data dianalisis dengan menggunakan program Statistik Analisis System (SAS) untuk
komputer (Cary, North Carolina, USA). Skor SLE secara klinik dianalisis menggunakan non-
parametrik one-way analysis of variance. CFU bakteri dianalisis menggunakan General
Linear Models Procedure of Least Squares Means. Semua percobaan dilakukan dua kali,
menghasilkan hasil yang sejenis dan data dari dua percobaan tersebut digabungkan. Analisis
statistik dari data MPO dilakukan dengan menggunakan Student t-test. P <0,05 dianggap
signifikan.
HASIL
Kelinci Yang Terinfeksi Keratitis
Mata diperiksa sebelum perlakuan/pengobata untuk menunjukkan bahwa keparahan klinis
semua kelompok adalah sama. Dua puluh empat jam PI (pre-treatment), skor SLE sama
besarnya untuk kelompok pengobatan kolesterol, PBS, moksifloksasin dan moksifloksasin /
kolesterol (P ≥ 0,43, Tabel 2). Empat puluh delapan jam PI (post-treatment), mata diobati
dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki skor signifikan lebih rendah dibandingkan rata-
rata SLE mata yang diobati dengan PBS, kolesterol, atau moksifloksasin saja (P ≤ 0.016).
Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam keparahan klinis antara salah satu kelompok
perlakuan lainnya (P ≥ 0,12, Tabel 2, Gambar 1).
Perhitungan CFU kornea
Mean log10 CFU ± standard error of the mean (SEM) dari S. pneumoniae ditemukan dari
kornea pada 24 jam PI (pra-perelakuan) adalah 6,64 ± 0,49 (Tabel 3). Empat puluh delapan
jam PI (pasca perelkuan), mata dengan perlakuan yang di beri moksifloksasin dan
moksifloksasin / kolesterol secara signifikan ditemukan nilai log10 CFU lebih rendah daripada
kornea yang diobati dengan PBS atau kolesterol saja (P <0,0001). Moksifloksasin dan
moksifloksasin / kolesterol sama-sama efisien dalam sterilisasi kornea (P = 1.00).
MPO Assay
Rata-rata unit MPO yang menunjukkan aktivitas PMN ditentukan dari pra- dan pasca-
pengobatan. Pengobatan Moksifloksasin / kolesterol efektif dalam mengurangi baseline MPO
unit (P = 0,006). Selain itu, kornea yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol secara
signifikan memiliki aktivitas MPO lebih rendah dibandingkan kornea diobati dengan
kolesterol saja atau moksifloksasin saja (P ≤ 0,046). Tidak ada perbedaan yang signifikan
yang diamati antara salah satu kelompok perlakuan dengan kelompok lainnya (P ≥ 0,35;
Tabel 4).
MICs
MIC untuk moksifloksasin saja adalah 0,125 mg / mL dan kolesterol saja tidak dapat
menghambat pertumbuhan di salah satu konsentrasi yang diuji. MIC untuk moksifloksasin
bila dikombinasikan dengan kolesterol 1% adalah 0,0625 mg / mL.
Histopatologi
Semua mata dikeluarkan secara keseluruhan, dibelah, dan diwarnai dengan hematoxylin dan
eosin. Lebih banyak didapatkan sel imun pada kornea mata yang diobati dengan PBS,
kolesterol saja, atau moksifloksasin saja dibandingkan dengan mata yang diobati dengan
campuran moksifloksasin / kolesterol (Gambar 2). Lokasi Injeksi telah diamati pada semua
perlakuan kelompok (Gambar 2, panah hitam).
PEMBAHASAN
Temuan saat ini menunjukkan bahwa terapi kombinasi dengan moksifloksasin dan
kolesterol larut memberikan efek yang berarti tidak hanya membunuh S. pneumoniae di
kornea, tetapi juga mengurangi keparahan klinis pneumokokus keratitis. Sebuah studi yang
diterbitkan sebelumnya oleh laboratorium ini menunjukkan bahwa pengobatan pneumokokus
keratitis yang disebabkan oleh WU2 (strain non-okular) dengan kolesterol saja secara
signifikan dapat menurunkan keparahan infeksi pneumokokus keratitis serta jumlah bakteri.13
Temuan dari penelitian ini berbeda dari penelitian sebelumnya yang mendapatkan hasil
pengobatan kolesterol saja sudah dapat meningkatkan nilai klinis atau secara signifikan
mengurangi jumlah bakteri. Beberapa kemungkinan bisa menjadi alasan untuk menjelaskan
perbedaan hasil yang didapat. Strain yang berbeda digunakan dalam dua studi tersebut, satu
dari strain non-okular dan studi yang lain menggunakan strain okular. Strain okular yang
digunakan dalam studi bisa lebih resisten terhadap pengobatan dengan kolesterol, yang
menekankan pentingnya menggunakan terapi kombinasi dengan antibiotik yang efektif.
Alasan lain untuk perbedaan dalam temuan antara penelitian sebelumnya dan penelitian ini
adalah perbedaan dalam dosis inokulum. Penelitian sebelumnya menggunakan inokulum
sebesar 105 CFU, sedangkan penelitian ini menggunakan inokulum sebesar 106 CFU.
Inokulum yang dimaksudkan untuk penelitian ini adalah 105 CFU dan kultur bakteri pada
densitas optik (OD) yang diperkirakan mengandung 105 CFU per 10 ml, namun kuantitas
inokulum dengan pengenceran menunjukkan bahwa inokulum yang sebenarnya adalah 106
CFU. Yang mendukung gagasan ini adalah bahwa bakteri sekitar 1 log10 unit adalah lebih
banyak bakteri yang ditemukan pada kornea yang diobati kolesterol 48 jam PI di penelitian
ini (3,77 ± 0,44) dibandingkan studi sebelumnya(2.64 ± 0.50).13 Temuan ini juga mendukung
pentingnya menggunakan terapi kombinasi dengan antibiotik (moksifloksasin) sehingga
bakteri dapat sepenuhnya dibunuh bukan hanya berkurang. Juga, pengobatan dengan
moksifloksasin / kolesterol secara signifikan menurunkan aktivitas MPO dibandingkan
dengan mata yang diobati dengan moksifloksasin atau kolesterol saja (Tabel 4) yang sesuai
dengan sedikit PMN terdeteksi oleh histologi (Gambar 2) dan secara signifikan lebih sedikit
log10 CFU yang ditemukan pada kornea, dibandingkan dengan mata yang diobati dengan PBS
atau kolesterol. MIC terhadap bakteri juga mendukung data. Secara in vitro bakteri tidak
rentan terhadap kolesterol, begitu juga pada pengamatan in vivo. Bakteri rentan pada
moksifloksasin dan moksifloksasin / kolesterol dalam vivo dan in vitro. Meskipun kolesterol
saja tidak menghambat pertumbuhan bakteri, kolesterol tampaknya memiliki efek sinergis
bila dicampur dengan moksifloksasin ditunjukkan dengan hasil MIC lebih rendah bila
dibandingkan dengan moksifloksasin sendiri. Untuk kolesterol, studi sebelumnya sendiri
memiliki MIC dari 1% dan menurunkan keparahan klinis keratitis yang disebabkan oleh
strain WU2.13 Untuk penelitian saat ini, kolesterol sendiri tidak memiliki MIC dan tidak lebih
rendah keparahan klinis dari isolat klinis yang digunakan untuk infeksi keratitis. Perbedaan
antara hasil dari dua studi mungkin karena perbedaan dalam dua strain yang digunakan.
Ketiga, jumlah aktivitas pneumolysin bisa kemungkinan besar terlibat dalam perbedaan
antara strain, seperti pneumolysin telah terbukti menjadi virulensi utama faktor dalam
keratitis9 pneumokokus dan kolesterol adalah substrat inang untuk pneumolysin.10 Uji
Hemolisis A dilakukan dalam penelitian ini menggunakan WU2 seperti telah dijelaskan
sebelumnya,21 dan ditentukan bahwa Aktivitas pneumolysin dari WU2 sedikit lebih rendah
(83% hemolisis) dibandingkan dengan strain klinis keratitis digunakan untuk penelitian ini
(89% hemolisis). Sebuah laporan baru-baru ini menunjukkan bahwa pneumolysin adalah
membran-terikat toksin, dan tergantung pada serotipe, pneumolysin dapat ditemukan
terutama di fraksi dinding sel atau protoplas fraksi S. pneumonia.22 Mungkin WU2 (strain 3
jenis) mengandung jumlah pneumolysin yang lebih tinggi dalam dinding sel dari K1263 (a
type 35f strain), yang akan memungkinkan pneumolysin menjadi lebih mudah diakses oleh
agen luar seperti eksogen menambahkan kolesterol.
Moksifloksasin umumnya digunakan untuk mengobati keratitis bakteri karena berbagai
macam kerentanan bakteri.7,8 Namun itu tidak menurunkan keparahan klinis yang disebabkan
oleh keratitis pneumokokus. Studi ini menunjukkan bahwa pengobatan keratitis pneumoniae
S. dengan campuran kolesterol dan moksifloksasin baik mensterilkan kornea dan secara
signifikan menurunkan tingkat keparahan infeksi dibandingkan dengan pengobatan dengan
PBS, kolesterol saja, atau moksifloksasin saja. Terapi kombinasi ini tampaknya memberikan
manfaat ganda dalam ke efektifan antibiotik membunuh bakteri, dan kolesterol menghambat
efek toksik dari pneumolysin, yang meliputi lisis sel inang dan / atau aktivasi komplemen
yang menginduksi merusak dan merusak respon kekebalan inang pada mata. Pengobatan
dengan campuran ini bisa mengurangi keparahan dari hasil yag tampak yang disebabkan oleh
Infeksi pneumokokus pada manusia.
PERNYATAAN
Penulis mengakui bahwa adanya dukungan pendanaan dari National Eye Institute, National
Institutes of Health (Public Health Services Grant R01EY016195).
Declaration of interest : Penulis melaporkan tidak ada konflik kepentingan. Penulis sendiri
yang bertanggung jawab atas konten dan penulisan penelitian ini.
REFERENSI
[1] Bourcier T, Thomas F, Borderie V, et al. Bacterial keratitis: Predisposing factors, clinical and microbiological review of 300 cases. Br J Ophthalmol. 2003;87:834–838.
[2] Wong T, Ormonde S, Gamble G, et al. Severe infective keratitis leading to hospital admission in New Zealand. Br J Ophthalmol. 2003;87:1103–1108.
[3] Bharathi M, Ramakrishnan R, Vasu S, et al. In-vitro efficacy of antibacterials against bacterial isolates from corneal ulcers. Indian J Ophthalmol. 2002;50:109–114.
[4] Donnenfeld E, O’Brien T, Solomon R, et al. Infectious keratitis after photorefractive keratectomy. Ophthalmology. 2003;110:743–747.
[5] Parmar P, Salman A, Kalavathy C, et al. Pneumococcal keratitis: A clinical profile. Clin Experiment Ophthalmol. 2003;31:44–47.
[6] Varaprasathan G, Miller K, Lietman T, et al. Trends in the etiology of infectious corneal ulcers at the F. I. Proctor Foundation. Cornea. 2004;23:360–364.
[7] Allan BD, Dart JK. Strategies for the management of microbial keratitis. Br J Ophthalmol. 1995;79:777–786.
[8] Sueke H, Kaye S, Neal T, et al. Minimum inhibitory concentrations of standard and novel antimicrobials for isolates from bacterial keratitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010;51:2519–2524.
[9] Johnson M, Hobden J, Hagenah M, et al. The role of pneumolysin in ocular infections with Streptococcus pneumoniae. Curr Eye Res. 1990;9:1107–1114.
[10] Tweten RK. Cholesterol-dependent cytolysins, a family of versatile pore-forming toxins. Infect Immun. 2005;73:6199–6209.
[11] Shumway CN, Klebanoff SJ. Purification of pneumolysin. Infect Immun. 1971;4:388–392.
[12] Briles DE, Nahm M, Schroer K, et al. Antiphosphocholine antibodies found in normal mouse serum are protective against intravenous infection with type 3 Streptococcus pneumoniae. J Exp Med. 1981;153:694–705.
[13] Marquart ME, Monds KS, McCormick CC, et al. Cholesterolas treatment for pneumococcal keratitis: Cholesterol-specific inhibition of pneumolysin in the cornea. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2007;48:2661–2666.
[14] Nandoskar M, Ferrante A, Bates E, et al. Inhibition of human monocyte respiratory burst, degranulation, phospholipid methylation and bactericidal activity by pneumolysin. Immunology. 1986;59:515–520.
[15] Ferrante A, Rowan-Kelly B, Paton JC. Inhibition of in vitro human lymphocyte response by the pneumococcal toxin pneumolysin. Infect Immun. 1984;46:585–589.
[16] Iliev AI, Djannatian JR, Nau R, et al. Cholesterol-dependent actin remodeling via RhoA and Rac1 activation by the Streptococcus pneumoniae toxin pneumolysin. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104:2897–2902.
[17] Iliev A, Djannatian J, Opazo F, et al. Rapid microtubule bundling and stabilization by the Streptococcus pneumoniae neurotoxin pneumolysin in a cholesterol-dependent, nonlytic and Src-kinase dependent manner inhibits intracellular trafficking. Mol Microbiol. 2009;71:461–477.
[18] Watanabe I, Nomura T, Tominaga T, et al. Dependence of the lethal effect of pore-forming haemolysins of Grampositive bacteria on cytolytic activity. J Med Microbiol. 2006;55:505–510.
[19] Hobden JA, Hill JM, Engel LS, et al. Age and therapeutic outcome of experimental Pseudomonas aeruginosa keratitis treated with ciprofloxacin, prednisolone, and flurbiprofen. Antimicrob Agents Chemother. 1993;37:1856–1859.
[20] Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically; approved standard, seventh edition. Clinical and Laboratory Standards Institute document M7-A7. Wayne, Pennsylvania: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2006.
[21] Sanders M, Norcross E, Moore Q, et al. A comparison of pneumolysin activity and concentration in vitro and in vivo in a rabbit endophthalmitis model. Clin Ophthalmol. 2008;2:793–800.
[22] Price KE, Camilli A. Pneumolysin localizes to the cell wall of Streptococcus pneumoniae. J Bacteriol. 2009;191:2163–2168.
Hak Cipta Eye Research saat ini adalah milik Taylor & Francis Ltd dan isinya tidak boleh disalin ataudiemail ke beberapa situs atau diposting ke listserv tanpa izin pemegang hak cipta tertulis.Namun, pengguna dapat mencetak, men-download, atau email artikel untuk penggunaan individu.